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INGENIERÍA
E.P. ING. AMBIENTAL Y SANITARIA
PREPARACION DE
MEDIOS DE CULTIVO
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PREPARACION DE MEDIO DE CULTIVO
I. INTRODUCCION
Los medios de cultivo son fuentes nutritivas naturales o sintéticas que se asemejan al
nicho ecológico de los microorganismos en el cual se desarrollan estas necesidades
nutricionales se han determinado mediante extensas investigaciones.
Todos los medios deberán ser preparados de acuerdo a las especificaciones dadas por los
fabricantes, así existen medios que requieren esterilización, otros se preparan por
ebullición y otros por filtración.
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II. OBJETIVOS:
Conocer los procedimientos de preparación de un medio simple o común
y un medio selectivo.
Conocer las formas de esterilización usadas mas frecuentemente en
microbiología.
Aprender a preparar los medios de cultivo mas comunes que se utilizan
para el cultivode los microorganismos
Diferenciar los diversos tipos de medios y su aplicación adecuada de
acuerdo al tipode microorgaanismo a cultivar
III. MARCO TEORICO
MEDIOS DE CULTIVO:
Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir
encondiciones extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando
una amplia diversidad de nichos ecológicos. Entre los requerimientos más
importantes para su desarrollo están el carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido
de carbono ehidrógeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del aporte
extra de factores decrecimiento específicos en forma de suero, sangre y
extracto de levadura entre otros. (Ramón P. & Juárez A., 2002)
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El desarrollo de un microorganismo en un medio de cultivo depende
de diversosfactores, entre los cuales los más importantes son:
SEGÚN SU ORIGEN:
SEGÚN SU CONSISTENCIA:
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seextrae de las algas. Como esta sustancia no es digerida por las
bacteriasno constituye ningún elemento nutritivo, en ellos las bacterias
crecencon mayor dificultad, pues los nutrientes se agotan con rapidez
en elpunto donde se desarrollan.
Semisólidos: Se utilizan para determinar la motilidad de las especies
enestudio. Actualmente se encuentran disponibles comercialmente con
elagregado de agar. (García M., Fernández T. & Paredes S., 2005).
SEGÚN SU COMPOSICIÓN:
SEGÚN SU APLICACIÓN:
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COMPONENTES USUSALES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO:
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Agentes reductores: Cisteína, tioglicolato y otros son agentes reductores
quese añaden a los medios de cultivo para crear condiciones que permitan
eldesarrollo de los gérmenes microaerófilos o anaerobios.
Agentes selectivos: La adición de determinadas sustancias al medio de
cultivopuede convertirlo en selectivo (ver más adelante, clasificación de los
medios decultivo). Por ejemplo, cristal violeta, sales biliares, ácida sódica,
teluritopotásico, antibióticos, etc., a la concentración adecuada, actúan como
agentesselectivos frente a determinados microorganismos. (Rodríguez C.,
Gamboa C. & Hernández Ch., 2005)
AGAR NUTRITIVO:
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pH-meter
Agua destilada
Lapiz marcador
Autoclave
Hasa de siembra
Algudon
4.2.METODO
Pesar las sustancias indicadas en las fórmulas respectivas calculando las
cantidades en relación con los volúmenes requeridos.
Para aplicar la formula de aspa simple, para dar el uso de la forma exacta de
agar nutritivo nos pide para 100ml de agua destilada en una probeta de 250ml
y luego trasladar ha una matraz de emeleyer
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Luego limpiar la mesa con alcohol y algudon para que el ambiente se esteril
de la contaminacion.
Prender la llama para calentar el parte superior de la mustra de Agar de
microorganismo y servir en 7 placas de petri en proporcion casi iguales a
13.3ml. Tubos de ensayo o placa petri completamente estériles y siempre
frente a una llama (mechero).
Despues enfriar de 7 a 10 minutos, y luego si hace una esterilizacion al
material haza de siembra, luego se introduce a leche de suero para formar
siembra por estria en cada cuadrante, y en primer cuadrante mayor estria en
segundo lamitad de estria y en tercero la tercera parte en cuarto cuadrante uno
o dos puntos de estria, y aplicar a las 7 placas de petri, para almacenamiento
de los microorganismos.
Luego se remplaza a la encobadora microbiana, para los medios de siembra a
37ºc hasta que haya habido crecimiento bacteriano durante 24 a 48 horas.
V. RESULTADOS:
Se obtuvo un medio de cultivo en buenas condiciones.
VI. DISCUSIÓN O COMENTARIOS:
Para poder identificar los microorganismos es necesario observar su
crecimiento en sustancias alimenticias artificiales.
(Pinto & Martín, 2012)
VII. CONCLUSIONES:
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Tenemos que esterilizar los materiales a utilizar para el cultivo
demicroorganismos para evitar la contaminación.
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