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UNIVERSIDAD DE LA HABANA
EVALUACIÓN FARMACOGNÓSTICA,
FITOQUÍMICA Y ACTIVIDAD
ANTIOXIDANTE DE
Guettarda calyptrata A. Rich.
(Contraguao)
La Habana
2017
INSTITUTO DE FARMACIA Y ALIMENTOS
UNIVERSIDAD DE LA HABANA
EVALUACIÓN FARMACOGNÓSTICA,
FITOQUÍMICA Y ACTIVIDAD
ANTIOXIDANTE DE
Guettarda calyptrata A. Rich.
(Contraguao)
La Habana
2017
DEDICATORIA
A mi mamá, por todo el apoyo, paciencia y amor incondicional, porque con ella aprendí a dar mis
primeros pasos y ahora le toca verme volar…
A mi hija, porque tenerla a mi lado me da fuerzas para ser mejor cada día…
AGRADECIMIENTOS
A mis profesosres Dra.C. Yamilei I. Gutiérrez Gaitén y MsC. Ramón Scull por darme la
oportunidad de trabajar con ellos en este proyecto,
A Lic, José Luis Mayoral por dar su idea,
A mis directoras DraC. Miriam Díaz de Armas y Lic. Yailen Cartaya por su ayuda, paciencia y
comprensión.
A MsC. Tahimi Pinillos Saavedra por su asesoría y apoyo incondicional,
A mis compañeros de trabajo en la EPB “Carlos J. Fnlay porque son mis cómplices en todo.
A mis familiares y amigos por creer en mí cuando esto parecía un sueño inalcanzable.
Sin su ayuda realmente, hubiese sido imposible.
Resumen
RESUMEN
ÍNDICE
Páginas
INTRODUCCIÓN……………………………………………………..…………….. 1
24
II.6.4. Determinación del contenido de flavonoides totales……..…….
II.7. Actividad antioxidante de los extractos....…..………………………..….. 25
II.7.1. Técnica FRAP………………………….…………………………..….. 25
II.7.2. Técnica de DPPH………………………….....……………………..… 25
II.8. Análisis estadístico………………………………………………………..…. 27
CONCLUSIONES…………………………………..……………………………….. 50
RECOMENDACIONES…………………………………………..…………………. 51
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
INTRODUCCIÓN
Introducción
INTRODUCCIÓN
El regreso del interés científico sobre las plantas medicinales, investigando su riqueza y
variabilidad química, ha impulsado una revalorización de su empleo en muchas partes
del mundo, representando una forma complementaria de curar, en que el empirismo
queda atrás en función de la evidencia científica, armonizando la medicina tradicional
con las terapias oficiales de cada país (Avello y Cisternas, 2010).
~1~
Introducción
Dentro de las especies referidas con gran importancia económica, por su utilidad en el
campo alimenticio, ornamental y farmacéutico, se encuentran las correspondientes a la
familia Rubiácea. Está constituida, aproximadamente, por 650 géneros y 13 000
especies (Delprete y Jardim, 2012; Dias y col., 2013). Entre los representantes se
encuentra el género Guettarda, del que existen en nuestro país ocho especies
arbóreas, incluida Guettarda calyptrata A. Rich. (Bisse, 1988).
G. calyptrata, es endémica de Cuba (Bissea, 1988). Fue descrita por Achille Richard y
publicado en Historia Física Política y Natural de la Isla de Cuba, Botánica. Esta especie
ha sido empleada tradicionalmente por los campesinos en preparaciones artesanales,
para contrarrestar de forma rápida y eficaz los efectos tóxicos de Comocladia dentata
Jacq. (Guao), muy común en terrenos áridos y pedregosos, sabanas y costas de toda
la isla y que se caracteriza por segregar un látex altamente cáustico para piel y
mucosas (Roig, 1974; 2014).
Los antioxidantes naturales presentes en las plantas han cobrado gran interés en las
ultimas décadas, puesto que el estrés oxidativo (un desbalance entre las sustancias
oxidantes y prooxidantes) está implicado en un gran número de afecciones de salud. Se
ha demostrado que el daño oxidativo causado por radicales libres está relacionado con
una amplia gama de enfermedades y desórdenes, entre los cuales se incluye la
causticación (Calderón, 2011).
