Fundamentos de Toxi QFB 2019

Primera edición: 2017
Fecha de edición: 8 de septiembre de 2017

Primera reproducción: 3 de mayo de 2019
D.R. 2019 © UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
Ciudad Universitaria, Alcaldía Coyoacán,
C.P. 04510, Ciudad de México.
ISBN: 978-607-02-9781-6
Tamaño: 35.0 MB
Tipo de impresión: PDF
“Prohibida la reproducción total o parcial por cualquier medio,

sin la autorización escrita del titular de los derechos patrimoniales”.
Hecho en México
Contenido
Capítulo 1. Aspectos históricos y definiciones básicas 1
Capítulo 2. Etapa de exposición 9
Capítulo 3. Etapas toxocinética y toxodinámica 18
Capítulo 4. La biotransformación de xenobióticos 53
Capítulo 5. Estrés oxidante 82
Capítulo 6. Mutagénesis química 104
Capítulo 7. Carcinogénesis química 123
Capítulo 8. Teratogénesis química 136
Capítulo 9. Toxicología de metales 151
Capítulo 10. Toxicología Preclínica 171
Prólogo
El presente material fue elaborado como un recurso de apoyo para el aprendizaje de la Toxicología en la carrera de Química Farmacéutico Biológica de la
Facultad de Química, UNAM. Está constituido por diez capítulos que abarcan casi la totalidad del programa oficial de esta asignatura. El primer capítulo
es una introducción que comprende aspectos históricos y la clasificación de agentes tóxicos. El segundo y tercero incluyen las bases para la compren-
sión de las tres etapas de la acción tóxica: exposición, toxocinética y toxodinámica. El cuarto apartado está constituido por los conceptos, definiciones
y ejemplificaciones de las reacciones de biotransformación y su relación con la bioactivación de moléculas orgánicas. Del quinto al octavo capítulos
se presentan los mecanismos de acción de mayor recurrencia entre los agentes toxicológicos: estrés oxidante, mutagénesis, carcinogénesis, terato-
génesis. Finalmente, los dos restantes, fueron elaborados como tópicos particulares para un grupo determinado de sustancias (metales y fárma-
cos).
El material fue estructurado con un enfoque que puntualiza las características estructurales y propiedades fisicoquímicas de los xenobióticos
para tratar de explicar su comportamiento biológico. En este sentido, la presente obra resulta novedosa por la forma de abordar los diferen-
tes tópicos cubiertos, dirigido a estudiantes de Ciencias Químico Farmacéuticas.
Asimismo, se pretende reforzar el proceso enseñanza-aprendizaje de los universitarios que cursan la materia de Toxicología, quienes
contarán con un recurso de partida que les proporcione las herramientas necesarias para entender la información que se publica en
esta área del conocimiento, mismas que se requieren en el campo profesional. Los contenidos de los diferentes tópicos se selecciona-
ron para incidir en el cumplimiento de los siguientes requerimientos establecidos en el Perfil de Egreso de la licenciatura de
Química Farmacéutico Biológica:
a) Desarrollar nuevas formulaciones con compuestos químicos de interés farmacéutico.
b) Adecuar, adaptar y optimizar las formulaciones de medicamentos ya conocidos.
c) Realizar trabajos de investigación dirigidos a la obtención de nuevas especies químicas con
fines terapéuticos.
d) Aplicar métodos de evaluación para dictaminar y asegurar la calidad de los productos resultantes
de procesos farmacéuticos, bioquímico clínicos y biológicos.
e) Interactuar con otros miembros del equipo de salud para asegurar el uso racional de los medicamentos
así como informar y orientar al paciente.
f) Implantar redes de distribución de medicamentos y servicios, así como el manejo y destino de los
productos devueltos en farmacias hospitalarias y comunitarias.
Esperamos que la obra cumpla sus objetivos y sea de utilidad.
Los autores
Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM
Capítulo 1. Aspectos históricos y definiciones 1.1. Aspectos históricos
básicas Mucha de la historia de la toxicología ha quedado asentada en manuscritos

de Medicina, así como en aquellas narraciones que tratan sobre
Francisco Hernández-Luis, María Elena Bravo-Gómez, Sandra María envenenamientos, suicidios, asesinatos, y ejecuciones.2
Centeno-Llanos, Perla Carolina Castañeda-López, Circe Mouret- Tanto en el papiro egipcio Ebers, que data aproximadamente de
Hernández, Alejandra Quijano-Mateos 1500 años a.C., como en los trabajos publicados entre los años 400 a 250
años a.C. por Hipócrates, Aristóteles y Teofrastus, se incluyeron menciones
de algunos venenos conocidos por aquellas épocas. El griego Nicander
Contenido
elaboró dos trabajos, uno de ellos trata sobre venenos animales (Therica) y
1.1. Aspectos históricos…………………………………………….1
el otro sobre antídotos para tóxicos de plantas y animales (Alexipharmica).
1.2. Divisiones de la toxicología……………………………………2 El primer intento de clasificar a las plantas de acuerdo con sus efectos
1.2.1 Categorías……………………………………………….…..2 terapéuticos y tóxicos fue realizada por el griego Dioscorides, empleado por
1.2.2 Áreas especializadas...…………………………………….3 el emperador romano Nerón, en el año 50 d.C. Actualmente, se reconoce
1.3. Definición de algunos términos……………………………….3 que los primeros avances históricos de la toxicología se dieron en las
épocas de Galeno (131-200 años d.C.) y Paracelso (1493-1541 años d.C.).
1.4. Clasificación de los agentes tóxicos…………………………5
Fue este último quien postuló que “todas las sustancias pueden ser
Bibliografía……………………………………………………………8
venenos, su dosificación hace la diferencia para que se comporte como un
veneno o un remedio”, con esta afirmación estableció una de las premisas
actuales de la toxicología, la relación dosis-respuesta.2
La toxicología estudia las interacciones dañinas entre sustancias químicas y Otro de los personajes fue M. J. B. Orfila (1787-1853), oriundo de
sistemas biológicos. En la vida diaria, los seres humanos, los animales y los Menorca (isla de España en el archipiélago de Beleares). Estudió
vegetales están expuestos a una variedad, cada vez mayor, de agentes Matemáticas y Química en Valencia. Sus primeros estudios los inició con el
químicos, que van desde sustancias inorgánicas (metales), hasta moléculas arsénico y publicó el Tratado sobre los venenos minerales, vegetales y
orgánicas complejas. El estudio de los efectos bioquímicos, fisiológicos y animales. Toxicología general considerada a la luz de los conocimientos de
patológicos de tales agentes constituyen el campo de estudio de los patología y medicina legal (París, 1814).2 En esta obra resalta la
toxicólogos.1 importancia del análisis químico en los estudios de toxicología
En este capítulo se presentan los conceptos y definiciones básicas (http://mateuorfila.blogspot.mx/). Unos años después, Claude Bernard
que permitirán comprender los tópicos posteriores que conforman el (1813-1878), fisiólogo francés, publicó Introducción al estudio de la
temario del curso. medicina experimental. En esta obra, propone el conocimiento de los
1
Capítulo 1. Aspectos históricos y definiciones básicas Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM
mecanismos de toxicidad para entender el funcionamiento de un sistema

Tabla 1.2. Divisiones de la toxicología.
biológico. Identificó el sitio de acción del curare en la terminación nerviosa
de la unión neuromuscular.1, 3 Categorías Áreas especializadas
Aunque posteriormente se presentaron varios acontecimientos que Descriptiva Forense

Mecanística Clínica
fueron dando las bases de la toxicología, esquemáticamente podemos Regulatoria Ambiental
dividir el desarrollo histórico de esta disciplina en tres etapas cuyas
A continuación, se mencionan de manera resumida cada una de las
características se presentan en la Tabla 1.1.1
categorías y áreas especializadas antes indicadas.
Tabla 1.1. Etapas históricas de la toxicología.
1.2.1. Categorías
Etapa Investigación aplicada Investigación básica
Descriptiva. Abarca el desarrollo de pruebas toxicológicas en animales para
I Venenos en seres Mecanismos de acción
Tradicional humanos, orígenes, fisiológicos: curare, producir mayor información en la evaluación del riesgo que se pueda
(-1900) efectos y antídotos. atropina. extrapolar en seres humanos o al impacto ecológico.4
II Aspectos forenses, Mecanismos de acción
Moderna industriales, bélicos, bioquímicos (inhibición Mecanística. Se ocupa de la elucidación de los mecanismos biológicos por
(1900-1945) errores clínicos. enzimática).
los cuales las sustancias ejercen sus efectos tóxicos.5
Intoxicación crónica en Mecanismos de acción
III
poblaciones, químicos fisico-
Contemporánea Regulatoria. Tiene la responsabilidad de decidir sobre las bases de datos
contaminantes químicos.
(1946- )
ambientales, mutágenos, proporcionados por las categorías Descriptiva y Mecanística, si un fármaco
carcinógenos,
posee bajo riesgo para ser comercializado o usarlo legalmente. En el
teratógenos, enervantes.
campo de los estudios epidemiológicos elabora y hace el seguimiento de
IV Establecimiento de bio- Estudio sobre la todos los estudios de evaluación del riesgo (risk assessment).
Época omica marcadores.* interacción de genes y
Toxicogenómica condiciones
ambientales en la En la Figura 1.1 se muestra la integración de las tres categorías
aparición de para los estudios de evaluación del riesgo.
enfermedades*
* https://dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/2555755.pdf La categoría regulatoria también está involucrada en el
establecimiento de estándares para cuantificar la presencia de
1.2. Divisiones de la toxicología contaminantes. Algunas de las organizaciones que se ubican en este
Con el propósito de lograr un mejor entendimiento de las actividades y ámbito son: FDA (Food and Drug Administration), EPA (Environmental
campos de desarrollo de la toxicología, ésta se ha dividido en categorías y Protection Agency), OSHA (Occupational Safety and Health Administration).
1
áreas de especialidad que se listan en la Tabla 1.2.
2
Ante esta entidad se realizan los siguientes trámites relacionados con el

quehacer farmacéutico:
a) Registro de medicamentos alopáticos
b) Registro de productos herbolarios
c) Registro de plaguicidas y nutrientes vegetales
d) Farmacovigilancia (NOM-220-SSA1-2002)
Otra entidad gubernamental que tiene que ver con las actividades
profesionales del farmacéutico es la Secretaría del Medio Ambiente y
Recursos naturales (SEMARNAT; www.semarnat.gob.mx/). Las actividades
reguladas por esta dependencia son:
a) Residuos peligrosos: SEMARNAT: NOM-052, NOM-053, NOM-054
b) Licencia ambiental única para empresas
1.2.2. Áreas especializadas

Forense: involucra la aplicación de las técnicas de Química Analítica para
Figura 1.1. Integración de las categorías para los estudios de evaluación responder a cuestiones médico-legales sobre los efectos dañinos
del riesgo. de los compuestos químicos.1, 3

Clínica: se relaciona con los efectos de sustancias químicas en los
En nuestro país, la Comisión Federal para la Protección contra Riesgos envenenamientos y el tratamiento de personas intoxicadas.1, 3
Sanitarios (COFEPRIS) es la encargada de realizar el trabajo regulatorio. Ambiental: estudia el destino ambiental de sustancias químicas y sus
Esta comisión es un órgano desconcentrado de la Secretaría de Salud con impactos en los ecosistemas y poblaciones humanas.1, 3
autonomía técnica, administrativa y operativa, que tiene como misión
proteger a la población contra riesgos sanitarios, para lo cual integra el 1.3. Definición de algunos términos
ejercicio de la regulación, el control y el fomento sanitario bajo un solo Es necesario definir algunos de los términos de uso frecuente en el campo
mando. de la toxicología con el propósito de interpretarlos adecuadamente a lo
Unifica y aplica las políticas que se definan con este propósito largo de los siguientes capítulos.
(www.cofepris.gob.mx). Algunos lineamientos que sigue están establecidos Fármaco: toda sustancia natural, sintética o biotecnológica, con alguna
por las Normas Oficiales Mexicanas (NOM). actividad farmacológica, que se identifique por sus propiedades
físicas, químicas o acciones biológicas y que reúnan condiciones
3
para ser empleadas como medicamentos o ingredientes del

mismo (http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/073ssa105.html).
Toxón: sustancia que manifiesta efectos dañinos que pongan en peligro la
vida de los individuos.
Las definiciones anteriores no deben tomarse en términos absolutos, ya

que la no actividad, actividad benéfica o actividad tóxica de una sustancia
depende de varios factores, entre los que se encuentra la dosis
administrada, como se indicará más adelante.1
Xenobiótico: toda sustancia extraña al ser viviente, incluye sustancias

benignas o dañinas, excluye vitaminas y hormonas.
Sustancia endógena: es aquella que no es extraña al organismo y a
Figura 1.2. Perfil del comportamiento de una sustancia endógena.
determinadas concentraciones, es necesaria para que el cuerpo
funcione satisfactoriamente.6
Hormesis: fenómeno que presentan algunas sustancias químicas al
En la Figura 1.2 se presenta la importancia que tiene que
manifestar dos diferentes efectos biológicos, los cuales
las sustancias endógenas se mantengan en un cierto rango de
aparecerán dependiendo de la concentración del compuesto
concentración para que no ocasionen daño al individuo. Esta
involucrado (Figura 1.3).
región comprende el estatus de homeostasis (condición estable
en un organismo mediante la existencia de equilibrios dinámicos
En la Figura 1.4 se muestra el ejemplo de comportamiento de hormesis de
que compensan las alteraciones de origen externo o interno).
la sacarina y su relación de incidencia de tumores en ratas hembras.7
Un ejemplo es la glucosa; su concentración en sangre total
debe estar dentro de un rango para que no ocasione
alteraciones al organismo: 65-95 mg/dL sangre total
(http://www.valoresnormales.com/g/glucosa-en-sangre).
Cambios hacia concentraciones inferiores o superiores a
este rango provocan alteraciones al ser humano que llegan a
comprometer su vida.
4
Figura 1.4. Comportamiento de hormesis de la sacarina.
1.4. Clasificación de los agentes tóxicos

Hay varias formas de clasificar a los agentes tóxicos, según la línea de
investigación y las necesidades de los especialistas relacionados con la
toxicología (Tabla 1.3). 3
Los tres criterios frecuentemente utilizados son aquellos que
consideran a la dosis letal media de las sustancias,8 al mecanismo de
acción y al órgano diana (“blanco”) sobre el cual actúan los xenobióticos.
Para el criterio de la dosis letal media se utiliza un rango de valores que
Figura 1.3. Representación del fenómeno de hormesis.
constituyen los rubros de clasificación (Tabla 1.4).
En la Tabla 1.4 se puede visualizar que entre más pequeño sea el
Para la consulta de términos y definiciones adicionales en el campo de la
valor numérico de la DL50, más tóxico será el compuesto. Ejemplos de estos
toxicología existe un glosario publicado por el Departamento de Salud y
valores para varios compuestos se presentan en la Tabla 1.5. Para valores
Servicios Humanos de los Estados Unidos, el cual puede consultarse en:
de fármacos puede consultar https://www.drugbank.ca/
http://sis.nlm.nih.gov/enviro/iupacglossary/glossaryp.html
5
Tabla 1.3. Criterios de clasificación de agentes tóxicos. Tabla 1.5. Ejemplos de valores de DL50 de algunos compuestos.
Por el órgano diana Por su uso Por su origen
Xenobiótico DL50 (mg/kg de Especie (ruta)
Hígado Pesticida Animal
peso)
Riñón Aditivo de alimentos Vegetal
Cerebro Disolvente Mineral Etanol9 10250.00 Rata (oral)
Diacetato de etilenglicol9 6850.00 Rata (oral)
Por sus efectos Por su mecanismo de Por su dosis letal Cloruro de sodio9 3750.00 Rata (oral)
acción media Sulfato ferroso9 1520.00 Ratón (oral)
Carcinógeno Unión a biomoléculas Muy tóxico Morfina9 500.00 Ratón (sc)
Teratógeno Alteración en la Prácticamente no Fenobarbital9 162.00 Ratas (oral)
homeostasis del calcio tóxico Estricnina9 5.00 Ratas (oral)
Nicotina9 0.30 Ratón (iv)
TCDD (dioxina)1 0.001
Toxina del C. botulinium1* 0.00001
Tabla 1.4. Clasificación según el valor de la dosis letal media.1 Ricina9** 0.00001 Ratón (ip)
Término DL50 (roedores) sc: subcutáneo; ip: intraperitoneal; iv: intravenosa; TCDD (2,3,7,8-
tetraclorodibenzo-p-dioxina).
Prácticamente no tóxico >15 g/kg de peso corporal
*inhibe la liberación de neurotransmisores en la unión sináptica;
Ligeramente tóxico 5-15g/kg de peso corporal
**lectina hemoaglutinante
Moderadamente tóxico 0.5-5 g/kg de peso corporal
Muy tóxico 50-500 mg/kg de peso corporal
Extremadamente tóxico 5-50 mg/kg de peso corporal
Súper tóxico <5 mg/kg de peso corporal Tabla 1.6. Valores de DL50 y rutas de administración para dos xenobióticos.9
DL50 (mg/kg de peso), (ratón)
Xenobiótico iv oral sc ip
Es importante mencionar que el valor de DL50 que presente una sustancia
Procaína 88 500 660 230
no es una constante, puede variar dependiendo de las condiciones
experimentales en que se determine. Uno de los factores que influye de Nicotina 0.3 230 nd 9.5
forma determinante es la ruta de administración. sc: subcutáneo; ip:intraperitoneal; iv: intravenosa; nd: no determinada
En la Tabla 1.6 se puede apreciar que para la procaína y la nicotina,

Con excepción de la ruta de administración intravenosa (iv), el proceso de
la administración intravenosa de estas sustancias es la que mayor riesgo de
absorción forma parte de las restantes que se utilizan en trabajos de
toxicidad presenta. Por otro lado, la ruta oral es la de menor potencial
investigación o en el campo clínico.
toxicológico. En el caso particular de la procaína, la administración
Otro factor que puede modificar el valor de la DL50 es la especie
subcutánea sería la más recomendable si se quiere usar como anestésico
animal de experimentación que se utiliza para su determinación.
local.
Manteniendo la misma vía de administración, algunos compuestos llegan a
ser más tóxicos para ciertas especies (ej. cafeína para el ratón, ver Tabla 1.7).
6
Tabla 1.7. Influencia de la especie en la toxicidad letal de un xenobiótico.

