SIEMBRA BACTERIANA

Iván Ramírez
CÓDIGO: 18282020

Keiber Álvarez
CODIGO: 18281068

Gerson Iscala
CODIGO: 18282020

Katherine Cuberos
CODIGO: 18282043

Belkis
BIÓLOGA QUÍMICA
DOCENTE

UNIVERSIDAD DE SANTANDER
SEDE CÚCUTA
PROGRAMA DE SALUD
FACULTAD DE ENFERMERÍA
11/05/19
 INTRODUCCIÓN
A través de los años, los humanos hemos sido susceptibles a múltiples
“microorganismos” que son los causantes de un sin número de “enfermedades”,
nosotros como profesionales del área de la salud debemos identificar, conocer,
diferenciar, adquirir e interpretar los resultados sobre estos organismos
microscópicos para poder llevar a cabo un diagnóstico, un tratamiento y un
seguimiento al paciente para mejorar su calidad de vida y su estado de salud, en
este trabajo investigativo realizado por estudiantes de enfermería de segundo
semestre de la Universidad de Santander haremos hincapié a la bacteria
Escherichia coli, ya que esta posee una cepas que han adquirido genes que les
permiten ocasionar infecciones en sitios estériles del cuerpo humano y han
afectado al menos un 80 % al mundo según los últimos datos epidemiológicos.
 RESUMEN
La bacteria Escherichia coli fue inicialmente aislada y descrita por el pediatra
alemán Escherich en 1885, quien demostró su existencia como huésped habitual
del intestino. La denominó Bacterium coli commune, que puede traducirse como
“bacteria común del colon”, fue en 1919 cuando Castellani y Chalmers le dieron su
denominación definitiva en homenaje a Escherich. Escherichia se convirtió
rápidamente en el género típico de la familia de las Entero bacteriáceas y E. coli
en la especie más conocida de este género.
La Escherichia coli se caracteriza por poseer bacilos Gram negativos, no
esporulante, producción de indol a partir de triptófano, no utilización de citrato
como fuente de carbono y no producción de acetoína. Además, fermenta la
glucosa y la lactosa con producción de gas, la cubierta de ella tiene tres partes
entre estas esta la membrana citoplasmática, la membrana externa y, entre
ambas, un espacio periplásmico constituido por péptido-glucano. Esta última
estructura confiere a la bacteria su forma y rigidez, y le permite resistir presiones
osmóticas ambientales relativamente elevadas.
Escherichia coli es una bacteria mesófila, es decir que descompone la materia
orgánica en elevadas temperaturas, la temperatura límite de crecimiento de esta
bacteria se sitúa alrededor de 7 ºC, lo que indica que un control eficaz de la
cadena de frío en las industrias alimentarias es esencial para evitar el crecimiento
de esta bacteria en los alimentos, sin embargo la Escherichia coli es sensible a
temperaturas superiores a 70 ºC, a partir de la cual son fácilmente eliminadas; por
ello, es muy importante la pasteurización de alimentos como la leche, zumos y
demás para garantizar su eliminación.
La Escherichia coli presenta múltiples características y facetas, y constituye la
categoría bacteriana mejor estudiada, aunque el conocimiento de las cepas
salvajes o variante fenotípicas es parcial en la actualidad; posee facultades de
adaptación de esta bacteria son poco comunes, debido a la adquisición de nuevos
genotipos a partir de plásmidos o pequeña molécula de ADN, bacteriófagos, y
otros elementos que transmiten su material genético. Además, su conocida
capacidad de ubicuidad (estar presente en todos lados) favorece la aparición
reiterada de cepas con nuevas propiedades, incluyendo capacidades patógenas
no fácilmente reconocibles.
La bacteria se adhiere primeramente a una célula intestinal blanco uniéndose y
encajando con su receptor, llamado receptor translocador de intimina (Tir, por sus
siglas en inglés), situado en la membrana de la célula epitelial huésped. La
bacteria se une a las células intestinales al unir sus proteínas intiminas a las
proteínas Tir insertadas. Se ha observado que el complejo proteico presenta
prolongaciones rígidas con estructuras de sujeción situadas en el extremo de la
intimina, que se estiran para agarrar al receptor, los brazos de la proteína están
doblados de tal forma que son capaces de aferrar la bacteria a la superficie, Estos
últimos incluyen un número de toxinas secretadas, sistemas de adquisición de
hierro, adhesinas y antígenos capsulares (3). Las proteínas secretadas, entre las
que se incluye la toxina proteica alfa-hemolisina (HlyA) y el factor necrotizante
citotóxico 1 (CNF-1), pueden alterar las cascadas de señalización de las células
huésped, alterando la respuesta inflamatoria e induciendo la muerte celular o
alteración metabólica.
Ahora bien ya conociendo un poco sobre nuestra bacteria productora de toxina
Shiga que ocasiona un impacto en la salud pública, vamos a describir algunos de
sus síntomas más frecuentes basándonos en la Organización Mundial de la Salud.

