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Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas


Laboratorio de Sistemas de Control de Calidad

Validación de sueros hemoclasificadores de grupo sanguíneo “ABO” ,


tinción de Wright/Giemsa

Grupo:
5QV1

Alumno
Castillo Islas Cristian Yair

Sección:
3

Equipo
3

Asignatura:
Sistemas de Control de Calidad

Fecha de entrega
25/05/2019

1
Introducción
La inmuhematología es la parte de la hematología , que estudia los procesos inmunes
relacionados con los elementos sanguíneos del organismo . Uno de los aspectos más importantes
de la inmunohematología es el estudios de los grupos sanguíneos
El descubrimiento de los antígenos del sistema ABO por Karl Landstainer fue el detonador para el
inicio del empleo de la trasfusión como medida terapéutica eficaz .Así como la participación del
sistema Rh en la génesis de la enfermedad hemolítica del recién nacido es otro avance
fundamental de la medicina transfusional.
Los antígenos de los sistemas de grupos sanguíneos y las características de los anticuerpos
correspondientes son una pieza fundamental en el buen manejo de los pacientes que requieren
transfusión o trasplante , ya que están presentes no solo en los eritrocitos , sino también en
muchas otras células entre ellas las endoteliales de los vasos sanguíneos
Los antígenos eritrocitarios de han clasificado en sistemas , colecciones y grupos . Actualmente
se conocen 33 sistemas de grupos eritrocitarios

Grupo Antígenos Anticuerpos Genotipo


Sanguíneo presentes
O H Anti A , Anti OO
B
A A Anti-B AO , AA
B B Anti-A BO , BB
AB AYB Ninguno AB

Objetivo
-Determinar el grupo sanguíneo de una muestra de sangre problema , en forma directa con
antisueros hemoclasificadores .
-Determina el grupo sanguíneo de una muestra de suero problema , en forma indirecta con
células de fenotipo conocido A1 , A , B , O
-Realizar las pruebas de control de calidad a los sueros hemoclasificadores .
-Validar o rechazar de acuerdo a procedimientos normalizados los reactivos usados
-Validar o rechazar resultados obtenidos de acuerdo a resultados de control de calidad

Fundamento
La determinación de grupo sanguíneo ABO por norma comprende dos fases prueba de
determinación de antígeno o prueba directa (en eritrocitos) y la prueba indirecta o de
determinación de anticuerpo (suero) NOM-253-SSA1-2012

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PRUEBA DE ESPECIFICIDAD PRUEBA DE AVIDEZ

Preparar una suspensión Preparar una suspensión al


salina al 2% de cada uno de 10% de los eritrocitos
los eritrocitos apropiados

Colocar igual volumen de la Colocar una gota en un


suspensión y del reactivo y portaobjetos y añadir una gota
mezclar del mismo volumen del reactivo

Centrifugar 30 segundos de Mezclar las dos gotas con un


3000 a 3400 rpm aplicador en un área de
aproximadamente 25mm de
diámetro y tomar el tiempo con
Leer los tubos de la
un cronómetro desde el
reacción al cabo de unos
momento de la mezcla hasta el
minutos
momento de inicio de la
aglutinación

Rotar el portaobjeto de lado a


PRUEBA DE POTENCIA O TÍTULO lado durante el periodo de
observación

Registrar el tamaño de los


Hacer diluciones seriadas al doble de los cúmulos al final de dos minutos
reactivos hemoclasificadores en solución
salina (9 g NaCl/L)

La suspensión de eritrocitos debe ser de 2%


en solución salina (9 g NaCl/L)

Colocar tubos de ensaye y agregar volumen de


la dilución de suero y de la suspensión de
eritrocitos a cada tubo y mezclar

Centrifuga 30 segundos de 3000 a 4000 rpm

Resuspender suavemente las células

Interpreta los resultados de acuerdo a la regla


de cruces

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Resultados
Prueba de especificidad
Grupo Sanguíneo Tabla 1 Resultados esperados para la
A1 A2 B O prueba de especificidad
Anti-A + + - - + = Prueba positiva
Anti-B - - + -
Anti-AB + + + - - = Prueba negativa

Grupo sanguineo Tabla 2 Resultados obtenidos por el


A1 A2 B O equipo de Cris y Ana con Anti-B
Suero anti-B - - + -

Prueba de avidez

Suero Reactivo Tiempo en aglutinación Tabla 3 Resultado para prueba de avidez ,


58 segundos es el tiempo en que la sangre
Eritrocitos B Anti-B 58 segundos
tardo en aglutinarse