DL50 (mg/kg de peso)
Xenobiótico ratón rata conejo
Ketamina 224, ip 229, ip nd
Cafeína 127, oral 355, oral 246, oral
Procaína 88, iv nd 57, iv
sc: subcutáneo; ip:intraperitoneal; iv: intravenosa
Por lo que se refiere a la clasificación, según los mecanismos de acción

Figura 1.5. Sustancias que actúan nocivamente sobre los pulmones
tóxica, se incluyen: 2 (tomado y editado de https://sites.duke.edu/apep/module-4-alcohol-and-the-
- Unión a biomoléculas breathalyzer-test/biology-and-chemistry-connections/the-structure-and-
function-of-lungs/).
- Interferencia con las interacciones normales ligando-receptor
- Interferencia con las funciones de membranas
- Alteración en la homeostasis del calcio La Organización Panamericana de la Salud (OPS) ha publicado una
colección de libros y manuales que sirven de referencia sobre tópicos
Los diferentes aspectos y procesos que comprenden estos mecanismos especializados de la toxicología que abarcan a varias sustancias en los
serán descritos en el capítulo correspondiente a la toxodinámica. aspectos de dosis letal, mecanismos de acción y órganos diana
La tercera clasificación de los compuestos tóxicos toma en cuenta un (http://www.bvsde.ops-oms.org/bvsair/e/repindex/repi92/cdeco/titulo.html).
órgano o tejido sobre el que sus efectos dañinos son preponderantes;6

algunos de los términos utilizados son nefrotoxicidad (sobre el riñón),
hepatotoxicidad (sobre el hígado). Una ilustración de lo anterior se presenta
en las Figuras 1.5 y 1.6.
7
Bibliografía
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Poisons. Eight Edition ed.; 2013.
2. E. M. S., Toxicology. A brief introduction to fundamentals, chemistry,
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3. Hodgson, E., A Textbook of Modern Toxicology. John Wiley and Sons,
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4. Hartung, T., From alternative methods to a new toxicology. Eur J
Pharm Biopharm 2011, 77 (3), 338-49; Berg, N.; De Wever, B.; Fuchs,
H. W.; Gaca, M.; Krul, C.; Roggen, E. L., Toxicology in the 21st century-
working our way towards a visionary reality. Toxicol In Vitro 2011, 25
(4), 874-81.
5. Guengerich, F. P., Mechanisms of drug toxicity and relevance to
pharmaceutical development. Drug Metab Pharmacokinet 2011, 26 (1),
3-14.
6. Curtis, K. D.; J.B., W. I., Manual de Toxicología. Quinta edición ed.;
McGraw Hill: España, 2010.
7. Calabrese, E. J.; Baldwin, L. A., Hormesis: the dose-response
revolution. Annu Rev Pharmacol Toxicol 2003, 43, 175-97.
8. Holsapple, M. P.; Wallace, K. B., Dose response considerations in risk
assessment-an overview of recent ILSI activities. Toxicol Lett 2008,
Figura 1.6. Xenobióticos que causan nefrotoxicidad (dibujo realizado con 180 (2), 85-92.
SmartDraw™). 9. Budavari, S., The Merck Index. Eleventh ed.; Merck Co, Inc: 1989.
1. Complejos inmunes a penicilinas, inmunoglobulinas, sulfonamidas pueden depositarse

durante la filtración en los glomérulos. La reacción a la deposición puede causar
glomerulonefritis. 2. Los aminoglucósidos son sustancias policatiónicas que dañan la
estructura aniónica de los glomérulos. 3. El tetracloruro de carbono y el cloroformo son
biotransformados a intermediarios reactivos en el túbulo proximal. 4. Los metales
pesados causan toxicidad directa al túbulo proximal y pueden provocar vasoconstricción
de los vasos sanguíneos que rodean al riñón. 5. El túbulo colector es relativamente
resistente al daño. Adicionalmente, analgésicos tales como la aspirina o acetaminofén
pueden causar nefritis intersticial y necrosis papilar.
8
Capítulo 2. Etapa de exposición alterar dependiendo de la ruta de ingreso de las sustancias al

organismo.
Francisco Hernández-Luis, María Elena Bravo-Gómez, Sandra María

Centeno-Llanos, Perla Carolina Castañeda-López, Circe Mouret- 2.2. Etapa de exposición
Hernández, Alejandra Quijano-Mateos En esta etapa se presentan varios aspectos a considerar, como son las
características de la exposición, la ruta y sitio así como la frecuencia a la
Contenido que un organismo es expuesto a un xenobiótico.
2.1. Etapas de la acción tóxica ................................................ 9
Etapa de exposición Riesgo, Frecuencia, Dosis
2.2. Etapa de exposición.......................................................... 9
2.2.1. Características de la exposición……………………...10 Xenobiótico
disponible para
2.3. Evaluación del riesgo de exposición a xenobióticos ...... .11 ingresar al
organismo
2.3.1. Caracterización del riesgo………………………….….12
2.4. Biomarcadores, biomonitores y bioindicadores ………….14
Etapa toxocinética Absorción, Distribución,
Bibliografía …………………………………………………….17 (Farmacocinética) Biotransformación, Excreción
Xenobiótico
En este capítulo se presentan los aspectos correspondientes a la disponible para
ejercer su acción
exposición a xenobióticos y los términos básicos relacionados con los
biomarcadores.
Etapa toxodinámica Interacción del agente tóxico con su
(Farmacodinámica) receptor endógeno
2.1. Etapas de la acción tóxica
Se han propuesto tres etapas por las que una sustancia tiene que pasar Ampliación de la
respuesta biológica
para que manifieste su acción biológica: exposición, toxocinética y
toxodinámica (Figura 2.1).1-3
Efectos tóxicos, signos
Aunque la secuencia de este esquema la siguen de manera clínicos
general la mayoría de los xenobióticos, en ocasiones, ésta se puede

Figura 2.1. Etapas de la acción tóxica.
9
Capítulo 2. Etapas de la exposición Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM
2.2.1. Características de la exposición Para muchos xenobióticos, los efectos que producen desde una
Estas características suelen dividirse en dos apartados generales que exposición aguda son completamente diferentes a aquellos ocasionados
4, 5
son: por exposiciones repetidas (Tabla 2.2).4
a) Ruta y sitio de exposición
b) Duración y frecuencia de la exposición Tabla 2.2. Ejemplos de efectos en la exposición aguda y crónica.
Xenobiótico Exposición aguda/efecto Exposición crónica/efecto
2.2.1.1. Ruta y sitio de la exposición agudo crónico
Las rutas y sitios de exposición se refieren a las diferentes vías Benceno Depresión del SNC Metahemoglobinemia,
fisiológicas o sitios anatómicos por donde los xenobióticos pueden leucemia
ingresar al organismo. Las más importantes para la toxicología son: 6 Tetracloruro Depresión del SNC Cirrosis hepática o
de carbono insuficiencia renal
i) gastrointestinal ii) pulmonar iii) dérmica iv) parenteral
SNC: sistema nervioso central; metahemoglobinemia: valores mayores
Es pertinente señalar que, algunas veces, las circunstancias en que se al normal (1%) de metahemoglobina en sangre; leucemia: proliferación
excesiva de glóbulos blancos en sangre y médula ósea.
pueda presentar una intoxicación jerarquizan a estas rutas de
exposición; por ejemplo, en el campo industrial, las rutas de exposición En general, los efectos agudos ocasionados por un xenobiótico se van a
más importantes son la pulmonar y la dérmica; por otro lado, en la manifestar a dosis mayores con respecto a aquellas dosis que provocan
mayoría de los envenenamientos accidentales, la ruta de ingreso de los efectos crónicos (Figura 2.2 A).8
tóxicos es la gastrointestinal. Se pueden presentar otros escenarios distintos a los típicos de
exposición aguda/efecto agudo (Figura 2.2 B) y exposición
2.2.1.2. Duración y frecuencia de la exposición. crónica/efecto crónico (Figura 2.2 C). Una variante sucedería con el
i) Duración de la exposición ingreso crónico de un compuesto lipofílico que se acumule en el tejido
La duración en la que un individuo se expone a una sustancia graso; cuando ocurriera una movilización de las grasas corporales por el
determinada, se ha dividido en varios periodos (Tabla 2.1). sometimiento a una dieta o una enfermedad degenerativa (diabetes) o
Tabla 2.1. Duración de la exposición. en procesos reproductivos, el compuesto se incorporaría al plasma en
Aguda < 24 h alta concentración para ejercer su efecto agudo (Figura 2.2 D). Un
Subaguda* < 1 mes
Subcrónica* 1-3 meses escenario adicional es que un organismo se exponga de una manera
Crónica > 3 meses aguda a un xenobiótico (ej. etapa embrionaria) y tiempo después se
*Usados principalmente en experimentos con roedores
presenten anormalidades en su desarrollo (Figura 2.2 E).8
10
Dosis única: se trata de realizar una sola administración de un

B. Exposición aguda que produce efectos inmediatos xenobiótico.
Exposición Efecto Dosis fraccionada: el ingreso de una cantidad determinada de una
aguda agudo
sustancia se distribuye en varias administraciones a diferentes intervalos
tiempo
de tiempo; con esto se puede reducir el efecto tóxico.
C. Exposición crónica que produce efectos crónicos (sub-letales )
Exposición crónica 2.3. Evaluación del riesgo de exposición a xenobióticos

+
Efecto agudo Efecto En muchas situaciones, el factor crítico no es la toxicidad de la
crónico
dosis
tiempo sustancia, sino el riesgo o peligro asociado a su uso o exposición. La

Efecto crónico
evaluación del riesgo es la caracterización sistemática del efecto
(sub-letal) D . Exposición crónica que produce efectos agudos
adverso que provocaría un xenobiótico en un organismo que ha sido
Exposición crónica
A. Relación dosis tipo de expuesto al mismo. La evaluación del riesgo provee un marco de
efecto producido
Efecto referencia valioso para establecer prioridades en las agencias
agudo
tiempo regulatorias, de salud y ambientales. A continuación se presentan
E. Exposición aguda que produce efectos crónicos (sub-letales) algunas definiciones que forman parte de este ámbito:
Exposición
Efecto Peligro: el término se emplea en Estados Unidos y Canadá para
aguda
crónico
referirse a las propiedades tóxicas de una sustancia (reflejada
tiempo
en el valor de DL50).11
Figura 2.2. Diferentes escenarios entre los tipos de exposición y efectos Riesgo: es la probabilidad de que una sustancia produzca un daño bajo
que se presentan. condiciones específicas.

Seguridad: es un término recíproco del riesgo; es la probabilidad de que
ii) Frecuencia de exposición el daño no ocurra bajo condiciones específicas.
La frecuencia agrupa el uso de dosis única o dosis fraccionadas de un Manejo del riesgo: proceso a través del cual se toman acciones para
xenobiótico. controlar los peligros identificados en la evaluación del riesgo.11
11
Comunicación del riesgo: proceso para generar información nada”, es decir, el individuo en una población, responde o no, a
comprensible para la comunidad sobre la evaluación y el una dosis administrada de xenobiótico. Estos estudios reflejan
11
manejo del riesgo. las variaciones de la respuesta biológica que se presentan entre
2.3.1. Caracterización del riesgo individuos de una misma población. Su representación gráfica
Para poder caracterizar el riesgo adecuadamente se requiere, en una utiliza el logaritmo de la dosis en la abscisa y el porcentaje de
etapa inicial, de la identificación del peligro. En muchos casos la respuesta biológica en la ordenada (Figura 2.3).
información acerca de la toxicidad de un xenobiótico es limitada, por lo
En la toxicología, ambos tipos de relación dosis-respuesta son de
que es necesario emplear métodos para evaluar la toxicidad de los
utilidad ya que constituyen la base fundamental de las relaciones
mismos. Los principales son: evaluaciones in vitro y a corto plazo,
cuantitativas entre la exposición a un agente y la incidencia de una
bioensayos en animales y el empleo de datos epidemiológicos.
respuesta dañina.9 El establecimiento de las relaciones dosis-respuesta
Las consideraciones cuantitativas en la caracterización del
es esencial y suele utilizarse como criterio para aceptar una relación
riesgo incluyen:
causal entre un agente y una enfermedad.
a) evaluación de la dosis-respuesta
La pendiente de la curva varía según el xenobiótico y los
b) evaluación de la exposición
diferentes efectos. En el caso de algunas sustancias que tienen efectos
c) variación en la susceptibilidad
específicos (carcinógenos, mutágenos), la curva de dosis-respuesta
podría ser lineal desde un valor de cero en la abscisa; esto significa que
2.3.1.1. Evaluación dosis-respuesta
no hay un umbral y que hasta las dosis más pequeñas deben ser
Desde una perspectiva práctica, hay dos tipos de relación dosis-
consideradas. Para la evaluación dosis-respuesta se han propuesto por
respuesta:1
tanto dos tipos de puntos finales, los que se estima tienen un umbral y
a) Relación dosis-respuesta individual. Describe la respuesta de
aquellos otros en los que puede haber cierto riesgo a cualquier nivel de
un solo organismo expuesto a varias dosis de un xenobiótico;
exposición, es decir, sin umbral. Los primeros se emplean para la
esta respuesta se considera gradual porque se mide de forma
evaluación de puntos finales de agentes no cancerígenos y los
continua sobre un rango de dosis administrada.
segundos para cancerígenos. A continuación, se mencionan los
b) Relación dosis-respuesta cuantal. Se caracteriza por la
métodos que se emplean para xenobióticos no cancerígenos.1
distribución de respuestas individuales de una población a
Los métodos para caracterizar los umbrales de las relaciones
diferentes dosis. La respuesta que se presenta en estos
dosis-respuesta incluyen la identificación de LOAEL (Lowest observable
estudios es cuantal porque se le considera como del “todo o
12
adverse effect level, por sus siglas en inglés) y NOAEL (No observed humano) y la variabilidad intraespecie (humano-humano) con valores
adverse effect level). Este último se identifica como la dosis más alta por convención equivalente a 10 para cada uno.1
que se evaluó, sin que se presentaran efectos estadísticamente
significativos.1
RfD = NOAEL / (UF) (MF) =NOAEL/100

ADI = NOAEL / (UF) (MF)= NOAEL/100
Figura 2.4. Relación entre NOAEL y RfDS y ADIs.1
http://www.bvsde.paho.org/tutorial/humanos/respuesta.html
Debido a las limitaciones de NOAEL, se ha propuesto un método