~2~
Introducción
Objetivo general:
Objetivos específicos:
~3~
CAPÍTULO I
REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
Revisión Bibliográfica
En cuanto a sus características botánicas se puede plantear que son árboles, arbustos,
sufrútices, hierbas, enredaderas o lianas, de hábitos terrestres o raras veces epífitas, a
veces con rafidios. Los tallos son tetragonales y con muchos ganchos, que permiten a
las especies trepadoras sujetarse a las especies circundantes. Las hojas se presentan
simples, opuestas o verticiladas, de borde generalmente entero con estípulas situadas
entre los peciolos de las mismas (Borhidi y Diego-Pérez, 2002).
~4~
Revisión Bibliográfica
a) b)
El género Pogonopus y varios otros son las fuentes de compuestos activos de pruebas
y actividad anticancerígena, eso involucra la inhibición de la formación de microtúbulos
durante la división celular (Delprete, 2004). Por su parte, el género Uncaria (uña de
gato), tiene numerosos reportes de usos medicinales por médicos naturistas en el Perú.
Psychotria viridis y especies relacionadas son usadas en importantes ingredientes en
la producción de alucinógenos (Andersson, 1992).
En Cuba, existen varios géneros de la familia Rubiácea, entre los que se encuentran:
Cephalanthus, Calycophyllum, Exostema, Chimarrhis, Rondeletia, Casasia,
Genipa, Morinda, Antirrhea, Chione, Faramea, Guettarda, etc. (Bisse, 1988).
~5~
Revisión Bibliográfica
El género fue nombrado por Linnaeus en 1753 en su libro Species Plantarum, en honor
al naturalista francés del siglo XVIII Jean-Etienne Guettard (Quattrocchi, 2000).
~6~
Revisión Bibliográfica
~7~
Revisión Bibliográfica
Es una especie endémica de Cuba, común en todas las provincias, sabanas y terrenos
pedregosos, áridos y cuabales (Roig, 1974; Bisse, 1988).
Se reportan casos de personas afectadas por el solo hecho de pasar cerca del guao, al
alcance de los vapores que emite su savia lechosa al reaccionar con el calor. De ahí
surgió la superstición de que hasta la sombra del guao afecta a las personas (Roig,
1974). La causticación que produce esta planta supone una desorganización de los
componentes tisulares. Es una quemadura química muy diferente a la térmica. Se
produce en el lugar de contacto del látex tóxico con el tejido orgánico, donde se
desnaturalizan los lípidos y proteínas celulares. En el tejido afectado se producen
~8~
Revisión Bibliográfica
lesiones que se caracterizan por eritema, edema y urticaria que varían en gravedad de
un individuo a otro (Repetto J y Repetto K, 2009).
~9~
Revisión Bibliográfica
2009; Jin y Mumper, 2010; Zhang y col., 2011; Castellano y col., 2012; Mohanlal y col.,
2012; Sawadogo y col., 2012).
Radical libre (RL) es cualquier especie química capaz de existir de forma independiente
y que presenta uno o más electrones desapareados en su estructura. Son conocidos
~ 10 ~
Revisión Bibliográfica
como especies reactivas oxigénicas o del oxígeno (ROS) y especies reactivas del
nitrógeno (RNS). Son responsables del daño oxidativo de macromoléculas biológicas
como el DNA, lípidos, carbohidratos y proteínas. Participan en los mecanismos
fisiopatológicos de muchas enfermedades, como algunos tipos de cáncer, diabetes,
patologías cardiovasculares, procesos reumáticos, patologías gastroentéricas,
afecciones broncopulmonares o procesos neurodegenerativos y otros (González, 2000;
Agudo, 2010).
~ 11 ~
Revisión Bibliográfica
~ 12 ~
Revisión Bibliográfica
~ 13 ~
CAPÍTULO II
MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales y Métodos
De las colectas realizadas solo se emplearon las hojas, previamente lavadas con agua
potable, las cuales fueron cortadas en trozos pequeños con ayuda de tijeras para
facilitar el proceso de secado.
También se efectuaron mediciones de largo y ancho de las hojas con ayuda de un pie
de rey; se calcularon los valores promedios y la desviación estándar. (Miranda y
Cuéllar, 2000).
~ 14 ~
Materiales y Métodos
Para visualizar los diferentes caracteres anatómicos internos del vegetal se utilizó un
microscopio NOVEL (lente 10X) con cámara acoplada modelo HDCE-50B.
