UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER
Facultad de Salud
Práctica No 5. pH y soluciones amortiguadoras.
Paula Fernanda Caicedo Rincón 2161030
Dennis Lorena Cárdenas Leal 2161029
Pablo Elías Prado Guevara 2161058
● Objetivos
Medir el pH de las soluciones mediante los métodos potenciométricos y colorimétricos, evaluando la capacidad
amortiguadora de los buffers preparados.
● Resultados y discusión
ACTIVIDAD 1. DETERMINACIÓN DE pH POR
MÉTODO POTENCIOMÉTRICO
Los diferentes volúmenes de NaOH agregados a los 10ml de
tampón para conseguir los respectivos pHs son:
Tabla 1.
El pH del tampón determinado experimentalmente fue de 1,82
y teóricamente dio 1,8 por lo que la exactitud del instrumento
es muy alta. La forma como se halló este pH es la siguiente: La
solución tampón estaba compuesta por tres ácidos (H3BO3,
H3PO4 y CH3COOH).La concentración de 𝐻 + del H3BO3 no
se tuvo en cuenta porque sus pKas son muy altas (9.2 y 12.74);
lo que indica que el aporte al pH es mínimo, así que para hallar
el pH se obtuvieron las concentraciones molares de los otros
dos ácidos, teniendo en cuenta que el volumen final fue de
200ml y así el pH es la suma de las concentraciones de
hidrogeniones presentes en su totalidad, determinadas con las
constantes de acidez ( Ka CH3COOH = 1.8 x 10−5 y Ka
H3PO4 = 7.58 x 10−3). El resultado fue el siguiente:
-Log (Concentración de 𝐻 + CH3COOH = 8.68 x 10−4 M +
Concentración de 𝐻 + H3PO4 = 0.0156) = pH = 1.8.
Como se observa en la tabla 1, el volumen de NaOH para cada
pH es creciente, sin embargo, a la hora de hacer los cálculos, a
partir de cierto pH el volumen da igual; por ejemplo, al despejar
el volumen para un pH de 8.07 y de 10.11 la variable es la
misma. Entendiendo este comportamiento es como se puede
explicar lo que sucede al tratar de determinar de forma teórica
los volúmenes hallados experimentalmente. Como la constante
de disociación del H3PO4 es mucho mayor que la del
CH3COOH (cuyo aporte de base conjugada es irrelevante), el
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Laboratorio de Bioquímica I
Semestre II-2017
Grupo de Laboratorio: 02 – J01
Fecha de elaboración de la práctica: 2017-09-26
Fecha de presentación del informe: 2017-10-03
cálculo de cada volumen se puede realizar solo con el H3PO4
de la siguiente forma:
𝑆𝑎𝑙
Ecuación 1. PH = pKa + log ( ) así para PH 2.99 sería: 2.99
á𝑐𝑖𝑑𝑜
𝑥
= 2.12 + Log (0,0324−𝑋) = x = 0.0285M de NaOH
Ecuación 2. (0.0285M)(0.01L +V) = 0.1M(V)
2.854 𝑥 10−4
(V)= = 3.99ml
0.0715
En este procedimiento se debe tener en cuenta que no se está
usando la molaridad inicial del ácido, puesto que esta era
0.048M, y en la ecuación 1 está 0.0324M, que se obtuvo de
restarle a la concentración inicial de H3PO4, la concentración
de la base conjugada, ya que se necesita la cantidad de ácido
presente sin desionizar y de esta manera se le restó 0.01566 M
que es la concentración inicial de 𝐻2𝑃𝑂4− en el tampón
determinada con su la Ka. Por otra parte la variable X mostrada
en la ecuación 1, indica la cantidad de sal que se formará, que
es totalmente dependiente de los 𝑂𝐻 − agregados, en otras
palabras es la misma concentración, por eso x = [NaOH] y x =
[𝐻2𝑃𝑂4− ]. Finalmente, hallada esta concentración de 𝑂𝐻 − , se
obtiene el volumen desconocido por medio de una igualación,
afirmando que las moles de base conjugada en el volumen final
de la solución (10 ml de tampón más lo agregado) en cierto pH
(en el ejemplo pH 2.99) es igual a la cantidad de 𝑂𝐻 −
adicionados y se despeja (V) que representa el volumen
(Ecuación 2). A medida que se le va agregando mas NaOH, y
esta concentración se acerque al límite de la cantidad de ácido
presente se obtendrán volúmenes teóricos similares a los
conseguidos en la práctica; así para un PH de 2.99 se obtuvo
3.99 ml y 4.702 ml para un pH de 4.01, pero al hacer los
cálculos de pH 5.01 en adelante los volúmenes tienden a un solo
valor (4.79 ml), hecho que no se evidencia en la tabla 1, donde