LOAEL: Lowest observable adverse effect level (nivel más bajo en donde se observan efectos adversos). alternativo denominado dosis de referencia (benchmark dose - BMD), el
NOAEL: No observed adverse effect level (nivel más bajo en donde no se observan efectos adversos). cual fue propuesto por Crump (1984)13,14 y extendido por Kimmel y
Gaylor (1988).14 En este método, la curva dosis de respuesta se modela
Figura 2.3. Relación dosis-respuesta cuantal, LOAEL y NOAEL
(compuestos no carcinogénicos). y se calcula el límite de confiabilidad de una dosis a un nivel específico
de respuesta (respuesta de referencia o benchmark response - BMR);
El NOAEL ha servido como base para realizar cálculos que permitan la
este valor usualmente se especifica como el 1, 5 o el 10%, al 95% de
valoración del riesgo como dosis de referencia (RfDs) o valores de
confianza. La BMDx se usa como valor alternativo al NOAEL. Este
ingesta diaria aceptable (ADIs) para pesticidas o aditivos de alimentos.
método también se utiliza para estimar los puntos finales de compuestos
Estos valores típicamente se calculan dividiendo el NOAEL entre
no carcinógenos.
factores de incertidumbre (UF) y factores modificantes (MF) (Figura 2.4).
Adicionalmente, la caracterización de las relaciones dosis
Estos factores permiten considerar la variabilidad interespecie (animal a
respuesta, incluyen también la identificación de niveles de efectos como
13
la DL50, CL50 (concentración que produce el 50% de letalidad), y DE10 2.4. Biomarcadores, biomonitores y bioindicadores
1
(dosis que produce el 10% de respuesta). Los biomarcadores son sumamente útiles en la investigación
toxicológica y muchos de ellos pueden tener aplicación en la vigilancia
2.3.1.2. Evaluación de la exposición biológica.10 En el ámbito laboral, los biomarcadores suelen utilizarse
El principal objetivo es determinar la fuente, tipo, magnitud y duración como indicadores del estado de salud o del riesgo de enfermedad de los
del contacto con el xenobiótico de interés. Debido a que no se presentan trabajadores expuestos a determinados compuestos. Un biomarcador es
efectos tóxicos en ausencia de exposición, ésta es un área crucial en la cualquier respuesta biológica a un xenobiótico, a nivel funcional o
determinación del riesgo. Habitualmente se consideran efectos críticos molecular, que demuestre o manifieste una desviación de las
12
adversos aquellos que ocurren a bajas concentraciones de exposición. condiciones normales (homeostasis) y que sea cuantificable. Debe
El enfoque principal es emplear la información de la exposición cubrir las siguientes características:
para evaluar cuantitativamente el riesgo, tomando en cuenta que estos a) Relación de causalidad
cálculos representan sólo “un estimado plausible” de la exposición de los b) Magnitud dosis-dependiente
individuos con un 90% de confiabilidad. No sólo es importante el tipo y c) Existencia de un método de evaluación y forma precisa de
cantidad de la exposición total, sino también determinar específicamente expresar la toxicidad
la cantidad de xenobiótico que puede estar alcanzando los tejidos del
organismo. Los biomarcadores se utilizan tanto en estudios in vitro como in vivo. Se
utilizan para su estudio y evaluación animales de experimentación11 o
2.3.1.3. Variación en susceptibilidad seres humanos. Los marcadores biológicos se clasifican por lo general
Los factores que influyen en la susceptibilidad de los seres humanos a en tres tipos: biomarcadores de la exposición, biomarcadores del efecto
presentar una respuesta biológica, cuando se han expuesto a un y biomarcadores de la susceptibilidad.12
xenobiótico, incluyen sus características genéticas, sexo, edad,
enfermedades preexistentes, comportamiento y hábitos (p.ej. fumar), 2.4.1. Biomarcadores de la exposición
exposiciones coexistentes, medicación, vitaminas y medidas de Puede ser un compuesto exógeno, un metabolito, un producto formado
seguridad. Estos aspectos serán revisados en la parte toxodinámica del entre el xenobiótico o metabolito, y una sustancia endógena, o cualquier
siguiente capítulo. otro hecho relacionado con la exposición. Lo más habitual es que los
biomarcadores de exposición a compuestos estables, como los metales,
14
comprendan mediciones de las concentraciones del metal en muestras 2.4.4. Los bioindicadores y el biomonitoreo
apropiadas. Estos términos son utilizados en el área de toxicología ambiental. En
este ámbito, se emplean bioindicadores en vez de biomarcadores, para
2.4.2. Biomarcadores del efecto evaluar los efectos tóxicos de un xenobiótico sobre la integridad de los
Los marcadores del efecto pueden ser componentes endógenos, ecosistemas.
medidas de la capacidad funcional o cualquier otro indicador del estado
o equilibrio del cuerpo o de un sistema orgánico afectado. Suelen Tabla 2.3. Ejemplos de biomarcadores de exposición, efecto y
susceptibilidad.
utilizarse como indicadores preclínicos de anomalías. Los
Biomarcador de
biomarcadores del efecto pueden ser específicos o no específicos, son Xenobiótico
exposición efecto susceptibilidad
los de mayor relevancia en el contexto de los estudios de toxicidad en
animales. Últimamente, los biomarcadores del efecto se llegan a Hidrocarburo -Aducto* con -Mutación del -NAT-2
considerar como puntos finales en la identificación de peligro para aromático ADN gen hprt -CYP1A1
aditivos en alimentos o ingredientes según las guías internacionales. policíclico -Aducto con Hb -Activación del -CYP2A2
(benzopireno) oncogén fes
2.4.3. Biomarcadores de la susceptibilidad -Micronúcleo
Un marcador de la susceptibilidad, sea heredada o inducida, es un *Aducto: producto de adición; ADN: ácido desoxirribonucleico; Hb:
indicador de que el individuo es especialmente sensible al efecto de un hemoglobina; NAT: N-acetiltransferasa; CYP: citocromo P 450; Gen hprt:
codifica a la hipoxantina fosforibosiltransferasa 1 (implicada en el
xenobiótico o a los efectos de un grupo de xenobióticos. La metabolismo de purinas).
hipersusceptibilidad puede deberse a un rasgo heredado, a la
constitución del individuo o a factores ambientales. El término bioindicador se refiere a organismos, partes de organismos o
En la Tabla 2.3 se muestran ejemplos de los tres tipos de una comunidad de ellos, que son utilizados para estimar la calidad
biomarcadores. atmosférica mediante comparación de rangos o en relación a un nivel

Los biomarcadores pueden emplearse con varios fines; de considerado basal (background). Su comportamiento muestra una
forma individual, un biomarcador puede utilizarse para apoyar o relación lineal en términos dosis-respuesta, ya sea con la concentración
rechazar el diagnóstico de un determinado tipo de intoxicación. de un contaminante, con la combinación de ellos o con el tiempo de
exposición.17 Los bioindicadores se pueden evaluar en el sitio de
15
contaminación o colectar para ser estudiados en laboratorio, lejanos al

sitio afectado (Figura 2.5).
Tabla 2.4. Ejemplos de bioindicadores.
Laboratorio:
evaluación de
Bioindicador Biomonitoreo Referencia
Evaluación Toma de bioindicador
del bioindicador muestra 13
Crustáceo Genotoxicidad
(Daphnia)
14
Tubérculo Genotoxicidad,
Cuerpo de
Cuerpo de
agua
agua (Allium, cebolla) estrés oxidante
15
Alga verde Efecto en crecimiento del
evaluación en campo evaluación en laboratorio
(Chlorella) tamaño de cloroplastos
16
Protozoario Efecto en crecimiento
Figura 2.5. Formas de estudiar bioindicadores
(Tetrahymena)
17
Planta de ornato Genotoxicidad
El biomonitoreo es el parámetro que se cuantifica en los organismos
(Tradescantia)
bioindicadores para conocer las alteraciones en su fisiología o los
efectos ocasionados por su capacidad para acumular contaminantes.
Retención lisosomal de
Con el biomonitoreo se miden los efectos de la contaminación en seres rojo neutro
vivos, por lo tanto, ofrecen información sobre los riesgos para otros
organismos, ecosistemas y el hombre.
Actividad de la
En la Tabla 2.4 y la Figura 2.6, se presentan ejemplos y usos acetilcolinesterasa
en la glándula
de bioindicadores, respectivamente.
Eobania vermiculata Determinación de
metalotioneínas
en la glándula
bioindicador
biomonitoreo
Figura 2.6. Ejemplo del uso de los bioindicadores.
16
Bibliografía 15. Hu, L. F.; Long, Y. Y.; Shen, D. S.; Jiang, C. J., Can Chlorella
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17
Capítulo 3. Etapas toxocinética y toxodinámica absorción, biotransformación, distribución y excreción de compuestos en los
organismos vivos.1, 2 Para iniciar el estudio de esta etapa, primeramente se
revisarán los principios básicos que son responsables del transporte de las
Centeno-Llanos, Perla Carolina Castañeda-López, Circe Mouret-
sustancias a través de las membranas biológicas.
Hernández, Alejandra Quijano-Mateos
3.1.1. Transporte a través de las membranas biológicas

Contenido
3.1. Toxocinética…………………………………………………….18 Un aspecto importante a considerar una vez que el xenobiótico ha
ingresado al organismo es que tiene que atravesar varias membranas de
3.1.1 Transporte a través de las membranas biológicas……..18
los diferentes compartimentos biológicos para ejercer su acción en un sitio
3.1.2 Absorción ……………………………………………………27
distante de su ingreso (Figura 3.1).3, 4
3.1.3 Distribución …………………………………………...…….34
3.2. Toxodinámica…………………………………………………...36
3.2.1 Factores que influyen en los efectos tóxicos……….….. 37
3.2.2 Mecanismos de acción tóxica de los compuestos
químicos……………………………………………………..39
3.3. Los biomarcadores de citotoxicidad………………………….46
Bibliografía……………………………………………………………51
El propósito de este capítulo es que el alumno integre los diferentes

conceptos de toxocinética y toxodinámica para tratar de entender el
comportamiento que presente un xenobiótico al ingresar a un organismo.
Ubicar los parámetros de la toxocinética como todo aquello que el
organismo le hace al xenobiótico y los de la toxodinámica, como lo que el
xenobiótico le hace al organismo.
3.1. Toxocinética
La toxocinética es el estudio del movimiento (traslado) de los xenobióticos Figura 3.1. Diferentes membranas que atraviesa un xenobiótico.
1
dentro del organismo. El estudio de esta etapa comprende los procesos de
18
Capítulo 3. Etapas toxocinética y toxodinámica Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM
Los procesos de traslado de xenobióticos se inician a nivel de las Un término que en ocasiones se utiliza para denotar al proceso de traslado
membranas celulares. Prácticamente son procesos de tipo reversibles. La de xenobióticos por membranas es permeación. No debe confundirse la
forma en que los xenobióticos se trasladan a través de las diferentes expresión permeabilidad celular con permeación. La primera se refiere a la
1,4
membranas son las siguientes: propiedad de la membrana de permitir el paso de ciertos compuestos y la
a) Difusión simple (transcelular, paracelular) segunda es la capacidad del xenobiótico para trasladarse por la
b) Difusión facilitada membrana.5
c) Transporte activo La estructura de las membranas biológicas determina su función y
d) Endocitosis/Exocitosis características. La más importante, desde un punto de vista toxicológico, es
que son selectivamente permeables. Solamente ciertas sustancias son
En la siguiente figura se esquematizan los mecanismos de transporte antes capaces de pasar a través de ellas, dependiendo de las características
mencionados. físicas y fisicoquímicas que a continuación se mencionan:1
- Liposolubilidad del xenobiótico
- Polaridad y carga eléctrica de la molécula
- Tamaño de la molécula
- Solubilidad en el medio que rodea a la membrana
- Similitud del xenobiótico a sustancias endógenas
Aunque todas estas propiedades deben tomarse en cuenta cuando se

estudia el traslado de xenobióticos, no todas influyen con la misma
A. Difusión simple transcelular. B. Difusión simple paracelular. C. Transporte activo o
difusión facilitada. D. Endocitosis/Exocitosis. E. Xenobiótico en reflujo. importancia en los diferentes modos de transporte.
Figura 3.2. Mecanismos de transporte para los xenobióticos. A continuación se mencionan los diferentes aspectos que
caracterizan a los sistemas de traslado por las membranas biológicas que
Hay una forma adicional de ingreso de sustancias, primordialmente en el utilizan los diversos xenobióticos.
intestino delgado. Este sistema se ha llamado transporte de nanopartículas
o persorción (filtración por los poros de membranas) y se presenta cuando 3.1.1.1. Difusión simple
las células de las vellosidades se desprenden hacia el lumen, provocando Ésta es la forma más utilizada por la mayoría de los xenobióticos para
5
una apertura por donde ingresan macromoléculas o nanopartículas. transportarse en los organismos vivos. Se presenta en dos variantes:
difusión simple transcelular y difusión simple paracelular. Algunas
propiedades fisicoquímicas y el peso molecular del xenobiótico son las que
19
determinan qué variante de transporte utilizará; aunque algunos de ellos b) Los parámetros que afectan la facilidad para que la molécula del
6
usan ambas alternativas. xenobiótico pueda moverse al interior lipofílico de la membrana son:
- Coeficiente de partición (P) o Coeficiente de distribución.
Tabla 3.1. Factores que influyen en la difusión simple.
- Tamaño molecular
Factor Transcelular Paracelular
- Grado de ionización
Gradiente de concentración + +
Liposolubilidad + -
La velocidad con la cual una sustancia va a trasladarse por las membranas
Tamaño molecular - +
pKa + + biológicas se puede presentar mediante la siguiente relación:7
Ley de difusión de Fick
La difusión simple transcelular se presenta cuando el xenobiótico ingresa a
la célula y difunde a través del citoplasma, para posteriormente salir y
continuar su movimiento.
Como se mencionó en la tabla anterior, los factores que afectan la
Donde:
velocidad de este proceso son:6
Cmayor– Cmenor: es el gradiente de concentración.
a) El gradiente de concentración del compuesto
P: es el coeficiente de partición.
D: coeficiente de difusión
Sa: área superficial de la membrana
d: grosor de la membrana
De los parámetros anteriores, ya se mencionó al gradiente de

concentración; enseguida indicaremos la relevancia del coeficiente de
difusión (D) y el de partición (P).
Figura 3.3. Gradiente de concentración de un xenobiótico. 3.1.1.1.1. Coeficiente de difusión

El coeficiente de difusión (D) depende primariamente del peso molecular,
Es importante anotar que el xenobiótico ingresa a la membrana, luego se
conformación y solubilidad del xenobiótico en la membrana. La magnitud
acumula o disuelve, según sus propiedades de liposolubilidad;
de D refleja la facilidad que tiene un xenobiótico para distribuirse por la
posteriormente, sale hacia la parte intracelular. Todo lo anterior siguiendo la
membrana. Cuando se tiene un xenobiótico de bajo peso molecular, con
dirección de mayor a menor concentración (Figura 3.3).7
pocos confórmeros y de buena liposolubilidad, su valor de D es alto, lo que
20
indicará que difundirá sin ningún problema. Es importante mencionar que El parámetro P se utiliza para representar la facilidad de traslado que un
en el traslado de compuestos a través de membranas celulares participan xenobiótico presentaría al difundir a través de una membrana biológica de
dos D; uno de la parte extracelular al interior de la membrana, y el otro de naturaleza lipoidea. De forma práctica se calcula de la siguiente manera:
7
la membrana hacia la parte intracelular. P = Vac/Voil[Cinicial-Cfinal/Cfinal]
Un factor que puede alterar el valor de D para un xenobiótico, es la Vac: volumen de la fase acuosa
viscosidad de la membrana. Esta propiedad es constante, normalmente; Voil: volumen de la fase lipoidea
sin embargo, cuando se administran fármacos y sus excipientes, estos Cinicial: concentración inicial (antes de agitar)
últimos pueden ingresar a la membrana y alterar su viscosidad con la Cfinal: concentración final (después de agitar)
7
consecuente modificación de D para ese fármaco.
En vista de que los valores numéricos que se obtienen experimentalmente
3.1.1.1.2. Coeficiente de partición (P) guardan diferencias de varios dígitos (ejemplo para dos compuestos: A, P =
Expresa el grado de solubilidad en lípidos de un compuesto. Se define 0.01 y B, P = 1000), se presentan dificultades en el momento de intentar
como la relación de la concentración de una sustancia, entre una fase hacer una representación gráfica, por lo que se ha optado manejar los
orgánica, generalmente 1-octanol o cloroformo, y una fase acuosa, medidos datos en escala logarítmica; ésta es la razón que en la literatura aparezca
a 25 o 37°C. Es importante para la aplicación de este parámetro que la como log P. Con base en la relación de su determinación, se establece que
7
molécula no presente carga eléctrica. a mayor valor de log P, mayor es la liposolubilidad de una sustancia.
Se representa como un parámetro que denota la distribución de un Menor polaridad
Mayor liposolubilidad
xenobiótico entre dos fases inmiscibles. Se puede determinar
experimentalmente como se indica en la ecuación de la Figura 3.4.7 +
log P
-
Mayor polaridad
Menor liposolubilidad
Figura 3.5. Interpretación de los valores de log P.
Para ilustrar la utilidad del coeficiente de partición, en la tabla siguiente se

comparan el porcentaje de traslado de diferentes esteroides en el yeyuno
Figura 3.4. El coeficiente de partición. de ratas con el valor numérico de este parámetro.
21
Tabla 3.2. Relación log P con la permeabilidad celular a esteroides.

Esteroide Log P* Permeación en yeyuno de rata,
(octanol/agua) Pm (104 cm s-1)
Prednisolona 1.62 0.4
Dexametasona 1.84 1.0
Testosterona 3.32 2.0
Estradiol 4.01 2.2
*https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/
En la tabla anterior, los valores de comparación en el log P, hacen

referencia a una serie de xenobióticos, estructuralmente relacionados
(análogos), que pertenecen a la familia de los esteroides. Como indican los
valores, a mayor valor de log P, mayor permeación de los esteroides.
Es necesario señalar que el aumento infinito del coeficiente de
partición, para una serie de compuestos, no incrementará el porcentaje de
Figura 3.6. Relación entre log P y el traslado del xenobiótico.
traslado para aquellos que sean los más liposolubles; ya que cuando el
valor de dicho parámetro aumenta, el porcentaje de traslado por las Si este conocimiento de log P de xenobióticos (que actúen en un órgano
membranas disminuye. distante a su sitio de ingreso) se quiere extrapolar a un mamífero, se diría
Los xenobióticos que son muy polares o hidrofílicos, que aquellas sustancias que presentan log P pequeños (muy hidrofílico,
frecuentemente presentan propiedades pobres de transporte, mientras que muy polares), se excretarán antes de alcanzar su sitio de acción; por otro
aquellos muy lipofílicos, alcanzan sólo un gradiente de concentración lado, los de mayor valor de log P (muy lipofílicos, menos polares), se
8
pequeño. Para que las diversas sustancias puedan trasladarse, primero se almacenarán en los depósitos lipofílicos del organismo. Empero, hay un
tienen que solubilizar en el fluido extracelular del compartimiento donde se coeficiente de partición “ideal” (punto máximo en la Figura 3.6), en donde el
encuentren presentes.1, 6 xenobiótico que lo presente tendrá la mayor probabilidad de alcanzar su

sitio de acción.1
En la Tabla 3.3 se muestran algunos valores de log P para varios
xenobióticos y su grado de absorción en el ser humano.
22
9
Tabla 3.3. Valores de log P y grado de absorción oral de algunos xenobióticos.
H 3 CO
Xenobiótico log P Absorción en el humano

O
H
Aspirina 1.1 Bien absorbido H N
CH3
Atropina 1.83 Bien absorbido HO
Cafeína -0.07 Bien absorbido codeína log P = 1.20

Cloropromacina 3.4 Absorción lenta pero completa (antitusivo) pKa = 8.23
Diacepam 2.82 Bien absorbido
Morfina 0.89 Absorbido en un 60%
Nitracepam 2.1 Bien absorbido
H
3CO
O
H
Tetraciclina -1.37 Absorción irregular e incompleta O N

H C
H3
Teofilina 0.0 Bien absorbido C

H3
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pccompound metropolol log P = 1.72

(antihipertensivo) pKa = 9.17
log P y pKa calculados con ACDlabs software v. 9.

