Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Microbiology Course
Încărcat de
tata_77Drepturi de autor
Formate disponibile
Partajați acest document
Partajați sau inserați document
Vi se pare util acest document?
Este necorespunzător acest conținut?
Raportați acest documentDrepturi de autor:
Formate disponibile
Microbiology Course
Încărcat de
tata_77Drepturi de autor:
Formate disponibile
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
يمذيــــــــــخ
افزجبهاد ٓ٤ب ٙاُْوة ُٖالؽ٤زٜب ُالٍزٜالى ا٥كٓ ٞٛ ٠اُِ٤ٍٞخ ُِزؾون ٖٓ اُٖالؽ٤خ ؽز ٠ال
٘ٛ ٌٕٞ٣بى ٓقبٛو ػِٕ ٠ؾخ أَُزِٜي ٖٓٝ .اُ٘بؽ٤خ اُجُٞٞ٤ع٤خ ٣زْ االٛزٔبّ ثٔؾز ٟٞأُ٤بٖٓ ٙ
َٓججبد آ٧واٗٝ .ثٌزوُٞٞ٣ع٤ب ٖٓ اُٖؼت إٔ ٣زْ اُزؾُِ َ٤غٔ٤غ َٓججبد آ٧واٗ ُنُي ٣زْ
اٌُْق ػِٓ ٠ب ٠َٔ٣ثؤكُخ اُزِٞس اُجواى.ٟ
ٝػِ ٠اُوؿْ ٖٓ إٔ ٓؾز ٟٞأُ٤ب ٙاُؼبّ ٖٓ اُجٌزو٣ب ػِٕٞ ٠هح اُؼلك اٌُُِِ ٠جٌزو٣ب هل ٣جل ٝأٗٚ
ُٓ ُٚ ٌ٤لُٕ ٍٞؾ ٠اال أٗ٣ ٚؼط ٠كٌوح ػٖ ًلبءح ػِٔ٤خ أُؼبُغخٝ ،ؽبُخ ٗظْ رٞى٣غ أُ٤ب.ٙ
ُٝزؤص٤واُؼلك اٌُُِِ ٠جٌزو٣ب ػِ ٠اُ٘غبػ ك ٠اٌُْق ػٖ ثٌزو٣ب اُوٝ ُٕٞٞاُز ٠ٛ ٠أؽل أكُخ اُزِٞس
ُٝضجٞد أ٤ٔٛز ٚثبَُ٘جخ ُلئبد ٖٓ أُغزٔغ ٓضَ اٛ٧لبٍ ً ،جبه اَُٖ ٘ٓٝقل ٠ٚأُ٘بػخ ُنُي أٛزْ
ثزول٣و.ٙ
ًْٝبكبد اُزِٞس اُجواى٣خ ٓضَ ثٌزو٣ب اُوٝ ُٕٞٞاُجٌزو٣ب اَُجؾ٤خ اُجواى٣خ ٣ؼزٔل اُ٘غبػ ك ٠اٌُْق
ػٜ٘ب ػِ ٠ارجبع اُطوم اُٖؾ٤ؾخ ك ٠اٌُْق ػٜ٘ب.
ٝال ٣زؤر ٠اُزو ْ٤٤اُٖؾ٤ؼ ُٖالؽ٤خ أُ٤بُ ٙالٍزٜالى ا٥كٓ ٠اال ثبرجبع اُطوم اُو٤بٍ٤خ ك ٠اٌُْق
ػٜ٘ب ٝرول٣و ػلكٛبٗٝ .ظوا ٤ٔٛ٧خ مُي كبٕ اُلٝهح اُؾبُ٤خ رٜزْ ثبُزوً٤ي ػِ ٠ر٤ٙٞؼ اُطوم
اُو٤بٍ٤خ ٝاالؽز٤بٛبد اُالىّ ٓواػبرٜب ُِؾٖ ٍٞػِ ٠اُ٘ز٤غخ اُٖؾ٤ؾخ٤ٍٝ .زْ اٍزؼواٗ اُطوم
أُقزِلخ أٌُٖٔ ارجبػٜب ٍَٖ٘ٝك ٠اُٜ٘ب٣خ اُ ٠أَٗت اُطوم أٌُٖٔ ارجبػٜب ٛجوب ُ٘ٞػ٤خ أُ٤بٙ
أُقزجوح ُزٞؽ٤ل ٛوم افزجبه ٓ٤ب ٙاُْوة ػَِٓ ٠ز ٟٞأُؼبَٓ أُوًي٣خ ٝاُزُٜ ٠ب كٝه اٍبٍ٠
ك ٠ػِٔ٤بد رو ْ٤٤اكاء ٓؾطبد أُؼبُغخ.
-1-
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
-2-
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
انفصم األٔل
البكتريا الهتيروتروفية ( العدد الكلى للبكتريا )
)Total Bacterial Count – Heterotrophic Plate Count (HPC
. 1يمذيخ:
اٍزؼَٔ ػلك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ك ٠أُ٤ب ٙهلٔ٣ب ٘ٓٝن ثلا٣خ االٛزٔبّ ثبُ٘ٞاؽ ٠اُٖؾ٤خ ك٠
ٓ٤ب ٙاُْوة ًلُ َ٤ػِٞٗ ٠ػ٤خ أُ٤بٝ . ٙثؼل مُي اٍزقلّ اُؼلك اٌُُِِ ٠جٌزو٣ب اُ ٠عبٗت ػلك
ثٌزو٣ب اُؤُ ُٕٞٞواهجخ ٗٞػ٤خ ٓ٤ب ٙاُْوةٝ .ك ٠اُٞال٣بد أُزؾلح االٓو٤ٌ٣خ رْ ٙٝغ اُطو٣وخ
اُو٤بٍ٤خ ُزؾل٣ل اُؼلك اٌُُِِ ٠جٌزو٣ب ثبٍزقلاّ ٛو٣وخ اُؼل ك ٠اٛ٧جبم Plate counts
٘ٓ procedureن ػبّ ٝ .)Prescott et al., 1950 ( 1898اٍزٔو اُؼَٔ ك ٠رط٣ٞو
اُطوم اُو٤بٍ٤خ ٌُِْق ػٖ ػلك اُجٌزو٣ب ُزظٜو ك ٠أٛ ٍٝجؼخ ُٔب ٣ؼوف ا ٕ٥ثبُطوم
اُو٤بٍ٤خ الفزجبه أُ٤بٝ ٙأُقِلبد اَُبئِخ Standard Methods for the Examination
of Water and Wastewater (1905).
ٛوم اُؼل ك ٠اٛ٧جبم Poured plateك ٠ثلا٣زٜب اٍزقلٓذ اُغ٤الر ٖ٤أُـنٝ ٟاُزؾٖ٤ٚ
ػ٘ل 20كهعخ ٓئ٣ٞخ ُِؾلبظ ػِٕ ٠الثخ اُغ٤الر ٝ .ٖ٤ثؼل اكفبٍ اٍزؼٔبٍ ا٥عبه ثل٣ال ًٔبكح
ِٖٓجخ ُج٤ئخ ر٘ٔ٤خ اُجٌزو٣ب أٌٖٓ اٍزقلاّ ؽواهح رؾ ٖ٤ٚأػِٓ 28 ٖٓ ٠ئ٣ٞخ.
اُطجؼخ اُضبٗ٤خ ٖٓ اُطوم اُو٤بٍ٤خ الفزجبه أُ٤بٝ ٙأُقِلبد اَُبئِخ ٝاُز ٠ظٜود ػبّ 1912
أكفِذ اُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل ٓ 37ئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 24بػخ ٛ٧جبم اُؼل ثبٍزقلاّ ث٤ئخ ا٥عبه أُـنٟ
ٌُٖٝ ، Nutrient agarأكفَ اُزؾٛ٧ ٖ٤ٚجبم اُؼل اُجٌز٤و ٟػ٘ل ٓ 20ئ٣ٞخ ُٔلح 48
ٍبػخ ٝثبٍزقلاّ ث٤ئخ آعبه اُغ٤الر.ٖ٤
اكفبٍ اُؼل اُجٌز٤و ٟػ٘ل ٓ 20ئ٣ٞخ اٍزٔو اُ ٠اُطجؼخ اُضبٗ٤خ ػْو ٖٓ اُطوم اُو٤بٍ٤خٌُٖٝ ،
اٍو٘ٓ ٜن اُطجؼخ اُضبُضخ ػْو ػبّ ٝ 1971اُ ٠اُطجؼخ اُقبَٓخ ػْو ٝاُز ٠ظٜود ػبّ
ٝ .1980ك ٠اُطجؼخ اَُبكٍخ ػْو ػبّ ٖٓ 1985اُطوم اُو٤بٍ٤خ أكفَ صبٗ٤خ ًؼبٓال
افز٤به٣ب اعواإ ٞٛٝ ٙاُؼل اُجٌز٤و ٟػ٘ل 20كهعخ ٓئ٣ٞخٝ .ك ٠اُؾو٤وخ ،اُطجؼخ اَُبكٍخ
ػْو ٖٓ اُطوم اُو٤بٍ٤خ أكفِذ رـ٤واد ػل٣لح كٛ ٠و٣وخ اُؼل ثبٛ٧جبم ثبكفبٍ ٛو٣وخ
-3-
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ )ٛٝ Membrane filter (MFو٣وخ اُلوك ػِ ٠اٛ٧جبم Spread plate
)ٝ ،(SPاٍزقلاّ اُج٤ئخ أُ٘قلٚخ كٓ ٠ؾزٞاٛب ٖٓ أُـن٣بد Low nutrient medium
ٓ R2Aغ اٍزقلاّ اُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل 30 ، 28 ،20كهعخ ٓئ٣ٞخ (Reasoner and
)ٓٝ Geldreich, 1979; 1985لح رؾٓ ٖ٤ٚقزِلخ ُزول٣و َٓز ٟٞاُؼل اٌُُِِ ٠جٌزو٣ب
اُٜز٤وٝروٝك٤خ ) ) HPCك ٠أُ٤ب.ٙ
ٝثؼل مُي رغلك االٛزٔبّ ثطوم اُؼلك اٌُُِِ ٠جٌزو٣ب ك٤ٓ ٠ب ٙاُْوة ٓغ االٛزٔبّ ثزوٞٗ ْ٤٤ػ٤خ
ٓ٤ب ٙاُْوة فالٍ ٗظبّ رٞى٣غ أُ٤بٛ .ٙن ٙاْٗ٧طخ أكد اُْٗ ٠ؤح ث٤ئبد عل٣لح ٝاٙبكخ ٛوم
اُلوك ك ٠اٛ٧جبم ٝ Spread plateأؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ Membrane filterاُ ٠اُطجؼخ
اَُبكٍخ ػْو ُِطوم اُو٤بٍ٤خ الفزجبه أُ٤بٝ ٙاآقِلبد اَُبئِخ ٝاُز ٠ظٜود ػبّ .1985
ٝك ٠اَُ٘ٞاد اُؾل٣ضخ أعو٣ذ ًض٤و ٖٓ اُلهاٍبد اُجؾض٤خ ٝاٍزؼِٔذ ٛوم ٝث٤ئبد رقزِق ػٖ
ٛو٣وخ اٛ٧جبم أُٖجٞثخ اُزوِ٤ل٣خ ٗٝ . Poured plate procedure .زبئظ ثؼ٘ اُلهاٍبد
رَججذ ك ٠اػبكح رو ْ٤٤اُطوم ٝأكد اُ ٠رـ٤٤و اٍْ اُطو٣وخ ٖٓ ٛو٣وخ ػل اٛ٧جبم اُو٤بٍ٤خ
” “Standard Plate Countاُ ٠ػل اٛ٧جبم اُز٤وٝروٝكHeterotrophic Plate " ٚ٤
. " Count, HPC
ػل اٛ٧جبم اُٜز٤وٝروكٜ٣ ٚ٤زْ ثؼل اُجٌزو٣ب اُٜٞائ٤خ ٝاُٜٞائ٤خ افز٤بها Aerobic and
facultative aerobic bacteriaأُزٞاعلح ك ٠أُ٤بٝ ٙاُوبكهح ػِ ٠اُ٘ٔ ٞػِٓ ٠وًجبد
ػ٣ٞٚخ ثَ٤طخ (ًوث٤ٛٞلهاد ،أؽٔبٗ أٓ٤٘٤خ ٝثجز٤لاد) أُزٞاعلح ك ٠ث٤ئخ أُيهػخٝ ،رؾذ
ظوٝف ٓؾلكح ُِزؾ ٖٓ ٖ٤ٚؽ٤ش اُٞهذ ٝكهعخ اُؾواهحٝ .فبُٔ ٗزبئظ اُلهاٍبد اُؾل٣ضخ
ٝاُزـ٤٤و كٛ ٠وم ػل اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ اُؼبٓخ ك٤ٓ ٠ب ٙاُْوة ٞٛرٞاكو افز٤بهاد أًضو
ٝرْغؼذ ٓؾطبد أُ٤ب ٙػِ ٠اٍزؼٔبٍ ٛن ٙاُطوم ًؤكاح ُِؾٖ ٍٞػِ ٠رلبٕ َ٤أك َٚػٖ
رؤص٤و ػِٔ٤بد ٓؼبُغخ أُ٤بٝ ٙاُزٞى٣غ ػِ ٠اُ٘ٞػ٤خ اُجٌزوُٞٞ٣ع٤خ ُٔ٤ب ٙاُْوة.
-4-
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
.2اطزؼًبالد ليبطبد ػذ األغجبق انٓزيزٔرزٔفيخ
Uses of Heterotrophic Plate Count Measurements
اُٜلف ٖٓ ٓؼبُغخ أُ٤ب ٞٛ ٙرؾو٤ن االٓلاك ثٔ٤ب٣ ٙزؾون كٜ٤ب ػٖ٘و آ٧بٕ ثبَُ٘جخ َُِٔزِٜي
ثبٍزؼٔبٍ ٍَِِخ ٖٓ ٝؽلاد أُؼبُغخ ُقل٘ َٓز٣ٞبد اُؼٌبهحٕ ٝأُِٞصبد أٌُ٤ب٣ٝخ
ٝأٌُ٤وٝث٤خٝ .ػِ ٠مُي كبٕ عٞكح ٗٞػ٤خ أُ٤ب ٙأُؼبُغخ ٣غت إٔ رجو ٠فالٍ اُزقيٖ٣
ٝاُزٞى٣غ اُ ٠أَُزِٜي.
ػل اٛ٧جبم اُٜز٤وٝروٝك٤خ ِ٤ٍٝ HPCخ ماد كبئلح ك:٠
ٓ واهجخ ًلبءح ػِٔ٤بد ٓؼبُغخ أُ٤بّ ،ٙبِٓخ اُزط٤ٜو.
اُؾٖ ٍٞػِ ٠رلبٕ َ٤اٙبك٤خ ػٖ َٓز٣ٞبد ػل اٛ٧جبم اُٜز٤وٝروٝك٤خ ٝاُز ٖٓ ٠أٌُٖٔ
إٔ رزلافَ ٓغ اٌُْق ػٖ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞك ٠ػ٘٤بد أُ٤ب ٙاُز ٠رقزجو ُٔواهجخ اُزطبثن ٓغ
أُٞإلبد اُو٤بٍ٤خ (. ) U.S. EPA, 1975
رو ْ٤٤اُزـ٤واد كٞٗ ٠ػ٤خ أُ٤ب ٙاُٜ٘بئ٤خ فالٍ اُزٞى٣غ ٝاُزقيٗٝ ،ٖ٣ظبكخ ٗظبّ اُزٞى٣غ.
رو ْ٤٤اُ٘ٔ ٞأٌُ٤وٝث ٠ػِ ٠أُٞاك أَُزؼِٔخ ك ٠اْٗبء ػِٔ٤بد ٓؼبُغخ ٓ٤ب ٙاُْوة ٗٝظْ
اُزٞى٣غ.
ه٤بً اٍزؼبكح اُ٘ٔ ٞاُجٌز٤و Regrowth ٟأٓ ٝقبٛو ٓب ثؼل اُ٘ٔ After growth ٞك٠
ٓ٤ب ٙاُْوة أُؼبُغخ.
ٓ واهجخ اُزـ٤واد ك ٠أُغزٔغ أٌُ٤وٝث ٠ػوت اُزؼل٣الد ك ٠أُؼبُغخ ٓضَ اُزـ٤و كٞٗ ٠ػ٤خ
أُطٜو أَُزقلّ.
-5-
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
.3اػزجبراد يُٓغيخ Methodology Considerations
رو٘٤خ اٛ٧جبم أُٖجٞثخ )ٕٝ Pour plate technique (PPق ثٞاٍطخ ًٞؿ ػبّ
ً (Koch, 1912; McNew, 1938 (1883طو٣وخ ُِؾٖ ٍٞػِٓ ٠يهػخ ٗو٤خ ٖٓ
اُجٌزو٣ب ٖٓ فال٣ب ٓلوكح .ك ٠اُٞال٣بد أُزؾلح ،اٍزؼِٔذ ٛو٣وخ اٛ٧جبم أُٖجٞثخ ٓغ
اُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل 35كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخ ُؼل اُجٌزو٣ب ك٤ٓ ٠ب ٙاُْوة ُْ .رَزؼَٔ ٛو٣وخ
اُلوك ػِ ٠اُطجبم Spread plateثٌضوح ٜٗ٧ب ًبٗذ ٛو٣وخ ؿ٤و ه٤بٍ٤خ ؽز ٠ظٜٞهٛب ك٠
اُطجؼخ اَُبكٍخ ػْو ُِطوم اُو٤بٍ٤خ ػبّ ٛ . ) APHA, 1985) 1985و٣وخ أؿْ٤خ
اُزوّ٤ؼ ْٗ )Taylor and Geldreich, 1979( MFؤد ُالٓلاك ثٔوٗٝخ أًجو ك ٠ػل
اُجٌزو٣ب ك٤ٓ ٠ب ٙاُْوة أُؼبُغخ .كبٜٗب رَٔؼ ثزؾِ َ٤ؽغْ ٖٓ اُؼ٘٤خ أًجو ٖٓ ٝاؽل َِٓ،
ٝاُن ٞٛ ٟػبَٓ ٣ؾل ٖٓ اٍزؼٔبٍ ٛوم اٛ٧جبم أُٖجٞثخ ٝ Poured platesاٛ٧جبم
أُيهٝع ػٍِ ٠طؾٜب ٓٝ .Surfaceغ مُي كَ٤ُ ٠ٜذ ٛو٣وخ ه٤بٍ٤خ ؽز ٠اُطجؼخ اَُبكٍخ
ػْو ٖٓ اُطوم اُو٤بٍ٤خ ٝاُز ٠ظٜود ػبّ ٝ .1985كٔ٤ب ٤ٔٓ ٠ِ٣ياد ٝػٞ٤ة ًَ ٛو٣وخ.
. 1 . 3األغجبق انًصجٕثخ Poured Plates
ٛو٣وخ اٛ٧جبم أُٖجٞثخ ٖٓله هٞرٜب ٞٛثَبٛخ ٍُٜٞٝخ االٍزؼٔبٍٗ ٖٓٝ .بؽ٤خ صبٗ٤خ ،كبٕ
ُٜب ػوجزبٕ ٣غؼالٜٗب ٛو٣وخ ٓوؿٞثخ ثلهعخ أهَ ُؼل اُجٌزو٣ب ك ٠أُبء.
أٔنٓب أٌ انجكززيب فٗ انجيئبد انًبئيخ يُخفعخ انًغذيبد رؼزجز ثصفخ ػبيخ يعزٔرح
فظيٕنٕعيب ٔ . Physiologically stressedثبنزبنٗ ظٓز أَٓب حظبطخ نعزر صبَٕٖ
يزظجت ػٍ انحزارح انُبشئخ ػٍ صٓز اآلعبر ٔحفظّ ػُذ درعخ حزارح يب ثيٍ 46 – 43
يئٕيخ ) . (Stapert et al., 1962; Klein and Wu, 1974كِول أظٜو (Klein )1974
and Wuإٔ أػلاك اُجٌزو٣ب أَُزؼبكح ٗ Recoveredز٤غخ اُزؼوٗ ُِج٤ئخ أُٖٜ٘وح
ٝأُؾزلع ثٜب ػِ ٠كهعخ 45كهعخ ٓئ٣ٞخ ٗز٤غخ ٕت اُج٤ئخ ػِٜ٤ب كٛ ٠و٣وخ اٛ٧جبم
أُٖجٞثخ روَ ػٖ ٓضِ٤زٜب اُ٘برغخ ػٖ اٍزؼٔبٍ ٛو٣وخ اٛ٧جبم أُ٘ضٞهحٝ .ػِ ٠مُي اٍز٘زظ إٔ
ٛو٣وخ اٛ٧جبم أُٖجٞثخ PPؿ٤و ٓ٘بٍجخ ُؼل اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ أُٚوٝهح ٗز٤غخ
رٞاعلٛب ك ٠اُج٤ئخ أُبئ٤خ اُلو٤وح ك ٠أُٞاك أُـن٣خ أ ٝاُؾَبٍخ ُِؾواهح ( ٓ 45ئ٣ٞخ).
ً٘ٝز٤غخ ُٜناٝ ،ػِ ٠ا٧هَ عيئ٤ب ،كبٕ ٛو٣وخ اٛ٧جبم أُٖجٞثخ PPثٖلخ كائٔخ ر٘زظ أػلاك
ٖٓ اُجٌزو٣ب أهَ ٖٓ رِي اُزبرغخ ػٖ اٍزؼٔبٍ ٛو٣ن اٛ٧جبم أُ٘ضٞهح (اُيهع ػِ ٠اَُطؼ)
. SP
-6-
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
(Buck & Cleverdon, 1960; Van Soestbergen & Lee, 1969; Means et
(al., 1981; Taylor et al., 1983; Reasoner & Geldreich, 1985).
ًٝنُي كبٕ اُجٌزو٣ب رٌٓ ٕٞـٔٞهح ك ٠ا٥عبه (رؾذ ٍطؾ٤خ) كٛ ٠و٣وخ ٝ PPأَُزؼٔواد
رٔ َ٤اُ ٠اُٖـو ٝال رظٜو اُقٖبئٔ أُٞهكُٞٞع٤خ ٝاُز ٠هثٔب رٌ ٕٞماد كبئلح ك٠
اُزٖ٘٤ق.
انؼمجخ انضبَيخ ْٕ أٌ ألصٗ حغى نهؼيُخ يكٍ اخزجبرِ ثبطزخذاو غزيمخ ٔ PPاحذ يهمْٔ ،ذا
يحذ يٍ فبئذح انطزيمخ ػُذيب يكٌٕ انًطهٕة رحهيم حغى أكجز.
. 2 . 3غزيمخ انفزد أٔ َضز األغجبق )Spread plate (SP
ٛو٣وخ َ٤ُ SPذ أًضو ٕؼٞثخ ٖٓ ٛو٣وخ ٌُٖٝ ، PPرؾزبط اُ ٠رؾ٤ٚو اٛ٧جبم كٝ ٠هذ
ٍبثن ٝاٍزؼٔبٍ ٍبم ىعبع٤خ ٓض٘٤خ ٓؼؤخ ُلوك ٝرٞى٣غ اُؼ٘٤خ ػٍِ ٠طؼ ا٥عبهٝ .ثَجت رِي
االؽز٤بعبد ،كبٕ اُطو٣وخ رجل ٝثبَُ٘جخ ُِجؼ٘ أٜٗب ِٓٔخ أًضو ٖٓ ٛو٣وخ ٝ . PPأٚ٣بٕ٧ ،
اٛ٧جبم ِ٣يّ رؾ٤ٚوٛب ٓولٓب ،كبٜٗب ِ٣يّ كؾٖٜب ُٞعٞك رِٞس هجَ ٙٝغ اُؼ٘٤خ ٝىهػٜب؛
ِ٣ٝيّ ػلّ اٍزؼٔبُٜب ػ٘لٓب رًٌ ٕٞض٤وح اُوٞٛثخ ،أ ٝاما ًبٗذ هل كولد ًٔ٤خ ًج٤وح ٖٓ
اُوٞٛثخ ُٝ . too dehydratedول أظٜود أثؾبس ( ) Clark , 1971إٔ اٛ٧جبم اَُبثن
رغل٤لٜب ٝاُز ٠رلول ٓب ث 4 – 3 ٖ٤عواّ ٖٓ َِٓ 15 /اُج٤ئخ ك ٠اُطجن رَٔؼ ثبٍزقلاّ ؽغْ
ُِزِو٤ؼ َٖ٣اُ َِٓ 1 ٠ك ٕٝرؤص٤و ػِ ٠اٍزقالٓ اُجٌزو٣بٓٝ .غ مُي ،كبٕ اُؾغْ اُنٖ٘٣ ٟؼ
ثُِ ٚيهع .َِٓ 0.1 – 0.5 ٞٛ
ٛو٣وخ ُ SPزول٣و اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ رٞكو ظوٝف أًضو َٓبػلح ػِ ٞٔٗ ٠اُجٌزو٣ب
أُزٞاعلح ك ٠أُبء ػٖ ٛو٣وخ ٝ .PPث٘بء ػِ ٠مُئً ،ب ظٜو أػال ،ٙكبٕ SPرؼط ٠أػلاك
أػِ ٖٓ ٠أَُزؼٔواد ػٖ ٛو٣وخ ٛٝ .PPبُٔب إٔ اُجٌزو٣ب ك ٠اُؼ٘٤خ ريهع ػٍِ ٠طؼ ث٤ئخ
ا٥عبه ،كبٕ ٗٔٛٞب ال ٓ ٌٕٞ٣و٤ل ثٌ ٕٞا٥عبه ٓؾ٤طب ثٜبٝ .ػِ ٠مُي ،كبٗ ٖٓ ٚاَُ َٜإٔ
٣الؽع اُلوٝم ك ٌَّ ٠أَُزؼٔوح ،اُوٞاّ ،اُٖجـبد ،اُؾغْٝ ،اُقٖبئٔ ا٧فو.ٟ
ٝك ٠كهاٍبد ػل٣لح هٞهٗذ كهخ ٛو٣وخ SPثطو٣وخ ًٝ PPبٗذ اُ٘زبئظ ٓقزِطخ ،كل ٠ؽ ٖ٤إٔ
( ) Van Soestbergen and Lee, 1969هل مًو إٔ ٛو٣وخ ٠ٛ PPأًضو كهخ ػٖ ٛو٣وخ
، SPمًو ( )Taylor et al., 1983اُؼٌٌ ٌُٖٝ .ثبُٔوبهٗخ كبٗ٣ ٚظٜو إٔ ٛو٣وخ SP
-7-
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٖٓ ؽ٤ش اُلهخ ال روَ ػٖ ٛو٣وخ ٝ . PPرْزوى اُطو٣وزبٕ كٓ ٠ؾلٝك٣خ ؽغْ اُؼ٘٤خ أٌُٖٔ
افزجبه( ٙال ري٣ل ػٖ َِٓ 1كًِ ٠زب اُؾبُزبٕ).
-8-
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 3 . 3أغشيخ انززشيح Membrane Filter
ٝهٝك ٛو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ ًطو٣وخ ُزول٣و ػل اُٜز٤وٝروك٤ي ثٌزو٣ب HPCهلٓذ ٓوٗٝخ
ًج٤وح اُٛ ٠و٣وخ أٛجبم اُؼل ٤ُٔ Plate count procedureب ٙاُْوة ٝمُي ٖٓ فالٍ
أَُبػ ثزؾِ َ٤ؽغْ ٖٓ اُؼ٘٤خ أًجو ٖٓ ٛ .َِٓ 1ن ٙاُطو٣وخ رَٔؼ ثؼل روً٤ياد ٓ٘قلٚخ ٖٓ
اُجٌزو٣ب ك٤ٓ ٠ب ٙاُْوة اُٜ٘بئ٤خ ٓٝ Finished drinking waterؾلٝك٣زٜب رؼزٔل ػِ٠
ًٔ٤خ أُ٤ب ٙأٌُٖٔ ٓوٝهٛب ٖٓ فالٍ اُـْبء ك ٕٝاَٗلاك صوٞث ،ٚأ ٝروٍ٤ت ًض٤و ٖٓ أُٞاك
ػٍِ ٠طؼ اُـْبء ٝاُز ٠رزلافَ ٓغ آٌبٗ٤خ ٗٔ ٞاُجٌزو٣ب ٍٕٞٝٝاُـناء اُٜ٤ب ٖٓ فالٍ
اُضوٞة . Bores
ٓوبهٗخ اُؼل اُجٌز٤و ٟأُزؾَٖ ػِ ٚ٤ثبٍزقلاّ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ ثزِي أُزؾَٖ ػِٜ٤ب ثطو٣وخ
PPأظٜود إٔ ٛو٣وخ ا٧ؿْ٤خ رؼطٗ ٠زبئظ َٓب٣ٝخ أ ٝأًضو ٖٓ ٛو٣وخ ( PPعل. ) 1 ٍٝ
ٛٝنا اُغل٣ ٍٝؼطِٓ ٠قٔ ُ٘زبئظ اٍزؼٔبٍ ٛوم MF, PP, SPفالٍ كهاٍبد ٓقزِلخ
ٝثبٍزؼٔبٍ ٗلٌ اُج٤ئخ ٝ .اَُ٘ت ٓب ثٗ ٖ٤زبئظ SP and MFاُٗ ٠زبئظ ،PPأٗ ٝزبئظ MF
to SPرظٜو اٌُلبءح اَُ٘ج٤خ ُِطوم.
-9-
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
- 10 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٝكٓ ٠وبهٗبد ٘ٛ ، MF to SPبى ٗزبئظ ٓقزِطخ ٕ٧افز٤به اُج٤ئخ ٣ئصو ثْلح ػِ٠
أػلاك اُجٌزو٣ب ثبالٙبكخ اُ ٠ؽواهح اُزؾٝ ٖ٤ٚؽزٖٓ ٠له أُ٤بُٝ .ٙول ظٜو ٖٓ
كهاٍبد ) )LeChevallier et al 1980إٔ ٛو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ ٝثبٍزؼٔبٍ
ث٤ئخ ٝ( m-SPCاُز ٠رَٔ ٠اً )m-HPC ٕ٥بٗذ أكٛ ٖٓ َٚو٣وخ PP
الٍزقالٓ اُجٌزو٣ب ٖٓ ٓ٤بّ ٙوة ٓؼبُغخ ثبٌُِٞه٘ٛ ٌ٤ُ ٌُٖٝ ،بى افزالف
ٓؼ٘ ٟٞث ٖ٤اُطو٣وز ٖ٤ػ٘ل رؾِ َ٤أُ٤ب ٙاُقبّٝ .كٓ ٠وبهٗخ ٛو٣وخ PPثبٍزقلاّ
ث٤ئخ ػل اٛ٧جبم ٛٝ Plate count mediumو٣وخ Reasoner and
)ٝ Geldreich (1985عل أٗ ٚػ٘ل 28أ 20 ٝكهعخ ٓئ٣ٞخ ًؾواهح رؾ ٖ٤ٚكبٕ
ٛو٣ن أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ ٝثبٍزؼٔبٍ ث٤ئخ m-HPCأ R2A ٝرؾَٖ ػِٗ ٠زبئظ
PPاُو٤بٍ٤خ ك ٠رؾِ٤ٓ َ٤ب ٙاُْوة. الػلاك اُجٌزو٣ب أػِ ٖٓ ٠اٍزقلاّ ٛو٣وخ
ٝػ٘ل كهعخ ٓ 35ئ٣ٞخ ًؾواهح رؾً ، ٖ٤ٚبٗذ ٗزبئظ َٓ m-HPCب٣ٝخ أ ٝأًجو
هِ٤ال ٖٓ ٗزبئظ ٛو٣وخ ُٝ . PPول هبهٕ )ٛ Fujiok et al., (1986و٣وزSPC ٠
ٝ, MFثبٍزقلاّ ث٤ئزُ m-HPC agar and R2A agar ٠ؼل اُجٌزو٣ب ك٤ٓ ٠بٙ
اُْوة ٝٝعلٝا إٔ ٛو٣وخ PPرَزقِٔ كو ٖٓ % 80 ٜاُجٌزو٣ب ك ٠ؽ ٖ٤إٔ
m-HPC ٛو٣وخ MFرَزقِٔ ٖٓ %100اُجٌزو٣ب ثبٍزؼٔبٍ أ ٖٓ ٟث٤ئز٠
. or R2A
ٝأعو٣ذ كهاٍبد ٓوبهٗخ ػل٣لح ٌُٖٝ ،كٝه اُج٤ئخ أَُزقلٓخ ُزول٣و ػلك اُجٌزو٣ب
اُٜز٤وٝروٝك٤خ ٣غت إٔ ٣ئفن ك ٠االػزجبه ػ٘ل أُوبهٗخ ٝ .اُغل ٍٝاُزبُ٠
(علٙٞ٣ )2 ٍٝؼ أُوبهٗخ ُ٘زبئظ رول٣و اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ك٤ٓ ٠ب ٙاُْوة
ثبٍزقلاّ ث٤ئبد ٓزؼلكح ٛٝوم ٓقزِلخ .
- 11 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
- 12 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 4انجيئبد ٔدرعخ حزارح ٔسيٍ انزحعيٍ
اُطجؼبد ا ٖٓ ٠ُٝ٧اُطوم اُو٤بٍ٤خ هلٓذ ُزول٣و اُؼل ك ٠اٛ٧جبم Plate countكهعز٠
ؽواهح ُِزؾٔٛ ٖ٤ٚب ٓ 20ئ٣ٞخ (اُؼل ػ٘ل ؽواهح اُـوكخ) ٓ 37 ٝئ٣ٞخ (اُؼل ػ٘ل ؽواهح
اُغَْ) .ػل اٛ٧جن ػ٘ل ٓ 37ئ٣ٞخ ٣ؼزول أٗ٣ ٚؼطٓ ٠ئّو ػٖ ٝعٞك اُجٌزو٣ب ٍو٣ؼخ اُ٘ٔٞ
ٝرٔ َ٤اُ ٠أٜٗب ر٘زُِٔٞ٘ ٠ػ٤بد أُو٤ٙخ ٝاُز ٠هثٔب رزٞاعل ك ٠ؽبُخ اُزِٞس ثٔقبكبد
اُٖوف اُٖؾ .٠ك ٠ؽ ٖ٤إٔ ػل اٛ٧جبم Plate countػ٘ل ٓ 20ئ٣ٞخ اٍزؼَٔ ُؼل
اُجٌزو٣ب اُز ٠رٔ َ٤اُ ٠اُْ٘ؤح اُجط٤ئخ .اٍزؼٔبٍ كهعخ ؽواهح ٓ 37ئ٣ٞخ ُِزؾ ٖ٤ٚك ٠اُٞال٣بد
أُزؾلح ُِزؾٝ ٖ٤ٚعل أٜٗب ك ٠اُجلا٣خ رْ٤و اُ ٠اُؼلك ػ٘ل ؽواهح اُغَْ ٌُٖٝ ،فلٚذ
كهعزبٕ.
ٝك ٠ػبّ ،1970أٛزْ ثؼل ٝرٖ٘٤ق اُجٌزو٣ب اُز ٠ال ر٘زٔ ٠اُ ٠ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞكٖٓ ٠بكه
أُ٤ب ٙكْ٘ؤد ث٤ئخ عل٣لح ٝأػ٤ل رو ْ٤٤ؽواهح اُزؾٛٝ ٖ٤ٚنا أك ٟاُ ٠اُزـ٤٤و ك ٠االٍْ ٖٓ
SPCاُ HPC ٠ك ٠اُطجؼخ اَُبكٍخ ػْو ٖٓ اُطوم اُو٤بٍ٤خ.
ٝثبكهاى اُؾبعخ ُطو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ ُزول٣و اُجٌزو٣ب ك٤ٓ ٠بٗ ٙظبّ اُزٞى٣غ Distribution
systemأك ٟاُْٗ ٠ؤح ث٤ئخ m-HPC (m-SPC) agarثٞاٍطخ Taylor and
)ٛ .Geldreich (1979ن ٙاُج٤ئخ ْٗؤد ُزؼطٗ ٠زبئظ ٓٔبصِخ ُج٤ئخ ( )SPC agarأ ٝث٤ئخ
ًِٝ yeast extract agar.زب اُج٤ئزبٕ ٓنًٞهربٕ ك٠ Tryptone glucose
اُطوم اُو٤بٍ٤خ ُزول٣و اُؼل ك ٠اٛ٧جبم Plate countػ٘ل ٓ 35ئ٣ٞخ٣ٝ .زٚؼ إٔ ث٤ئخ m-
ٓ HPCغ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ َٔ٣ؾبٕ ثبُٔوٗٝخ ك ٠ؽغْ اُؼ٘٤خ أٌُٖٔ افزجبهٛب ٝثبُزبُ ٠ى٣بكح
ؽلٝك اُطو٣وخ ك ٠اٌُْق ػٖ اُجٌزو٣ب.
ٝثبفزٖبه كبٕ االٛزٔبّ ٗؾ ٞرؼظ ْ٤اٍزقالٓ اُجٌزو٣ب ٝمُي ُٙٞغ ٕٞهح ُِجٌزو٣ب أُزٞهغ
رٞاعلٛب ك٤ٓ ٠ب ٙاُْوة أُؼبُغخ اك ٟاُْٗ ٠ؤح ث٤ئخ ٝ R2Aاُزٙٝ ٠غ ٌٓٗٞبرٜب
)ٝ . Reasoner and Geldreich ( 1979, 1985ػِ ٠ػٌٌ ث٤ئخ ػل اٛ٧جبم اُو٤بٍ٤خ
ٝ Standard plate count mediaث٤ئخ ، m-HPCث٤ئخ ٠ٛ R2Aث٤ئخ ٓ٘قلٚخ ك٠
ٓؾزٞاٛب ٖٓ أُـن٣بد ٝمُي ثبَُ٘جخ ُزوً٤ي ًَ ٌٌٓٗٞٓ ٖٓ ٕٞبرٜب ًٝنُي أُؾز ٟٞاٌُِ،٠
ٌُٖٝثٜب ٌٓٗٞبد ًض٤وح ٓقزِلخ ٖٓ أُـن٣بدٝ .ثبٍزؼٔبٍ اُؾواهح اُو٤بٍ٤خ ( ٓ 35ئ٣ٞخ)
ُِزؾُٔ ٖ٤ٚوبهٗخ HPCاُ٘برظ ػِ ٠اٛ٧جبم أُ٘ضٞهح ٝ MF ، SPثبٍزقلاّ ث٤ئخ R2A
ثنُي اُ٘برظ ثطو٣وخ ٛٝ ، PPو٣وخ ،m-HPC MFكبٕ ث٤ئخ ٗ R2Aزظ ػٜ٘ب أػلاك أًجو ػٖ
مُي أُزؾَٖ ػِ٤خ ثبٍزقلاّ اُج٤ئبد ا٧فوٓ ٍٞٛ .ٟلح اُزؾٛ ٖ٤ٚبّ ثبَُ٘جخ ُج٤ئخ R2A؛
- 13 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ثَجت ٓؾزٞاٛب ٖٓ اُزوً٤ياد أُ٘قلٚخ ٖٓ أُـن٣بد ،اُجٌزو٣ب ك٤ٓ ٠ب ٙاُْوة رٔ َ٤اُ٠
اُْ٘ٞء أًضو ثطئب ٝاُزؾُٔ ٖ٤ٚلح 7 – 5أ٣بّ ػ٘ل 20أ 28 ٝكهعخ ٓئ٣ٞخ رظٜو أػِ ٠أػلاك
ٖٓ اُجٌزو٣ب ػِ ٠رِي اُج٤ئخ.
ٌَّ ٙٞ٣ 1ؼ اُلوٝم كٗ ٠زبئظ HPCأُزؾَٖ ػِٜ٤ب ثبٍزقلاّ ٛو٣وزٝ SP , MF ٠ث٤ئخ
R2A, m-HPC , standard method plate count (SMA) agarػ٘ل ٝ ،28 ،20
35كهعخ ٓئ٣ٞخ ٝرؾُٔ ٖ٤ٚلح ٖٓ 2اُ.ّٞ٣ 14 ٠
٣ٝظٜوٓ٘ ٚإٔ اُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل 35كهعخ ٓئ٣ٞخ أهَ ٖٓ أ 28 ٖٓ ٟأ 20 ٝكهعخ ٓئ٣ٞخ ثٖوف
اُ٘ظو ػٖ اُج٤ئخ أَُزقلٓخ.
- 14 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اٍزؼِٔذ ث٤ئخ ُ R2Aؼل اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ كٞٗ ٠ػ٤بد ٓقزِلخ ٖٓ ٓ٤ب ٙاُْوة ِّٔذ
ٓجب ٙآثبه (٤ٓ ،)Stetzenbach et al, 1986بٗ ٙبرغخ ػٖ ٓؼبُغخ ػ٘ل ٗوطخ االٍزؼٔبٍ
ثبٌُوث ٕٞأُْ٘٤ٓ ،)Reasoner et al., 1987( ٜبٓ ٙؼبُغخ ثبُز٣ٜٞخ الىاُخ ًٔ٤ب٣ٝبد
ٓزطب٣وح (ُ ،)Fronk-Leist and Love, 1984ؼل اُجٌزو٣ب أُٖبؽجخ ٌُِوث ٕٞأُْٖ٘ٓ ٜ
ٓ٤ب ٙاُْوة (ٝ ،(Camper et al., 1986الفزجبه رِق أؿْ٤خ اُز٘بٙؼ اُؼٌَ٠
- 15 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
( .)Ridgway et al., 1983, 1984رؤص٤و ؽواهح اُزؾٝ ٖ٤ٚعل أٜٗب ٛبٓخ علا ُِؾٍٖٞ
ػِ ٠أهٖ ٠أػلاك ٖٓ اُجٌزو٣ب ثبٍزؼٔبٍ أ ٟث٤ئخ .
- 16 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
عل٣ 3 ٍٝظٜو ٗزبئظ كهاٍبد ػل٣لح٣ ،ظٜو ٜٓ٘ب رؤص٤و كزوح اُزؾ ،ٖ٤ٚاالفزالف ث ٖ٤اُج٤ئبد
ٝؽواهح اُزؾ ٖ٤ٚػِٗ ٠زبئظ ػل اُجٌزو٣بٝ .ثٖلخ ػبٓخ ،اٛبُخ كزوح اُزؾٖ٣ ٖ٤ٚبؽجٜب ى٣بكح
ك ٠أػلاك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ.
يٍ دراطخ ) Reasoner and Geldreich (1985ظٓز أٌ كم انجيئبد انًظزخذيخ
أػطذ ألم أػذاد يٍ انجكززيب ػُذ انزحعيٍ ػهٗ 35يئٕيخٝ ،ثٖوف اُ٘ظو ػٖ ٓ ٍٞٛلح
اُزؾ ٖ٤ٚأ ٝاُطو٣وخ أَُزقلٓخ ( ٌَّ ٝ 1علٝٝ .)3 ٍٝعل إٔ اُزؾ ٖ٤ٚػِ ٠كهعخ 20
ٓئ٣ٞخ أػط ٠أػِ ٠ا٧ػلاك ػِ ًَ ٠اُج٤ئبد ػ٘لٓب ٛبُذ ٓلح اُزؾ ٖ٤ٚاُ .ّٞ٣ 14 – 12 ٠اال
أٌ انؼذد ػُذ 28يئٕيخ كبٌ أػهٗ ػٍ انؼذد ػهٗ 22درعخ يئٕيخ يٍ انيٕو انضبَٗ انٗ
انيٕو انظبدصٔ ،نًؼظى األغزاض فبٌ 28درعخ يئٕيخ ظٓز أَٓب ْٗ أفعم حزارِ
نهزحعيٍ ػهيٓبٝ .أ٣ل مُي )ٝ Lombardo et al., (1986مًو إٔ أك َٚث٤ئخ R2A ٠ٛ
ٓغ اُزؾ ٖ٤ٚػِ 28 ٠كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح 7أ٣بّ مُي ثبَُ٘جخ ُزؾِ٤ٓ َ٤ب ٙاُْوة.
ٝك ٠اٗغِزوا ،كبٕ اُطو٣وخ اُو٤بٍ٤خ ُؼل اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ PP ٠ٛثبٍزؼٔبٍ ث٤ئخ آعبه
َٓزقِٔ اُقٔ٤وح )ٝ Yeast extract agar (YEAاُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل ٓ 22 – 20ئ٣ٞخ ُٔلح 3
أ٣بّٝ .هبهٕ ) Gibbs and Hayes (1988ث٤ئز R2A, YEA ٠ثبٍزقلاّ ٛو٣وزPP ٠
ٓ and SPغ اُزؾُٔ ٖ٤ٚلح 7 ، 3أ٣بّ ُؼل اُجٌزو٣ب ك ٠ػ٘٤بد ٖٓ ٓ٤ب ٙاُْوةٝ .رِقٖذ
اُ٘زبئظ ك ٠اُزبُ:٠
ثٔوبهٗخ اُؼل ثؼل 3أ٣بّ ث٘ظ٤و ٙثؼل 7أ٣بّ رؾٝ ٖ٤ٚعل إٔ ث٤ئخ R2Aأػطذ 4
أٙؼبف أػِ ٠ك ٠اُؼلك ػ٘ل 3أ٣بّ 8 ،أٙؼبف أػِ ٠ك ٠اُؼل ػ٘ل 7أ٣بّ ٖٓ ٗظ٤وٛب
ث٤ئخ ,YEA
ٛ و٣وخ SPأػطذ 7أٙؼبف ٓب أػطزٛ ٚو٣وخ PPػ٘ل ًال ٖٓ 7 ، 3أ٣بّ,
أػطذ ث٤ئخ R2Aثطو٣وخ ٙ 27 ، 93 SPؼق ٓب ظٜو ػِ ٠ث٤ئخ YEAثطو٣وز٠
SP ٝ PPػِ ٠اُزور٤ت.
اٍزقلاّ R2Aثطو٣وخ ٓ SPغ اُزؾُٔ ٖ٤ٚلح 7أ٣بّ أػطذ أػلاك ٙ 520ؼق أػِ٠
ٓٔب ظٜو ػِ ٠ث٤ئخ ٝ YEAثبٍزقلاّ ٝ PPاُزؾ 3 ٖ٤ٚأ٣بّ.
- 17 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ك ٠اُٜ٘ب٣خ ر َٕٞاُ ٠االٍز٘زبط إٔ ٛو٣وخ االفزجبه ك ٠اٗغِزوا رؼط ٠أػلاك هِِ٤خ علا ٓٔب هل
٣قَ ثوٞاػل اُٖؾخ اُؼبٓخ ٝاُز ٠رورج ٜثؤػلاك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝرو٣ٝخ كٖٓ ٠بكه أُ٤ب٣ٝ ٙغت
ٓواعؼخ اُطو٣وخ أُزجؼخ.
ٝػِ ٠مُي كٜ٘بى اكُخ ًض٤وح ٖٓ اُؼل٣ل ٖٓ اُلهاٍبد رو ٍٞإٔ ٛو٣وخ ٝ PPاُج٤ئخ اُـ٘٤خ
ٝاُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل ٓ 35ئ٣ٞخ ُٔلح هٖ٤وح رئك ٟاُ ٠فل٘ أػلاك اُجٌزو٣ب اُز ٠هثٔب رزٞاعل ك٠
ٓ٤ب ٙاُْوةٛٝ .ن ٙأُغٔٞػخ ٖٓ اُظوٝف رَٔؼ كوُ ٜغيئ٤خ اُجٌزو٣ب ٍو٣ؼخ اُ٘ٔ ٞثبُظٜٞه
ٝاُز ٠هثٔب ٓ ٌٕٞ٣وعؼٜب اُ ٠رِٞس ثٔقِلبد اُٖوف اُٖؾ٘ٛٝ .٠بى عيئ٤خ ًج٤وح ٖٓ
اُجٌزو٣ب ر٘بٍجٜب ٛو٣وخ SPأٓ MF ٝغ ث٤ئخ رؾز ٟٞػِٞٓ ٠اك ٓـن٣خ ٓزؼلكح ٝثزوً٤ياد
ٓ٘قلٚخٓ ،غ اٍزقلاّ ؽواهح رؾ٘ٓ ٖ٤ٚقلٚخ ُٔٝلح أٍ 72 ٖٓ ٍٞٛبػخ٘ٛٝ .بى ؽبالد
ر٘غؼ كٜ٤ب اُج٤ئبد ػبُ٤خ اُزـن٣خ ٓغ اٛبُخ كزوح اُزؾ.ٖ٤ٚ
ٝال رٞعل ٛو٣وخ ٝال ظوٝف رَٔؼ ثبُؾٖ ٍٞػِ ٠ػلك ًَ اُجٌزو٣ب اُز ٠هثٔب رزٞاعل ك٠
أُ٤بٝ )Buck, 1979( ٙػِ ٠مُي كٜ٘بى االفز٤به ُِطو٣وخ ٝاُج٤ئخ ٣ٝغت اُزوٛ ْ٤٤جوب ُ٘ٞػ٤خ
أُ٤ب ٙاُز ٠ؿبُجب ٓب ٣زْ رؾِِٜ٤ب هجَ اُ ٍٕٞٞاُ ٠هواهُٝ .ول مًود ػجبهح ػٖ Goulder
)٣ (1976و ٍٞكٜ٤ب " ػِ ٠اُوؿْ ٖٓ ػل اٛ٧جبم ٔ٣ضَ ك ٠أؽَٖ اُظوٝف عيء ٕـ٤و ٖٓ
ًَ اُجٌزو٣ب كبٗ ٖٓ ٚا٧ك َٚاٍزؼٔبٍ اُج٤ئخ اُز ٠رؼط ٠أػِ ٠ا٧ػلاك ٕ٧أ ٟى٣بكح ك٠
اُغي٣ئ٤خ اُز٣ ٠زْ اؽٖبئٜب ٣ي٣ل ٖٓ ؽَبٍ٤خ اُطو٣وخ ٝاُز ٠رزقن ًِ٤ٍٞخ ُزول٣و ؽغْ اُزـ٤٤و
ك ٠اُ٘ٞػ٤خ أٌُ٤وٝثُٞٞ٤ع٤خ"ٛ .ن ٙأُوُٞخ رؼزجو ٓ٘بٍجخ ُِ٘ٞػ٤خ اُجٌزوُٞٞ٣ع٤خ ُٔ٤ب ٙاُْوة.
.5اطزخذاو يزالجخ انجكززيب انٓزيزٔرزٔفيخ
. 1 .5ػًهيبد انًؼبنغخ
ٝاؽل ٖٓ أثَ ٜاالٍزقلآبد ُؼلك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وروٝك٤خ ٓ ٞٛواهجخ االٗقلبٗ اُن٣ ٟؾلس ك٠
اُؾَٔ اُجٌز٤و٤ُِٔ ٟب ٙفالٍ ٓوٝهٛب ػِٓ ٠واؽَ ٓؼبُغخ ٓ٤ب ٙاُْوةٝ .ك ٠ؽ ٖ٤أٗ٘ٛ ٚبى
ث٤بٗبد ٓزٞاكوح ػٖ االىاُخ أ ٝاُزضج ٜ٤ك ٠ثٌزو٣ب اُوٝ ُٕٞٞأُٔوٙبد فالٍ ػِٔ٤بد أُؼبُغخ،
كٜ٘بى اُوِ ٖٓ َ٤اُج٤بٗبد أُْ٘ٞهح ٝأُزبؽخ ػٖ اُقل٘ ك ٠ػلك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ
َ٣ٝزض٘ ٠ثبُطجغ ٓب ٓ ٞٛورج ٜثبُٔ٤ب ٙاُٜ٘بئ٤خ ٝاُز ٠رْ رط٤ٜوٛب ٝرلفَ ٗظبّ اُزٞى٣غٖٓٝ .
