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Aminoácidos y
Proteínas
BIOQUÍMICA GENERAL
DBIO1037
Edición:
Paula Aracena S., PhD
Funciones de proteínas
Las funciones de las proteínas son múltiples debido a la diversidad posible de
estructuras.
MOVIMIENTO
Miosina, actina
TRANSPORTE CATÁLISIS
Albúmina, hemoglobina Enzimas
DIVERSIDAD DE
FUNCIÓN
ADHESIÓN COMUNICACIÓN
CELULAR Hormonas, proteínas de
Integrinas, caderinas señalización
DIVERSIDAD DE
PROTEÍNAS DE
ESTRUCTURA
MEMBRANA INMUNIDAD
Receptores, bombas Anticuerpos, complemento
ASISTENCIA
Histonas, chaperonas
Resultado de aprendizaje
R – NH2
R1 – NH – R2 O
R–C
R1 – N – R2 OH
–
R3
Ácido g-aminobutírico
Ácido aminolevulínico (GABA)
Levodopa Alanina
a-aminoácidos
Son aminoácidos en los que los grupos amino carboxilo están unidos al mismo
carbono, denominado carbono alfa (a).
Ácido g-aminobutírico
Ácido aminolevulínico (GABA)
Levodopa Alanina
a-aminoácidos
Son aminoácidos en los que los grupos amino carboxilo están unidos al mismo
carbono, denominado carbono alfa (a).
Alanina Levodopa
NH2 Ca COOH
L-a-aminoácido D-a-aminoácido
El carbono a (central) es quiral en
todos los a-aminoácidos clásicos,
excepto glicina.
a-aminoácidos clásicos
La cadena lateral es lo que le proporciona identidad y reactividad específica a
cada a-aminoácido.
(Triptofano)
(Arginina)
204Da
- +
R 75Da
(Glicina)
(Aspartato)
TAMAÑO CARGA
H Polar Apolar
Nucleofilicidad
Electrofilicidad
(Aspartato)
Redox
Tamaño de a-aminoácidos
El tamaño de las cadenas laterales es específico para cada a-aminoácido y este
tamaño repercute en su disposición cuando forma parte de proteínas.
Lisina
Prolina
Glicina
Fenilalanina
Fenilalanina
a-aminoácido apolar
Cadena lateral poco soluble
en agua y soluble en lípidos.
Reactividad redox de a-aminoácidos
Existen pocos a-aminoácidos con la capacidad de entregar electrones. Dicha
actividad está determinada por la presencia de azufre (S) en la cadena lateral.
Modificación
Metionina por un oxidante O Sulfóxido
Fenilalanina Lisina
Serina
¡Es una
amida!
2 grupos 3 grupos
ionizables ionizables
Ionización de a-aminoácidos
Los aminoácidos pueden ionizarse en virtud de la reactividad ácido-base de sus
grupos carboxilo y amino.
(base) (ácido)
R NH2 R
R COOH
H+
NH2 Ca COOH
H+
H
R NH3+ R COO-
Ionización de a-aminoácidos
Los grupos ionizados y no ionizados reciben nombres diferentes y tienen
distintas propiedades ácido-base.
R NH2 + H+ R NH3+
Grupo Grupo
AMINO
(base) AMONIO
(ácido)
R COOH R COO- + H+
Grupo Grupo
CARBOXILO
(ácido) CARBOXILATO
(base)
Ionización de a-aminoácidos
Por convención, las ionizaciones siempre se escriben como reacciones de
ácidos. La constante de acidez (Ka) indica el grado de acidez de estos grupos.
R NH3+ R NH2 + H+
Grupo Grupo
AMONIO
(ácido) AMINO
(base)
[base] [H+]
Ka =
[ácido]
R COOH R COO- + H+
Grupo Grupo
CARBOXILO
(ácido) CARBOXILATO
(base)
Ionización de a-aminoácidos
Cada vez que se valora el grado de acidez de dos o más grupo químico, se
comparan sus valores de Ka o pKa.
[base] [H+]
Ka = pKa = - Log Ka
[ácido]
MAYOR Ka Ka MENOR Ka
R
Asignar un valor de pKa a un
NH2 Ca COOH
grupo básico es UN ERROR.
pKa = 11
pKa = 3
H
Ionización de a-aminoácidos
Cada vez que se valora el grado de acidez de dos o más grupo químico, se
comparan sus valores de Ka o pKa.
R AH R A- + H+
¿A qué pH habrá más ácido?
