MOMENTOS DE

CIENCIA

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

Juan David Ibarbuen

Resumen
En el laboratorio de orgánica I se determinó la cromatografía
en diferentes técnicas, la primera técnica fue la de separación de
cromatografía en columna de una mezcla de violeta cristal y
Jose Fernando Trujillo naranja de metilo y la segunda fue la cromatografía en capa
Hoyos delgada o fina “polaridad de la sustancia”, estas técnica
permiten, el aislamiento, separación e identificación de
componentes presentes en una mezcla, en esta práctica se logró
la separación de los diferentes componentes de una mezcla y
también definir su polaridad.
J.ibarbuen@udla.edu.co

Palabras Clave: Aislamiento, cromatografía, mezcla,

polaridad, separación.

Josef.trujillo@udla.edu.co
Abstrac:
In the laboratory of Organic Chemistry I, chromatography
was determined in different techniques, the first technique was
the separation of column chromatography of a mixture of crystal
violet and methyl orange and the second was thin-layer or thin-
layer chromatography. the substance ", these techniques allow
the isolation, separation and identification of components
present in a mixture, in this practice the separation of the
different components of a mixture was achieved and also its
polarity was defined.

Keywords: Isolation, chromatography, mixing, polarity,

separation.
Introducción
Las personas siempre han estado
interesadas en conocer los diferentes
componentes que están presentes en
las diferentes mezclas que podemos
ver en la naturaleza. Por ejemplo,
muchas de las civilizaciones antiguas
extraían diferentes pigmentos
presentantes en los extractos de
muchas plantas, y estos pigmentos los
utilizaban para teñir sus prendas o sus
edificaciones. Las primeras
investigaciones sobre cromatografía
con equipos y sustancias más
modernas fueron realizadas entre 1903
y 1906 por el botánico ruso Mikhail
Tswet t. él separó pigmentos de las
hojas de las plantas por cromatografía
en columna (Martínez, 2010). A
medida que la ciencia ha ido
avanzando se han implementado
varios métodos para la separación de
los componentes de una mezcla, en su
conjunto se denominan como
cromatografía. El fundamento teórico
de la cromatografía consiste en la
distribución del compuesto entre dos
fases, una fija y otra móvil (Kurman,
1999). La separación de los
compuestos se debe a la acción de la
fase móvil que es el eluyente que
atraviesa la fase solida o absorbente
(retiene el compuesto), y arrastra los
compone tes menos polares, y el
absorbente retiene los más polares
(Sánchez, 2002). En algunas técnicas de
cromatografía se utiliza gel de Sílice
que es característico por separar
compuestos muy polares y la alúmina
que es característica por separar
compuestos no polares o no polares
(Sánchez, 2002). Pero hay que tener en
cuenta que la cromatografía no solo se
utiliza para la separación de
compuestos, también se utiliza para la
purificación e identificación de
compuestos (Kurman, 1999). Por
ejemplo, se puede establecer la
identidad de un fármaco mediante la
técnica de cromatografía de gases
(L.G. Wade, 2011) actualmente existen
varias técnicas de cromatografía como,
por ejemplo, en química orgánica se
utilizan tres técnicas de cromatografía:
cromatografía en capa fina (CCF)
cromatografía en columna (CC) y
cromatografía de gas-líquido (CGL)
(Sánchez, 2002). Ahora bien, el
objetivo e esta práctica fue incentivar e
inducir al estudiante a que conociera
algunas de las técnicas de
cromatografía utilizadas en ciencia y
la industria.
Metodología
La primera técnica cromatográfica
que se hizo fue la de cromatografía en
columna, para ello se procedió se a
montar la columna, en esta práctica se
utilizó una bureta y para el montaje se
conto con la ayuda de un soporte
universal y dos pinzas, con una de
ellas se sujetó la parte superior de la
bureta y con la otra pinza se sujetó
cerca de la llave, luego se procedió a
introducir un pequeño copo de hasta que alcanzara una altura de 1ml
algodón en el interior de la bureta sobre el absorbente, en este punto se
hasta su extremo inferior. Una vez cerro la llave y se añadieron 5ml de
montada la columna, se colocó un etanol y se abrió la llave nuevamente
Erlenmeyer debajo de esta y un y se siguió añadiendo etanol hasta que
embudo en su extremo superior, el primer colorante se recogiera en el
después de haber terminado todo el Erlenmeyer, cuando ya esta a punto de
montaje se procedió a preparar en un salir el segundo colorante se cerro la
vaso de precipitados una solución con llave y se agrego una mezcla de
5 gramos de gel de sílice, que fue eluyentes (Etanol/Trietilamina) en
nuestro absorbente y 50 ml de etanol una proporción 9:1, después se abrió la