أٌُٖٔ إٔ ٌٕٞ٣اٗقلبٗ ػلك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ٓزالىٓب ٓغ االٗقلبٗ ك ٠ثٌزو٣ب
اُو ُٕٞٞفالٍ ػِٔ٤بد أُؼبُغخُٝ .ول ؽلك )َٗ Geldreich (1988ت االىاُخ ثبَُ٘جخ ُِٔ٤بٙ
- 18 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اُقبّ ( ٕلو)%؛ رقي ٖ٣أُ٤ب ٙاُقبّ ()% 50؛ اُزغِٝ ٜاُزوٍ٤ت ()%62؛ اُزوّ٤ؼ اُوِٓ٠
اَُو٣غ ()%96؛ ٝاُزط٤ٜو ( %99أ ٝأًضو).
ٝك ٠اُلهاٍبد اُز ٠رٖق رؤص٤و اٍزقلاّ اُزط٤ٜو ػ٘ل ٗوب ٛثلِ٣خ فالٍ ٓؼبُغخ أُ٤ب ،ٙاٍزقلّ
)ٛ Cummins and Nash (1979و٣وخ اٛ٧جبم أُٖجٞثخ ( )PPاُو٤بٍ٤خ ٓغ اُزؾٖ٤ٚ
ػِٓ 35 ٠ئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخٝ .ػ٘ل اٍزؼٔبٍ اٌُِٞه ٓغ أُ٤ب ٙاُقبّ هجَ اُزو٣ٝن ،اٗقل٘
ػلك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝكجخ ك ٠أُ٘زظ اُٜ٘بئ ٖٓ ٠أُ٤ب ٙثٔولاه ٝ .% 87,1ػ٘ل ٓؼبُغخ أُ٤بٙ
اُقبّ أُقيٗخ ثبٌُِٞه ٍغَ اٗقلبٗ ٓبثٝ .%99 ٝ %98,7 ٖ٤ك ٠اُٜ٘ب٣خ ػ٘ل اٍزقلاّ
اٌُِٞه ٓب ث ٖ٤اُزو٣ٝن ٝاُزوٍ٤ت ،أ ٝث ٖ٤اُزغِٝ ٜاُزوٍ٤ت ٝاُزوّ٤ؼ ٝعل اٗقلبٗ ٝ %99,6
أًجو ٖٓ % 99,98ػِ ٠اُزور٤ت.
ٖٓٝفالٍ أُؼِٓٞبد اُز ٠عٔؼٜب )٣ Hutchinson and Ridgway (1977زٚؼ إٔ
أُؼبُغخ أُجلئ٤خ ُِٔ٤ب ٙثبٍزؼٔبٍ اُوَٓ اُقْٖ ٓٝؼلٍ اُزوّ٤ؼ اَُو٣غ اىاُذ ٖٓ % 80 – 50
ػلك اُجٌزو٣ب (ػل أٛجبم ػ٘ل 37كهعخ ٓئ٣ٞخ) ثٔ٘٤ب اُزوٍ٤ت اُجَ ٜ٤أىاٍ ؽٞاُ.%50 ٠
ٖٓٝفالٍ أثؾبس ) Ridgway (1978ارٚؼ إٔ ٖٓله أُ٤بِ٣ ٙؼت كٝها ك ٠اٍزؼبكح ٗٔٞ
Regrowthاُجٌزو٣ب كٗ ٠ظبّ اُزٞى٣غ كٞه كولإ اٌُِٞه اُؾوأُزجو.٠
ُٝول رْ رول٣و ػلك اُجٌزو٣ب ثبٍزؼٔبٍ ٛو٣وخ اٛ٧جبم أُٖجٞثخ ٓ PPغ ث٤ئخ YEA agar
ٝاُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل ٓ 37ئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخ أٓ 22 ٝئ٣ٞخ ُٔلح 7أ٣بًّٝ .بٗذ َٗجخ االىاُخ
ُِجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ٖٓ ٓ٤ب ٙاُٜ٘و ٓوٝها ثٔواؽَ أُؼبُغخ
(impoundment + prechlorination +coagulation + filtration +
)chlorinationرواٝؽذ ٓب ثُٞ 4 – 1 ٖ٤ؿبه٣زْ٣ٝ .ؼزٔل اٍزؼبكح ٗٔ ٞاُجٌزو٣ب ػ٘ل اُزٞى٣غ
ػِ ٠كولإ اٌُِٞه اُؾو أُزجوٞٗ ،٠ػ٤خ أُ٤بَٓ ،ٙز ٟٞأُٞاك اُؼ٣ٞٚخ ك ٠أُ٤ب ٙاُٜ٘بئ٤خُٝ .ول
هبّ ) MacLeod & Zimmerman (1987ثٔؾبُٝخ اؽالٍ اٌُِٞه أُزؾل Combined
ٓchlorineؾَ اٌُِٞه اُؾو أُزجو ٠كٗ ٠ظبّ رٞى٣غ ٓ٤ب ٙاُْوة كٓ ٠ؾبُٝخ ُِزـِت ػِ٠
ظبٛوح اٍزؼبكح ٗٔ ٞاُجٌزو٣ب ٌُٖٝاٍزٔود اُي٣بكح أُؼ٘٣ٞخ ك ٠اػلاك اُجٌزو٣ب.
- 19 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 2 .5انزخشيٍ ٔانزٕسيغ Storage and Distribution
ٓواهجخ اُ٘ٞػ٤خ اُجٌزوُٞٞ٣ٞ٣ع٤خ ُ٘ظْ اُزقيٝ ٖ٣اُزٞى٣غ اُْبئغ كٜ٤ب اٍزؼٔبٍ اُزؾُِِ َ٤جٌزو٣ب
اُٜز٤وٝروٝك٤خ .كبُزـ٤واد ك ٠اُ٘ٞػ٤خ اُجٌزوُٞٞ٣ع٤خ ُِٔ٤ب ٙأُؼبُغخ ٖٓ ٝهذ كفُٜٞب ٗظبّ
اُزٞى٣غ ؽزُٜٕٞٝ ٠ب اُ ٠أَُزِٜي ٌٖٔ٣رول٣وٛب ٖٓ فالٍ اٍزؼٔبٍ ثوٗبٓظ ٓ٘بٍت ُغٔغ
اُؼ٘٤بد ٝاُزؾُِِ َ٤جٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ .HPC
اُزـ٤واد هثٔب رَجت ْٓبًَ ك ٠اُ٘بؽ٤خ اُغٔبُ٤خ ٤ُِٔ Aestheticبٝ ٙاُز ٠رَْٔ ْٗٞء اُطؼْ
ٝاُوائؾخ ،رِ ٕٞأُ٤ب ،ٙاُ٘ٔ ٞاُِيط ،أُْبًَ االهزٖبك٣خ ٝاُز ٠رَْٔ اُزآًَ ك ٠أُٞاٍ٤و
ٝرؾَِ أُٞاك (.)Water Research Center, 1976
أػلاك اُجٌزو٣ب رٔ َ٤اُ ٠اُي٣بكح فالٍ اُزٞى٣غ ًٝضبكخ أػلاكٛب رزؤصو ثجؼ٘ اُؼٞآَ رَْٔ
اُ٘ٞػ٤خ اُجٌزوُٞٞ٣ع٤خ ُِٔ٤ب ٙاُٜ٘بئ٤خ ٝاُز ٠رلفَ ٗظبّ اُزٞى٣غ ،اُؾواهحٓ ،لح اُجوبء،
ٝأُـن٣بد أُزبؽخ )ُٝ .(Geldreich, 1974; Olson and Nagy, 1984ول هًيد اُؼل٣ل
ٖٓ اُلهاٍبد اُؾل٣ضخ ػِ ٠اُزـ٤واد كٞٗ ٠ػ٤خ أُ٤ب ٙفالٍ ٗظبّ اُزٞى٣غ كٕٞ ٠هح ه٤بً
اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ.
رٞاعل اُجٌزو٣ب أُِٗٞخ Pigmented bacteriaك ٠أُ٤ب ٙاُقبّ ،أُ٤ب ٙفالٍ ٓواؽَ أُؼبُغخ
ٗٝظبّ اُزٞى٣غ كهٍ(Reasoner & Geldreich, 1980 and Reasoner et al., ٚ
)ٝ 1989اٍزؼَٔ ك ٠رِي اُلهاٍبد ُزول٣و اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ٛوم ٝث٤ئبد Standard
ٓ PP, m-HPC MF, R2A MFغ اُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل ٓ 35ئ٣ٞخ ٖٓٝ .اُلهاٍخ اٍزقِٔ إٔ
٣ئز m-HPC and R2A ٠هل أظٜوا أػلاك ٖٓ اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خٝ ،رَْٔ اُجٌزو٣ب
أُِ ،ٚٗٞأًجو ٖٓ ٛو٣وخ ًٝ .Standard PPبٕ اُزؾُٔ ٖ٤ٚلح 7أ٣بّ ٞٛا٧هله ػِ ٠اظٜبه
اُجٌزو٣ب أُِ ٚٗٞػِ ٠ث٤ئزٓ . m-HPC and R2A ٠ضِذ اُجٌزو٣ب أُِٗٞخ َٗجخ ٓؼ٘٣ٞخ ٖٓ
. HPCأُزٞاعل ك ٠أُ٤بّ ٖٓ ٙجٌبد اُزٞى٣غٝٝ .عل ًنُي اهرجب ٛث ٖ٤أػلاك اُجٌزو٣ب أُِٗٞخ
ٍْٞٓٝاُلهاٍخً .بٗذ اُجٌزو٣ب اُٖلواء ٝاُجوروبُ٤خ آُِ ٕٞزٞاعلح ثٖلخ كائٔخ.
ٝعل ) LeChevallier et al.(1980إٔ أػلاك اُجٌزو٣ب ثطو٣وخ m-HPCرزواٝػ ٓب ث ٖ٤أهَ
ٖٓ .,2اًُٝ . cfu/ ml 410 X 1 ٠بٕ اُؼلك كٜٗ ٠ب٣بد اُْجٌبد ؽ٤ش ال
- 20 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٞ٣عل ًِٞه ٙ 23ؼق اُؼلك ػ٘ل رٞاعل اٌُِٞه اُؾوً .نُي ٝعل إٔ ٘ٛبى ػالهخ ٓبث ٖ٤اُؼٌبهح
ٓٝؾز ٟٞأُ٤ب ٖٓ ٙاُجٌزو٣ب HPCكؼ٘لٓب رٌ ٕٞاُؼٌبهح أًجو ٖٓ NTU 5ري٣ل ا٧ػلاك ك٠
ٓ٤ب ٙاُْجٌبد ٓب ثُٞ 3 – 1 ٖ٤ؿبه٣زْ ٝ .ثزٖ٘٤ق اُجٌزو٣ب أُزٞاعلح ك ٠اُْجٌبد ٝعل إٔ أًضو
ٖٓ ٜ٘ٓ %30ب ر٘زُِٔ ٠جٌزو٣ب االٗزٜبى٣خ ٝ Opportunistic pathogensؽٞاُ% 35 ٠
ٓٚبكاد ُ Antagonisticجٌزو٣ب اُوٝ .ُٕٞٞاٍز٘زظ إٔ رول٣و أػلاك ثٌزو٣ب ٓ HPCل٤ل ُ٤لٍ
ػِٝ ٠عٞك اُجٌزو٣ب االٗزٜبى٣خ ،رضج ٜ٤ثٌزو٣ب اُو ، ُٕٞٞاُزلٞٛه ك ٠فٞآ ٓ٤ب ٙاُْوة.
ُٝول ٝعلد )ٝ Olson and Hanami (1981ثبٍزؼٔبٍ ٝ Plate count agarثطو٣وخ
ٝ SPاُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل ٓ 35ئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخ إٔ ٘ٛبى افزالكبد ٓ٤ٍٔٞخ ك ٠ػلك اُجٌزو٣ب
اُٜز٤وٝروٝك٤خ ٝإٔ ا٧ع٘بً اُْبئؼخ رقزِق ٓب ث ٖ٤أُٖله ٗٝو ٜأفن اُؼ٘٤بد ٖٓ ٗظبّ
اُزٞى٣غ ٝإٔ اُؼٞآَ أُئصوح ك ٠رِي االفزالكبد هل رٌ ٕٞػٞآَ ٛج٤ؼ٤خ ٔ٤ًٝبئ٤خ ك ٠فٜ
اُزٞى٣غُٝ .ول ٝعل إٔ ا٧ع٘بً اُْبئؼخ كٗ ٠ظبّ اُزٞى٣غ ٓغ اٍزؼٔبٍ اٌُِٞه ًبٗذ
ٝ Acinetobacter, Pseudomonas/Alcaligenes, and Flavobacteriumؽ٤ش ال
َ٣زؼَٔ اٌُِٞه ٝعل إٔ ا٧ع٘بً اُْبئؼخ ٠ٛ
Pseudomonas/Alcaligenes, Acinetobacter, Flavobacterium and
.Klebsiella
٘ٛٝب ٣غت اُزلوهخ ٓب ث ٖ٤اٍزؼبكح اُ٘ٔ ٞٛٝ Regrowth ٞاُ٘ٔ ٞاُ٘برظ ػٖ اُجٌزو٣ب أُٚبهح
ٝاُؾ٤خ ٖٓ Injured bacteriaرؤص٤و اٌُِٞه أ ٝرِي اُز ٠ك ٠ؽبُخ ٌٍDormancy ٕٞ
ٝاُزَ٤ُ ٠ٛ ٠ذ ْٗطخ أ٤ٓ ٝز ، ٚأٓب After growthك ٜٞاُ٘ٔ ٞاُ٘برظ ػٖ اٗلٖبٍ اُجٌزو٣ب
أُؼِوخ (اُل ِْ٤اُؾ)ٟٞ٤ػٍِ ٠طؼ ٓٞاٍ٤و رٞى٣غ أُ٤ب. ٙ
ُٝول ٝعلد اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ثؤػلاك أهَ كّٜٞ ٠ه اُٖ٤ق ؿٖ ّٜٞه اُْزبء (ػٌٌ
أُزٞهغ) هل ٣وعغ مُي اُ ٠ى٣بكح عوػخ اٌُِٞه أَُزقلٓخ ٕ٤لب ُِٞهب٣خ ٖٓ أٓواٗ اُٖ٤ق(
.(Brazos and O’Connor, 1988
ُٝول كهً رؤص٤و اُل ِْ٤اُؾ Biofilm ٟٞ٤ػِٞٗ ٠ػ٤خ أُ٤ب ٖٓ ٙفالٍ ػلك اُجٌزو٣ب
اُٜز٤وٝروٝك٤خ ( )LeChevallier et al. 1987كجبٍزؼٔبٍ ث٤ئخ ٛٝ R2Aو٣وخ ٓ SPغ
اُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل ٓ 24 – 20ئ٣ٞخ ُٔلح 7أ٣بّ) ٝعل ى٣بكح ك ٠ا٧ػلاك ٓغ اَٗ٤بة أُ٤بٓ ٖٓ ٙؾطخ
أُؼبُغخ ( ) َِٓ / cfu 410اُٜٗ ٠ب٣خ اُقط.)َِٓ /cfu 610( ٛٞ
- 21 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اُ٘لف أُزٌٗٞخ ٖٓ أُبكح أَُزقلٓخ ُِزؾٌْ ك ٠اُزآًَ (أٝهصٞكٍٞلبد اُيٗي) ًبٗذ رؾزٟٞ
4
ػًِٝ َِٓ/cfu 610X 2،4 ٠بٕ اٍ٘ٔ٧ذ أُجطٖ َُطؼ اٗ٧بث٤ت ٣ؾز ٟٞػِ10X 2 ٠
. 2ٍْ/cfu
. 3 .5انفيهى انحيٕٖ ًَٕٔ انجكززيب ػهٗ يٕاد االَشبء
اُ٘ٔ ٞأٌُ٤وٝث ٠أُٖبؽت َُطٞػ اُقياٗبد ٞٓٝ Basinsاك االْٗبءاد ا٧فو ٟأَُزؼِٔٚ
ك ٠ػِٔ٤بد أُؼبُغخ ٞٓٝاٍ٤و اُزٞى٣غ ٗٝظْ اَُجبًخ ك ٠أُ٘بىٍ Household plumbing
systemsهٔ٤ذ ثبٍزؼٔبٍ ٛوم ػل اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خًٝ .نُي اٍزؼَٔ ػلك اُجٌزو٣ب
اُٜز٤وٝروٝك٤خ ك ٠اُلهاٍبد اُجٌزوُٞٞ٣ع٤خ ٍٝ٧ب ٛاُزآًَ.
ٝك ٠كهاٍخ أعواٛب ) Nagy and Olson (1986اٍزؼَٔ ٛو٣وخ ٓ SPغ ث٤ئبد Plate
.coun agar, m-HPC, and R2Aرواٝؽذ أػلاك اُجٌزو٣ب
ث 2ٍْ100 /cfu 11 ٖ٤اٍُ ٖٓ 2ٍْ100/cfu 10X 5,75 ٠طؼ اٗ٧جٞثخٝٝ .عل إٔ ٓؼلٍ
اُي٣بكح ك ٠ا٧ػلاك ػٍِ ٠طؼ اٗ٧بث٤ت ؽٞاُُٞ 1 ٠ؿبه٣زْ ًَ ٍٞ٘ 10اد فلٓخٝٝ .عل إٔ ػلك
اُجٌزو٣ب ؿ٤و ٓورلغ ٝؿ٤و ٓٞىع ثبٗزظبّ ػٍِ ٠طؼ اٗ٧بث٤ت ٝهثٔب ٣وعغ مُي اٍُ ٠وػخ
أُ٤ب ،ٙأَُز ٟٞأُ٘قل٘ ٖٓ أُٞاك أُـن٣خَٓ ،ز ٟٞاُؾوٖ أُ٘قل٘ ٝاُ٘برظ ػٖ أُؼبُغخ
ًٝنُي ٝعٞك أُزجو ٖٓ ٠أُطٜوًٝ .بٗذ أع٘بً اُجٌزو٣ب أُٞعٞكح ٗ ٠ٛلَٜب أُزٞاعلح ك٠
أُ٤ب.ٙ
ٝكهً ) ٞٔٗ Donald & Pipes (1987اٌُبئ٘بد اُله٤وخ ػٍِ ٠طٞػ أُٞاٍ٤وأُٖ٘ٞػخ
ٖٓ اُؾل٣ل اُيٛو ٝ Cast ironأُؼوٙخ ُٔ٤ب ٙاُْوة .ػوٙذ ٍِ٘لهاد ٕـ٤وح ٖٓ اُؾل٣ل
ُٔ٤ب ٙاُْوة ػ٘ل (ٓ 20 – 15ئ٣ٞخ) ٓ 15 – 4( ،ئ٣ٞخ) .ثؼ٘ اَُِ٘لهاد ػوٙذ ٓجبّوح
ُِٔ٤ب ٙثبكفبُٜب كٗ ٠ظبّ اُزٞى٣غ ثٔ٘٤ب اُجؼ٘ ا٥فو ػوٗ ُٔ٤ب ٙاُْوة ك ٠فياٗبد ثالٍز٤ٌ٤خ
ٍؼخ ُ 100زو.
ىٖٓ اُزؼوٗ ( ّٞ٣ 41 – 28رؼوٗ هٖ٤و) ( ّٞ٣ 115 – 67 ،رؼوٗ ٝ .)َ٣ٞٛاؽٖ٤ذ
اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ثبٍزؼٔبٍ ث٤ئخ َٓ . R2Aز٣ٞبد اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ك٤ٓ ٠ب ٙاُزٞى٣غ
ػ٘ل ٓٞاهغ ٓقزبهح ُِلهاٍخ رواٝؽذ ٓب ث 4 ٖ٤آَُ 219 ٠زؼٔوح َِٓ /فالٍ اُلزواد اُجبهكح
اُؾواهح ٓٝب ث 10 ٖ٤آَُ 8300 ٠زؼٔوح َِٓ /ك ٠اُلزواد اُلاكئخًٝ .بٗذ اُجٌزو٣ب ػِ ٠اُؾل٣ل
اُيٛو أُؼوٗ ُِٔ٤ب ٙكٗ ٠لٌ أُٞاهغ ٣زواٝػ ٓب ثَٓ410 X 2،1 ٖ٤زؼٔوح 2ٍْ /اُ7,59 ٠
- 22 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
2
َٓ 710Xزؼٔوح 2ٍْ /فالٍ اُلزواد اُلاكئخ ،ثَٓ 56 ٖ٤زؼٔوح 2ٍْ /اٍُْ /510 X1,58 ٠
فالٍ اُلزواد اُجبهكحَٓ .ز٣ٞبد اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ػٍِِ٘ ٠لهاد اُؾل٣ل اُيٛوٝأُؼوٙخ
ُِٔ٤ب ٙك ٠فياٗبد ٍؼخ ُ 100زوفالٍ اُلزوح اُلاكئخ ًبٗذ َٓ 510 X 1,44زؼٔوح – 2ٍْ /
ًٝ .2ٍْ / 710 X 1,74بٗذ ٘ٛبى ػالهخ ٓٞعجخ ه٣ٞخ ث ٖ٤أػلاك اُجٌزو٣ب ك ٠أُ٤بٝ ٙأػلاكٛب
ػٍِ ٠طؼ اَُِ٘لهادًٝ .بٕ ٘ٛبى ػالهخ ٍبُجخ ه٣ٞخ ث ٖ٤روً٤ي اٌُِٞه ٝاُجٌزو٣ب ػٍِ ٠طؼ
اَُِ٘لهاد ك ٠كزوح اُؾواهح اُلاكئخ ٛٝن ٙاُؼالهخ هثٔب رؼزٔل ػِ ٠أُٞهغ٘ٛٝ .بى أٚ٣ب ػالهخ
ه٣ٞخ ٓب ث ٖ٤ؽواهح أُ٤بٝ ٙاُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ػٍِ ٠طؼ اَُِ٘لهاد اُيٛوٍ .وػخ أُ٤بٙ
ك ٞعل أٜٗب رؾل ٖٓ ٗٔ ٞاُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ػِ ٠اَُِ٘لهاد آب ػٖ ٛو٣ن ى٣بكح اُزؼوٗ
ٌُِِٞهآ Monochloramine ٖ٤أ ٝثبىاُخ اُقال٣ب أُِزٖوخ . Attached cells
ُٝول ٝعل إٔ اُجٌزو٣ب أٌُٗٞخ ُِل ِْ٤اُؾ ٟٞ٤أ ٝأُٞعٞكح كافِٝ ٚأُِزٖوخ ثبٍ٧طؼ (ًوثٕٞ
ّْٓ٘ – ٜوائؼ ٓؼلٗ٤خ) إٔؼت ك ٠اُوٚبء ػِٜ٤ب ٖٓ اُجٌزو٣ب اُؾوح ٝإٔ اٌُِٞهآٖ٤
( ( Monochloramineأه ٟٞك ٠رؤص٤و ٖٓ ٙاٌُِٞه اُؾو أ ٝصبٗ ٠أًَ٤ل اٌُِٞه Chlorine
.LeChevallier et al., 1988).(dioxide
ُٝول ٝعل إٔ آواه ٓ٤بٓ ٙؾز٣ٞخ ػِ ٠اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك ٚ٤كٞٓ ٠اٍ٤و ٖٓ ٝ PVCأفوٟ
ٖٓ اُِٖت ٓ٘قل٘ اٌُوث ٕٞكبٕ ٓ٤ب ٙأُٞاٍ٤وأُٖ٘ؼخ ٖٓ PVCاؽزٞد ػِ ٠ثٌزو٣ب ثٌضبكخ
أًجو ٖٓ رِي اُ٘برغخ ٖٓ ٓٞاٍ٤و اُِٖت ٝٝ .عل إٔ ٓٞاٍ٤و اُؾل٣ل اُيٛو هل ؽلس كٜ٤ب رآًَ
ٗز٤غخ اٙبكخ ثٌزو٣ب اُٜ٤ب ٓؼيُٝخ ٖٓ ٗظبّ رٞى٣غ ٓٔبصَٝٝ .عل أٚ٣ب إٔ اُجٌزو٣ب أُؼيُٝخ ٖٓ
أُبكح أُزآًِخ ٗ ٠ٛلَٜب أُزٞاعلح ٖٓ أُ٤ب.ٙ
ٖٓ أُواعغ اُز ٠رٜزْ ث٘ٔ ٞاُجٌزو٣ب ػِ ٠أٍطؼ ٓٞاك االْٗبء ٝاُطالء ُؼِٔ٤بد أُ٤بٙ
ٝاُقياٗبد ٗٝظْ اُزٞى٣غ ). Colbourne (1985) and Schoenen (1986
ٔكًهخص كبٕ اٍزؼٔبٍ ٛوم رول٣و اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك ٚ٤رٔلٗب ثزلبٕٓ َ٤ؼ٘٣ٞخ ػٖ
اُزـ٤واد كٞٗ ٠ػ٤خ أُ٤ب ٙفالٍ أُؼبُغخ ،اُزقيٝ ٖ٣اُزٞى٣غ .اصجزذ رِي اُطوم كبئلرٜب ٍٞٝف
َ٣زٔو اٍزؼٔبُٜب ك ٠ثوآظ أُواهجخ ُ٘ٞػ٤خ أُ٤ب .ٙك ٠اُؾو٤وخ ،هثٔب ٝعلد ٓؾطبد أُؼبُغخ
إٔ ػلك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ريكاك كبئلر ٚام أٜٗب رلكغ ٗؾ ٞاُزؾٌْ كَٓ ٠ز٣ٞبد ٓ٘زغبد
اُضبٗ٣ٞخ ُِٔطٜواد اُٚبهح ك ٠أُ٤ب .ٙاٍزؼٔبٍ ثلائَ أُطٜواد ًغيء ٖٓ اٍزوار٤غ٤خ اُقل٘
ٖٓ روً٤ي اُ٘ٞارظ اُضبٗ٣ٞخ ُِزط٤ٜو ٝ ،آٌبٗ٤خ فل٘ عوػبد أُطٜواد أَُزقلٓخ هثٔب ٣ؼ٘٠
أٗ٘ٛ ٌٕٞ٤ٍ ٚبى صوخ ًج٤وح ثبُزؾِ٤الد ُؼلك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ُزول٣و ٓـي ٟاُزـ٤واد ك٠
ٗٞػ٤خ أُ٤بٝ ٙاُزٍ ٠زؾزبط اُ ٠اٍزغبثخ ٗؾ ٞثؼ٘ اُزـ٤٤و ك ٠أُؼبُغخ.
- 23 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٝػِ ٠اُوؿْ ٖٓ أٗ ٖٓ ٚأُؼوٝف إٔ اُزوً٤ياد اُؼبُ٤خ ٖٓ أػلاك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ٌٖٔ٣
إٔ رْ٘ؤ ك ٠أٓبًٖ ٓؼ٘٤خ كٗ ٠ظبّ اُزٞى٣غ ،كبٕ ٘ٛبى ٗلهح ك ٠اُج٤بٗبد ػٖ اُزؤص٤و ػِٕ ٠ؾخ
االَٗبٕ ٝاُز ٖٓ ٠أٌُٖٔ إٔ رْ٘ؤ ػٖ اُزؼوٗ ُٜن ٙاٌُبئ٘بد ػوت االثزالع أ ٖٓ ٝفالٍ
اُغٜبى اُز٘لَ( ٠اُومام) .ػِ ٠إٔ ٘ٛبى ثؼ٘ ٓؼِٓٞبد ػٖ اُزؼوٗ ُِومام ٖٓ Aerosol
ؽ٤ش آ٧واٗ أُزُٞلح ػٖ أُ٤بٓ waterborne pathogen ٙضَ اُِغ٤ٗٞ٤الٝ ،.ػٖ أٓواٗ
اُغِل ٝاُز ٠روعغ اُ Pseudomonas aeruginosa ٠أ ٝثؼ٘ ٝ Mycobacteriaاُز٠
رْ٘ؤ ػٖ اُزؼوٗ ُٔ٤ب ٙاٍزؾٔبّ ِٓٞصخ ٌُٖٝ ،اُزوبه٣و ػٖ اُزؤص٤و اُٖؾ ٠اُٚبه ٗز٤غخ
ا٧ػلاك اٌُج٤وح ٖٓ اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ْٓززخ أ ٝؿ٤و ٓزٞاعلحٓٝ .غ اىك٣بك أػلاك اّ٧قبٓ
ٓ٘قل ٠ٚأُ٘بػخ ٝاُن ْٛ ٖ٣ك ٠فطو ُالٕبثخ ثبٌُبئ٘بد اُز ٠ٛ ٠ثٖلخ ػبٓخ ؿ٤و ٓو٤ٙخ
كبٕ اُجؾش كٛ ٠نا أُغبٍ ٣ؾزبط اُ ٚ٤ثْلح.
ٝالٍزٔواه٣خ اُؼل٣ل ٖٓ ٛن ٙاُجٌزو٣ب ؽ٤خ ك ٠اُج٤ئخ اُطج٤ؼ٤خ ًبٕ مُي ٓؾَ اُزَبإٍ ػٖ ٓلٟ
أ٤ٔٛخ رِي اُظبٛوح ٖٓ ٗبؽ٤خ اُ٘ٞػ٤خ اُٖؾ٤خ ُٔ٤ب ٙاُْوة ٕٝؾخ أَُزِٜي٘ٛٝ .بى اُؼل٣ل
ٖٓ اُجٌزو٣ب اُز ٖٓ ٠أٌُٖٔ إٔ رلفَ ك ٠ؽبُخ أٜٗب ؽ٤خ ٌُٖٝال ٌٖٔ٣ىهاػزٜب Viable but
)nonculturable Roszak and Colwell, 1987 ).
ٛٝبُٔب إٔ ٛن ٙاٌُبئ٘بد ال ٌٖٔ٣ػلٛب ثطوم اُيهاػخ اُز ٠رَزؼَٔ ا ،ٕ٥كبٗ٣ ٚغت اٍزؼٔبٍ
ٛوم أفوُ ٟزول٣و ًٔ٤زٜبٝ .اٍزقلاّ ٛوم ٌُِْق ػٖ رٞاعل اٌُبئ٘بد اُؾ٤خ أُزٞاعلح ك٠
ٓ٤ب ٙاُْوة ٝاُز ٠ال ٌٖٔ٣ىهاػزٜب ٝرو ْ٤٤أ٤ٔٛزٜب ثبَُ٘جخ ُٖؾخ االَٗبٕ رؾزبط رِي
أَُبؽخ آُ ٠ي٣ل ٖٓ اُجؾش.
- 24 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
انفصم انضبَٗ
غزق رمذيز انؼذد انكهٗ نهجكززيب انٓزيزٔرزٔفيخ فٗ انًيبِ
)Total Bacterial Count (SPC
)Total Viable Bacterial Count (HPC
. 1يمذيخ
. 1 .1االطزخذايبد Applications
عٔ٤غ ٓب مًو ًؼ٘ٞإ ٖٓ ٠ٛطِؾبد رنًو ك ٠أُواعغ ٝا٧ثؾبس ٝ ،أؽلس رِي أَُٔ٤بد
٠ٛا ٧ف٤و٣ٝ ،وٖل ثٜب ٓؼوكخ ٓؾز ٟٞػ٘٤خ أُ٤ب ٙأُقزجو ٖٓ ٙؽ٤ش اُؼلك اٌُُِِ ٠جٌزو٣ب.
ٖٓٝفالٍ رول٣و ػلك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ٌٖٔ٣إٔ ٣زْ رول٣و اُزـ٤واد فالٍ ٓواؽَ
ٓؼبُغخ ٓ٤ب ٙاُْوة أُقزِلخ ثبالٙبكخ اُ ٠اُزـ٤واد اُز ٖٓ ٠أٌُٖٔ إٔ رؾلس كٞٗ ٠ػ٤خ
أُ٤ب ٙفالٍ ٗظبّ اُزٞى٣غ ٓٝ .Distribution systemب ٣زْ ؽٖو ٙػبكح َٓ ٠ٛزؼٔواد
Coloniesهثٔب رْ٘ؤ ػٖ فِ٤خ ٝاؽلح ،اص٘زبٍَِِٕ ،خ Chainأ ٝػ٘وٞك ُٝ Clusterنُي
٣نًو اُؼلك ٓٔ٤يا ثبالٕطالػ ٝؽلاد رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔوح .Colony forming units
)ٝ (CFUاُؼلك اُٜ٘بئ٣ ٠ؼزٔل ػِ ٠رلبػَ ٓب ث ٖ٤أَُزؼٔواد اُ٘بّئخ ٝاُج٤ئخ اُز ٠ىهػذ
ػِٜ٤ب اُجٌزو٣ب؛ ُنُي رقزبه اُز٤ُٞلخ ٖٓ اُطو٣وخ ٝاُج٤ئخ اُز ٠ر٘زظ أهٖ ٠ػلك ٖٓ أَُزؼٔواد
ٖٓ فالٍ اُزؾ ٖ٤ٚػِ ٠أَٗت كهعخ ؽواهح ُِٝلزوح اُيٓ٘٤خ أُ٘بٍجخ ُنُئُِٝ .وبهٗخ ثٖ٤
ًلبءح فطٞاد أُؼبُغخ أُقزِلخ َ٣زؼَٔ ٗلٌ اُطو٣وخ ٝاُج٤ئخ.
٘ٛٝبى صالس ٛوم ٝأهثؼخ ث٤ئبد ُزول٣و ػلك اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ عبء مًوٛب ك٠
٤ٍٝ Standard Methods for the Examination of Water and Wastewaterزْ
مًوٛب.
- 25 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 2 . 1اخزيبر انطزيمخ Selection of Method
٣غت ا٧فن ك ٠االػزجبه إٔ اُطوم اُز ٠رَزقلّ ك ٠رول٣و اُؼلك اٌُُِِ ٠جٌزو٣ب ٝاُز٤ٍ ٠وك
مًوٛبٝ ،ػِ ٠رؼلكٛب ،ال ر٘غؼ ك ٠ر٘ٔ٤خ ٝاظٜبه اُؼلك اُؾو٤وُِ ٠جٌزو٣ب أُزٞاعلح ك ٠ػ٘٤خ
أُ٤ب ٙأُقزجوح ُؼلح اػزجبهاد ٖٓ .أ ْٛرِي االػزجبهاد ،ػلّ آٌبٗ٤خ رٞك٤و اُظوٝف اُز٠
رالئْ ٗٔٝ ٞرٌبصوعٔ٤غ ٗٞػ٤بد اُجٌزو٣ب ٖٓ ؽ٤ش اُزـن٣خ ٝاالؽز٤بط ًَُٞ٨ع ٖ٤ثبالٙبك ٚاُ٠
ؽواهح ٓٝلح اُزؾ ٝ .ٖ٤ٚكِول مًو كٛ ٠نا أُغبٍ أٗ ٚرؾذ أؽَٖ اُظوٝف كبٕ ٓب ٣زْ رول٣وٙ
ٖٓ أػلاك ال ٣ي٣ل ػٖ صِش اُؼلك اُؾو٤و ٠أُٞعٞك ك ٠اُؼ ٚ٘٤أُقزجوٝ .ٙؽ٤ش أٖٗٓ ٚ
أُلو ٗٝإٔ اُـوٗ ٖٓ االفزجبه ٞٛاُٞهٞف ػِٕٞ ٠هح ػبُٓٔ ٚؾز ٟٞاُؼ ٖٓ ٚ٘٤اُجٌزو٣ب
كبٕ االٛزٔبّ ٓ ٌٕٞ٣وًي ػِ ٠ػلك اُجٌزو٣ب اُؾٝ ٚ٤ال ٣لفَ ٘ٛب ٓب ِْٚٔ٣اُؼلك ك ٠ثؼ٘
اُطوم ٖٓ ثٌزو٣ب ؿ٤و ؽُٝ ٚ٤نُي أهزوؽذ اُزَٔ٤خ ثبالٕطالػ اُضبُذ ُزِي أُغٔٞػخ ٖٓ
اُجٌزو٣ب.
ٖٓٝأُلو ٗٝأُٗٔ ٚؼوكخ ٓؾز ٟٞاُؼ ٖٓ ٚ٘٤اُجٌزو٣ب إٔ َ٣زجؼل أ ٟػبَٓ آفو هل ٔ٣ضَ
ٖٓلها اٙبك٤ب فبهع٧ ٠ػلاك ٖٓ اُجٌزو٣بُ ،نُي ٣واػ ٠إٔ رٌ ٕٞعٔ٤غ ا٧كٝاد أَُزقلٓخ
ك ٠اُزول٣و ٓؼؤ ٚأ ٟفبُ٤خ ٖٓ أً ٟبئ٘بد ؽ ٚ٤رزلافَ ك ٠اُزول٣و ًٔب ٣زْ اُؼَٔ رؾذ ظوٝف
ٓؼؤخ .Aseptic conditions
.1 . 2 . 1غزيمخ األغجبق انًصجٕثخ Pour plate method
ٛو٣وخ اٛ٧جبم أُٖجٞثخ ٝاُز٤ٍ ٠ؤر ٠رلِٖٜ٤ب كٔ٤ب ثؼل ٛ ٠ٛو٣وخ ٍِٜخ االعواء ٌٖٔ٣ٝإٔ
رَزٞػت ؽغْ ٖٓ اُؼ٘٤خ ا٤ِٕ٧خ أ ٝرقل٤ق ٜٓ٘ب ٣زواٝػ ٓب ث َِٓ ,1 ٖ٤اُ. َِٓ 2 ٠
أَُزؼٔواد اُ٘برغخ ٕـ٤وح َٗج٤ب ٚٓٝـٛٞخ َ٤ٓٝ ،أَُزؼٔواد اُ ٠اُزؼل ٟػِ ٠ثؼٜٚب
أهَ ػٖ ٛو٣وخ اُيهع ػٍِ ٠طؼ اٛ٧جبم ٗ ٖٓٝ .Surface growthبؽ٤خ أفو ٟكبٕ
أَُزؼٔواد أُـٍٔٞخ ر٘ٔ ٞثجط٢ء ٖٓٝاُٖؼت ٗوِٜب ٛٝنا ٔ٣ضَ أؽل ػٞ٤ة اُطو٣وخ٘ٛٝ .ب
ؽبعخ ٓبٍخ اُ ٠ؽٔبّ ٓبئ ٠ما صوٍٓٞزبد ُزِط٤ق ؽواهح اُج٤ئخ ٝ Temperingػِ ٠اُوؿْ
ٖٓ مُي كبٌٓبٗ٤خ ؽلٝس ٕلٓخ ؽواه٣خ ُِجٌزو٣ب أُٞعٞكح ك ٠اُؼ٘٤خ هبئٔخ ٝرزَجت ك٠
اٙواه ُِقال٣ب ٗ Injuryز٤غخ اٍزؼٔبٍ اُج٤ئخ ػ٘ل كهعخ ؽواهح ٓ 46-45ئ٣ٞخ ٝرالَٜٓب ٓغ
اُقال٣ب اُجٌز٤و٣خ أُٞعٞكح ك ٠اُؼ٘٤خ ٝثبُزبُ ٠هل رزَجت ك ٠ػلّ ٗٔٛٞب.
- 26 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 2 . 2 . 1غزيمخ انفزد ػهٗ األغجبق Spread plate method
ٛو٣وخ كو ك عيء ٖٓ اُؼ٘٤خ ا ٝرقل٤ق ٜٓ٘ب ػٍِ ٠طؼ اُج٤ئخ ٝاُز٤ٍ ٠ؤر ٠مًوٛب رلٖ٤ِ٤ب كٔ٤ب
ثؼل ال ٣ؾزَٔ إٔ ٣ؾلس ٜٓ٘ب ٕلٓخ ؽواه٣خ ُِقال٣ب ٝأُْبه اُٜ٤ب ك ٠اُطو٣وخ اَُبثوخ
ٝأَُزؼٔواد رزٌ ٕٞػٍِ ٠طؼ اُج٤ئخ ك ٠اُطجن ٝاُز ٌٖٔ٣ ٠رٔ٤٤يٛب ثَُٜٞخ ػٖ كوبػبد
اُٜٞاء ٝاُْٞائت اُز ٠هل رزٞاعل ك ٠اُج٤ئخ ٝرزلافَ أ ٝرؼ٤ن اُؼلٝ .أَُزؼٔواد اُ٘برغخ ػِ٠
ٍطؼ اُج٤ئخ ٘ٛب ٗ ٌٖٔ٣وِٜب ثَوػخ ٍُٜٞٝخ اُ ٠أ ٟث٤ئبد أفو ٟالعواء ٓي٣ل ٖٓ
االفزجبهاد ػِٜ٤بٛٝ ،ج٤ؼخ أَُزؼٔوح ٖٓ ؽ٤ش اٌَُْ ٓ ٌٖٔ٣الؽظزٓٝ ٚوبهٗزٜب ثبٕٝ٧بف
أُْ٘ٞهح ًؤ ٍٝفطٞح ك ٠ػِٔ٤بد اُزٖ٘٤ق.
ٓٝب ٣ؾل اٍزؼٔبٍ رِي اُطو٣وخ ٕ ٞٛـو ؽغْ اُؼ٘٤خ أ ٝاُزقل٤ق ٜٓ٘ب أٌُٖٔ اٍزؼٔبُ- ,1 ( ٚ
ٝ )َِٓ.,5اُن٣ ٟؾلك ٙهلهح اُج٤ئخ أَُزؼِٔخ ٝأُؾلٝكح ػِ ٠االٓزٖبٓ ٝاُز ٠رزٞهق ػِ٠
كهعخ علبف اُج٤ئخٝ .الرجبع ٛن ٙاُطو٣وخ ِ٣يّ رٞك٤و اُج٤ئبد اُزٍ ٠زَؼَٔ ٝرٌٍ ٕٞبثوخ
اُزغل٤ق ٝثبُزبُُٜ ٌٕٞ٣ ٠ب اُولهح ػِ ٠آزٖبٓ أًجو ُِؼ٘٤خ أُقزجوح.
. 3 . 2 . 1غزيمخ أغشيخ انززشيح Membrane filter method
رز٤ؼ ٛو٣وخ اُزوّ٤ؼ ثب٧ؿْ٤خ افزجبه ؽغً ّٞج٤وح ٖٓ أُ٤ب ٙأُ٘قلٚخ ك ٠اُؼٌبهح ٠ٛٝ
اُطو٣وخ أُقزبهح ك ٠ؽبُخ أُ٤ب ٙأُ٘قلٚخ كٓ ٠ؾزٞاٛب ٖٓ اُجٌزو٣ب ( أهَ ٖٓ 1اُ100 ٠
ٝؽلح رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔواد ٛٝ .)CFU/ml( َِٓ /ن ٙاُطو٣وخ ال ٘٣زظ ػٜ٘ب ٕلٓخ ؽواه٣خ
ٌُٖٝر٤ٚق اُ ٠رٌبُ٤ق اعواء ُالفزجبه صٖٔ ؿْبء اُزوّ٤ؼ ٖٓٝ .Membrane filter
أٓضِخ اُؼٞ٤ة ا٧فوٕ ٟـو أَُبؽخ أُزبؽخ ُ٘ٔ ٞأَُزؼٔواد ،اُؾبعخ اُٞٙ ٠ء ٓ٘ؼٌٌ
ؽز ٌٖٔ٣ ٠هإ٣خ أَُزؼٔواد ػِ ٠فِل٤خ ثٚ٤بء اما ُْ َ٣زؼَٔ كِزو ِٓ ٕٞإٔ ٝجـخ ،آٌبٗ٤خ
رِق اُقال٣ب ثبُٚـ ٜاُيائل ًٝنُي آٌبٗ٤خ ٝعٞك كوٝم كٞٗ ٠ػ٤خ أُوّؾبد
.Membranes
. 3 . 1األدٔاد انؼبيخ انالسيخ نهزمذيز
. 1 . 3 . 1يبصبد يذرعّ ٓ Pipettesؼؤٍ ٚؼخ (ا َِٓ – )َِٓ 10 – َِٓ 5 -ْٓ 2
أ( Micro pipette ٝاما رٞاكود).
- 27 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 2 . 3 . 1أَبثيت اخزجبر يؼمًّ Test tubesرَزٞػت َِٓ 20ػِ ٠ا٧هَ ُِزقل٤ق أٝ
ىعبعبد رقل٤ق ٍ Dilution bottlesؼخ ٓ َِٓ 150لهع ٚأ ٝؿ٤و ٓلهعخ ثـطبء هالٝٝظ
رزؾَٔ ؽواهح اُزؼو.ْ٤
. 3 . 3 . 1أغجبق ثززٖ ىعبع ٚ٤أ ٝثالٍز٤ي Petri dishesهطو ٓ ٍْ 10ؼؤٝ ٚهطو 5
ٍْ ك ٠ؽبُخ ارجبع .Membrane filtration technique
. 4 . 3 .1عٓبس ُٔ Vortexيط اُؼ ٚ٘٤ع٤لا ٓغ ٓؾِ ٍٞاُزقل٤ق ُٔٚٝبٕ اُزغبٌٗ.
. 5 . 3 .1نٓت ثُشٌ ُِزؼو.ْ٤
. 6 . 3 . 1لعجبٌ سعبعيّ ٌِْٚٓ Glass rodsػِ ٌَّ ٠ؽوف )Spreaders (L
ٓؼؤ ٚك ٠ػِت ٓؼلُٗ ٚ٤لوك اُغيئ٤خ أَُزقلٓخ ٖٓ ػ٘٤خ أُ٤ب ٙػٍِ ٠طؼ اُج٤ئخ.
. 7 . 3 . 1حًبو يبئٗ َٖ٣ثبُٔ٤ب ٙاُ ٠كهعخ اُـِ٤بٕ الٍبُخ اُج٤ئخ اُزٍ ٠زَزقلّ ٝآفو
ٓٚج ٛٞػِ ٠كهعخ ٓ 47 – 46ئ٣ٞخ ُزِط٤ق ؽواهح اُج٤ئخ Temperingهجَ ٕجٜب ك٠
أٛجبم اُجزوٍٞ ٟاء كٝ ٠عٞك ػ٘٤خ أُ٤ب(Poured plate ( ٙأ ٝػلٓ ٚالٍزقلاّ رِي اٛ٧جبم
ك ٠كوك اُؼ٘٤خ ػٍِ ٠طؼ اُج٤ئخ ثٜب )(Streak plates
. 8 . 3 . 1حعبَزبٌ ٣زْ ٙج ٜؽواهح ًال ٜٓ٘ٔب ٛجوب ُِج٤ئخ أَُزقلٓخ.
. 9 . 3 . 1عٓبس انززشيح انغشبئٗ Membrane Filtration Apparatusك ٠ؽبُخ
ارجبع ٛو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ .Membrane filter
Binocular . 12 . 3 . 1م ٝاٙبءٍ ٙلِ ٚ٤ػبكٝ ٚ٣ػِ ٌٖٔ٣ ٚ٣ٞاُزؾٌْ ك ٠ىا٣ٝخ َٓ٤
ٍوّ٧ ٛٞؼخ ػِ ٠اُطجن أ ٝعٜبى ٌٖٔ٣ Quebec colony counterثٞاٍطز ٚػل
أَُزؼٔواد اُ٘برغ ٚثبٍزقلاّ ػلٍخ ٌٓجوح ٓغ ٓئّو أٝرٓٞبر٣ ٠ٌ٤ؼٌٌ اُزالٌٓ ٓغ ٍطؼ
اُطجن اُ ٠اههبّ أ ٝثبٍزقلاّ ػلاك ٣ل.ٟٝ
- 28 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 4 . 1يُطمخ انؼًم Work area
٣غت رٞك٤و Benchكَ٤ؼ فبُ ٖٓ ٠اُْوٞم ك ٠ؿوكخ ٓؾٌٔخ أ ٝثٙٞغ اُغٜبى) (MFك٠
) ٌٕٞ٣ (MFؿ٤و ٓ٘لن ًبث٘٤خ ُِؾل ٖٓ اُزِٞس ،اَُطؼ أُٞٙٞع ػِ ٚ٤اُغٜبى
٣ٝطٜو هجَ أ ٟرؾِ َ٤رو ّٞث.ٚ
. 5 . 1انؼيُبد Samples
رغٔغ اُؼ٘٤بد ٛجوب ُٔب عبء ك Module 1 ٠ػِ ٠إ ٣زْ اُزؾِٓ َ٤جبّوح هله االٌٓبٕ ؽز٠
ال ٣ؾلس رـ٤و ك ٠ا٧ػلاك ػِ ٠إٔ أهٖٝ ٠هذ َٓٔٞػ ث ٚإٔ ٓ ٠ٚٔ٣ب ث ٖ٤اُزغٔ٤غ ٝاُزؾَِ٤
ٍ 8 ٞٛبػبد ( ٍ 6بػبد ُِ٘وَ ٍٝبػزبٕ ُِزْـٝ )َ٤ػ٘لٓب ٌٕٞ٣مُي ؿ٤و ٓزبؽب رؾلع اُؼ٘٤خ
ػِ ٠كهعخ ؽواهح أهَ ٖٓ ٓ 4ئ٣ٞخ ٌُٖٝك ٕٝرغٔ٤لٝ .كٛ ٠ن ٙاُؾبُخ كبٕ اهٖٝ ٠هذ
َٓٔٞػ ثٝ ٖٓ ٚهذ اُغٔغ اُ ٠اُزؾٍِ 24 ٞٛ َ٤بػخ.
- 29 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 6 . 1رحعيز انؼيُخ Sample preparation
رؾٚو اٛ٧جبم أُؼؤخ ٌ٣ٝزت ػِٜ٤ب ههْ اُؼ٘٤خ ،اُزقل٤ق ،اُزبه٣ـ ٝأ ١ث٤بٗبد أفو ٟهجَ
اُزؾِ٣ٝ .َ٤ؾٚو ػِ ٠ا٧هَ ٛجوبٕ ٓؼؤبٕ ٖٓ اُيعبط ( ) 2ٍْ 65أ ٝثالٍز٤ي ( ) 2ٍْ 57
ٌَُ رقل٤ق ٍ٤زْ افزجبه .ٙرقِ ٜاُؼ٘٤خ أ ٝرقل٤لبرٜب ع٤لا ( ٓ 25وح اُ ٠أػِٝ ٠اُ ٠أٍلَ) أ( ٝ
اُ ٠آ٧بّ ٝاُقِق)ٝ .افز٤به٣ب ٌٖٔ٣اٍزقلاّ ٛياى ًٜوثُٔ ٠لح 15صبٗ٤خ ُقِ ٜاُؼ٘٤خ.