De los datos mostrados anteriormente, se observa que los compuestos con
valor de log P en un rango de 0.0 a 3.00 son bien absorbidos.9 Figura 3.7. Log D a diferentes valores de pH.
Dado que muchos xenobióticos son ácidos o bases débiles, se ha
propuesto la inclusión del parámetro de coeficiente de distribución (log D). 3.1.1.1.3. Tamaño molecular
En éste se indica, en forma de subíndice, el valor de pH de la fase acuosa a Si la liposolubilidad se mantiene constante y el tamaño molecular se
la que se realizó la determinación: log DpH. La diferencia entre log P y log D, incrementa, entonces habrá una menor facilidad para atravesar las
es que este último incluye, en la fase acuosa, la porción ionizada y no membranas biológicas debido a la resistencia por fricción o impedimento
ionizada del ácido o base que se esté evaluando.1, 6 estérico que presenten las membranas. En el intestino delgado se aplica el
término “ventana de absorción” para indicar que el tamaño del radio de poro
[fase orgánica (X no ionizado) ] no es el mismo. En el yeyuno, el radio de apertura presenta un rango de
LogD!" =
[fase acuosa (X no ionizado + X ionizado)] 6–8 Å, en el íleo 2.9–3.8 Å y en el colon, menor que 2.3 Å. Ante estos datos,
el yeyuno es la porción anatómica que facilitará el mayor ingreso de
Donde: sustancias pequeñas.
X: xenobiótico
3.1.1.1.4. Grado de ionización
En este sentido, a diferencia del log P, el valor numérico del log D va a Como se mencionó anteriormente, muchas de las sustancias que presentan
cambiar según sean las características estructurales del xenobiótico y el actividad biológica son ácidos o bases débiles, por lo que el grado de
valor del pH del medio acuoso donde se realice la medición. Esta situación ionización que presenten a diferentes valores de pH va a cambiar de
6
se ilustra para la codeína y el metoprolol en la siguiente figura. acuerdo con su valor de pKa. Es importante recordar que el valor del pKa
23
representa el grado de disociación o fuerza de un ácido. Por comodidad, se O O CH3

CH3
utiliza también este mismo parámetro para denotar el grado de protonación H3C H3C
N pKa = 0.629 N
N N
+
1, 9
de una base. H+
+
N O N N
O N
H
CH3 CH3
cafeína
(no iónico)
log P = -0.07*
Figura 3.8. Reacciones ácido-base.
Ejemplos de algunas sustancias con sus correspondientes valores de pKa, O CH3

se presentan en la Tabla 3.4. H3C +
N
N
Tabla 3.4. Valores de pKa para algunos xenobióticos.28 O N N

Ácidos pKa Bases pKa Anfóteros pKa1 pKa2
+ H
(HA) (HB ) CH3
Sacarina 1.6 Cafeína 0.6 Nicotina 3.1 8.0
Aspirina 3.5 Diazepam 3.3 Ampicilina 2.5 7.2 *Newton, D, Kluza R. Drug Intelligence and Clinical Pharmacy 1978, 12, 546.
**http://toxnet.nlm.nih.gov/cgi-bin/sis/search/r?dbs+hsdb:@term+@rn+@rel+58-08-2
Fenilbutazona 4.5 Morfina 7.9 Anfotericina B 5.5 10.0
Pentobarbital 8.1 Cocaína 8.5 Sulfadiazina 6.4 2.0
Figura 3.9. Valores de pKa y log P de la cafeína
Acetaminofén 9.5 Anfetamina 9.8 Teofilina 8.6 3.5
Tetrahidrocannabinol 10.6 Teobromina 10.5 0.12
3.1.1.1.5. Influencia del pH y el pKa en el grado de disociación de ácidos
De los datos antes mostrados, cabe señalar el caso de la cafeína, y bases débiles
siendo un alcaloide que por su naturaleza estructural es una base débil De acuerdo con la ecuación de Henderson-Hasselbalch para los ácidos y
y su valor de pKa = 0.6, indica que a valores de pH fisiológicos, la las bases, podemos expresar la relación entre su forma no iónica, iónica y
molécula estaría primordialmente en su forma no iónica (Figura 3.9). su pKa de la siguiente manera.9
Para encontrar valores de pKa para xenobióticos en general puede [HA]

Para los ácidos: pKa + pH = log
consultar el Merck Index (https://www.rsc.org/merck-index) o [A! ]
(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pccompound). En particular para fármacos: las Cuando el valor del pH del medio es mayor que el valor numérico del pKa
farmacopeas o el Drug bank (www.drugbank.ca). de un ácido, éste se encontrará mayoritariamente en su forma iónica.
Cuando el valor del pH del medio es menor que el pKa, entonces el ácido
24
se encontrará mayoritariamente en su forma no iónica. Esto se puede

aplicar a las bases pero en sentido contrario (Figura 3.10). 3.1.1.1.6. Relación de concentraciones en dos lados de una membrana
[HB ! ] biológica a diferentes valores de pH
Para las bases: pKa − pH = log
[B] En un proceso de separación de un ácido en dos fases inmiscibles (Figura 3.11),
la porción no iónica será la que se encuentre en la fase orgánica.9
pH < pKa pKa pH > pKa
O O +
-
+ H
R OH R O
O O
-
agua
R OH O
R
·ácido
cido
O
R OH
diclorometano
+
R
NH3 +
R
NH2 + H
base
Figura 3.10. Formas iónica y no iónica de ácidos carboxílicos y aminas.
Con la ecuación correspondiente a los ácidos, se calculó a diferentes

valores de pH, el porcentaje de la forma iónica y no iónica del fenobarbital
cuyo pKa = 7.44; los resultados se presentan en la Tabla 3.5.9
Figura 3.11. Distribución en fases orgánica y acuosa de ácidos
Tabla 3.5. Disociación del fenobarbital a diferentes valores de pH. carboxílicos.
pH No ionizado (%) Ionizado (%)
2.0 100.0 0.00 Lo anterior es importante dado que se considera que la forma no ionizada
4.0 99.96 0.04
6.0 96.17 3.83 (más lipofílica) de un ácido o una base es la que atraviesa la membrana
7.0 71.53 28.47 biológica, no la forma iónica de la misma. Aunque esta última es más
8.0 20.07 79.93
10.0 0.25 99.75 hidrosoluble, el incremento en el coeficiente de partición al pasar de la
12.0 0.00 100.0
forma iónica a la forma no iónica, generalmente excede en varios órdenes
de magnitud a la pérdida de solubilidad que se pudiese presentar por la
La relación entre el pKa y pH va a jugar un papel importante debido a que al
misma conversión. Por lo anterior, el coeficiente de partición de la forma no
cambiar los valores del segundo, se altera la relación iónica y no iónica del
xenobiótico.
25
iónica de un ácido o una base se puede relacionar con el pKa del mismo mantiene el gradiente de concentración al desplazarse los equilibrios de
compuesto, mediante las siguientes ecuaciones: forma correspondiente a como se ha presentado anteriormente.
Ácidos: logD!" = log P!" − log (1 + 10 !"!!"# ) 3.1.1.2. Difusión facilitada
Bases: logD!" = log P! − log (1 + 10 !"#!!" ) Esta forma de transporte prácticamente no es utilizada por los xenobióticos.
Los parámetros importantes a considerar son: 1,3
Si se conoce el valor del pKa, y el log D a un pH determinado, entonces § Requiere de un acarreador
se podrá calcular el valor de log P de la especie no ionizada (log P HA o § Necesita de un gradiente de concentración
log P B).9 § No implica un gasto de energía
Un ejemplo de las relaciones anteriores, lo constituye el diclofenaco § Es un proceso saturable
y su distribución en dos compartimentos biológicos con valores de pH
diferentes. Ejemplos de compuestos que utilizan este tipo de trasporte: azúcares y
aminoácidos en los glóbulos rojos.
3.1.1.3. Transporte activo

Los aspectos relevantes a considerar en este tipo de transporte son:1,3
- Requiere de un acarreador
- No necesita de un gradiente de concentración
- Requiere de un gasto de energía
- Es saturable
En general, para que un xenobiótico pueda utilizar este transporte, debe

presentar una similitud estructural con alguna de las sustancias que se
encuentran de manera natural en el organismo (Figura 3.13).
O O
F
NH NH
Figura 3.12. Relación del diclofenaco en dos compartimentos

de pH diferentes. O N O N
H H
Sólo la porción no iónica del diclofenaco es la que atraviesa la membrana.
uracilo 5-fluorouracilo
Por los valores diferentes de pH en ambos lados de la membrana, se Figura 3.13. Estructuras similares del uracilo y el 5-fluorouracilo.
26
Existen algunos compuestos que utilizan transportadores especiales para El transporte activo juega un papel importante en la excreción de sustancias
atravesar las membranas intestinales. Algunos de los ejemplos se tóxicas por el riñón. En este órgano se han identificado dos tipos de este
1
presentan en la Tabla 3.6. transporte; uno para compuestos ácidos y otro para compuestos básicos.
Por lo que respecta al hígado, se han reportado tres diferentes tipos de
Tabla 3.6. Ejemplos de xenobióticos y sus transportadores
transporte activo: uno para ácidos, uno para bases y uno para compuestos
Xenobióticos Transportador
neutros.1
Ácido salicílico, ácido valpróico de monocarboxilato
Antibióticos beta-lactámicos, de péptidos (PEPT) 3.1.1.4. Endocitosis/Exocitosis

inhibidores de acetilcolinesterasa
Es la invaginación que provoca una célula hacia una partícula sólida
Fe (II), Cd (II) de iones divalentes
(fagocitosis) o pequeñas porciones de líquido (pinocitosis). Este sistema es
importante para la trasportación de macromoléculas y liposomas.1
Para este tipo de transporte, la velocidad del movimiento de las moléculas a
través de las membranas será constante, ya que el flujo dependerá de la
3.1.2. Absorción
capacidad del transportador y no de la masa del xenobiótico transportado.
La absorción es el proceso de transferencia de un xenobiótico desde su
Este tipo de procesos son denotados como de cinética de orden cero
sitio de ingreso al organismo hasta su llegada a la circulación sanguínea.7
porque la cantidad de xenobiótico transportado será la misma una vez que
Los sitios de ingreso más importantes para los xenobióticos son:
se ha alcanzado la saturación del acarreador. Entonces, un incremento en
a) Tracto gastrointestinal
la concentración o dosis administrada, no se verá reflejada en una mayor b) Tracto respiratorio
concentración del xenobiótico en la contraparte de la membrana celular.1 c) Piel
En la Tabla 3.7 se presenta un ejemplo de traslado de xenobiótico
a las cantidades de 1000, 100 y 10 mg sometidos a un proceso de primer 3.1.2.1. Tracto gastrointestinal
1
orden (difusión simple) y de orden cero (transporte activo). Es importante marcar que el término absorción gastrointestinal de
xenobióticos implica la determinación de la concentración de la sustancia
Tabla 3.7. Diferencias de traslado en una cinética de primer y cero orden.
en plasma después de su ingreso por la ruta oral.3, 7
Masa inicial del Cantidad transportada/min Cantidad transportada/min Las porciones del tracto gastrointestinal que están implicadas en la
xenobiótico (mg) (primer orden)* (orden cero)
absorción de xenobióticos son el estómago, intestino delgado e intestino
1000 100 10 grueso. Del tracto gastrointestinal, los xenobióticos mayoritariamente pasan
100 10 10
al hígado. En este último órgano, los compuestos pueden arribar al torrente
10 1 10
sanguíneo venoso o dirigirse de nuevo al intestino delgado a través de la
*La constante de velocidad es de 0.1 (10% por min)
27
bilis (circulación enterohepática). Aquellos xenobióticos que no atraviesan

las barreras gastrointestinales son excretados por las heces (Figura 3.14).10
tránsito
intestinal
Figura 3.15. Factores que influyen en la absorción en el tracto

gastrointestinal (dibujo realizado con SmartDraw™).
3.1.2.1. Velocidad de disolución y tiempo de desintegración de la forma

farmacéutica
Figura 3.14. Rutas que sigue el xenobiótico en el tracto gastrointestinal. La disolución de los xenobióticos, tanto in vitro como in vivo, es
principalmente gobernado por la solubilidad acuosa de los mismos. La
Los factores que afectan la absorción gastrointestinal de una sustancia velocidad de disolución (R) de una sustancia en particular en un medio
son: 2 acuoso es directamente proporcional a la solubilidad acuosa de la misma
- Velocidad de disolución y tiempo de desintegración de la forma (S):2
farmacéutica. Esto para la administración de medicamentos. R=K*S
- El pH de la porción gastrointestinal y el valor de pKa que presente Donde K es una constante que refleja la velocidad de agitación en el medio
el xenobiótico. de disolución, y también el área superficial de las partículas de la sustancia
- Vaciamiento gástrico. en cuestión. Si una sustancia se solubiliza con facilidad en agua
- Área de absorción. (>1g/100mL) entonces se podrá disolver con facilidad, logrando estar
- Transporte a través de las células (liposolubilidad y tamaño del disponible para su posterior absorción.
xenobiótico).
- Inestabilidad química y metabolismo del xenobiótico a nivel de 3.1.2.2. pH de la porción gastrointestinal
membrana intestinal y/o por la presencia de microbiota. Los valores de pH a lo largo del tracto gastrointestinal presentan
variaciones (Figura 3.16), lo que afecta el comportamiento de los
En la Figura 3.15 se representan algunos de los factores que influyen en la xenobióticos que poseen propiedades de ácidos débiles o bases débiles.
absorción del tracto gastrointestinal.
28
Tomando en cuenta sólo las propiedades ácido-base y asumiendo que el

traslado se dará por difusión simple, sólo la forma no iónica será capaz de
atravesar las membranas y, por tanto, se espera que los compuestos
ácidos se absorban en el estómago, y los compuestos básicos en el
intestino delgado. Sin embargo, es necesario puntualizar que, las diferentes
sustancias tanto básicas como ácidas, se van a absorber también a nivel de
intestino delgado, ya que la mayoría de los xenobióticos son ácidos o bases
débiles y el valor de pH de esta región anatómica (5–8 dependiendo de la
zona) es adecuado para su absorción por difusión simple. Además,
independientemente del valor del pH que aquí se manifieste, el intestino
colon
delgado presenta las condiciones óptimas de área de absorción y
pH = 8
vascularización que permiten sea el sitio de absorción preferencial de la
mayor parte de los nutrientes y xenobióticos.10
3.1.2.3. Vaciamiento gástrico

Determina el paso de alimentos del estómago hacia la parte superior del
Figura 3.16. Regiones y valores del pH del tracto gastrointestinal
intestino delgado. Este proceso puede acelerarse o retardarse según (dibujo realizado con SmartDraw™).
ciertas circunstancias (Tabla 3.8).2
Para los xenobióticos que tienen velocidades de disolución muy
lenta, un vaciamiento gástrico retardado favorecerá su proceso de Tabla 3.8. Factores que promueven o retardan el vaciamiento gástrico
absorción; ya que tendrán más tiempo para que una cantidad mayor de Promueven el vaciamiento gástrico Retardan el vaciamiento gástrico
esta sustancia se logre solubilizar; por otro lado, aquellos compuestos con Soluciones buffer alcalinas Alimentos grasosos y viscosos
velocidades de disolución altas, su absorción se verá favorecida con un Estados de ansiedad Estados de depresión
Hambre Úlceras
vaciamiento gástrico acelerado, porque les ayudaría a ingresar al intestino Hipertiroidismo Hipotiroidismo
delgado rápidamente para absorberse en mayor proporción.2 Alimentos fríos Alimentos calientes
3.1.2.4. Área de contacto

En el tracto gastrointestinal no todas las porciones anatómicas ofrecen la
misma cantidad de área de contacto para los xenobióticos. El área de
29
contacto se presenta a través de la presencia de monocapas; entre mayor

sea la presencia de estas últimas mayor será el área de contacto. La
presencia de monocapas celulares es mínima a nivel de esófago. En el
estómago aparecen ya una porción de monocapas, aunque la mayor
cantidad y conformación de ellas se encuentran en el intestino delgado
(Figura 3.17).10
Figura 3.18. Porciones del intestino delgado y su longitud respectiva