Los diferentes ensayos se realizaron según la metodología descrita por la NRSP 309
(1992) y Miranda y Cuéllar (2000).
El secado se realizó a 40 ºC, en estufa con recirculación de aire, modelo P/G 2007 ba
serie 081070207 de procedencia China. En el estudio se utilizaron 100 g de muestra por
cada réplica. Se tuvo en cuenta el número de días que demoró la droga en alcanzar
peso constante (tiempo de secado) y el porcentaje de la pérdida en peso de agua (con
una frecuencia de 12 h) (NRSP 309, 1992; Miranda y Cuéllar, 2000).
a) Humedad residual
Hr = Vf - Vi
x 100
M
Donde:
Hr: humedad residual (%)
Vf: volumen final de agua (mL)
Vi: volumen inicial de agua (mL)
M: masa de la muestra (g)
100: factor matemático para el cálculo.
~ 15 ~
Materiales y Métodos
Este ensayo se llevó a cabo por triplicado, a partir de 5 g de droga. Se utilizaron como
disolventes agua y mezclas hidroalcohólicas al 30, 50 y 80 %. Las muestras se agitaron
en una zaranda por un tiempo de 6 horas. Cada extracto obtenido se filtró por un
embudo de vidrio utilizando papel Whatman de filtración rápida.
R x 500 x 100
Ss =
M (100-H)
Donde:
Ss: sustancias solubles (%)
R: residuo de la muestra (g)
M: masa de la muestra (g)
H: humedad residual (%)
500 y 100: factores matemáticos para el cálculo.
Para las determinaciones se empleó una mufla modelo SX2-12TP, procedencia China.
Las pesadas se realizaron en balanza analítica marca Sartorius. Cada determinación se
efectuó por triplicado a partir de 2 g de material vegetal.
Cenizas totales
M2 - M
CT = x 100
M1 - M
Donde:
C T : cenizas totales en base hidratada (%)
M: masa del crisol vacío (g)
M 1 : masa del crisol con la muestra (g)
~ 16 ~
Materiales y Métodos
Las determinaciones se llevaron a cabo a partir de las cenizas totales, luego de disolver
las mismas con agua destilada. Los cálculos se realizaron por la expresión siguiente:
M2 - Ma
Ca = x 100
M1 - M
Donde:
Ca: cenizas solubles en agua en base hidratada (%)
M 2 : masa del crisol con las cenizas totales (g)
Ma: masa del crisol con las cenizas insolubles en agua (g)
M 1 : masa del crisol con la muestra de ensayo (g)
M: masa del crisol vacío (g)
100: factor matemático para el cálculo.
Se determinaron a partir de las cenizas totales, después de tratar las mismas con ácido
clorhídrico al 10 %. Los resultados se obtuvieron por la expresión siguiente:
M2 - M
B= x 100
M1 - M
Donde:
B: cenizas insolubles en ácido clorhídrico en base hidratada (%)
M 2 : masa del crisol con la ceniza (g)
M: masa del crisol vacío (g)
M 1 : masa del crisol con la porción de ensayo (g)
100: factor matemático para el cálculo.
~ 17 ~
Materiales y Métodos
FILTRAR
FILTRAR
FILTRAR
~ 18 ~
Materiales y Métodos
RESINAS
FEHLING (SUSTANCIAS REDUCTORAS)
TRICLORURO FÉRRICO (COMPUESTOS FENÓLICOS)
BALJET (LACTONAS Y COUMARINAS)
ESPUMA (SAPONINAS)
EXTRACTO ALCOHÓLICO
LIEBERMANN-BUCHARD (TRITERPENOS Y/O ESTEROIDES)
DRAGENDORFF, MAYER Y WAGNER (ALCALOIDES)
NINHIDRINA (AMINOÁCIDOS)
BONTRAGUER (QUINONAS)
SHINODA (FLAVONOIDES)
KEDDE (CARDIOTÓNICOS)
ANTOCIANIDINAS
a) Requisitos organolépticos
~ 19 ~
Materiales y Métodos
- Determinación del color: se tomó un tubo para ensayos, bien limpio y seco, se
llenó hasta las tres cuartas partes con la muestra de ensayo y se observó el
color, la transparencia, la presencia de partículas y la separación en capas. Se
informó el resultado.
b) pH
c) Sólidos totales
Pr - P
St = x 100
V
Donde:
P r = masa de la cápsula más el residuo (g)
P = masa de la cápsula vacía (g)
V = volumen de la porción de ensayo (mL)
100 = factor matemático
d) Densidad relativa
Se realizó por picnometría y se utilizó una balanza analítica monoplato marca Sartorius.