. 7 . 1انًٕاد انالسيخ نهزمذيز
. 1 . 7 . 1انجيئخ انًظزخذيخ ك ٠اُزول٣و ٣ ٝغت إٔ رٌ ٕٞاُج٤ئخ ٛجوب ُِطوم اُو٤بٍ٤خ
اُؾل٣ضخ ٛ ٌ٤ُٝجوب ُٔب ٓ ٞٛزٞاكو ٖٓ اُج٤ئبد ك ٠اَُٞم أُؾًِٔ ٠ب ٣غت
إٔ ٌٕٞ٣االفز٤به ٛجوب ُٔب أّ٤و اُ ٖٓ ٚ٤ث٤ئبد رؼط ٠أػلاك ؽو٤و٤خ (ػبُ٤خ)
ٝمُي ٛجوب ُجوٗبٓظ ٝ QC/QAاُزول٣و آب إٔ :ٌٕٞ٣
. 1 . 1 . 7 .1اُزول٣و ثبٍزؼٔبٍ انجيئبد انؼبنيخ فٗ يحزٕاْب يٍ انًغذيبد ٓضَ ث٤ئخ
Plate count agar (tryptone glucose yeast agar) . 1 . 1 . 1 . 7 . 1
ًٝبٗذ ّبئؼخ االٍزؼٔبٍ ك ٠أُبٛٝ .٠ٙن ٙاُج٤ئخ ال ٖ٘٣ؼ ثبٍزقلآٜب اال ك ٠ؽبُخ اٍزٌٔبٍ
ػَٔ ٍبثن ٓضَ ثؾش أُ ٝؼَٔ كهاٍبد ٓوبهٗٓ ٚغ اُج٤ئبد ا٧فوٝ .ٟمُي ٜٗ٧ب رؼط ٠أػلاك
ٖٓ اُجٌزو٣ب أهَ ٖٓ رِي اُز ٠رظٜو ػِ ٠اُج٤ئبد أُ٘قلٚخ كٓ ٠ؾزٞاٛب ٖٓ أُـن٣بد ٝاُز٠
ٍ٤وك مًوٛب كٔ٤ب ثؼل.
- 30 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٝروً٤ت ث٤ئخ ً Plate count agarب٥ر:٠
Tryptone 5.0 g
Yeast extract 2.5 g
Glucose 1.0 g
Agar 15.0 g
Reagent-grade water 1L
Adjust pH at 7.0 +/- 0.2 after autoclaving for 15 min.
. 2 . 1 . 1 . 7 . 1ثبٍزؼٔبٍ ث٤ئخ ٠ٛٝ m-HPC agarرَزقلّ كوٓ ٜغ ٛو٣وخ أؿْ٤خ
اُزوّ٤ؼ ٝ Membrane Filter methodاُز٤ٍ ٠وك مًوٛب كٔ٤ب ثؼل ٝروً٤ت اُج٤ئخ:
Peptone 20 g
Gelatin 25 g
Glycerol 10 mL
Agar 15 g
Reagent-grade water 1L
رقِ ٜكٓ ٠بء اُزؾ٤ٚو عٔ٤غ أٌُٗٞبد ػلا اُغَِوٚ٣ .ٖ٣ج pH ٜػ٘ل 7.1
ثبٍزؼٔبٍ اُٖٞكا اٌُبٞٗ 1 ( ٚ٣ٝهٓبٍ) ٝرَقٖ ثج ٜء اُ ٠كهعخ اُـِ٤بٕ ك ٠ؽٔبّ
ٓبئُِ ٠نٝثبٕٚ٣ ،بف اُغَِو ٖ٣صْ رؼوْ ك ٠اٝ٧رًٞالف ػِ ٠كهعخ ٓ 121ئٚ٣ٞ
ُٔلح 5كهبئن ٌٖٔ٣ٝػلّ رؼو ْ٤اُج٤ئخ ٓغ اُؾوٓ ك ٠االٍزقلاّ ُٔ٘غ اُزِٞس.
- 31 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
:َو ثبٍزؼٔبٍ انجيئبد انًُخفعّ فٗ يحزٕاْب يٍ انًغذيبد ٓض٣ اُزول. 2 . 1 . 7 .1
٠ٌُِو اُؼلك ا٣ رول٠غ اُطوم أَُزقلٓخ ك٤ٔب ٓغ عٌٜٖٓٔ اٍزقلا٣ٝ R2A agar ئخ٤ث
Surface ٠وخ اُيهع اَُطؾ٣وٛ –Poured plate method ٚثٞجبم أُٖجٛ٧ب (ا٣ُِجٌزو
.)Membrane filter method خ اُلبهىح٤ْؿ٧وخ ا٣وٛ –or Spread plate method
يحٛب عبٛاكوٞ ؽبُخ ػلّ ر٠ئخ ك٤ت اُج٤ًروٝ .ٕئزبٕ اَُبثوزب٤ ٖٓ اُج٠ِ أػلاك أػ٠ رؼط٠ٛٝ
:ٞٛ
Yeast extract 0.5 g.
Proteose peptone NO.3 or polypeptone 0.5 g.
Casamino acid 0.5 g.
Glucose 0.5 g.
Soluble starch 0.5 g
Dipotassium hydrogen
phosphate K2HPO4 0.3 g
Magnesium sulfate heptahydrate
MgSO4 7H2O 0.05 g
Sodium pyruvate 0.3 g.
Agar 15 g.
Reagent-grade water 1 L.
- 32 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
4 رٚج ٜؽٔٙٞخ اُج٤ئخ pHػ٘ل 7.2ثبٍزقلاّ كا ٟثٞربٍ٤ٛ ّٞ٤لهٝع ٖ٤كٍٞلبد
K2HPOأ ٝثٞربٍ ّٞ٤كا٤ٛ ٟلهٝع ٖ٤كٍٞلبد K H2 PO4هجَ اٙبكخ ا٥عبه .رَقٖ اُج٤ئخ
ك ٠ؽٔبّ ٓبئ ٠الماثخ ا٥عبه ٝرؼوْ ػ٘ل ٓ 121ئ٣ٞخ ُٔلح 15كه٤و.ٚ
أ ٝث٤ئخ NWRI agar or Heterotrophic Plate Count Agar
)(HPCA
ٌٖٔ٣ٝاٍزقلاّ ٛن ٙاُج٤ئخ ٓغ عٔ٤غ ٛوم رول٣و اُؼل اٌُُِِ ٠جٌزو٣ب (اٛ٧جبم
أُٖجٞث ،Poured Plate ٚاُيهع اَُطؾ ،Spread Plate ٠ا٧ؿْ٤خ
اُلبهىحً ٠ٛٝ .)Membrane Filter Methodsج٤ئخ ٓ٘قلٚخ ك ٠أُـن٣بد رؼط٠
أػلاك ػبُ٤خ ٖٓ اُجٌزو٣ب ػٖ ؽبُخ اٍزقلاّ اُج٤ئبد اُؼبُ٤خ أُـن٣بدٝ .هل ال رٞعل ٛنٙ
اُج٤ئخ عبٛيح اُزوً٤ت ُنا ٌٖٔ٣رؾ٤ٚوٛب ٖٓ ٌٓٗٞبرٜب اُزبُ٤خ:
Peptone 3 g.
Soluble casein 0.5 g.
K2 HPO4 0.2 g.
MgSO4 0.05 g.
FeCl3 0.001 g
Agar 15 g.
Reagent-grade water 1 L.
رٚج ٜاُؾٔٙٞخ ػ٘ل pH 7.2هجَ اُزؼو ْ٤ك ٠اٝ٧رًٞالف ُٔلح 15كه٤و ٚػ٘ل ٓ 121ئ.ٚ٣ٞ
. 2 . 7 . 1أغشيخ انززشيح ٓ Membrane filterؼؤخ هطو ٝ ْٓ 47صوٞة Boresهطو
ٌ٤ٓ ,47و.ٕٝ
- 33 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 3 . 7 . 1يحبنيم انزخفيف ٌٖٔ٣ Dilution solutionsاٍزؼٔبٍ أؽل أُؾبَُ٤
اُزبُ٤خ ك ٠اُزقل٤ق.
ُ Buffer waterزؾ٤ٚو Stock buffer solution . 1 . 3 . 7 . 1يبء يُظى
امة 34عواّ ثٞربٍ ّٞ٤كا٤ٛ ٟلهٝع ٖ٤كٍٞلبد ( )KH2 PO4ك500 ٠
َِٓ ٓبء ٚ٣ٝ Reagent-grade waterج pH ٜػ٘ل 0,5 -/+ 7.2ثبٍزقلاّ ٓؾٍِٞ
ٗٞهٓبٍ ٕٞك٤ٛ ّٞ٣له٤ًَٝل ٣ٝقلق اُ 1 ٠ثٔبء .Reagent-grade water
أٙق ٖٓ َِٓ 1,25أُؾِ ٍٞاَُبثن ( ٓ ٖٓ َِٓ 5 ٝ (Stock solutionؾًِِٞ ٍٞه٣ل
أُـَ٘ 81,1( ّٞ٤عواّ ٖٓ )MgCl2 .6H2 Oاُُ ٠زو reagent-grade water
ٞ٣ىع ثٌٔ٤بد َِٓ 2 -/+ 99أ َِٓ 0,2 -/+ 9 ٝثؼل اُزؼؤُ ْ٤لح 15كه٤وخ.
. 2 . 3 . 7 . 1يبء انججزٌٕ Peptone water
ؽٚو ٓؾِ ٖٓ %10 ٍٞاُججز ٕٞكٓ ٠بء ٓوطو.
فلق اُٝ % ,1 ٠اٙج pH ٜػ٘ل ٝ . 6,8ىع ثٌٔ٤بد َِٓ2-/+ 99أ َِٓ ,2 -/+ ٝثؼل
اُزؼؤُ ْ٤لح 15كه٤وخ.
ال رؼِن اُجٌزو٣ب ك ٠أٓ ٟبء رقل٤ق أًضو ٖٓ 30كه٤وخ ػ٘ل كهعخ ؽواهح اُـوكخ ٕ٧
أُٞد ٝاُ٘ٔ ٖٓ ٞأٌُٖٔ إٔ ٣ؾلس.
. 8 . 1انزحعيٍ Incubation
ُِزطبثن ٓغ ثوٗبٓظ ؽٔب٣خ اُج٤ئخ آ٧و٤ٌ٣خ ك ٠أػٔبٍ أُواهجخ كبٕ رؾ ٖ٤ٚاٛ٧جبم ٣غت إٔ ٣زْ
ػ٘ل ٓ 35ئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخٝ .اال ك٤قزبه ىٖٓ ٝكهعخ ؽواهح اُزؾٛ ٖ٤ٚجوب ُٔب ٞٓ ٞٛاكن
ػُِٔ ٚ٤واهجخ اُزـ٤واد كٞٗ ٠ػ٤خ أُ٤ب .ٙأػِ ٠أػلاك ٣زؾَٖ ػِٜ٤ب ثبُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل 20اُ28 ٠
ٓئ٣ٞخ ثؼل 5اُ 7 ٠أ٣بّ.
فالٍ كزوح اُزؾ ٖ٤ٚؽبكع ػِ ٠اُوٞٛثخ كافَ اُؾٚبٗخ ثؾ٤ش ال ٘ٛ ٌٕٞ٣بى كول ك ٠هٞٛثخ
اُج٤ئخ ك ٠اٛ٧جبم أًضو ٖٓ ٣ٝ .% 15ؼزجو مُي ٜٓٔب ك ٠ؽبُخ كزوح اُزؾ ٖ٤ٚاُطِ٣ٞخٌٖٔ٣ٝ .
رٞك٤و مُي ثٙٞغ ٛجن ثٓ ٚبء ك ٠هبع اُؾٚبٗخ ٓغ ٓواػبح ٓ٘غ رٌٕ ٕٞلأ ػِ ٠عَْ اُؾٚبٗخ
أ ٝا٧هف ُٝنُي ٣غت إٔ رٌ ٖٓ ٕٞاُِٖت اُـ٤و هبثَ ُِٖلأ Stainless steelأ ٝاّٞ٤ُ٘ٓٞ٧
اَُبُت .Anodized aluminumك ٠ؽبُخ اُؾٚبٗبد اُز ُْ ٠رؼلٍ هٞٛثزٜب ٙٝ ٌٖٔ٣غ
اٛجبم اُجزو ٟأُيهٝػخ ك ٠أً٤بً ثالٍز٤ي أ ٝآٗ٤خ ٓؾٌٔخ اُـِن.
- 34 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 9 . 1ػذ ٔرظغيم انُزبئظ Counting and Recording
. 1 . 9 . 1فٗ غزيمخ األغجبق انًصجٕثّ أٔ غزيمخ انشراػخ ػهٗ ططح انجيئخ
Poured and Spread platesرؼل عٔ٤غ أَُزؼٔواد ػِ ٠اٛ٧جبم أُقزبهح ثؼل اٗزٜبء
كزوح اُزؾٝ .ٖ٤ٚك ٠ؽبُخ االٙطواه اُ ٠رؤع َ٤ػِٔ٤خ اُؼل ،رؾلع اٛ٧جبم ػ٘ل كهعخ – 5
ٓ 10ئ٣ٞخ ُٔلح ال ري٣ل ػٖ ٍ 24بػ ٌُٖٝ ٚال رغؼَ مُي ّ٤ئب ٓؼزبكاًٝ .نُي رَغَ ٗزبئظ
اٛ٧جبم أُوعؼ٤خ ُِ Controlزؼوٗ ٖٓ) ْ٤لٌ اُج٤ئخ ٝرؾ ٖٚثل ٕٝرِو٤ؼ أ ٝثزِو٤ؾٜب
ثٔؾِ ٍٞاُزقلجق ٝأَُزقلّ ك ٠ػِٔ٤خ اُزقل٤ق اما رْ رقل٤ق اُؼ )ٚ٘٤ك ٠روو٣و ٌَُ ُٖٓ ٛٞ
اُؼ٘٤بد.
٣ٝزْ ػل أَُزؼٔواد اُ٘برغخ آب ٣ل٣ٝب ٝثبٍزؼٔبٍ ِ٤ٍٝخ رٌج٤و ٓٞاكن ػِٜ٤ب ٓضَ ػلاك
أَُزؼٔواد ٝ .Quebec Colony Counterك ٠ؽبُخ ػلّ رٞاكو اُغٜبى ٣زْ اُؼل ثبٍزؼٔبٍ
أ٣خ ِ٤ٍٝخ ٓزٞاكوح ٓٔبصِخ الػطبء رٌج٤و ٓغ اٍزؼٔبٍ االٙبءحٝ .رزٞاكو ِ٤ٍٝخ اُؼل ثبٍزؼٔبٍ
ػلاك اٝرٓٞبرٝ ،٢ٌ٤ك ٚ٤رَزقلّ ّبّخ رِ٤لي٤ٗٞ٣خ ٓغ ٝعٞك ٓبٍؼ اُطجن ُزٌج٤و اُقال٣ب.
ٝاٍزؼٔبُٓ ٚوج ٍٞاما رْ روٓٝ ٚٔ٤٤وبهٗخ اُ٘زبئظ ثبُؼل اُ٤ل.ٟٝ
ُٝؾوٖ اٛ٧جبم أُؼلحٙٞ٣ ،غ ثٜب ؽغْ ٖٓ اُؼ٘٤خ ثبٍزقلاّ ٓبٕخ ٣ل ٚ٣ٝأ ٝأٝرٓٞبرٚ٤ٌ٤
ثؾ٤ش ٣ؼط ٠ثؼل اُزؾٓ ٖ٤ٚب ثَٓ 300 – 30 ٖ٤زؼٔوح ك ٠اُطجنٝ .هل ِ٣غؤ اُ ٠رقل٤ق
اُؼ٘٤خ رقل٤لبد ٓززبُٓ ٚ٤غ اٍزقلاّ أًضو ٖٓ رقل٤ق ك ٠ؽوٖ اٛ٧جبم ٝمُي ُِؾٖ ٍٞػِ٠
اُؼلك ك ٠اُؾلٝك أُنًٞه.ٙ
ك ٠أُؼزبك إٔ ال َ٣زقلّ ُالفزجبه اًضو ٖٓ ٖٓ َِٓ 2اُؼ ،ٚ٘٤ػِ ٠أٗ ٚك ٠ؽبُخ اُؾٖ ٍٞػِ٠
أهَ ٖٓ َٓ 30زؼٔوح ثبٍزقلاّ ٖٓ َِٓ 2اُؼٌ٣ ٚ٘٤زت اُؼلك أُزؾَٖ ػِ ٚ٤كؼال ثٖوف
اُ٘ظو ػٖ اُوبػلح أُنًٞه .)300-30( ٙثٜنا االٍزض٘بء ٣ ،ئفن ك ٠االػزجبه أٛ ٟجن ٣ؼط٠
ػلك ٓب ث 300- 30 ٖ٤ك ٠رول٣و اُؼلكٝ .رؾَت ا٧ػلاك ٝرَغَ اُ٘ز٤غ ٚػِٕٞ ٠هح ػلك
أَُزؼٔواد ٖٓ َِٓ /اُؼ.Colony forming unit/ ml (cfu/ml) ٚ٘٤
CFU/mL = colonies counted -
Actual volume of sample in dish, mL
- 35 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اما ُْ ٣زٞاعل ٛجن ٣ؼطٓ ٠ب ثَٓ 300-30 ٖ٤زؼٔوٝ ٙرٞاعل ٛجن أ ٝأٛجبم أًضو ٖٓ 300
َٓزؼٔوح كَ٤زؼَٔ ك ٠رَغ َ٤اُ٘ز٤غ ٚاُؼل ك ٠اٛ٧جبم ماد اُؼلك ا٧هوة ٓب ٌٖٔ٣اُ300 ٠
َٓزؼٔوٝ .ٙرؾَت ا٧ػلاك ًٔب مًو أػال ٝ ٙرَغَ اُ٘ز٤غخ أٚ٣ب ػِٕٞ ٠هح .CFU/ ml
اما ُْ رؼط ٠اٛ٧جبم ٖٓ عٔ٤غ اُزقل٤لبد أُقزِلخ أَُزؼِٔ ٚأ٣خ أػلاك ٖٓ اُجٌزو٣ب رٌزت
اُ٘ز٤غ ٚأهَ ٖٓ ٝاؽل ٓوَٓٞب ػِ ٠اُزقل٤ق كٔضال اما ًبٕ ؽغْ اُؼ ٚ٘٤أَُزقلّ َِٓ 0.01
رٌزت اُ٘ز٤غ ٚأهَ ٖٓ ٝ 100ؽلح رٌَٓ ٖ٣ٞزؼٔوح .َِٓ/ CFU
اما ىاك اُؼلك ك ٠اُطجن ًض٤وا ػٖ َٓ 300زؼٔو ٙال رٌزت اُ٘ز٤غخ أػلاك ًج٤و ٙال رؼل “To
) .numerous to count” (TNTCرؼل أَُزؼٔواد ك ٖٓ 2ٍْ ٠اُطجن كبما ًبٗذ أهَ
ٖٓ 2ٍْ / 10رؼل أَُزؼٔواد كٓ 13 ٠وثغ رٌٔٓ ٕٞضُِ ٚزٞى٣غ أَُزؼٔواد ك ٠اُطجن ( 7
ٓوثؼبد ػجو اُطجن أكو٤بٓ 6 ،وثؼبد ػجو اُطجن هأٍ٤ب ٓغ اُؾوٓ ك ٠ػلّ هواءح اُؼلك ك٠
ٓوثغ ٝاؽل ٓوربٕ) ٚ٣ٝوة ؽبَٕ اُغٔغ ك 5 ٠اما ًبٗذ َٓبؽخ اُطجن ( 2ٍْ 65اٛ٧جبم
اُيعبع٤خ) ٣ٝ ،ؾَت اُؼلك ػِ ٠أٍبً إٔ َٓبؽخ اُطجن 2ٍْ 57ك ٠ؽبُخ اٍزؼٔبٍ أٛجبم
ثالٍز٤ي .ػ٘لٓب ٣ي٣ل ػلك أَُزؼٔود ػٖ َٓ 10زؼٔواد 2ٍْ/رؼل ٓ 4وثؼبد ٣ٝؾَت
أُز ٍٜٞكٚ٣ٝ 2ٍْ ٠وة ك ٠ػبَٓ ٓ٘بٍت ُؾَبة أَُزؼٔواد ك ٠اُطجنٛ .نا اُؼبَٓ ٞٛ
65ك ٠ؽبُخ اٍزؼٔبٍ اٛ٧جبم اُيعبع٤خ 57 ،ك ٠ؽبُخ اٍزؼٔبٍ اٛ٧جبم اُجالٍز٤ٌ٤خ.
ػ٘لٓب رٌ ٕٞاٛ٧جبم ٓيكؽٔخ ثبَُٔزؼٔواد ٌٕٞ٣ٝاُؼلك أًجو ٖٓ َٓ 100زؼٔوح ك، 2ٍْ ٠
رَغَ اُ٘ز٤غخ أًجو ٖٓ ٓ 6500وَٓٞخ ػِ ٠أهَ ؽغْ ٖٓ اُؼ٘٤خ َٓزؼَٔ ك ٠ؽبُخ اٍزؼٔبٍ
اٛ٧جبم اُيعبع٤خ أ ٝأًجو ٖٓ ٓ 7500وَٓٞخ ػِ ٠أهَ ؽغْ اٍزؼَٔ ٖٓ اُؼ٘٤خ ك ٠ؽبُخ
اٛ٧جبم اُجالٍز٤يٝ .رَغَ اُ٘ز٤غخ ػِٕٞ ٠هح ٝؽلح رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔوح .َِٓ/ CFU
ػ٘ل ػل أَُزؼٔواد أُْ٘ٞهح ثٞاٍطخ ٝ Spreaderأُزلافِخ ػِ ٠اُطجن أ ٝاٛ٧جبم
أُقزبهح ،ػل أَُزؼٔواد ػِ ٠أعياء ٓٔضِخ رٌ ٕٞأَُزؼٔواد كٜ٤ب ٓٞىػخ ع٤لا.
- 36 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
رؼل أَُزؼٔواد أُْ٘ٞهح ػِ ٠أٜٗب َٓزؼٔوح ٝاؽلح ك ٠اُؾبالد اُزبُ٤خ:
ٍَِِخ ٖٓ أَُزؼٔواد ٝاُز ٠رظٜو ًؤٜٗب ٗبّئخ ٖٓ رلز٤ذ رغٔغ ٖٓ اُجٌزو٣ب Bacterial
ٝ clumpاُز ٌٕٞ٣ ٠كٜ٤ب ا٥عبه ٓقزِطب ٓغ اُؼ٘٤خ؛
االٗزْبه اُ٘برظ ًل ٖٓ ِْ٤اُ٘ٔ ٞث ٖ٤ا٥عبه ٝهبع اُطجن؛
أَُزؼٔوح اُز ٠رْ٘ؤ ػِٕٞ ٠هح ك ٖٓ ِْ٤أُ٤ب ٙػ٘ل اُؾبكخ أ ٝػٍِ ٠طؼ ا٥عبه.
اُؾبُزبٕ ا٧ف٤وربٕ رْ٘ب ػٖ رغٔغ اُوٞٛثخ ػ٘ل ٗوطخ ٜٓ٘ب ْ٘٣ؤ االٗزْبهً .ض٤وا ٓب رـط٠
أًضو ٖٓ ٖٗق اُطجن ٝرؼ٤ن اُؾٖ ٍٞػِ ٠ػلك ؽو٤و.٠
رؼل ًَٔزؼٔواد ٓ٘لوكح أَُزؼٔواد اُز ٠رٌٓ ٕٞزغبٝهح علا ٌُٜ٘ٝب َُ٤ذ ٓزالَٓخ ،ػِ ٠إ
رٌ ٕٞأَُبكخ ثٜ٘٤ب ػِ ٠ا٧هَ َٓب٣ٝخ ُوطو إٔـو َٓزؼٔوح .ػل أَُزؼٔواد أُزالَٓخ اُز٠
رقزِق ك ٠أُظٜوٓ ،ضَ اٌَُْ أ ٝأًَُِ ٕٞزؼٔواد ٓ٘لوكح.
اما اؽز ٟٞاُطجن ػِٓ ٞٔٗ ٠جؼضو أًزت ك ٠اُزوو٣و )ٝ .Spreader (Sprػ٘لٓب رٌ ٕٞاٛ٧جبم
ال ٌٖٔ٣ػلٛب ٣ ُْ ٚٗ٧زْ اُ ٍٕٞٞاُ ٠اُزقل٤ق أُ٘بٍت ٍ ،و ٛٞاٛ٧جبم ،رِٞس ،أ ٝإٔ
اٛ٧جبم أُوعؼ٤خ Controlأظٜود إٔ اُج٤ئخ ِٓٞصخ أ ٝإٔ اُزؼو٣ ُْ ْ٤زْ ث٘غبػ ٌ٣زت ك٠
اُزوو٣و ).Laboratory accident (LA
- 37 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 2 . 9 . 1غزيمخ أغشيخ انززشيح Membrane filter method
ػل أَُزؼٔواد ػِ ٠أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ ثبٍزؼٔبٍ ٍزوٌٍٞٞ٣ث٤ي ٌٓ٤وٌٍٞٝة
Stereoscopic microscopeثوٞح رٌج٤و 10آُ 15 ٠وح٣ .لٙٝ َٚغ اُطجن ٓبئَ
ثيا٣ٝخ 45كهعخ ػَِٓ ٠وػ أٌُ٤وٌٍٞٝة ٚ٣ٝجٖٓ ٜله اُٞٚء هأٍ٤ب ػِ٠
أَُزؼٔواد .أكً َٚضبكخ َُِٔزؼٔواد ػِ ٠ؿْبء اُزوّؼ 20اُ .200 ٠اما ًبٗذ
أَُزؼٔواد ٕـ٤وح ٌُٜ٘ٝب َُ٤ذ ٓيكؽٔخ كبٕ ؽلٝك أًجو ٖٓ اَُبثوخ رؼزجو ٓوجُٞخ.
ػل ًَ أَُزؼٔواد ػِ ٠ؿْبء اُزوّ٤ؼ ػ٘لٓب ٘ٛ ٌٕٞ٣بى أهَ أَ٣ ٝبَٓ ٟٝزؼٔوربٕ ك٠
أُوثغٝ .ػ٘لٓب ٘ٛ ٌٕٞ٣بى ٓب ث 3 ٖ٤آَُ 10 ٠زؼٔواد ك ٠أُوثغ ػل ٓ 10وثؼبد ٝاؽَٖ
ػِ ٠أُزٓ ٌَُ ٍٜٞوثغ .أٓب اما ًبٕ ٘ٛبى 10آَُ 20 ٠زؼٔوح ك ٠أُوثغ ػل ٓ 5وثؼبد
ٝاؽَت أُز / ٍٜٞأُوثغٚ٣ .وة أُز٣ٝ 100 X ٍٜٞوَْ ػِ ٠ؽغْ اُؼ٘٤خ ُِؾٖ ٍٞػِ٠
اُؼلك ٝ .َِٓ /اما ًبٕ ٘ٛبى أًضو ٖٓ َٓ 20زؼٔوح ك ٠أُوثغ ٌ٣زت اُؼلك أًجو ٖٓ 2000
٣ٝوَْ ػِ ٠ؽغْ اُؼ٘٤خٌ٣ .زت ٓز ٍٜٞاُؼلك ثزٔ٤٤ي ٝؽلاد رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔواد ٓؾَٞثخ.
Computing and Reporting Counts . 12 . 1حظبة ٔرظغيم األػذاد
إطالػ ٝؽلاد رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔوح )ٕٝ ٞٛ Colony –forming units (CFUق
ُِطوم أَُزقلٓخ؛ ُنُي ،رَغَ ًَ ا٧ػلاك ػِٕٞ ٠هح ٝؽلاد رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔوح٣ٝ .نًو
ك ٠اُزوو٣و اُطو٣وخ أَُزقلٓخ ،ؽواهح اُزؾٝ ٖ٤ٚاُيٖٓٝ ،اُج٤ئخٓ .ضال :
CFU/ml, pour plate method, 35o C/48 h, plate count agar.
ُٝؾَبة ػلك اُجٌزو٣ب ُٜز٤وٝروٝك٤خ ٣ ،CFU/mlوَْ اُؼلك أٌَُُِِ ٠زؼٔواد أ ٝأُز( ٍٜٞ
اما رْ ػَٔ ٛجوبٕ ٖٓ ٗلٌ اُزقل٤ق) ٛ /جن ث٘لٌ اُؾغٍْ .غَ ؽغ ّٞاُؼ٘٤خ أَُزؼِٔخ ٝػلك
أَُزؼٔواد ػِٛ ًَ ٠جن رْ ػل ٙأ ٝؽَبث.ٚ
اما ًبٕ اُؼلك اُ٘برظ ٌٓ ٖٓ ٕٞههٔبٕ كٌ٤زت ًٔب ٞٛأٓب اما ًبٕ صالصخ أههبّ ك٘٤ظو اُ ٠اُوهْ
اُضبُش اما ًبٕ أهَ ٖٓ ٣ 5ؾ ٍٞإُ ٠لو ٝاما ًبٕ أًجو ٖٓ ٣ 5ؾ ٍٞاُوهْ اُضبٗ ٠اُ ٠اُؼلك
- 38 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ا٧ػٌِ٣ٝ ٠زت اُوهْ اُضبُش ٕلو كٔضال 142رٌزت ٣ 155 ، 140ؾ ٍٞاُ 160 ٠أٓب 35
كٌ٤زت ًٔب .35 ٞٛ
. 11 . 1رحهيم انزحيش Analytical bias
٣زغ٘ت ػلّ اُلهخ ك ٠اُؼل ثَجت ػلّ االٛزٔبّ ،ػلّ ٗظبكخ أعٜيح اُؼل ٝثبُزبُ ٠ؽغت اُوإ٣خ،
أ ٝػلّ آٌبٗ٤خ رٔ٤٤ي أَُزؼٔواد .اُؼبِٓ ٖ٤ك ٠أُؼَٔ ٝاُن ٖ٣ال َ٣زط٤ؼ ٕٞعؼَ اُلوٝم ثٖ٤
هواءربٕ ٖٓ ٗلٌ اُطجن ك ٠ؽلٝك ٝ %5اُلوٝم ٗز٤غخ اُزؾِ َ٤ثٞاٍطخ كوك آفو ك ٠ؽلٝك
%10ػِ ْٜ٤ثؾش أَُججبد ٝاىاُزٜب.
- 39 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 2غزيمخ األغجبق انًصجٕثخ Poured Plate Method
. 1 . 2انؼيُبد ٔرغٓيش انؼيُخ Samples and sample preparation
ٍجن ر٘ب ٍٝمُي ك ٠اُغي٣خ ا ٖٓ ٠ُٝ٧أُؾبٙواد Module 1
. 2 . 2رخفيف انؼيُخ Sample dilution
ؽٜي ٓؾِ ٍٞاُزقل٤ق ًٔب مًو ك3 . 7 . 1 ٠
. 1 . 2 . 2اخزيبر انزخفيف Selecting dilutionافزبه اُزقل٤ق ػِ ٠إٔ ٌٕٞ٣اُؼلك
أٌَُُِِ ٠زؼٔواد ػِ ٠اُطجن ٓب ثٓ .300 – 30 ٖ٤ضال ،ػ٘لٓب ٌٕٞ٣اُؼلك
أُزٞهغ ُِجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ٓورلغ اُ ،3000 ٠ؽٚو اُطجن ٖٓ رقل٤ق .210
ثبَُ٘جخ ُـبُج٤خ ػ٘٤بد ٓ٤ب ٙاُْوة ،كبٕ اٛ٧جبم أُ٘بٍجخ ُِؼل هثٔب ر٘زظ ػٖ
.2 -
اٍزؼٔبٍ آَِ ٖٓ َِٓ ,1 ٝ ،اُؼ٘٤خ اُـ٤و ٓقللخ ٖٓ َِٓ 1 ٝرقل٤ق 10
. 2 . 2 . 2ليبص حغى انؼيُخ Measuring sample volumeاٍزؼَٔ ٓبٕخ ٓؼؤخ
ُ٘وَ اٝ َٕ٧اُ٘والد اُزبُ٤خ ٖٓ ًَ ىعبعخ .اما رِٞصذ أُبٕخ هجَ ارٔبّ ػِٔ٤خ
اُ٘وَ ثلٍ أُبٕخ ثؤفوٓ ٟؼؤخ .اٍزؼَٔ ٓبٕخ أفوُِ٘ ٟوَ ٖٓ ًَ رقل٤ق .ال
رو ّٞثزؾ٤ٚو اُزق٤لبد أ ٝرٖت اٛ٧جبم ك ٠أٌُْ أُجبّوح .فن اُؾنه ػ٘ل أفن
أُبٕخ أُؼؤخ ٖٓ ػِجخ أُبٕبدُ٘ٔٝ ،غ اُزِٞس ،ال رغؼَ ٜٗب٣خ أُبٕخ رٌِٔ
كٛٞخ أُبٕبد ا٧فو ٟػ٘ل ٍؾجٜب ٖٓ ػِجخ أُبٕبدً ،نُي ال رالٌٓ ٜٗب٣خ
أُبٕخ ُؾٞاف ا ٝههجخ ىعبعبد اُزقل٤ق .ػ٘ل ٍؾت ػ٘٤خ ال رـٌٔ أُبٕخ أًضو
ٖٓ ٍْ 2,5أٍلَ ٍطؼ اُؼ٘٤خ ك ٠ىعبعخ اُؼ٘٤خ أ ٝاُزقل٤ق.
- 40 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 3 . 2 . 2ليبص انزخفيفبد Measuring dilutions
ػ٘ل افواط أعياء اُؼ٘٤خ ،اعؼَ أُبٕخ ثيا٣ٝخ ؽٞاُ 45 ٠كهعخ ٛٝوف أُبٕخ ٌِٔ٣هبع
اُطجن أ ٝكافَ ههجخ ىعبعبد اُزقل٤ق .اهكغ ؿطبء اُطجن ثلهعخ رَٔؼ ثبكفبٍ أُبٕخ.
أٍؼ ثضبٗ٤ز ٖ٤اُ ٠أهثؼخ صٞإ ُ٤قوط ٓب ك ٠أُبٕخ .اما ُْ رٌٖ أُبٕخ ٖٓ اُ٘ٞع اُن٣ ٟقوط
ًَ ٓب ثٜب ٛج٤ؼ٤ب ،أٌُ ثطوف أُبٕخ عيء آفو عبف ٖٓ هبع اُطجن ٖٓ ٌ٤ُ .أُل َٚإٔ
ٌٕٞ٣ثبُٔبٕخ هطؼخ هطٖ ٘٣ٝلـ كٜ٤ب ثوكن ثبُلْ الٗياٍ ٓب ثٜب ٖٓ ٓزجو .٠ػ٘ل ه٤بً ، َِٓ ,1
كع اُؼ٘٤خ أُقللخ رَ٘بة ٖٓ أُبٕخ ؽز٣ ٠قوط ٜٓ٘ب .َِٓ ٝ1روكغ أُبٕخ ثل ٕٝإٔ رالٌٓ
اُطجن ٓوح أفوٙٞ٣ .ٟغ اُؾغْ أُ٘بٍت ٖٓ اُؼ٘٤خ أ ٝرقل٤لٜب ك ٠اُطجن أُؼوْ هجَ اٙبكخ
ث٤ئخ اُيهع أُٖٜ٘وحٝ .الٍزؼٔبٍ أهَ ٖٓ ٖٓ َِٓ ٝ1اُؼ٘٤خ اٍزؼَٔ ٍَِِخ ٖٓ اُزقل٤لبد ٝال
رو ٖٓ َِٓ ,1 ٌ٤اُؼ٘٤خ اٍ٧بٍ٤خ .ؽٚو ػِ ٠ا٧هَ ٌٓوهإ ٖٓ اٛ٧جبم ٌَُ رقل٤ق
َٓزؼَٔ .ثؼل ٙٝغ اُؼ٘٤خ أ ٝاُزقل٤ق ٜٓ٘ب ك ٠اٛ٧جبم ،رٖت اُج٤ئخ ٝافِ ٜثوكن ٝثؾوٓ.
ال ٣غت إٔ ٔ٣و أًضو ٖٓ 20كه٤وخ ٓب ثٙٝ ٖ٤غ اُؼ٘٤خ ك ٠اُطجن ٕٝت اُج٤ئخ ك ٠اٛ٧جبم
ػِ ٠اُؼ٘٤خ.
. 3 . 2اػذاد األغجبق Plating
. 1 . 3 . 2صٓز انجيئخ Melting medium
إٜو اُج٤ئخ اُِٖجخ أُؼؤخ ثزؼوٜٚ٣ب ُٔبء ٣ـِ ٠أ ٝر٤به ٖٓ ثقبه أُبء ك ٠اٗبء ٓـط٠
عيئ٤ب ،رغ٘ت اُزؼو ٘٣اُـ٤و ٙوٝهُِ ٟج٤ئخ ُٔلح ِ٣ٞٛخ ُِؾواهح أُورلؼخ اص٘بء اُٖٜو أٝ
ثؼل .ٙال رؼ٤ل رؼو ْ٤اُج٤ئخ .اما رْ ٕٜو اُج٤ئخ ػِٕٞ ٠هح اعياء اٍزؼَٔ ٓب رْ ُ ُٕٚٞٝلهعخ
االٖٜٗبه ثبُزور٤ت٣ .زقِٔ ٖٓ ا٥عبه أُٖٜ٘و اُن٣ ٟؾز ٟٞػِ ٠هٝاٍت.
رؾلع اُج٤ئخ أُٖٜ٘وح ك ٠ؽٔبّ ٓبئ ٠ػ٘ل 46 – 44كهعخ ٓئ٣ٞخ ؽزٝ ٠هذ االٍزؼٔبٍ،
٣ٝل َٚإٔ ال ري٣ل ٓلح اُؾلع ك ٠اُؾٔبّ أًضو ٖٓ ٍ 3بػبدٝ .ك ٠اٗبء آفو ٙغ روٓٓٞزو ك٠
ٓ٤بٝ ٙػوٗ االٗبء ُ٘لٌ كهعبد اُؾواهح اُز ٠رزؼوٗ ُٜب اُج٤ئخ ٍٞاء ػ٘ل اٖٜٗبهٛب أٝ
ؽلظٜب .ال رؼزٔل ػِ ٠االؽَبً ثبٌُِٔ ُٔؼوكخ كهعخ ؽواهح اُج٤ئخ أُ٘بٍجخ ٝمُي ػ٘ل ٕت
ا٥عبه.
- 41 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اٍزؼَٔ أًٔ Plate count agar, R2A agar, or NWRI agar ٖٓ ٟب مًو ٍبثوب ك٠
. 2 . 1 . 7 . 1هجَ اٍزؼٔبٍ ُ ٛٞعل٣ل ٖٓ اُج٤ئخ افزجو ٓل٘ٓ ٟبٍجزٜب.
. 2 . 3 . 2صت األغجبق Pouring plates
ؽل ٖٓ ػلك اُؼ٘٤بد اُزٍ ٠زؼل ك ٠االٛجبم ثؾ٤ش ال ٔ٣و أًضو ٖٓ 20كه٤وخ ٣ٝل 10 َٚكهبئن
ٓب ث ٖ٤رقل٤ق اُؼ٘٤خ ٕٝت اٛ٧جبمٖ٣ .ت ٓب ث ٖٓ َِٓ 12 – 10 ٖ٤اُج٤ئخ أُٖٜ٘وح
ٝأُؾلٞظخ ػ٘ل كهعخ ٓب ثٓ 46 – 44 ٖ٤ئ٣ٞخ كٛ ًَ ٠جن ثلزؼ ؿطبء اُطجن ثلهعخ رَٔؼ
ثٖت اُج٤ئخ ك .ٚ٤ثؾنه آ٘غ رَبه ٜاُج٤ئخ فبهط كٝهم اُج٤ئخ أ ٝكافَ ؿطبء اُطجن أص٘بء
اُٖتٝ .ػ٘ل ٕت اُج٤ئخ ٖٓ اُلٝهم أ ٝاالٗجٞثخ أُؾلٞظخ ك ٠اُؾٔبّ أُبئ ،٠عللٜب ثٞهم
ٓبٓ أ ٝكٛٞخ ٍٝقٖ كٛٞخ اُلٝهم هجَ اُٖتٓٝ .غ ٕت ًَ ٛجن افِ ٜاُج٤ئخ أُٖٜ٘وح
ٓغ اُؼ٘٤خ ك ٠اُطجن ٝفن اُؾنه ٖٓ اَٗ٤بة اُج٤ئخ ٓغ اُؼ٘٤خ كٞم ؽبكخ اُطجن .ؽوى اُطجن اُ٠
آ٧بّ ٝاُقِق ٝاُ ٠اُٝ ٖ٤ٔ٤اَُ٤به صْ ٓغ ػوبهة اَُبػخ ٝػٌَ٣ .ٚزوى اُطجن ُ٤زِٖت
(فالٍ 10كهبئن)ٝ .ثؼل رِٖجٜب اهِت اٛ٧جبم ٙٝؼٜب ك ٠اُؾٚبٗخ.
. 3 . 3 . 2يزعؼيخ انزؼميى Sterility controls
هاعغ رؼو ْ٤اُج٤ئخ ٤ٓٝب ٙاُزقل٤ق ثٖت أٛجبم ٓوعؼ٤خ ٌَُ ٍَِِخ ٖٓ اُؼ٘٤بد .ؽٚو
ٓوعؼ٤بد اٙبك٤خ ُزول٣و اُزِٞس ثبَُ٘جخ ُٛ٨جبم ،أُبٕبدٞٛٝ ،اء اُـوكخ.
. 4 . 2انزحعيٍ Incubation
. 5 . 2انؼذ ،انزظغيم ،انحظهت ٔانزمزيز
Counting, recording, computing, and reporting
- 42 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 3غزيمخ انُشز ػهٗ األغجبق (انفزد انظطحٗ ػهٗ األغجبق) Spread Plate
Method
. 1 . 3األعٓشح انًؼًهيخ Laboratory apparatus
. 1 . 1 . 3لعجبٌ سعبعيخ Glass rods
اصٖ هٚجبٕ ىعبع٤خ ٖٓوُٞخ Polishedهطو ٝ ْٓ 4ثط ْٓ 200 ٍٞثبُ٘به ثيا٣ٝخ 45
كهعخ ٖٓ ثؼل ٖٓ ْٓ 40أؽل اٛ٧واف .ػؤٜب هجَ االٍزؼٔبٍ
. 2 . 1 . 3يبصبد Pipet
اٍزؼَٔ ٓبٕبد ىعبع٤خٛ ،َِٓ 1 ،وكٜب َٓزل٣و .Rounded tipال رَزؼَٔ أُبٕبد
اُجالٍز٤ٌ٤خ.
. 3 . 1 . 3حعبَخ أٔ فزٌ رغفيف Incubator or drying oven
Fischer Scientific, hand operated, No 08-758 or Lab-Line,
motor driven, No. 1580, or equivalent.
. 2 . 3انجيئبد Media
اما اٍزؼِٔذ ث٤ئخ R2Aكبٕ أكٗ َٚزبئظ ٣زؾَٖ ػِٜ٤ب ثبُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل ٓ 28ئ٣ٞخ ُٔلح 7
أ٣بّ؛ ٝاما اٍزؼِٔذ ث٤ئخ ،NWRIكبُزؾ٣ ٖ٤ٚزْ ػ٘ل 20كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح 7أ٣بّ.
. 3 . 3رغٓيش األغجبق Preparation of plates
ٖ٣ت ٖٓ َِٓ 15اُج٤ئخ أُوؿٞثخ ك ٠أٛجبم ثزوٓ ٟؼؤخ 15X 100أ 15X 90 ٝ؛
٣ٝزوى ا٥عبه ُ٤زِٖت .أالٛجبم أُوِٞثخ ٝأُـطبٍ ٙبثوخ اُزغل٤ق ٌٕٞ٣اُلول ك ٠اُوٞٛثخ
فالٍ اُِ 3 – 2 َ٤عواّ (اٗظو اٌُِْ ٖ٤اُزبُٝ ٖ٤٤اُغل.)ٍٝ
- 43 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
- 44 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اٍزؼَٔ اٛ٧جبم ٍبثوخ اُزغل٤ق كٞها ػوت رغل٤لٜب أ ٝفيٜٗب اُ ٠اٍجٞػ ٖ٤ك ٠أً٤بً ثالٍز٤ي
ٓؾٌٔخ اُـِن ػ٘ل 4كهعخ ٓئ٣ٞخٝ .ثبَُ٘جخ ُٛ٨جبم ٍبثوخ اُزغل٤ق ٝأَُزؼِٔخ كٗ ٠لٌ اُ،ّٞ٤
ٕت َِٓ 25آعبه ك ٠اُطجن ٣ٝغلق كً ٠بث٘٤خ آ٧بٕ Laminar flowػ٘ل كهعخ ؽواهح
اُـوكخ ( 26 – 24كهعخ ٓئ٣ٞخ) ٓغ هكغ اُـطبء ُِؾٖ ٍٞػِ ٠كول 3 – 2عواّ .
. 4 .3انطزيمخ Procedure
ؽٚو رقل٤لبد اُؼ٘٤خ ًٔب ٖ٤٘ٓ ٞٛك ٠اُج٘ٞك ٍبثو ٚاُنًو .
ٙغ ٖٓ َِٓ ,5 - ,1اُؼ٘٤خ ػٍِ ٠طؼ أٛجبم ا٥عبه ٍبثن اُزغل٤ق .اٍزؼَٔ ه٤ٚت ىعبط
ٓ٘ؾ٘ٓ ٠ؼوْٝ ،ىع أٌُ٤خ ٖٓ اُؼ٘٤خ ػٍِ ٠طؼ اُج٤ئخ آب ثبكاهح اُطجن ٣ل٣ٝب أ ٝػِ ٠هبػلح
كٝاهح .كع اُطجن ُ٤زْ االٓزٖبٓ هجَ اُزؾ.ٖ٤ٚ
. 5 . 3انزحعيٍ Incubation
. 6 . 3انؼذ ،انزظغيم ،انحظبةٔ ،انزمزيز
Counting, Recording, Computing, and Reporting
- 45 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 4غزيمخ أغشيخ انززشيح Membrane Filter Method
. 1 . 4األدٔاد انًؼًهيخ Laboratory Apparatus
اٍزؼَٔ أكٝاد ىعبع٤خ ٝأ٣خ أكٝاد أفو ٟرزوًت ٖٓ ٓٞاك فبُ٤خ ٖٓ اُؼٞآَ اُز٠
هثٔب رئصو ػِ ٞٔٗ ٠اُجٌزو٣ب.
. 1 . 1 . 4سعبعبد انؼيُبد Sample bottles
هاعغ ٓنًواد QC/QA
. 2 . 1 . 4سعبعبد انزخفيف Dilution bottles
هاعغ ٓنًواد QC/ QA
. 3 . 1 . 4انًبصبد ٔانخجبر انًذرط Pipets and graduated cylinders
هاعغ ٓنًواد .QC/QAهجَ اُزؼو ،ْ٤اؿِن ثطو٣وخ ؿ٤و ٓؾٌٔخ أُقبث٤و
ثبٍزؼٔبٍ ٝهم اُ ّٞ٤٘ٓٞأٝ ٝهم ًواكذ ٓوبُِ ّٝؾواهح ٝثؼل اُزؼو ْ٤اؽٌْ ؿِوٜب
ُٔ٘غ اُزِٞس.
. 4 . 1 . 4ػجٕاد ثيئخ انشرع Containers of culture medium
اٍزؼَٔ كٝاهم ٖٓ ىعبط اُجٞهٌ٤ٍِٝبد ٌٖٔ٣ .اٍزؼٔبٍ أٝ ٌَّ ٟأ ٟؽغٌُْٖٝ ،
اُلٝاهم أُقو٤ٛٝخ ماد اُـطبء أُؼلٗىٖ ٓغ اُزـط٤خ ثٞهم اُ ،ّٞ٤٘ٓٞأ ٝثبُـطبء
اُوالٝٝظ رَٔؼ ثبُقُِِ ٜج٤ئخ أُؾز٣ٞخ ػِٜ٤ب ٘ٓٝبٍجخ ُِزقي.ٖ٣
- 46 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 5 . 1 . 4أغجبق انشرع Culture dishes
اٍزؼَٔ أٛجبم ىعبع٤خ ٖٓ ٗٞع اُجٞهٌ٤ٍِٝبد أ ٝأٛجبم ثالٍز٤ي ٓؼؤخ50 ،ْٓ 15X 60 ،
،ْٓ 9Xا ٝؽغْ آفو ٓ٘بٍتُ .ق ػلك ٓ٘بٍت ٖٓ اٛ٧جبم اُيعبع٤خ كٝ ٠هم اُ ( ّٞ٤٘ٓٞأٝ
ػِت ٓؼلٗ٤خ) ُِزؼو ْ٤ك ٠اُلوٕ اُغبف ،أٝ ٝهم ًواكذ ه ٟٞػ٘ل اُزؼو ْ٤ك ٠اٝ٧رًٞالف.
ؽ ٖٚاٛ٧جبم اُـ٤و ٓؾٌٔخ اُـِوَٞاء ًبٗذ ىعبع٤خ أ ٝثالٍز٤ي ك ٠اٗبء ٓؾٌْ ث ٚهطؼخ
هٔبُ أٝ ٝهم ٓجِِخ ُٔ٘غ
رجقو اُوٞٛثخ ٝاُز ٠رئك ٟاُ ٠علبف ث٤ئخ اُيهع ُِٔٝؾبكظخ ػِ ٠ث٤ئخ هٛجخ ُزٞك٤و أكَٚ
ظوٝف ُظٜٞه أَُزؼٔواد.اٛ٧جبم اُجالٍز٤ي ٍبثوخ اُزؼو ْ٤ماربُـطبء أُؾٌْ ٝاُز ٠رزٔزغ
ثبُٔٞإلبد اَُبثوخ ٓزٞاكوح رغبه٣ب ٘ٓٝزْوح االٍزؼٔبٍ.
٣ؼبك ؿِن ا٤ً٧بً اُجالٍز٤ي أُؾز٣ٞخ ػِ ٠اٛ٧جبم اُجالٍز٤ي أُؼؤخٝاُز ُْ ٠رَزؼَٔ
ُِزقي.ٖ٣
ٔ . 6 . 1 . 4حذاد انززشيح Filtration units
ٝؽلاد اُزوّ٤ؼ ٖٓ اُيعبط ،اُجالٍز٤ي اُوبثَ ُِزؼو ،ْ٤اُجٞهٍِ ،ٖ٤أ ٝاالٍزٌِ٘ ٍزِٞ٤اُز٠
رزوًت ٖٓ هٔغ ٣ضجذ ػِ ٠هبػلح ثٞاٍطخ ْٓجي أ ٝثوٞح ٓـ٘ب٤َ٤ٛخ .اُزٖٔ٣ ْ٤غت إٔ
َٔ٣ؼ ثٙٞغ ؿْبء اُزوّ٤ؼ ػِ ٠اُغيء أُ٘لن ثل ٕٝاؽزٔبٍ ُزِق اُـْبء َٔ٣ٝؼ ٌَُ
أُؾبُ َ٤ثبُٔوٝه ٖٓ فالٍ اُـْبء فالٍ ػِٔ٤خ اُزوّ٤ؼ .اُؤغ اُجالٍز ٠ٌ٤ما اُْوٞم
ٝاُقل ُٝاُؼٔ٤وخ ٖٓ اُلافَ َ٣زجؼل ٝاُؤغ اُيعبع ٠اُقْٖ ٝاُن ٟرظٜو ث ٚهْٞه َ٣زجؼل
ٞٛا٥فو ٖٓ االٍزؼٔبٍ.
