Guía de Prácticas de Biología Celular 2016-I

Práctica Nº 3

Estructura y Diversidad Celular

I. Objetivos
 Realizar la observación de células sanguíneas tras una tinción de Wright de un
frotis sanguíneo
 Reconocer los detalles estructurales de células de mohos ambientales.
 Realizar una tinción simple a una suspensión de levaduras y observar su
morfología y estructura con un microscopio óptico.

II. Fundamento teórico

Los seres vivos están formados por células, pequeños compartimientos rodeados
de membrana y llenos de una solución acuosa concentrada de compuestos
químicos. La historia de este descubrimiento se remonta al año 1665 cuando el
físico inglés Robert Hooke (1665-1703), encontró que la corteza del alcornoque
Quercus súber, y los tallos de diversas plantas estaban formados por nítidas hileras
de compartimientos de gruesas paredes que le recordaron un panal de abejas, por
lo cual les llamó células. Posteriormente, en el año 1839, el botánico Matthías
Schleiden y el zoólogo Theodor Schwann, después de realizar numerosas
investigaciones independientes en diversos tejidos vegetales y animales, llegaron a
concluir que todos los seres vivos, independientemente de su clase, estaban
formados por células. Esta afirmación pasó a constituir una de las más amplias y
fundamentales de todas las generalizaciones biológicas conocidas como la Teoría
Celular.
La gran variedad de formas, tamaños y tipos de asociación que presentan las
células, corresponden a una adaptación evolutiva a diferentes ambientes o a
distintas funciones especializadas dentro del organismo celular. Sin embargo,
dentro de la diversidad, las células deben poseer tres estructuras básicas: una
membrana celular, que separe a la célula y, a su vez, la relacione con el medio, el
ADN, que contenga instrucciones para el control de las funciones vitales, para el
crecimiento y especialización celular y una maquinaria metabólica para obtener
energía del medio y utilizarla en la mantención de los procesos vitales.
Estos tres requisitos básicos, sólo se cumplen en dos formas de organización de
distinta complejidad: la organización procarionte y el eucarionte.

III. Experimento 1. Observación de célula humana

3.1 Materiales.
 Portaobjetos
 Lanceta estéril
 Alcohol
 Piseta con agua destilada
 Puente de tinción
 Colorante Wright
 Aceite de inmersión
 Microscopio compuesto
3.2 Procedimiento.
a) Realización del frotis o extensión sanguínea
1. Con la lanceta estéril realizar una punción en el dedo medio

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2. Se deposita una gota de sangre a 1cm del borde derecho del portaobjeto
3. Sujetando el portaobjeto con la mano izquierda, el otro con la mano derecha se
apoya este último sobre el primero con un ángulo de 45º
4. Se hace retroceder el portaobjetos de la mano derecha hasta la gota de sangre,
esta se extiende por capilaridad. Se lleva el portaobjetos hacia adelante con
decisión.
5. La extensión no debe llegar a los bordes, ni al derecho ni al izquierdo, ya que
las células más voluminosas se quedarían en los bordes; por ello antes de
llegar al final se eleva la mano derecha.
6. Dejar secar el frotis.

b) Tinción con colorante Wright

1. Colocar el frotis sobre el puente de coloración

2. Cubrir con III gotas del colorante de Wright.
3. Lavar con agua destilada
4. Secar al aire
5. Observar con el objetivo de 100X y aceite de inmersión
6. Anotar y dibujar sus observaciones.

IV. Experimento 2. Observación de mohos

4.1 Materiales.
 Material Biológico: mohos ambientales
 Láminas portaobjetos
 Láminas cubreobjetos
 Azul de metileno
 Tijera

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4.2 Procedimiento.
a) Colocar una gota de azul de metileno en la superficie de una lámina
portaobjetos
b) Con ayuda de una cinta adhesiva, extraer fracciones de mohos ambientales y
colocar en la lámina portaobjetos del punto a).
c) Observar al microscopio con el objetivo de 10X y 40X
d) Anotar y dibujar sus observaciones

V. Experimento 3. Observación de levaduras

5.1 Materiales.
 Levadura Saccharomyces cerevisiae
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Solución salina fisiológica
 Microscopio óptico compuesto
 Colorante vital (azul de metileno)
 Aceite de inmersión

5.2 Procedimiento.
1.- Coloca una gota de solución salina fisiológica en un portaobjeto limpio
2.- Con un asa de siembra prepara una suspensión de levaduras en solución salina
fisiológica
3.- Coloque una porción de la suspensión en un portaobjeto limpio y cubra la
suspensión con un cubreobjetos, luego realice las observaciones con el objetivo
de 10X y 40X
4.- La porción restante de la suspensión fije suavemente a la llama
5.- Posteriormente se tiñe con III gotas de azul de metileno durante 5 minutos.
6.- Lave con agua destilada y seque cuidadosamente con papel de filtro
7.-Observar al microscopio con el objetivo de inmersión 100X y aceite de
inmersión.
8.- Anotar y dibujar sus observaciones

VI. CUESTIONARIO
1. Mencione las diferencias estructurales entre las células eucariotas y
procariotas
2. Clasifica las células observadas en procariotas y eucariotas.
3. Describa el fundamento de la tinción Wright y de Giemsa

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