De la muestra de ensayo se tomó la cantidad necesaria de acuerdo con la capacidad
del picnómetro y se enfrió a 25 °C.
~ 20 ~
Materiales y Métodos
M1 - M
D25 =
M2 - M
Donde:
M = masa del picnómetro vacío (g)
M1= masa del picnómetro con la muestra de ensayo (g)
M2= masa del picnómetro con agua (g)
e) Índice de refracción
f) Análisis capilar
Este ensayo se desarrolló según lo descrito en la NRSP 312 (1992) y por Miranda y
Cuéllar (2000), a partir de 20 mL de extracto, empleando papel Whatman # 1. El tiempo
de corrida fue de 2 horas y la temperatura de trabajo de 25 ºC (± 1).
Para el análisis e interpretación de la imagen capilar se tuvieron en cuenta los aspectos
siguientes:
Color
Altura
Descripción de las diferentes partes (franja, sub-franja, banda y sub-banda)
Cambios de coloración con vapores de amoníaco
~ 21 ~
Materiales y Métodos
Los análisis se efectuaron a los cuatro extractos, los cuales se diluyeron y añadieron a
una tableta de KBr. Las mediciones se realizaron en un equipo infrarrojo marca Jasco,
~ 22 ~
Materiales y Métodos
Muestras
Extractos acuoso e hidroalcohólicos al 30, 50 y 80 % de G. calyptrata
Sustancia de referencia: ácido gálico
Procedimiento:
Solución diluida de Folin-Ciocalteu: se tomó 10 mL del reactivo y se diluyó a 100
mL con agua destilada.
Solución de carbonato de sodio 7,5 %: se pesó 75 g de Na 2 CO 3 anhidro y se
disolvió en un litro de agua destilada.
~ 23 ~
Materiales y Métodos
diluyeron a 100 mL. Estas diluciones correspondieron a las concentraciones de 10, 20,
30, 40 y 50 mg/100 mL de ácido gálico, con las que se construyó una curva de
calibración de absorbancia contra concentración. El contenido de fenoles totales se
expresó en mg/mL.
Se llevó a cabo por el método colorimétrico del tricloruro de aluminio, según lo referido
por Woisky y Salatino (1998); Chang y cols., (2002) y Pourmorad y cols. (2006).
Muestras
Extractos acuoso e hidroalcohólicos al 30, 50 y 80 % de G. calyptrata
Sustancia de referencia: quercetina
Procedimiento
Con las concentraciones del patrón anteriormente señaladas, se construyó una curva
de calibración de absorbancia contra concentración. El contenido de flavonoides totales
se expresó en base a quercetina (mg/mL).
~ 24 ~
Materiales y Métodos
Materiales:
Micropipetas de 5-1000 µL
Tubos de ensayos
Reactivos:
Acetato de sodio anhidro o acetato de sodio tri-hidratado.
Ácido acético (99,7 %)
2,4,6-tripiridil-s-triazina (TPTZ) (Aldrich)
Ácido clorhídrico (37 %)
FeCl 3 x 6 H 2 O (0,02 M)
Muestras:
Extractos acuoso e hidroalcohólicos al 30, 50 y 80 % de G. calyptrata, a las
concentraciones de 2; 10; 20; 30 y 40 μg/mL.
Consiste en medir la capacidad de la muestra para reducir el hierro férrico (Fe 3+) a ferroso
2+ 3+
(Fe ). Se coloca en el medio de reacción el complejo Fe -TPTZ y el mismo en
2+
presencia de agentes reductores se reduce a Fe -TPTZ que desarrolla un color azul
intenso con un máximo de absorción a 593 nm.
Para la determinación cuantitativa se utilizó el método del radical libre DPPH (radical
2,2-difenil-1-picrilhidracilo). Se empleó un espectrofotómetro UV- visible y las
~ 25 ~
Materiales y Métodos
Materiales:
Micropipetas de 5-1000 µL
Tubos de ensayos
Reactivos:
DPPH (2,2 difenil-1-picrilhidracilo) (Sigma)
Etanol absoluto calidad para análisis
Muestras:
Extractos acuoso e hidroalcohólicos al 30, 50 y 80 % de G. calyptrata, a las
concentraciones de 5; 12,5; 25; 37,5 y 50 μg/mL.