ُق اُٞؽلح ( عٔ٤ؼٜب أ ٝػِ ٠أعياء) كٝ ٠هم هً( ٟٞواكذ) اٝ ٝهم اُ ، ّٞ٤٘ٓٞػوْ ك٠
اٝ٧رًٞالف ٝفيٕ اُٝ ٠هذ االٍزؼٔبًٍٝ .جل ٌٖٔ٣ َ٣رؼو ًَ ٘٣اَُطٞػ اَُبثن
ر٘ظ٤لٜب ُّ٨ؼخ اُلٞم ث٘لَغ٤خ ُٔلح كه٤وزبٕ ٝمُي هجَ االٍزؼٔبٍ أ ٝالػبكح االٍزؼٔبٍ ٝثٖ٤
ًَ ػِٔ٤زبٕ ُِزوّ٤ؼٝ .اُٞؽلاد اُز ٠رَزقلّ ك ٠اُؾوَ ٌٖٔ٣رؼؤٜ٤ب ٖٓ فالٍ هّٜب
ثبٌُؾٝ ٍٞثؼل مُي رْؼَ ،أ ٝثـٔوٛب كٓ ٠بء ٣ـِٝ ،٠رجوك اُ ٠كهعخ ؽواهح اُـوكخ هجَ
االٍزؼٔبٍ .ال رْؼَ ا٧عياء اُجالٍز٤ٌ٤خ ٌٖٔ٣ٝ .اُزقِٔ ٖٓ اُٞؽلاد اُجالٍز٤ٌ٤خ اُز٠
رَزقلّ ك ٠اُؾوَ ٜٗ٧ب ػبكح رَزقلّ ُٔوح ٝاؽلح.
- 47 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ُِٝزوّ٤ؼ ،ر َٕٞاُٞؽلح ثلٝهم روّ٤ؼ (ثٞف٘و) ُ 1زو أ ٝأ٣خ ِ٤ٍٝخ أفو ٟرَزوجَ ٗبرظ
روّ٤ؼ ٓ 6 – 3واد ٓززبُ٤خ ٝثؾ٤ش ٣زٞاكو)ٓ Pressure differential (kPaولاه34 ٙ
– 51ػِ ٠ؿْبء اُزوّ٤ؼ َٕ .اُلٝهم ثق ٜرلو٣ؾٝ ،ثبٍزؼٔبٍ ِٔٛجخ رلو٣ؾ ًٜوثبئ٤خ،
أِٔٛ ٝجخ رؼَٔ ػِٕ٘ ٠جٞه أُبء ٣ٝ Water pumpزُٞل اُزلو٣ؾ ٗز٤غخ ر٤به أُبء
أُ٘لكغ فالُٜب ٌٖٔ٣ٝ ،اٍزؼٔبٍ أ٣خ ِ٤ٍٝخ أفو ٟرٞكو )Pressure differential(kPa
هله َٕ . 207 – 138 ٙكالٌٍخ ث٘لٌ اُؾغْ ث ٖ٤كٝهم اُزوّ٤ؼ ٖٓٝله اُزلو٣ؾ
ًٖٔ٤لح ُِٔبء أُورل.
. 7 . 1 . 4غشبء انززشيح Membrane filter
اٍزؼَٔ أؿْ٤خ روّ٤ؼ ( هاعغ ٓنًوح )QC/QAماد صوٞة رٔ٘غ ٓوٝه ًَ اُجٌزو٣ب (ؽَت
ٗٞػ٤خ اُجٌزو٣ب اُز٣ ٠واك ؽغيٛب) .اٍزؼَٔ ا٧ؿْ٤خ اُز ٠فٚؼذ الفزجبهاد ٝأُٖؾٞثخ
ثْٜبكاد ٖٓ أُٖ٘غ ػِ ٠أٜٗب رؾغي ًَ اٌُبئ٘بد اُز٣ ٠زْ ىهاػزٜبٝ ،اُضبثز ٚك ٠االٍزؼٔبٍ،
فبُ٤خ ٖٓ أٌُ٤ب٣ٝبد اُز ٌٖٔ٣ ٠اٍزقالٕٜب ٝاُز ٖٓ ٠أٌُٖٔ إٔ ُٜ ٌٕٞ٣ب رؤص٤و هبرَ ػِ٠
اُجٌزو٣ب ٘٣ٝ ،زظ ػٜ٘ب ٍوػخ روّ٘ٓ ٢بٍجخ ( 5كهبئن) ٝال رئصو ٓؼ٘٣ٞب ػِ pH ٠اُج٤ئخ (-/+
ٝ , 2ؽلح) ٝ ،ال ى٣بكح ك ٠أػلاك أَُزؼٔواد أُلٓغخ أ ٝأُ٘زْوح ٓوبهٗخ ثؤؿْ٤خ ٓوعؼ٤خ.
اٍزؼَٔ أؿْ٤خ ٓؤَخ ثقطٝ ٛٞالؽع إٔ ٓبكح اُقط ٛٞال رَجت رْغ٤غ أ ٝرضج ُٞٔ٘ ٜ٤اُجٌزو٣ب
( ػِٗ ٠لٌ اُق )ٜػ٘ل ٙٝغ اُـْبء ػِ ٠اُج٤ئخ أُ٘بٍجخ ٓغ اُزؾ٣ .ٖ٤ٚل َٚاٍزؼٔبٍ أؿْ٤خ
ؽل٣ضخ اُٖ٘غ ٝاما اٙطوهد اُ ٠اُزقي ٖ٣ؿبٕ أٌُبٕ ال ٣غت إٔ ٓ ٌٕٞ٣ورلغ اُؾواهح أٝ
اُوٞٛثخ ٝ .ال رقيٕ أًضو ٖٓ ٍ٘ٝ ٚثبُزبُ ٠كبّ ِٛجي ٌٕٞ٣ث٘بء ػِ ٠االٍزؼالى ُٔلح ػبّ.
٣ٝو َٚا٧ؿْ٤خ ٍبثوخ اُزؼوٝ ْ٤رٌِ٤ٍٝ ٕٞخ اُزؼو ْ٤ال ٘٣زظ ػٜ٘ب ٍٔ٤خ أ ٝرئصو ػِ ٠اُقٞآ
اٌُ٤ٔ٤بئ٤خ أ ٝاُطج٤ؼ٤خ ُ٨ؿْ٤خ (ثْٜبكح ٖٓ أُ٘زظ)ٝ .اما ًبٕ اُزؼو٣ ْ٤زْ ك ٠أُؼَٔ كبٗ٣ ٚزْ
ك ٠اٝ٧رًٞالف ػ٘ل ٓ 121ئ٣ٞخ ُٔٝلح 10كهبئن .كٜٗ ٠ب٣خ كزوح اُزؼو٣ ْ٤لوؽ اُجقبه ثَوػخ
ُِؾل ٖٓ رٌضق اُجقبه ػِ ٠ا٧ؿْ٤خ.
. 8 . 1 . 4انٕطبداد انًبصخ Absorbent pads
هاعغ ٓنًوح QC/QA
. 9 . 1 . 4انًهمػ Forceps
هاعغ ٓنًوح QC/
- 48 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 12 . 1 . 4انًيكزٔطكٕة ٔيصذر االظبءح Microscope and light source
هاعغ ٓنًوح QC/
. 2 . 4انجيئبد Media
اٍزؼَٔ ث٤ئخ m-HPC agarأ ٝاُجل R2A َ٣أ.NWRI agar ٝ
. 3 . 4رغٓيش األغجبق Preparation of plates
ٝىع ٖٓ َِٓ 5اُج٤ئخ أُؼؤخ ك ٠أٛجبم ثزو . ْٓ 9 X 50 ٟرزوى ُززغٔل ػ٘ل كهعخ
ؽواهح اُـوكخ .اٛ٧جبم أُؾٚوح هثٔب رقيٕ ٓوِٞثخ ك ٠أً٤بً ثالٍز٤ي أٝ ٝػبء ٓؾٌْ ك٠
اُضالعخ ُٔلح أهٖبٛب اٍجٞػبٕ.
- 49 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 4 . 4حغى انؼيُخ Sample size
ؽغْ اُؼ٘٤خ اُن٣ ٟزْ روّ٤ؾ٣ ٚقزِق ؽَت ٗٞػ٤خ اُؼ٘٤خ .افزبه ؽغْ اُؼ٘٤خ اُن٘٣ ٟزظ ػ٘ٓ ٚب
ثٝ 200 – 20 ٖ٤ؽلاد رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔوح Colony forming unitsػِ ٠اُـْبء عٔ٤ؼ.ٚ
. 5 . 4انطزيمخ Procedure
هّؼ اُؾغْ أُ٘بٍت فالٍ ؿْبء ٓؼوْ ثوطو ٝ ْٓ 47صوٞة Poresثوطو ٌ٤ٓ ,45وٕٝ
ٓٝوَْ ثقط ،ٛٞرؾذ رلو٣ؾ .اؿََ اُؤغ ثٔولاه ٓ 3 َِٓ 30 – 20واد ٓززبُ٤خ ٖٓ ٓبء
اُزقل٤ق أُؼوْٙ .غ اُـْبء ػِ ٠اُج٤ئخ كً ٠جن اُجزو.ٟ
. 6 . 4انزحعيٍ Incubation
ٙغ اٛ٧جبم كٕ٘ ٠لٝم ٓؾٌْ أ ٝأً٤بً ثالٍز٤ي ثٜب كٛٞخ ٝهه٤خ ٓجِِخ .ؽ ٖٚػ٘ل -/+ 35
ٝ2كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخ ك ٠ؽبُخ اٍزؼٔبٍ ث٤ئخ ٝm-HPCػ٘ل 28 – 20كهعخ
R2A agar or NWRI agar ٓئ٣ٞخ ُٔلح 7 – 5أ٣بّ ك ٠ؽبُخ اٍزؼٔبٍ ث٤ئخ
. 7 . 4انؼذ ،انزظغيم ،انحظبةٔ ،انزمزيز
Counting, Recording, Computing, and Reporting
هاعغ اُج٘ل ٝ .10 . 1 ٝ 9 . 1رَغَ اُ٘ز٤غخ ػِ ٠اُٖٞهح اُزبُ٤خ
CFU/ml., membrane filter method, time, medium.
- 50 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 5انؼذ انكهٗ انًجبشز نهًيكزٔثبد Direct Total Microbial Count
. 1 . 5يمذيخ Introduction
ػل فال٣ب اُجٌزو٣ب أُجبّو ك ٠أُ٤ب ٙأ ٝأُقِلبد اَُبئِخ ػبكح ٣لٞم ا٧ػلاك
أُزؾَٖ ػِٜ٤ب ٖٓ ػل اُجٌزو٣ب اُٜز٤وٝروٝك٤خ ثبٛ٧جبم ٝمُي هاعغ ُِقطؤ
أُزَجت ػٖ اُظٞاٛو أُزؼِوخ ثبُؾ٣ٞ٤خ ٓضَ االٗزوبء ُ Selectivityج٤ئخ اُ٘ٔ،ٞ
رغٔغ اُقال٣ب ٝ Clumbingاُجٜء كٓ ٠ؼلٍ اُ٘ٔ.ٞ
Epifluorescence Microscopic Method . 2 . 5
. 1 . 2 . 5يُبلشخ ػبيخ General Discussion
ٛن ٙاُطو٣وخ رؼط ٠ػل ٓجبّو ُِؼلك اٌُِ ٠ثَوػخ ( 30 – 20كه٤وخ) ٝثؾَبٍ٤خ.
٠ٛٝال رَٔؼ ثبُزلوهخ ث ٖ٤فال٣ب اُجٌزو٣ب ػِ ٠أٍبً اُزوَْٗ ،ْ٤ب ٛاُزٔضَ٤
اُـنائ ،٠أ ٝاُؾ٣ٞ٤خٝ ٝ ،ال ٌٖٔ٣اٍزؼٔبُٜب ُزول٣و اٌُزِخ أٌُ٤وٝث٤خ Microbial
ُ biomassالفزالكبد اٌُج٤وح ك ٠ؽغْ اُقال٣ب .اُطو٣وخ رؾزبط اُ ٠فجوح اُل٘٠
اُنَ٣ ٟزط٤غ اُزلوهخ ٓب ث ٖ٤اُقال٣ب أٌُ٤وٝث٤خ ٝاُوٝاٍت ػِ ٠أٍبً اٌَُْ.
رزوًت اُطو٣وخ ٖٓ رضج٤ذ اُؼ٘٤خ ُِزقي ،ٖ٣اُٖجؾ ثٖجـخ Fluorochrome
اُزوّ٤ؼ ثبُزلو٣ؾ ػِ ٠ؿْبء ثً ٠ُٞوثٗٞبد Nonfluorescing
ٝ ،polycarbonate membraneاُؼل ثٞاٍطخ Epifluorescence
.microscopic
. 2 . 2 . 5األعٓشح Apparatus
. 1 . 2 . 2 . 5ييكزٔطكٕة Microscope
ٖٓله ُّ٨ؼخ اُلٞم ث٘لَغ٤خ هأٍ ٠ثؾوَ َٓز ،ٟٞػلٍخ ى٣ز٤خ ُ 100 Xزؼط٠
هٞح رٌج٤و ًِ٤خ 1000 Xػِ ٠ا٧هَ.
- 51 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 2 . 2 . 2 . 5ػيُيخ نهؼذ Counting graticule
ػلٍخ ػ٤٘٤خ ٌٓ٤و٤ٓٝزوٓ ocular lens micrometer ٚ٣لهعخ ثَٔوػ
Calibrated with stage micrometer. ٌٓ٤وٓٝزوٟ
. 3 . 2 . 2 . 5يزشحبد ٝ Filtersرَْٔ كالرواصبهح KP 400 ( Excitation filters
ّ ، )and LP 455بٛو أّؼخ )ٝ Beam splitter( LP 510كِزو ؽبعي
Barrier filter
(LP 520 using mercury lamp, HBO 50).
. 4 . 2 . 2 . 5خالغ أٔ عٓبس فٕرركض Blender or vortex mixer
ٔ . 5 . 2 . 2 . 5حذح رزشيح Filtration unitيُبطجخ نالطزؼًبل ثأغشيخ رزشيح لطز
25يى.
. 6 . 2 . 2 . 5أغشيخ رزشيح ٞٗ ٖٓ Membrane filtersع اُجً ٠ُٞوثٗٞبد هطو 25
ْٓ ،هطو اُضوٞة ٌ٤ٓ ,2و ٌٕٞ٣ ( ٕٝؿ٤و ٓزٛٞظ Nonfluorescentأ٣ ٝغٜي
ثـٌٔ اُـْبء ك 2 ] Irgalan black ٠عواّ /اُِزو ٖٓ %2ؽبٓ٘ فِ٤ي[ ُٔلح
ٍ 24بػخ ٣ٝ ،ـََ ك ٠أُبء ٣ٝغلق ٞٛائ٤ب) ؛ ٍُِٞٞ٤ى ٟهطو ،ْٓ 25هطو
اُضوٞة ٌ٤ٓ 5و.ٕٝ
. 7 . 2 . 2 . 5طزَغبد َِٓ 3 Syringesال ٣ؼبك اٍزؼٔبُٜب ٣ٝوًت ػِٜ٤ب كالرو ,2
ٌٓ٤وٝ ٕٝال ٣ؼبك اٍزقلآٜب أٚ٣ب.
. 8 . 2 . 2 . 5أَبثيت اخزجبر Test tubesىعبع٤خ ثـطبء هالٝٝظ 125X 13
ْٓ.
- 52 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 3 .5انذالئم أٔ انكشبفبد Reagents
. 1 . 3 . 5يحهٕل فٕطفبد يُظى Phosphate bufferأمة 13,6عواّ KH2PO4
كٓ ٠بء ٝفلق اُ ٠ا ُزو .أٙج ٜػ٘ل pH 7؛ هّؼ فالٍ ؿْبء روّ٤ؼ ٌ٤ٓ ,2و.ٕٝ
. 2 . 3 . 5يضجذ ٝ( % 5 Fixativeىٕ/ؽغْ) عِٞربهُل٤ٛل كٓ ٠ؾِ ٍٞكٍٞلبد ٓ٘ظْ
ٓؾٚو ؽل٣ضب.
. 3 . 3 . 5فهٕركزٔو ( % ,1 FDluorochromeؽغْٝ /ىٕ) اًو٣ل ٖ٣ثوروبُ ٠ك٠
ٓؾِ ٍٞكٍٞلبد ٓ٘ظْ .
. 4 . 3 . 5سيذ نهؼذطخ انشيزيخ يُخفط انزْٕظ Immersion oil, low fluorescing
. 4 . 5انطزيمخ Procedure
اعٔغ اُؼ٘٤بد .أٙق ٖٓ َِٓ 9اُؼ ٚ٘٤اُ ٠اٗجٞثخ افزجبه ٓؾز٣ٞخ ػِخ ٓ َِٓ 1ضجذ .اُؼ٘٤خ
أُضجز ٌٖٔ٣ ٚرقيٜ٘٣ب ػ٘ل ٓ 4ئ٣ٞخ ؽز 3 ٠أٍبث٤غ ثلٗ ٕٝؤ ٓؼ٘ ٟٞك ٠أػلاك اُقال٣ب.
ٝىع ٝفلق ػ٘٤بد ٖٓ ٖٓبكه ُِ mesotrophic or eutrophicؾٖ ٍٞػِٗ ٠زبئظ .
افِ ٜػٜ٘٤جبٍزؼٔبٍ فال ٛأ ٝكٞهرٌٌٝ ،فلق 10/1كٓ ٠ؾِ ٍٞكٍٞلبد ٓ٘ظْ .ػ٘٤بد
أُ٤ب ٙاُ٘و٤خ هثٔب ال رؾزبط اُ ٠رقل٤ق ٌُٖٝاُؾغ ّٞاٌُج٤وح (أًجو ٖٓ )َِٓ 100هثٔب
٣ؾزبط اُٜ٤ب ُِؾٖ ٍٞػِ ٠أػلاك ؽو٤و٤خ.
ٙغ ٖٓ َِٓ 1اُؼ٘٤خ أ ٝرقل٤ق ٜٓ٘ب ػِٓ ٠وّؼ ثً ٠ُٞوثٗٞبد ؿ٤و ٓزٛٞظ
ٓ nonfluorescentلػْ ثـْبء ٍُِٞٞ٤ى Cellulosic membrane filter ٟكFilter ٠
. holderثبٍزؼٔبٍ كالرو روًت ػٍِ ٠وٗغخ ،أٙق َِٓ 1كِٞهًوٝ ّٝاٗزظو كه٤وزبٕ،
أٙق ؽٞآُ َِٓ 3 ٠ؾِ٘ٓ ٍٞظْ ٖٓ اُلٍٞلبد أُوّؼ َُِٔبػ ثزٞى٣غ أًضو ُِقال٣ب.
ًٝجل ،َ٣افِ ٜاُلِٞهًوٓ ّٝغ اُؼ٘٤خ ك ٠اٗجُٞخ ٕـ٤وحٝ ،اٍؼ ثبُزلبػَ ،أٙق فِ ٜ٤اُ٠
Filter holderهّؼ ثبُزلو٣ؾ ( ؽٞاُ . )kPa 13 ٠اؿََ ثبٍزؼٔبٍ ٖٓ َِٓ 2اُلٍٞلبد
أُ٘ظْ ٝهّؼ .أىٍ ٓوّؼ اُجً ٠ُٞوثٗٞبد ثِٔوٝ ٜعلق ٞٛائ٤ب ُٔلح 3 – 1كه٤وخ ٌٖٔ٣ .هطغ
- 53 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اُلِزو اُ 4 ٠أعياء ٣ٝؾلع اما ُيّٙ .غ اُلِزو أُغلق ػِٗ ٠وطخ ٖٓ اُيثذ Immersion
oilػِّ ٠و٣ؾخ ٌٓ٤وٌٍٞٝة ٗظ٤وخ .أٙق ٗوطخ ٕـ٤وح ٖٓ ٗلٌ اُي٣ذ ػٍِ ٠طؼ اُلِزو.
ثِطق ؿ ٜاُلِزو ثـطبء ّو٣ؾخ ٌٖٔ٣ .Coverرقي ٖ٣اُؼ٘٤خ ثٚغ ّٜٞه ثل ٕٝكول ُِزٛٞظ
.Fluoresence
افزجو ػِ ٠ا٧هَ ٓ 10غبالد ػْٞائ٤خ ٓقزبهح ػِ ٠اُلِزو ثبٍزؼٔبٍ ػلٍخ ى٣ز٤خ ( 100 Xاما
ُْ رٌٖ رٞى٣غ اُقال٣ب ٓ٘زظْ فلق اُؼ٘٤خ ٝػبٝك اُقطٞاد)٣ .ل َٚػل 50 – 10فِ٤خ ك٠
أُغبٍ .ػل اُقال٣ب كٓ 20 ٠وثغ ػِ ٠ا٧هَ ٝثبٍزؼٔبٍ ػلٍخ ػ٤٘٤خ ٓؤَخ.
. 5 . 5انحظبثبد Calculations
اؽَت أُز ٍٜٞالػلاك اُقال٣ب ػِ ٠اُلِزو.
ػلك اُقال٣بٓ( =َِٓ/ز ٍٜٞاُقال٣ب/أُوثغ) ٓ( Xوثؼبد/كِزو) ٓ( Xؼبَٓ اُزقل٤ق) /ؽغْ
اُؼ٘٤خ َِٓ.
- 54 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
انفصم انضبنش
اطزخذاو كشبفبد انزهٕس انًيكزٔثيخ نزمييى طاليخ انًيبِ
. 1يمذيّ
ظٜود اُؾبعخ اُ ٠رول٣و ٕالؽ٤خ أُ٤بُِْ ٙوة ٝاالٍزقلآبد ا٧فو٘ٓ ٟن ػبّ 1855
ػ٘لٓب رْ اُوث ٜث ٖ٤ظٜٞه ٝثبئ ٢ؽٔ ٠اُز٤ل٣ٞل ٝاٌُ٤ُٞوا ٝرِٞس أُ٤ب ٙثبُٔقِلبد اُجواىٚ٣
(ُٝ )Moore, 1974زؤً٤ل إٔ ٗٞػ٤خ أُ٤بٓ ٙوجُٞخ ٖٓ ٗبؽ٤خ اُٖؾخ اُؼبٓخ ،إجؼ ٖٓ
اُٚوٝه ١ا٣غبك ٛوم ثَ٤طخ رؼطٗ ٠زبئظ ؽو٤و٤خ ٝكٗ ٠لٌ اُٞهذ ٍو٣ؼخ ٌُِْق ػٖ ٝر٘ٔ٤خ
أٌُ٤وٝثبد أُورج ٜرٞاعلٛب ثبُزِٞس اُجواىٝ .١اما أفن ك ٢االػزجبه إٔ أُٔوٙبد ُٖٓ ٌ٤
اَُ َٜاٌُْق ػٜ٘ب أ ٝىهاػزٜب هٝر٤٘٤ب ك ٠ٜرؾزبط اُ ٠فجوح ػبُ٤خ ُزٔ٤٤يٛب ٝرؤً٤ل رٞاعلٛب
ُٞٝأٙل٘ب اُ ٠مُي اُؾبعخ اُٝ ٠هذ ٌُِْ َ٣ٞٛق ػٜ٘ب ًٔب إٔ كوٕخ ؽلٝس ػل ٟٝثٜب
أص٘بء اُزؼبَٓ ٓؼٜب هبئٔب ًَ مُي ٣ئ٣ل أٗ ٖٓ ٌ٤ُ ٚأٌُٖٔ إٔ ٠ٕٞ٣ثبٍزقلاّ أٌُ٤وٝثبد
أُو٤ٙخ ٌُِْق ػٖ ٍالٓخ ٓ٤ب ٙاُْوة .ػِ ٠مُي ظٜود ٝرطٞهد ٛوم ُزول٣و رٞاعل
ًبئ٘بد ثواى ٚ٣أفو ،ٟثؾ٤ش اما ؿبثذ رِي اٌُبئ٘بد اُز ٠أِٛن ػِٜ٤ب اٌُْبكبد أ ٝا٧كُخ ،كبٕ
اؽزٔبٍ رٞاعل اٌُبئ٘بد أُو٤ٙخ ك ٠أُ٤ب ٌٕٞ٣ ٙثَٛ .ٜ٤نا أُلٌُِْ ّٜٞبف أ ٝاُلَُ٤
أٌُ٤وٝث “Indicator organism” ٠اكفَ ػبّ ٝ 1892ا ٞٛ ٕ٥أٍبً ٙٝغ أُؼب٤٣و
أٌُ٤وٝث٤خ ُِٔ٤ب.ٙ
ٝالىاٍ ٘ٛبى ؽبالد ٝثبئ٤خ ٓؼ٣ٞخ ًٝنُي أٓواٗ اٗزٜبى“Opportunistic diseases” ٚ٣
ٗبّئخ ػٖ ٌٓ٤وٝثبد ٓزُٞلح ػٖ أُ٤ب “Water-borne microorganisms” ٙث ٖ٤اُْؼٞة
أُزولٓخ ٝاُز ٠رَزقلّ رٌُ٘ٞٞع٤بد ٓزولٓخ ك ٠أُؼبُغخ ٝثوآظ ُالفزجبه ٓؼولٝ .ٙؿ٤بة
اٌُْبف أٌُ٤وٝث ٠ال ٣ؼ٘ ٠ؿ٤بة اُجٌزو٣ب االٗزٜبى٣خ أ ٝاُل٤وٍٝبد ثٖلخ هبٛؼخ ( (EPA,
ً 1986نُي ا٤ُٝ٧بد اُطل٤ِ٤خ ٓضَ اُغ٤بهك٣ب ”Bellamy et al., “Giardia lamblia
ٝ1985 and Lin,1985اٌُوثزٍٞجٞه٣لSterling, ) “Cryptosporidium” ْ٣
- 55 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٝ ،) 1987اُز ٠هثٔب ٠ٛأًضو ٓوبٓٝخ ُِزط٤ٜوٝ .فٖبئٔ ٗٞػ٤خ أُ٤ب ٙا٧فوٓ ٟضَ اُؼٌبهٙ
٣غت إٔ رواهت ُزبً٤ل ٍالٓخ ٓ٤ب ٙاُْوة.
.2انكشبفبد أٔ األدنخ انًيكزٔثيخ ”"Indicator Organisms
. 1 . 2رؼزيف
ك ٠اَُ٘ٞاد اُؾل٣ضخ ،أكهى أُِٗ ٚز٘جئ ثبُٔقبٛو اُٖؾ٤خ ٖٓ فالٍ ًبئٖ ًْبف أ ٝكَُ٤
” “Indicatorكبِٗ٣ ٚيّ إٔ رزٞاكو ك ٠مُي اُلُ َ٤ػلح فٖبئٔ ): )Dutka, 1975
ِ٣ يّ إٔ ٣ورج ٜثٖلخ كائٔخ ٝػِٝ ٠ع ٚاُؾٖو أ ٝاُوٖو ٓغ اٌُبئ٘بد أُو٤ٙخ أُؼ٣ٞخ.
ِ٣ يّ إ رزٞاعل ثؤػلاك أًجو ٖٓ أُٔوٙبد.
٣ غت إٔ رٌ ٕٞأًضو ٓوبٓٝخ ُِٔئصواد اُج٤ئ٤خ أُضجطخ ٔ٣ٝزل ثوبئٜب ُٔلح أًجو ٖٓ
أُٔوٙبد.
٣ غت إٔ ال رزٌبصو ك ٠اُج٤ئخ.
٣ غت إٔ رزٞاعل ٛوم ثَ٤طخ٣ ،ؼ ٍٞػِٜ٤ب ٝؿ٤و ٌِٓلخ ٌُِْق ،ر٘ٔ٤خ ٝرٖ٘٤ق اٌُبئٖ
أَُزقلّ ًٌْبف أ ٝكُ ٖٓ َ٤أُؼوٝف إٔ أُٔوٙبد أُؼ٣ٞخ رَجت أٝثئخ ٖٓ
آ٧واٗ أُؼ٣ٞخ ًٝض٤وا ٓب ر٘زٔ ٠اُ ٠ػبئِخ ٝ Enterobacteriaceaeرَْٔ
اَُبُٔ٤ٗٞال ( ،(Salmonellaاُْ٤غ٤ال) ، (Shigellaاُ٤بهٍ٤٘٤ب (Yarsinia
) ،enterocoliticaاٌُِ٤جَ٤ال )،(Klebsiella pneumoniae
االٗز٤وٝثبًزو)ٝ (Enterobacterا٤ْ٣و٤ْ٣ب ًٞال ٟأُ٘زغخ ُِزE.coli) ٖ٤ًَٞ
.)enteropathogenic
٘ٛٝبى اص٘ ٖ٤آفوإ ٖٓ أُٔوٙبد أُؼ٣ٞخ ٔٛب كجو٤ًُٞ ٞ٣وا
(ًٝ )Vibrio choleraeبٓجِٞ٤ثبًزو(Krieg, ()Campylobacter jejuni
.)1984آ٧واٗ أُزَججخ ػٖ ٛن ٙاٌُبئ٘بد ر٘زْو ػٖ ٛو٣ن أُ٤ب ٙأُِٞصخ
ثٔٞاك ثواى ٖٓ ٚ٣اَٗ٩بٕ أ ٝاُؾٞ٤اٗبد أفو ٖٓ ٟمٝاد اُلّ اُلاكئ ٌٕٞ٣ ٠ٌُٝ .
ًبئٖ أٓ ٝغٔٞػخ ًبئ٘بد كُٓ َ٤ؼ ٍٞػًِ ٚ٤لُ َ٤ػِ ٠آٌبٗ٤خ رٞاعل أُٔوٙبد
أُؼ٣ٞخ كٖٓ ٠له ُِٔبء ،كبٕ اُلُ٣ َ٤غت إٔ ٌٕٞ٣ػِٝ ٠ع ٚاُوٖو أ ٝاُؾٖو
ٖٓ ٖٓله ثواى٣ٝ ٟزٞاعل ثبٍزٔواه ك ٠أُقِلبد اُجواى٣خ اُطبىعخ .اُؾبعخ اُ٠
ٛو٣وخ ثَ٤طخ ٓٝؼ ٍٞػِٜ٤ب ٌُِْق ٝاُز٘ٔ٤خ اكد اُ ٠اٍزؼٔبٍ كالئَ ٖٓ
- 56 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٓغٔٞػبد اُجٌزو٣ب ٝاُز ٠رْزَٔ ػِ ٠ا٧ع٘بً أُؾلكح أُطِٞثخٝ .اٌُبئ٘بد
أَُزقلٓخ ًلالئَ ػِ ٠اُزِٞس رَْٔ اُجٌزو٣ب اُو ، )Coliform) ٚ٤ُٗٞٞاُجٌزو٣ب
اَُجؾ٤خ اُجواىٝ ) Fecal streptococci , Enterococci( ٚ٣اُجٌزو٣ب أُقزيُخ
ٌُِجو٣ز٤ذ ”ٓ “Sulfite Reducing Bacteriaضَ ًَُٞزو٣ل ْ٣ث٤وكوٗغٌ٘
(.)Clostridium perfringens
. 3ثكززيب انمٕنٌٕ كذنيم ػهٗ انزهٕس
. 1 .3يمذيخ
ك ٠ػبّ ،1885اًزْق ا٤ْ٣وُ ( )T.Escherichعٌ٘ ٖٓ اُجٌزو٣ب ٣زٞاعل ػبُٔ٤ب ك٠
أُٞاك اُجواى٣خ ا٥كٓٛ .ٚ٤ن ٙاُجٌزو٣ب ال رزٞاعل كو ٜثٌضبكخ ػبُ٤خ ً ٌُٖٝض٤وا ٓب رورج ٜثجٌزو٣ب
اُز٤ل٣ٞل اُؼٖ٣ٞخ (ٝ .)Salmonella typhiاػط٤ذ رِي اُجٌزو٣ب اُز ٠اًزْلٜب اْ٣و ِ٣اٍْ
ا٤ْ٣و٤ْ٣ب ًٞالٟ
٠ٛٝ .)Escherich, 1885) Escherichia coliعيء ٖٓله ٙثواىٓ ٖٓ ٟغٔٞػخ
ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأ ٝثٌزو٣ب ً ٠ُٞأٝهع٤٘٤ي (.)coli-aerogenes
ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞر٘زٔ ٠روَ٤ٔ٤ب اُ ٠ػبئِخ اٗز٤وٝثبًزوٝ ،)Enterobacteriaceae( ٠َ٣عٔ٤ؼٜب
ثٌزو٣ب فال٣بٛب ػٖ٣ٞخ اٌَُْ ،ال رٌ ٕٞعواصٍ ،)non-spore-forming( ْ٤بُجخ ُٖجـخ
عواّ .ثٌزو٣ب ٓؾلكح ٖٓ ٛن ٙاُؼبئِخ ر٘زٔ ٠اُ ٠أع٘بً ) )generaا٤ْ٣و٤ْ٣ب
(ٍ ،)Escherichiaزوٝثبًزو(ًِ ،)Citrobacterجَ٤ال (ٝ )Klebsiellaار٤وٝثبًزو
(ٝ )Enterobacterعٔ٤ؼٜب ُٜب اُولهح ػِ ٠اُ٘ٔ ٞكٝ ٠عٞك أٓالػ اُٖلواء ( )Bile saltsأٝ
ؿ٤وٛب ٖٓ أُٞاك ماد اُْ٘ب ٛاَُطؾ ٠ٛٝ )(Surface active agents ٠هبكهح ػِ ٠رقٔ٤و
ٌٍو اُالًزٞى ػ٘ل 35أ 37 ٝكهعخ ٓئ٣ٞخ ٓغ اٗزبط ؽبٓ٘ ٝؿبى ٝاُل٤ٛل ()Aldehyde
فالٍ ٍ 48-24بػخ ًنُي ٍبُجخ ُالٗي ْ٣أُئًَل َُِ٤زًٞو.)Cytochrome-oxidase( ّٝ
اػزٔبكا ػِٛ ٠ن ٙاُقٖبئٔ ،ؽلكد ٓ٘ظٔخ اُٖؾخ اُؼبُٔ٤خ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞػِ ٠أٜٗب ثٌزو٣ب
ػٖ٣ٞخ اٌَُْ ،ال رٌ ٕٞعواصٍ ،ْ٤بُجُٖ ٚجـخ عواّ ،هبكهح ػِ ٠اُ٘ٔ ٞكٝ ٠عٞك أٓالػ
اُٖلواء أ ٝؿ٤وٛب ٖٓ أُٞاك ماد اُْ٘ب ٛاَُطؾٍٝ ٠بُجخ الٗي ْ٣أًَلح اَُ٤زًٞوٝ ّٝهبكهح
ػِ ٠رقٔ٤و ٌٍو اُالًزٞى ػ٘ل 35أ 37 ٝكهعخ ٓئ٣ٞخ ٓغ اٗزبط ؽبٓ٘ ،ؿبى ٝاُل٤ٛل فالٍ
ٍ 48-24بػخ (.)WHO,1985
- 57 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ًٔٝغٔٞػخ ًْل٤خ ،كبٕ ػلك ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُؾ٤خ ال رورج ٜكائٔب ثزٞاعل اُزِٞس .أػلاك ثٌزو٣ب
اُو ُٕٞٞأُورلؼخ ٌٖٔ٣أ ٕ رْ٘ؤ ٖٓ رٞاعل اٌُِجَ٤ال (ٍ ،)Klebsiellaزوٝثبًزو
(ٝ )Citrobacterؿ٤وٛب ٖٓ ٌُبئ٘بد اُزَ٤ُ ٠ذ ٖٓ إَ ثواىٝ ٟاُز ٖٓ ٌ٤ُ ٠اُٚوٝهٟ
إٔ ُٜ ٌٕٞ٣ب أصو ٍِج ٠أٓ ٝقبٛو ػِ ٠اُٖؾخ ٗز٤غخ اٍزٜالى رِي أُ٤بٝ .ٙك ٠كهاٍخ أعو٣ذ
ػِ٤ٓ ٠ب ٙثئو ٝعل ( )McFeters et al., 1974إٔ اُٞهذ اُالىّ الٗقلبٗ أػلاك ثٌزو٣ب
اُو ُٕٞٞاُ ٠اُٖ٘ق ثِؾ ٍ 17بػخ ثٔ٘٤ب اٗقلٚذ رِي اُلزوح اٍُ 7,2 ٝ 6 ٠بػخ ك ٠ؽبُخ
اُجٌزو٣ب أُو٤ٙخ ٓٔضِخ كً ٠ال ٖٓ اَُبُٔ٤ٗٞال (ٝ )Salmonella typhiاٌُ٤ُٞوا ( Vibrio
ٛ .)choleraن ٙاُج٤بٗبد أ٣لد كؼبُ٤خ ثٌزو٣ب اُوً ُٕٞٞلُ َ٤ػِ ٠ؿ٤بة رِي اٌُبئ٘بد
أُو٤ٙخٝ .ظٜود ػل٣ل ٖٓ اُؾبالد رْ كٜ٤ب ػيٍ ٓٔوٙبد ك ٠ؿ٤بة ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأ ٝك٠
رٞاعل أػلاك ٓ٘قلٚخ علا ٜٓ٘بٝ .ظٜود ؽبالد ٝثبئ٤خ ٓزَججخ ػٖ رٞاعل اَُبُٔ٤ٗٞال ٝ
اُْ٤غ٤ال ( Salmonella typhimurium, Shigella flexneri and Shigell a
)Heidelbergك ٠أُ٤بٓ ٙغ ػلّ رٞاعل ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأ ٝرٞاعلٛب ثبػلاك هِِ٤خ
&(Dutka,1975; Boring et al.,1971; Muller,1964 and Seligman
Reitler,1965).
ٝػِ ٠اُوؿْ ٖٓ إٔ ٛن ٙاُؾبالد اُ٘بكهح ٖٓ اٗزْبه اٝ٧ثئخ أُْبه اُٜ٤ب رزْٔٓ ٠غ ٓب ٍجن
مًو ٙثٞاٍطخ ) )McFeters et al., 1974كِول اكزوٗ إٔ ؿ٤بة ثٌزو٣ب اُو٣ ُٕٞٞوعغ اُ٠
اُطو٣وخ اُز ٠اٍزقلٓذ َ٤ُٝذ ٛن ٠ٛ ٙاُؾبُخ اُؾو٤و٤خ ُِؼ٘٤خ.
ٓ ٕ٧ٝغٔٞػخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ ٠ٛ Total coliformاُلُ َ٤اً٧ضو ّٔٞال ؽ٤ش
رْزَٔ ػِ ٠اُغيء اُجواىًٝ ٟنُي ػِ ٠اْ٣و٤ْ٣ب ًٞال2،1 ٌَّ( Escherichia coli ٟ
) ٝٝعٞك ٓغٔٞػخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأرقن ًلُ َ٤ػِ ٠ػلّ ارٔبّ ػِٔ٤خ اُزط٤ٜو ُِٔ٤بًٔ ٙب ٣غت،
ُٝول ارقند ٓغٔٞػخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ ًؤٍبً ُٔٞإلبد ٓ٤ب ٙاُْوة ك ٠اُٞال٣بد
أُزؾلح ٓٝؼظْ اُل ٍٝأُزطٞهح.
ك ٠ػبّ 1904اهزوػ ا٣قٔبٕ Eijkmanاٗزبط ؿبى ٖٓ اُغًِٞٞى ػ٘ل ٓ 46ئ٣ٞخ ًبفزجبه
ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞماد ا َٕ٧اُجواى .)Eijkman, 1904) Fecal coliform ٟاُؼل٣ل ٖٓ
ا٧ع٘بً اُزٝ ٠هك مًوٛب ٝاُز ٠ر٘زٔ ٠آُ ٠غٔٞػخ اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ ٌٜ٘ٔ٣ب إٔ ر٘زظ ؿبى ٖٓ
- 58 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اُغًِٞٞىٝ .ػِ ٠مُي ،ؽلس رؼلٍ َ٣و٣غ ُالفزجبه ٝاٍزجلٍ اُغًِٞٞى ثبُالًزٞى .أٓب ثبَُ٘جخ
ُِغيء اُجواى ٖٓ ٟأُغٔٞػخ كِول ؽلس أٚ٣ب رؼل َ٣ك ٠االفزجبه ُٜب ثبٍزؼٔبٍ كهعخ ؽواهح
ٓ 44.5ئ٣ٞخ ك ٠اُزؾ.ٖ٤ٚ
ٝاُ ،ّٞ٤اُزؼو٣ق أُوجُ ٍٞجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ ٓٔضِخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأُوبٓٝخ ُِؾواهح
ٝاُوبكهح ػِ ٠اُ٘ٔٓ ٞغ اٗزبط ؽبٓ٘ ٝؿبى ػ٘ل ٓ 44.5ئ٣ٞخٝ .اُجٌزو٣ب اُز ٠رْزَٔ ػِٜ٤ب ٛنٙ
أُغٔٞػخ َٞ٣ك كٜ٤ب .Escherichia coli, Citrobacter freundii, and Klebsirlla
pnemoniaػِ ٠إٔ ػبئِخ Enterobacteriaceaeرَْٔ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ ٝاٌُِ٤خ
ػالٝح ػِ ٠عيء ال ٘٣زٔ ٠آُ ٠غٔٞػخ ثٌزو٣ب اُوٞٓٝ .)2 ٌَّ( ُٕٞٞإلبد ٓؼظْ أُ٤بٙ
اُطج٤ؼ٤خ رؼزٔل ػِ ٠ػلك ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ.
أك َٚكُ َ٤ػِ ٠اُزِٞس اُجواىٓ ٖٓ ٟقِلبد االَٗبٕ ٝاُؾٞ٤إ .Escherichia coli ٞٛ
كِول ٝعل إٔ ثواى االَٗبٕ ٝاُؾٞ٤إ رٔضَ ٓ Escherichia coliب ثٖٓ %100 – 90 ٖ٤
ٓؾزٞا ٖٓ ٙاُجٌزو٣ب اُو ،ٚ٤ُٗٞٞثٔ٘٤ب ر٘قل٘ ك ٠اُٖوف اُٖؾ Sewage ٠اُ%59 ٠
( .)WHO, 1985اُٝ ٠هذ هو٣ت ُْ رزٞاعل ٛوم ثَ٤طخ رؼطٗ ٠زبئظ ؽو٤و٤خ ٌُِْق ،ر٘ٔ٤خ،
ٝرٖ٘٤ق ا٤ْ٣وّ٤ب ًٞالٝ .ٟف ػبّ 1986ظٜود االفزجبهاد اُؾل٣ضخ ال٤ْ٣وّ٤ب ًٞالٟ
ٝاُز ٠رؼزٔل ػِ ٠االفزجبهاد اُج٤ٔ٤ًٞ٤بئ٤خ ٍٔؾذ ثبػالٕ ْٗٝو أُٞإلبد اُو٤بٍ٤خ اػزٔبكا
ػِ ٠ػلك .Escherichia coliػِ ٠إٔ افزجبهاد ٗٞػ٤خ ٓ٤ب ٙاُز٘يٝ ٙاالٍزغٔبّ
Recreational waterرؼزٔل ػِ ٠اُؾو٤وخ إٔ ًَ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ ٓٞعجخ الفزجبه
اُٞ٤ه٤٣ي ٓب ػلا ٛ .Eschericia coliن ٙاُطو٣وخ رَٔؼ ث٘ٔ ٞثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ ٝثبُزبُ٠
اٍزؼٔبٍ افزجبه ٓؼِٔٞ٤ُِ ٠ه٤٣ي(ْٗ .)Dufour et al., 1985ؤ افزجبه ؽل٣ش ٣ورٌي ػِ٠
ٓولهح ٍ ٖٓ %97الالد E.coliػِ ٠اٗزبط اٗي ْ٣ث٤زب-عِ٤ًٞو٤٘٣ٝل٣ي
ٝ B-glucuronidaseاُن٣ ٟؾَِ هاثطخ أٝهصٞعِ٤ًٞو َ٤ٍٞٗٝكْٓ ٠زوبد عِ٤ًٞو٤ٗٝل
ٓ Glucuronosyl-o-bond of glucuronide conjugaresضَ ٤ٓ 4ض َ٤آجِ٤ل٤و-َ٣ث٤زب-
كُزب-عِ٤ًٞو٤ٗٝل )ٝ .4-methyl-umbelliferyl-B-D-glucuronide (MUGك ٠ػبئِخ
االٗز٤وٝثبًز٤وٗ Enterobacteriaceae ٠َ٣غل إٔ ا٤ْ٣وّ٤ب ًٞالEscherichia coli ٟ
ٝثؼ٘ اُْ٤غ٤ال ا ٝ Shigellaاَُبُٔ٤ٗٞال )Feng and Hartman, 1982( Salmonella
ٝاُوِ ٖٓ َ٤اُ٤بهٍ٤٘٤ب )Petzel and Hartman, 1985( Yersiniaر٘زظ االٗي ْ٣أُْبه
اُٝ .ٚ٤ػِ ٠أٍبً اٗزبط ٛنا االٗيْٗ ، ْ٣ؤد االفزجبهاد ٌُِْق ػٖ ٝر٘ٔ٤خ ا٤ْ٣وّ٤ب ًٞالٟ
- 59 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
(Feng & Hartman, 1982; Petzel &Hartman, 1985; Eschericia coli
)Freier &Hartman, 1987
ٛنا ٓٝغ رؼلك ٛوم رول٣و أُغٔٞػخ اال أٗ٣ ٚغت إٔ ٣ئفن ك ٠االػزجبه إٔ ًَ ٛو٣وخ
رَزؼَٔ فالٍ ؽلٝك ٓؼ٘٤خُِٝ .ؾٖ ٍٞػِٗ ٠زبئظ كؼبُخ ٣زطِت آ٧و االُزياّ ثطوم اُزؾٌْ
ك ٠اُ٘ٞػ٤خ ٝاُزٍ ٠جن مًوٛب كٓ ٠نًواد . QC/QA
. 2 . 3غزيمخ أَبثيت انزخًز انًزؼذدح أٔ انؼذ االحزًبنٗ نزمذيز يغًٕػخ ثكززيب انمٕنٌٕ
Multiple Tube Fermentation or Most Probable Number Technique
for Determination of Coliform Group
ػ٘ل اٍزؼٔبٍ ٛن ٙاُطو٣وخ كبٕ ٗزبئظ افزجبه ٌٓوهاد اٗ٧بث٤ت Replicate tubes
ٝاُزقل٤لبد رَغَ ػِٕٞ ٠هح اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال )Most Probable Number (MPN
ٌُِبئٖ أُزٞاعل.
ٛنا اُؼلك٣ ،ؼزٔل ػِٗ ٠ظو٣خ االؽزٔبالد ٠ٛٝ ،رولِ٣واد ُٔزً ٍٜٞضبكخ اُجٌزو٣ب (اُو ُٕٞٞأٝ
ؿ٤وٛب) ك ٠اُؼ٘٤خًٝ .ضبكخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأُزؾَٖ ػِٜ٤ب ٓغ ثؼ٘ أُؼِٓٞبد ا٧فوٟ
أُزؾَٖ ػِٜ٤ب ٖٓ فالٍ أَُؼ اُٜ٘لٍ ٠أ ٝاُٖؾٔ٣ ، ٠ل ثبكٛ َٚوم رو ْ٤٤كؼبُ٤خ
أُؼبُغخ ٝاُ٘ٞػ٤خ اُٖؾ٤خ ُٖٔله أُ٤ب.ٙ
كهخ ًَ افزجبه رؼزٔل ػِ ٠ػلك اٗ٧بث٤ت أَُزؼِٔخٝ .أك َٚأُؼِٓٞبد ٣ؾَٖ ػِٜ٤ب ػٖ
اٍزؼٔبٍ أًجو ؽغْ ٖٓ اُؼ٘٤خ ك ٠ؽوٖ اٗ٧بث٤ت ثؾ٤ش رظٜو ؿبى ك ٠ثؼ٘ ٜٓ٘ب أًِٜ ٝب ك٠
ؽ ٖ٤إٔ أٙـو ؽغْ ٖٓ اُؼَ٣ ٚ٘٤زؼَٔ ك ٠ؽوٖ اٗ٧بث٤ت ال ٣ظٜو ؿبى ك ًَ ٠اٗ٧بث٤ت أٝ
ٓؼظٜٔبًٝ .ضبكخ اُجٌزو٣ب روله ٖٓ ٓؼبكُخ أ ٖٓ ٝعل ٍٝثبٍزؼٔبٍ ػلك اٗ٧بث٤ت أُٞعجخ ك٠
اُزقل٤لبد أُزؼلكح .ػلك عيئ٤بد اُؼ٘٤خ Sample portionsأُقزبهح ٍ٤ؾٌْ ثلهعخ اُلهخ
ك ٠اُ٘ز٤غخٝ .علا ٍٝاُؼلك االؽزٔبُ ٠رؼزٔل ػِ ٠اكزواٗ رٞى٣غ ثAssumption of َٕٞ٣ٞ
( a poisson distributionاالٗزْبه اُؼْٞائٝ .)٠ػِ ٠مُي ،اما ُْ ٣زْ هط اُؼ٘٤خ ثطو٣وخ
ٓ٘بٍجخ هجَ أفن اُغيئ٤بد ٜٓ٘ب أ ٝاما ٝعلد رغٔؼبد ٖٓ فال٣ب اُجٌزو٣ب ،كبٕ هٔ٤خ اُؼلك
االؽزٔبٍُ ٠زٌ ٕٞثؼ٤لح ػٖ اٌُضبكخ اُؾو٤و٤خ ُِجٌزو٣ب.
- 60 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 1 . 2 . 3انًيبِ يٍ َٕػيخ ييبِ انشزة Water of Drinking Water Quality
ػ٘ل رؾِ٤ٓ َ٤ب ٙاُْوة ُزول٣و ٓب اما ًبٗذ اُ٘ٞػ٤خ رزطبثن ٓغ أُٞإلبد اُزٙٝ ٠ؼزٜب ًٝبُخ
ؽٔب٣خ اُج٤ئخ آ٧و٤ٌ٣خ َ٣ ،زؼَٔ 10أٗبث٤ت ٌٓوهح رؾز ٟٞػٌِٓ 5 ،َِٓ 10 ٠وهاد ٖٓ
أٗبث٤ت رؾز ٟٞػِ َِٓ 20 ٠أ ٝىعبعخ ٝاؽلح رؾز ٖٓ َِٓ 100 ٟٞاُؼ٘٤خٝ .ػ٘ل افزجبه ٓ٤بٙ
اُْوة ٣غو ٟاالفزجبه اُزؤً٤ل ٟػِ ًَ ٠اٗ٧بث٤ت أ ٝاُيعبعبد اُز ٠رؼطٓ ٞٔٗ ٠غ ٝعٞك أٝ
ػلّ ٝعٞك ٗز٤غخ ا٣غبث٤خ ُزٌ ٕٞؽبٓ٘ أ ٝؿبى ٣ٝ .غو ٟاالفزجبه اٌُبَٓ Completed
testػِٓ ٠ب ال ٣وَ ػٖ ٖٓ % 10اُؼ٘٤بد أُٞعجخ ًَ ّٜٞ 3هٝ .رؼزجو ٗز٤غخ EC broth
أ EC MUG ٝاال٣غبث٤خ ًجلُِ٘ َ٣ز٤غخ اال٣غبث٤خ ُالفزجبه اٌُبَٓ.