(dibujo realizado con SmartDraw™).
Las diferentes sustancias que alcanzan el intestino delgado ingresan a

Figura 3.17. Capa serosa y muscular del intestino delgado través de las vellosidades intestinales que presentan un área mayor para
que se realice este proceso (Figura 3.18).3
El intestino tiene un excelente suplemento de flujo sanguíneo, lo cual

asegura que el xenobiótico absorbido se remueva rápidamente, logrando de
esta forma mantener el gradiente de concentración (sink condition).10
30
3.1.2.5. Transporte a través de las células

En este parámetro hay que considerar la liposolubilidad y el tamaño de
partícula del xenobiótico. Estos aspectos ya han sido revisados al inicio de
la presente unidad.
3.1.2.6. Inestabilidad química y metabolismo a nivel de membrana intestinal

o por la presencia de microflora
La descomposición de los xenobióticos es un factor importante en la
absorción gastrointestinal. Los compuestos lábiles en el medio ácido, tales
como penicilina, se hidrolizan en el estómago con un valor de pH de 1.
Péptidos como la insulina, oxitocina, vasopresina, son destruidos por las
enzimas proteolíticas digestivas. En la membrana intestinal también se
localizan enzimas que pueden transformar a los compuestos que presenten
Figura 3.19. Corte del yeyuno y el incremento del área de contacto
(dibujo realizado con SmartDraw™). grupos funcionales susceptibles; ejemplos de este tipo de modificaciones lo
registran el isoproterenol (isoprenalina) y la clorpromacina.
A pesar de que el tiempo de residencia del contenido gastrointestinal es Además de la descomposición por enzimas del organismo humano,
mayor en el colon (Tabla 3.9), el área de contacto del duodeno y yeyuno algunos compuestos pueden ser transformados por las enzimas secretadas
(Figura 3.19) es la que determina la mayor cantidad de permeación del por los microorganismos que viven como comensales en el intestino
xenobiótico. 3 grueso, ejemplos de este tipo de xenobióticos son el succinilsulfatiazol y el
ftalilsulfatiazol. En algunos casos, los compuestos logran transformarse en
Tabla 3.9. Tiempo de residencia del contenido gastrointestinal
entidades con mayor actividad biológica, ejemplo de ello son presentados
Región Longitud Área (m )
2
pH Residencia m.o. por el propranolol y el alprenolol.1 En la Figura 3.20 se muestran las
(m) estructuras químicas de algunas de las sustancias que logran bioactivarse
Esófago 0.3 0.02 6.8 > 30 s ausente en el tracto gastrointestinal.
Estómago 0.2 0.2 1-3 1.5 h < 102
Duodeno 0.3 0.02 5-6.5 > 5 min < 102 Un ejemplo de esto es la toxicidad de los glucósidos cianogénicos
Yeyuno 3 100 6.9 1-2 h < 102 presentes en las semillas de manzanas, duraznos, cerezas y almendras en
Íleon 4 100 7-8 2-3 h < 107
Colon 1.5 3 5.5-8 15-48 h < 1011 la forma de amigdalina, la cual es inestable en el medio ácido estomacal y
m.o.: microorganismos libera cianuro. Otro ejemplo importante, es la formación por parte de la
microbiota intestinal de nitrosaminas carcinogénicas a partir de aminas y
31
nitritos no carcinogénicos.11 Cabe resaltar que algunos nitritos como el 3.1.2.7. Tracto respiratorio
nitrito de sodio se emplea como conservador de algunos alimentos cárnicos El tracto respiratorio constituye otra de las rutas de ingreso de xenobióticos.
y puede ser un riesgo para la presentación de cáncer de colon. En este sistema, los xenobióticos al ingresar al organismo pasan
CH3
CH3
directamente a la sangre (Figura 3.21).1
OH
OH H3C NH
H3C NH
OH
OH
Isoproterenol Propanolol
S N
O Figura 3.21. Estructuración del sistema respiratorio.

NH
O OH S
O CH2
O CH3 Los xenobióticos que van a ingresar por el tracto respiratorio son partículas
NH
NH CH3
pequeñas y gases. En todas las porciones anatómicas, los xenobióticos se
O
OH
pueden trasladar a la sangre; sin embargo, es en los pulmones en donde
Ftalilsulfatiazol Alprenolol este acceso es más importante.1

La circulación pulmonar va desde el corazón donde, a través de las
S
arterias pulmonares (Figura 3.22), se transporta sangre desoxigenada y se
N
regresa oxigenada a través de las venas pulmonares. Este traslado de la
O
NH
O OH S
sangre pulmonar, llamada circulación menor, representa la relación
O
O contraria al resto del organismo, donde las arterias llevan la sangre
NH oxigenada hacia los tejidos y las venas, la desoxigenada desde los tejidos
hacia el corazón.1
Succinilsulfatiazol
Figura 3.20. Sustancias que logran bioactivarse

en el tracto gastrointestinal.
32
no son fácilmente solubles, entonces son fagocitadas y transferidas

directamente al sistema linfático, donde pueden permanecer almacenadas
por un periodo considerable de tiempo. La absorción de partículas puede
alvéolos ser controlable por la solubilidad y características de transferencia de la
propia membrana.1
3.1.2.1.2. Gases
Prácticamente todos los gases que ingresan al tracto respiratorio llegan
hasta los pulmones. El grado de absorción depende de la solubilidad del
compuesto gaseoso (Tabla 3.10). Los compuestos que son muy solubles
Figura 3.22. Circulación sanguínea en los pulmones pueden absorberse en un solo movimiento de respiración. Para tales
(dibujo realizado con SmartDraw™). xenobióticos, un incremento del flujo sanguíneo no afecta su velocidad de
absorción; la única forma de incrementarla es aumentar la ventilación
2
Los pulmones presentan una gran área de absorción, alrededor de 50 a 100 m pulmonar.1
en el hombre; presentan una excelente irrigación sanguínea y la barrera Para gases o partículas que son poco solubles en la sangre,
entre el aire en los alvéolos y la corriente sanguínea es tan delgada como el presentan una capacidad limitada de absorción. El torrente sanguíneo se
grosor de dos capas de células. Debido a esta circunstancia anatómica de satura rápidamente y la única forma de incrementar su paso a través de las
1
los alvéolos, la absorción desde el pulmón es muy rápida y eficiente. membranas es incrementando el flujo sanguíneo.
3.1.2.1.1. Partícula sólida y líquida Tabla 3.10. Solubilidad de algunas sustancias en el plasma.
Según sea el tamaño de las partículas a su paso por el sistema respiratorio,
se irán reteniendo en las diferentes porciones anatómicas como se muestra Insolubles Solubles Ligeramente solubles
a continuación:1 NOx NH3 X2

AsO3 HCl O3
- Región nasofaríngea: partículas de 5 μm de diámetro. CoCl SO2 PCl4
- Región traqueobronquial: partículas de 2 a 5 μm de diámetro. HF
H2SO4
- Región alveolar: partículas menores o iguales a 1 μm.
3.1.2.2. La piel
Después que las partículas han sido depositadas en la región alveolar,
La piel está constantemente expuesta a sustancias extrañas tales como
pueden ser disueltas y absorbidas al torrente sanguíneo. Si estas partículas
gases, disolventes, soluciones, por lo que la absorción de las mismas es
33
potencialmente importante. Sin embargo, aunque la piel representa una 3.1.3. Distribución
gran superficie de exposición, su estructura es tal que constituye una Después de que los xenobióticos atraviesan las membranas de sus sitios
barrera. Esto se debe a que la capa más externa se forma por células de ingreso, pasan al torrente sanguíneo. La parte del sistema vascular en la
muertas o células empaquetadas con queratina, con escaso riego cual se encuentra el compuesto dependerá del sitio de ingreso. La
sanguíneo. Los xenobióticos atraviesan las capas de la piel por difusión absorción por la piel implicará, en primera instancia, a la sangre periférica;
simple (transcelular o paracelular), transfolicular y por los poros sudoríparos por otro lado, si la absorción fue por vía pulmonar, entonces el compuesto
(Figura 3.23). La abrasión de la piel puede incrementar la permeación de estará en la corriente sanguínea mayor. Para la mayoría de compuestos
xenobióticos porque se daña el estrato córneo. Asimismo, un incremento en absorbidos desde la vía oral, la vena porta será la responsable de
el grado de hidratación favorece el ingreso porque favorece la disolución de acarrearlos hacia el hígado y de allí al torrente sanguíneo sistémico.1
moléculas que luego se trasladarán a través de las membranas.1 Una vez que los xenobióticos se encuentran en el torrente
La porción de dermis es la que presenta el mayor riego sanguíneo; sanguíneo, se distribuirán por todo el cuerpo (Figura 3.24) y serán diluidos
desde esta posición, los xenobióticos pasan directamente al torrente por la sangre.3
sanguíneo.
Figura 3.23. Porciones de la piel y sitios de ingreso de xenobióticos

En el campo del trabajo de los profesionales de la Química, los disolventes

Figura 3.24. Las rutas de distribución de xenobióticos.
son los principales agentes que ingresan por la piel de las manos, al
operarlos sin el uso de guantes protectores adecuados para su manejo.
34
Los factores que afectan el proceso de distribución de xenobióticos son:1 iónicos en la estructura del xenobiótico parece incrementar su afinidad
- Propiedades fisicoquímicas del xenobiótico hacia la albúmina. Los compuestos en el plasma generalmente se
- Gradiente de concentración del xenobiótico entre los diferentes presentan en equilibrio entre la forma enlazada y la forma libre.7
compartimentos del organismo
- Riego sanguíneo que reciben los diferentes órganos y tejidos
- Unión del xenobiótico a proteínas sistémicas
3.1.3.1. Unión a proteínas

Un indicador importante acerca de los procesos de distribución con Figura 3.25. Interacción de xenobióticos con proteínas aceptoras.
implicaciones toxicológicas es la interacción de xenobióticos con las
proteínas plasmáticas y algunas macromoléculas en otros órganos y En la siguiente tabla se presentan algunos xenobióticos que se unen
tejidos. Las evaluaciones realizadas en los laboratorios para xenobióticos significativamente a proteínas plasmáticas.
en plasma se basan en la cuantificación, tanto del xenobiótico libre como el
enlazado. El conocimiento de la fracción de xenobiótico libre podría ser de Tabla 3.11. Unión de algunos xenobióticos a proteínas plasmáticas.
mayor utilidad clínica para aquellos compuestos que están fuertemente Unión a albúmina Unión a α1-glicoproteína Unión a
lipoproteína
unidos a componentes del plasma, porque solamente el xenobiótico libre es
Ac. Acetilsalicílico Dipiridamol (anticoagulante) Amitriptilina (antidepresivo)
capaz de interaccionar en su sitio de acción para producir el efecto.2
Barbitúricos Disopiramida (anticolinérgico) Nortriptilina (antidepresivo)
La unión de xenobióticos a los componentes del plasma involucra Benzodiazepinas Etidocaina (anestésico local)
Digitoxina Imipramina (antidepresivo)
primeramente a la albúmina, α1-glicoproteína, u otras lipoproteínas.
(antidisrítmico)
Aproximadamente, el 6.5% de la sangre es proteína, de los cuales el 50% Estreptomicina Lidocaína
Fenilbutazona Metadona (narcótico)
es albúmina. Esta proteína tiene un peso aproximado de 69000 D y al pH (antiinflamatorio)
de la sangre (7.4) presenta carga negativa. Los compuestos ácidos se unen Fenitoina Peracina (psicotrópico)
(antiepiléptico)
preferencialmente a esta macromolécula. Las sustancias básicas se unen Penicilina Prazosin (simpatolítico)
primariamente a la α1-glicoproteína, la cual tiene un peso molecular de Probenecid Propranolol
(uricosúrico)
40000 D con 41% de carbohidratos, y está presente en el plasma a la Sulfonamidas Quinidina (anticolinérgico)
concentración de 0.08 g/10mL. 1 Tolbutamida Verapamil (vasodilatador)
Warfarina
El tipo de interacción molecular involucrada entre un xenobiótico y
las macromoléculas del plasma es de tipo ión-ión, enlaces de hidrógeno,
fuerzas de van der Waals y enlaces hidrofóbicos. La presencia de grupos
35
El xenobiótico unido a proteína por su gran tamaño está limitado a Etapa de Etapa
Etapa toxodinámica Consecuencias para
exposición toxocinética el organismo
atravesar las membranas biológicas, por lo que su distribución en los tejidos
cambios bioquímicos
desde la sangre se verá reducida. B1 [XB1]
o fisiológicos
No toxicidad
Uno de los aspectos a considerar en el campo de la toxicología es entrada del absorción

xenobiótico xenobiotico B2 [XB2] a, b, c No toxicidad
al organismo
el que se presenta cuando ciertos compuestos llegan a desplazar a otras metabolismo
B3 [XB3] X, Y, Z Toxicidad
sustancias que se encuentran unidas a proteínas. Este desplazamiento metabolito
amplificación (signos clínicos
polar
del cambio síndromes)
puede ocasionar:7 excreción
[XB]: interacción xenobiotico-blanco
- Aumento de la eficacia terapéutica del fármaco desplazado
- Incremento de la toxicidad del xenobiótico desplazado Figura 3.26. Interacción xenobiótico-macromolécula
- Redistribución en varias partes del cuerpo del xenobiótico y consecuencias en el organismo. 30
desplazado
- Potenciación de la actividad biológica del xenobiótico desplazado
3.2.1. Factores que influyen en los efectos tóxicos
Al estudiar el efecto tóxico de las diferentes sustancias, es importante
3.2. Toxodinámica
considerar, de manera integral, varios factores que van a jugar un papel
Las respuestas toxicológicas provocadas por sustancias químicas en los
determinante y constituyen elementos necesarios para su evaluación. Estos
seres vivos son iniciadas por interacciones moleculares de las mismas con
factores son:7
las células, los tejidos u otros componentes del organismo. Hay muchas
- Las características de exposición (aguda, crónica, ruta de ingreso,
formas por las cuales un agente químico puede interferir con la bioquímica
etc.)
y fisiología normal de las células.12 En este capítulo se van a indicar cuáles
- La dosis del compuesto (DL50, dosis fraccionada, etc.)
son los sitios generales de acción tóxica de los compuestos y que ilustran,
- La estructura molecular y propiedades fisicoquímicas de la
al mismo tiempo, sus diferentes mecanismos de acción.
sustancia (Log P, solubilidad, pKa)
Un aspecto importante a considerar, en el campo de la toxicología,
- Tipo de efecto tóxico producido
es que la manifestación de un efecto biológico por una sustancia no es un
- Características genéticas del organismo expuesto (Figura 3.27).
evento simple. Algunas veces no basta que la sustancia alcance su sitio
“blanco” para desencadenar el trastorno clínico, ya que podrían presentarse
diferentes alternativas que se indican en la siguiente figura.13
36
Tabla 3.14. Ejemplos de reacciones adversas mayores.

Colapso vascular periférico Choque anafiláctico Cardiopatías
Deficiencia Favismo;
Exposición a hemólisis, Atrofia de órganos y tejidos Coma Ulceraciones
congénita en Cambios en la glucosa sanguínea Cáncer Pancreatitis
haba anemia,
Glucosa 6-fosfato hemoglobinemia*, (severos)
(Vicia faba)
deshidrogenasa hemoglobinuria Cambios en la presión arterial Convulsiones Teratogénesis
(severos)
Exacerbaciones (úlcera péptica, Hemorragias Mutaciones
*Hemoglobinemia: presencia de hemoglobina en plasma. infecciones)
**Hemoglobinuria: presencia de hemoglobina en orina.
Discrasias sanguíneas (anemia Disfunción renal Encefalopatía
aplásica)
Figura 3.27. Importancia de las características genéticas del organismo
Aumento severo de la libido Disfunción hepática Bromismo
expuesto para presentar efectos tóxicos.
Actividad psicomotora Depresión
descontrolada respiratoria
3.2.1.1 Tipo de efecto tóxico producido Reacciones en la piel (severa) Daño ocular
irreversible
El tipo de efecto deseable o indeseable que una sustancia pueda presentar,
Fotosensibilidad (severa) Inmunosupresión
en ocasiones, se califica según los intereses de quien lo está evaluando. Reducción severa de la libido Depresión tiroidea
Depresión mental severa Toxicología
Ejemplo de esto se presenta a continuación con la atropina y la reserpina.
perinatal
Tabla 3.12. Efectos de la atropina.