D.Oc - D.Om
% inhibición DPPH = x 100
D.Om
Donde:
D.O m: densidad óptica de la muestra (nm)
D.O c: densidad óptica del control (nm)
~ 26 ~
Materiales y Métodos
~ 27 ~
CAPÍTULO III
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Resultados y discusión
~ 28 ~
Resultados y discusión
~ 29 ~
Resultados y discusión
de tricomas o pelos del tipo unicelulares, los que también fueron identificados en el
análisis macroscópico.
~ 30 ~
Resultados y discusión
Con relación a la temperatura de secado hay que señalar que su control es fundamental
y constituye una seria limitante en el proceso; temperaturas demasiado altas
descomponen los metabolitos responsables de la acción terapéutica de las plantas
medicinales y muy bajas hacen más largo y costoso el proceso, además de ocasionar
daños en el material por el desarrollo de hongos. Por regla general la temperatura de
secado no debe exceder los 40 oC (Acosta y Rodríguez, 2006).
~ 31 ~
Resultados y discusión
El método azeotrópico, que es uno de los más aceptados por la norma que rige el
trabajo con las plantas, fue el seleccionado durante este estudio por ser general y
~ 32 ~
Resultados y discusión
~ 33 ~
Resultados y discusión
Los resultados positivos para la prueba de fenoles y taninos, coincide con los reportes
de la literatura para el género Guettarda (Naressi y col., 2015); dichos compuestos,
confieren propiedades fungicidas y son utilizados como defensa química, ya que
gracias a su capacidad de precipitar proteínas actúan como antinutricionales ante el
ataque de predadores (Asquith y Butler, 1986). Entre la gran variedad de compuestos
secundarios existentes en las plantas, los fenoles representan a los principales agentes
alelopáticos que se conocen en la actualidad (Lizalda, 2008). Por sus propiedades
antioxidantes estos compuestos han demostrado efectos beneficiosos a la salud
humana como antinflamatorios, antiescleróticos y antivirales (Mendes y col., 2010;
Wannes y col., 2010; Gupta y col, 2014; Coimbra y col., 2015).
~ 34 ~
Resultados y discusión
~ 35 ~
Resultados y discusión
Se elaboró un extracto acuoso por decocción, considerando los antecedentes del uso
popular dado a la planta. También se obtuvieron extractos hidroalcohólicos (por
maceración), teniendo en cuenta una mayor posibilidad de aplicación y estabilidad de
las preparaciones a partir de la droga.
~ 36 ~
Resultados y discusión
Los resultados obtenidos oscilaron entre 4,01 y 4,97; mostrándose las características
ácidas de los extractos. El carácter ácido puedo estar dado por la presencia de
diferentes metabolitos secundarios tales como: fenoles, flavonoides, taninos,
triterpenoides y esteroides detectados en el tamizaje fitoquímico, fundamentalmente
fenoles y taninos en cuyas estructuras presentan grupos funcionales como los
hidroxilos fenólicos que aportan esta característica al medio. Se encontraron diferencias
significativas en la determinación de dicho parámetro.
La densidad relativa da criterio del peso específico de cada extracto. Los resultados de
esta determinación muestran la presencia de sustancias extraídas a partir de cada
disolvente utilizado. El análisis estadístico evidenció diferencias significativas,
observándose que a medida que aumenta el grado alcohólico, disminuye el valor de
densidad.
~ 37 ~
Resultados y discusión
~ 38 ~
Resultados y discusión
Al visible (figura 8A) se apreció poca complejidad cromatográfica, lo notorio fue una
mancha de color amarillo de Rf 0,67 en los cuatro extractos que coincidía con el patrón
de rutina ensayado. En el revelado físico mediante luz UV (figura 8B) se observó en
todas las muestras evaluadas, fluorescencia en un gran número de manchas, lo cual
confirma la presencia de moléculas con grupos cromóforos conjugados en su
estructura. Las coloraciones entre parda-amarillenta y naranja pudiera estar relacionada
con compuestos de naturaleza fenólica, entre ellos flavonoides.