cada pH se consiguió con un volumen diferente. La explicación

es clara, el amortiguador llega a su punto límite en donde las
concentraciones de ácido y de 𝑂𝐻 − son iguales (neutralización
total del ácido por la base agregada) y después cualquier
adición de NaOH generará grandes cambios en el pH y por lo
tanto, es probable que a partir de pH 5.01 ya se esté midiendo
el pH resultante de 𝑂𝐻 − agregados y no el de una
amortiguación, puesto que la base conjugada presente ya habría
reaccionado en su totalidad para un pH menor a este. En este
orden de ideas, se confirma que un buffer tiene un rango de pH
específico para amortiguar y que su máxima eficacia estaría en
el punto en que la concentración de sal está entre el 24% y 75%
(donde los valores de PH son muy cercanos a la pKa y es
representado con una flecha discontinua en la figura 1) mientras
que a medida que sobrepase la cantidad de base conjugada
(100% de sal) el amortiguador dejará de funcionar y se empieza
a medir PH de base agregada (figura 1), hecho que se
comprueba en el aumento de volumen de forma
desproporcionada en pH 5.01 (6.95ml) cuando este venía
cambiando con una diferencia de aprox. 1.19 ml y pasó a 2.25
ml más sobre el pH 4.01 lo que coincide con la figura 1 en
donde se observa que en PH igual a la pKa + 2 que es el límite
de amortiguación, (siendo para este caso 2.12+2= 4.12) el
sistema deja de funcionar.
ACTIVIDAD 2. Para preparar la solución amortiguadora de
Figura 1. Comportamiento de una solución amortiguadora. [1]
Tomada de:http://www.ehu.eus/biomoleculas/buffers/efica.htm
fosfato 0,1M a pH 7, se
calcularon los volúmenes de NaH2 PO4 y Na2 HPO4 que debían
ser tomados y se aforaron a 50 mL con agua destilada: (Ka=
6,2x10−8 y pKa= 7,2) los cálculos son los siguientes:
Durante la práctica se prepararon dos soluciones tampón de
fosfato con los volúmenes indicados anteriormente, al medir el
pH experimentalmente se obtuvieron los siguientes resultados:
pH 1: 6,69 pH2: 6,705, para los cálculos y experimentos
posteriores utilizaremos 6,7.
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DETERMINACIÓN DE pH POR MÉTODO
COLORIMÉTRICO
Tabla 2. Resultados de pH medido por diferentes
métodos.
Figura 2. Escala de pH (3-10). Figura 3. Resultados de
los experimentos 1 y 2 (colorimetría)
EXPERIMENTO 1. DETERMINACIÓN DE pH.
El método colorimétrico es una buena herramienta para
obtener una idea del pH de una muestra, pues como se
observa en la tabla 2, los valores obtenidos con el pH metro
se encuentran dentro de los rangos anotados utilizando la
escala colorimétrica. Sin embargo, este método es menos
seguro, porque ofrece un intervalo bastante amplio de
mediciones. Además, en el método potenciométrico se
utiliza el pH metro, el cual cuenta con un electrodo sensible
a los iones, presentando resultados más precisos.
La solución amortiguadora de fosfatos (pH 6,7) utilizada en
los experimentos, presentaba un valor de Ka pequeño y de
pKa grande (Ka= 6,2x10−8 y pKa= 7,2), lo cual indica que
el NaH2PO4 es un ácido débil con poca fuerza para liberar
sus hidrogeniones [2]. Este buffer podía actuar manteniendo
el pH dentro de un rango de 6,2 a 8,2 (calculado utilizando
la pKa: pKa±1).
En el tubo 1 el pH fue de 6,3 debido a que el agua destilada
es ligeramente ácida, pues disuelve el CO2 del aire hasta
estar en equilibrio con la atmósfera y este reacciona con el
agua formando ácido carbónico. El pH del tubo 2 (6,93) fue
un poco más alto, pues el buffer utilizado evitó que el pH
disminuyera de manera brusca al adicionar el agua destilada.
La muestra utilizada fue la gaseosa seven up (7up). Dentro
de los ingredientes de estas bebidas se encuentran: el agua
carbonatada (donde el CO2 reacciona con el agua,
generando ácido carbónico), aditivos y edulcorantes (los
cuales confieren el sabor dulce, como la sacarosa y la
fructosa), acidulantes (ácido cítrico, ácido fosfórico, ácido
málico y ácido tartárico), colorantes y conservantes [3].