Tabla 3.15. Ejemplos de reacciones adversas menores.
Efecto Oftalmólogo Internista Acidosis intestinal Anorexia Debilidad y fatiga
Calambres Diarrea suave Vértigo
Deseado Midriasis Espasmolítico Desvanecimientos Euforia Sueño
Indeseado Espasmolítico Midriasis Fiebre (grado bajo) Hipo Dolor de cabeza
Inflamación de la Náuseas, vómito Parestesia suave
lengua (glositis)
Faringitis Infamación Prurito anal
Tabla 3.13. Efectos de la reserpina. gástrica
Irritación a la piel (ligera) Estreñimiento Vaginitis
Efecto Cardiólogo Psiquiatra
Deseado Hipotensión Sedación Para reportar reacciones adversas se encuentra disponible la siguiente
Indeseado Sedación Hipotensión página: https://www.gob.mx/cofepris/acciones-y-programas/como-notificar-
una-sospecha-de-reaccion-adversa
Sin embargo, algunos efectos son verdaderamente indeseables cuando se
Desde el punto de vista de la naturaleza de los efectos biológicos,
presentan. Éstos se denominan efectos adversos y se dividen en mayores o
éstos se pueden clasificar de la siguiente manera.14,15
menores, según logren poner en peligro la existencia del individuo (Tablas
3.14 y 3.15).
37
Tabla 3.16. Tipos de reacciones según la naturaleza del efecto biológico.31 A lo largo de todo el curso se irán presentando la mayoría de los
Reacción Definición mecanismos mencionados con los ejemplos específicos de las sustancias
que los utilizan y las consecuencias toxicológicas que desencadenan.
Tipo A Pueden predecirse con base en sus acciones
farmacológicas conocidas; frecuentemente, se identifican
(on target)
como una exageración del efecto farmacológico. Son Tabla 3.17. Algunos mecanismos generales de la acción tóxica.
dependientes de la dosis administrada. Algunos ejemplos
son: Unión a macromoléculas
a) Por sobredosis: hemorragia por anticoagulantes Actividad enzimática (arsénico, mercurio, organofosfatos, fluoroacetato
b) Por efecto colateral: somnolencia por de sodio).
antihistamínicos de primera generación; hemorragia Proteínas de transporte (monóxido de carbono, nitritos).
por anti-inflamatorios no esteroideos. Interferencia con las funciones del sistema inmune.
c) Por efectos secundarios: hipopotasemia (baja Peroxidación de lípidos (tetracloruro de carbono, paraquat, ozono).
concentración del catión potasio) por algunos Generación de radicales libres.
diuréticos. Formación de lípidos hidroperóxidos.
Estrés oxidante
No se pueden predecir a partir de su efecto farmacológico. Disminución de glutatión (acetaminofén)
Tipo B
Muchas personas no presentan estas reacciones a ninguna Oxidación de grupos tioles en proteínas.
(idiosincrática)
dosis administrada. Ejemplos Ácidos nucleicos: ADN y ARN (agentes alquilantes, agentes
a) Off target: terfenadine (antihistamínico que se une intercalantes)
adicionalmente al receptor hERG causando Interferencia con la producción de energía celular
arritmias. Inhibición y desacoplamiento de la fosforilación oxidativa (nitrofenoles)
b) Idiosincráticas Inhibición del transporte de electrones (rotenona, cianuro)
i) Síndrome de Stevens-Johnson: daño en la piel Inhibición del metabolismo de carbohidratos (fluoroacetato)
del 10%. Interferencia con las interacciones normales ligando-receptor
ii) Necrólisis epidérmica tóxica o enfermedad de Neuroreceptores y neurotransmisores (por ejemplo: benzodiazepinas,
Lyell: daño en la piel mayor al 30%. barbitúricos, atropina, estricnina, LSD, organofosfatos, antihistaminas)
(cefalosporinas, sulfamidas, antiepilépticos, Receptor para hidrocarburos aromáticos policíclicos (receptor Ah)
antiinflamatorios no esteroideos, alopurinol). Receptores hormonales (dioxinas como el TCDD, goitrógenos)
Interferencia con las funciones de las membranas
Para fines de aplicación regulatoria, las definiciones y características de las Membranas excitables:
reacciones adversas se establecen en la NOM 220-SSA1-2002. Flujo iónico (saxitoxina, tetrodoxina, DDT)
Fluidez de la membrana (disolventes orgánicos, etanol, anestésicos
locales)
3.2.2. Mecanismos de acción tóxica de los compuestos químicos Membranas en organelos
Membranas lisosomales (tetracloruro de carbono)
Los mecanismos por los cuales algunos compuestos provocan sus efectos Membranas mitocondriales (organoestaños)
tóxicos se enlistan en la Tabla 3.17.13 Esta lista se incrementará a medida Perturbación en la homeostasis del calcio
Alteraciones del citoesqueleto
que las investigaciones arrojen nuevos resultados. Activación de fosfolipasas
Activación de proteasas
Activación de endonucleasas
38
Toxicidad por pérdida de células selectivas

Desbalance hormonal y fisiológico (pérdida de neuronas
dopaminérgicas; insuficiencia tiroidea)
Alteraciones congénitas
Alteraciones genéticas no letales en células somáticas
Cáncer
Alteraciones congénitas
En el presente capítulo sólo se mencionarán a dos de ellos, la interferencia

Interferencia por el xenobiótico
con la producción de energía celular y la unión a biomoléculas. A manera
de ejemplo, en la Figura 3.28 se representa la interferencia con las
funciones normales ligando-receptor, uno de los mecanismos de acción
tóxica incluidos en la Tabla 3.17.
xenobiótico
3.2.2.1. Unión a biomoléculas

Este mecanismo de acción tóxica se presenta cuando los compuestos se Figura 3.28. Interferencia con las funciones normales ligando-receptor.
unen a alguna macromolécula (diana) que desempeña una función

biológica importante (enzimas, ADN, ARN, lípidos). Aunque en los próximos El tipo de interacción que un xenobiótico puede presentar con una
capítulos ilustraremos esta forma de acción con varios ejemplos, en el macromolécula biológica puede ser de dos tipos (Figura 3.29):1
presente sólo se citarán dos casos, la interferencia sobre el sistema inmune a) Reversible: no hay formación de enlaces covalentes sino
y la interacción de una sustancia endógena con macromoléculas interacciones hidrofóbicas, puentes de hidrógeno, interacciones
biológicas.1 ión-ión). Éste es el tipo mayoritario de interacción que se presenta.

b) Irreversible: se caracteriza por la formación de al menos un enlace
covalente entre el xenobiótico y la macromolécula biológica.
39
xenobiótico
reversible irreversible
(no covalente)
(covalente)
Figura 3.29. Unión reversible e irreversible a biomoléculas

El xenobiótico, para poder ejercer su efecto sobre la célula, primero tiene

que arribar a la región donde se encuentre la macromolécula diana e
.
interaccionar con ella. Sin embargo, en ocasiones, algunos xenobióticos
Figura 3.30. Rutas para que un xenobiótico ocasione daño celular.
pueden ocasionar daño si alteran el microambiente de la célula. Cuando los
xenobióticos causan daño por cualquiera de las dos alternativas, el efecto
tóxico se va a presentar directamente o porque la célula no puede reparar Cuando la macromolécula diana es la determinante del efecto tóxico, puede
de forma adecuada las modificaciones provocadas por el xenobiótico alterar la regulación celular o alterar su mantenimiento. En el primer caso,
(Figura 3.30).1 se manifiestan cambios en la expresión genética o trastornos de las

funciones celulares. En el caso de alteraciones del mantenimiento, éste se
puede ocasionar por desarreglos internos o por perturbaciones externas.
Las consecuencias de todos estos eventos se indican en la Figura 3.31.1
40
Figura 3.31. La molécula diana como determinante del efecto tóxico.
Como se mencionó anteriormente, varios de los daños tóxicos se van a

manifestar porque la célula no pudo reparar las alteraciones ocasionadas
por el xenobiótico. En este sentido, los procesos de reparación se van a
llevar a cabo en tres niveles: molecular, celular y tisular. A nivel molecular Figura 3.32. Niveles de reparación del daño celular.
implica la reparación a ADN, lípidos o proteínas dañadas. En el nivel
celular, se va a presentar autofagia de organelos dañados o regeneración La autofagia es un proceso en el cual una porción de la membrana celular
de axones dañados del sistema nervioso. Finalmente, en el plano tisular se engloba al organelo dañado o a macromoléculas alteradas, para formar un
inducirá apoptosis, adecuaciones de la reproducción celular o reproducción autofagosoma. Este último se funde con los lisosomas que contienen
1
de la matriz celular (Figura 3.32). hidrolasas ácidas que producen los monómeros que constituyen a las
macromoléculas con la intención de que sean reutilizados.1
41
3.2.2.1.1. Interferencia sobre el sistema inmune quimioatractores de neutrófilos y eosinófilos. Estos mediadores causan
El sistema inmune puede ser afectado por una amplia variedad de agentes vasodilatación, incrementan la permeabilidad capilar, bronco-constricción e
16,17
tóxicos (Figura 3.33). Cuatro tipos de respuestas se pueden ocasionar: inflamación. La urticaria, el asma y la anafilaxia provocadas por fármacos
- Hipersensibilidad. Respuesta incrementada a un xenobiótico se presentan por esta alteración inmunológica. Un ejemplo lo constituye la
específico con el consecuente daño tisular. reacción anafiláctica a penicilina.18,19
- Inmunosupresión. Efecto directo sobre órganos y células del
sistema inmune que provoca una respuesta disminuida. Tabla 3.18. Xenobióticos que causan hipersensibilidad.
- Inmunoestimulación. Incremento en la actividad de órganos o Xenobiótico Tipo de reacción

células del sistema inmune que puede provocar una respuesta
aditivos de alimentos (colorantes azo, BHT, BHA) Tipo I
inmunológica incrementada. anhídridos ftálicos Tipo I
antimicrobianos (parabenos) Tipo IV
- Autoinmunidad. Respuesta inmune causada por el propio sistema
berilio Tipo I, IV
inmunológico. Se puede demostrar por la presencia de anticuerpos compuestos de platino Tipo I
cromo Tipo IV
o linfocitos T reactivos con antígenos del huésped.
formaldehído Tipo IV
mercurio, oro Tipo II, III, IV
níquel Tipo I, IV
penicilina, quinina, tetraciclina Tipo I, II, III, IV
Macromolécula (proteína) resinas y plastizantes (tolueno, diisocianato) Tipo I, IV
xenobiótico xenobiótico
(hapteno)
La reacción de Tipo II (citolítica) se inicia cuando anticuerpos, tales como la
X IgG, IgM, IgA, se unen a antígenos tisulares específicos. Ciertas células
tienen receptores Fc, tales como las células K o ciertos macrófagos, que se
componentes Respuesta inmunológica unen a la porción Fc de los anticuerpos enlazados y en consecuencia son
activados y lisan las células blanco. Este proceso es conocido bajo el
Célula del nombre de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo (DAC). De
sistema inmune
manera similar el sistema complemento es activado cuando se enlaza de
Figura 3.33. Efectos de los xenobióticos sobre el sistema inmune. forma cruzada a la porción Fc de dos moléculas de IgG, o una molécula de
IgM, cada una de las cuales está unida a la superficie celular. Varios
La reacción de Tipo I (anafilaxia) es inmediata y está mediada por la IgE (y fármacos, incluyendo las penicilinas, sulfonamidas y quinina pueden
en menor extensión por IgG4 en seres humanos) unida, vía sus receptores estimular la formación de anticuerpos, y producir la lisis de glóbulos
Fc, a basófilos o a membranas de células cebadas. La unión de antígenos a rojos.20,19
estas inmunoglobulinas libera histamina, prostaglandinas, leucotrienos y
42
La reacción Tipo III (precipitina tóxica) involucra la unión de anticuerpos con Algunos de los xenobióticos reportados que manifiestan toxicidad sobre el
antígenos multivalentes. Ellos se forman en donde el antígeno se forma y sistema inmune, ya sea por alteraciones humorales o celulares, se
se libera de la superficie celular. Esto provoca la deposición de complejos presentan en la siguiente tabla.21
anticuerpos / antígenos en la piel y membranas. La reacción inmune a estos
Tabla 3.19. Xenobióticos que presentan inmunidad humoral o celular.
complejos puede causar inflamación de la piel, articulaciones, riñones,
lupus eritematoso, reacción de Arthus (Nicholas Maurice Arthus).19 Xenobiótico Tox I Hm IC Xenobiótico Tox I Hm IC
Finalmente, la reacción de Tipo IV (hipersensibilidad mediada por Acetaminofén T + Alprenolol D +

células) a diferencia de las anteriores, es causada por la interacción de Salicilato A, As, U + Tolbutamida HA +
A + Alopurinol D, U +
antígenos con linfocitos T y no con anticuerpos. Los linfocitos T reconocen Eritromicina H + Cefamandol T +
Difenilhidantoína H, SS + Halotano H + +
el antígeno y entonces reclutan otras células para provocar una respuesta
Clorpropamida HA + Hidralazina DLE +
inflamatoria al antígeno. La dermatitis por contacto al níquel es causada por Metildopa HA, N, H +
Quinina, T + Probenecid HA +
este tipo de respuesta. Quinidina
Para que un xenobiótico provoque una respuesta inmune, primero Penicilinas As, D, U, + + Penicilamina N +
A
necesita ser biotransformado a una especie electrofílica o radical libre para Etinilestradiol Th + Procaínamida DLE +
Ciclofosfamida A, U + Amoxicilina HA +
que forme un conjugado con una macromolécula (acarreador), la cual al ser
Captopril U, D, Ne + +
modificada estructuralmente presentará características antigénicas. Esto Tox: toxicidad; I Hm: inmunidad humoral; I C: inmunidad celular; A: anafilaxia; As: asma;
D: dermatitis; H: hepatitis; H.A.: anemia hemolítica; Ne: nefritis; N: neutropenia; SS:
nos lleva a tomar en cuenta dos consideraciones que involucran: la síndrome de Stokes; T: trombocitopenia; Th: trombosis; U: urticaria; DLE: lupus
eritematoso inducido por fármacos.
localización de la biotransformación y las propiedades químicas de los
metabolitos generados. Si el xenobiótico es predominantemente activado
dentro de un órgano específico, y sus metabolitos son altamente reactivos y La inmunosupresión se puede ocasionar por:22
de vida corta, la formación del conjugado y subsecuentes reacciones a) Interferencia con el crecimiento celular o con su proliferación,
alérgicas se presentarían en lugares bien localizados; por ejemplo, la provocando una baja de la capacidad de dicho sistema.
hepatitis provocada por el halotano. En contraste, si el xenobiótico es b) Destruir directamente los componentes del sistema inmune.
metabolizado en varios órganos o es transformado en metabolitos con c) Distorsionar los mecanismos de reconocimiento, por lo que
valores de vida media suficientes para trasladarse a sitios distantes, reducen la respuesta inmune.
entonces se presentarán efectos múltiples en varios órganos y tejidos, por
En la Tabla 3.20 se muestran algunas sustancias que pueden provocar
ejemplo, aquellas manifestadas por las respuestas de Tipo I y Tipo III.19
inmunosupresión.
43
NADP+ ADP
Tabla 3.20. Sustancias que provocan inmunosupresión.
Xenobiótico Xenobiótico
-2e- , 2H+ transporte de ATP sintetasa
electrones
Antitumorales (6-mercaptopurina, Benceno
azatioprina, ciclofosfamida,
NADPH +H+
ATP
ciclosporina)
Hidrocarburos aromáticos policíclicos (proceso (proceso
Insecticidas (organoclorados, exotérmico) endotérmico)
organofosforados, carbamatos)
Drogas (etanol, cannabinoides y Metales (plomo, mercurio, níquel, Figura 3.34. Desacopladores de la fosforilación oxidante.
opiáceos) cadmio)
Organometálicos (metilmercurio)
Los agentes desacopladores permiten el transporte de electrones pero
previenen la fosforilación de ADP para convertirse en ATP (Figura 3.34). El
El benceno causa linfocitopenia, pero también afecta a otros componentes
primer agente desacoplante fue el herbicida 2,4-dinitrofenol. Muchos
de la médula ósea. El resultado funcional es una deficiencia en la
agentes desacopladores son ácidos débiles, lipofílicos y, generalmente,
inmunidad mediada por células. Los trabajadores expuestos al benceno
tienen un anillo aromático. Entre los agentes desacoplantes conocidos se
presentan una baja inmunidad humoral, que se ha evidenciado por una
encuentran fenoles halogenados, nitrofenoles, dicumarinas,
disminución del complemento y concentraciones de inmunoglobulinas.1
carbonilcianidas, fenilhidrazonas, salicilanilidas, atebrina (antimalárico) y
En los seres humanos, el efecto de la inmunosupresión puede
arsenatos.1
provocar un incremento de las infecciones bacterianas, virales y
parasitarias; por ejemplo, las personas expuestas a bifenilos policlorados
son más susceptibles a sufrir infecciones respiratorias, mientras que los
niños expuestos al plomo padecen de diarrea bacteriana.1
3.2.2.2. Interferencia con la producción de energía celular 2,4-dinitrofenol Carbonilcianuro-p-trifluorometoxihidrazona (FCCP)
- Inhibición y desacoplamiento de la fosforilación oxidante

