desapareados en su orbital más externo por
llo cual tienen una alta reactividad química,
INTRODUCCIÓN:
La utilización de oxígeno por parte de los
seres humanos, resulta ser muy útil y
positivo para el organismo cuando se habla
de la regulación de proteínas, grasas,
carbohidratos entre otras cosas, pero de
igual manera resulta ser muy nocivo en
cuanto al formar radicales libres que atacan
a células del organismo lo cual trae algunos
efectos negativos en el organismo, Los
radicales libres también llamados “especies
reactivas de oxígeno” (ROS), son átomos o
moléculas que tienen uno o más electrones
se generan durante el metabolismo normal
en el ser humano (Miriam Palomino Pacheco
, Emilio Guija Poma , Nancy Lozano Reyes,
2009). No obstante, el ser humano tiene un
sistema antioxidante constituido por
enzimas, es ahí donde encontramos la
función de los antioxidantes en el cuerpo,
estos estabilizan y actúan impidiendo el
ataque de los radicales libres a las células.
Las capacidades antioxidantes de las frutas
varían según su contenido en vitamina C,
vitamina E, carotenoides, flavonoides y otros
polifenoles (Saura-Calixto y Goñi, 2006). Uno
de los antioxidantes naturales más comunes
es el ácido ascórbico o vitamina C, el cual
también abunda en muchas frutas. Por otro
lado, la vitamina C (acido L-ascorbico) es una
vitamina soluble en agua y se encuentra
tanto en forma reducida (ácido ascórbico),
como en forma oxidada (ácido
deshidroascorbico). Es muy usado en la
industria como: aditivo alimentario nutritivo,
antioxidante, agente reductor, estabilizador,
modificador, estabilizador de color
(Eitenmiller et al, 2008). En algunos estudios
se reporta que el efecto antioxidante en
algunos alimentos se debe a las altas
concentraciones de ácido ascórbico.
Durante la práctica de laboratorio se
realizaron estudios con una muestra de
guayaba, es importante resaltar que es una
fruta que posee una elevada concentración
de vitaminas A y C , polifenoles y otros
componentes que podrían ejercer un
eficiente efecto antioxidante (Miriam
Palomino Pacheco , Emilio Guija Poma ,
Nancy Lozano Reyes, 2009).
El principal objetivo del presente informe es
determinar la capacidad antioxidante y el
contenido total de ácido ascórbico en una
muestra de guayaba, así hallar la cantidad de
vitamina C en las muestras realizadas
haciendo uso de espectrofotometría, a partir
de esto determinar si puede ser explotada
como fuente de antioxidantes naturales. Así
mismo realizar la curva de calibración de
ácido ascórbico.
Tabla 1: Volúmenes de reactivos (2-
nitroanilina y nitrito de sodio) para
preparar curva de calibración (tubos 1-6)
y muestras problema (P) (tubos 7-12)

MATERIALES Y METODOLOGÍA

preparación de las soluciones problema:

1. muestra problema (P1) sin diluir

se pesaron 1.0473 g de materia vegetal

(guayaba), el cual fue macerado en 10 ml de
ácido oxálico (0.15%) y luego filtrado con
gasa sobre un matraz totalmente cubierto de
aluminio. con lo cual se obtuvo una solución
al 10.473 % p/v,con una densidad de 1.0176
g/ml (dato obtenido al pesar un gramo de
solución).
2. muestra problema (P2)diluida
para esta muestra se tomó 1 ml de muestra
(P1) y 9 ml de ácido oxálico (0.15%).
Concentración de 1.0473 % p/v.
estos tubos fueron mezclados y se
verificó que el medio fuera ácido
(pH<4,0). Para así dejarlos en reposo 10
min y añadir los siguientes reactivos
siguiendo la Tabla 2:
Tabla 2: Volúmenes de reactivos (etanol
absoluto, patrón ácido ascórbico y ácido
oxálico) para preparar curva de
calibración (tubos 1-6) y muestras
problema (P) (tubos 7-12)

se realizaron dichas soluciones con el fin de

obtener las concentraciones de ácido
ascórbico presente en las soluciones
espectrofotométricamente. Para las
muestras problema (P) se añadió 1 ml del
filtrado (diluido y sin diluir en caso de
material sólido o diluciones en caso de
material líquido; tubos 7-12) en lugar de
la solución patrón (tubos 1-6), se
determinó la absorbancia y concentración Era necesario tener un pH básico para
con base en la curva de calibración. observar color. asi pues,se mezclaron bien
y se esperó 20 minutos para agregar los
preparación de la curva de calibración: siguientes reactivos según la Tabla 3:
se cubrieron 13 tubos con papel aluminio
Tabla 3: Volúmenes de reactivos (NaOH
y se empezó adicionando reactivos de
y Agua destilada) para preparar curva de
acuerdo a la Tabla 1, teniendo en cuenta
calibración (tubos 1-6) y muestras
que el tubo B es el blanco:
problema (P) (tubos 7-12)
se observó que el pH fuera básico y se
midió absorbancia en espectrofotómetro a
540 nm.
Concentración preparada Absorbancia