ُٝالفزجبه اُوٝرُٖٔ ٠٘٤بكه ٓ٤ب ٙاُْوة اُؼبٓخ كبٕ اُٜلف ٖٓ االفزجبه ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ
ٞٛرول٣و ًلبءح ػِٔ٤بد أُؼبُغخ اُز ٠رزْ ك ٠أُؾطخ ًٝنُي ٍالٓخ ٗظبّ اُزٞى٣غًٝ .نُي
َ٣زؼَٔ ًٔبٗغ ُٞعٞك اُزِٞس اُجواى .ٟرٞاعل عيء ًج٤و ٖٓ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞكٗ ٠ظبّ اُزٞى٣غ
هثٔب ٌٕٞ٣ؿ٤و ٓورج ٜثلَْ أُؼبُغخ أ ٝاُجئو أُٖلهٓ ٌُٖٝ ،ورج ٜثبٍزؼبكح اُُِ٘ٔ ٞجٌزو٣ب .
ُٖٝؼٞثخ اُزلوهخ ٓب ث ٖ٤اٍزؼبكح ثٌزو٣ب اُوٝ ُِٞٔ٘ ُٕٞٞاُزِٞس اُغل٣لٕ ٣لزوٗ أّ ٗٞاعل
ثٌزو٣ب اُو ٞٛ ُٕٞٞرِٞس عل٣ل اال اما اصجذ.
. 2 . 2 . 3انًيبِ األخزٖ خالف ييبِ انشزة
ك ٠افزجبه أُ٤ب ٙفالف ٓ٤ب ٙاُْوة ٣ؾوٖ ٍَِِخ ٖٓ اٗ٧بث٤ت ثزقل٤لبد ٓززبُ٤خ ػْو٣خ ٖٓ
أُ٤ب)..... ,01 ٝ ,1 ٝ 1 ٝ10 ( ٙاػزٔبكا ػًِ ٠ضبكخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأُؾزِٔخ٣ .غو ٟاالفزجبه
اٌُبَٓ أ ٝاُٜ٘بئ ٠ػِ %10 ٠ػِ ٠ا٧هَ ٖٓ اُؼ٘٤بد أُٞعجخ ػِ ٠أٍبً ٓٝ .٠ٍٔٞاُٜلف
ٖٓ افزجبه أُ٤ب ٙفالف ٓ٤ب ٙاُْوة ٞٛافزجبه ًضبكخ اُزِٞس اُجٌز٤و ،ٟرول٣و ٖٓله اُزِٞس،
االُياّ ث٘ٞػ٤خ أُ٤ب ٙاُو٤بٍ٤خ ،أ ٝرول٣و ؽ٣ٞ٤خ ُِ Survivalجٌزو٣ب .افزجو ػلك ًبف ٖٓ
اُؼ٘٤بد ُِؾٖ ٍٞػِٗ ٠زبئظ ٓٔضِخ ٝ .ػٔٓٞب ،كبٕ هٔ٤خ أُزُِ٘ ٍٜٞزبئظ ٖٓ ػلك ٖٓ اُؼ٘٤بد
٣ؼط ٠هٔ٤خ ٌٕٞ٣كٜ٤ب ٣زلٗ ٠االفزالف ٖٓ ػ٘٤خ اُ ٠أفو. ٟ
. 3 . 2 . 3انؼيُبد األخزٖ
ك ٠ؽبُخ افزجبه أُٞاك اُِٖجخ أّ ٝج ٚاُِٖجخ ٣زْ ػَٔ رقل٤ق ٝىْٗ ؽغْ ٖٓ ٓؾِ٘ٓ ٍٞظْ أٝ
ٓبء اُججز٣ٝ %,1 ٕٞزْ اُقِ ٜثبٍزؼٔبٍ فال ٛثَوػخ ٓ٘قلٚخ ( ُ 8000لخ ك ٠اُله٤وخ) ُٔلح
2 – 1كه٤وخ ٣ ٚ٘ٓٝزْ ػَٔ اُزقل٤لبد أُززبُ٤خ ثَوػخ ؽز ٠ال ٣ؾلس روٍ٤ت.
- 61 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 4انطزيمخ انزخًز انميبطيخ نزمذيز ثكززيب انمٕنٌٕ انكهيخ
Standard Total Coliform Fermentation Technique
. 1 . 4انًزحهخ االفززاظيخ Presumptive Phase
اٍزؼَٔ ث٤ئخ Lauryl tryptose brothك ٠أُوؽِخ االكزوا٤ٙخ الفزجبه اٗ٧بث٤ت أُزؼلكح.
اما ًبٗذ اُج٤ئخ ٓجوكح ثؼل اُزؾ٤ٚو ٝاُزؼو ،ْ٤رزوى ػِ ٠كهعخ ؽواهح اُـوكخ (ٓ 20ئ٣ٞخ)
فالٍ اُِٝ َ٤هجَ االٍزؼٔبٍ٣ .زقِٔ ٖٓ االٗبث٤ت اُز٣ ٠ظٜو ثٜب ٗٔ ٞأ ٝكوبػبد أً ٝالٔٛب.
. 1 . 1 . 4رزكيت ثيئخ يزق انهٕريم رزثزٕس :
………………………………… Tryptone ..20 g
Lactose …………………………………… . 5 g
Dipotassxium hydrogen phosphate …… …. 2.75 g
Potassium dihydrogen phosphate ………. 2.75 g
… ……………………… Sodium chloride 5 g
Sodium lauryl sulphate ……………………. .0.1 g
……………………… Reagent-grade water 1 L
أٙق أٌُٗٞبد اُ ٠أُبء ٝافِ ٜع٤لاٍ ،قٖ ُِنٝثبٕ٣ pH .غت إٔ ,2 -/+ 6,8 ٌٕٞ٣ثؼل
اُزؼو .ْ٤هجَ اُزؼوٝ ْ٤ىع اُج٤ئخ ثٌٔ٤بد ًبك٤خ ك ٠أٗبث٤ت اُزقٔو ٌٕٞ٣ٝثٌَ اٗجٞثخ اٗجٞثخ كهٛبّ
ٓوِٞثخ ٝرٌ ٕٞؽغْ اُج٤ئخ ٣ـطٖٗ ٠ق االٗجٞثخ أ ٝصِضبٛب ػِ ٠ا٧هَ ثؼل اُزؼوًٝ .ْ٤جل َ٣أَٛ
ٙٝغ اٗجٞثخ كهٛبّ ٝأٙق ,01عواّ /اُِزو ٖٓ ثوً ٞٓٝو٣ي ٍٝث٤وثَ اُ ٠اُج٤ئخ ٌُِْق
ػٖ اٗزبط ؽٔٙٞخ ٝاُن٣ ٟؼزجو كُ َ٤ػِ ٠ا٣غبث٤خ ٛنا االفزجبهٝ .رـط ٠االٗجٞثخ ثـطبء ٓؼلٗ٠
أ ٝثالٍزٓ ٠ٌ٤وبُِ ّٝؾواهح.
- 62 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ؽٚو اُِٞه َ٣ثزوً٤ي ثؾ٤ش ال ٣ئصو اٙبكخ ، َِٓ 20 ،َِٓ 100أ َِٓ 10 ٝػِ ٠روً٤ي
ٌٓٗٞبد اُج٤ئخ
. 2 . 1 . 4انطزيمخ
هرت اٗ٧بث٤ت كٕ ٠لٞف ٖٓ 5أ 10 ٝأٗبث٤ت ك ٠ؽبَٓ أٗبث٤ت .ػلك اُٖلٞف ٝؽغْ اُؼ٘٤خ
٣ؼزٔل ػِٞٗ ٠ػ٤خ ٝفٖبئٔ أُ٤ب ٙأُقزجوح٤ُٔ .ب ٙاُْوة اٍزؼَٔ 5أعياء ٖٓ اُؼ٘٤خ ًَ
،َِٓ 10 ًَ 10 ،َِٓ 20أ ٝىعبعخ ٝاؽلح ٤ُِٔٝ ،َِٓ 100ب ٙاُـ٤و َٓزؼِٔخ ك ٠اُْوة
اٍزؼَٔ 5أٗبث٤ت ٌَُ رقل٤ق ( َِٓ ,1 ،1 ،10أ ٝؿ٤وٛب)
ُؼَٔ اُزقل٤لبد ٝه٤بً ؽغْ اُؼ٘٤بد أُقللخ ارجغ ٓب مًو ٍبثوب .هط اُؼ٘٤خ ٝاُزقل٤لبد ع٤لا
ؽٞآُ 25 ٠وحُ .وؼ ًَ اٗجٞثخ ك ٠أُغٔٞػخ ثؾظ ٓزٌوه ٖٓ اُؼ٘٤خ .افِ ٜاُؼ٘٤خ ٓغ اُج٤ئخ
ثبُٜي ثوكن.
ؽ ٖٚاٗ٧بث٤ت أُِوؾخ أ ٝاُيعبعبد ػ٘ل ٓ ,5 -/+ 35ئ٣ٞخ ٝ .ثؼل ٍ 24بػخ ٍ 2 -/+بػخ
افزجو اٗ٧بث٤ت أ ٝاُيعبعبد ُٞعٞك ٗٔ ،ٞؿبى ،رلبػَ ؽبٓ ُٕٞ ( ٠ٚإٔلو) ،اما ُْ ٌٖ٣
٘ٛبى ؿبى أ ٝؽبٓ٘ ،أػل اُزؾ, ٖ٤ٚاػل اٌُْق كٜٗ ٠ب٣خ ٍ 48بػخ ٍ 3 -/+بػخٍ .غَ
اُ٘ز٤غخ.
اٗزبط رلبػَ ؽبٓ ٠ٚأ ٝؿبى ك ٠اٗ٧بث٤ت أ ٝاُيعبعبد فالٍ ٍ 48بػخ ٍ 3 -/+بػخ ٣لٍ
ػِ ٠اُزلبػَ االكزوا ٠ٙأُٞعت .اُ٘بث٤ت أُٞعجخ ٣غوُٜ ٟب االفزجبه اُزؤً٤ل.ٟ
- 63 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ؿ٤بة رٌ ٕٞاُـبى أ ٝاُؾٔٙٞخ كٜٗ ٠ب٣خ اُزؾ٣ ٖ٤ٚلٍ ػِ ٠اُ٘ز٤غخ اَُِج٤خ ُالفزجبه.
أًل اٗ٧بث٤ت أ ٝاُيعبعبد اُز ٠أظٜود ؿ٤بة اُـبى ٝؿ٤بة اُؾٔٙٞخ ٌُٖٝأصجزذ إٔ ٘ٛبى
ٗٔ.ٞ
. 2 . 4انًزحهخ انزأ كيذيخ Confirmed phase
. 1 . 2 . 4ثيئخ انشراػخ :اٍزؼَٔ ث٤ئخ ٓوم اُجو٘٤ِ٣ذ عو ٖ٣الًزٞى ثُِ َ٤زقٔو ك ٠أٗبث٤ت
ُِٔوؽِخ اُزؤً٤ل٣خ ٝروً٤جٜب ًٔب ٠ِ٣
Peptone ……………………………….. 10 g
Lactose ………………………………. 10 g
Oxgall ……………………………….. 20 g
Brillient green …………………………... 0.0133 g
Reagent grade water ………………………1 L
أٙق اٌُٗٞبد اُ ٠أُبء ٝافِ ٜع٤لاٍ ،قٖ الماثخ اٌُٗٞبد ٝاٙجpH ٜثؾ٤ش 7،2 ٌٕٞ٣
,2 -/+ثؼ ل اُزؼو .ْ٤هجَ اُزؼوٝ ْ٤ىع ك ٠أٗج٤ت ٝثٜباٗجٞثخ كهٛبّ ٓوِٞثخ ٤ًٔ ،خ ٖٓ اُج٤ئخ ًبك٤خ
ُزـطٖٗ ٠ق اُ ٠صِض ٠اٗجٞثخ كهٛبّ ثؼل اُزؼو .ْ٤ؿط ٠اٗ٧بث٤ت ثؤؿط٤خ ٓؼلٗ٤خ أ ٝثالٍز٤ي
ٓوبُ ّٝؾواهح اُزؼو.ْ٤
. 2 . 2 . 8انطزيمخ ًَ : Procedureاٗ٧بث٤ت اال٣غبث٤خ أ ٝاُيعبعبد اُز ٠أػطذ ٗز٤غخ
ا٣غبث٤خ ك ٠أُوؽِخ االكزوا٤ٙخ ( Presumptive phaseأ٣خ ًٔ٤خ ٖٓ اُـبى -ػٌبهح-
ؽبٓ٘) فالٍ ٍ 2 -/+ 24بػخ (أ ٝهجَ مُي ٖ٘٣ٝؼ ثبُلؾٔ ثؼل ٍ 1 -/+ 18بػخ
ُال٣غبث٤خ) ٖٓ اُزؾ٣ ٖ٤ٚزْ اعواء االفزجبه اُزؤً٤لٝ .ٟاما ظٜود أٗبث٤ت ا٣غبث٤خ أفو ٟػ٘ل
ٍ 3 -/+ 48بػخ ٖٓ اُزؾ٣ ٖ٤ٚغوُٜ ٟب ٠ٛا٧فو ٟاالفزجبه اُزؤً٤ل.ٟ
ٛي ثوكن اٗ٧بث٤ت اال٣غبث٤خ ٖٓ أُوؽِخ االكزوا٤ٙخ (ؽبٓ٘ ٝؿبى) ُزؼِ٤ن اُٖ٘ٔٓ ٞ
اٌُبئ٘بد ك ٠اٗ٧بث٤ت .ثبٍزؼٔبٍ ُٞة ٓؼوْ ( هطو كزؾزٜب )ْٓ 3,5 – 3اٗوَ ُٞة ٝاؽلح أٝ
أًضو ٖٓ أُيهػخ ٖٓ ًَ اٗجٞثخ ا٣غبث٤خ اُ ٠اٗجٞثخ ثو٘٤ِ٣ذ عو ٌٖٔ٣( ٖ٣اٍزؼٔبٍ ٗبهَ فْج٠
- 64 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٓ Applicatorؼوْ ثـََُٔٔ ٚبكخ ٍْ 2,5ػِ ٠ا٧هَ ك ٠أُيهػخ ٙٝٝؼ ٚك ٠ث٤ئخ
اُجو٘٤ِ٣ذ عو ٖ٣صْ اىاُزٌ٣ٝ .)ٚوه مُي ثبَُ٘جخ ٌَُ اٗ٧بث٤ت اال٣غبث٤خ ٖٓ أُوؽِخ
االكزوا٤ٙخ.
ؽ ٖٚاٗبث٤ت اُجو٘٤ِ٣ذ عو ٖ٣ػ٘ل ٓ 35ئ٣ٞخ ,5 -/+كهعخ ،رٌ ٕٞؿبى ك ٠اٗجٞثخ كهٛبّ ثؼل
كزوح رؾٍِ 1 -/+ 6 ٖٓ( ٖ٤ٚؼخ اٍُ 2 -/+ 24 ٠بػخ) ٝفالٍ ٍ 48بػخ ٍ 3 -/+بػخ
رؼزجو رِي اٗ٧بث٤ت ا٣غبث٤خ ُالفزجبه اُزؤً٤ل .ٟاؽَت اُؼلك االؽزٔبُ ٖٓ ٠اٗ٧بث٤ت اال٣غبث٤خ
ٖٓ ث٤ئخ اُجو٘٤ِ٣ذ عو.ٖ٣
. 3 . 2 . 4انطزيمخ انجذيهخ :رَزقلّ رِي اُطو٣وخ ثبَُ٘جخ ُِٔ٤ب ٙأُِٞصخ ٤ٓٝب ٙاُٖوف
اُٖؾ.٠
اما ًبٗذ ًَ اٗ٧بث٤ت ك ٠أُوؽِخ االكزوا٤ٙخ ا٣غبث٤خ ُزقل٤لٓ ٖ٤ززبُ ٖٓ ٖ٤اُؼ٘٤خ أُقزجوح ٣زْ
اعواء االفزجبه اُزؤً٤لُ ٟالٗبث٤ت اال٣غبث٤خ ٖٓ اٗ٧بث٤ت أُؾوٗٞخ ثبٌُٔ٤خ ا٧هَ ٖٓ اُؼ٘٤خ
ٝأُٞعجخ عٔ٤ؼٜب اُ ٠عبٗت اٗ٧بث٤ت اال٣غبث٤خ ٖٓ اُٖق اُضبُش ( أُؾوٗٞخ ثٌٔ٤خ أهَ ٖٓ
اُؼ٘٤خ) ٣ٝزْ ػِٜ٤ب ٓب رْ ٍبثوب.
. 4 . 2 . 4انًزحهخ انكبيهخ أٔ انُٓبئيخ Complete phase
٣غوٛ ٟنا االفزجبه ًج٤بٗبد ُِزؾٌْ ك ٠اُغٞكح ػِ %10 ٠ػِ ٠ا٧هَ ٖٓ االٗبث٤ت اال٣غبث٤خ
ٖٓ أُوؽِخ اَُبثوخ٣ .زْ ؽوٖ اٗبث٤ت ثو٘٤ِ٣ذ عوُ ٖ٣جٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ ٓ ٝوم ECأ ٝث٤ئخ
ٓوم EC with MUGال٤ْ٣و٤ْ٣ب ًٞالً ( ٟالٔٛب ٣زْ اُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل 44,5كهعخ ٓئ٣ٞخ)
ٝاُ٘ز٤غخ اال٣غبث٤خ ك ٠اُؾبالد اُضالس رلٍ ػِ ٠إٔ االفزجبه اُٜ٘بئ ٠ا٣غبثٝ . ٠ا٣غبث٤خ أٗبث٤ت
- 65 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اُجو٘٣ذ عو ٖ٣كو ٜكٍ ػِ ٠اال٣غبث٤خ ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ ( اٗظو اٌَُْ اُزبُ)٠
- 66 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
LES Endo agar:
Yeast extract ………………………………………1,2 g
Casitone or trypticase …………………………….3,7 g
Thiopeptone or thiotone …………………………. 3,7 g
Tryptose …………………………………………. 7,5 g
Lactose …………………………………………… 9,4 g
Dipotassium hydrogen phosphate ……………… 3,3 g
Potassium dihydrogen phosphate ……………….. 1.0 g
Sodium chloride ………………………………….. 3,7 g
Sodium desoxycholate …………………………….0,1 g
Sodium lauryl sulphate …………………………. . 0,05 g
Sodium sulfite …………………………………… 1,6 g
Basic fuchsin …………………………………….. 0,8 g
Agar ……………………………………………… 15.0 g
Reagen grade water ……………………………… 1 L
بٕ الماثخ٤ِ هوة اُـ٠ُ ٍقٖ ا.% 95 ٍٞٗضب٣ َِٓ ا20 قٙأٝ ُزو ٓبء1 ٠ُٗبد اٌُٞق اٙا
٠ ال رؼوْ ك.خ٣ٞ كهعخ ٓئ50 – 45 ٠ُثوك اٝ ب ٖٓ ؽٔبّ أُبءٜٗبد صْ افوعٌُٞٔا
ؽبُخ٠ ك.ْٓ 60 جبمٛ أ٠ َِٓ ك7 – 5 بٜىػٝ .,2 -/+ 7,2 ٠بئُٜ٘ اpH .ًالفٞرٝ٧ا
.ْٓ 5 – 4 ئخ٤ٕ ػٔن اُجٌٞ٣ ش٤ؾ٤ئخ ث٤خ ٖٓ اُج٤ًٔ غٙ ْ ٓقزِلخ اُؾغٟجبم أفوٛاٍزؼٔبٍ أ
- 67 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اؽلع اٛ٧جبم ثؾ٤ش ال رؼوٗ اٛ٧جبم اُ ٠أّؼخ أٌُْ ،ثوك ك ٠اُظالّ٣ ،ل َٚؽلظٜب ك٠
أً٤بً ثالٍز٤ي ٓؾٌٔخ اُـِن ُقل٘ اُلول ك ٠اُوٞٛثخ .ال ري٣ل ٓلح اُؾلع ػٖ اٍجٞػبٕ أٝ
٣زقِٔ ٜٓ٘ب ثٔغوك االؽَبً ثلول اُوٞٛثخ ،رـ٤و ك ٠اُِ ٕٞأ ٝاُزِٞس.
MacConkey agar
Peptone ……………………………………………….. 17 g
Proteose peptone …………………………………….. 3 g
Lactose ……………………………………………… 10 g
Bile salts ……………………………………………….. 5 g
Sodium chloride ……………………………………… 1,51 g
Agar ………………………………………………… 13,5 g
Neutral red ……………………………………………0,03 g
Crystal violet ………………………………………….0,001 g
Reagent grade water ……………………………… ..1 L
أٙق أٌُٗٞبد اُ ٠أُبء ٝافِ ٜع٤لاٍ ،قٖ اُ ٠اُـِ٤بٕ الماثخ أٌُٗٞبد .ػوْ ك٠
االٝرًٞالف ُٔلح 15كه٤وخ ػ٘ل ٓ 121ئ٣ٞخُ .طق اُؾواهح Temperػوت اُزؼوٕٝ ْ٤ت
اُج٤ئخ ك ٠أٛجبم .
pHاُج٤ئخ ٣غت إٔ ٝ2 -/+ 7,1 ٌٕٞ٣ثؼل اُزؼو.ْ٤
- 68 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
Nutrient agar
Pesptone ……………………………………………… .. 5 g
Beef extract ……………………………………………… 3 g
Agar ………………………………………………………15 g
Reagent grade water ……………………………………. 1 L
أٙق أٌُٗٞبد اُ ٠أُبء ،افِ ٜع٤لا ٍٝقٖ ُِنٝثبٕ٣ pH .غت إٔ ,2 -/+ 6,8 ٌٕٞ٣ثؼل
اُزؼو.ْ٤هجَ اُزؼوٝ ْ٤ىع اُج٤ئخ ك ٠أٗبث٤ت ثوالٝٝظ .ثؼل اُزؼو ْ٤أَٓ اٗ٧بث٤ت ُزؼطٍ ٠طؼ
ٓ٘ؾ٘ . Slant ٠اؿِن اٗ٧بث٤ت ثبؽٌبّ ثؼل إٔ رجوك ٝفيٜٗب كٌٓ ٠بٕ ثبهك ٓؾٔ.٠
٣) Gram stain reagentsواعغ ) Module 2
1 . 4 . 2 . 4انطزيمخ
أ .ك ٠ظوٝف ٓؼؤخ اىهع ػٍِ ٠طؼ ٛجن LES Endo agarأMacConkey agar ٝ
ًَ اٗجٞثخ ٓٞعجخ ٖٓ اُجو٘٤ِ٣ذ عو ٖ٣كٞه ظٜٞه اُـبى ثٜب ثبٍزؼٔبٍ ُٞة ْٓ 3أ ٝاثوح
ٓ٘ؾ٘ؾ٤خ هِ٤ال ( ال ٣ئفن اُو ْ٣ػٍِ ٠طؼ االٗجٞث ،ٚرـٌٔ اُِٞة اُ ٠اُؼٔن ٣ٝقط ٜاُطجن
ُِؾٖ ٍٞػَِٓ ٠زؼٔواد ٓزجبػلح) .ؽ ٖٚػِٓ 35 ٠ئ٣ٞخ ,5 -/+كهعخ ُٔلح 2 -/+ 24
ٍبػخ.
ة .أَُزؼٔواد اُز ٠رْ٘ؤ ػِ LES Endo agar ٠رٌٞٔٗ ٕٞمع٤خ (Typicalهوٓي٣خ اُ٠
أؽٔو هبرْ ٓغ أُِؼخ أُؼلٗ٤خ) أ ٝؿ٤و ٗٔٞمع٤خ ( Atypicalهوٓي٣خ ،أؽٔو ،أث ،٘٤أٝ
ػلٔ٣خ اُِ ٕٞثل ٕٝأُِؼخ أُؼلٗ٤خ ) ثؼل رؾٍ 24 ٖ٤ٚبػخ .أَُزؼٔواد أُقٔوح ُالًزٞى
اُ٘ٔٞمع٤خ ٝاُز ٠رْ٘ؤ ػِ ٠ث٤ئخ أُبً ٠ٌٗٞرٌ ٕٞؽٔواء ٝهثٔب رٌٓ ٕٞؾبٛخ ثٔ٘طوخ ٓؼزٔخ أٝ
روٍ٤ت آالػ اُٖلواءٛ ًَ ٖٓ .جن اُزوَٓ ٜزؼٔوح أ ٝأًضو ٖٓ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُ٘ٔٞمع٤خ
رٌ٘ٓ ٕٞؼيُخ ٝ ،ك ٠ؽبُخ ػلّ رٞاعل رِي أَُزؼٔواد اُزوَٓ ٜزؼٔواد أهوة ٓب ٌَُِْ ٌٖٔ٣
أُْبه آَُ ًَٝ ٚ٤زؼٔوح رِوؼ ك ٠اٗجٞثخ رقٔو ٖٓ ٓوم ُٞه َ٣رو٣جزٞى ٝػٍِ ٠طؼ آعبه
ٓـنٓ ٟبئَ ٝ Nutrient agarرؾٍ 24 ٖٚبػخ ػ٘ل ٓ 35ئ٣ٞخ .ؽ ٖٚػِٝ5 -/+ 35 ٠
- 69 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 2 -/+ 24بػخ ٝاكؾٖٜب ُزٌٖ ؿبى ٝأػل اُلؾٔ اما ًبٗذ ٍبُجخ ػ٘ل 48
ٍ 3 -/+بػخ٣ٝ .غو ٟاُٖجؾ ثغواّ ٖٓ اٗجٞثخ ا٥عبه أُـن ٌٖٔ٣( ٟػلّ اعواء رِي اُقطٞح
ك ٠ؽبُخ ٓ٤ب ٙاُْوة).
رٌ ٕٞؿبى ك ٠اٗجٞثخ ٓوم اُِٞه َ٣روثزٞى فالٍ ٍ 3 -/+ 48بػخ ٝاػطبء فال٣ب ٍبُجخ ُغواّ،
ؿ٤و ٓزغوصٔخ ،ػٖ٣ٞخ رؼزجو ٓٞعجخ ُالفزجبه اُزٌٔ٤جٝ ٠رئًل ٝعٞك أػٚبء ٖٓ ٓغٔٞػخ
اُو.ُٕٞٞ
. 3 . 4حظبة كضبفخ انجكززيب Estimation of Bacterial Density
. 1 . 3 . 4دلخ اخزجبر أَبثيت انزخًز Precision of fermentation tube test
اما ُْ ٣زْ افزجبه ػلك ًج٤و ٖٓ عيئ٤بد اُؼ٘٤خ ،كبٕ كهخ افزجبه أٗبث٤ت اُزقٔو رٌ٘ٓ ٕٞقلٚخ.
ٓضال ،اما أفزجو ٖٓ َِٓ 1ىعبعخ رؾز ٟٞػِ ٠فِ٤خ ٝاؽلح ٖٓ ثٌزو٣ب اُو ،َِٓ/ُٕٞٞكبٕ
ؽٞاُ ٖٓ % 37 ٠اٗ٧بث٤ت أُؾز٣ٞخ ػِ ٖٓ َِٓ 1 ٠اُؼ٘٤خ ٖٓ أُزٞهغ إٔ ر٘زظ ٗزبئظ ٍِج٤خ
ٗز٤غخ ُِزٞى٣غ اُؼْٞائُِ ٠جٌزو٣ب ك ٠اُؼ٘٤خ ًَ ،آَِ ٖٓ اُؼ٘٤خٝ .ػ٘لٓب ٘ٛ ٌٕٞ٣بى 5أٗبث٤ت
ًَ ٜٓ٘ب ث ٖٓ َِٓ 1 ٚاُؼ٘٤خ كبٗ ٚاُ٘ز٤غخ اَُِج٤خ رؾذ رِي اُطوٝف كبٕ اُزٞهغ إٔ رٌٕٞ
اُ٘زبئظ ٍِج٤خ ثبٌُبَٓ ال ٣ي٣ل ػٖ .%1
ٝثبُزبُ٘ٛ ٌٕٞ٣ ٠بى ؽوٓ ػ٘ل اٍ٘زبط أُـي ٟاُٖؾُ٘ ٠زبئظ االفزجبه ُجٌزو٣ب اُوُٕٞٞ
ٝأُزؾَٖ ػِٜ٤ب ٖٓ ثٚغ اٗبث٤ت هِِ٤خ ٖٓ ًَ رقل٤ق ٖٓ اُؼ٘٤خ ،فبٕخ ػ٘لٓب ٌٕٞ٣ػلك
اُؼ٘٤بد ٖٓ ٗوطخ ٓؼ٘٤خ ٓؾلٝك.
. 2 . 3 . 8حظبة ٔرظغيم انؼذد األكضز احزًبال Computing and Recording of
ُMPNؾَبة ًضبكخ ثٌزو٣ب اُو٣ ُٕٞٞؼجو ػٜ٘ب كٕٞ ٠هح ػلك أًضو اؽزٔبال . MPNهْ٤
اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال ََُِِ ،خ ٖٓ ٗزبئظ اُيهع ،رزٚؼ ك ٠اُٖلؾخ اُزبُ٤خ.
ٝرِي اُغلا ٍٝرْزَٔ ػِ % 95 ٠ؽلٝك صوخ ٌَُ Cofidence limitsهٔ٤خ ٓولهح ٖٓ هٔ٤خ
اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال أُولهح .اما ًبٕ ؽغْ اُؼ٘٤خ أَُزؼِٔخ ٖٓ رِي أُٞعٞكح ك ٠اُغلا،ٍٝ
ٍغَ اُ٘ز٤غخ َٓ٘ٞثخ اُ ٠ػلك اُ٘زبئظ اال٣غبث٤خ ٝاَُِج٤خ ك ٠اَُالٍَ ًؼلك أًضو اؽزٔبال /
َِٓ 100أٍ ٝغَ اُ٘ز٤غخ ًٞعٞك أ ٝؿ٤بة ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ أ ٝاُجواى٣خ (. ( P/A
ؽغْ اُؼ ٚ٘٤اُز ٠رظٜو ك ٠اُغلا ٍٝك ٠اُٖلؾ ٚاُزبُٚ٤
- 70 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
- 71 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٓورج ٜأٍبٍب ثبُٔ٤ب ٙاُٜ٘بئ٤خ ٣ٝ .ج ٖ٤ه ْ٤اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال ُ٘زبئظ ا٣غبث٤خ ٍِٝج٤خ ػ٘ل افزجبه
فَٔخ ٖٓ ٝ ،َِٓ 10فَٔخ ،َِٓ 1فَٔخ .َِٓ ,1ػ٘لٓب رٌ ٕٞاُزقل٤لبد أُززبُ٤خ ٓقزِلخ ػٖ رِي
أُٞعٞكح ك ٠اُغل ،ٍٝافزبه ه ْ٤اُؼل اً٧ضو اؽزٔبال اُغل ٍٝاَُبثن ُِؼلك ٖٓ اُ٘بث٤ت أُٞعجخ
ٝاؽَت ٛجوب ُِٔؼبكُخ اُزبُ٤خ:
MPN value (from table) X _________10___________ = MPN / 100ml
Largest volume tested in dilution
Series used for MPN determination
ػ٘لاٍزؼٔبٍ أًضو ٖٓ 3رقل٤لبد كٍَِِ ٠خ ٓزلهعخ ٖٓ اُزقل٤ق ،اٍزؼَٔ ٗزبئظ 3
كوٜ٘ٓ ٜب ك ٠ؽَبة اُؼل اً٧ضو اؽزٔبال .الفز٤به اُضالس رقل٤لبد الٍزؼٔبُٜب ك٠
رول٣ال اُؼل اً٧ضو اؽزٔبال ،افزبه أػِ ٠اُزقل٤لبد اُزىزؼطٗ ٠زبئظ ا٣غبث٤خ كًَ ٠
اُقٌٔ اعياء ٖٓ اُؼ٘٤خ أُقزجوح ٝاُزقل٤لبٕ اُزبُ٤بٕ اُ٘بعؾبٕ ا٧ػِ ٠ك ٠اُزقل٤ق.
اٍزؼَٔ ٗزبئظ ُٜن ٙاُؾغ ّٞاُضالصخ ك ٠ؽَبة اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبالٝ .ك ٠أُضبٍ
أُج ٖ٤أٍلَ ( اُغل ٍٝاُزبُ ، )٠اُضالس رقلجلبد أُقزبهح رظٜو ثق٤ٍٔ ٜي .ك٠
ؽبُخ Cاف زبه اُضالس رقل٤لبد ا ٠ُٝ٧ثؾ٤ش رٌ ٕٞاٗ٧بث٤ت اال٣غبث٤خ ك ٠اُزقل٤لبد
اٍُٞط.٠
ٝك ٠ؽبُخ ٓضَ أُٞعٞك أٍلَ أٍلَ (ٓضبٍ )dكبٕ اٗ٧بث٤ت اال٣غبث٤خ رزٞاعل ك٠
رقل٤ق أػِ ٖٓ ٠اُضالس أُقزبهح ٛجوب ُِوبػلح ٝك ٠ؽبُخ eاٍزقلّ اُضالس هْ٤
ا٠ُٝ٧
ػ٘لٓب ٣واك رِقٗ ٔ٤زبئظ ثبَُ٘جخ ُٔغٔٞػخ ٓزََِِخ ػِٕٞ ٠هح هٔ٤خ ٝاؽلح
٣ؾَت أُز.ٍٜٞ
- 72 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اُغل ٍٝاُزبُ٣ ٠ظٜو اُضالس اُزقل٤لبد أُقزبهح .اما رؾَٖ ػِ ٠هواءاد ثؼ٤لح االؽزٔبٍ
ثَ٘جخ ري٣ل ػِ %1 ٠كبٜٗب كُ َ٤إٔ ٘ٛبى فطؤ ك ٠اُطو٣وخ أ ٝإٔ االكزواٗ االؽٖبئٝ ٠اُنٟ
رؾز ٚؽَجذ هٔ٤خ اُؼلك االؽزٔبُ٣ ُْ ٠زؾونٝ .اما ًبٗذ ٘ٛبى هواءاد ُٗ٨بث٤ت أُٞعجخ ال
رزٞاعل ك ٠اُغلٝة كبٗ ٌٖٔ٣ ٚؽَبثٜب ٖٓ أُؼبكُخ اُزبُ٤خ:
ٝاُغلاٝ
ٍ ُو ْ٤اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال ًٝنُ1ي أُؼبكُخ اَُبثوخ ٌٖٔ٣اٍزؼٔبُٜب ُزول٣و أ٣خ
ٓغٔٞػخ أفو ٟفالف ثٌزو٣ب اُو.ُٕٞٞ
- 73 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اخزجبر انزٕاعذ – ػذو انزٕاعذ نجكززيب انمٕنٌٕ )Presence-Absence (P-A
Coliform Test
افزجبه اُزٞاعل-ػلّ اُزٞاعل ُٔغٔٞػخ ثٌزو٣ب اُو ٠ٛ ُٕٞٞرط٣ٞو ُطو٣وخ اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال
.رجَ ،ٜ٤ثبٍزؼٔبٍ ؽغْ ًج٤و ٝاؽل ( )َِٓ 100ك ٠ىعبعخ ىهع ُِؾٖ ٍٞػِٓ ٠ؼِٓٞبد
ٗٞػ٤خ ػٖ رٞاعل أ ٝؿ٤بة ثٌزو٣ب اُوٙ ،ُٕٞٞجطذ ػِٗ ٠ظو٣خ أٗ ٚال ثل ٖٓ ؿ٤بة ثٌزو٣ب
اُو ُٕٞٞك ٖٓ َِٓ 100 ٠ػ٘٤خ ٓ٤ب ٙاُِْوةٝ .افزجبه اُزٞاعل-ػلّ اُزٞاعل ٞ٣كو اٚ٣ب
اُلوٕخ ُيهاػخ ٝػيٍ اُالئَ اُجٌز٤و٣خ ا٧فو( ٟثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ ،ا٣وٗٞٓٝبً،
ٍزبك٤ٍ ،٠ًًِٞٞ٤لٗٞٓٝبً ،اَُجؾ٤بد اُجواى٣خٝ ،اٌٍُِٞزو٣لٝ )ْ٣ػِٗ ٠لٌ اٍ٧بً اُ٘ٞػ٠
ٌ٤ُٝأٌُ٘ٛٝ .٠بى ٓٔ٤ياد أفو ٟرَْٔ آٌبٗ٤خ افزجبه ػلك ًج٤و ٖٓ اُؼ٘٤بد كٝ ٠ؽلح
اُٞهذ .اعو٣ذ كهاٍبد ٓوبهٗخ ثطو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ Membrane filtrationأظٜود
إٔ افزجبه اُزٞاعل –اُـ٤بة هثٔب رؼط ٠أهٖ ٠كوٕخ ٌُْق رٞاعل ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞكٝ ٠عٞك
اُؼل٣ل ٖٓ اُجٌزو٣ب ا٧فوٝ ٟاُز ٠هثٔب رزلٞم ك ٠اُ٘ٔ ٞػِ ٠ثٌزو٣ب اُوُٞٗٞٞرَجت ْٓبًَ ك٠
اٌُْق ػٜ٘ب.
افزجبه اُزٞاعل-اُـ٤بة ٙٝغ ُالٍزؼٔبٍ ك ٠االفزجبه اُوٝرُِ ٠٘٤ؼ٘٤بد أُغٔؼخ ٖٓ ٗظبّ
اُزٞى٣غ أٓ ٝؾطبد ٓؼبُغخ أُ٤ب .ٙػ٘لٓب ر٘زظ اُؼ٘٤بد أُغٔؼخ ٖٓ ٓٞهغ ٓؼٗ ٖ٤زبئظ ا٣غبث٤خ
الفزجبه اُزٞاعل-اُـ٤بة ُجٌزو٣ب اُو ،ُٕٞٞكبٗ ٚهثٔب ٖ٘٣ؼ ثؤٕ روله ًضبكخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞك٠
ػ٘٤بد ٓزٌوهحٝ .أُؼِٓٞبد أٌُ٤خ هثٔب رظٜو ٓل ٟاُزِٞس.
- 74 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 1انًزحهخ االفززاظيخ Presumptive phase
. 1 . 1ثيئخ انشرع Culture media
P-A broth
Beef extract ……………………………………………….. 3 g
Peptone …………………………………………………… 5 g
Lactose …………………………………………………… 7.46 g
Tryptose ……………………………………………… 9.83 g
Dipotassium hydrogen phosphate …………………… .. 1.35 g
Potassium dihydrogen phosphate ……………………… 1.35 g
Sodium chloride ……………………………………….. 2.46 g
Spdium lauryl sulphate ……………………………….. 0.05 g
Bromocresol purple ………………………………………0.0085 g
Reagent grade water ……………………………………… 1 L
رؾٚو اُج٤ئخ صالص٤خ اُزوً٤ي (اُوٞح) ػ٘ل افزجبه ٖٓ َِٓ 100اُؼ٘٤خ .رناة ث٤ئخ ٓوم اُزٞاعل-
اُـ٤بة ك ٠أُبء ثل ٕٝرَق ،ٖ٤رَزؼَٔ ِ٤ٍٝخ روِ٤ت .رٞىع ٖٓ َِٓ 50اُج٤ئخ أُؾٚوح ك٠
ىعبعبد ثـطبء هالٝٝظ ٙٝ .َِٓ 250غ كافَ ًَ ىعبعخ اٗجٞثخ رقٔو (كهٛبّ) ؿ٤و
ٙوٝه .ٟػوْ ك ٠االٝرًٞالف ُٔلح 12كه٤وخ ػ٘ل ٓ 121ئ٣ٞخ ٓٝلح ثوبء اُج٤ئخ ك٠
اٝ٧رًٞالف ال ٣غت إٔ ري٣ل ػٖ 30كه٤وخ٣ pH .غت إٔ ٝ2 -/+ 6,8 ٌٕٞ٣ثؼل اُزؼو.ْ٤
- 75 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٝػ٘ل رؼو ْ٤اُج٤ئخ ثبُزوّ٤ؼ رَزؼَٔ ث٤ئخ ٍلاٍ٤خ اُزوً٤يٝ .ىع ٖٓ َِٓ 20اُج٤ئخ اَُلاٍ٤خ
اُزوً٤ي ك ٠ىعبعبد ٓؼؤخ . َِٓ 250
Lauryl tryptose broth ( see 8. 1 . 1 ).
. 2 . 1انطزيمخ Procedure
هط اُؼ٘٤خ ثْلح ؽٞآُ 25 ٠وح ُٝوؼ َِٓ 100ك ٠ىعبعخ ث٤ئخ اُزٞاعل-اُـ٤بة .افِ ٜع٤لا
ثوِت اُيعبعخ ٓوح أٓ ٝورُِ ٖ٤ؾٖ ٍٞػِ ٠رٞى٣غ ربّ ُِج٤ئخ صالص٤خ اُزوً٤ي فالٍ اُؼ٘٤خ .
ؽ ٖٚػ٘ل ,5 -/+ 35كهعخ ٓئ٣ٞخ ٝاكؾٔ ثؼل ٍ 24بػخ ٍ 48 ٝبػخ ُِزلبػَ اُؾبٓ.٠ٚ
. 3 . 1رفظيز انُزبئظ Interpretation
رٌ ُٕٞ ٕٞإٔلو ك ٠اُج٤ئخ ػ٘ل رٞاعل اُظوٝف اُؾبٓ٤ٚخ رزٞاعل ثؼل رقٔو اُالًزٞى .اما
رٌ ٕٞؿبى أٚ٣ب ٛ ،ي اُيعبعخ ثوكن ٍٞف ٣ظٜو هؿٞح ا ٝكٞهإ .أ٣خ ًٔ٤خ ٖٓ اُـبى ٓغ/أٝ
ؽبٓ٘ ٣ؼزجو االفزجبه ٓٞعت ٣ٝؾزبط اُ ٠اُزؤً٤ل.
. 2يزحهخ انزأكيذ Confirmed phase
. 1 . 2ثيئخ انشراػخ :اٍزؼَٔ ث٤ئخ ٓوم اُجوُ٘٤ذ عو ٖ٣الًزٞى أٓالػ اُٖلواء ك ٠أٗبث٤ت
. 2 . 2انطزيمخ Procedureاٗوَ ًَ أُياهع أُٞعجخ ( اُز ٠أػطذ ؽبٓ٘ أ ٝؽبٓ٘
ٝؿبى) اُ ٠ث٤ئخ اُجو٘٤ِ٣ذ عوٝ ٖ٣رؾ ٖٚػ٘ل ٝ5 -/+ 35كهعخ ٓئ٣ٞخ .
. 3 . 2رفظيز انُزبئظ Interpretationاٗزبط اُـبى ك ٠أٗبث٤ت اُجو٘٤ِ٣ذ عو ٖ٣ثؼل 48
ٍ 3 -/+بػبد ٣ئًل ٝعٞك ثٌزو٣ب اُوٌ٣ .ُٕٞٞزت اُزوو٣و ػِٕٞ ٠هح افزجبه اُزٞاعل/اُـ٤بة
(ٓٞعت أٍ ٝبُت) ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞك ٖٓ َِٓ 100 ٠اُؼ٘٤خ.
. 4 . 2االخزجبر انًكًم Completed test
- 76 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
انفصم انزاثغ
غزيمخ ثكززيب انمٕنٌٕ انجزاسيخ
Fecal Coliform Procedure
افزجبهاد اُؾواهح أُورلؼخ Elevated temperature testsرَزقلّ ُزلوهخ ٓغٔٞػخ
ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ ٖٓ ٓغٔٞػخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ .االفزجبه ٌٖٔ٣اعواإ ٙثطو٣وخ
اٗ٧بث٤ت أُزؼلكحٝ .اُطو٣وخ ثبٍزؼٔبٍ ث٤ئخ ٓوم ٛ ٠ٛ A 1و٣وخ رغو ٟك ٠فطٞح ٝاؽلح.
افزجبه ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ ثبٍزؼٔبٍ ث٤ئخ ECاٍزؼِٔذ ك ٠اُلهاٍبد ػِ٤ٓ ٠ب ٙاُْوة،
رِٞس أُغبه ٟأُبئ٤خ ،أُ٤ب ٙاُقبّٗ ،ظْ ٓؼبُغخ أُقِلبد اَُبئِخ ٤ٓ ،ب ٙاالٍزؾٔبّ٤ٓ ،بٙ
اُجؾوٝػِٔ٤بد ٓواهجخ ٗٞػ٤خ أُ٤بٝ .ٙرَزقلّ ث٤ئخ A 1ك ٠افزجبه ٖٓبكه أُ٤ب٤ٓ ،ٙبٙ
اُجؾوٝ ،أُقِلبد اَُبئِخ أُؼبُغخ.
. 1االخزجبر نجكززيب انمٕنٌٕ انجزاسيخ ثبطزخذاو ثيئخ EC
)FecalColiform Test (EC medium
افزجبه ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ َ٣زؼَٔ ُزلوهخ اُغيء ٖٓ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ اُن٘٣ ٟزٔ٠
ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ .اٍزؼَٔ ًطو٣وخ ٍو٣ؼخ الفزجبه ٓ٤ب ٙأُؾبه٣بد ،أُقِلبد
اَُبئِخ أُؼبُغخ Shellfishث٤ئخً A 1بفزجبه ٓجبّو.
- 77 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
1 . 1ثيئخ ٝ ECروً٤جٜب:
Tryptose or trypticase …………………………………. 20 g
Lactose ………………………………………………….. 5 g
Bile salt mixture or bile salt No.3………………………… 1.5 g
Dipotassium hydrogen phosphate ……………………… . 4 g
Potassium dihydrogen phosphate……………………… 1.5 g
Sodium chloride …………………………………………. 5 g
Reagent-grade water ……………………………………….1 L
رٚبف أٌُٗٞبد اُ ٠أُ٤ب ،ٙرقِ ٜع٤لا ،رَقٖ ُزنٝة٣ pH .غت إٔ ,2 -/+ 6,9 ٌٕٞ٣ثؼل
اُزؼو .ْ٤هجَ اُزؼوٝ ْ٤ىع ك ٠أٗبث٤ت رقٔوٝ ًَ ،اؽلح ثٜب اٗجٞثخ كهٛبّ ٓوِٞثخ ٤ًٔ ،خ ٖٓ اُج٤ئخ
ًبك٤خ ُزـط ٠اٗ٧جٞثخ أُوِٞثخ أ ٝػِ ٠ا٧هَ عيئ٤ب ثؼل اُزؼوٍ .ْ٤ل اٗ٧بث٤ت ثـطبء ٓؼلٗ ٠أٝ
ثالٍزٓ ٠ٌ٤وبُ ّٝؾواهح اُزؼو.ْ٤
. 2انطزيمخ Procedure
اهٍَ اٗبث٤ت االفزجبه اُلوPresumptive test ٠ٙاُز ٠رظٜو ٗز٤غخ ا٣غبث٤خ ثبٕ ٌٕٞ٣ك٠
أٗبث٤ت كهٛبّ أ٣خ ًٔ٤خ ٖٓ اُـبى ،ٞٔٗ ،أ ٝؽٔٙٞخ فالٍ ٍ 48بػخ ٖٓ اُزؾ ٖ٤ٚالعواء
افزجبه ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ.
ٛ . 1 . 2ي أٗبث٤ت االفزجبه اُلو ٠ٙثوكن أ ٝاُيعبعبد اُز ٠أظٜود ؿبى ،ٞٔٗ ،أ ٝؽٔٙٞخ .
اٍزقلّ ُٞة هطو كزؾزٜب ُ٘ ْٓ 3,5 – 3وَ اُ٘ٔ ًَ ٖٓ ٞاٗجٞثخ أ ٝىعبعخ ٓٞعجخ
. 2 . 2ؽ ٖٚاٗ٧بث٤ت أُِوؾخ ( )ECك ٠ؽٔبّ ٓبئ ٠ػ٘ل ٝ2 -/+ 44,5كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح 24
ٍ 2 -/+بػخ.
- 78 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٙغ ًَ أٗبث٤ت ٓوم ECأُِوؾخ ك ٠اُؾٔبّ أُبئ ٠فالٍ ٖٓ 30االٗزٜبء ٖٓ ؽوٜ٘ب .اؽوٓ
ػِ ٠إٔ ٌٕٞ٣ك ٠اُؾٔبّ أُبئ٤ًٔ ٠خ ٖٓ أُ٤ب ٙرٌلُ ٠زـط٤خ َٓز ٟٞاُج٤ئخ ك ٠اٗ٧بث٤ت
أُؾ٘ٚخ.
. 3 . 2رفظيز انُزبئظ اٗزبط اُـبى ٓغ اُ٘ٔ ٞك ٠ث٤ئخ ٓوم ECفالٍ ٍ 2 -/+ 24بػخ أ ٝأهَ
٣ؼزجو االفزجبه ٓٞعت ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ .اُلَْ ك ٠اٗزبط ؿبى (ٓغ ٝعٞك ٗٔ ٞهِ َ٤أٝ
ٓؼل٣ )ّٝؼزجو اُزلبػَ ٍبُت .اما اٍزؼِٔذ اٗ٧بث٤ت أُزؼلكح ٣ ،ؾَت ٖٓ MPNػلك أٗبث٤ت
ECأُٞعجخ ٝرووأ ٖٓ اُغلا ٍٝاَُبثوخٝ .ػ٘ل اٍزؼٔبٍ اٗجٞثخ ٝاؽلح ٖٓ افزجبه
Presumptiveرنًو اُ٘ز٤غخ ػِٕٞ ٠هح ٝعٞك أ ٝؿ٤بة ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ.
.3اخزجبر يكززيب انمٕنٌٕ انجزاسيخ انًجبشز
)Fecal-coliform Direct Test (A-1 medium
. 1 . 3انجيئخ
رَزقلّ ث٤ئخ ٓوم ٘ٛ ٌ٤ُ ،A1بى ٓوؽِخ اكزوا٤ٙخ ٝ .Presumptive phaseروً٤ت ث٤ئخ
A1
ًٔب :٠ِ٣
Lactose …………………………………………………………. 5 g
Tryptose ………………………………………….. …………… 20 g
Sodium chloride …………………………………. …………….. 5 g
Salicin ……………………………………………………………. 0.5 g
Polyethylene glycol p-isooctyl phenyl ether (Tween 100) ……… 1 ml
Reagent-grade water ……………………………………………... 1 L
ٍقٖ الماثخ أٌُٗٞبد اُِٖجخ ،اٙق رٝ ، 100 Xٖ٣ٞاٙج pH ٜػ٘ل . .,1 -/+ 6,9هجَ
اُزؼوٝ ْ٤ىع اُج٤ئخ ك ٠أٗبث٤ت رقٔ٤و ثٜب اٗبث٤ت كهٛبّ ٓوِٞثخ ثٌٔ٤خ رٌلُ ٠ـٔو اٗجٞثخ كهٛبّ
- 79 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ػِ ٠ا٧هَ عيئ٤ب ثؼل اُزؼو .ْ٤ؿ ٜاٗ٧بث٤ت ثؤؿط٤خ ٓؼلٗ٤خ أ ٝثالٍز٤ي ٓوبُ ّٝؾواهح اُزؼو.ْ٤
ػوْ ُٔلح 10كهبئن ك ٠اٝ٧رًٞالف ػ٘ل 121كهعخ ٓئ٣ٞخ .فيٕ اٗ٧بث٤ت ك ٠اُظالّ ػ٘ل
كهعخ ؽواهح اُـوكخ ثؾ٤ش ال رزؼل ٟكزوح اُزقي 7 ٖ٣أ٣بّ .رغب َٛرٌ ٕٞهاٍت .