Prueba de potencia o título

Tabla 4 Interpretación en sistema de cruces para las distintas diluciones


Dilución
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512
N° de cruces ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ +++ ++ ++

Discusión
Para la prueba de especificidad como podemos observar en la tabla 1 los resultados esperados
para cada uno de los sueros , en el caso del equipo de Cris y Ana el antisuero a probar fue el
Anti-B , al colocar 100 microlitros de este antisuero a los distintos sueros (A1 , A2 , B y O) con el
único que hay aglutinación es con las células del grupo B mientras que con las otras no hay
reacción alguna por lo tanto podemos decir que los hemoclasificadores y los glóbulos rojos de
fenotipo conocido están en control ´, si el suero anti B llegara a aglutinar con otro tipo de suero es
indicador de que el reactivo no se encuentra en condiciones óptimas por lo tanto tendremos
resultados erróneos
Para la prueba de Avidez el equipo trabajo con células de tipo B y antisuero B , como podemos
observar en la tala 3 el tiempo en que se observa la aglutinación es en 58 segundos de acuerdo
al PROY-NOM-223-SSA1-2002 en el apartado 5.2.3 para la prueba de avidez la aglutinación de
los eritrocitos del tipo correspondiente se inicie en el tiempo máximo que se especifique para cada

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grupo o subgrupo , contados a partir del momento en que se ponen en contacto suero y
eritrocitos , el tamaño de los cúmulos no debe ser menos a 1 milímetro .Para El suero anti-B la
aglutinación inicia a los 2 segundos y finaliza a los 30 segundos pero en este caso obtuvimos un
tiempo mayor siendo este de 58 segundos para finalizar la aglutinación , el error puede deberse
a que es una prueba macroscópica y cada persona tiene una manera distinta de observar la
aglutinación o simplemente ya se encontraba pero no era del todo visible .
Para la prueba de potencia o titulo de cuerdo a PROY-NOM-223-SSA1-2002 apartado 5.2.4 el
título de aglutinación mínimo de los reactivos hemoclasificadores para suero anti B es de 128 ,
nosotros determinamos ésta prueba con cruces (tabla 4) por lo tanto no podemos tener un título
tal cual pero debido a los resultados anteriores podemos asumir que el anti suero B se
encontraba en control
Por último de acuerdo a PROY-NOM-223-SSA1-2002 apartado
5.2.2 los goteros de reactivos estaban adecuadamente

rotulados y caracterizados

Tinción

Tabla 5 Observaciones a distintos pH de la tinción de Wright /Giemsa


Ph Observaciones tipo de error
6.8 Los núcleos no tiene una tinción Un error por coloración ácida
adecuada y solo podemos observar
eosinófilos que se ven de un color muy
rosado
6.4 Los núcleos teñidos de los leucocitos Presentamos una coloración
se observar de un color púrpura intenso básica
y se puede observar los eritrocitos en
color gris
7.4 En esta tinción solamente se pueden Coloración básica
distinguir los basófilos y los eritrocitos
se ven en colores grisaseos
Agua Los núcleos no se tiñeñ y solamente se Coloración ácida
puede distinguir la prescencia de
acidófilos

Conclusiones
-El antisuero B esta en control
-Las tinciones no se observaron de una manera adecuada
Pregunta extra
¿Qué es el grupo B adquirido?

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El b adquirido se debe a la absorción de sustancian bacterianos muy parecidas al grupo B , esto
podría darse en el caos que el paciente este pasando por una infección por ejemplo la de colon
El “B adquirido” podría deberse a la acción de la desacetilasa bacteriana, que convierte la
Nacetilgalactosamina en α-galactosamina, la cual es muy similar a la galactosa, el principal
determinante de B. Las células B adquiridas se hacen más reactivas frente al extracto de Dolichus
biflorus. También pueden presentar activación T o Tk, estando mediadas todas esas alteraciones
por enzimas bacterianas en pacientes que cursan con una infección importante como la de colon.
Otro mecanismo de producción de grupo B adquirido secundario a la absorción de sustancias
bacterianas semejante al grupo B se observa en personas infectadas por Proteus vulgaris o
Escherichia coli.También se ha descrito un grupo B adquirido que se detecta sólo en células del
grupo A de expresión débil
Bibliografía
-PROY-NOM-223-SSA1-2002 , Consulta 25/05/2019 ,pdf online :
http://www.cenetec.gob.mx/cd_inter/normas/ssa222.pdf
-Araceli Nieto Rodríguez. Detección , análisis y resolución de discrepancias en el grupo
sanguíneo ABO, 20 de julio de 2006 pag. 4, consulta 25/05/2019 , pdf online
https://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2006/ims062h.pdf

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