GUÍA 8 DE BIOQUÍMICA –UNIVERSIDAD DEL VALLE PROFESOR CÉSAR GODOY 2018-II

GENERALIDADES PARA EL TRATAMIENTO DE LOS RESIDUOS.

 IMPORTANTE: USEN LOS ELEMENTOS DE SEGURIDAD DEL CASO Y LA FICHAS DE
RIESGO PARA CADA UNO DE LOS RESIDUOS Y REACTIVOS A TRATAR.
 A MENOS QUE SE INDIQUE LO CONTRARIO TODOS ESTOS PROCEDIMIENTOS
DEBERÁ HACERLOS EN CAMPANA DE EXTRACCIÓN.
 DE LLEGAR A USARSE, LAS CANTIDADES A AÑADIR DE SULFURO DE SODIO, DE
BISULFITO DE SODIO Y DE HIPOCLORITO LAS DEBERÁN ESTIMAR DE ACUERDO
CON LA CANTIDAD MÁXIMA DE LOS METALES (Y OTROS) QUE TENGAN LOS
RESIDUOS Y QUE SE PUEDEN DEDUCIR DE CADA UNA DE LAS GUÍAS DE
LABORATORIO EMPLEADAS PREVIAMENTE.
 DEJEN LIMPIOS Y SIN ETIQUETA LOS RECIPIENTES DE LOS REACTIVOS QUE
TRATE.
 UNA VEZ QUE SU GRUPO TERMINE LAS TAREAS ASIGNADAS DEBERÁ
COLABORAR CON LAS TAREAS QUE FALTAN POR REALIZAR POR PARTE DE
OTRO GRUPOS. COMO SIEMPRE, NADIE SE MARCHA SIN EXPRESA
AUTORIZACIÓN DEL PROFESOR.
 Disuelva en el menor volumen posible los reactivos que se lleguen a usar para
neutralizar, reducir y precipitar.

DEBERÁN LEER PREVIAMENTE EL ARCHIVO “DIVISIÓN DEL TRABAJO…” PARA QUE

CONOZCAN CUÁLES TRATAMIENTOS DE LOS DESCRITOS MÁS ABAJO EN ESTE
DOCUMENTO SE LLEVARAN A CABO DE ACUERDO CON LOS RESIDUOS GENERADOS EN
SU SEMESTRE Y ASIGNADOS AL GRUPO.

PRECIPITACIÓN COMO SULFUROS DE METALES PESADOS.

1. RESIDUOS CON METALES PESADOS EN GENERAL
Si los residuos con metales pesados se logran dividir entre los seis grupos en volúmenes
no mayores a 1 L se puede considerar reducir volúmenes por evaporación en plancha de
calentamiento (previa neutralización según se indique) y dentro de campana de extracción
evitándose así gastos de reactivos adicionales, pero si resultan mayores, se deberá hacer lo
siguiente:
Los residuos se tratarán por todos los grupos de modo coordinado, por ejemplo, todos emplearán
los mismos reactivos, etc.
Los residuos a tratar según estos lineamientos serán aquellos que contengan Cu(II) en medio
acuoso resultante de las pruebas de Biuret o BCA, así como otros metales pesados en menor
cantidad como Cr(III) del reineckato, Fe(III) del nitroprusiato y Cloruro de ácido férrico, Mo(VI) de
Molibdatos, etc.
Para lo anterior se empleará la precipitación en forma de sulfuros pero antes y solo en el caso de
presencia de especies como Mo(VI), Cr(>3+), Fe(III),etc., se realiza reducción con exceso de
sulfito ácido de sodio a pH ácido (<3).
Una vez hecha la reducción y como siempre campana de extracción, la precipitación de los
metales como sulfuros se debe hacer en medio básico (pH >10): para ello basifique lo que fue
reducido por el bisulfito (según el caso) y disuelva el Na2S en NaOH(ac) pH=11 según las cantidades
calculadas y en el mínimo volumen posible. Adicione lentamente el Na2S(ac) a las disoluciones de
los metales reducidos y verifique si hay formación de precipitados (sulfuros metálicos).
Estos precipitados se deberán filtrar, pesar (peso aproximado) y guardar (en papel de filtro que se
pondrá dentro de un recipiente hermético plástico con tapa o en una bolsa ziplock debidamente
rotulada si no se tuviera otro recipiente).
(No lo olvide, todo esto en campana): los sobrenadantes resultantes de las precipitaciones de
metales contienen exceso de sulfuro, todos estos se reúnen y se oxidan (a Sulfato) con exceso de
hipoclorito sódico en disolución (por 1h con agitación) y después se neutraliza para desechar.
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NEUTRALIZACIÓN DE RESIDUOS ÁCIDOS/BÁSICOS.