¿A qué pH habrá más base?
¿A qué pH habrá iguales
pH concentraciones de ácido y
pKa ÁCIDO
de base?
ÁCIDO BASE
BASE ÁCIDO
BASE
Ionización de a-aminoácidos
El valor de pKa es el más útil, ya que permite deducir el estado de ionización de
los grupos ionizables de los aminoácidos a diferentes pH del medio.
R AH R A- + H+
¿A qué pH habrá más ácido?
¿A qué pH habrá más base?
¿A qué pH habrá iguales
pH concentraciones de ácido y
pKa ÁCIDO
de base?
ÁCIDO BASE
BASE ÁCIDO
BASE
Ionización de a-aminoácidos
Los a-aminoácidos presentan a lo menos dos grupos ionizables (y dos valores
de pKa), por lo que pueden sufrir a lo menos dos reacciones de ionización.
ÁCIDO
ÁCIDO pH BASE
BASE
pKa1 = 3 pKa2 = 11
R R R
H+ H+
H+ H+
pKa = 11 pKa = 3 pKa = 11
H H H
MEJOR PEOR
ÁCIDO ÁCIDO
Especie más abundante Especie más abundante Especie más abundante
a pH < 3 a pH entre 3 y 11 a pH > 11
Ionización de a-aminoácidos
Los a-aminoácidos presentan diferente carga neta, dependiendo de los pKa de
sus grupos ionizables y el pH del medio.
ÁCIDO
ÁCIDO pH BASE
BASE
+1 pKa1 = 3 0 pKa2 = 11 -1
R R R
H+ H+
H+ H+
pKa = 11 pKa = 3
H H H
ÁCIDO
ÁCIDO pH BASE
BASE
+1 pKa1 0 pKa2 -1
protonación
Especie zwitteriónica y punto isoeléctrico
La especie zwitteriónica es aquella con carga neta cero y el punto isoeléctrico
(pI) corresponde al pH en el cual sólo está presente esta especie.
ÁCIDO
ÁCIDO pH BASE
BASE
pKa1 pI pKa2
Sólo zwitterión
presente
ÁCIDO
ÁCIDO pH BASE
BASE
pKa1 pI pKa2
pKa1 + pKa2
pI =
2
Especie zwitteriónica y punto isoeléctrico
El punto isoeléctrico se calcula como un promedio de pKa de los 2 grupos que,
al ionizarse, generan el zwitterión.
ÁCIDO
ÁCIDO pH BASE
BASE
pKa1 pI pKa2
3 7 11
R
¿Cuál es el punto isoeléctrico de este
a-aminoácido?
NH3+ Ca COOH
+2
Lisina pKa = 2,2 3 grupos ionizables
+
En cada ionización, +1
H3
1 grupo carboxilo el grupo pierde un H+
pKa = 10.5 + 0
NH3 2 grupos amonio
pKa = 9,0 -1
protonación
pI = 9,8 pH
pKa1 pKa2 pKa3
+2 2,2 +1 9,0 0 10,5 -1
Especie zwitteriónica y punto isoeléctrico
Cuando un a-aminoácido presenta tres grupos ionizables (tres valores de pKa),
presentará tres reacciones de ionización.
+1
pKa = 4.3 pKa = 2,2 3 grupos ionizables 0
En cada ionización,
2 grupo carboxilos el grupo pierde un H+
Ácido glutámico
+
NH3 -1
1 grupo amonio
pKa = 9,7 -2
protonación
pI = 3,3 pH
pKa1 pKa2 pKa3
+1 2,2 0 4,3 -1 9,7 -2
Clasificación de a-aminoácidos
Existen muchas formas de clasificar a-aminoácidos. Una de las más usadas es
por tipo de cadena lateral.
Leucina Fenilalanina
CO2
NH4+
Cofactores
Huevos
Frutos
secos Leche
Frutas y
verduras
Quinua Carnes y
Granos y legumbres pescados
R R
NH2 Ca COOH
CO NH
NH2 Ca COOH
H H
H2 O
Enlace peptídico
Este enlace forma una nueva función orgánica (amida), que tiene diferente
reactividad a la de los grupos carboxilo y amina que reaccionaron.
TRES ENLACES
PEPTÍDICOS
Péptidos
Son polímeros pequeños formados por hasta 100 residuos de a-aminoácido.
Presentan al menos un enlace peptídico.
4 CARBONOS a
4 RESIDUOS DE
a-AMINOÁCIDO
TETRAPÉPTIDO
Péptidos
Son polímeros pequeños formados por hasta 100 residuos de a-aminoácido.