5x10-3 mg/ml 0,268

1x10-2 mg/ml 0,425

2x10-2 mg/ml 0,712

3x10-2 mg/ml 1,012

RESULTADOS :
4x10-2 mg/ml 1,142
El peso de la muestra tomada para
realizar la primera mezcla con ácido
5x10-2 mg/ml 1,39
oxálico: 1,0473g

A partir de lo anterior y siguiendo con la se graficaron los siguientes datos en una

metodología se determinó la densidad, curva de calibración donde como
así: resultado obtuvimos un R de 0,9872 con
la cual se confirma la correlación con la
Se peso en un vaso de precipitados un ley de Lambert-Beer
litro del filtrado, lo cual en la balanza
marcó 1,0176 g. Haciendo los respectivos ilustracion 1:
cálculos obtuvimos una densidad de
1017,6 kg/m3, valor expresado en
unidades el sistema internacional.

TABLA 4: absorbancia muestras de

concentración preparada
también se obtuvieron las absorbancias de
las muestras problema mediante
espectrofotometría a 540 nm: P2:

con
estos datos se calculo la concentración
experimental con la ecuacion de la recta
MUESTRAS ABSORBANCIA obtenida en la curva de calibración:
540nm
Y= 2.4671X + 0.1875

P1.1 0,691 Y Absorbancia

P1.2 0,678 X concentración

P1.3 0,701
XP1:

P2.1 0,154
XP2:
P2.2 0,137 resultado con el que se encontró la
relación de vitamina c en la guayaba de
P2.3 0,143 forma experimental:

muestras P1: concentradas

muestras P2: diluidas

Para obtener las concentraciones se
realizó primero una media entre los
resultados de concentración diluida(P2) y
concentrada (P1) de los que no se
descarto ninguno por su corta diferencia,
con lo que se obtuvo:
P1
Se utilizó la concentración de la muestra
sin diluir (ecuación XP1), porque en la
diluida al hacer los respectivos cálculos
obtuvimos un valor negativo, como se
puede evidenciar en la anterior ecuación
(XP2).
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
A Partir de los datos obtenidos
experimentalmente, así como también la
ecuación al graficar dichos datos en una
curva de calibración, se calcularon las
concentraciones de ácido ascórbico en la
muestra tomada, tomamos el valor
obtenido con los datos de las muestras P
concentradas, es decir las muestras P1
que corresponden a las no diluidas, puesto
que el valor fue positivo en comparación
con el obtenido con las muestras P
diluidas (P2), lo que se puede interpretar
debido a que el blanco absorbe más luz
comparado con la muestra problema.
tabla (Bienestar familiar,2015)tabla
nutricional guayaba
como se pudo notar el valor obtenido
experimental difiere de 14,6% diferencia
que se puede atribuir a una mala dilución
de la muestra o una falta de maceración
en donde se perdió materia vegetal al
realizar el filtrado.
Finalmente expresamos los datos
obtenidos experimentalmente acerca de la
cuantificación de vitamina C en la
muestra de guayaba analizada en
unidades internacionales de vitamina C.
Sabiendo que 1 UI de vitamina C: 50
μg de vitamina C , tenemos:
De igual forma expresando los datos
encontrados acerca de el contenido de
vitamina C en la tabla nutricional ( tabla
(Bienestar familiar,2015)tabla nutricional
guayaba) en unidades internacionales de
vitamina C:
Notamos que hay una diferencia de 6,66
UI de vitamina C, variación que puede ser
resultado de errores experimentales.
CONCLUSIONES
1 Se determinó una concentración
experimental de vitamina c de 195 mg
ácido ascórbico/ 100 g guayaba que
difiere del valor real (228.3mg/100
g)14,6%. con lo cual se evidencia un gran
aporte antioxidante de esta fruta.
2 se encontró que la curva de calibracion
cumplia con la le de Lambert_ Beer con
un coeficiente de correlación lineal de
3 En unidades internacionales UI la
vitamina C en la guayaba tiene un valor
experimental de 39 UI de vitamina C y un
valor real de 45,6 UI de vitamina C, a
pesar de que el valor obtenido
experimentalmente no es exactamente el
mismo al encontrado en la tabla
nutricional, si se asemeja mucho.
4 la muestra diluida P2
REFERENCIAS
Kapur, A., Hasković, A., Čopra-
Janićijević, A., Klepo, L., Topčagić, A.,
Tahirović, I., Sofić, E. (2012).
Spectrophotometric analysis of total
ascorbic acid content in various fruits and
vegetables. Recuperado el 13 de
septiembre de 2019 de:
http://pmf.unsa.ba/hemija/glasnik/files/Iss
ue%2038/38%20-%208-Kapur.pdf

Palomino, M., Guija, E., & Lozano

N.(2009) PROPIEDADES
ANTIOXIDANTES DE LA GUAYABA
( L.)Recuperado el 13 de septiempre de
2019 de:
http://www.scielo.org.pe/pdf/rsqp/v
75n2/a10v75n2.pdf