2. RESIDUO DE DESECHOS DE LA PARTE DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS,
ENZIMOLOGÍA, ADN, UREA Y SULFATO DE AMONIO
Disoluciones acuosas básicas (aminoácidos titulados, p-nitrofenol,etc.) deberán ser neutralizadas
con residuos ácidos como el ácido sulfúrico de la práctica de DNA. Sin no es suficiente deberán
agregar ácido o base según sea el caso hasta alcanzar un pH entre 6,5 y 8,5 e idealmente de 7,0.
En disoluciones de p-nitrofenol neutralizadas este no debe superar alrededor de 10 ppm (verifiquen
este límite). En la práctica, cuando lo tuvimos más concentrado estuvo a 350 ppm. Haga las
diluciones necesarias de ser el caso.
3. RESIDUOS BÁSICOS DE LA PRÁCTICA DE LÍPIDOS
En esencia se encuentra éter, etanol, agua y KOH disuelto. Por lo tanto, estos desechos se deben
neutralizar en campana, procure buscar otros desechos que tengan un pH ácido para realizar esta
labor (por ejemplo podría mezclarlos con H2SO4 resultante de la práctica de ADN y que también se
pueden usar en la parte 2.
Si hay medios predominantemente orgánicos ya neutralizados se deben destilar para recuperar el
disolvente, el residuo acuoso se debe tratar neutralizando y evaporando si no excede 1 L.

RECUPERACIÓN DE SÓLIDOS ORGÁNICOS NINHIDRINA Y 2,4 DFHZ.

4. RESIDUO DE NINHIDRINA
Ninhidrina en medio acuoso: deberán filtrar el residuo y guardar el sólido para posterior tratamiento
por la empresa encargada. El/los sobrenadantes se neutralizan y se almacenan como residuo
especial en recipiente como Ninhidrina a ~XX mg /el volumen total del residuo en L. Si es
ninhidrina disuelta en etanol, esta se deberá evaporar en campana y almacenar como residuo
especial sólido previamente pesado.
5. RESIDUO DE 2,4-Dinitrofenilhidrazina
Procedimiento análogo al de la ninhidrina. El/los sobrenadantes se neutralizan y se almacenan
como residuo especial etiquetado como Ninhidrina a ~XX mg /el volumen total del residuo en L.
6. RESIDUO DE PIPERIDINA AL 3%, ÁCIDO TRICLOROACÉTICO 10%.
Independientemente se neutralizan y guardan como residuo especial líquido de piperidina al 3% o
ácido tricloroacético al 10% en recipiente hermético diferente.
IMPORTANTE: Límites permitidos en agua de algunos contaminantes generados
Orgánicos
Ninhidrina: no establecido pero se puede inferir de sus fichas de toxicidad y letalidad que NO
podría ser superior a 1µg/mL
2,4 Dinitrofenilhidrazina: no establecido pero se puede inferir de sus fichas de toxicidad y
letalidad que NO podría ser superior a 1µg/mL
Piperidina: no establecido pero se puede inferir de sus fichas de toxicidad y letalidad que NO
podría ser superior a 1mg/mL
Urea : máxima concentración permitida 10mg/L en agua potable
Ácido tricloroacético: máxima permitida 0,2mg/L
Metales
Cr(III) 0,05mg/mL
Fe(II) 1mg/mL
Cu(II) 1mg/mL
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Efectores (Enzimología)
Vanadio: 15 µg/L. A lo neutralizado de la parte de efectores dilúyalo para que alcance estos límites
o inferiores y descártelo.
Molibdeno: 0,07mg/L. A lo neutralizado de la parte de efectores dilúyalo para que alcance estos
límites o inferiores y descártelo.
Fluoruro: 0,8-1,2 mg/L. A lo neutralizado de la parte de efectores dilúyalo para que alcance estos
límites o inferiores y descártelo.
Fosfato: 0,1mg/L. A lo neutralizado de la parte de efectores dilúyalo para que alcance esto límites
123456789101112
o inferiores y descártelo.
Bibliografía

(1) Mo, S. L. SIGMA-ALDRICH. 2012, 1–7.

(2) Singer, A.; Kuhn, H. Frank-Kamenetskii, M. Meller, A. Detection of Urea-Induced Internal

Denaturation of dsADN Using Solid-State Nanopores. J Phys Condens Matter 2010, 22 (45).

(3) Ninhidrina- CHEMICAL PRODUCT AND COMPANY IDENTIFICATION. 1910, 1–12.

(4) Mironets, N. V; Savina, R. V; Kucherov, I. S.; Solntseva, V. V; Martyshchenko, N. V. [Setting

a Maximum Allowable Concentration for Urea in Reclaimed Potable Water and Evaluating
the Nature of Its Biological Action]. Kosm. Biol. Aviakosm. Med. 22 (1), 63–66.

(5) Howd, R. A. PROPOSED NOTIFICATION LEVEL FOR VANADIUM

http://oehha.ca.gov/water/pals/vanadium.html (accessed Aug 25, 2015).

(6) W.H.O. Molybdenum in Drinking-Water, Background Document for Development of WHO

Guidelines for Drinking-Water Quality. 2011.

(7) Trichloroacetic Acid in Drinking-Water Background Document for Development of WHO

Guidelines for Drinking-Water Quality.

(8) Who. Chromium in Drinking-Water. 2003, 2, 1–13.

(9) Quality, D. pH in Drinking-Water Background Document for Development of. 1996, 2.

(10) Quality, D. Iron in Drinking-Water Background Document for Development of. 1996, 2.

(11) Tabla de parametros fisicoquimicos en muestras de agua

http://www.bioline.org.br/showimage?ja/photo/ja10023t1.jpg (accessed Aug 25, 2015).

(12) Water Sanitation and Health , Fluoride

http://www.who.int/water_sanitation_health/naturalhazards/en/index2.html (accessed Aug
25, 2015).