Ácidos Nucleicos

• Importância:

- O Ácido Desoxirribonucléico (DNA) armazena a informação genética da célula.

- O Ácido Ribonucléico (RNA) participa do fluxo da informação genética, ou seja,
dos processos de transcrição e tradução que resultam em síntese protéica.

• Estrutura:

- Os Ácidos Nucleicos são polímeros lineares de Nucleotídeos.

NUCLEOTÍDEO = BASE NITROGENADA + PENTOSE + FOSFATO

(PURINA / PIRIMIDINA) (RIBOSE / DESOXIRRIBOSE)

BASE
NITROGENADA
FOSFATO

PENTOSE ADENINA GUANINA

PURINAS

CITOSINA TIMINA URACILA

PIRIMIDINA PURINA (c)
PIRIMIDINAS

A base nitrogenada está ligada covalentemente (pelo N1 das pirimidinas e

pelo N9 das purinas) através de uma ligação N-glicosídica ao C1’da pentose e o
fosfato está esterificado a OH do C5’ da pentose.

OBS: NUCLEOTÍDEO – FOSFATO = NUCLEOSÍDEO

* Nucleotídeos do DNA X Nucleotídeos do RNA

DNA RNA

PURINAS ADENINA E GUANINA

PIRIMIDINAS CITOSINA E TIMINA CITOSINA E URACILA

PENTOSE DESOXIRRIBOSE RIBOSE

DESOXIADENOSINA DESOXIGUANOSINA DESOXITIMIDINA DESOXICITIDINA

DESOXIADENILATO DESOXIGUANILATO DESOXITIMIDILATO DESOXICITIDILATO

DESOXIRRIBONUCLEOTÍDEOS

ADENOSINA GUANOSINA URIDINA CITIDINA

ADENILATO GUANILATO URIDILATO CITIDILATO

RIBONUCLEOTÍDEOS
* Outros nucleotídeos:

ATP (ADENOSINA 5´-TRIFOSFATO) GMP (DESOXIGUANOSINA 3´-MONOFOSFATO)

- Nucleotídeos sucessivos estão unidos covalentemente por ligações fosfodiéster
3´
5´entre as pentoses para formar uma cadeia linear de ácido nucleico.
Especificamente, a OH 3´da pentose de um nucleotídeo é esterificada a um
grupamento fosfato, que, por sua vez, junta-se à OH 5´da pentose do nucleotídeo
adjacente. Desta forma, o esqueleto dos ácidos nucléicos consiste de resíduos
fosfato e pentose alternados. As bases características podem ser consideradas
como grupos laterais unidos ao esqueleto em intervalos regulares. Uma cadeia
de DNA ou RNA tem polaridade. Uma extremidade da cadeia tem uma OH
5´ligada a um fosfato, enquanto a outra ponta tem uma OH 3´, nenhuma delas
ligada a outro nucleotídeo. Por convenção, a seqüência de bases é escrita no
sentido 5´
3´.
DNA RNA
EXTREMIDADE 5´

LIGAÇÃO
FOSFODIÉSTER

OS ESQUELETOS
TANTO DO DNA
QUANTO DO RNA SÃO
HIDROFÍLICOS.
O – H OU – OH DOS
RESÍDUOS DE PENTOSE
FORMAM PONTES DE
HIDROGÊNIO COM A
ÁGUA.

EXTREMIDADE 3´
- Todo o DNA celular é constituído de duas cadeias helicoidas muito longas de
nucleotídeos enroladas ao redor de um eixo comum. Esta estrutura tridimensional
é chamada de Dupla hélice.
* O esqueleto pentose-fosfato de cada filamento está do lado externo da dupla
hélice, enquanto as bases nitrogenadas estão do lado interno.
* As duas cadeias são mantidas juntas por pontes de hidrogênio entre os pares
de bases (purina-pirimidina): adenina-timina e guanina-citosina. Assim, um
filamento de uma dupla hélice é complementar ao outro.
* Os dois filamentos da dupla hélice correm em sentidos opostos.
* O empilhamento dos pares de bases contribui para a estabilidade da dupla
hélice de dois modos: Pares adjacentes se atraem por forças de van der Waals;
As interações hidrofóbicas das bases resultam na exposição das superfícies mais
polares à água circundante.
MODELO DE WATSON E CRICK PARA A ESTRUTURA DO DNA
- A maioria das moléculas de RNA é unifilamentar, mas muitas contêm longas
regiões de dupla hélice que surgem pelo dobramento da cadeia em forma de
grampo de cabelo.

• Replicação semiconservativa do DNA:

- A seqüência de bases de um filamento da

dupla hélice determina exatamente a seqüência
do outro. Uma guanina em um filamento está
sempre pareada com uma citosina do outro, e
assim por diante.

- A separação de uma dupla hélice em suas

duas cadeias componentes produz dois moldes
unifilamentares sobre os quais podem ser
construídas novas duplas hélices, cada uma das
quais com a mesma sequência de bases que a
dupla hélice parental.