SINTOMAS
Entre los síntomas de la enfermedad causada por E. coli productora de toxina
Shiga destacan los calambres abdominales y la diarrea, que puede progresar en
algunos casos a diarrea sanguinolenta (colitis hemorrágica). También puede haber
fiebre y vómitos. El periodo de incubación varía entre tres y ocho días, con una
mediana de tres a cuatro días. La mayoría de los pacientes se recuperan en el
término de diez días, pero en un pequeño porcentaje de los casos (especialmente
niños pequeños y ancianos) la infección puede conducir a una enfermedad
potencialmente mortal, como el síndrome hemolítico urémico (SHU). El SHU se
caracteriza por una insuficiencia renal aguda, anemia hemolítica y trombocitopenia
(deficiencia de plaquetas).
Nosotros los estudiantes de enfermería de segundo semestre de la Universidad de
Santander, bajo la supervisión de nuestra Maestra Bacterióloga profesional y una
auxiliar idónea con años de experiencia y cumpliendo con las normas del
laboratorio, realizamos una siembra bacteriana por agotamiento de la Escherichia
Coli, utilizando recursos y materiales brindados por la Universidad de Santander
además una flexibilidad horaria para el desarrollo de este procedimiento, en cual
se utilizó:
Equipo de protección personal: Es todo equipo, aparato o dispositivo
especialmente proyectado y fabricado para preservar el cuerpo humano, en todo o
en parte, de riesgos específicos de accidentes del trabajo o enfermedades
profesionales.
El agar: es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de
medios de cultivo, los cuales deben estar exentos de todo microorganismo
contaminante para facilitar la identificación, crecimiento y desarrollo de otros
microorganismos que crecen en sustancias alimenticias artificiales preparadas en
laboratorios, denominados cultivo.
Para el crecimiento del cultivo, se requieren nutrientes muy complejos, por eso la
mayoría de medios de cultivo, tienen como base infusión de extractos de carne o
peptona y se le agregan demás ingredientes, para este se utilizó a base de sangre
de cordero.
Colonia bacteriana: A partir de una muestra de microorganismo procedente de un
cultivo, cuya finalidad no es otra que la de observar las características del
microorganismo mediante su visualización a través del microscopio óptico.
Caja de Petri: La Caja Petri o Placa de Petri es un instrumento de laboratorio el
cual puede ser de cristal o de plástico, que consta de una base circular.
Asa de Siembra: Las asas de siembra se utilizan normalmente para trasvasar
muestras de microorganismos en suspensión. Ideales para uso en condiciones
que requieren esterilidad y no es posible flamear el asa, su superficie libre de
rugosidades asegura un suave deslizamiento sin peligro de dañar la superficie del
medio de cultivo.
Mechero de Bunsen: Es un instrumento utilizado en laboratorios para calentar
muestras y sustancias químicas.
Colorantes: Los colorantes son sustancias de origen químico o biológico,
generalmente tintes, pigmentos, reactivos u otros compuestos, empleados en la
coloración de tejidos microorganismos para exámenes microscópicos, debiendo
tener al menos, un grupo cromóforo que le proporcione la propiedad de teñir.
Microscopio Óptico: El microscopio es un aparato óptico que incrementa el
tamaño de la imagen que se obtiene de una muestra translúcida; consta de un
sistema de iluminación, un sistema óptico y una parte mecánica.
Aceite de Inmersión: compuesto orgánico a base de benzonato de bencilio usado
entre el lente frontal y el cubre objetos de vidrio, que permiten angular los rayos
difractados para incrementar y dar mayor resolución.
Porta y Cubre Objetos: Los porta objetos de microscopio son esenciales y son la
plataforma para sus muestras. Nuestros porta-objetos de microscopio
proporcionan la máxima nitidez de imagen, lo que le permite llegar a un
diagnóstico preciso.
Gradilla: Una gradilla es una herramienta que forma parte del material de
laboratorio es utilizada para sostener y almacenar gran cantidad de tubos de
ensayo.
Jarra de Anaerobiosis: es un recipiente ideal para realizar incubaciones en
anaerobiosis ya que en su soporte de acero inoxidable se pueden instalar bolsas
de generación de atmósfera libre de oxígeno.
Incubadora: es un dispositivo que sirve para mantener y hacer crecer cultivos
microbiológicos o cultivos celulares. La incubadora mantiene la temperatura, la
humedad y otras condiciones en grado óptimo, tales como el contenido de dióxido
de carbono (CO2) y de oxígeno en su atmósfera interior.