Presentan al menos un enlace peptídico.
4 CADENAS
LATERALES
Péptidos
Son polímeros pequeños formados por hasta 100 residuos de a-aminoácido.
Presentan al menos un enlace peptídico.
4 GRUPOS
IONIZABLES
+NH -Cys-His-Glu-Met-COO-
3
Residuo de metionina
Residuo de histidina (Met)
(His)
Péptidos
Son polímeros pequeños formados por hasta 100 residuos de a-aminoácido.
Presentan al menos un enlace peptídico.
+NH -
3-Cys-His-Glu-Met-COO
NH2
NH2
NH2 COOH
COOH
COOH
Fibrilares
Globulares
NH2
COOH
DETERMINADA ESTABLECIDA
ESPECÍFICA
GENÉTICAMENTE COVALENTEMENTE
Cada proteína tiene su La secuencia de residuos depende Se mantiene por enlaces peptídicos
propia estructura de la secuencia de ADN del gen (covalentes) entre los residuos que
primaria específica que la codifica las conforman
Estructura primaria
La forma que adopta una proteína es la expresión espacial de la información
lineal de la estructura primaria.
Glucagón
NH2-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-
Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-COOH
Niveles de organización proteica
A partir de la estructura primaria se obtienen niveles jerárquicos de organización
espacial de las proteínas.
Hélice a Hoja b
Estructura en Estructura en
forma de cable forma de sábana
(helicoidal) (plana)
Estructura secundaria
La hélice a se forma con mayor facilidad con residuos de cadena alifática,
como Met, Ala, Leu, Asp y Lys. Residuos de Pro provocan ruptura de la hélice.
EN PROMEDIO PRESENTA
3,6 RESIDUOS POR VUELTA
SE REPRESENTA COMO
UNA CINTA
ES DEXTRÓGIRA
Estructura secundaria
La hoja b se forma con mayor facilidad con residuos aromáticos y alifáticos
ramificados, como Thr, Val e Ile.
GENERALMENTE TIENE DE 3
A 10 RESIDUOS DE LARGO
SE REPRESENTA COMO
FLECHAS PARALELAS
ES EXTENDIDA
Estructura secundaria
La hoja b se puede presentar en dos conformaciones, dependiendo de la
dirección de la cadena polipeptídica (siempre de N-terminal a C-terminal).
Hacia el
C-terminal Hacia el
C-terminal
Hacia el
N-terminal Hacia el
N-terminal
CONFORMACIÓN CONFORMACIÓN
ANTIPARALELA PARALELA
Estructura de péptidos
Debido a su pequeño tamaño, oligopéptidos y péptidos no alcanzan altos niveles
de organización, sino usualmente estructura secundaria como máximo.
Proteína soluble
Sólo a en agua RESIDUOS
Coordinación de
Interacción iónica
iones
POLARES
Sólo b
Puente de
hidrógeno
SOD1 ATP
Homodímero SINTASA
Heteromultímero Coordinación de
Interacción iónica
iones
Puente de
hidrógeno
Fibrilares
Interacción
hidrofóbica Puente
disulfuro
HEMOGLOBINA Globulares
Heterotetrámero
Puente de
hidrógeno
Interacciones
Hidrofóbicas Puente
disulfuro
α-queratina
Motivo
Fibroína Gly-X-Y
Gly
Pro
Hojas β H-Pro
desordenadas Gly β-queratina
Región Pro
apolar Hojas β H-Pro
ordenadas
Gly
Cadena
amorfa
Motivo Walker A
de unión a ATP ATP
Humano GVPNVGKS
VacunoS
GVPNVGKS
Drosophila Lys
Dominio de S
Arroz
unión a ATP GVPNVGKS
Bacteria
S
GVPNVGKS
A
DOMINIOS MOTIVOS RELACIÓN ESTRUCTURA-
GIPNAGKST
FUNCIÓN
Regiones de la proteína con Secuencias de residuos de La forma de los dominios y la
una organización espacial que a-aminoácido conservadas, que disposición de los motivos determina
cumple una función forman parte de los dominios la función
Relación estructura-función de proteínas
Una alteración de la estructura puede conducir a la pérdida de la función de
las proteínas, en distinto grado.