que fue nuestro eluyente. Mientras se llave y se recogió el colorante.
preparaba la solución de gel sílice y
Para la segunda técnica de
etanol, se procedió a añadir poco a
cromatográfica que se realizó
poco etanol a la columna, luego se
denominada cromatografía en capa
vertió la solución de gel y etanol con
fina se procedió de la siguiente forma:
cuidado, al adicionar la solución se
se prepararon tres disoluciones Orto-
abrió la llave de la bureta permitiendo
toluidina (T), Acetofenona (A) y una
que goteara y se golpearon con
mezcla de ambas (O), una vez
cuidado las paredes de la bureta con el
preparadas estas disoluciones se
fin de que el absorbente se
introdujo en cada una un tubo capilar
sedimentara bien y procurando que no
para extraer una pequeña muestra de
se formaran burbujas. El etanol que se
cada una. Cada una de las muestras se
iba recogiendo en el Erlenmeyer se
depositaron en una placa
adiciono al vaso de precipitados
cromatográfica a unos 7 mm del borde
donde se preparó la solución de gel de
inferior procurando que no quedaran
sílice y etanol, esto con el fin de que se
demasiado cerca una muestra con la
recuperara parte el gel que haya
otra, luego se dejaron secar las
quedado en el vaso cuando se preparó
muestras y se depositó la placa en una
la solución, después todo esto se vierte
cámara cromatográfica que contenía
nuevamente en la columna. El
5ml de acetato de etilo, hexano y
eluyente se dejó descender hasta una
mezcla de acetato de etilo hexano en
distancia de entre 1 y 2 mm, luego se
proporción 2:8 al introducir la placa se
serró la llave para así poder agregar
procuró de esta disolución no tocara
aproximadamente 1ml de solución
las mancas, luego se esperó hasta que
preparada con violeta de cristal y
el disolvente ascendiera hasta 1 ml del
naranja de metilo preparada en un
borde superior de la placa
beaker, una vez hecho esto se procedió
cromatográfica, después se saco la
a abrir la llave hasta que la disolución
placa de la cámara y se dejo secar muy
quedara inmersa en el absorbente
bien para así reflejarla en luz
ultravioleta esto con el fin de ver la
distribución de cada una de las
muestras en la placa.
Resultados y discusión
En la técnica de cromatografía en
columna se pudo ver que, al hacer
todo el procedimiento experimental
para la separación de los dos
colorantes, el primer colorante que se
logro extraer fue el naranja de metilo y
luego el violeta de cristal. Ahora bien,
teniendo en cuenta la literatura que
nos decía que en la técnica de
cromatografía en columna se utiliza
gel de sílice como absorbente y este es
empleado para separar compuestos
polares, teniendo esto en cuenta
podemos decir que entre el violeta de
cristal y el naranja de metilo el mas
polar es el naranja de metilo a pesar de
que el violeta de cristal también es
bastante polar.
En la técnica de cromatografía por
capa fina o delgada entre las tres
muestras Orto-toluidina (T),
Acetofenona (A) y la combinación de
ambas (M) logramos ver que la
muestra menos polar es la muestra M,
A es levemente polar y o es polar y
todo esto se puede comprobar
calculando el Rf de cada uno, que es la
distancia recorrida por la muestra
entre la distancia recorrida por el
disolvente
Calculo el Rf para (M)
2,3
𝑅𝑓 = = 0,45
5,1
Calculo del Rf para (A)
1,5
𝑅𝑓 = = 0,29
5,1
Para (O) no es necesario ya que no
presento desplazamiento.
Ahora bien, teniendo en cuenta el
fundamento teórico cuando el valor de
Rf es mayor para una muestra que
para otra esto nos indica que la que el
de mayor Rf es menos polar que la
otra.
Conclusiones.
En esta práctica se aprendió dos
técnicas fundamentales en la
cromatografía la primera es la
separación de cromatografía en
columna de una mezcla de violeta
cristal y naranja de metilo y la segunda
fue la cromatografía en capa delgada o
fina. Donde la cromatografía que se
observa más ligera es la de la capa
delgada esta técnica determina
concentraciones y polaridad de los
eluyentes y la identificación de que tan
puro es el reactivo de prueba y la de la
columna determina la polaridad de
eluyente a través del absorbente en
fase estacionario si el absorbente es
mayormente polar que eluyente la
cromatografía es más ligera.
Bibliografía

Kurman, L. G. (1999). EUDEBA. Obtenido de Quimica organica. Fundamentos theorio-practicos

para el laboratorio: https://documentop.com/1ra-
parte_599cea671723dd9d9fbb936e.html

L.G. Wade, J. (2011). QUÍMICA ORGÁNICA. MEXICO: PEARSON EDUCACIÓN, México, 2011.

Martínez, C. H. (2010). Química 1. Bogotá: Santillana.

Sánchez, M. Á. (2002). UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANA. Obtenido de Manual de

prácticas de laboratorio de Orgánica I:
http://www.uamenlinea.uam.mx/materiales/quimica/GARCIA_SANCHEZ_MIGUEL_ANGEL
_Manual_de_practicasquim_orgI.pdf