~ 39 ~
Resultados y discusión
Al exponer la cromatoplaca a los vapores de amoníaco (figura 8C), todas las manchas
intensificaron su color y algunas se mostraron amarillas, entre ellas, la de Rf 0,67, algo
indicativo de compuestos con presencia de grupos fenólicos libres. Algo similar ocurrió
con el revelado frente al tricloruro de aluminio (figura 8E) y al exponer la placa a la luz
UV después del revelado con dicha solución (figura 8F), evidenciándose tonalidades
entre amarillo intenso y amarillo-naranja.
El revelado con tricloruro férrico al 5 % en agua (figura 8D) mostró manchas de color
verde negruzco, lo que sugiere compuestos fenólicos derivados del catecol, así como
otras de color pardo-rojizo en el punto de aplicación, propio también de este tipo de
compuesto, fundamentalmente, glicosilados (Lock, 1988; Miranda y Cuéllar, 2001).
~ 40 ~
Resultados y discusión
I que aparece en un rango de los 300 a 400 nm y la banda II, ubicada entre los 200 y
285 nm (Lock, 1988; Markham, 1989; Abad-Garcia, 2009; Martínez y col., 2012). En la
figura 9 se representan los espectros UV-visibles de las muestras evaluadas.
Al analizar los extractos por espectroscopía infrarrojo, se observó una banda ancha e
intensa entre 3500 y 3200 cm-1, indicativa de las vibraciones de valencia de
~ 41 ~
Resultados y discusión
alcoholes o fenoles asociados. Entre 2980 y 3000 cm-1, se apreciaron bandas múltiples
indicativas de vibraciones de valencia C-H. También se visualizaron bandas de 1500-
1600-cm-1 que pudieran estar relacionadas con las vibraciones de valencia de C–C de
compuestos con agrupamiento aromático. Se constató una banda alargada y estrecha
muy cercana a los 1050 cm-1, aproximadamente, indicativa de la presencia de enlaces
C-O (Silverstein, 1977; Lock, 1988; Siebert y Hildebrandt, 2007). En la figura 10 se
muestran los espectros infrarrojos de los cuatro extractos evaluados.
Es de notar, que los extractos manifestaron un perfil IR con varias bandas coincidentes,
pero con diferencias en la intensidad y ancho de las mismas; pudiendo sugerir en todos
los casos la presencia de compuestos de naturaleza fenólica.
~ 42 ~
Resultados y discusión
0,8
0,6
Absorbancia
0,4
0,2
0
0 10 20 30 40 50
Concentración de ácido gálico (mg/100 mL)
El contenido de fenoles totales en los extractos fue determinado por el método de Folin-
Ciocalteau, donde el reactivo utilizado es una mezcla de ácidos de coloración amarilla
~ 43 ~
Resultados y discusión
Se logró una buena correlación entre las concentraciones ensayadas del patrón de
quercetina y las absorbancias, obteniendo una ecuación de la recta Y=
0,0036X+0,0270, con un coeficiente de correlación de 0,9995 (≥0,99); esto es indicativo
del buen ajuste de la ecuación del modelo de los datos experimentales. En la tabla VI
se presentan los resultados del contenido de flavonoides para cada extracto.
~ 44 ~
Resultados y discusión
El análisis de FRAP fue introducido por Benzie y Strain (1996) para medir la actividad
antioxidante total y se basa en el poder reductor de un antioxidante que reduce el ion
férrico (Fe3+) al ion ferroso (Fe2+), formando un complejo azul. Una absorción alta a
~ 45 ~
Resultados y discusión
una longitud de onda de 593 nm indica un poder de reducción alto del fitoquímico, es
decir, una actividad antioxidante alta (Roginsky y Lissi, 2005).
Del análisis estadístico, se desprende que existen diferencias significativas entre los
valores de densidad óptica, los cuales aumentaron a medida que aumentaba la
concentración de cada extracto evaluado. En todos los casos se formó un complejo de
color azul, cuya intensidad aumentaba con la concentración de la muestra.
En la técnica del DPPH ocurre una reducción de dicho radical, que se monitorea por la
disminución en la absorbancia a una longitud de onda característica. En su forma de
radical libre, el DPPH• absorbe a 517 nm y cuando sufre reducción por un antioxidante,
esta absorción desaparece. En consecuencia, la desaparición del DPPH• proporciona
un índice para estimar la capacidad del compuesto de prueba para atrapar radicales.