- La fosforilación oxidante es un proceso metabólico que utiliza
energía liberada por la oxidación de nutrientes para producir ATP.
- Inhibidores de la fosforilación oxidante (inhiben a la ATP sintetasa)
- Oligomicina (antibiótico)
Dicumarol Pentaclorofenol
- Diciclohexilcarbodiimida (DCC)
Figura 3.35. Xenobióticos que provocan desacoplamiento
de la fosforilación oxidante.
44
Los agentes desacoplantes ocasionan un “corto circuito” al provocar una Entre los síntomas causados por intoxicación por cianuro se encuentran
corriente de protones a través de las membranas mitocondriales, las cuales una rápida salivación, dolor de cabeza, vértigo y dificultad respiratoria.
son impermeables de manera normal. Estos eventos desencadenan un Típicamente, el cianuro tiene un sabor amargo, además de un olor a
incremento en el consumo de oxígeno y en la producción de “calor”. En almendras. Se ha estimado que entre un 20 al 40% de la población es
seres humanos, se presentan hipertermia e incluye síntomas de respiración genéticamente incapaz de detectar el olor a cianuro.
rápida, náusea y coma. La muerte ocurre de manera rápida por hipertermia
fatal.1 H
OH
HO O
H
HO H
3.2.2.3 Inhibición del transporte de electrones H
OH
El ión cianuro es uno de los agentes venenosos de más rápida acción. Es H O NO2 -2
H
fácilmente absorbido por todas las rutas, incluyendo la piel, las mucosas, y O NC CN
HO H
HO H H
Fe 2Na+
por inhalación. La ingestión de pequeñas cantidades de ión cianuro o del NC
OH CN
H O
gas cianuro de hidrógeno (HCN) provoca la muerte en cuestión de minutos CN
CN
u horas, dependiendo de la ruta de exposición. El químico Karl Wilhelm
amigdalina nitroprusiato de sodio
Scheele, descubridor del HCN, murió al aspirar los vapores de este
compuesto. El ión cianuro forma parte de algunos venenos para ratas, Figura 3.36. Estructuras químicas de la amigdalina y nitroprusiato de sodio.
polvos pulidores para plata y otros metales, soluciones fotográficas, y El cianuro ejerce su efecto tóxico al bloquear el transporte de electrones en
productos para fumigación. El cianuro también está presente en las semillas la secuencia de citrocromos mitocondriales a-a3 como se muestra en la
de manzanas, duraznos, cerezas y almendras en la forma de amigdalina Figura 3.37. Estos citocromos son referidos como citocromo oxidasa. El
(un glucósido cianogénico) o en frijoles y forrajes (sorgo). 1 cianuro forma un complejo de coordinación con el grupo hem del citocromo
La amigdalina, un ingrediente del Laetrile (antineoplásico), está a3, con esto previene la unión del grupo hem con el oxígeno. Como
formada por glucosa, benzaldehído y cianuro. El ión cianuro puede ser resultado de la inhibición por el cianuro, la transferencia de electrones del
liberado del glucósido por la acción de la β-glucosidasa (emulsina), citocromo a3 hacia el oxígeno molecular es bloqueada y la célula muere.1
presente en la pulpa de las semillas trituradas y en la microbiota intestinal
de los mamíferos. Por esta razón, la amigdalina puede ser más tóxica por
vía oral que por vía intravenosa. 1
Otra fuente potencial de ión cianuro es el fármaco nitroprusiato de
sodio (nitroferricianuro de sodio), el cual es utilizado en el tratamiento de la
hipertensión. La sobredosis de este compuesto ha provocado problemas de
intoxicación por cianuro.1 Figura 3.37. Mecanismo de acción del cianuro.
45
El tratamiento para el envenenamiento con cianuros está dividido en tres consecuencias que afectan la viabilidad celular, lo cual puede ocasionar su
etapas (Figura 3.38). Primero se administra nitrito de amilo (gas) por vía muerte. Una de las consecuencias de la acción de xenobióticos es provocar
respiratoria, seguida por administración intravenosa de nitrito de sodio. la salida del Ca2+ de la célula.1
Estas sustancias oxidan al Fe (II) del grupo hem en la hemoglobina para
generar la metahemoglobina. El ión férrico de la meta-hemoglobina se
combina con el cianuro del plasma, provocando una disociación del cianuro
que se encuentra unido en el citocromo a3. Después de la administración de
nitritos, se administra tiosulfato de sodio vía intravenosa; esta sustancia es
un sustrato para la enzima rodanasa (tiosulfato sulfotransferasa) que
cataliza la conversión del cianuro a tiocianato, el cual es excretado
fácilmente.1
CH3
N
H C O O NaNO2
3 Cit a3
Nitrito de amilo
CN-1 Figura 3.39. Perturbaciones de las concentraciones del calcio. Salida del ión
2+
calcio hacia el espacio extracelular mediante la bomba Ca -ATPasa [1] y hacia
NO2-1 CN-1
el retículo endoplásmico [2] mediante el mismo sistema. Salida mediante el
HbO2 MetHb CNMetHb
transporte por gradiente de iones [3]. Hacia la mitocondria (M) mediante un
canal uniporte [4].
IV S2O3-2 + CN-1 SCN-1 SO3-2
+
rodanasa
Figura 3.38. Etapas en el tratamiento contra el envenenamiento 3.3. Los biomarcadores de citotoxicidad
con cianuros. El término de citotoxicidad se utiliza para denotar que un xenobiótico ha

ocasionado daño letal a una célula sin indicar el mecanismo de acción
Otras sustancias que presentan un mecanismo de acción semejante al implicado.
cianuro son las azidas y el sulfuro de hidrógeno (H2S). El parámetro que se utiliza para denotar la citotoxicidad de un
xenobiótico es la CL50 (concentración letal cincuenta que representa la
3.2.2.4 Perturbación de la homeostasis del calcio muerte del 50% de células expuestas a un compuesto en un rango de
El calcio juega un papel preponderante en mantener la homeostasis de las concentraciones. Gráficamente este término se representa de la siguiente
células. La perturbación de su concentración intracelular tiene forma.
46
Otros parámetros a evaluar in vitro sobre la exposición de líneas celulares a

xenobióticos en un determinado tiempo (ejemplo 24 h) son:
GI (growth inhibition): Inhibición del crecimiento; TGI: inhibición total del
crecimiento; CL50: concentración letal.
Tabla 3.22. Evaluación de los parámetros GI, TGI y CL50 en línea celular.
Cantidad de células Cantidad de células Parámetro
inicial después de 24 h
2 000 000 4 000 000 Control negativo
(sin xenobiótico)
2 000 000 3 000 000 GI50
2 000 000 2 000 000 TGI
Figura 3.40. Concentración letal 50 y viabilidad celular. 2 000 000 1 000 000 CL50
La representación gráfica de los parámetros antes mencionados se

El término CL50 conceptualmente es similar al de la DL50. Sin embargo, es
presenta a continuación.
importante distinguir el ámbito de sus aplicaciones.
Tabla 3.21. Ámbito de aplicaciones de la CL50 y la DL50.

Parámetro Unidad Evaluación
CL50* mM, μM, nM In vitro

DL50 mg/kg In vivo
CL50: Concentración letal media; DL50: Dosis letal media;
*En algunos textos se puede indicar el mismo concepto como CI50: Concentración
inhibitoria media, o CT50: Concentración tóxica media.
El valor de la CL50 de compuestos se puede calcular a partir de datos

experimentales mediante el uso de algunos softwares; por ejemplo, Master
Plex (https://www.youtube.com/watch?v=wlpysMavrYc) estructurado para
procesar los datos arrojados por lectores de ELISA; o manejando la
metodología del Probit:
http://userwww.sfsu.edu/efc/classes/biol710/probit/ProbitAnalysis.pdf Figura 3.41. Representación gráfica de los parámetros inhibición del
crecimiento (GI), inhibición total del crecimiento (TGI) y CL50.
47
En la Tabla 3.23 se presentan los resultados de citotoxicidad de un

compuesto semisintético en la línea celular HeLa, expresada con los
Captura de colorantes
parámetros de GI, TGI y CL50. (azul de tripano, MTT)
Tabla 3.23. Ejemplo de citotoxicidad en la línea celular HeLa.23
Compuesto GI50 (μM) TGI (μM) CL50 (μM) célula Salida de radioisótopos
previamente
Etopósido 3.56 40.18 87.54 administrados (tritio)
Para determinar la viabilidad celular se pueden utilizar diferentes

Liberación de enzimas
indicadores para tal efecto (Tabla 3.24 y Figura 3.42). citoplasmáticas (LDH)
Figura 3.42. Indicadores de viabilidad celular.
Tabla 3.24. Sustancias usadas como biomarcadores de citotoxicidad.24
Indicador Característica
Las sales de tetrazolio (MTT, amarillo) son convertidas Una de las células usadas para detectar la citotoxicidad de un xenobiótico
a cristales de formazán (púrpura insolubles) por las es el linfocito (célula sanguínea mononucleada). Al respecto, se presentan
MTT enzimas deshidrogenasas mitocondriales de las células
vivas. a continuación los datos comparativos de citotoxicidad en linfocitos de
humano, perro, rata y ratón para ilustrar las diferentes sensibilidades de
Su comportamiento es similar al MTT, solamente que su
XTT sal de tetrazolium formada es soluble en agua. esta evaluación.
El rojo neutro es captado por las células

(específicamente por los lisosomas y endosomas). Sólo
Rojo neutro
las células viables son capaces de retener el colorante.
Azul de El colorante no es retenido por las células viables.

tripano
En condiciones ácidas, la sulforodamina se une a los
aminoácidos básicos de las proteínas intracelulares de
las células viables. En condiciones básicas, se disocia y
Sulforodamina
se puede evaluar en el medio de cultivo por
absorbencia a 564 nm.
Leer en el
Azul Kenacida Determina las proteínas totales al ingresar a la célula espectrofotómetro
La resazurina (azul no fluorescente) es reducida a

Resazurina Precipitado púrpura
resorufina (rojo fluorescente) por deshidrogenasas
(azul de
mitocondriales de la células viables. La resorufina se Figura 3.43. Ensayo MTT.
alamar)
difunde al medio de cultivo donde es cuantificada.
48
Tabla 3.25. Valores de CL50 de diversos xenobióticos en linfocitos de Tabla 3.27. Ejemplos de aplicación de la CL50 medido con MTT.26
diferentes especies.25
log CL50 ±DE*
Línea celular Compuesto Tiempo, h CI50, μM
(CL50, μM)
Compuesto Humano Perro Rata Ratón K562 Quinifurilo 24 2 ± 0.90
5-Fluorouracilo 2.65 ± 0.21 3.36 ± 0.22 (leucemia-humana) 12 12 ± 2.20
(>10000) (460) (2300) (>10000) Nitracrina 24 0.12 ± 0.07
Melfalan 2.28± 0.11 2.14 ±0.11 2.29 ± 0.28 1.92± 0.18 6 2.2 ± 0.06
(190) (140) (200) (84) P388 Quinifurilo 24 1.1 ± 0.20
Cisplatino 1.42 ± 0.08 0.98± 0.16 1.27 ± 0.07 (leucemia-ratón) Nitacrina 24 0.16 ± 0.06
(26) (9.5) (>100) (18) 6 0.5 ± 0.13
Taxol 0.51 ± 0.07 0.41 ± 0.12 0.47 ± 0.14 0.19 ± 0.08 NIH3T3 Quinifurilo 24 1.2 ± 0.17
3.8 2.6 (2.9) (1.5) (fibroblasto-ratón) 12 11 ± 2.10
Prednisolona (>1000) (>1000) (>1000) (>1000) Nitacrina 24 0.13 ± 0.04
*DE: desviación estándar 12 1.4 ± 0.20
Cada valor de CL50 representa (M ± DE) de dos a cinco series de experimentos
completamente independientes, con cinco a seis repeticiones para cada serie.
Otro de los métodos para evaluar la citotoxicidad de xenobióticos es
mediante el uso de líneas celulares. En este ámbito se presentan dos Estas determinaciones tienen diferentes puntos finales o end point. Entre
grupos generales: las líneas primarias derivadas de células normales (ej. otros métodos, se utiliza la presencia de proteínas totales o de alguna
fibroblastos-célula del tejido conjuntivo) y las líneas secundarias obtenidas enzima intracelular como biomarcador; ejemplo de ello lo constituye la
de tumores malignos (cancerosos). A continuación se presenta algunas de lactato deshidrogenasa (LDH) (Figuras 3.44 y 3.45). La presencia de las
las líneas comercialmente disponibles de la colección europea. También proteínas o de la enzima indica que las células se rompieron.
existe la colección ATTC.
LDH
Tabla 3.26. Algunas líneas celulares de la colección europea (ECACC)a ·ácido láctico
cido l· ctico ·ácido pirúvico
cido pir vico
Línea Especie de origen Morfología
NAD+ NADPH + H+
HELA Cérvix humano Fibroblasto formazán 30 a 60 min
VERO Riñón del mono verde Epitelial formaz·
(rojo) n tetrazolium INT
africano (rojo) diaforasa (amarillo)
490 nm
NIH3T3 Embrión de ratón Fibroblasto 490 nm
CHO Ovario de hámster chino Fibroblasto
HEPG2 Hígado humano Epitelial Figura 3.44. Reacción para evaluar la actividad
BAE-1 Aorta de bovino Endotelial
a de lactato deshidrogenasa (LDH).
The European Collection of Cell Cultures
(https://www.phe-culturecollections.org.uk/collections/ecacc.aspx)
Algunas ventajas de este método son:
- no utilizan material radiactivo
- operativamente sencillo y reproducible
49
- el tiempo de reacción es corto (30-60 min) En términos generales, la muerte de una célula se puede presentar por
- no requiere centrifugación apoptosis o por necrosis. En la Tabla 3.29 se listan algunas características
- la absorbencia correlaciona con las células lisadas que marcan las diferencias entre estos dos términos.1
Tabla 3.29. Características de apoptosis y necrosis.

Características Apoptosis Necrosis
Estímulo Fisiológico o patológico Patológico
Ocurrencia Células únicas Grupo de células
Reversibilidad Limitada Limitada
Nivel celular
Forma de la célula Contracción y formación Abultamiento con
de cuerpos apoptóticos posterior desintegración
Adhesión entre células Alterada desde el Alterada al final del
principio evento
Fagocitosis por otras Presente Ausente
células
Inflamación exudativa Ausente Presente
Figura 3.45. Determinación de LDH como biomarcador de citotoxicidad.
Nivel de organelos
Membrana Presenta forma de Ampollas previas a la
En la Tabla 3.28 se presentan algunos datos de la citotoxicidad del CdCl2,
ampollas lisis
evaluada por distintos métodos en dos diferentes líneas celulares.27 Citoplasma Abultado en las últimas Abultados al inicio del
etapas evento
Permeabilidad Presente Presente
Tabla 3.28. Valores de CL50 (μM) de líneas hepáticas expuestas a CdCl2.27 mitocondrial
3h 5h 8h 24 h Núcleo Cariorrexis Cariólisis
HTC Nivel bioquímico
Rojo 200 ± 2.25 80 ±1.26 40 ±6.53 20 ± 3.31 Activación génica Presente Ausente
neutro Requerimiento de Presente Ausente
síntesis protéica
MTT 100 ± 14.47 Liberación de enzimas Ausente Presente
lisosomales
proteína 200 ±2.25 Activación de enzimas Presente Presente
LDH 80 ± 16.11 no lisosomales
Activación de caspasas Presente Ausente
HepG2
Cambio en el Presente Presente
Rojo 300 ± 7.88 100 ±0.84 80 ±1.90 8 ± 0.21
citoesqueleto
neutro
Niveles de ATP Alto Bajo
MTT 500 ±1.96 100 ±8.39 40 ±3.53 15 ± 5.02 requeridos
proteína 300 ±1.01 10 ±0.02 De forma complementaria, se ha informado que uno de los varios factores
LDH 5 ± 5.35
M ± ESM (error estándar medio) (n = 3). Análisis con t-student. que marcan la diferencia entre la muerte por apoptosis y necrosis es el
50
número de mitocondrias que puedan verse afectadas. En la Figura 3.46 se sitio ECOTOX Data Base de la Environmental Protection Agency (EPA):
indica esta diferencia según sea el fenómeno que se presente: autofagia, http://cfpub.epa.gov/ecotox/
1
activación de caspasas o disminución del ATP.
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52
Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM.