PROCEDIMIENTO
Preparar el material necesario en la mesa de trabajo, colocarse el equipo de
protección personal, después encendimos el mechero Bunsen justo antes de
empezar con la práctica, tomamos el asa de siembra la esterilizamos por
flameado, agarramos el tubo con medio líquido de la colonia bacteriana de la
Escherichia Coli, después Introducimos el asa de siembra en el tubo en un angulo
vertical, Cerramos el tubo con medio líquido, lo dejamos en la gradilla, tomamos la
placa de Petri, sembramos el inóculo en la placa de petri con movimientos en
forma de línea recta, cuatro exactamente de manera horizontal sin tocarse las
líneas entre ellas girando la placa en pocos movimientos con la misma mano,
hasta complementar una forma de s, posteriormente le pusimos la tapa a la caja
de Petri, esterilizamos del asa de siembra, nosotros los estudiantes realizamos
dos siembras ya que uno era para aplicar la respiración aerobia quien fue
depositado en la incubadora cumpliendo con las condiciones generales y la otra la
respiración anaerobia por medio de la jarra anaeróbica, después de un día fuimos
a identificar la bacteria, aplicamos una tinción diferencial, la coloración de gram
paso a paso iniciando con el cristal violeta lavando, aplicando el lugol, lavando,
alcohol acetona, lavando, safranina, lavando posterior a esto se dejó secar ambas
muestras, pudiendo observar en el microscopio con aceite de inmersión a 100x y
generar unos resultados:
Aerobia

Esta muestra fue almacenada en la incubadora

cumpliendo las condiciones generales,
posteriormente a la tinción de gram podemos
observar con el objetivo 100x y aceite de inmersión
presencia de bacilos en forma de bastón
gramnegativos empalizados de color rosado.

Anaerobia

Esta muestra fue almacenada en la jarra de

anaerobiosis, posteriormente se aplicó la tinción de
gram observando con el objetivo 100x y aceite de
inmersión presencia de cocos y bacilos de color
rosado, empalizados gramnegativos.
Podemos observar que la Escherichia coli crece en medios aerobios y anaerobios
por lo cual la Organización Mundial de la Salud ha realizado medidas de control en
todas las etapas de la cadena alimentaria, desde la producción agropecuaria en la
granja hasta la elaboración, fabricación y preparación de los alimentos en las
cocinas tanto de establecimientos comerciales como de los hogares para
aplicarlas y prevenir una infección de este agente patógeno.