~ 47 ~
Resultados y discusión
~ 48 ~
Resultados y discusión
Thaipong y col., 2006, Echavarría y col., 2009; Ljiljana y col., 2009; Faustino y col.,
2010; Dejan y col., 2011). Dentro de esta gran familia suelen encontrarse tres grupos
principales: los ácidos fenólicos, los polifenoles y los flavonoides (Ochoa y Ayala, 2004).
Otros estudios reflejan, que las propiedades biológicas y farmacológicas de los
flavonoides, en gran medida, depende de la actividad antioxidante (Bosetti y col., 2005;
Rossi y col., 2006; Walle y col., 2007; Majewska y col., 2011).
~ 49 ~
CONCLUSIONES
Conclusiones
CONCLUSIONES
~ 50 ~
RECOMENDACIONES
Recomendaciones
RECOMENDACIONES
~ 51 ~
REFERENCIAS
BIBLIOGRÁFICAS
Referencias Bibliográficas
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Duarte AFS, Szabo EM, Duarte IS, Merino FJZ, de Oliveira VB, Miguel MD and
Miguel OG. Evaluation of antioxidant capacity, phenolic content, antimicrobial
and cytotoxic properties of Guettarda uruguensis flowers and fruits. African
Journal of Pharmacy and Pharmacology 2016;10(47):1014-1024.
Echavarría B, Francos A, Martínez A. Evaluación de la actividad antioxidante y
determinación del contenido de compuestos fenólicos en extractos de
macroalgas del Caribe Colombiano. Vital 2009;16(1).
Faustino H, Gil N, Baptista C and Duarte AP. Antioxidant Activity of Lignin
Phenolic Compounds Extracted from Kraft and Sulphite Black Liquors.
Molecules 2010;15:9308-9322.
Fujiwara M, Okamoto M, Okamoto M, Watanabe M, Machida H, Shigeta S,
Konno K, Yokota T, Baba M. Acridone derivatives are selective inhibitors of HIV-1
replication in chronically infected cells. Antiviral Res. 1999;43:179-189.
Gattuso MA, Gattuso SJ. Manual de procedimientos para el análisis de drogas
en polvo. Editorial de la Universidad Nacional de Rosario Urquiza. Argentina;
1999. ISBN N◦ 950-673-199-3.
González AM. Morfológica. 2013. Disponible en:
http//www.biologia.edu.ar/botnica/tema2-3venación.
González CLM, Mosquera MOM, Osorio JN. Ciclótidos de la especie Guettarda
crispiflora (Rubiaceae). Scientia et Technica Año XVII. Universidad Tecnológica
de Pereira. 2012; 51:203-210.
González TMC, Betancourt RM, Ortiz MR. Daño Oxidativo y Antioxidantes.
Bioquímica 2000;25(1):3-9.
Granado L, García JA, Palmarola A, Barrios D, González-Oliva L, González-
Torres LR, Hernández M, Falcón B & Bécquer ER. Encuesta de percepción
pública sobre valores y conservación de la flora cubana: resultados preliminares.
Sección de Conservación, Sociedad Cubana de Botánica. Bissea 2013;7(3).
Gupta N, Chauhan RS, Pradhan JK. Rutin: a bioactive flavonoid. In: Gupta, N.
(Ed.), Handbook of Medicinal Plants and Their Bioactive Compounds. Research
Signpost, Trivandrum 2014;51-57.
Referencias Bibliográficas
Kartik CP, Surendra kP, Ranjit kH, Jayaram KK. Traditional Approaches towards
Standardization of Herbal Medicines. A Review. Journal of Pharmaceutical
Science and Technology 2010;2(11):372-379.
Koba M, Baczek T. Physicochemical interaction of antitumor acridinone
derivatives with DNA in view of QSAR studies. Med Chem Res. 2011;20:1385-
1393.
Kuskoski EM, Agustín GA, Troncosa MA, Manzini-Filho J, Roseane F. Aplicación
de diversos métodos químicos para determinar la actividad antioxidante en pulpa
de frutos. Cienc. Tecnol. Aliment. Campinas. 2005;25 (4):726-732.
Lizalda C. Estudio Fitoquímico y Alelopático de extractos polares de las hojas de
Swinglea glutinosa Merr. (Rutaceae). Colombia; 2008.
Ljiljana S, Mihajlo S, Vesna N, Ljubiša N, Dušica R, Jasna ČB and Vesna T.
Antioxidant Activity and Total Phenolic and Flavonoid Contents of Hieracium
pilosella L. Extracts. Sensors 2009;9:5702-5714.