Debido a la gran cantidad de componentes ácidos, el pH de
las bebidas gaseosas está alrededor de 2,8, pero varía según
la bebida por la concentración de sus ingredientes. Para el
caso de 7up, la literatura registra un pH de 3,31, el cual es
muy cercano al obtenido experimentalmente (3.33). En
cuanto al tubo 4, se obtuvo un pH de 3,8; este contenía 9 ml
de 7up, 1 ml de buffer y el indicador. Aunque el pH es un
poco más alto en el tubo 4 que en el 3, sigue siendo bastante
ácido, lo cual indica que la capacidad amortiguadora del
buffer no es suficiente. Al observar detalladamente, se
puede notar que la cantidad de gaseosa agregada es nueve
veces la cantidad del buffer; además, el valor medido (3,8)
se encuentra muy por debajo del rango de pH que puede ser
mantenido por el buffer (6,2-7,2), por lo que se afirma que
el buffer de fosfato preparado pierde la capacidad
amortiguadora frente a sustancias con pH muy bajos como
la gaseosa.
EXPERIMENTO 2.
CAPACIDAD AMORTIGUADORA.
En la determinación del pH agregando únicamente gotas de
NaOH al agua destilada (Tubo A) se observó una coloración
morada, la cual indicó un pH alcalino en la escala
colorimetrica; Al medir con el pH metro se obtuvo un pH de
9,71; posteriormente a ello, al soplar, el tubo se acidificó,
disminuyendo a un pH de 6,88, ya que junto a la presión
ejercida con un medio de CO₂ frente al agua se forma el
ácido carbonico [4]. En el tubo B se adicionó el buffer de
fosfatos preparado (pH 6,7) junto a 1 gota de NaOH y agua
destilada; el pH se aumento levemente a 6,73, debido a la
capacidad amortiguadora y la baja concentración de base
adicionada al medio. Al soplar el tubo B su pH fue
solamente de 6,74, (disminuyó menos con respecto al tubo
A) esto se puede explicar por la baja concentración de ácido
carbonico generado, el cual fue contrarestado por la
solución amortiguadora.
Para el tubo C se registró un pH entre 4 y 5 por el método
colorimétrico y 3,14 por el método de pH metro; en la
medición cualitativa se presentaron errores sistemáticos,
debido a las limitaciones humanas. Dicho error fue
contrarestado con el método del pH metro, el cual es mucho
más presiso. El tubo D presentó un pH de 6,7, indicando que
la concentración de HCl fue diluida a tal punto que su
concentración no afecto al pH inicial del buffer.
● Conclusiones
Para obtener una solución amortiguadora eficaz,
es fundamental tener en cuenta el rango de pH en el cual ella
puede actuar, y la concentración de sus componentes.
Además, si se conoce la sustancia que se desea amortiguar,
se debe preparar el buffer adecuado.
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Cuando se añaden ácidos o bases fuertes a la disolución
amortiguadora, el equilibrio se desplaza en el sentido de
eliminar el ácido añadido (hacia la izquierda) o de
neutralizar la base añadida (hacia la derecha). Este
desplazamiento afecta a las proporciones relativas de sal y
ácido en el equilibrio. Como el pH varía con el logaritmo de
este cociente, en el punto en que se sobrepase la
concentración de base o ácido conjugado con las moles
agregadas, este empieza a aumentar desproporcionadamente
y por lo tanto al calcular los volúmenes necesarios para subir
o bajar el PH de un buffer habrá un límite de volumen que
depende totalmente de las concentraciones presentes para
amortiguar.
El pH presentes en una solución puede ser alterada por el
medio en el que se encuentra, ya sea por las interacciones
naturales entre componentes externos ambientales o
propiamente de la solución; por ende, para mantener una
solución blanco en un correcto equilibrio, se debe primar la
no modificación de la concentración del medio, la
interacción con agentes degradantes, las alteraciones físicas,
etc.
Bibliografía
1 González Mañas; J. Curso de Biomoléculas. Ecuación de
Henderson-Hasselbalch. Departamento de Bioquímica y
Biología Molecular de la UPV-EHU. Disponible en:
http://www.ehu.eus/biomoleculas/buffers/hh.htm
2. Mckee, T; Mckee, J. R. (2013), Bioquímica las bases
moleculares de la vida. México D.F. McGraw Hill
Interamericana Editores S.A.
3. Información de bebidas gaseosas. Disponible en:
http://www.mapama.gob.es/es/ministerio/servicios/informaci
on/gaseosa_tcm7-315312.pdf
4. Rafael D, Ácido Carbónico (H₂CO₃): Propiedades,
Usos e Importancia, Lifeder, disponible en :
https://www.lifeder.com/acido-carbonico/