INDUSTRIA
La aplicación de unas buenas prácticas de higiene durante el sacrificio reduce la
contaminación de las carcasas por heces, pero no garantiza la ausencia de
Escherichia coli productora de toxina Shiga de los productos, el único método
eficaz para la eliminación de E. coli productora de toxina Shiga de los alimentos es
la aplicación de un tratamiento bactericida, como el calentamiento (como por
ejemplo mediante cocción o pasteurización) o la irradiación.

HOGARES
Las medidas de prevención de la infección por la Escherichia coli son similares a
las recomendadas para otras enfermedades transmitidas por los alimentos. Las
prácticas básicas de buena higiene de los alimentos, descritas en las Cinco claves
para la inocuidad de los alimentos que ha establecido la OMS, pueden prevenir la
transmisión de los agentes patógenos responsables de muchas enfermedades
transmitidas por los alimentos:
 Mantenga la limpieza.
 Separe alimentos crudos y cocinados.
 Cocine completamente.
 Mantenga los alimentos a temperaturas seguras.
 Use agua y materias primas seguras.
Hay que lavar bien las frutas y verduras, especialmente si se comen crudas; a ser
posible, deberán pelarse. Las poblaciones vulnerables (por ejemplo los niños
pequeños y las personas mayores) deben evitar el consumo de productos cárnicos
crudos o poco cocidos, leche cruda y productos elaborados con leche cruda.
Se recomienda encarecidamente el lavado frecuente de las manos, sobre todo
antes de preparar o consumir alimentos y después de defecar, especialmente en
el caso de los cuidadores de niños pequeños, las personas mayores y los
inmunodeprimidos, pues la bacteria puede transmitirse de persona a persona, así
como a través de los alimentos, el agua y el contacto directo con animales, es
importante también proteger esas aguas, al igual que las fuentes de agua de
bebida, de los desechos animales.

PRODUCTORES DE FRUTAS Y VERDURAS

Las prácticas esenciales para evitar la contaminación microbiana de productos
frescos durante la plantación, el crecimiento, cosecha y almacenamiento.
 Practicar una buena higiene personal.
 Proteger los campos de la contaminación fecal por animales.
 Utilizar residuos fecales tratados.
 Evaluar y gestionar los riesgos del agua de riego.
 Mantener limpios y secos los equipos de cosecha y las instalaciones de
almacenamiento.
 Mantener limpios y secos los equipos de cosecha y las instalaciones de
almacenamiento.
 CONCLUSIÓN
Teniendo en cuenta la información y la práctica realizada, la cual consto de
sembrar una bacteria “Echerichia coli” en una tabla de Petri con el fin de
aplicar la respiración aerobia en una incubadora y la anaerobia en la jarra
anaeróbica, y dándoles su respectivo tiempo, podemos observar que la
bacteria crece en ambos medios.

BIBLIOGRAFÍA
 http://www.betelgeux.es/blog/2016/01/19/escherichia-coli-caracteristicas-
patogenicidad-y-prevencion-i/
 Bakás, Laura, Maté, Sabina, Vázquez, Romina, Herlax, Vanesa,
Mecanismo de acción de la toxina alfa hemolisina de Escherichia coli. Acta
Bioquímica Clínica Latinoamericana [en línea] 2013, 47 (abril-junio): [Fecha
de consulta: 11 de mayo de 2019] Disponible
en:<http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=53529348012> ISSN 0325-2957
 Souza, Valeria, Castillo, Amanda, Rocha, Martha, Sandner, Luisa, Silva,
Claudia, Eguiarte, Luis E., Ecología evolutiva de escherichia coli.
Interciencia [en linea] 2001, 26 (octubre) : [Fecha de consulta: 11 de mayo
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ISSN 0378-1844
 https://www.who.int/es/news-room/fact-sheets/detail/e-coli
 https://mdmcientifica.com/agar-microbiologia/