Lock O. Investigación fitoquímica. Métodos para el estudio de los productos
naturales. Lima: Ontificia Universidad Católica del Perú; 1988. p. 91-101.
Lou Zhi-cen. General control methods for vegetabla drugs. Comparative study of
methods included in thirteen pharmacopoeias an proposals on their internacional
unification. WHO/PHARM/80.502; 1980. p. 8-39.
Mabberley DJ. The Plant Book. Cambridge Univ. Press., Cambridge; 1997. p.
858.
Majewska M, Skrzycki M, Podsiad M and Czeczot H. Evaluation of antioxidant
potential of flavonoids: an in vitro study. Acta Poloniae Pharmaceutica - Drug
Research 2011;68(4):611-615.
Markham KR. Flavones, flavonols and their glicosides, Chemistry Divison,
D.S.I.R., Petone, New Zealand. 1989. pp. 205-207.
Martínez IV, Periago MJ, Ros G. Significado nutricional de los compuestos
fenólicos de la dieta. Archivos Latinoamericanos de Nutrición 2000;50(1).
Martínez J, García C, Durango D, Gil J. Caracterización de propóleos
provenientes del municipio de Caldas obtenido por dos métodos de recolección.
Rev.MVZ Córdoba. 2012;17(1):2861-2869.
Referencias Bibliográficas
Repetto JM, Repetto KG. Toxicología fundamental. 4ta ed. Ediciones Días de
Santos. 2009;6:172-173.
Revathi D, Rajeswari M. Chemical Profiling of Guettarda speciosa Linn. by GC-
MS. International Journal of Emerging Technology and Advanced Engineering
2015;5(9):114-118.
Robbrecht E. Tropical Woody Rubiaceae. Opera Bot. Belgica. 1988;1:7-215.
Roginsky V, Lissi EA. Review of methods to determine chain-breaking antioxidant
activity in food. Food Chem. 2005;92:235-254.
Roig JT. Diccionario botánico de nombres vulgares cubanos. Tomo I. Cuarta
edición. Editorial Científico-Técnica. La Habana; 2014. p. 295.
Roig JT. Plantas medicinales, aromáticas o venenosas de Cuba. Editorial Ciencia
y Técnica. Instituto del libro, La habana; 1974. p. 297.
Rossi M, Negri E, Talamini R, Bosetti C, Parpinel M, Gnagnarella P, Franceschi
S, Dal Maso L, Montella M, Giacosa A, La Vecchia C. Cancer Epidemiol.
Biomarkers Prev. 2006;15:1555.
Salvamani S, Gunasekaran B, Shaharudin NA, Aqlima S, Shukor M.
Antiartherosclerotic effects of plant flavonoids. Biomed Research Internatinal
2014;1-11.
Sánchez-Moreno C. Review: methods used to evaluate the free radical
scavenging activity in foods and biological systems. Food Sci. Tech. Int.
2002;8(3):121-137.
Saravana KA, Amutha P, Gandhimathi R, Dhanapal R. Study on phytochemical
profile and antiepileptic activity of inner bark of Guettarda speciosa (L.). Iran J.
Pharm. Ther. 2009;8(1):73-76.
Saravana KA, Gandhimathi R. Effect of Guettarda speciosa extracts on
antioxidant enzymes levels in rat brain after induction of seizures by MES and
PTZ. Journal of Natural Products 2010;3:80-85.
Sawadogo WR, Maciuk A, Banzouzi JT, Champy P, Figadere B, Guissou IP,
Nacoulma OG. Mutagenic effect, Antioxidant and anticancer activities of six
medicinal plants from Burkina Faso. Nat. Prod. Res. 2012;26:575–579.
Referencias Bibliográficas
Wijngaard HH, Rößle C, Brunton N. A survey of Irish fruit and vegetable waste
and byproducts as a source of polyphenolic antioxidants. Food Chem.
2009;116:202-207.
Wikipedia. La Enciclopedia libre. 2016. Disponible en:
https://en.wikipedia.org/wiki/Guettarda.
Zhang L, Ravipati AS, Koyyalamudi SR, Jeong S, Reddy N, Smith PT, Bartlett J,
Shanmugam K, Münch G, Wu MJ. Antioxidant and anti-inflammatory activities of
selected medicinal plants containing phenolic and flavonoid compounds. J. Agric.
Food Chem. 2011;59:12361-12367.