ؽٚو اُج٤ئخ ثزوً٤ي ٓٚبػق ؽز ٌٖٔ٣ ٠اٍزؼٔبٍ ٖٓ َِٓ 10اُؼ٘٤خ ثؾ٤ش ال ٣زؤصو روً٤ي
اُج٤ئخ ثبٙبكخ اُؼ٘٤خ.
. 1 . 3انطزيمخ
ُوؼ اٗ٧بث٤ت ٖٓ ث٤ئخ ًٔ A 1ب مًو ٍبثوب ؽُٔ ٖٚلح ٍ 3بػبد ػ٘ل ٝ5 -/+ 35كهعخ
ٓئ٣ٞخ صْ اٗوَ اٗ٧بث٤ت اُ ٠ؽٔبّ ٓبئ ٠ػ٘ل ٝ2 -/+ 44,5كهعخ ٓئ٣ٞخ ٝؽُٔ ٖٚلح -/+ 21
ٍ 2بػخ.
. 2 . 3رفظيز انُزبئظ
اٗزبط اُـبى ك ٠اٗ٧بث٤ت فالٍ ٍ 24بػخ أ ٝأهَ ٣ؼزجو ػالٓخ ػِ ٠إٔ اٗ٧جٞثخ ا٣غبث٤خ
ُالفزجبه ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ .اؽَت اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال ٖٓ MPNػلك اٗ٧بث٤ت
اال٣غبث٤خ .
- 80 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
غزيمخ أغشيخ انززصيح نًغًٕػخ ثكززيب انمٕنٌٕ
Membrane Filter Technique of the Coliform Group
. 1يمذيخ
ٛو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ ٌٖٔ٣اٍزؼٔبُٜب ٓغ ؽغً ّٞج٤وح ٗٞػب ٓب ٖٓ اُؼ٘٤بدٝ ،ػبكح ر٘زظ ٗزبئظ
أًضو ؽو٤وخ ٖٓ ٛوثوخ اُلك اً٧ضال اؽزٔبالى ٛو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ ٓل٤لح علا كٓ ٠واهجخ ٓ٤بٙ
اُْوة ٝػل٣ل ٖٓ ٗٞػ٤بد أُ٤ب ٙاٌُج٤ؼ٤خٓٝ .غ مُي ،كبٕ ٛو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ ُٜب ثؼ٘
أُؾلٝك٣بد ،فبٕخ ػ٘ل افزجبه أُ٤ب ٙماد اُؼٌبهح اُؼبُ٤خ أ ٝأػلاك اُجٌزو٣ب اُز ٠ال ر٘زٔ ٠اُ٠
ٓغٔٞػخ ثٌزو٣ب اُوٝ . Noncoliform (background) ُٕٞٞػ٘ل اٍزقلاّ ٛو٣وخ أؿْ٤خ
اُزوّ٤ؼ ٍبثوبً ،بٕ ٖٓ أُوؿٞة اعواء افزجبهاد ٖٓ اُزَ٣ ٠زقلٜٓب أُؼَٔ كٗ ٠لٌ اُٞهذ
ٓغ ٛو٣وخ ا٧ؿْ٤خ صجبد آٌبٗ٤خ رطج٤وٜب ُِٔٝوبهٗخ.
. 2رؼزيف Definition
ثبَُ٘جخ ُطو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ كبٕ ٓغٔٞػخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞػوكذ ػِ ٠أٜٗب رِي االٞٛائجخ
افز٤بها ٍ ،بُجخ ُغواّ ،ؿ٤و ٌٓٗٞخ ُِغواص ، ْ٤ػٖ٣ٞخ اٌَُْ ٝاُز ٠ر٘زظ َٓزؼٔواد ؽٔواء
ثِٔؼخ مٛج٤خ Mettalic (golden) sheenفالٍ ٍ 24بػخ ػ٘ل ٓ 35ئ٣ٞخ ػِ ٠ث٤ئخ االٗلٝ
ٝ Endo mediumاُز ٠رؾز ٟٞػٌٍِ ٠و اُالًزٞى .ثؼ٘ أػٚبء ٓغٔٞػخ ثٌزو٣ب
اُو ُٕٞٞهثٔب ر٘زظ َٓزؼٔواد ثِ ٕٞأؽٔو هبرْ ٓ ، Dark redقب٤ٛخ Mucoidأ ٝماد ٗٞاٙ
Nucleatedك ٕٝأُِؼخ أُؼلٗ٤خٛٝ .ن ٙرٖ٘ق ػِ ٠أٜٗب َٓزؼٔواد ثٌزو٣ب اُوٌُٜ٘ٝ ُٕٞٞب
ؿ٤و ٓضبُ٤خ ٝ .Atypicalػ٘ظ افزجبه ٓياهع ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأُ٘وبح Purified cultures
كبٜٗب رٌٍ ٕٞبُجخ الٗي٤ٍ ْ٣زًٞو ّٝأًَ٤ل٣ي ٞٓٝ Cytochrome oxidase negativeعجخ
الٗيٝ .B-galactosidase ْ٣ثٖلخ ػبٓخ ،كبٗ ٚك ٠رِي اُطو٣وخ MFرؼزجو أَُزؼٔواد
ماد اُِ ٕٞا٧ؽٔو اُٞهك Pink ٟاُـ٤و ٓقب٤ٛخ ،Nunmucoidاُيههبء ،اُجٚ٤بء ،أٝ
ػلٔ٣خ اُِٝ ٕٞاُز٘٣ ٠وٖٜب أُِؼبٕ كبٜٗب رؼزجو َُ٤ذ ٖٓ ثٌزو٣ب اُو.ُٕٞٞ
- 81 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 3انزطجيك Application
اُؼٌبهح أُزَججخ ػٖ ٝعٞك اُطؾبُت ،اُغي٣ئبد أ ٝأٞٓ ٟاك ٓزلافِخ هثٔب ال رَٔؼ ثبفزجبه
ؽغْ ٖٓ اُؼ٘٤خ ًبك ٠الٗزبط ٗزبئظ ٓؼ٘٣ٞخٝ .اُزول٣واد أُ٘قلٚخ ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞهثٔب رزَجت
ػٖ ٝعٞك اُجٌزو٣ب ا٧فوٝ ٟاُز ٠ال ر٘زُٔ ٠جٌزو٣ب اُو ،ُٕٞٞأ ٝػْ ٝعٞك ٓٞاك ٍبٓخ .
ٛو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ هبثِخ ُِزٌج٤ن الفزجبه أُ٤ب ٙأُبُؾخ ٔ ،Saline waterنكٍ نيض
نهًخهفبد انظبئهخ انزٗ اعزٖ ػهيٓب يؼزبعخ يجذئيخ ٓزجٞػخ ثٔؼبُغخ ثبٌُِٞه ثَجت اُؼٌبهح
ػ٘ل اٍزقلاّ ؽغً ّٞج٤وح ٖٓ اُؼ٘٤بد أٓ ٝقِلبد ٍبئِخ رؾز ٟٞػِٓ ٠ؼبكٕ ٍبٓخ أٞٓ ٝاك
ػ٣ٞٚخ ٍبٓخ ٓضَ اُلٞ٘٤الدٌُِٝ .ضق ػٖ رٞاعل ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ أُٚبهح total
Stressed coliformsك٤ٓ ٠ب ٙاُْوة أُؼبُغخ ٗٝبرظ أُؼبُغخ اُضبٗ٣ٞخ ٖٓ أُقِلبد
اَُبئِخ أُؼبُغخ ثبٌُِٞه كبٕ اُطو٣وخ ٕٔٔذ ٌُِْق ػٖ رٞاعل رِي أُغٔٞػخ ( ٍز٘بُٜٝب ك٠
.) Module 4
ٝؽغْ اُؼ٘٤خ اُالىّ افزجبه ٙك ٠ؽبُخ ٓ٤ب ٙاُْوثبُٔوّؾخ ٝ .َِٓ 100 ٞٛالؿواٗ أُواهجخ
اُقبٕخٓ ،ضَ ؽَ ْٓبًَ ٗٞػ٤خ أُ٤ب ٙأ ٝرٖ٘٤ق ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞك ٠اُزوً٤ياد أُ٘قلٚخ
ٖٓ فالٍ فطٞاد أُؼبُغخ ،هثٔب ٖٓ ٌٕٞ٣أُوؿٞة افزجبه ُ 1زو ٖٓ اُؼ٘٤خ .اما ًبٗذ
أُٞاك أُؼِوخ رٔ٘غ روّ٤ؼ اُِزو ٖٓ اُؼ٘٤خ فالٍ ٓوّؼ ٝاؽل ،روَْ اُؼ٘٤خ اُ ٠اُ ٠أعياء
ٕـ٤وح ٓ َِٓ 250 ،ضال ُِزؾِٝ .َ٤رغٔغ اػلاك اُزوّ٤ؼ (ٓوبهٗخ اُغلا ٍٝاُزبُ٤خ) ٝاُ٘زبئظ
ثبَُ٘جخ ُزوٞٗ ْ٤٤ػ٤خ أُ٤ب ٙثزِي اُطو٣وزٓ ٖ٤زٔبصِزبٕ ٌُٖٝا٧ػلاك االؽٖبئ٤خ ثطو٣وخ ا٧ؿْ٤خ
أًضو كهخ ٖٓ ٛو٣وخ اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال.ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُ٘برغخ ػٖ أُوّؾبد أَُزقلٓخ
ُزوّ٤ؼ اُؼ٘٤خ ُُ ٌٕٞ٤ل٣زب اُؼلك/اُِزوٝ .أؽغبّ إٔـو ٖٓ اُؼ٘٤بد رٌ ٕٞالىٓخ ك ٠ؽبُخ ٓ٤بٙ
أُز٘يٛبد Recreational waterأٖٓ ٝله أُ٤ب Source water ٙأ ٝأُقِلبد اَُبئِخ
ٝاُز ٠رؾز ٟٞػِ ٠أػلاك ػبُ٤خ ٖٓ ثٌزو٣ب اُوٝ .ُٕٞٞاُلهاٍبد أُوبهٗخ ٓب ثٛ ٖ٤و٣وخ
ُٔوّؾبد اُـْبئ٤خ ٛٝو٣وخ اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال أظٜود ى٣بكح كهخ ٛو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ
(ٓوبهٗخ اُغلا ٍٝاُزبُ٤خ) ٝاُ٘زبئظ ثبَُ٘جخ ُزوٞٗ ْ٤٤ػ٤خ أُ٤ب ٙثزِي اُطو٣وزٓ ٖ٤زٔبصِزبٕ ٌُٖٝ
ا٧ػلاك االؽٖبئ٤خ ثطو٣وخ ا٧ؿْ٤خ أًضو كهخ ٖٓ ٛو٣ن ٌُٖٝا٧ػلاك االؽٖبئ٤خ ثطو٣وخ
ا٧ؿْ٤خ أًضو كهخ ٖٓ ٛو٣وخ اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال
- 82 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
- 83 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
انطزيمخ انميبطيخ نجكززيب انمٕنٌٕ ثبطزخذاو أغشيخ انززشيح
Standard Total Coliform Membrane Filter Procedure
. 1األدٔاد انًؼًهيخ Laboratory apparatus
ُِزؾِ َ٤ثؤؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ اٍزؼَٔ أكٝاد ىعبع٤خ ٝأ ١أعٜيح أفو ٟرٌٖٞ٘ٓ ٕٞػخ ٖٓ ٓٞاك
فبُ٤خ ٖٓ أُٞاك اَُبٓخ ٝاُز ٠هثٔب رئصو ػِ ٞٔٗ ٠اُجٌزو٣ب.
. 1 . 1سعبعبد انؼيُبد )QA/ QC Notesَ( Sampling bottles
. 2 . 1سعبعبد انزخفيف .)QA/ QC Notesَ( Dilution bottles
. 3 . 1انًبصبد ٔانًخبثيز انًذرعخ Pipets and graduated cylinders QA/QC
) )Notesهجَ اُزؼو٣ ، ْ٤ـط ٠اَُِ٘لهاد ثٞهم ًواكذ أ ٝاُٝ ّٞ٤ٗٞٓٞرٌ ٕٞاُزـط٤خ ؿ٤و ٓؾٌٔخ،
ٝثؼل اُزؼوٓ ْ٤جبّوح اؽٌْ اُزـط٤خ.
. 4 . 1أٔػيخ ثيئخ انشرع Containers of culture medium
. 5 . 1أغجبق انشرع Culture dishes
ٔ . 6 . 1حذاد انززشيح Filtration units
. 7 . 1أغشيخ انززشيح Membrane filter
. 8 . 1انٕطبدح انًبصخ Absorbent bads
. 9 . 1انًاللػ Forceps
.12 . 1انًيكزٔطكٕة ٔيصذر االظبءح Microscope and light source
- 84 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
.2انًٕاد ٔثيئبد انشرع Materials and Culture Media
ال رِغؤ اُ ٠رؾ٤ٚو اُج٤ئخ ٖٓ ٌٓٗٞبرٜب ٛبُٔب اُج٤ئخ اُغبٛيح ٓزٞاكوح ػِٗ ٠طبم رغبه .ٟفيٕ
اُج٤ئخ اُز ٠رْ كزؼ ػجٞرٜب كٓ ٠غلق .أٗظو ُِ QC/QAزؾٌْ كٞٗ ٠ػ٤خ اُج٤ئخ.
افزجو ًَ ُ ٛٞعل٣ل ٖٓ اُج٤ئخ ثبٍزؼٔبٍ اُِ ٛٞاُول ْ٣أُوجًٔ ٍٞوعغ (ٓ . )QC/QAغ ًَ
ُ ٛٞعل٣ل ٖٓ ث٤ئخ ٖٓ ٗٞع االٗل Endo type ٝرؾون Verifyػِ ٠ا٧هَ ٖٓ ٖٓ %10
َٓزؼٔواد ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأُزؾَٖ ػِٜ٤ب ٖٓ اُؼ٘٤بد اُطج٤ؼ٤خ أ ٝػ٘٤بد ثٜب اٙبكبد
ٓؼوٝكخُٔ ،وبهٗخ اُِٛٞبد أُقزِلخ ُِج٤ئخ ٝهلهرٜب ػِ ٠االٍزقالٓ . Recovery
هجَ االٍزؼٔبٍ ،افزجو ًَ ػِٔ٤خ رؾ٤ٚو ُِ Batchج٤ئخ اُزٍ ٠زَزقلّ ٓغ M Fثبٍزقلاّ
ٓيهػخ ٓؼوٝف أٜٗب رؼطٗ ٠ز٤غخ ا٣غبث٤خ ٝأفوٓ ٟؼوٝف أٜٗب رؼطٗ ٠ز٤غخ ٍِج٤خ .افزجو
رِٞس ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞػ٘ل ثلا٣خ ٜٗٝب٣خ ًَ ٍَِِخ ٖٓ اُزوّ٤ؼ ثزوّ٤ؼ ٖٓ َِٓ 30 – 20
ٓؾِ ٍٞاُزقل٤ق أٝاُْطق فالٍ أُوّؼ .اما ظٜو رِٞس ك ٠أُوعؼ٤بد Controlsاهك٘
أ٣خ ٗزبئظ ٝاِٛت ػ٘٤خ أفو.ٟ
- 85 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
LES Endo agar ثيئخ.1 . 2
M-Endo ثيئخ. 2 . 2
Tryptone or polypeptone ………………………………………..10 g
Thiopeptone or thiotone ……………………………………… 5 g
Casitone or trypticase ………………………………………… 5 g
Yeast extract …………………………………………………… 1,5 g
Lactose ……………………………………………………… 12,5 g
Sodium chloride ……………………………………………… 5 g
Dipotassium hydrogen phosphatr …………………… ……. 4,375 g
Potassium dihydrogen phosphate …………………………… 1,375 g
Sodium lauryl sulphate ……………………………………… 0,05 g
Sodium desoxycholate ……………………………………… 0.1 g
Sodium sulfite ……………………………………………… 2,1 g
Basic fuchsin ……………………………………………… 1,05 g
Agar ………………………………………………………… 15 g
Reagent-grade water ………………………………………… 1 L
.َ٣ضب٣ٍ اٞ ًقؾ%90 َِٓ 20 ٠ِ ػٟٞؾز٣ م ُزو ٓبء1 ٠ُٗبد اٌُٞٔبف اٚ ر-عبه٥و ا٤ٚرؾ
بد٤ًٔ ىعٝ .خ٣ٞ كهعخ ٓئ50 – 45 ٠ُرجوك اٝ روكغٝ ،عبه٥بٕ الماثخ ا٤ِ هوة اُـ٠ٍُقٖ ا
- 86 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
َِٓ 7 – 5ك ٠اٛ٧جبم اُيعبط أ ٝثالٍز٤ي هطو .ْٓ 60اما اٍزؼِٔذ اٛجبم ثؤهطبه ٓقزِلخ
٣واػٙٝ ٠غ ًٔ٤خ ٖٓ اُج٤ئخ رؼطٗ ٠لٌ أَُي .ال رؼوْ اُج٤ئخ ك ٠االٝرًٞالف pH .اُٜ٘بئ٠
ٖٓ .,2 -/+ 7,2اُؼبكٝ ٟعٞك هاٍت .
ثوك اُج٤ئخ اُٜ٘بئ٤خ ك ٠اُظالّ َ٣ٝزجؼل اُـ٤و َٓزؼَٔ ٖٓ اُج٤ئخ ثؼل اٍجٞػ.ٖ٤
رؾ٤ٚو أُوم_ ؽٚو ًٔب مًو ٍبثوب ٓغ ػلّ اٙبكخ ا٥عبه ٝ ،ىع اُج٤ئخ اَُبئِخ ( َِٓ 2
ٌَُ ٛجن) ػِ ٠اٍُٞبئل أُبٕخ ( اهعغ اُ ٠فٖبئٖٜب ٝ )QA/QCثبؽزواً ٣ياٍ اُيائل
ٖٓ اُج٤ئخ .أُوم هل ٌٕٞ٣ث ٚهٝاٍت ٌُٜ٘ٝب ال رزلافَ ٓغ ًلبءح اُج٤ئخ اما ًبٗذ اٍُٞبئل
أُبٕخ ْٜ٣ل ُٜب ثؤٜٗب فبُ٤خ ٖٓ اٌُجو٣زبد أ ٝأٞٓ ٟاك ٍبٓخ ثزوً٤ياد ٌٖٔ٣إٔ رو ٠ٚػِ٠
ٗٔ ٞاُجٌزو٣ب .أُوم أُجوك هثٔب ٣قيٕ اُ 4 ٠أ٣بّ.
- 87 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 3انؼيُبد ( هاعغ ( QA/QC
. 4رؼزيف ثكززيب انمٕنٌٕ
اُجٌزو٣ب اُز ٠ر٘زظ َٓزؼٔواد ؽٔواء ٓغ ُٔؼخ مٛج٤خ (ٓؼلٗ٤خ) Metallic sheenفالٍ 24
ٍبػخ ٖٓ اُزؾ ٖ٤ٚػِ 35 ٠كهعخ ٓئ٣ٞخ ػِ ٠ث٤ئخ ٖٓ ٗٞع االٗل ٝرؼزجو ػٓ ٖٓٞٚغٔٞػخ
ثٌزو٣ب اُو .ُٕٞٞأُِؼخ هل رـط ٠أَُزؼٔوح ًِٜب أ ٝهل رظٜو ػِٓ ٠وًي أَُزؼٔوح كو ٜأٝ
ػِ ٠اُؾٞاف ٛ .نا اُزؼو٣ق ُجٌزو٣ب اُو٣ ُٕٞٞؼزٔل ػِ ٠اٗزبط اُ٧ل٤ٛلاد ٖٓ رقٔو اُالًزٞى.
ٝثٔ٘٤ب ٛن ٙاُقبٕ٤خ اُجٔ٤ًٞ٤ب٣ٝخ ٠ٛعيء ٖٓ ٛو٣ن ػِٔ٤خ اُزٔض َ٤اُـنائ ٠الٗزبط اُـبى ك٠
افزجبه اُؼلك اً٧ضو اؽزٔبال ،كبٕ ثؼ٘ االفزالف ك ٠أُِؼبٕ َُِٔزؼٔواد ٣الؽ ٜثٍ ٖ٤الالد
ثٌزو٣ب اُوٝ .ُٕٞٞػِ ٠مُي ،كبٕ ٛنا االفزالف اُجَ ٜ٤ك ٠رؾل٣ل اُلُ َ٤ال ٣نًو ػِ ٠أٗ ٚفط٤و
ُزـ٤٤و ٓـياٗ ٖٓ ٙبؽ٤خ اُٖؾخ اُؼبٓخ ،فبٕخ اما اعو٣ذ كهاٍبد ٓ٘بٍجخ ال٣غبك اُؼالهخ ثٖ٤
اُ٘زبئظ أُزؾَٖ ػِٜ٤ب ثطو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ ٝا٧فو ٟأُزؾَٖ ػِٜ٤ب ثطو٣وخاٗبث٤ت
اُزقٔو أُزؼلكح.
. 5انطزيمخ Procedure
. 1 . 5افز٤به ؽغْ اُؼ٘٤خ ٣ :ؾٌْ ؽغْ اُؼ٘٤خ ثٌضبكخ اُجٌزو٣ب أُزٞهؼخ .ك ٠رؾِ٤ٓ َ٤ب ٙاُْوة
٣ؾٌْ ؽغْ اُؼ٘٤خ ثبُؼٌبهحٕ أ ٝث٘ٔ ٞاُجٌزو٣ب اُز ٠ال ر٘زٔ ٠اُ ٠ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞػِ ٠اُج٤ئخ (
اُغل ٍٝاُزبُ٨ُٝ . )٠ؿواٗ اُز٘ظ٤ٔ٤خ ٞٛ َِٓ 100 ،اُؾغْ اُؤٍ.٠
- 88 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
- 89 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اُؾغْ آ٧ضَ ٖٓ اُؼ٘٤خ ٍ٘٤زظ َٓ 80 – 20زؼٔوح ٖٓ ثٌزو٣ب اُو ٌ٤ُٝ ُٕٞٞأًضو ٖٓ 200
َٓزؼٔوح ٖٓ ًَ اٞٗ٧اع ػٍِ ٠طؼ أُوّؼ اُـْبئ .٠رؾِ٤ٓ َ٤ب ٙاُْوة ثزوّ٤ؼ ٖٓ 100
اُ ،َِٓ 1000 ٠أ ٝثزوّ٤ؼ ٌٓوهاد ٖٓ ػ٘٤بد ٕـ٤وح اُؾغْ ٓضَ اص٘بٕ ًال َِٓ 50أ4 ٝ
ًال .َِٓ 25ـؾِ َ٤أُ٤ب ٙا٧فو ٟثزوّ٤ؼ 3ؽغٓ ّٞقزِلخ ( ٓقللخ أ ٝؿ٤و ٓقللخ) ٣ ،ؼزٔل
ػًِ ٠ضبكخ اُجٌزو٣ب أُزٞهؼخ .ك ٠ؽبُخ روّ٤ؼ أهَ ٖٓ ٖٓ َِٓ 10اُؼ٘٤خ (ٓقللخ أ ٝؿ٤و
ٓقللخ) أٙق ؽٞآُ َِٓ 10 ٠ؾِ ٍٞرقل٤ق ٓؼوْ اُ ٠هٔغ اُزوّ٤ؼ هجَ اُزوّ٤ؼ أ ٝاٗوَ
اُؾغْ ٖٓ اُؼ٘٤خ اُ ٠ىعبعخ رقل٤ق ٝهّؼ ٗبرظ اُزقل٤ق عٔ٤ؼٛ .ٚن ٙاُي٣بكح ك ٠ؽغْ أُ٤بٙ
َ٣بػل ػِ ٠اٗزظبّ رٞى٣غ ٓؼِن اُجٌزو٣ب ػٍِ ٠طؼ اُلِزو .
ٔ . 1 . 5حذاد انززشيح انًؼمًخ Sterile filtration units
اٍزؼَٔ ٝؽلاد روّ٤ؼ ٓؼؤخ ك ٠ثلا٣خ ًَ ٍَِِخ ٖٓ اُزوّ٤ؾبد أُززبُ٤خ ًؾل أكٖٗٓ ٠
اُؾ٤طخ ُٔ٘غ اُزِٞسٍَِِ .خ اُزوّ٤ؼ رؼزجو ٓؼزوٙخ اما ٓود كزوح 30كه٤وخ أ ٝأًضو ثٖ٤
ػِٔ٤بد اُزوّ٤ؼ أُززبُ٤خٝ .ام1ا ؽلس مُي ػبَٓ ػِٔ٤خ اُزوّ٤ؼ اُزبُ٤خ ػِ ٠اُوؿْ ٖٓ اٗزٔبئٜب
اُ ٠ػِٔ٤خ ٍبثوخ ػِ ٠أٜٗب ػِٔ٤خ عل٣لحٝثبُزبُ ٠ػوْ ًَ اُغٜبى ( هاعغ .)QALQC
. 2 . 5رزشيح انؼيُخ Filtration of sample
ثبٍزؼٔبٍ ِٓوٓ ٜؼوْ ٙ ،غ ٓوّؼ ؿْبئٓ ٠ؼوْ ( Sterile membrane filterاَُطؼ
أُوَْ اُ ٠أػِ )٠ػِ ٠اُغيء أُلػْ أُ٘لن ٖٓ اُغٜبى .ثؾوٓ ٙغ اُغيء أُزؾوى ٖٓ
اُؤغ ػِ ٠اُغيء اُؾبَٓ ُِلِزو ٝصجز ٚع٤لا ٓغ ٓواػبح ػلّ أَُبػ ثٞعٞك أ ٟرَ٤و٣ت .هّؼ
اُؼ٘٤خ رؾذ رلو٣ؾ عيئٓ .٠غ ثوبء اُلِزو كٌٓ ٠بٗ ٚاؿََ اَُطؼ اُلافُِِ ٠ؤغ ٖٓ فالٍ
روّ٤ؼ 3ككؼبد ًَ َٓ ثٓ ٖٓ َِٓ 30 – 20 ٖ٤ؾِ ٍٞاُزقل٤ق أُؼوًْٝ .جل ،َ٣اّطق اُؤغ
ثز٤به ٖٓ ٓؾِ ٍٞاُزقل٤ق أُؼوْ ٖٓ ىعبعخ ؿَٓ Washing bottle َ٤غ االؽزواً ٖٓ
اُزِٞس فالٍ االٍزؼٔبٍ .اُْطق ث ٖ٤اُؼ٘٤بد ٘ٔ٣غ ٖٓ اٗزوبٍ اُزِٞسٓ .غ اٗزٜبء اُْطق
اُٜ٘بئٝ ٠ػِٔ٤خ اُزوّ٤ؼ اٝهق اُزلو٣ؾ ،اكزؼ ٝىٍ اُؤغٝ ،اُزو ٜاُلِزو اُـْبئ ٠ثِٔوٓ ٜؼوْ،.
ٙٝؼ ٚػِ ٠اُج٤ئخ أُقزبهح ثؾوًخ كائو٣خ ُٔ٘غ ؽغي اُٜٞاء ث ٖ٤اُلِزو ٝاُج٤ئخ ٛٝنا ٘ٔ٣غ
اٗزوبٍ اُج٤ئخ اُ ٠اُقال٣ب ػٍِ ٠طؼ اُلِزو .اؿِن اُطجن ٝاهِجٝ ٚؽُٔ ٖٚلح ٍ 24-22بػخ ػ٘ل
,5 -/+ 35كهعخ ٓئ٣ٞخ.
- 90 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ك ٠ؽبُخ اٍزقلاّ اُج٤ئخ اَُبئِخٙ ،غ اٍُٞبكح أُبٕخ Filter padك ٠اُطجن ّٝجؼٜب
ثبٍزؼٔبٍ ٖٓ َِٓ 2اُج٤ئخ (ٝ )M-Endoثبؽزواً اىٍ اُيائل ٖٓ اُج٤ئخ ٔ٣ ُْٝزٔ
(ثبُزغل٤ق)ٙ .غ اُلِزو أُؾٚو ٓجبّوح ػِ ٠اٍُٞبكح أُْجؼخ ثبُج٤ئخ ،اهِت اُطجنٝ ،ؽٖٚ
ػ٘ل ,5 -/+ 35كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 24بػخ.
رٔ٤٤ي أَُزؼٔواد ٍٞاء ك ٠ؽبُخ اٍزقلاّ اُج٤ئخ كٕٞ ٠هح ِٕجخ أٍ ٝبئِخ هثٔب ثلول أ٣ ٝزؼنه
اما ؽ٘ٚذ أُياهع أًضو ٖٓ ٍ 24بػخ.
ثؼل ػْو ػ٘٤بد افزجو رؼو٤ٓ ْ٤ب ٙاُْطق ثزوّ٤ؼ ٝ َِٓ 100افزجبهٛب ًٖٔله ُِزِٞس
ث٘ؾ ٖ٤ٚأٛجبهٜب رؾذ ٗلٌ ظوٝف رؾِ َ٤اُؼ٘٤خ.
ُؼ٘٤بد أُ٤ب ٙاُز ٠رَزؼَٔ ك ٠اؿواٗ أفو ٟفالف اُْوة ٝثَجت ٝعٞك أػلاك ًج٤وح ٖٓ
ثٌزو٣ب اُو٣ ُٕٞٞغت رؼوٝ ْ٤ؽلح اُزوّ٤ؼ ثؼل ًَ ػ٘٤خًٝ .جل ،َ٣اٍزؼَٔ ٓؾِ٘ٓ ٍٞظْ
ُْBuffer rinseطق اُٞؽلح ثؼل اىاُخ اُلِزو ٘ٓٝغ ٗوَ اُزِٞس ث ٖ٤اُؼ٘٤بد.
. 3 . 5غزيمخ انزخصيت انجذيهخ Alternative enrichment technique
ٙغ ٍٝبكح ٓبٕخ ٓؼؤخ ك ٠ؿطبء ٛجن ثزوٓ ٟؼوْ ّٝجؼٜب ثؾٞاُ ٖٓ َِٓ 2 ٠ث٤ئخ ٓوم
ُٞه َ٣روثزٞى ٓؾٚو ًٔب مًو َٓجوب ٙغ أُوّؼ اُـْبئ ٠اُن ٟهّؾذ ػِ ٚ٤اُؼ٘٤خ ػِ٠
اٍُٞبكح أُبٕخ ٝال روِت اُطجن ٝؽُٔ ٖٚلح 1,5اٍُ 2 ٠بػخ ػ٘ل ,5 -/+ 35كهعخ ٓئ٣ٞخ
ك ٠ع ٞهٞٛثز %60 ٚػِ ٠ا٧هَ.
اما اٍزؼَٔ ث٤ئخ اٗل ٝآعبه ،اىٍ اُلِزو ٖٓ ػٍِ ٠طؼ اٍُٞبكح أُبٕخ ثؼل اُزؾٙٝ ٖ٤ٚؼٚ
ثؾوًخ كائو٣خ ػٍِ ٠طؼ ث٤ئخ اٗل ٝآعبه ٓغ اُؾوٓ ثؼلّ أَُبػ ثٞعٞك ٞٛاء ث ٖ٤اُلِزو
ٝاُج٤ئخ.
أٓب اما اٍزؼِٔذ اُج٤ئخ اَُبئِخ ،كبٗ٣ ٚزْ ٙٝغ ٍٝبكح عل٣لح ك ٠اُطجن ٝرْجغ ثبُج٤ئخ M-
Endoصْ ٣ياٍ اُلِزو ٖٓ ػِ ٠اٍُٞبكح اُولٔ٣خ ٣ٝوِت اُطجن ٣ٝؾ ٖٚرؾذ ٗلٌ ظوٝف
اٍزقلاّ اُج٤ئخ اُِٖجخ.
ٍٞاء اٍزقلٓذ اُج٤ئخ اُِٖجخ أ ٝاَُبئِخ اهِت اٛ٧جبم ٝؽُٔ ٖٚلح 20اٍُ 22 ٠بػخ
ػ٘ل ,5 -/+ 35كهعخ ٓئ٣ٞخ.
- 91 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 4 . 5انؼذ Counting
ُؼل أَُزؼٔواد ػٍِ ٠طؼ أُوّؾبد اُـْبئ٤خ اٍزؼَٔ هٞح رٌج٤و ٓ 15 – 10وح ٖٓ فالٍ
Wide-field dissecting microscope or other optical devices
ٓغ اٍزؼٔبٍ ُٔجخ كِٞهٍ٘ذ ثٚ٤بء ًٖٔله ُِٞٚء ٝرٞع ٚاالٙبءح ؽز ٠رو ٟأٙٝؼ ٕٞهح
َٓ .زؼٔواد ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأُضبُ٤خ ُٜب ُ ٕٞهوٗلِ Pink ٠اُ ٠أؽٔو هبرْ ٓغ ُٔؼبٕ ٓؼلٗ٠
ػِ ٠اَُطؼ .ى ػل ًال ٖٓ أَُزؼٔواد أُضبُ٤خ ٝؿ٤و أُضبُ٤خ .Typical and atypical
أُ٘طوخ اُالٓؼخ هثٔب رقزِق ك ٠اُؾغْ ٖٓ ٗو ٜك ٠ؽغْ هأً اُلث ًٞاٍُ ًَ ٠طؼ
أَُزؼٔوحَٓ .زؼٔواد ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞؿ٤و أُضبُ٤خ ٌٖٔ٣إٔ رٌ ٕٞماد ُ ٕٞأؽٔو هبرْ،
ٓقب٤ٛخ Mucoidأ ٝماد ٗٞاح كُٔ ٕٝؼبٕ .ػبٓخ أَُزؼٔواد اُووٗلِ٤خ ،اُيههبء ،اُجٚ٤بء
أ ٝػلٔ٣خ اُِٝ ٕٞاُز٣ ٠ـ٤ت ػٜ٘ب أُِؼبٕ رؼل ػِ ٠أٜٗب َُ٤ذ ثٌزو٣ب اُو .ُٕٞٞػلك ًَ
أَُزؼٔواد (ثٌزو٣ب اُوٝ ُٕٞٞؿ٤وٛب) ػِ ٠ث٤ئخ االٗل ُٚ ٌ٤ُ ٝػالهخ ثؼلك اُجٌزو٣ب اٌُِ ٠ك٠
اُؼ٘٤خ ا٤ِٕ٧خ .اُؼلك اُؼبُ ٖٓ ٠اُجٌزو٣ب اُـ٤و ه٤ُٗٞٞخ هثٔب ٣زلافَ ٓغ ْٗٞء أهٖ ٠أػلاك ٖٓ
ثٌزو٣ب اُو .ُٕٞٞرجو٣ل أُياهع (ثؼل ٍ 22بػخ رؾٓ )ٖ٤ٚغ اُؼلك أُورلغ ٖٓ اُجٌزو٣ب اُـ٤و
ه٤ُٗٞٞخ ُٔلح ,5اٍُ 1 ٠بػخ هجَ اُؼل هثٔب ٘ٔ٣غ االؽزْبك َ٣ٝبػل ػِ ٠رٔ٤٤ي أُِؼبٕ
Deter spread of confluence while aiding sheen discernment.
ػ٘٤بد أُ٤ب ٙأُطٜوح أٗٝبرظ أُقِلبد اَُبئِخ أُؼبُغخ هثٔب ٣ؾز ٟٞػًِ ٠بئ٘بد ٓٚبهح
ٝ Stressed organismsاُز ٠ر٘ٔ ٞثجٜء ٝر٘زظ أهُٖٔ ٠ؼبٕ كٍ 24 – 22 ٠بػخ .اٌُبئ٘بد
ٖٓ أُٖبكه اُـ٤و ٓطٜوح هثٔب ر٘زظ أُِؼبٕ ثؼل 1مٍ 18 – 6بػخ٣ٝ ،جٜذ أُِؼبٕ ثؼل – 24
ٍ 30بػخ.
.5 . 5انزحمك يٍ ثكززيب انمٕنٌٕ Coliform verification
ػِ ٠كزواد ،هثٔب رظٜو أَُزؼٔواد اُالٓؼخ أُضبُ٤خ ػٖ ٗٔ ٞثٌزو٣ب ال رزجغ ثٌزو٣ب اُوُٕٞٞ
ٝأَُزؼٔواد ؿ٤و أُضبُ٤خ (َٓزؼٔواد ُٜٗٞب أؽٔو هبرْ أَٓ ٝزؼٔواد ماد ٗٞاح كُٔ ٕٝؼبٕ)
هثٔب رٌ ٕٞثٌزو٣ب اُو٣ٝ .ُٕٞٞل َٚإٔ ٣زؾون ٖٓ ًَ ٗٞػ٤بد أَُزؼٔواد أُضبُ٤خ ٝؿ٤و
أُضبُ٤خ ػٖ ٛو٣ن َٓؼ اُلِزو اُـْبئ ٠أ ٝاُزوب ٛػِ ٠ا٧هَ َٓ 5زؼٔواد ٓضبُ٤خ ٝفَٔخ
- 92 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
َٓزؼٔواد ؿ٤و ٓضبُ٤خ ٖٓ ٓيهػخ كِزو ؿْبئٝ .٠ك ٠ؽبُخ أُ٤ب ٙا٧فو ٟفالف ٓ٤ب ٙاُْوة،
ًؾل أكٗ ،٠رؾون ٖٓ َٓ 10زؼٔواد الٓؼخ ( ٔٓٝضالد َُِٔزؼٔواد اُـ٤و ٓضبُ٤خ ٝأُقزِلخ
كٓ ٠ظٜوٛب) ٖٓ ػ٘٤بد أُ٤ب ٙأُٞعجخ ّٜو٣ب ( .)QA/QC notesاػزٔبكا ػِ ٠اُؾبعخ
ٞٗٝػ٤خ اُؼ٘٤خ ،هثٔب رطجن أُؼبَٓ ٓوبٓ ٌ٤٣زْلكح (ٓضال ،اُزؾون ٖٓ َٓزؼٔوح ٝاؽلح ٖٓ ًَ
ٗٞع ٓTypeضبُ ٠أ ٝؿ٤و ٓضبُٓ ٖٓ ٠يهػخ ٖٓ اُزوّ٤ؼ اُـْبئ ،٠رؾون ٖٓ ٖٓ %10
اُؼ٘٤بد أُٞعجخ) .أٙج ٜاالػلاك ث٘بء ػِٗ ٠ز٤غخ اُزؾون.
.1 . 6 . 5اخزجبراد انزحمك Verification tests
. 1 . 1 . 6 . 5رخًز انالكُٕس -اٗوَ َٗٔٓ ًَ ٖٓ ٞزؼٔوح أ ٝآَؼ ؿْبء اُزوّ٤ؼ ثبٍزؼٔبٍ
Swabهطٖ (ك ٠ؽبُخ افزجبه اُزٞاعل ٝاُـ٤بة ك ٠ػ٘٤بد ٓ٤ب ٙاُْوة) ٙٝؼٜب كٓ ٠وم
ُٞهٍِ َ٣لبدٝ ،ؽ ٖٚػ٘ل ,5 -/+ 35كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخ\ .اٗزبط ؿبى كٓ ٠وم
اُِٞهٍِ َ٣لبد ٝاُزؤً٤ل كٓ ٠وم ثو٘٤ِ٣ذ عو ٖ٣الًزٞى (هاعغ ث٘ل ٝ ) 2 . 8فالٍ 48
ٍبػخ رؾون ٖٓ أَُزؼٔوح ًجٌزو٣ب اُو ٖٓٝ .ُٕٞٞأٌُٖٔ ىهع اُج٤ئزبٕ كٗ ٠لٌ اُٞهذ
ٝاُزؾون ٖٓ اٗزبط اُـبى كً ٠الٔٛبٝ .اٙبكخ ؽوٖ أٗبث٤ت ٝ EC brothاُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل
,2 -/+ 44,5كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 24بػخ ٣ؼطٗ ٠ز٤غخ ػٖ ٝعٞك ثٌزو٣ب اُوُٕٞٞ
اُجواى٣خٝ ،ؽوٖ اٗبث٤ت ٖٓ ٗلٌ اُج٤ئخ ٓٚبف اُٜ٤ب ٝ MUGاُزؾ ٖ٤ٚرؾذ ٗلٌ
اُظوٝف اَُبثوخ ٣ؼطٗ ٠ز٤غخ ػٖ ٝعٞك ا٤ْ٣وّ٤ب ًٞال.ٟ
. 2 . 1 . 6 . 5ثذيم ػٍ انزحمك يٍ ثكززيب انمٕنٌٕ_ اٍزؼَٔ رِي اُطو٣وخ ُؼيٍ َٓزؼٔواد
ػِ ٠أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ .اما ّي ثؤٕ أُيهػخ ٓقزِطخ أ ٝاما ًبٗذ أَُزؼٔواد أُلُٖٞخ
أهَ ٖٓ ،ْٓ 2اىهع ٖٓ اُ٘ٔ ٞػِ ٠ث٤ئخ M-Endoأٓ ٝبً ٠ٌٗٞآعبه ُزؤً٤ل ٗوبء
أُيهػخ أ ٝاعو ٟافزجبه اٗبث٤ت اُزقٔو.
. 3 . 1 . 6 .5االخزجبر انظزيغ-اُزؾون ٖٓ أَُزؼٔواد ثبٍزؼٔبٍ افزجبه اُزلبػَ َُِ٤زًٞوّٝ
أًَ٤ل٣ي ٝث٤زب عبالًز٤ٍٞل٣ي أُٞعت فالٍ ٍ 4بػبد رؾُ ٖ٤ٚالٗجٞثخ أٛ ٝو٣وخ
افزجبه اُجوؼخ . Spot test
- 93 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
َ . 4 . 1 . 6 . 5ظى االخزجبر انًزؼذد Commercial multi-test systems
رؾون ٖٓ أَُزؼٔوح ثيهػٜب ُِز٘و٤خ .افزبه َٓزؼٔوح ٓؼيُٝخ ع٤لا ،اؽوٜ٘ب كٗ ٠ظبّ االفزجبه
أُزؼلك ُٔغٔٞػخ ٝ Enterobacteriaceaeاُز ٠رَْٔ افزجبهاد رقٔو اُالًزٞى /ٝأ ٝث٤زب
عبالًز٤ٍٞل٣ي ٤ٍٝزًٞو ّٝأًَ٤ل٣ي.
. 6حظبة كضبفخ ثكززيب انمٕنٌٕ Calculation of Coliform Density
اؽَت اُؼلك ،ثبٍزؼٔبٍ أُوّؾبد اُـْبئ٤خ اُز ٠ثٜب َٓ 80 – 20زؼٔوح ً٤ُٞلٞهّ ٌ٤ُٝ
أًضو ٖٓ َٓ 200زؼٔوح ٖٓ ًَ اٞٗ٧اع ٌَُ ٓوّؼ ؿْبئ ٠ثبٍزؼٔبٍ أُؼبكُخ:
ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ = َِٓ 100 /ػلك َٓزؼٔواد ثٌزو٣ب اُو100X ُٕٞٞ
ؽغْ اُؼ٘٤خ أُوّؾخ َِٓ
اما ُْ رزٞاعل َٓزؼٔواد ُجٌزو٣ب اُوٌ٣ ُٕٞٞزت اُزوو٣و أهَ ٖٓ ٖٓ 1ثٌزو٣ب اُو100 /ُٕٞٞ
َِٓ.
ُٝؼل اُزؾون ٛجن أُؼبكُخ اُزبُ٤خ:
ػلك أَُزؼٔواد
×100 َٗجخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأُزؾون ٜٓ٘ب =
اُؼلك أٌَُُِ ٠زؼٔواد اٌُ٤ُٞلٞهّ أُؼوٙخ ُِزؾون
. 1 . 6انًيبِ يٍ َٕػيخ ييبِ انشزة
ٗظْ EPAرؾزْ فِ ٞأُ٤ب ٖٓ ٙثٌزو٣ب اُو َِٓ 100 / ُٕٞٞكبٕ مُي ٣زطِت رول٣و ًضبكخ ثٌزو٣ب
اُو ُٕٞٞك ٠ػ٘٤بد ٓزٌوهح ٛ .نا ٓ ْٜاما ًبٗذ ثٌزو٣ب اُوَٓ ُٕٞٞز٘ٛٞخ ٗظبّ اُزٞى٣غ.
أُؼِٓٞبد أٌُ٤خ رؼطٓ ٠ئّو ػٖ ٓل ٟؽلس اُزِٞس.
أُ٤ب ٙاُغ٤لح ٓؾزٞاٛب ٖٓ ثٌزو٣ب اُو ٌٕٞ٣ ُٕٞٞأهَ ٓب ُ .ٌٖٔ٣نُي ،رؼل ًَ َٓزؼٔواد ثٌزو٣ب
اُوٝ ُٕٞٞال ٣ئفن ك ٠االػزجبه اُؾل ا٧كٗ ٠أُنًٞه ٍبثوب (َٓ 20زؼٔوح) ٝرَزؼَٔ أُؼبكُخ
ُٔؼوكخ ًضبكخ ثٌزو٣ب اُو.ُٕٞٞ
- 94 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اما ًبٕ اُ٘ٔٓ ٞـطَٓ ٌَُ ٠طؼ اُلِزو اُـْبئ ٠أ ٝعيء ٓ٘ٝ ٚأَُزؼٔواد ؿ٤و ٓؾلكح رٌزت
اُ٘ز٤غخ ٗٔٛ ٞبؽ ٓغ ٝعٞك ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞأ ٝػلّ ٝعٞكٛب
Confluent growth with (or without ) coliform
اما ًبٕ اُؼلك اٌُُِ ٠جٌزو٣ب اُوٝ ُٕٞٞؿ٤وٛب ٣ي٣ل ػٖ 200ػٍِ ٠طؼ أُوّؼ اُـْبئ ٠أ ٝاما
ًبٗذ أَُزؼٔواد ٓؾلكح ُؼلٛب رٌزت اُ٘ز٤غخ أػلاك ًج٤وح علا ُؼلٛب too numerous to
count Confluent or TNTCػِ ٠اُزور٤ت.
ك٤ٓ ٠ب ٙاُْوةٝ ،عٞك ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞكُٔ ٕٝؼبٕ هثٔب رئٛل ػٖ ٛو٣ن ٗوَ هِٖٓ َ٤
أَُزؼٔواد اُ ٠اٗجٞثخ ٓالم ثو٘٤ِ٣ذ عوٓ ٖ٣غ اُٖلواء أًٝجل َ٣رئفن ٍ ٖٓ Swapطؼ
أُوّؼ اُـْبئٝ ٠رٙٞغ ك ٠اٗجٞثخ ٓوم ثو٘٤ِ٣ذ عوٓ ٖ٣غ اُٖلواء ٝرؾ ٖٚػ٘ل -/+ 35
,5كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخ ٝاٗزبط ؿبى ٓؼ٘بٝ ٙعٞك ثٌزو٣ب اُو.ُٕٞٞ
ٝػلّ اُؾٖ ٍٞػِٗ ٠ز٤غخ ٣ؾزْ اُؾٖ ٍٞػِ ٠ػ٘٤خ أفوٗ ٖٓ ٟلٌ أُٞهغ فالٍ ٍ 24بػخ.
ُالهالٍ ٖٓ االىكؽبّ ػٍِ ٠طؼ أُوّؼ اُـْبئٗ ٠ز٤غخ روّ٤ؼ ،َِٓ 100هَْ اُؼ٘٤خ ػِ4 ٠
أؿْ٤خ روّ٤ؼ ٓضال ٝاعٔغ اُ٘زبئظ ػِ ٠أُوّؾبد اُـْبئ٤خ أَُزقلٓخ.
. 2 . 6انًيبِ خالف ييبِ انشزة Water of other thsan drinking water
اما ًبٗذ ا٧ػلاك اُظبٛوح ٌٖٔ٣ػلٛب ًٝبٕ هل اٍزؼَٔ ك ٠رؾِ ٖٓ َِٓ 100 َ٤اُؼ٘٤خ 2
ٓوّؼ ؿْبئٝ ٠رْ روّ٤ؼ ً ٖٓ َِٓ 50ال ٜٓ٘ٔب ٝظٜو ػِ ٠آَ 3 ٍٝ٧زؼٔواد ٝاُضبٗ5 ٠
َٓزؼٔواد كبٕ اُؼلك آٌَُِ 8 ٌٕٞ٣ ٠زؼٔوح . َِٓ 100 /
ٝك ٠ؽبُخ اُؾٖ ٍٞػِٗ ٠ز٤غخ ٖٓ روّ٤ؼ ٝ ،9 ، 40 – َِٓ ,1 ،َِٓ 1 ،َِٓ 10أهَ ٖٓ
ٝاؽل ٖٓ َٓزؼٔواد ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞكبٕ اُؾَبة ٣زْ ػِ ٠اٍبً ٗز٤غخ 40 ٠ٛٝ َِٓ 10
ك ٌٕٞ٤اُؼلكٝ . 400 َِٓ 100 /اما ًبٕ اُؼلك اٌُُِِ ٠جٌزو٣ب ػِٛ ٠نا أُوّؼ أًجو ٖٓ 200
رٌزت اُ٘ز٤غخ أًجو ٖٓ أ ٝرَب.َِٓ 100/400 ٟٝ
Statistical reliability of membrane filter results . 3 . 6
عل71 –10 ٓ ٍٝ
- 95 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
رأخز انزحعيٍ نجكززيب انمٕنٌٕ انكهيخ
Delayed-Incubation Total Coliform Procedure
رط٣ٞو ٛو٣وخ أُئّؾبد اُـْبئ٤خ اُو٤بٍ٤خ َٔ٣ؼ ث٘وَ اُؼ٘٤خ ثؼل روّ٤ؾٜب آٌُ ٠بٕ اُ٘ؼَ٘
ُِزؾِٝ َ٤ثبُزبُ٣ ٠زْ ٗوَ أُوّؼ اُـْبئ ٠اُ ٠اُج٤ئخ أُزقٖٖخ ٝاُزؾٝ ٖ٤ٚأًبٍ االفزجبه.
ٛنا االفزجبه اُقبٓ ثزؤف٤و اُزؾ ٌٖٔ٣ ٖ٤ٚاٍزؼٔبُ ٚػ٘لٓب ال ٌٕٞ٣ػِٔ٤ب اٍزقلاّ اُطوم
اُزوِ٤ل٣خ ٌٖٔ٣ٝ ,اٍزؼٔبُ ٚأٚ٣ب (أ) ػ٘لٓب ال ٌٖٔ٣ؽلع اُؼ٘٤خ ػِ ٠كهعخ اُؾواهح أُطِٞثخ
أص٘بء اُ٘وَ (ة) ػ٘لٓب ٌٕٞ٣اُٞهذ اُالىّ ُؼِٔ٤خ اُ٘وَ أ ٖٓ ٍٞٛاُٞهذ أَُٔٞػ ث( ٚط)
ػ٘لٓب ٌٓ ٌٕٞ٣بٕ أفن اُؼ٘٤خ ٗبئ ٠ػٖ ٓ٘طوخ أُؼَٔ .أعو٣ذ كهاٍبد ثبٍزقلاّ ٓ٤بٓ ٙبُؾخ
٤ٓٝب ٙػنثخ ٝٝعل إٔ ٗزبئظ ٛو٣وخ اُزؤف٤و ك ٠اُزؾٔٓ ٖ٤ٚبصِخ ُ٘زبئظ االفزجبه اُلٞهُِ ٟؼ٘٤خ.