GVPNVGKS
S
GVPNVGAS Ala
S
ALTERACIONES
MUTACIONES PÉRDIDA DE FUNCIÓN
ESPACIALES
Provocan la pérdida de la Cambios en la secuencia de los Puede ser total o parcial,
forma del dominio o que éste residuos de a-aminoácido de un dependiendo de la alteración
ya no esté expuesto al medio motivo
Conformación nativa de proteínas
Corresponde a la estructura espacial de menor energía de las proteínas, que es
la que expresa la función biológica.
Conformaciones de
plegamiento intermedio
Conformaciones de
plegamiento intermedio
CONFORMACIÓN
NATIVA
Conformación nativa de proteínas
Corresponde a la estructura espacial de menor energía de las proteínas, que es
la que expresa la función biológica.
ARNm
Ribosoma
Péptido Proteína
naciente nativa
Prión
Creutzfeld-Jacob
Chaperonas
HIDRÓLISIS DESNATURALIZACIÓN
Pérdida de organización Pérdida de organización
espacial debido a ruptura de espacial, sin pérdida de
enlaces peptídicos estructura primaria
Hidrólisis del enlace peptídico
Es la reacción inversa a la condensación que forma el enlace peptídico, por lo
que rompe el enlace y regenera a-aminoácidos libres.
R R
NH2 Ca COOH
CO NH
NH2 Ca COOH
H H
H2 O
Hidrólisis de proteínas
Dado que rompe el enlace peptídico, la hidrólisis provoca una disrupción de la
estructura primaria de las proteínas y, por lo tanto es irreversible.
Ácidos 100ºC
o bases Pepsina
fuertes 48 horas
Bromuro de
cianógeno Tripsina
ALTERA LA ESTRUCTURA
HIDRÓLISIS QUÍMICA HIDRÓLISIS CATALIZADA
PRIMARIA
Rompe enlaces peptídicos Producida por agentes químicos Intervención de enzimas
hidrolíticas (proteasas)
Desnaturalización de proteínas
Corresponde a la pérdida de la organización espacial de proteínas, sin pérdida
de la estructura primaria. Puede ser reversible.
Agentes
Temperatura
reductores
OVOALBÚMINA
(irreversible) Detergentes
Urea
Alta fuerza
iónica
CASEÍNA
(reversible) Ácidos y
bases débiles
LIPOPROTEÍNAS
METALOPROTEÍNAS
LDL
Calmodulina HEMOPROTEÍNAS
FLAVOPROTEÍNAS Hemoglobina
D-aminoácido
oxidasa
Grupos prostéticos
Estos grupos, generalmente unidos a la proteína conjugada por un enlace
covalente, permiten interacciones específicas con moléculas redox activas.
Intercambio
de electrones
Grupos Fe-S Interacción con oxígeno
molecular
Grupo hem
SUCCINATO
DESHIDROGENASA
FAD (Complejo II mitocondrial)
Intercambio de
átomos de hidrógeno
Resultado de aprendizaje
Inhibidor alostérico
Sitio
alostérico
CONFORMACIÓN
Cooperatividad positiva
RELAJADA
Máxima avidez
por el ligando
Cooperatividad negativa
CONFORMACIÓN
TENSA
Mínima avidez
por el ligando
MIOGLOBINA HEMOGLOBINA
Proteínas de transporte de oxígeno
Son proteínas especializadas, que unen oxígeno molecular para transportarlo
entre tejidos. La unión a oxígeno se produce a través de los grupos hem.
Son hemoproteínas
Monómero Tetrámero
1 hem 4 hem
SIMILITUDES DIFERENCIAS
Regulación de hemoglobina y mioglobina
La hemoglobina, pero no la mioglobina, exhibe cooperatividad, debido a su
estructura cuaternaria. Además, la hemoglobina presenta regulación alostérica.
CONFORMACIÓN R CONFORMACIÓN T
Cooperatividad en la unión de oxígeno
La hemoglobina exhibe una cooperatividad positiva en la unión a oxígeno
molecular de sus subunidades.
MIOGLOBINA
La avidez (afinidad) por O2 de cada proteína
se deduce a partir de cuán empinada está
cada curva (pendiente)
Saturación con O2
-pH
2,3BPG
= 7,6
A pH más básico (menos protones, pH = 7,6),
Saturación con O2
Presión de O2
Relevancia biológica de la regulación de la
unión a oxígeno de hemoproteínas
Esta regulación explica la carga y descarga de oxígeno.
Mioglobina
La mioglobina es una proteína residente en tejido
muscular que actúa como reserva de O2, que sólo
lo descarga cuando la pO2 es mínima
Saturación con O2