- À medida que o DNA se replica, uma das

cadeias de cada molécula filha de DNA é recém-
sintetizada, enquanto a outra é transmitida
inalterada a partir da molécula parental de DNA.

- O DNA se replica pela ação das enzimas DNA

polimerases que sintetizam novos filamentos no
sentido 5´
3´.
• Transcrição e Tradução = Expressão gênica:

- Os genes especificam os tipos de proteínas que são sintetizadas pelas células,

mas o DNA não é o molde direto para a síntese de proteínas. O fluxo da
informação genética nas células normais é do DNA para RNA e daí para proteína.

- Expressão gênica é a transformação da informação no DNA em moléculas

funcionais.

- A síntese de RNA a partir de uma molécula de DNA é chamada de transcrição

e ocorre no núcleo.
* As células contêm vários tipos de RNA: RNA mensageiro (mRNA), RNA
transportador (tRNA) e RNA ribossômico (rRNA).
mRNA: É o molde para a síntese de proteínas ou tradução.
tRNA: Leva aminoácidos em uma forma ativada ao ribossomo para a formação
das ligações peptídicas, em uma seqüência ditada por um molde de mRNA.
rRNA: É o principal componente dos ribossomos, tendo tanto um papel catalítico
como estrutural na síntese protéica.
* Todo o RNA celular é sintetizado pelas RNA polimerases de acordo com as
instruções dadas por moldes de DNA. O sentido da síntese é 5´
3´
mRNA

FILAMENTO MOLDE
DE DNA

FILAMENTO
CODIFICANTE DE
DNA

- A síntese de uma proteína a partir de um molde de RNA á chamada de

tradução e ocorre no citoplasma.
* O código genético é a relação entre a sequência de bases no DNA (ou mRNA
transcrito) e a seqüência de aminoácidos nas proteínas.
* Um aminoácido é codificado por um grupo de 3 bases ou códon.
* A seqüência de bases é lida continuamente a partir de um ponto fixo.
* Alguns aminoácidos são codificados por mais de um códon, pois existem 64
possíveis trincas de bases e apenas 20 aminoácidos.
TRANSCRIÇÃO / TRADUÇÃO – PROCARIONTES X EUCARIONTES
 TRADUÇÃO – SÍNTESE DE PROTEÍNAS

SUBUNIDADE
GRANDE DO
RIBOSSOMO

tRNA +AMINOÁCIDO

mRNA

SUBUNIDADE
PEQUENA DO
INÍCIO RIBOSSOMO

LIGAÇÃO
PEPTÍDICA

ALONGAMENTO

POLIPEPTÍDEO

FIM
• A Tecnologia do DNA recombinante:
- A tecnologia do DNA recombinante revolucionou a bioquímica desde que surgiu
na década de 1970. A constituição genética dos organismos pode agora ser
mudada com exatidão de modos programados.

- Requisitos para o desenvolvimento desta tecnologia:

* Enzimas que possam cortar, juntar e sintetizar o DNA. As enzimas de restrição
cortam moléculas bem longas de DNA em fragmentos específicos que podem ser
manipulados; DNA ligases unem os fragmentos. As enzimas de restrição e DNA
ligases são instrumentos importantes na formação de moléculas de DNA
recombinante. DNA polimerases sintetizam filamentos de DNA a partir de um
molde. A existência de DNA polimerases termoestáveis permite a amplificação de
fragmentos de DNA.
* Vetores, como os plasmídeos bacterianos, que inserem a molécula de DNA
recombinante em bactérias, modificando alguma característica das mesmas.
* Pareamento de bases complementares. Este fato permite que seqüências
complementares se reconheçam e se liguem uma à outra. O pareamento de
bases é usado para construir novas combinações de DNA, bem como para
detectar e ampliar determinadas seqüências.

CLONAGEM GÊNICA DE UM
FRAGMENTO DE DNA EUCARIÓTICO
EM CÉLULAS BACTERIANAS
 (b)

(a) REAÇÃO EM CADEIA COM POLIMERASE (PCR): Permite amplificar um fragmento de dna em 1
bilhão de vezes. uma molécula do dna pode ser amplificada a quantidades que permitem a
caracterização e manipulação. esta técnica poderosa está sendo usada para detectar
patógenos e doenças genéticas, para determinar a fonte de um cabelo deixado na cena de um
crime e recuperar genes de fósseis.

(b) IDENTIFICAÇÃO DE UM CLONE COM O SEGMENTO DE DNA DESEJADO (HIBRIDIZAÇÃO): A sonda

do dna radioativo hibridiza apenas com o DNA homólogo. A sonda radioativa anelada é
revelada por auto-radiografia. Quando as colônias marcadas forem reveladas, as colônias
correspondentes na placa de agar original podem ser usadas como fonte do DNA clonado para
outros estudos.