أًبٍ االفزجبه ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞث٘وَ ؿْبء اُزوّ٤ؼ ٖٓ ث٤ئخ اُ٘وَ اُLES Endo ٠
ٝاُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل ,5 -/+ 35كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 22 – 20بػخ ٝػل أَُزؼٔواد أُضبُ٤خ
ٝTypicalاُـ٤و ٓضبُ٤خ .Atypical
ث٤ئخ اُ٘وَ ٕٔٔذ ُزَٔؼ ثجوبء ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞؽ٤خ ٌُٖٝال ر٘زظ َٓزؼٔواد ٓوئ٤خ فالٍ
اُ٘وَ .أُٞاك أُٞعٞكح ك ٠ث٤ئخ اُ٘وَ روزَ اُجٌزو٣ب ا٧فو ٟأُٖبؽجخ ُجٌزو٣ب اُو ٌُٖٝ ُٕٞٞال
روزِٜب ٠ٛمارٜب اُٝ ٠هذ ٗوِٜب اُ ٠ث٤ئخ اعواء االفزجبه ك ٠أُؼَٔ٣ٝ .غله االّبهح اُ ٠إٔ
ٛوم االفزجبه ُِؼ٘٤خ ثؼل ُٜٕٞٝب أُؼَٔ ٖٓ أٌُٖٔ إٔ ٣زْ ثبرجبع اُطوم اُؼبك٣خ أ ٝثبرجبع
اٌُوم اُجلِ٣خ اُز٤ٍ ٠ؤر ٠مًوٛب.
. 1األدٔاد
أغجبق ثززٖ ثالطزيكيخ ٓؾٌٔخ ُِٔوّؾبد اُـْبئ٤خ أ ٝىعبع٤خ ٓؼؤخ ِٓٝلٞكخ ك ٠كِْ٤
ثالٍز٤ي.
ٔحذح رزشيح فٗ انحمم رؼوْ ث ٖ٤اُؼ٘٤بد اما ًبٗذ ٓؼلٗ٤خ (ًؾ٤ٓ ٍٞضْ٣ٝ َ٤ؼَ صْ ٣طلؤ
ُزٌ ٖ٣ٞكٞهٓبُل٤ٛل أٌ٣ ٝزل ٠ثـِ٤بٜٗب ك ٠أُبء) أ ٝال ٣ؼبك اٍزقلآٜب اما ًبٗذ ٖٓ اُجالٍز٤ي.
- 96 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٌٖٔ٣ٝاٍ٘قلاّ اّ٧ؼخ اُلٞم ث٘لَغ٤خ ك ٠اُزؼو ْ٤اما رٞاكو ٖٓله ُِز٤به اٌُٜوثٌٖٔ٣ٝ .٠
ا٣غبك ِ٤ٍٝخ ُِزلو٣ؾ ثبٍزقلاّ ِٔٛجخ ٣ل٣ٝخ.
. 2انًٕاد ٔثيئخ انُمم
M-Endo methods . 1 . 2
: M-Endo preservative medium . 1 . 1 . 2ؽٚو ث٤ئخ ًٔ M-Endoب ٍجن ،
ثؼل رجو٣لٛب اُ ٠رؾذ 45كهعخ ٓئ٣ٞخ أٙق 3,48عواّ ث٘يٝاد اُٖٞكُ/ ّٞ٣زو .
افِ ٜع٤لا ٝٝىػٜب َِٓ 7 – 5ك ٠أٛجبم ٕـ٤وح ٝاؽلظٜب ك ٠اُضالعخ ٓ َٜٔ٣ٝبُْ
َ٣زؼَٔ ٜٓ٘ب ثؼل ٍ 96بػخ.
. 2 . 1 . 2يحهٕل صٕديٕو ثُشٔاد :أمة 12عواّ ث٘يٝاد ٕٞك ّٞ٣ك٤ًٔ ٠خ ٖٓ أُبء
ٝ Reagent-grade waterأًِٜب اُ .َِٓ 100 ٠ػوْ ك ٠االٝرًٞالف أ ٝثبُزوّ٤ؼ
فالٍ ٓوّؼ ؿْبئٌ٤ٓ ,22 ٠وٝ ٕٝال َ٣زؼَٔ ثؼل ّٜٞ 6ه ٖٓ رؾ٤ٚو.ٙ
. 3 . 1 . 2طيكهْٕكظبييذ Cyclohexamideافز٤به٣ب أٙق ٌٌٍَِٛٞ٤بٓ٤ل اُ ٠ث٤ئخ M-
Endoأُٚبف اُٜ٤ب اُج٘يٝادٚ٣ٝ .بف ُِزقِٔ ٖٓ اُلطو ٝاُقٔ٤وح ك ٠ؽبُخ اػز٤بك
رِ٣ٞضٜب ُِؼ٘٤خ .أٙق اٌٌََُِٛٞ٤بٓ٤ل ثٞاهغ ٓ 50غْ ٖٓ َِٓ 100/اُج٤ئخ .فيٕ ٓؾٍِٞ
اٌٌََُِٛٞ٤بٓ٤ل ك ٠اُضالعخ ٣ٝزقِٔ ٖٓ أُزجو ٠ثؼل ّٜٞ 6ه.
M-ST method . 2 . 2
M-ST holding medium
, 1عواّSodium dihydrogen phosphate ……………………………….
3عواّDipotassium hydrogen phosphate .......................................
1عواّ Sulfanilamid ..............................................................................
Ethanol 95% ……………………………………………….. ....َٓ10
3عواّ…………Tris aminomethane …………………………………..
ُ 1زوReagent-grade water……………………………………………..
ه
- 97 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
أمة أٌُٗٞبد ك ٠أُبء .ػوْ ك ٠اٝ٧رًٞالف ُٔلح 15كه٤وخ ػ٘ل ٓ 121ئ٣ٞخ pH .اُٜ٘بئ٠
٣غت إٔ ٝ .,2 -/+ 8,6 ٌٕٞ٣ىع ثٞاهغ َِٓ 2ػِ ٠اٍُٞبكح أُبٕخ Absorbent pad
ٌٖٔ٣ٝؽلظٜب ك ٠اُضالعخ ٓلح ٍ 96بػخ.
. 3انطزيمخ
ٙغ اٍُٞبكح أُبٕخ أُؼؤخ كٛ ٠جن ٓؼوْ ّٝجـٜب ثج٤ئخ Selected coliform holding
med.
٣ياٍ ؿْبء اُزوّ٤ؼ ثؼل اٗزٜبء اُزوّ٤ؼ ٙٞ٣ٝغ ػٍِ ٠طؼ اٍُِٞل ٝأُْجؼخ اَُبثوخ ٝؿِن
اُطجق ثبؽٌبّٝ .ك ٠ؽبُخ اٍزقلاّ اٛ٧جبم اُيعبع٤خ ٣ؾٌْ ؿِن اُطجن ثبٍزقلاّ ّوٜ٣
الٕن٣ .وٍَ اُطجن أ ٝاُٛ٨جبم ثؼل ٙٝؼٜب كٕ٘ ٠لٝم ٓؾٌْ ٝروٍَ اُ ٠أُؼَٔ ُِزؾِ.َ٤
ٌٖٔ٣إٔ رزؾَٔ اُؼ٘٤خ ٍ 72بػخ ك ٕٝؽلٝس ٗٔ.ٞ
ثؼل ٍٕٞٝاٛ٧جبم اُ ٠أُؼَٔ ٣وكغ ؿْبء اُزوّ٤ؼ ٙٞ٣ٝغ ػِ ٠ث٤ئخ M-Endo or
ٝ LES-Endoرؾ ٖٚػِ ٝ5 -/+ 35 ٠كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 22 – 20بػخ.
ٍغَ ٝهذ أفن اُؼ٘٤خٝ ،هذ ُٜٕٞٝبٝ ،هذ افزجبهٛب ك ٠أُؼَٔ .اؽَت اُ٘ز٤غخ ٍٝغَ
اُٞهذ اُلٓ ٟو هجَ افزجبه اُؼ٘٤خ ك ٠أُؼَٔ.
- 98 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
غزيمخ أغشيخ انززشيح نزمذيز ثكززيب انمٕنٌٕ انجزاسيخ
Fecal Coliform Membrane Filter Procedure
ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ هثٔب ٣زْ رول٣وٛب ثبٍزقلاّ اٗ٧بث٤ت أُزؼلكح Multiple-tube
procedureأ ٝثبٍزقلاّ ٛو٣وخ أؿْ٤خ اُزوّ٤ؼ .Membrane filte technique
٣ٝزْ اُزؾ ٖ٤ٚػِ ٠كهعخ ,2 -/+ 44,5كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 24بػخ٤ٔٛ٧ٝ .خ ٙوٝهح
اُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل رِي اُلهعخ كبٕ اٛ٧جبم ٣زْ ٙٝؼٜب ك ٠أً٤بً ثالٍز٤ي ؿ٤و ٓ٘لنح ُِٔبء
َ٣ٝزقلّ ؽٔبّ ٓبئٝ ٠رؾ ٖٚاٛ٧جبم رؾذ ٍطؼ أُبء ٌٖٔ٣ٝ .اٍزقلاّ أ٣خ ؽٚبٗخ رؾون
االّزواٛبد اَُبثوخ.
. 1انًٕاد ٔثيئخ انشرع
M-FC medium . 1 . 1
َ٣زقلّ ك ٠اُزؾ٤ٚو اُج٤ئخ اُغبٛيح ٝال ِ٣غؤ اُ ٠رؾ٤ٚو اُج٤ئخ ٖٓ ٌٓٗٞبرٜب ًبُٔب
رٞعل اُج٤ئخ عبٛيح رغبه٣بٝ .روً٤ت اُج٤ئخ ًبُزبُ:٠
………………………………………… Tryptose or Biosate 10 g
Proteose peptone No. 3 or polypeptone …………………….. 5 g
Yeast extract ……………………………………………… .. 3 g
Sodium chloride ………………………………………………. 5 g
Lactose ……………………………………………………… 12,5 g
………………… Bile salt No, 3 or bile salt mixture ……….1,5 g
Aniline blue …………………………………………………… 0,1 g
Agar (optional) ……………………………………………….15 g
Reagent-grade water ………………………………………….. 1 L
- 99 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
رٚبف أٌُٗٞبد اُ ٠ا ُزو ٓبء ٓٚبف آُ ٖٓ َِٓ 10 ٚ٤ؾِٓ Rosalic acid % 1 ٍٞناة
كٞٗ ,2 ٠هٓبٍ ٕٞكا ًب٣ٝخٍ .قٖ ُووة اُـِ٤بٕ ٝثوك اُ ٠أهَ ٖٓ 50كهعخ ٓئ٣ٞخ .ال رؼوْ٤٤
ُِج٤ئخ ك ٠اٝ٧رًٞالف .اما اٍزقلّ ا٥عبه رٞىع اُج٤ئخ ك ٠أٛجبم ثزو ْٓ 12X 50 ٟثٌٔ٤خ 5
– ٝ َِٓ 7رزوى ُززِٖت pH .اُٜ٘بئ . ,2 -/+ 7,4 ٠اُج٤ئخ اُٜ٘بئ٤خ رؾلع ك ٠اُضالعخ ك٠
أً٤بً ٓؾٌٔخ ُِٔقؾبكظخ ػِ ٠اُوٞٛثخ٣ٝ ،زقِٔ ٖٓ اُج٤ئخ اَُبئِخ اُـ٤و َٓزؼِٔخ ثؼل 96
ٍبػخ ك ٠ؽبُخ اُج٤ئخ اَُبئِخ ٝاٍجٞػبٕ ك ٠ؽبُخ اٙبكخ آعبه.
ثقزجو ًَ ُ ٖٓ ٛٞاُج٤ئخ ٓوبهٕ ثبُِ ٛٞاَُبثن أُوج٣ٝ (QC/QA ( ٍٞؼَٔ رقل٤ق ٖٓ
ٓيهػخ ٣ٝ E,coliوّؼ ؽغْ ٓ٘بٍت ُ٤ؼطَٓ 60 – 20 ٠زؼٔوح ػِ ٠اُلبروٓٝ.غ ًَ ُٛٞ
رؾون ٖٓ َٓ 10زؼٔواد أ ٝأًضو ٓزؾَٖ ػِٜ٤ب ٖٓ ػ٘٤بد ٛج٤ؼ٤خ ٓقزِلخُ ،زؤً٤ل ػلّ ٝعٞك
ٗزبئظ ا٣غبث٤خ ؿ٤ال ؽو٤و٤خ ُٔ .False positiveؼظْ اُؼ٘٤بد رَزقلّ ث٤ئخ M-FCثلٕٝ
ٓ Rosalic acidغ اػزجبه إٔ ُ٘ٛ ٌ٤بى رلافَ ٖٓ اُقِل٤خ اُجٌز٤و٣خٛٝ .نا اُزلافَ ٣زٞهغ ك٠
ؽبُخ افزجبه .Storm water
هجَ االٍزقلاّ ٣قزجو ًَ ٖٓ Batchاُج٤ئخ ٌُلبءر ٚثبٍزقلاّ ٓيهػخ ا٣غبث٤خ ٝافوٍِ ٟج٤خ.
٣ٝقزجو ُِزِٞس كٜٗ ٠ب٣خ ٝثلا٣خ ًَ ٍَِِخ ٖٓ اُزوّجؼ ثبٓواه ٓ ٖٓ َِٓ 30 – 20ؾٍِٞ
اُْطق أُؼوْ ٝك ٠ؽبُخ ٝعٞك رِٞس ر َٜٔاُ٘زبئظ ُِؼ٘٤بد أُزؤصوح ثبُزِٞس ٣ٝؼبك ِٛت
ػ٘٤بد.
. 2 . 1أغجبق انشرع Culture dishes
رَزقلّ اٛ٧جبم اُجالٍز٤ٌ٤خ اُؾٌٔخ اُـِن ؽز ٠ال ٣لول هٞٛثخ ٖٓ اُج٤ئخ ِ٣ٝق ًَ ٛجن ك٠
ً ٌ٤ثالٍز٤ي ٓؾٌْ اُـِن ؽز ٠ال ر٘لن ٓ٘ ٚأُ٤ب ٙثزؾ ٚ٘٤ٚرؾذ ٍطؼ أُبء.
. 3 . 1انحعبَّ Incubator
اُزقٖٔ ك ٠افزجبه ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ ٣وعغ اُ ٠اٍزقلاّ ؽواهح اُزؾ .ٖ٤ٚاٍزقلاّ
ؽٚبٗخ ٞٛائ٤خ ك ٠اُزؾ ٖ٤ٚهثٔب ٣زورت ػِ٤ؼب ْٓبًَ ٗز٤غخ ٛجوبد اُؾواهح ك ٠اُؾٚبٗخ،
اٗقلبٗ ٓؼلٍ اٗزوبٍ اُؾواهح ٖٓ ٞٛاء اُؾٚبٗخ اُ ٠اُج٤ئخٝ ،اُزـ٤و ك ٠ؽواهح اُؾٚبٗخ ٓغ
ًَ ػِٔ٤خ كزؼ ُٜب ٞٛاٍ اُُٝ .ّٞ٤نُي كبٕ اٍزقلاّ ؽٚبٗخ ٓبئ٤خ (ؽٔبّ ٓبئٓ ٞٛ ) ٠ب ٖ٘٣ؼ
ث ٚثبَُ٘جخ ُٜنا االفزجبه اُْل٣ل اُؾَبٍ٤خ ٓ ٌٕٞ٣ٝـط ٠ثـطبء عٔبُُ ٕٞزوِ َ٤اُلول كىبُؾواهح
ٝك ٠أُ٤ب.ٙ
- 100 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 2انطزيمخ Procedure
. 1 . 2اخزيبر حغى انؼيُخ افزبه ؽغْ اُؼ٘٤خ ثبالٍزوّبك ثبُغل ٍٝاُزبُ: ٠
ٝاُؾغْ أُقزبه ٣ؼطٓ ٠ب ثَٓ 60 – 20 ٖ٤زؼٔوح ثٌزو٣ب ه٤ُٗٞٞخ ٣واى٣خ ػِ٠
اُلِزو.
ػ٘لٓب رًٌ ٕٞضبكخ اُجٌزو٣ب ؿ٤و ٓؼوٝكخ ،هّؼ ػلح ؽغ ّٞأ ٝرقل٤لبد ُِؾٖ ٍٞػًِ ٠ضبكخ
ٌٖٔ٣ػلٛب .اؽَت اُزقلجق ٝاُؾغْ أُزٞهغ إٔ ٣ؼط ٠ػل ٓؼو ٍٞػِ ٠اُلِزو ٝافزبه ًٔ٤زبٕ
أفوربٕ رٔضَ ػْو ٝػْوح أٙؼبف اُؾغْ أُقزبه .
- 101 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
. 2 . 2رزشيح انؼيُخ Filtration of sampleارجغ ٗلٌ اُطو٣وخ ٝاالؽز٤بٛبد أُْبه اُٜ٤ب
ك ٠االفزجبه ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ.
.3. 2رحعيز غجك انشرع ٙ Preparation of culture dishغ ٍٝبكح ٓبٕخ كًَ ٠
ٛجن ّٝجؼٜب ثؾٞاُُ ٖٓ َِٓ 2 ٠ج٤ئخ (ٙ .) M-FCغ ثطو٣وخ ٓؼؤخ اُلِزو اُن ٟرْ روّ٤ؼ
اُؼ٘٤خ ٖٓ فالُ ٚػِ ٠اٍُٞبكح ٝارقن االؽز٤بٛبد أُْبه اُٜ٤ب َٓجوب ٌٖٔ٣ٝ .اٍزؼٔبٍ اُج٤ئخ
أُٚبف اُٜ٤ب ا٥عبه ثلال ٖٓ اٍُٞبكح أُبٕخ.
. 4 . 2انزحعيٍ Incubationرٙٞغ االٛجبم ك ٌ٤ً ٠ثالٍز٤ي ؿ٤و ٓ٘لن ُِٔ٤بٝ ٙاؿِوٚ
ثبؽٌبّ ٣ٝؾ ٖٚرؾذ ٍطؼ أُبء ك ٠اُؾٔبّ أُبئ ٠ػ٘ل ,2 -/+ 44,5كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح 24
ٍ 2 -/+بػخ٣ .واػٙٝ ٠غ ًَ اٛ٧جبم أَُزؼِٔخ فالٍ 30كه٤وخ ٖٓ اُزوّ٤ؼ.
. 5 . 2انؼذ Countingثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خػِ ٠ث٤ئخ M-FCرؤفن كهعبد ٓقزِلخ ٖٓ
اُِ ٕٞا٧ىهم .ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُـ٤و ثواى٣خ رؤفن ُ ٕٞهٓبكً -ٟو .ْ٣هَِٓ ٖٓ َ٤زؼٔواد
ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُـ٤و ثواى٣خ ٍٞف رو ٟػِ ٠ث٤ئخ M-FCثَجت ؽواهح اُزؾ ٖ٤ٚأُورلؼخ
ٝٝعٞك Rosalic acidى اٍزؼَٔ ُِؼل هٞح رٌج٤و 15- 10ثبٍزقلاّ Binocular wide
.field
. 6 . 2انزحمك Verificationرؾون ٖٓ أَُزؼٔواد اُيههبء أُضبُ٤خ ٝأ٣خ َٓزؼٔواد ؿ٤و
ٓضبُ٤خ Atypicalهٓبك٣خ اُ ٠فٚواء .
. 7 . 2حظبة كضبفخ انجكززيب انمٕنَٕيخ انجزاسيخ اؽَت ػلك أَُزؼٔواد ك ٠أُغبٍ أُؾلك
َٓ 60 – 20زؼٔوح ٣ٝالؽع إٔ ا٧ػلاك أَُٔٞػ ثٜب ك ٠ؽبُخ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ – 20
٣ٝ 80وعغ مُي ٌُجو ؽغْ اُقِ٤خ ػِ ٠ث٤ئخ .M-FC
- 102 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
رأخز انزحعيٍ نهجكززيب انمٕنَٕيخ انجزاسيخ
Delayed-Incubation Fecal Coliform Procedure
اُطو٣وخ ْٓبثٜخ ُطو٣وخ اُجٌزو٣ب اُو٤ُٗٞٞخ اٌُِ٤خ Total coliformى رَزؼَٔ ك ٠ؽبُخ ػلّ
آٌبٕ ػَٔ االفزجبه ك ٠اُؾوَ أ ٝاما ًبٕ ٘ٛبى ؽبُخ فبٕخ ٖ٘٣ؼ كٜ٤ب ثؤٗ٤ٍ ٚزْ اُزؾون ٖٓ
أَُزؼٔواد .روّؼ اُؼ٘٤خ ٙٞ٣ٝغ اُلِزو ػِ ٠ث٤ئخ ٝ M-STروٍَ اُ ٠أُؼَٔ العواء
االفزجبه ث٘وَ اُلِزو اُ ٠ث٤ئخ ٝ M-FCاُزؾ ٖ٤ٚػِ ,2 -/+ 44,5 ٠كهعخ ٓئ٣ٞخ ُٔلح 24
ٍ 2 -/+بػخ ٝرؼل َٓزؼٔواد اُجٌزو٣ب اُو٤ُٗٞٞخ اُجواى٣خٝ .ث٤ئخ M-STرؾبكع ػِ ٠ؽ٣ٞ٤خ
اُجٌزو٣ب اُو٤ُٗٞٞخ اُجواى٣خ ٝال رَٔؼ ُٜب ثبُ٘ٔٝ ٞرٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔواد ٌٖٔ٣ٝإٔ رَزٔو ؽ٣ٞ٤زٜب
ػِ ٠رِي اُج٤ئخ ُٔلح 3أ٣بّ ٝاُزؤص٤و ٙئ.َ٤
عٔ٤غ اُقطٞاد ثؼل مُي ٠ٛاُقطٞاد اُؼل٣خ اَُبثن مًوٛب ثبَُ٘جخ ُج٤ئخ .M-FC
- 103 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
- 104 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
انفصم انخبيض
يغًٕػزٗ انجكززيب انظجحيّ انجزاسيّ ٔانكزيبد
انًؼٕيّ ككشبف نهزهٕس
FECAL STREPTOCOCCUS and ENTEROCOCCUS
GROUPS
Fecal Streptococcus Group ّ يغًٕػخ انجكززيب انظجحي:أٔال
genus عُِٞ٘ species ًع٘ب٧ٕ ٖٓ ػلك ٖٓ اٌٞ رزٚ٣خ اُجواى٤ب اَُجؾ٣ػخ اُجٌزوٞٔٓغ
: ًٌَ ٓضًٍٞٞزوثز
S. faecium, S. avium, S. bovis, S. equinus, S. faecali
andS. gallinarum.
ب ٖٓ ثواىُٜرْ ػيٝ Lance field’s Group D antisera خ ٓغ٤غبث٣غخ ا٤ ٗز٠ؼط٣ ٌَُا
.warm-blooded animals اٗبد ماد اُلّ اُلاكئٞ٤اُؾ
رحذ األَٕاع
S. faecalis subspecies (variety) liquefaciens, and S. faecalis var.
zymogenes
.َ ًواد اُلّ اُؾٔواء٤ِرؾٝ ٖ٤الر٤ اٍبُخ اُغ٠ِب ػٜي ثٔولهر٤ٔرز
.gastrointestinal tract ٓؼبء٧اٝ ٙأُؼلٞٛ fecal streptococci اعلٌٞٓبٕ ر
S. faecalis and S. faecium ٠ٛ ٕ االَٗب٠ع٘بً اُْبئؼخ ك٧اٝ
- 105 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ٝثبُٔضَ كبٕ S. bovis, S. equines snd S. aviumؿ٤و ٓوزٖو ٝعٞكٛب ػِ ٠اُؾٞ٤إ
ثبُوؿْ ٖٓ أٜٗب ػبكح ٓب رٌٓ ٕٞزٞاعل ٙثٌضبكخ ػبُ٤خ ك ٠ثواى اُؾٞ٤اٗبد .ثؼ٘ أع٘بً اُجٌزو٣ب
اَُجؾ٤خ رَٞك ك ٠أع٘بً ٓؾلكح ٖٓ اُؾٞ٤اٗبد ٝؿ٤و ٓزٞاعل ٙك ٠ؿ٤وٛبٖٓ ٌ٤ُ ٌُٖٝ ،
أٌُٖٔ رلوهخ ٖٓله اُزِٞس اُجواى ٟاػزٔبكا ػِ ٠اع٘بً اُجٌزو٣ب اَُجؾ.ٚ٤
اٍزقلٓذ اُجٌزو٣ب اَُجؾ٤خ اُجواى ٓ ٚ٣غ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواىُ ٚ٣زلوهخ اُزِٞس ا٥كٓ ٢ػٖ
اُزِٞس ٖٓ اُؾٞ٤اٗبد ماد اُلّ اُلاكئ .اَُ٘جخ ث ٖ٤ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى / ٚ٣اُجٌزو٣ب اَُجؾ٤خ
اُجواى ٚ٣رٌ ٕٞأًجو ٖٓ 4ك ٠ؽبُخ ٓب اما ًبٕ ٖٓله اُزِٞس آكٓ ،٠ك ٠ؽٓ ٖ٤ب اما ًبٗذ اَُ٘جخ
ثٜٔ٘٤ب أهَ ٖٓ ٖٓ ٌٕٞ٣ ., 7له اُزِٞس ؿ٤و آكٓ .٠ػِ ٠إٔ ٛن ٙاَُ٘جخ ٓؾَ رَبإٍ ؽ٤ش أٗٚ
ٖٓ أُؼوٝف إٔ ٓلح ثوبء أع٘بً اُجٌزو٣ب اَُجؾ٤خ ؽٓ Survival ٚ٤قزِل ٚك٘غل إٔ S. bovis
and S. equinusرٔٞد ثَوػ ٚػوت فوٝعٜب اُ ٠اُج٤ئخ أُبئ ٚ٤ثٔ٘٤ب S. faecalis and
S. faeciumرجو ٠ؽُٔ ٚ٤لح ً .ِٚ٣ٞٛنُي كبٕ رؤص٤و رط٤ٜو ٓقِلبد اُٖوف اُٖؾ٣ ٠ئصو
ػِ ٠رِي اَُ٘ج ٚثٓ ٖ٤ئّواد اُزِٞس ٓٔب هل ٣غؼَ االٍز٘زبط ػٖ ٖٓله اُزِٞس ؿ٤و ٕؾ٤ؼ.
ثبالٙبكخ اُ ٠إٔ ٛو٣وخ اٌُْق ػِ ٠اُجٌزو٣ب اَُجؾ٤خ ٠ٛا٧فو ٟػبَٓ ٓئصو ك٘غل إٔ
اٍزقلاّ ث٤ئخ ٓ KFغ ٛو٣وخ ا٧ؿْ٤خ اُلبهى٣ Membrane Filter ٙؼطٗ ٠ز٤غخ ا٣غبث٤خ
فبكػخ ثَ٘ج ٚرزواٝػ ٓب ث % 90 – 10 ٖ٤ك ٠ؽبُخ أُ٤ب ٙأُبُؾخ ٝاُؼنثٝ .ٚػِ ٠مُي كبٗ ٚال
٣غت ارقبم اَُ٘جخ أُنًٞهح ث ٖ٤ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواىٝ ٚ٣اُجٌزو٣ب اُْجؾ٤خ اُجواى٣خ ًؤٍبً
ُِزلوهخ ث ٖ٤اُزِٞس ا٥كٓٝ ٠اُؾٞ٤اٗ.٠
صبَيب :يغًٕػخ انجكززيب انكزٔيّ انًؼٕيّ Enterococcus Group
٠ٛرؾذ ٓغٔٞػٓ ٖٓ ٚغٔٞػخ اُجٌزو٣ب اَُجؾ ٚ٤اُجواىٝ ٚ٣رَْٔS. faecalis, S. :
faecium, S. gallinarum, and S. avium
ٝرلوم ػِ ٠أٍبً ٓولهرٜب ػِ ٠اُ٘ٔ ٞكٝ ٠عٞك ِٓ % 6.5ؼ ٛؼبّ ،اُ٘ٔ ٞػ٘ل ٝ pH 9.6ػ٘ل
ًال ٖٓ كهعز ٠ؽواهٓ 45 ، 10 ٙئٝ .ٚ٣ٞرَزقلّ ًلُ َ٤ػِ ٠اُزِٞس ك٤ٓ ٠ب ٙأُز٘يٛبد
ٝ Recreational waterرَْٔ ّٞاٛئ االٍزؾٔبّ اُؼنثخ ٝأُبُؾخ (اُقط ٛٞاالٍزوّبكٚ٣
َِٓ 100 / 33 ٠ٛك ٠أُ٤ب ٙاُؼنث َِٓ 100 / 35 ، ٚك ٠أُ٤ب ٙأُبُؾخ) ٝاٍ٧بً ٞٛ
أُزُ ٍٜٞقَٔ ٚػ٘٤بد ػِ ٠ا٧هَ فالٍ اُْٜو مُي فالٍ ٓ ٍْٞاٍزقلاّ اُْبٛئ ك٠
االٍزؾٔبّ.
- 106 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
اخزيبر غزيمخ االخزجبر:
رَزقلّ ٛو٣وخ اُؼل االؽزٔبُ MPN ٠ك ٠ؽبُخ افزجبه أُقِلبد اَُبئِ ٚاُقبّ ٝأُؼبُغخ
ثبٌُِٞه ًنُي اُوٝاٍت ٌٖٔ٣ٝ Sedimentsاٍزؼٔبُٜب أٚ٣ب ك ٠افزجبه أُ٤ب ٙاُؼنثٚ
ٝأُبُؾ.ٚ
ٛو٣وخ ا٧ؿْ٤خ اُلبهى Membrane Filter ٙرَزقلّ أٚ٣ب ك ٠ؽبُز ٠أُ٤ب ٙاُؼنثٝ ٚأُبُؾٚ
ٌُٖٝال رَزقلّ ك ٠ؽبُخ أُ٤ب ٙػبُ٤خ اُؼٌبه.ٙ
غزيمخ األَبثيت انًزؼذدِ Multiple-Tube Techniqueأٔ انؼذ االحزًبنٗ MPN
أ .االفزجبه أُجلئPresumptive Test ٠
ثبٍزقلاّ ث٤ئخ - Azide dextrose brothاُزؾ ٖ٤ٚػُِٔ .,5 -/+ 35 ٠لح 2 -/+ 24
ٍبػٝ ٚاما ُْ رْبٛل ػٌبه ٙك ٠هبع اٗ٧جٞث ٚر٘زْو ٓغ اُوط رياك ٓلح اُزؾ ٖ٤ٚاُ48 ٠
ٍبػٍ 3 -/+ ٚبػبد.
ة .االفزجبه اُزؤً٤لConfirmed Test ٟ
ثبٍزقلاّ ث٤ئخ - Pfizer selective enterococcus (PSE) agarاٗ٧بث٤ت اال٣غبث٤خ
ُالفزجبه أُجلئ ٠رقط ٜػِ ٠اُج٤ئخ اُزؤً٤لٝ ٚ٣رؾ ٖٚػِٓ 35 ٠ئُٔ ٚ٣ٞلح ٍ 24بػ.ٚ
أَُزؼٔواد اُج٘ ٚ٤أُبئِ ٚاُ ٠اُِ ٕٞاٍٞ٧ك ٓغ ٝعٞك ٛبُ ٚث٘٤خ ؽُٜٞب هثٔب ر٘وَ اُ٠
أٗبث٤ت ٖٓ ث٤ئخ
ٝ Brain Heart Infusion Broth + 6.5 % NaClاُ٘ٔ ٞػ٘ل اُزؾ ٖ٤ٚػِ45 ٠
ٓئ٣ ٚ٣ٞلٍ ػِ ٠إٔ أَُزؼٔواد ر٘زٔ ٠اُ ٖٓٝ enterococcus group ٠ػلك اٗ٧بث٤ت
اال٣غبث٤خ ٣وله ػلكٛب االؽزٔبُ. ٠
روله اُجٌزو٣ب اَُجؾ٤خ اُجواى ٖٓ ٚ٣ػلك اٗ٧بث٤ت اال٣غبث ٚ٤ك ٠افزجبه MPNاُز٠
أػطذ ٗز٤غخ ا٣غبث ٚ٤ػِ ٠اُج٤ئخ اُزؤً٤لٝ ٚ٣رٌ ٕٞاُ٘ز٤غخ ٓٔ٤ي ٙثبُؼل االؽزٔبُ100 / ٠
َِٓ.
- 107 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
صبَيب :غزيمخ األغشيخ انفبرسِ
أ .ثيئخ mE agar for enterococci
10عواّ ثجزٕٞ
15عواّ ًِٞه٣ل ٕٞكّٞ٣
30عواّ َٓزقِٔ فٔ٤وٙ
1عواّ اٌٍٖ٤ُٞ٤
.,.5عواّ اًز٤لٌَ٤ٌِٛٞ٤ٍ( ٕٞ٣بٓ٤ل)
.,. 15عواّ ٕٞك ّٞ٣آى٣ل
15عواّ آعبه
ا ُزو ٓبء Reagent grade
ثؼل اُزؾ٤ٚو ٝاُزؼو ْ٤رجوك اُج٤ئخ اُ 46 ٠كهعٓ ٚئٚ٣ٝ ٚ٣ٞبف 0.25عواّ ٖٓ Nalidixic
ٓ acidناة ك ٖٓ َِٓ 5 ٠أُبء ٚ٣ٝبف ثٚغ هطواد ٖٓ ا٣له٤ًَٝل اُٖٞك ّٞ٣ػْو
ػ٤به ٟالماثخ أُٚبك ُؾٚ٣ .ٟٞ٤بف ., 15عواّ ر ٠ر٣ٝ ٠ٍ ٠قِ ٜع٤لا ُ٤نٝة .رٖت ُج٤ئخ
ك ٠أٛجبم ٕـ٤وح ٝرزوى ُززِٖت .كهعخ اُؾٔٙٞخ اُٜ٘بئ ٚ٤رٌ 7.1+/- 0.2 ٕٞرؾلع
اٛ٧جبم أُٖجٞث ٚك ٠اُظالّ كافَ اُضالعٝ ٚرِٖؼ ُٔلح ّٜوٛٝ .ن ٙاُج٤ئخ ٕبُؾخ الفزجبه
ٓ٤ب ٙاالٍزؾٔبّ اُؼنثٝ ٚأُبُؾ.ٚ
- 108 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
EIA substrate
Esculin 1g
Ferric citrate 0.5 g
Agar 15 g
Reagent grade water 1 liter
جبمٛ أ٠رٖت كٝ ٚ٣ٞ ٓئ46 ٠ُرجوك اٝ ْرؼوٝ ٚ رَقٖ ُالماث. ْ٤ هجَ اُزؼوpH 7.1 +/- 0.2
.وّٜ ٍب فالٌُٜٖٔ اٍزؼٔب٣ٝ ٚ٣ٞ ٓئ10 – 2 اُظالّ ػ٘ل٠رؾلع كٝ رزوى ُززِٖتٝ
m-Enterocccus agar for fecal streptococci
Tryptone 20 g.
Yeast extract 5 g.
Glucose 2 g.
Dipotassium hydrogen phosphate 4 g.
Sodium azide 0.4 g.
Triphenyl tetrazolium chloride (TTC) 0.1 g.
Agar 1o g.
Reagent water 1 Liter
، رزوى ُززِٖتٝ ٙو٤جبم ٕـٛ أ٠ىع كٞ ر، ًالفٞرٝ٧ ا٠ ال رؼوْ ك، ٗبدٌَُٞٔقٖ الماثخ ا٣
.ٚأُبُؾٝ اُؼنثخٙب٤ُٔئخ رِٖؼ الفزجبه ا٤ اُجٙنٛٝ .ٙضب ًَ ٓو٣و ؽلٚرؾٝ ال رؾلع
Brain – heat infusion Broth
Infusion of calf brain 200 g.
Infusion of beef heart 250 g.
Proteose peptone 10 g.
Sodium chloride 5 g.
Disodium hydrogen ohosphate 2.5 g.
Reagent grade water 1L
.ْ٤ ثؼل اُزؼوpH 7.4
- 109 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
Brain heart infusion agar
رؾٚو ثبٙبكخ آعبه اُ ٠اُج٤ئخ اَُبثو ،ٚرٖت ك ٠أٗبث٤ت ٓبئِ.ٚ
Bile esculin agar
Beef extract 3g.
Peptone 5 g.
Oxgall 40 g.
Esculin 1 g.
Ferric citrate 0.5 g.
Agar 15 g.
Reagent grade water 1L
َ٣قٖ الماثخ أٌُٗٞبد .رٞىع ك ٠أٗبث٤ت ٝثؼل رـؤٜ٤ب رٙٞغ ٓبئِخ ُززِٖت ػِٕٞ ٠هح ٓبئِٚ
ٕ ٌٖٔ٣ٝجٜب ثؼل رؼؤٜ٤ب ك ٠أٛجبم .ال ري٣ل ٓلح اُزؼو ْ٤ػٖ 15كه٤و ٚؽز ٠ال ٖ٣جؼ ُٜٗٞب
هبرْ .اُؾٔٙٞخ اُٜ٘بئ٤خ ثؼل اُزؼوٝ . ,2-/+ 6.6 ْ٤رؾلع ػ٘ل ٓ 10-4ئ.ٚ٣ٞ
- 110 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
انطزيمّ:
mE method
٣قزبه ؽغْ اُؼ٣ٝ ٚ٘٤وّؼ فالٍ ٘٣ٝ membrane filterوَ اٍُ ٠طؼ اُج٤ئ60 – 20( ٚ
َٓزؼٔو ٙػٍِ ٠طؼ ٣ .(membraneؾ ٖٚؿِ ٠كهعخ ٖٗ -/+ 41ق كهع .ٚثؼل 48
ٍبػخ رؾ٘٣ ٖ٤ٚوَ اُلِزو اُ٣ EIA ٠ؾ ٖٚؿِ ٠كهعخ ٖٗ -/+ 41ق كهعُٔ ٚلح 20
كه٤وخ .رؼل أَُزؼٔواد ماد اُِ ٕٞاُووٓي ٟاُ ٠أؽٔو ػِ ٠أٜٗب اٌُو٣بد أُؼٚ٣ٞ
٠ٛٝ enterococciرٌ ٕٞهاٍت ث٘ ٠اُ ٠أٍٞك ك ٠فِق أَُزؼٔو.ٙ
m-enterococcus method
٣قزبه ؽغْ اُؼ٣ٝ ٚ٘٤وّؼ فالٍ ٘٣ٝ membrane filterوَ اٍُ ٠طؼ اُج٤ئٝ ٚرزوى اٛ٧جبم
30كه٤و ٚهجَ اكفبُٜب اُؾٚبٗ ٚػ٘ل ٓ 35ئٖٗ -/+ ٚ٣ٞق كهعُٔٝ ٚلح ٍ 48بػخ .رؼل
أَُزؼٔواد اُؾٔواء كبرؾخ أ ٝهبرٔٝ ٚرٌ ٕٞربثؼخ .enterococci
- 111 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
انزفزلّ:
ر٘وَ أَُزؼٔو ٙاٍُ ٠طؼ ٝ brain heart infusion agarرؾُٔ ٖٚلح ٍ 48 – 24بػخ
ػِٓ 35 ٠ئ .ٚ٣ٞر٘وَ َٓزؼٔوح ٓ٘لِٖ ٚاُٝ Brain heart infusion broth ٠اُّ ٠و٣ؾزٖ٤
ىعبع٤زبٕ .رؾ ٖٚأٗبث٤ت Brain heart infusion brothػ٘ل ٓ 35ئُٔ ٚ٣ٞلح ٍ 24بػخ.
ٚ٣ٝبف كٞم أًَ٤ل ا٣٧لهٝع %3 ٖ٤اُ ٠اُل ِْ٤ػِ ٠اُْو٣ؾخ اما رٌٗٞذ كوبه٤غ ٌٕٞ٣
االفزجبه ٓٞعت 1ٙٝا كُ َ٤ػِ ٠إٔ أَُزؼٔوح َُ٤ذ ٖٓ اُجٌزو٣ب اَُجؾ٤خ اُجواى .ٚ٣أٓب اما
ًبٕ االفزجبه ٍبُت ك٤ؼَٔ ٍجـخ عواّ ُِل ِْ٤ػِ ٠اُْو٣ؾخ اُضبٗ .ٚ٤أُلو ٗٝإٔ Fecal
ٞٓ Enterococci ،streptococciعجُ ٚغواّ ٝرًٌ ٕٞوٓ ٚ٣ٝيكٝعخ أ ٝكٍ ٠الٍَ٘٣ .وَ
ُٞة ٖٓ Brain heart infusion brothاًُ ٠ال ٖٓ:
٣ٝ Bile esculin agarؾ ٖٚػ٘ل ٓ 35ئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخ
ٖٚ٣ٝ Brain heart infusion brothػ٘ل ٓ 45ئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخ
ٚٓ Brain heart infusion brothبف آُِ % 6.5 ٚ٤ؼ ٛؼبّ ٝاُزؾ ٖ٤ٚػ٘ل 35
ٓئ٣ٞخ ُٔلح ٍ 48بػخ.
ًزبُ٤ي ،-عواّ ً +و ٚ٣ٝػِٝ Bile esculin agar ٠ػ٘ل ٓ 45ئ ٚ٣ٞكBrain heart ٠
٣ infusion brothلٍ ػِ ٠إٔ أَُزؼٔوح ر٘زٔ ٠اُ .Fecal streptocci group ٠اُ٘ٔٞ
ػ٘ل ٓ 45ئ ٚ٣ٞكٝ ٠عٞك ِٓ 6.5%ؼ اُطؼبّ ٣لٍ ػِ ٠إٔ أَُزؼٔوح ر٘زٔ ٠اُ٠
enterococcus group
- 112 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
انفصم انظبدص
انًٕاصفبد انميبطيخ نًيبِ انشزة
Drinking Water Standards
َظى انٕاليبد انًزحذح
ك ٠ػبّ 1977أفز٤ود اُ٘ظْ اُو٤ٓٞخ ا٤ُٔ ٚ٤ُٝ٧ب ٙاُْوة اُْوة National Interim
ُٙٞDrinking Water Primary Regulationsغ عٔ٤غ اُ٘ظْ اُؼبٓخ ُٔ٤ب ٙاُْوة.
ٝثٖلخ ػبٓخ كبٕ ا٥ثبه اُقبٕخ ٠ٛاُٞؽ٤لح اُز ُْ ٠ر٘ظْ ٝمُي ٜٗ٧ب ال رقلّ ِٕٝ 15خ
فلٓ ٚ٤أ ٝرقلّ ػِ ٠ا٧هَ ّ 25قٔ ٤ٓٞ٣ب ُٔلح ٓٞ٣ 60ب ك ٠اُؼبُّٝ .زؤً٤ل آ٧بٕ ُغٔ٤غ ٓ٤بٙ
اُْوة ٣غت إٔ رَزؼَٔ ٗلٌ اُ٘ظْ ا٤ُٝ٧خ أُْبه اُٜ٤ب ًقط ٛٞاٍزوّبك٣خ ثبَُ٘جخ ُ٦ثبه.
ٝث٘بء ػِ ٠اُ٘ظْ أُْبه اُٜ٤ب ؽلك أهَٖٓ ٠زُِِٞٔ ٟٞصبد Maximum Contaminany
) ٞٛٝ Level (MCLأػِ ٠روً٤ي َٓٔؼ ثِٞٓ ٖٓ ٚس ٓؼ ٖ٤ك٤ٓ ٠ب ٙاُْوة .ثؼ٘ ٛنٙ
اُزوً٤ياد ٙٝؼذ ُٔ٘غ أُْبًَ اُٖؾ٤خ اُز ٠رْ٘ؤ ػٖ روً٤ي ػبُِٞٓ ٖٓ ٠صبد ٓقزِلخ
فالٍ ٓلح ِ٣ٞٛخ ٖٓ اُٞهذٓٝ .غ مُي ،كبٕ ٝعٞك أُِٞصبد أٌُ٤وٝثُٞٞ٤ع ٚ٤اٍزؼِٔذ ًلَُ٤
ػِٝ ٠عٞك اُزِٞس ٝآٌبٗ٤خ ؽلٝس ْٓبًَ ٕؾ٤خ ٜٓ٘بٝ .ثِزبُ ٠افزجود ٓ٤ب ٙاُْوة ُجٌزو٣ب
اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ ُ Total coliformزلٍ ػِ ٠اُزِٞس اُؾل٣ش.
أ .ػ٘ل اٍزؼٔبٍ ٛو٣وخ اُؼل االؽزٔبُ Most Probable Number (MPN) ٠كبٕ أهٖ٠
َٓزُِ ٟٞزِٞس :ٌٕٞ٣ MCLs
ال رزٞاعل ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞك ٠اًضو ٖٓ ٖٓ %10عيئ٤خ ٖٓ َِٓ 10اُؼ٘٤بد أُقزجوح
ك ٠اُْٜو
اما ًبٗذ اُؼ٘٤بد أُقزجوح فالٍ اُْٜو أهَ ٖٓ 20كال َٔ٣ؼ ثؤًضو ٖٓ ػٝ ٚ٘٤اؽلح
رؼطٗ ٠ز٤غخ ا٣غبث٤خ ثبَُ٘جخ ا٧عياء اُضالس أَُزؼِٔ ٖٓ ٚاُؼ٘٤خ ك ٠رول٣و .MPN
- 113 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
ال َٔ٣ؼ ثؤًضو ٖٓ ٖٓ % 5اُؼ٘٤بد رؼطٗ ٠ز٤غخ ا٣غبث٤خ ك ٠اُضالصخ اعياء
أَُزقلٓخ ٖٓ اُؼ٘٤خ ك ٠رول٣و ٝ MPNمُي اما ًبٗذ اُؼ٘٤بد أُقزجوح 20أ ٝأًضو
فالٍ اُْٜو.
ة .ػ٘ل اٍزؼٔبٍ ٛو٣وخ اُزوّ٤ؼ فالٍ ا٧ؿْ٤خ اُلبهىح ) Membrane filtration (MFكبٕ
أهَٖٓ ٠زُِ ٟٞزِٞس :ٌٕٞ٣
ٝ ؽلح ٝاؽلح ٖٓ ٝؽلاد رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔواد )Colony Forming Unit (CFU
ك ٖٓ َِٓ 100 ًَ ٠اُؼًٔ ٚ٘٤زُِ ٍٜٞـ٘٤بد أُقزجوح فالٍ ّٜو.
َٔ٣ ؼ ثؼ٘٤خ ٝاؽلح رؼطٝ 4 ٠ؽلاد ٖٓ ٝؽلاد رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔواد ( )CFUك٠
ٖٓ َِٓ 100اُؼ٘٤خ ٝمُي اما ًبٕ ػلك اُؼ٘٤بد أهَ ٖٓ 20ػ٘٤خ فالٍ اُْٜو.
اما ًبٗذ اُؼ٘٤بد أُقزجوح 20أ ٝأًضو فالٍ اُْٜو َٔ٣ؼ ٖٓ %5اُؼ٘٤بد رؼط4 ٠
ٝؽلاد ٖٓ ٝؽلاد رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔواد ( )CFUك ٖٓ َِٓ 100 ًَ ٠اُؼ. ٚ٘٤
ك ٠ػبّ 1985ػلُذ أُٞإلبد آ٧و٤ٌ٣خ ثؼل مُي ثؤٗ ٚال َٔ٣ؼ ثزٞاعل ثٌزو٣ب
اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ Total coliformك ٠أ ٟػ٤ٓ ٖٓ ٚ٘٤ب ٙاُْوة.
World Health Organization انخطٕغ االطززشبديخ نًُظًخ انصحخ انؼبنًيخ
Guidelines
٣غت فِ٤ٓ ٞب ٙاُْوة ٖٓ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ ٝ Fecal coliformمُي ػ٘ل افزجبه
ٖٓ َِٓ 100اُؼ٘٤خ ٝمُي ثبَُ٘جخ ٌَُ ٖٓبكه أُ٤بٍٞ ٙاء ًبٗذ رٞىع فالٍ ٓٞاٍ٤وأ ٝأ٣خ
ِ٤ٍٝخ أفوٓ ٟؼبُغخ أ ٝؿ٤و ٓؼبُغخ .أٓب ثبَُ٘جخ ُجٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ Total coliform
كبٜٗب ٣غت إٔ رٌ ٕٞؿبئجخ ك ٖٓ َِٓ 100 ٠اُؼ٘٤خ أُقزجوح أُؼبُغخ ٝأُٞىػخ فالٍ
ٓٞاٍ٤و َٔ٣ٝؼ ػو٤ٙب ثزٞاعل َٓزؼٔوربٕ ك .َِٓ 100 ًَ ٠ثبَُ٘جخ ُِٔ٤ب ٙاُز ٠ال رٞىع
فالٍ ٓٞاٍ٤و ٌٖٔ٣أَُبػ ثزٞاعل ٝ ٖٓ 10ؽلاد رٌ ٖ٣ٞأَُزؼٔواد كٖٓ َِٓ 100 ًَ ٠
اُؼ٘٤خ .رٌواه٣خ رٞاعل أػلاك ػبُ٤خ ٖٓ ثٌزو٣ب اُو٣ ُٕٞٞؼ٘ ٠اُؾبعخ آُٖ ٠له ثل٣ َ٣زٞكو
ك ٚ٤ؽٔب٣خ أًضو ٖٓ اُزِٞس .اُلَْ ك٠
- 114 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
رؾو٤ن فبٕ٤خ ؿ٤بة ثٌزوثب اُو ُٕٞٞاٌُِ٤خ ٝاُجواى٣خ كٖٓ ٠بكه ٓ٤ب ٙاُطٞاهٟء ٣ؼ٘ ٠اُؾبعخ
اُ ٠ؿِ٤بٕ أُبء.
ييبِ انشزة انًؼجأح Bottled Water
٣غت إٔ رٌ ٕٞعٞكح ٓ٤ب ٙاُْوة أُؼجؤح ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب ػِ ٠ا٧هَ ٓٔبصِخ ُغٞكح ٓ٤ب ٙاُْوة
اُـ٤و ٓؼجؤح .ثبالٙبكخ اُ ٠مُي٣ ،غت إٔ رؼبُظ أُ٤ب ٙأُؼجؤح ثؾ٤ش إٔ ٘ٔ٣غ ٗٔ ٞاٌُبئ٘بد
اُله٤وخ االٗزٜبى٣خ ٓضَ ثٌزو٣ب ٍ٤لٗٞٓٝبً ا٣وٞ٣عٞ٘٤ىا .Pseudomonas aeruginosa
- 115 -
ثوٗبٓظ أكاه ٙأُ٤بٝ ٙاُٖوف اُٖؾWWM-gtz ٠ ٌٓ٤وٝثُٞٞ٤ع٤ب أُ٤ب-ٙاُجوٗبٓظ اُضبُش
يؼبييز َٕػيخ ييبِ انزُشِ ٔاالطزغًبو
Recreational Water Quality Criteria
ٓؼب٤٣و ٗٞػ٤خ ٓ٤ب ٙاُز٘يٝ ٙاالٍزغٔبّ ( ٓالَٓخ اُغَْ رٔبٓب) رْ ٓواعؼزٜب ٖٓ هجَ ًٝبُخ
ؽٔب٣خ اُج٤ئخ آ٧و٤ٌ٣خ )(US EPAػبّ 1986اػزٔبكا ػِ ٠كهاٍبد أعو٣ذ ( Cabelli,
ُٝ .)1983; and Dufour, 1984ول أظٜود ٛن ٙاُلهاٍبد ػِٝ ٠عٞك ػالهخ ه٣ٞخ ثٖ٤
َٓز ٟٞثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞك ٠أُ٤بٝ ٙاٗزْبه آ٧واٗ ث ٖ٤اُنَ٣ ٖ٣زقلٓ ٕٞرِي أُ٤ب ٙك٠
االٍزؾٔبُّٝ .ول مًود ًٝبُخ ؽٔب٣خ اُج٤ئخ آ٧و٤ٌ٣خ اُلهاٍبد اُز ٠أظٜود ػالهخ أه ٟٞثٖ٤
ٓغٔٞػخ ثٌزو٣ب االٗز٤و enterococci ٠ًًٞٝػٖ ثٌزو٣ب اُو ُٕٞٞاُجواى٣خ فبٕخ ثبَُ٘جخ
ٓ٧واٗ اُو٘بح اٍُٞ ٚ٤ٜٔٚاء ثبَُ٘جخ َُِجبؽخ كٓ ٠جبٓ ٙبُؾخ أ٤ٓ ٝب ٙػنثخُٝ .ول ٝعل إٔ رِي
اُؼالهخ ث ٖ٤اٗزْبه آ٧واٗ ٝثٌزو٣ب ا٤ْ٣و٤ْ٣ب ًٞال Escherichia coli ٟثبُزؾل٣ل
ٓزَب٣ٝخ ٓغ اُؼالهخ ثٔغٔٞػخ ثٌزو٣ب اٗز٤و ٠ًًٞٝفبٕخ ثبَُ٘جخ ُِٔ٤ب ٙاُؼنثخ ٌ٤ُٝك ٠ؽبُخ
ٓ٤ب ٙاُجؾوُٝ .ول ؽلكد أُٞإلبد ُِٔ٤ب ٙاُؼنثخ ٝأُبُؾخ ثب٥ر:)EPA, 1986( ٠
فٗ حبنخ انًيبِ انؼذثخ :
ػلك ا٤ْ٣وّ٤ب ًٞالَ٣ ٟب ٟٝأ ٝأهَ ٖٓ َِٓ 100 / 126
ػلك ٓغٔٞػخ اٗز٤وَ٣ ٠ًًٞٝب ٟٝأ ٝأهَ ٖٓ َِٓ 100 /33
ك ٠ؽبُخ أُ٤ب ٙأُبُؾخ (اُجؾو) :ػلك ٓغٔٞػخ اٗز٤وَ٣ ٠ًًٞٝب ٟٝأ ٝأهَ ٖٓ 100 / 35
َِٓ.
ُٝول ؽلكد ٛو٣وخ اٌُْق ػٖ ًال اُلُ ٖ٤ِ٤ثبٍزقلاّ ا٧ؿْ٤خ اُلبهىح Membrane Filter
(076-85-4/600 EPA).
- 116 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
REFERENCES
Heterotrophic Plate Count
American Public Health Association. 1985. Standard Methods for the
Examination of Water and Wastewater, 16th ED.American Public
Health Association, Washington, D.C. 10005, 1267 pp.
Brazos, B.J. and O’Connor, J.T. 1988. Relative contributions of
regrowth and aftergrowth to the number of bacteria in a drinking water
distribution system, pp. 433-467 in Technology Conference
Proceedings, WQTC-15, Issues and Answers for Today’s Water
Quality Professional,American Water Works Association, Denver,
Colorado.
Buck, J.D. 1979. The plate count in aquatic microbiology. Pp.19-28 in
Costerton, J.W. and Colwell, R.R. (editors), Native Aquatic Bacteria:
Enumeration, Activity, and Ecology, ASTM STP 695, American
Society for Testing and Materials, Philadelphia, PA.
Buck, J.D. and Cleverdon, R.C. 1960. The spread plate as a method for
the enumeration of marine bacteria. Limnology and Oceanography 5:
78-80.
Camper, A.K., LeChevallier, M.W., Broadway, S.C., and
McFeter, G.A. 1986. Bacteria associated with granular activated carbon
particles in drinking water. Applied and
Environmental Microbiology 52: 434-438.
Clark, D.S. 1971. Studies on the surface plate method of counting
bacteria. Canadian Journal of Microbiology 17: 943-946.
Colbourne, J.S. 1985. Materials usage and their effects on the
microbiological quality of water supplies. Journal of Applied
Microbiology 59:47S-59S, Symposium Supplement.
Donlan, R.M. and Pipes, W.O. 1987. Pipewall biofilm in Drinking
water mains.pp. 436-660 in Technology Conferenc Proceed-ings.
- 117 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
WQIC-14. 1986, Advances in Water Analysis and Treatment.
American Water Works Association, Denver, Colorado.
Fiksdal, L., Vik, E.A., Mills, A., and Staley, J.T. 1982. Nonstard
methods for enumerating bacteria in drinking water. Jour. American
Water Works Association 74:313-
318.
Fronk-Leist, C.A. and Love, O.T.,jr. 1984. Evaluating the quality of
water treated by redwood slat tower aerators. pp, 253-264 in
Technology Conference Pro-ceedings, WQTC-11, 1983, Water Quality
and Treatment: Advances in Laboratory Technology, American Water
Works Association, Denver, Colorado.
Fujioka, R., Kungskulniti, N., and Nakasone, S. 1986.
Evaluation of the presence-absence test for coliforms and the
membrane filtration method for heterotrophic bacteria. Pp. 271-283, in
Technology Conference Proceedings, WQTC-13, 1985, Advances in
Water Analysis and Treatment, American Water Works Association,
Denver, Colorado.
Geldreich, E.E. 1974. Is the total counts necessary? Pp. VII-1-VII-8 in
Technology Conference Proceedings. WQTC- 1973, Water Quality,
American Water Works Association, Denver, Colorado.
Geldreich, E.E. 1988. Coliform non-compliance nightmares in water
supply distribution systems. Pp. 55-74. in WaterQuality: A Realistic
Prespective. Seminar/Workshop, Ann Arbor, Michigan, February,
1988. Sponsored by The Univ. of Michigan College of Engineering,
Michigan Section of the American Water Works Association, Michigan
Water Pollution Control Association and Michigan Department of
Public Health.
Gibbs, R.A. and Hayes, C.R. 1988. The use of R2A medium and the
spread plate method for the enumeration of the heterotrophic bacteria in
drinking water. Letters in Applied Microbiology 6: 19-21.
Goulder, R. 1976. Evaluation of media for counting viable bacteria in
estuaries.Journal of Applied Bacteriology 41: 351-355.
Green, B.L., Taylor R.H., and Geldreich, E.E. 1982. The SPC Sampler
a simple procedure for monitoring the bacteriologic quality of water.
pp. 125-133 in Technology
- 118 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
Conference Proceedings, wQTC-9, 1981, Advances in Laboratory
Techniques for Quality Control, American Water Works Association,
Denver, Colorado.
Hutchinson, M. and Ridgway, J.W. 1977. Microbiological aspects of
drinking water . pp. 179-218 in Skinner, F.A.and Shewan, J.M.
(editors), Aquatic Microbiology, Society for Applied Bacteriology
Symposium Series No. 6, Academic Press, London, New York, San
Francisco.
Klein, D.A. and Wu, S. 1974. Stress: a factor to be considered in
heterotrophic microorganisms enumeration from aquatic environments.
Applied Microbiology 27: 427-431.
Koch, R. 1912. Uber die neuen Untersuchungsmethoden Nachweis der
Microkosmen in Roden, Luft und Wasser,
Rerinted in Ges. Werke von R. Koch 1:274-284. Berlin.
LeChevallier, M.W., Seidler, R.J., and Evans, T.M. 1980.Enumeration
and characterization of standard plate count bacteria in chlorinated and
raw water supplies. Applied and Environmental Microbiology 40: 922-
930.
LeChevallier, M.W., Babcock, T.M., and Lee, R.G. 1987.Examination
and characterization of distribution system biofilms. Applied and
Environmental Microbiology 53:2714-2724.
LeChevallier, M.W., Cawthon, C.D., and Lee, R.G. 1988.Inactivation
of biofilm bacteria. Applied and Environ-mental Microbiology 54:
2492-2499.
Lombardo, L.R., West, P.R., and Holbrook, J.L. 1986. A Comparison
of various media and incubation temperatures used in the heterotrophic
plate count analysis. Pp. 251-270 in Technology Conference
Proceeding, WQTC-13, 1985, Advances in Water Analysis and
Treatment, American Water Works Association, Denver, Colorado.
McLeod, B.W. and Zimmerman, J.A. 1987. Selected effects on
distribution water quality as a result of conversion to chloramines. Pp.
619-636 in Technology Conference Proceedings, WQTC-14, 1986,
Advances in Water Analysis and Treatment, American Water Works
Association, Denver, Colorado.
- 119 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
Maul, A., Block, J.C., and El-Shaarawi, A.H. 1985. Statistical approach
fpr comparison between methods of bacterial enumeration in drinking
water. Journal of Microbiological Methods 4: 67-77.
Maul, A., El-Shaarawi, A.H., and Block, J.C. 1985a. Hetero-trophic
bacteria in water distribution systems. I. Spatial and temporal variation.
The Science of the Total Environment 44: 201-214.
Maul, A., El-Shaarawi, A.H., and Block, J.C. 1985b. Heterotrophic
bacteria in water distribution systems. II. Sampling design for
monitoring. The Science of the Total Environment 44: 215-224.
McNew, G.L. 1938. Dispersion and growth of bacterial cells suspended
in agar. Phytopathology 28: 387-401.
Means, E.G., Hanami, L., Ridgway, H.F., and Olson, B.H. 1981.
Evaluating mediums and plating techniques for enumerating bacteria in
water distribution systems. Jour.
American Water Works Association 73: 585-590.
Nagy, L.A. and Olson, B.H. 1986. Occurrence and significance of
bacteria, fungi and yeasts associated with distribution pipe surfaces. Pp.
213-238 in Technology Conference Proceedings. WQTC-14, 1985,
Advances in Water Analysis and Treatment American Water Works
Association, Denver, Colorado.
Olson, B.H. and Hanami, L. 1981. Seasonal variation of bacterial
populations in water distribution systems. Pp. 137-150 in Technology
Conference Proceedings, WQTC-8, 1980. Advances in Laboratory
Technniques for Quality Control, American Water Works Association,
Denver, Colorado.
Olson, B.H. and Nagy, L.A. 1984. Microbiology of potable water.
Advances in Applied Microbiology30: 73-132.
Prescott, S.C., Winslow, C-E.A., and McCrady, M. 1950.Water
Bacteriology, 6th edition, John Wiley and Sons, Inc., New York. 368
pp.Reasoner, D.J. and Geldreich, E.E. 1980. Significance of
pigmented bacteria in water supplies. Pp. 187-196 in Technology
Conference Proceedings, WQTC-7, 1979, Advances in Laboratory
Techniques for Quality Control, American Water Works Association,
Denver, Colorado.
- 120 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
Reasoner, D.J. and Geldreich, E.E. 1979. A new medium for the
enumeration and subculture of bacteria from potable water. Abstract N
7, p. 180, Abstracts of the Annual Meeting of the American Society for
Microbiology, American Society for Microbiology, Eashington, D.C.
Reasoner, D.J. and Geldreich, E.E. 1985. A new medium for the
enumeration and subculture of bacteria from potable water. Applied
Environmental Microbiology 49: 1-7.
Reasoner, D.J., Blannon, J.C., and Geldreich, E.E. 1987.
Microbiological characteristics of third faucet point-of-use devices.
Journal American Water Works Association 79: 59- 66.
Reasoner, D.J., Blannon, J.C., Geldreich, E.E., and Barnick, J. 1989.
Non-photosynthetic pigmented bacteria in a potable water treatment
and distribution system. Applied and Environmental Microbiology 55:
912-921.
Ridgway, H.F., Kelly, A., Justice, C., and Olson, B.H. 1983. Microbial
fouling of reverse osmosis membranes used in advanced wastewater
treatment tech-nology: chemical, bacteriological, and ultrastructural
analyses. Applied and Environmental Microbiology 45: 1066-1084.
Ridgway, H.F., Justice, C.A., Whittaker, C., Argo, D.G., and Olson,
B.H. 1984. Biofilm fouling of RO membranes-its nature and effect on
treatment of water for reuse. Jour.
American Water Works Association 76: 94-102.
Ridgway, J.W. 1978. The role of plate counts in the Surveillance of
potable water. Paper No.3 in Bacteriological problems in Water
Supply. A Water Research Seminar,May 18, 1978, Madmenham
Laboratory, Henley Road, Madenham, P.O 16, Marlow, Bucks, SL7
2HD.
Roszak, D.B. and Colwell, R.R. 1987. Survival strategies of bacteria in
the natural environment. Microbiological Reviews 51: 365-379.
Scoenen, D. 1986. Microbial growth due to materials used in drinking
water systems. Pp. 627-647 in Rehm, H.J and Reed, G. (editors),
Biotechnology (Volume 8), VCH Verlagsgellschaft, Weinheim,
Germany.
- 121 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
Silley, P. 1985. Evaluation of total-count samples against the
traditional pour plate method for enumeration of total viable counts of
bacteria in a procees wate system.
Letters in Applied Microbiology 1:41-43.
Stapert, E.M., Sokolski, W.T., and Northam, J.I. 1962. The factor of
temperature in the better recovery of bacteria from water by filtration.
Canadian Journal of Microb-iology 8: 809-810.
Stetzenbach, L.D., Kelley, L.M., and Sinclair, N.A. 1986. Isoltion,
identification And growth of well-water bacteria. Groundwater 24: 6-
10.
Taylor, R.H. and Geldreich, E.E. 1979. A new membrane filter
procedure for bacterial counts in potable water and swimming pool
samples. Jour American Water Works Association 71: 402-405.
Taylor, R.H., Allen, M.J., and Geldreich, E.E. 1983. Standard plate
count: a comparison of pour plate and spread plate methods. Jour
American Water Works Association 75: 35- 37.
United State Environmental Protection Agency 1975. Interim Primary
Drinking Water Standards. Federal Register 40: 11990-11996,
Washington,D.C.
VanSoestbergen, A.A. and Lee, C.H. 1969. Pour plates or Streak
plates. Applied Microbiology 18: 1092-1093.
Water Research Center. 1976, Deterioration of bacteriological quality
of water during distribution. Notes on Water Research No. 6, October.
1. References on Poured Plate Method
Breed, R. S. & Dotterer, W. D. 1916. The number of colonies allowable
on satisfactory agar plates. Tech. Bull. 53, New York Agricultural
Experiment Sta. Butterfield, C.T. 1933. The selection of a dilution water
for Bacteriol-ogical examinations. J. Bacteriol. 23: 355; Pub. Health Rep.
48: 681.
- 122 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
Archambault, J., Curot, J. & McCrady, M.H. 1937. The need of uniformity
of conditions for counting plates (with suggestions for a standard colony
counter). Amer. J. Pub. Health 27: 809.
Richard, O.W. & Heun, P.C. 1945. An improved dark-field Quebec colony
counter. J. Milk Technol. 8: 253.
Berry, J.M., Mcneill, D.A. & Witter, L.D. 1969. Effect of
delays in pourplating on bacterial counts. J. DairySci. 52:
1456.
Geldreich, E.E., Nash, H.D., Reasoner, D.J. & Taylor, R.H. 1972. The
necessity of controlling bacterial populations in potable waters:
Community water supply. J. Amer. Water Works Assoc. 64: 596.
Geldreich, E.E.1973. Is the total count necessary? Proc. 1st Annu. AWWA
Water Quality Technol. Conf. Dec. 3-4, 1973. Cincinnati, Ohio. P. VII-1.
American Water Works
Assoc., Denver, Colo.
Ginsburg, W. 1973. Improved total count techniques. Proc. 1st Annu.
AWWA Water Quality Technol. Conf. Dec. 3-4, 1973. Cincinnati, Ohio.
P. VIII-1. American Water Works Assoc., Denver, Colo.
Dutka, B.J., Chau, A.S.Y.& Coburn, J. 1974. Relationship of heterotrophic
bacterial indicators of water pollution and fecal sterols. Water Res. 8: 1047.
Klein, D.A. & Wu, S. 1974. Stress : a factor to be considered in
heterotrophic microorganism enumeration from aquatic environments.
Appl. Microbiol. 37:429.
Geldreich, E.E., Nash, H.D., Reasoner, D.J. & Taylor, R.H. 1975. The
necessity for controlling bacterial populations in potable waters: Bottled
water and emergency water supplies. J. Amer. Water Works Assoc. 67:
117.
Bell, C.r., Holder-Franklin, M.A. & Franklin, M. 1980. Heterotrophic
bacteria in two Canadian rivers.-I. Seasonal
variation in the predominant bacterial populations. Water
Res. 12: 449.
Means, E.,G., Hanami, L., Ridgway, G.F.& Olson, B.H. 1981. Evaluating
medium and plating techniques for
Enumerating bacteria in water distribution systems. J. Amer. Water Works
Assoc. 73:585.
- 123 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
American Public Health Association. 1993. Standard Methods for the
Examination of Dairy Products. 16th ed. Amrican Public Health Assoc.,
Washington, D.C.
Reasoner. D.J. & Geldreich, E.E. 1985. A new medium for the enumeration
and subculture of bacteria from potable water. Appl. Environ. Microbiol.
49:1.
- 124 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
References on Spread Plate Method
Buck, J.D. & Cleverdon, R.C. 1960. The spread plate as a method for the
enumeration of marine bacteria. Limnol. Oceanogr. 5 : 78.
Clark, D.S. 1967. Comparison of pour and surface plate methods for
determination of bacterial counts. Can. J. Microbiol. 13: 1409.
Van Soestbergan, A.A. & Lee, C.H. 1969. Pour plates or streak plates.
Appl. Microbiol. 18: 1092.
Clark, D.S. 1971. Studies on the surface plate method of counting bacteria.
Can. J. Microbiol. 17: 943.
Gilchrist, J.E., Campbell, J.E., Donnelly, C.B., Peller, J.T.& Delaney, J.M.
1973. Spiral plate method for bacterial determination> Appl. Microbiol.
25: 244.
Ptak, D.M. & Ginsburg, W. 1976. Pour plate vs. streak plate method. Proc.
4th Annu. AWWA Water Quality Technol. Cof., Dec. 6-7, 1976. San
Diego, Cal., p. 2B-5. American Water Works Assoc., Denver, Colo.
Dutka, B.J., ed. 1978. Methods for microbiological analysis of waters,
wastewaters and sediments. Island waters directorate, Scientific Operation
Div., Canada Center for Inland Waters, Burlington, Ont.
Kaper, J.B., Kills, A.L. & Colwell, R. R. 1978. Evaluation of the accuracy
and precision of enumerating aerobic heterotrophs in water samples by the
spread method. Appl. Environ. Microbiol. 35: 756.
Young, M. 1979. A modified spread plate technique for the determination
of concentrations of viable heterotrophic bacteria. STP 673:41-51,
American Soc. Testing & Materials, Philadelphia, Pa.
Geldreich, E.E. 1981. Current status of microbiological water quality
criteria. ASM News 47: 23.
Taylor, R.H., Allen, M.J. & Geldreich, E.E. 1981. Standard plate count: A
comparison of pour plate and spread plate methods. Proc. 9th Annu.
AWWA Water Quality Technol. Conf., Dec. 6-9, 1981. Seattle, Eash., p.
223. American Water Works Assoc. Denver, Colo.
- 125 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
References on Determination of total count by membrane filter
method
Clark, H.F., Geldreich, E.E., Jeter, H.I., & Kabler, P.W. 1951.
The membrane filter in sanitary bacteriology. Pub. Health Rep.
66: 951.
Stopert, E.M., Sokoski, W.T. & Northam, J.T. 1962. The factor of
temperature in the better recovery of bacteria freom water by
filtration. Can. J. Microbiol. 8: 809.
Taylor, R.H. & Geldreich, E.E. 1979. A new membrane filter
procedure for bacterial counts in potable water and swimming
pool samples. J. Amer. Water Works Assoc. 71: 402.
Clark, J.A. 1980. The influence of uncreasing number of non-
indicator organisms upon the detection of indicator organisms by
the membrane filter and presence-absence tests. Can. J. Microbiol.
20: 827.
Dutka, B.J. ed. 1981. Membrane filtration, Applications,
Techniques, and Problems. Marcel Dekker, Inc., New York N.Y.
and Basel, Swizerland.
Hoadley, A.W. 1981. Effect of injury on the recovery of bacteria on
membrane filters. In B.J. Dutka, ed. Membrane Filtration, Applications,
Techniques, and Problems. P. 413. Marcel Dekker, Inc., New York
N.Y. and Basel, Swizerland.
References on Epifluorescence microscopic method
Hobbie, J.E., Daley, R.J. & Jasper, S. 1977. Use of nuclepore filters for
counting bacteria by fluorescence microscopy. Appl.
Environ.Microbiol. 33: 1225.
Sierack, M.E., Joenson, P.W. & Sieburth, J. McH. 1985. Detection,
enumeration, and sizing of planktonic bacteria by image-analyzed
epifluorescence microscopy. Appl, Environ, Microbiol. 49: 799.
American Society For Testing And Materials. 1987. Standard test method
for enumeration of aquatic bacteria by epifluorescence microscopy
- 126 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
counting procedure. ASTM D4455-85. Annual Book of ASTM Standards,
Vol. 11.02, Water. American Soc. Testing & Materials, Philadelohia, Pa.
References on MPN method for coliform group.
Sierman, V.B.D. 1967. A guide to the identification of the genera of
bacteria. Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
Geldreich, E.E. 1975. Handbook for evaluating water bacteriological
laboratories. 2nd ed. EPA-670/9-75-006. US Environmental Protection
Agency, Cincinnati, Ohio.
Evans, T.M., Waarvick, C.E., Seidler, R.J. & LeChevallier, M,W. 1981.
Failure of most probable number technique to detect coliforms in drinking
water and raw water supplies. Appl. Environ. Microbiol. 41: 130.
Seidler, R.J., Evans, T.M., Kaufman, J.R. , Waarvick, C.E. &
LeChevallier, M.W. 1981. Limitations of standard coliform enumeration
techniques. J. Amer. Water Works Assoc. 73: 538.
References on Coliform determination by MPN method:
Woodward, R.L. 1957. How probable is the most probable number? J.
Amer\. Water Works Assoc. 49: 1060.
McCarthy, J.A. , Thomas, H.A. & Delaney, J.E. 1958. Evaluation of the
reliability of coliform density tests. Amer. J. Pub. Health 48: 1628.
US. Environmental Protection Agency, 1989. National primary drinking
water regulations: analytical techniques: coliform bacteria; final rule.
Federal Register 54 (35) 29998 (July 17, 1989).
De Man, J.C. 1977. MPN tables for more than one test. European J. Appl.
Microbiol. 4: 307.
- 127 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
References on P/A test for coliform
Clark, J.A. & VLassoff, L.T. 1973. Relationships among pollution
indicator bacteria isolated from raw water and distribution systems by the
presence-absence (P-A) test. Health Lab. Sci. 10:163.
Clark, J.A. 1980. The influence of increasing number of nonindicator
organisms upon the detection of inducator organisms by the membrane
filter and presence-absence tests. Can. J. Microbiol., 26:827.
Clark, J.A., Burger, C.A. & Sabatinos, L.E. 1982. Characterization of
indicator bacteria in municipal raw water., drinking water and new main
water samples. Can. J. Microbiol. 28: 1002.
Jacobs, N.J., Zeigler, W.L., Reed, F.C., Stukel, T.A. & Rice, E.W. 1986.
Comparison of membrane filter, multiple-fermentation-tube, and presence-
absence techniques for detection total coliform in community weater
systems. Appl. Environ. Microbiol. 51:1007.
Reice, E.W., Geldreich, E.E. & Read, E.J. 1989. The presence-absence
coliform test for monitoring drinking water quality. Publ. Health Rep. 104:
54.
References on determination of fecal coliform by A1 medium:
Geldreich, E. E., Clark, H.F., Kabler, P.W., Hoff, C.B., & Bordner, R.H.
1958. The coliform group. II,. Reactions in EC medium at 45o C. Appl.
Microbiol. 6: 347.
Geldreich, E.E., Bordner, R.H., Hoff, C.B., Clark, H.F. & Kabler, P.W.
1962. Type distribution of coliform bacteria in the feces of warm blooded
animals. J. Water Pollut. Control Fed. 34: 295.
Geldreich, E.E. 1966. Sanitary significance of fecal coliforms in the
environment. FWPCA Publ. WP-20-3 (Nov. ) U.S. Dep. Interior.
Washington, D.C.
Andrews, W.H. & Presnell, M.W. 1972. Rapid recovery of Escherichia
coli from estuarine water. Appl. Microbiol. 23: 521.
- 128 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
Olson, B.H. 1978. Enhanced accuracy of coliform testing in seawater by a
modification of the most-probable number method. Appl. Microbiol. 36:
438.
Strandridge, J.H. & Delfino, J.J. 1981. A-1 medium: Alternative technique
for fecal coliform organism enumeration in chlorinated wastewaters. Appl.
Environ. Microbiol. 42: 918.
Trferences on MF Procedure for Coliform Group
Clark, H.F., Geldreich, E.E., Jeter, H.I. & Kabler, P.W. 1951. The
membrane filter in sanitary bacterialogy. Publ. Health Rep. 66: 951.
Kabler, P.W. 1954. Water examination by membrane filter and MPN
procedures. Amer. J.Pub. Health 44: 379.
McCarthy, J.A., Delaney, J.E. & Grasso, R.J. 1961. Measuring coliforms
in water. Water,Water Sewage Works `08: 238.
Lin, S. 1973. Evaluation of coliform test for chlorinated secondary
effluents. J. Water Pollut. Cpntrol Fed., 45: 498. Environmental
Protection Agency (EPA). 1986. Test Methods for Escherichia coli and
Enterococci in Water by the Membrane Filter Proced-ure. Environmental
Monitoring and Support Laboratory, EPA 600/4-85/076, Cincinnati, OH.
Bellamy, W.D., Silverman, G.P., Hendricks, D.W. and Logsdon, G.S.
1985. Removing Girdia cysts with Slow Sand Filtration. J. Am. Water
Works Assoc., 77:52-60.
Lin, S.D. 1985. Giardia lamblia and Water Supply. J. Am. Water Works
Assoc., 77:40-47.
Sterling, C.R. 1987. Cryptosporidium, A New Potential Waterborne
Pathogen, Annual Meeting of the ASM.
Schardinger 1982. Uber das Vorkommen Gahrung Errengender Spaltpilze
im Trinkwasser und ihre Bedeutung fur die Hygienische Beurthelung
Desselben, Wien. Kiln. Wochschr. 5:403-405.
Dutka, B.J. (1975). Coliforms are an Inadequate Index of Water Quality. J.
Environ. Health 36:39-46.
Krieg, N. 1984. Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology, Vol. 1,
Williams and Wilkins, Baltimore, USA.
Escherich, T. 1985). Die Darmbakterien des Naugen-borenen und
Sauglings. Med: 515-547.
- 129 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
World Health Organization (WHO). (1985).Guidelines for Drinking Water
Quality, Vol. 1, Geneva.
McFeters, G.A., et al., 1974. Comparative Survival of Indicator Bacteria
and Enteric Pathogens in Well Water. Appl. Environ. Microbiol. 27:823-
829.
Muller, G. 1964. What are the Lesson of the Hamburg Flood for Drinking
Water Hygiene Standards? Arch. Hyg. Bakteriol. 148:321-326.
Seligman, R., and Reitler, R. 1965. Enteropathogens in Water with Low
Escherichia coli Titers. J. Am. Water Works Assoc. 57:1572-1574.
Eijkman, C. 1904. Die Garungsprobe bei 46o als Hilfsmittel bei der
Trinkwasseruntersuchung. Centralbh. Bakteriol. Abt. I, Orig. 37:742-752.
Dufour, A., Strickland, E.H. and Cabelli, V.J. 1985. Membrane Filter
Method for Enumerating Escherichia coli. Appl. Environ. Microbiol.,
41:1152-1158.
Feng, P.C.S. and Hartman, P.A. 1982. Fluorogenic Assays for Immediate
Confirmation of Escherichia coli. Appl. Environ. Microbiol., 43:1320-
1329.
Petzel, J.P., and Hartman, P.A. 1985. Monesin-Based Medium for
Determination of Total Gram-Negative Bacteria and Escherichia coli.
Appl. Environ. Microbiol., 49:925-933.
Freier, T.A., and Hartman, P.A. 1987. Improved Membrane Filtration
Media for Enumeration of Total Coliform and Escherichia coli from
Sewage and Surface Waters. Appl. Environ. Microbiol., 53:1246-1250.
Prescott, S.C., Winslow, A.C., and Macrady, M.H. 1946. Water
Bacteriology. P.207-212, John Wiley & Sons, New York.
Levin, M.A., Fischer, J.R., and Cabelli, V.J. 1975. Membrane Filter
Technique for Enumeration of Enterococci in marine Waters. Appl.
Microbiol., 30:66-71.
Mossel, D.A.A. et al. 1973. Microbiological Quality Assurance for
Weaning Formula in: The Microbiological Safety of Food. London.
Academic Press, pp.70-76.
Cabelli, V.J. 1083. Health Effects Criteria for Marine Recreational Water:
U.S. Environmental Protection Agency, Cincinnati, OH, EPA-600/1-80-
031.
- 130 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
Dufour, A.P. 1984. Health Effects Criteria for Fresh Recreational Waters.
U.S. Environmental Protection Agency, Cincinnati, OH, EPA 600/1-84-
004.
EPA. 1986. Ambient Water Quality for Bacteria. U.S. Environmental
Protection Agency, Cincinnati, OH, EPA 440/5-84-002.
EPA 600/4-85-076. Test Methods for Escherichia coli and Enterococci in
Water by the Membrane Filter Procedure, U.S. Environmental Protection
Agency, Cincinnati, OH, EPA 600/4-85-076.
American Public Health Association (1998). Standard Methods for the
Examination of Water and Wastewater. 20th Edition.
Bordner, R. and Winter, J. 1978). Microbiological Methods for
Monitoring the Environment: ater and Wastes. U.S. Environmental
Protection Agency, Cincinnati, OH, EPA 600/8-78-017.
Vial, J. 1977. Bacteriological Analysis of Drinking Water. Commission of
the Europe Communities, Luxembourg.
McFeter, G.A., Cameron, S.C., and LeChevallier, M.W. 1982. Influence
of Diluents, Media and Membrane Filters on the Detection of Injured
Waterborne Coliform Bacteria. Appl. Envirpn. Microbiol. 43:97-103.
Evans, T.M., Seidler, R.J., and LeChevallier, M.W. 1981. Impact of
Verification Media and Resuscitation on Accuracy of the Membrane Filter
Total Coliform Enumeration Technique. Appl. Microbiol. 41:1144-1151.
LeChevallier, M.W., Cameron, S.C., and McFeter. G.A. 1983. New
Medium for Improved Recovery of Coliform Bacteria from Drinking
Water. Appl. Environ. Microbiom. 45:484-492.
Chapman, G.H. 1947. A superior Culture Medium for the Enumeration
and Differentiation of Coliforms. J. Bacteriol. 53:504.
LeChevallier, M.W., Jakanoski, P.E., Camper, A.K. and McFeter, G.A.
1984. Evaluation of m-T7 Agar as a Fecal Coliform Medium. Appl.
Environ. Microbiol. 48: 371-375.
Delaney, J.F., McCarthy, J.A. and Grasso, R.J. 1962. Measurement of
E.coli Type 1 by the Membrane Filter. Water Sewage Works 109:288-294.
Dufour, A.P., Strickland, E.H. and Cabelli, V.J. 1981. Membrane Filter
Method for Enumerating Escherichia coli. Appl. Environ. Microbiol.
41:1152-1158.
- 131 -
WWM-gtz ٠اُٖوف اُٖؾٝ ٙب٤ُٔ اٙثوٗبٓظ أكاه اُجوٗبٓظ اُضبُش-ٙب٤ُٔب ا٤عُٞٞ٤ثٌٝو٤ٓ
Freier, T.A. and Hartman, P.A. 1987. Improved Membrane Filtration
Media for Enumeration of Total Coliforms and Escherichia coli from
Sewage and Surface Waters. Appl. Environ. Microbiol. 53:1246-1250.
Levin, M.A., Fischer, J.R. and Cabelli, V.J. 1975. Membrane Filter
Techniq-ue for Enumeration of Enterococci in Marine Waters. Appl.
Environ. Microbiol. 30:66-71.
Levin, M.A., and Cabelli, V.J. 1972. Membrane Filter Technique for
Enumeration of Pseudomonas aeruginosa. Appl. Environ. Microbiol.
24:864-870.
- 132 -
S-ar putea să vă placă și
- Administrative ProfessionsDocument263 paginiAdministrative ProfessionsHadi HajjÎncă nu există evaluări
- Administrative Support OccupationsDocument85 paginiAdministrative Support OccupationsHadi HajjÎncă nu există evaluări
- (2008 - 2011) M .Aziz Akhannouch: Skhirat, Le 30 Octobre 2011Document26 pagini(2008 - 2011) M .Aziz Akhannouch: Skhirat, Le 30 Octobre 2011partirniÎncă nu există evaluări
- 50 Raz Mofaqiat PDFDocument24 pagini50 Raz Mofaqiat PDFj8gh9sffqcÎncă nu există evaluări
- 259-نص المقال-447-1-10-20230629Document15 pagini259-نص المقال-447-1-10-20230629mohsinawan1388Încă nu există evaluări
- Arabic Hell 7 YouthsDocument15 paginiArabic Hell 7 YouthsEternalAgonyÎncă nu există evaluări
- Ali (A.s) and The Philosophy of The DivineDocument90 paginiAli (A.s) and The Philosophy of The DivineS⸫Ḥ⸫R100% (1)
- Fluid Mechanics Mohamed HashimDocument242 paginiFluid Mechanics Mohamed HashimAbdelsattarÎncă nu există evaluări
- Full GSM Course in Arabic PDFDocument205 paginiFull GSM Course in Arabic PDFMohamed Ibrahim25% (4)
- October 2018: ResearchDocument19 paginiOctober 2018: ResearchZahraa AlbahnasawyÎncă nu există evaluări
- الاختصاص في منازعات الجنسيةDocument29 paginiالاختصاص في منازعات الجنسيةÂbdøü ÃbÎncă nu există evaluări
- Power SubstationsDocument36 paginiPower SubstationsAli RezaeipourÎncă nu există evaluări
- QJSD - Volume 5 - Issue 15 - Page 138-174Document40 paginiQJSD - Volume 5 - Issue 15 - Page 138-174Jamy JoonÎncă nu există evaluări
- Arabic To Hell and Back Dr. Maurice S. Rawlings Documentary On Near Death ExperiencesDocument27 paginiArabic To Hell and Back Dr. Maurice S. Rawlings Documentary On Near Death ExperiencesDrMauriceSRawlingsÎncă nu există evaluări
- Salnamat TrablusDocument14 paginiSalnamat Trablusadhm7Încă nu există evaluări
- 186 337 1 10 20200804Document12 pagini186 337 1 10 20200804مُحمَّد المَاجِريÎncă nu există evaluări
- Financial ProblemDocument15 paginiFinancial ProblemMohammad Navaie MehrÎncă nu există evaluări
- الفطرياتDocument82 paginiالفطرياتKhaled AbdelfattahÎncă nu există evaluări
- Full GSM Course PDFDocument205 paginiFull GSM Course PDFMohamedRagabÎncă nu există evaluări
- NematodaDocument42 paginiNematodaQueen BeeÎncă nu există evaluări
- ARMIN - Volume 21 - Issue 2 - Pages 96-134Document39 paginiARMIN - Volume 21 - Issue 2 - Pages 96-134sihemrahiliÎncă nu există evaluări
- تاريــــخ الهندســــــــــة و التكنولوجيا 1 اخرDocument77 paginiتاريــــخ الهندســــــــــة و التكنولوجيا 1 اخرdarkh919Încă nu există evaluări
- Agricultural Marketing ChallengesDocument11 paginiAgricultural Marketing ChallengesSawsan Ibrahim د. سوسن ابراهيمÎncă nu există evaluări
- PDF Manual de Consejeria Prematrimonial Compress CopiarDocument68 paginiPDF Manual de Consejeria Prematrimonial Compress CopiarYonner OllarvesÎncă nu există evaluări
- Safety Rules For The Construction and Installation of Lifts-Electric LiftsDocument236 paginiSafety Rules For The Construction and Installation of Lifts-Electric LiftsroozbehÎncă nu există evaluări
- حيدر صبري - التنافس العثماني الفارسي على العراق وأثره على الأوَضاع العامة في المجتمع العراقي 1534-1779Document20 paginiحيدر صبري - التنافس العثماني الفارسي على العراق وأثره على الأوَضاع العامة في المجتمع العراقي 1534-1779Kamaran KurdewarÎncă nu există evaluări
- بٍٍؼٌا دبسارذٌا خٍدِ - حِ (ٌٍٍٍٕٓا خؼِبخ 10) ، (ع 38 - 2) 1 / 1 / 8 201 َ 6228 - GCNU Journal ISSN: 1858Document25 paginiبٍٍؼٌا دبسارذٌا خٍدِ - حِ (ٌٍٍٍٕٓا خؼِبخ 10) ، (ع 38 - 2) 1 / 1 / 8 201 َ 6228 - GCNU Journal ISSN: 1858Halime HalimeÎncă nu există evaluări
- Human Capital in A Knowledge Economy Part 2Document565 paginiHuman Capital in A Knowledge Economy Part 2Bassem ElZouhbiÎncă nu există evaluări
- مجاهدDocument32 paginiمجاهدzakiÎncă nu există evaluări
- 6 Da 3 BD 43 e 143 B 8 A 9Document21 pagini6 Da 3 BD 43 e 143 B 8 A 9alo ibrahemÎncă nu există evaluări
- Prof DR Akram ICUDocument233 paginiProf DR Akram ICUramzi MohamedÎncă nu există evaluări
- الطبيعة القانونية للمحكمة الدستوريةDocument19 paginiالطبيعة القانونية للمحكمة الدستوريةام فراس زردومÎncă nu există evaluări
- Chest - DR Abo-ElAsrar - by El Azhar Medical Students 2012Document56 paginiChest - DR Abo-ElAsrar - by El Azhar Medical Students 2012Fatma HelalÎncă nu există evaluări
- 1737 RRR 28Document7 pagini1737 RRR 28mfhfhfÎncă nu există evaluări
- لقطة شاشة 2024-02-17 في 12.05.01 صDocument25 paginiلقطة شاشة 2024-02-17 في 12.05.01 صsuha2987nÎncă nu există evaluări
- Archive 2014Document348 paginiArchive 2014Arman MirzaeiÎncă nu există evaluări
- Cisco Packet Tracer Lab6Document10 paginiCisco Packet Tracer Lab6LuaÎncă nu există evaluări
- 167 61 204 1 10 20180303Document19 pagini167 61 204 1 10 20180303Njood KhalifahÎncă nu există evaluări
- 700 Hadith Bukhari BriefDocument83 pagini700 Hadith Bukhari Briefibrake4uÎncă nu există evaluări
- PDF Informe 3 de Evolucion Tecnologica CompressDocument12 paginiPDF Informe 3 de Evolucion Tecnologica Compressfjromero171982Încă nu există evaluări
- WWW Forexer MeDocument37 paginiWWW Forexer MeÀlï SAëédîÎncă nu există evaluări
- Curvas Huff 4Document19 paginiCurvas Huff 4Luis AragonÎncă nu există evaluări
- كورنرDocument18 paginiكورنرmohamed aliÎncă nu există evaluări
- Vietnamese textile companies licensing dataDocument2 paginiVietnamese textile companies licensing dataQuocHuynhÎncă nu există evaluări
- تفسير شروط الاعفاء من المسؤولية العقدية دراسة في القانون الانكليزيDocument49 paginiتفسير شروط الاعفاء من المسؤولية العقدية دراسة في القانون الانكليزيsirineghozzinefaaÎncă nu există evaluări
- PDF Resolucion Del Examen Parcial Final DLDocument9 paginiPDF Resolucion Del Examen Parcial Final DLKelvin SuarezÎncă nu există evaluări
- PDF CJR Psikologi Pendidikan Jho CompressDocument14 paginiPDF CJR Psikologi Pendidikan Jho CompressBagus SiahaanÎncă nu există evaluări
- Influence of Using Unsieved Sand on Concrete PropertiesDocument9 paginiInfluence of Using Unsieved Sand on Concrete PropertieszeekoÎncă nu există evaluări
- استراتيجية الحوكمة التشريعيةDocument20 paginiاستراتيجية الحوكمة التشريعيةahmed 92Încă nu există evaluări
- Understanding Traditional Medicine: Healing Practices of Ohth Lukghb TribeDocument24 paginiUnderstanding Traditional Medicine: Healing Practices of Ohth Lukghb TribeRanita Dwi PurnamaÎncă nu există evaluări
- PDF Penapisan Secara Mandiri DLDocument7 paginiPDF Penapisan Secara Mandiri DLDhinAr ChannelÎncă nu există evaluări
- #1 Ethan OximoxiDocument10 pagini#1 Ethan OximoxiMohamed AdelÎncă nu există evaluări
- 3 Small IntestineDocument49 pagini3 Small IntestinedrhydrogenÎncă nu există evaluări
- Untitled Fútbol AmateurDocument31 paginiUntitled Fútbol AmateurAlejandro RiosÎncă nu există evaluări
- Human Capital in A Knowledge Economy Part 1Document537 paginiHuman Capital in A Knowledge Economy Part 1Bassem ElZouhbiÎncă nu există evaluări
- Ap03 Aa4 Ev04 Ingles Elaboracion de Resumenes para Comprender Textos Basicos en Ingles PDFDocument4 paginiAp03 Aa4 Ev04 Ingles Elaboracion de Resumenes para Comprender Textos Basicos en Ingles PDFmarlon ayalaÎncă nu există evaluări
- تقييم الاداء البيئي درويشDocument17 paginiتقييم الاداء البيئي درويشOm ZanobaÎncă nu există evaluări
- CPAR-Quarter 1-Module 2 PDF Paintings PhiliDocument5 paginiCPAR-Quarter 1-Module 2 PDF Paintings Philialyssaashleybeltran43Încă nu există evaluări
- RO System Quotation 20m3/h 73% RecoveryDocument6 paginiRO System Quotation 20m3/h 73% Recoverytata_77Încă nu există evaluări
- Shock Chloro CalcDocument2 paginiShock Chloro Calctata_77Încă nu există evaluări
- DesignDocument3 paginiDesigntata_77Încă nu există evaluări
- Lecture 2. Water Quality ParametersDocument52 paginiLecture 2. Water Quality ParametersAbo-Khaled MohammedÎncă nu există evaluări
- 03 Lewabrane Manual System Design 03Document13 pagini03 Lewabrane Manual System Design 03zamijakaÎncă nu există evaluări
- Module 4 Annex Part 1 MKDocument95 paginiModule 4 Annex Part 1 MKtata_77Încă nu există evaluări
- Microbiology CourseDocument129 paginiMicrobiology Coursetata_77Încă nu există evaluări
- EPA WWT Factsheet - Ozone Disinfection 9-1999Document7 paginiEPA WWT Factsheet - Ozone Disinfection 9-1999kkdaÎncă nu există evaluări
- Water Microbiology Quality Assurance ProgramDocument74 paginiWater Microbiology Quality Assurance Programtata_77Încă nu există evaluări
- Water Sources and Potential Contamination of Taps and Water SystemsDocument26 paginiWater Sources and Potential Contamination of Taps and Water Systemstata_77Încă nu există evaluări
- EmulsionDocument8 paginiEmulsiontata_77Încă nu există evaluări
- Homogenizer: Standard Operating ProcedureDocument1 paginăHomogenizer: Standard Operating ProcedureDermedic phar este0% (1)
- Pseudomona in Hot TubsDocument2 paginiPseudomona in Hot Tubstata_77Încă nu există evaluări
- 03 Lewabrane Manual System Design 03Document13 pagini03 Lewabrane Manual System Design 03zamijakaÎncă nu există evaluări
- Determain SulphateDocument13 paginiDetermain SulphateNalita Aurelia AuritaÎncă nu există evaluări
- وجية جرجس جزء 1Document207 paginiوجية جرجس جزء 1Anonymous mghI7I7pÎncă nu există evaluări
- Water Quality MicrobiologyDocument56 paginiWater Quality MicrobiologyEva Pa'e OÎncă nu există evaluări
- Bromate Prove Ulr en 2016-01-06 HintDocument3 paginiBromate Prove Ulr en 2016-01-06 Hinttata_77Încă nu există evaluări
- Technical Service Bulletin: Procedure For Measuring Silt Density Index (SDI)Document3 paginiTechnical Service Bulletin: Procedure For Measuring Silt Density Index (SDI)JC PinoÎncă nu există evaluări
- CH Lori NationDocument11 paginiCH Lori NationihllhmÎncă nu există evaluări
- Cepacia From Respiratory Secretions of Patients With Cystic Fibrosis. J.Clin - Microbiol. 22 (1) 5-8Document1 paginăCepacia From Respiratory Secretions of Patients With Cystic Fibrosis. J.Clin - Microbiol. 22 (1) 5-8tata_77Încă nu există evaluări
- Calcium TestDocument7 paginiCalcium Testtata_77Încă nu există evaluări
- CH Lori NationDocument11 paginiCH Lori NationihllhmÎncă nu există evaluări
- Permeate Recycle Improves RO PerformanceDocument8 paginiPermeate Recycle Improves RO Performancetata_77Încă nu există evaluări
- Basics For Small Water Systems in Oregon: Storage Tank ChlorinationDocument2 paginiBasics For Small Water Systems in Oregon: Storage Tank Chlorinationtata_77Încă nu există evaluări
- Catalogue Absorption Chillers ENG FDocument80 paginiCatalogue Absorption Chillers ENG FBubai111100% (1)
- Technical Service Bulletin: Procedure For Measuring Silt Density Index (SDI)Document3 paginiTechnical Service Bulletin: Procedure For Measuring Silt Density Index (SDI)JC PinoÎncă nu există evaluări
- Chemical Additve CalculationDocument2 paginiChemical Additve Calculationtata_77Încă nu există evaluări
- Biocides For Disinfection and Storage of Hydranautics Membrane ElementsDocument6 paginiBiocides For Disinfection and Storage of Hydranautics Membrane Elementstata_77Încă nu există evaluări
- Cover Pages For BVPDocument8 paginiCover Pages For BVPAashish GauravÎncă nu există evaluări
- Bauters 2013Document85 paginiBauters 2013Ale LlerenaÎncă nu există evaluări
- ECDocument8 paginiECMiguel AndreiÎncă nu există evaluări
- Field 3ce Final MS Ch11Document16 paginiField 3ce Final MS Ch11Wirawan Adi Setya RÎncă nu există evaluări
- Ensci AssDocument5 paginiEnsci AssRafael pastranaÎncă nu există evaluări
- Cursul 3 - IPA - Pesticides PDFDocument20 paginiCursul 3 - IPA - Pesticides PDFCondrat CristinaÎncă nu există evaluări
- Addressing India's Water CrisisDocument19 paginiAddressing India's Water CrisisAanchal MehtaÎncă nu există evaluări
- Submitted To: Submitted By:: Dr. P.K. Dobriyal RituDocument49 paginiSubmitted To: Submitted By:: Dr. P.K. Dobriyal Rituvkumar_345287Încă nu există evaluări
- Def PaperDocument208 paginiDef Paperrene luisÎncă nu există evaluări
- Sustainable DevelopmentDocument35 paginiSustainable DevelopmentKhoala BalouchÎncă nu există evaluări
- Environmental Awareness and ProtectionDocument9 paginiEnvironmental Awareness and ProtectionBhosx Emjay BlanesÎncă nu există evaluări
- Biofilms Presentation Handouts 3-16-15Document62 paginiBiofilms Presentation Handouts 3-16-15Afan MirajÎncă nu există evaluări
- Studi Kasus Sato Umi SyalalaaDocument140 paginiStudi Kasus Sato Umi SyalalaaniayusfandrikÎncă nu există evaluări
- Cause Effect EssayDocument2 paginiCause Effect Essaymac léinnÎncă nu există evaluări
- Aqua DMDocument5 paginiAqua DMLelydwiastÎncă nu există evaluări
- Ground Water ContaminationDocument20 paginiGround Water Contaminationakshan kadaskar100% (1)
- Ecology Notes "Principles of Ecology": Chapter 2, Section 1 Organisms and Their RelationshipsDocument13 paginiEcology Notes "Principles of Ecology": Chapter 2, Section 1 Organisms and Their RelationshipsRahulÎncă nu există evaluări
- Car Wash Wastewater Treatment and Water ReuseDocument8 paginiCar Wash Wastewater Treatment and Water Reuserocotroncoso100% (1)
- Brackish WaterDocument20 paginiBrackish WaterMarie PeneyraÎncă nu există evaluări
- Calculations Used in Daily Operations of An EtpDocument9 paginiCalculations Used in Daily Operations of An Etpnguyen an100% (1)
- Environmental Impact Assessment - WikipediaDocument20 paginiEnvironmental Impact Assessment - WikipediagayathriÎncă nu există evaluări
- Sustaining The Earth 11th Edition Miller Solutions Manual 1Document36 paginiSustaining The Earth 11th Edition Miller Solutions Manual 1jenniferrussellsjidkbtzycÎncă nu există evaluări
- Thesis Rain Water GardenDocument2 paginiThesis Rain Water GardenJeremiah Angeles BautistaÎncă nu există evaluări
- 20200907134120trophic Cascades and Keystone SpeciesDocument3 pagini20200907134120trophic Cascades and Keystone SpeciesMacNicholas 7Încă nu există evaluări
- Test Bank Friedland Relyea Environmental Science For APDocument13 paginiTest Bank Friedland Relyea Environmental Science For APLinda Fulks100% (23)
- Microalgae is nature's 'green gold': our pioneering project to feed the world more sustainablyDocument9 paginiMicroalgae is nature's 'green gold': our pioneering project to feed the world more sustainablyUyen HuynhÎncă nu există evaluări
- Module 2 The Ecosystem and Its ComponentDocument12 paginiModule 2 The Ecosystem and Its ComponentJonaria CopisÎncă nu există evaluări
- Letter To EditorDocument3 paginiLetter To EditorANUSHIKAÎncă nu există evaluări
- Module 3 (Government Land Management Activities)Document9 paginiModule 3 (Government Land Management Activities)7-Idiots Future EngineersÎncă nu există evaluări
- Tutorial Group 1Document6 paginiTutorial Group 1Sanjeev NehruÎncă nu există evaluări