Capítulo 4. La biotransformación de 4.1. Introducción

La biotransformación de xenobióticos juega un papel central en la eliminación
xenobióticos corporal de los mismos. Muchos de los compuestos que ingresan al
Francisco Hernández-Luis, María Elena Bravo-Gómez, Sandra María organismo son liposolubles. Si estas moléculas no son biotransformadas a
Centeno-Llanos, Perla Carolina Castañeda-López, Circe Mouret- compuestos con mayor polaridad, se podrían acumular indefinidamente en el
Hernández, Alejandra Quijano-Mateos organismo. La biotransformación no solamente participa en la eliminación de
xenobióticos, sino también para aquellos que presentan alguna actividad
Contenido biológica, pues los inactiva.
4.1. Introducción ..................................................................................... 53
Siendo el tracto gastrointestinal la ruta de ingreso de la mayoría
4.2. La Fase I………………………………………………………………….55
de xenobióticos, se abordará primero en este capítulo. Por la vía oral, los
4.2.1 Reacciones de oxidación………………………………………...…55 xenobióticos pueden ingresar al organismo desde la boca (sublingual) o
4.2.2 Reacciones de reducción …………………………………………..64 el estómago, pero el sitio de mayor importancia, por la concentración que
4.2.3 Reacciones de hidrólisis ……………………………………………64 se traslada, es el intestino delgado. En este órgano, se mueven a través
4.3. La Fase II ......................................................................................... 65 de la vena mesentérica y luego por la vena porta, la cual los conduce
4.3.1 Reacciones de glucoronidación ……………………………………...67 hacia el hígado. Aunque se pueden iniciar reacciones de transformación
4.3.2. Reacción de sulfoconjugación ……………………………………....69 desde el tracto gastrointestinal, es en el hígado donde mayoritariamente
4.3.3. Conjugación con glutatión…………………………………………….70 se va a efectuar este proceso. Aquellos compuestos que ingresan por el
4.3.4. Acilaciones………………………………………………………….….72 estómago siguen el mismo camino que los que pasan a través del
4.3.5. Excreción de los metabolitos de Fase II……………….…………...73 intestino; los que usan la ruta sublingual arriban directamente al torrente
4.4. La bioactivación tóxica………………………………………………….73 sanguíneo sin pasar primeramente por el hígado.
4.5. La Fase III: transporte o excreción………………………………… 77 Cuando los xenobióticos que al pasar por primera vez por el
intestino (o estómago) e hígado presentan alguna transformación estructural,
4.5.1. Glicoproteína P….…………………………………………………….78
se dice que manifiestan un efecto de primer paso (Figura 4.1).1 Éste puede
Bibliografía…………………………………………………………………….80
ser extenso cuando la mayor parte del xenobiótico que atravesó la barrera
intestinal se transformó en sus metabolitos, después de haber pasado por el
El objetivo del presente capítulo es presentar los conceptos y definiciones
hígado.
que permiten el entendimiento de las reacciones de biotransformación de
Una vez que los xenobióticos llegan al hígado por la vena porta, se
xenobióticos y la implicación de los productos formados en la destoxificación
difunden hacia los hepatocitos, que son las células encargadas de realizar
o toxicidad que se pueda originar.
las reacciones de biotransformación.1 Los hepatocitos se presentan en forma
53

Capítulo 4. La biotransformación de xenobióticos Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM.
de placas, las cuales están unidas mediante sinusoides (Figura 4.1). Aunque el hígado es el órgano más importante para la biotransformación de
Algunos metabolitos formados en los hepatocitos se dirigen hacia la vena xenobióticos, otros órganos, como el pulmón, la piel y el riñón, también llevan
cava para arribar a la circulación sistémica; otros, particularmente de peso a cabo este proceso. A los cambios en las estructuras de los xenobióticos
molecular mayor a 300 Da, difunden por los capilares biliares que los ocurridos en estos otros sitios anatómicos, distintos al hígado, se les conoce
conducen hacia el lumen intestinal, donde más tarde serán biotransformados como biotransformación extrahepática.2
nuevamente para regresar al hígado. A este proceso se le conoce como Un aspecto que debe marcarse en esta parte es la definición del
circulación enterohepática; mismo que tendrá repercusión en la permanencia metabolismo de xenobióticos. Este término incluye a las reacciones de
del xenobiótico, o sus metabolitos, en el organismo. biotransformación comprendidas en las fases I y II, y los procesos de
traslado de los metabolitos formados hacia el exterior de las células, para
que finalmente puedan ser excretados del cuerpo (Figura 4.2).3 El propósito
central de las fases I y II es transformar un compuesto liposoluble en otro de
mayor polaridad para que sea más fácil de excretarse. Éste es uno de los
recursos que el organismo utiliza para desactivar o eliminar xenobióticos a
los que diariamente está expuesto.4 Sin embargo, como se mencionará más
adelante, en algunas ocasiones se van a formar metabolitos de mayor
potencial toxicológico.
Figura 4.2. Las tres fases del metabolismo de xenobióticos.
Figura 4.1. El primer paso de los xenobióticos y hepatocitos

La Fase III se encarga de trasladar los metabolitos polares, formados en el
interior de las células, hacia la parte extracelular. Este proceso requiere de la
participación de transportadores. Esto es importante, dado que los
54
metabolitos polares no pueden atravesar las membranas celulares para salir Las reacciones de la Fase I se van a caracterizar por la transformación de los
3
por difusión simple. En el apartado correspondiente a la Fase III se grupos funcionales que presente la estructura del xenobiótico. Por su parte,
mencionarán algunos de estos transportadores. las reacciones de la Fase II se presentan con la adición de una porción
Siendo las reacciones de biotransformación catalizadas por molecular a la estructura del xenobiótico o su metabolito de Fase I.
enzimas, este proceso es regulado por receptores nucleares –receptor X de A continuación, presentaremos las características asociadas a las
pregnano (PXR), receptor constitutivo de androstano (CAR), receptor reacciones de biotransformación.
activador de la proliferación de peroxisomas (PPAR), receptor de
hidrocarburos aromáticos (AHR)– llamados xenosensores, ya que éstos 4.2. Fase I
reconocen a xenobióticos o sustancias endógenas, para iniciar el fenómeno La importancia de la Fase I radica en lograr la transformación química de los
de inducción enzimática.1 grupos funcionales susceptibles que presenten los xenobióticos. Las
A manera de ilustración global, las reacciones químicas que se reacciones que incluye son:
presentan en las fases I y II se pueden representar esquemáticamente de la a) Oxidación
siguiente manera. b) Reducción

c) Hidrólisis
Las transformaciones efectuadas incrementan la polaridad de los diversos

compuestos y, en consecuencia, facilitan su excreción corporal.4
4.2.1. Reacciones de oxidación

Las reacciones de oxidación son las más frecuentes en la
biotransformación de xenobióticos. Estas reacciones son catalizadas por
varias enzimas (Tabla 4.1), ubicadas primordialmente en el hígado, dentro
de su célula considerada como su unidad funcional, el hepatocito.1
Tabla 4.1. Enzimas de Fase I y su ubicación celular.
Enzima Ubicación celular
Citocromo P450 retículo endoplásmico (microsomas)
Flavin-monooxigenasa (FMO) retículo endoplásmico (microsomas)
Prostaglandin H sintetasa retículo endoplásmico (microsomas)
Xantina oxidasa (XO) citosol
Figura 4.3. Características de cambios estructurales en las dos fases. Alcohol deshidrogenasa citosol
Aldehído deshidrogenasa citosol, mitocondria
Aldehído oxidasa (AO) citosol
Monoamina oxidasa mitocondria
55
Los xenobióticos son oxidados mayoritariamente por enzimas no específicas Existen prácticamente dos formas de presentar el acrónimo del citocromo
denominadas mono-oxigenasas (citocromo P450, flavin-monoxigenasa) P450. La más reciente utiliza la raíz CYP, seguido de un número que denota
porque catalizan la introducción de uno de los dos átomos del oxígeno la familia proteica (el 40% de homología en la estructura primaria), la cual a
molecular a sus sustratos. Estas enzimas se encuentran principalmente en su vez es seguida por una letra mayúscula, para denotar la subfamilia (el
los microsomas hepáticos, una fracción derivada del retículo endoplásmico 60% de homología en su estructura primaria). Por último, un número para
1
liso. indicar la forma correspondiente. La otra presentación utiliza las siglas P450,
Por su mayor participación en la biotransformación de xenobióticos, seguidas por un número romano para denotar la familia correspondiente (ej.
mencionaremos primero al grupo denominado citocromo P450. P450 II).2
familia
4.2.1.1. La superfamilia citocromo P450 (CYP)
CYP 1 A 1
El término citocromo P450 representa a un grupo de enzimas constituidas
por hemoproteínas (hem: porfirina y apoproteína, Figura 4.4). En el cuerpo forma individual
subfamilia
humano se ubican principalmente en el hígado y, en menor proporción, en
Familia: entre 45-50% de homologación de la estructura primaria de la proteína.
otros órganos.
Subfamilia: entre 51-60% de homologación de la estructura primaria de la proteína.
Se utiliza CYP para denotar a la proteína o al mARN y CYP para referirse al

gen que les da origen.
ADN (genes) mARN Proteína (enzima)

CYP CYP
La denominación 450 se debe a que cuando esta hemoproteína, con el

átomo de Fe en estado de oxidación +2, forma un complejo con el monóxido
de carbono, presenta una absorbencia máxima a 450 nm en el espectro de
luz visible (Figura 4.5). 2
Estas enzimas presentan la capacidad de catalizar la
biotransformación de sustratos con diferentes características estructurales.
Figura 4.4. Citocromo P450, una hemoproteína.
Dado que se ubican en el retículo endoplásmico, se requiere que el
xenobiótico alcance este sitio para iniciar su biotransformación y que
56
presente los grupos funcionales adecuados que puedan alterarse por La forma en que se lleva a cabo este proceso de monoxidación se presenta
2
reacciones enzimáticas. en las Figuras 4.7 y 4.8, cuyas etapas se describen a continuación.6
a) El primer paso es la interacción del sustrato con el CYP. En este punto, el
+2
grupo funcional a oxidarse debe quedar en posición cercana al Fe+3
[CYP Fe C=O]
([CYP-Fe+3RH]).
b) Enseguida, ocurre una reducción, mediada por la NADPH CYP reductasa,
para dar Fe+2.
c) El CYP, con el fierro reducido, interacciona con el oxígeno molecular para
formar un complejo donde el fierro se vuelve a oxidar.
d) Luego se presenta una reducción, mediada por NADPH CYP reductasa o
NADH Cyt b5 reductasa, para que el fierro adquiera la carga de +2.
e) Este complejo interacciona con dos protones para liberar a un átomo
de oxígeno en forma de agua y, en un último paso, transferir el átomo de
Figura 4.5. Absorbencia de CYP en complejo con monóxido de carbono.
oxígeno restante al grupo funcional del xenobiótico para su mono-
oxidación.
Para catalizar la formación de productos oxidados, el sistema requiere de la
coenzima nicotinamida adenina dinucleótido fosfato (NADPH), oxígeno
En este proceso, un átomo de oxígeno oxida al sustrato y el otro se reduce,
molecular, así como de la enzima NADPH CYP reductasa o NADH CyT b5. El
mediante la ganancia de dos electrones, a una molécula de agua (Figura 4.6);
CYP es una mono-oxigenasa, porque al oxidar a un sustrato, el producto sólo
por esta característica, al CYP se le clasifica como una mono-oxigenasa de
presenta uno de los dos átomos de la molécula de oxígeno (Figura 4.6).5
función mixta.5
+
2 NADPH + H+ 2 NADP
RH + O2
CYP
ROH + H2O
sustrato
Figura 4.6. La actividad de las mono-oxigenasas.
57
a) Biotransformación de xenobióticos (20 CYP)

b) Biotransformación de eicosanoides y ácidos grasos (12)
c) Biosíntesis de esteroides (6)
d) Formación de ácidos biliares (7 CYP)
e) Activación/desactivación de vitamina D (4 CYP)
f) Biotransformación de ácido retinóico(2 CYP)
g) Funciones desconocidas: CYP4A22, CYP4X1, CYP20A1, CYP27C1
3 3 Los CYP que participan en la biotransformación de xenobióticos se ubican en

[CYP-Fe+ ] [CYP-Fe+ RH]
tres familias (CYP1, CYP2 y CYP3) con 20 formas específicas. Las
Figura 4.7. Interacción de xenobiótico y CYP.
subfamilias y forma específica se presentan en la Tabla 4.2.2
RH
CYP-Fe+3 CYP-Fe+3 RH Tabla 4.2. Familias y subfamilias de CYP que biotransforman xenobióticos.
-
e Familias Subfamilias y formas
ROH NADPH NADPH + H+
CYP CYP1 A1, A2, B1
reductasa
NADP+
CYP-Fe+3 RH CYP2 A6, A13
B6
O CYP-Fe+2 RH
C8, C9, C18, C19
H2O O2 D6
+
E1
2H
F1
CYP-Fe+2 RH CYP-Fe+3 RH J2
S1
O2-. O2-. W1
-
e
CYP3 A4, A5, A7, A43
NADPH + H+ NADPH - NADH NADH + H+ Dada la amplia presencia del CYP en la naturaleza, su descripción por
CyT b5 e
CYP o Cyt b5
NADP + reductasa reductasa NAD + diversos grupos de investigación, en tiempos diferentes, dio lugar a que los
nombres asignados inicialmente no siguieran ninguna nomenclatura
Figura 4.8. Mecanismo propuesto de la mono-oxidación. reglamentada, por lo que se denominan nombres triviales. Con el
establecimiento del sistema CYP se han podido agrupar para hacer más fácil
En los seres humanos se han descrito 55 formas específicas de CYP. Las su manejo. En la siguiente tabla se presentan algunos ejemplos CYP
funciones de estos CYP se pueden listar de la siguiente forma:2 presentes en diferentes especies.
58
En el hígado, la distribución y participación de los diversos CYP no es indicar que para el CYP2D6 no se conocen xenobióticos que lo induzcan
homogénea. El CYP3A4 es el más abundante y de mayor importancia en su (Tabla 4.4).2
participación en la biotransformación de xenobióticos. No así por ejemplo, el
CYP2D6, cuya presencia hepática es baja, pero su importancia en
participación es alta (Figura 4.9).6
Tabla 4.3. Algunos CYP presentes en diversas especies.6

Gen Hemoproteína Nombre trivial Especie
CYP1A1 CYP1A1 C,bNF-B rata
P1, c, forma 6 humano
Forma 6 conejo
1 A1 trucha
Dah1 perro
Mkah1 mono
CYP1A2 CYP1A2 P-448, d, HCB rata
P3, d, forma 4 humano
LM4 conejo
MC4 trucha
Dah2 perro
Mkah2 mono
En cuanto a la distribución de las varias isoenzimas de una misma familia de

CYP también es diferente en la mayor parte de los casos; por ejemplo, el
CYP1. Hay que indicar que cada uno de los CYP pueden presentar valores
variables de su presencia en hígado de seres humanos.
Como muchas enzimas, los diferentes CYP tienen sustratos
preferentes, así como inductores e inhibidores. En la Tabla 4.4 se presentan
algunos ejemplos.
Para el caso de inductores, el CYP3A4 es inducido por algunos
fármacos, como el fenobarbital y productos naturales como la hierba de San
Juan. Al CYP1A2 lo llegan a inducir algunos contaminantes como el humo
del cigarro o componentes de algunos productos naturales como el safrol, Figura 4.9. Abundancia hepática y participación del CYP.
presente en el aceite esencial de la canela (Cinnamomun verum). Cabe
59
CYP1A1
Tabla 4.4. Sustratos, inductores e inhibidores de algunos CYP.
Enzima Sustrato Inductor Inhibidor
(extrahepático)
acetaminofén, humo de cigarro, ciprofloxacina,
acetanilida, antipirina carne carbonizada, fluvoxamina,
CYP1A2 CYP1A2 aminas aromáticas, crucíferas,
Activan algunos pro-mutágenos o pro-
(hepático) cafeína, estradiol, benzo[a]pireno,
carcinógenos:
teofilina, tacrina, dioxina (TCDD**),
- Hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP)
warfarina safrol, omeprazol
- Arilaminas
5,6-benzoflavona
CYP1B1
(ß-naftoflavona)
(extrahepático,
menor proporción) CYP2D6 amitriptilina, captopril, no conocido celecoxib, fluoxetina,
clorpromazina, lobelin, quinidina,
cinnarizina, clozapina, trifluoperidol,
codeína, yohimbina
Figura 4.10. Localización e importancia de los CYP1. dextrometorfano,
imipramina*
carbamazepina, clotrimazol,
El fenómeno de inducción de CYP tiene impacto en el comportamiento de paracetamol, fenobarbital, etinilestradiol,
carbamazepina, fenitoina, rifampina, indinavil, ketoconazol,
compuestos que son biotransformados por estas enzimas. A manera de CYP3A4 dapsona, diltiazem, sulfamidimina, nicardipina,
ejemplo, mencionaremos al CYP3A4, uno de los citocromos de mayor diazepam, lidocaína, hierba de San verapamil*
omeprazol, taxol, Juan*
participación, que es inducido por la hiperforina (antidepresivo) presente en teofilina, verapamil*
** TCDD = 2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina
la hierba de San Juan (Hypericum perforatum). El consumo de este inductor
* La lista completa la puede consultar en las referencias 2 y 5.
provoca una mayor extensión en la biotransformación de xenobióticos que
son sustratos de CYP3A4. Si los sustratos son fármacos, entonces su En compuestos alquílicos el comportamiento será como se menciona a
desactivación se verá incrementada por la inducción de CYP3A4, afectando continuación:4
5
su comportamiento farmacológico. a) Compuestos con cadenas largas: la oxidación ocurre preferencialmente
De manera resumida, se presentan en la Figura 4.11 algunos en la última o penúltima posición por estar más accesibles al CYP. La
ejemplos que ilustran las diferentes variantes de oxidación que presentan los oxidación de un metilo en la última posición produce un alcohol que
2
xenobióticos con la participación del CYP. En todos los casos, los productos sufre oxidaciones subsecuentes que lo llevan a aldehído y al ácido
de oxidación presentan mayor polaridad que el xenobiótico que les dio carboxílico. La oxidación de un metileno de la penúltima posición
7
origen. produce un alcohol secundario que se oxida a una cetona.
b) En el caso de heteroátomos que presenten cadenas alquílicas, la
oxidación de grupos metilos se ve favorecida sobre grupos alquilos de
mayor tamaño. Estas reacciones se denominan según sea el
heteroátomo que sufre la oxidación: N-desalquilación, O-desalquilación
60
y S-desalquilación. La oxidación de estos alquilos produce aldehído que presentan mayor densidad electrónica proporcionada por grupos
posteriormente se sigue oxidando al ácido correspondiente. electrodonadores, con respecto a aquellos anillos con baja densidad
2
c) Los átomos de carbono adyacentes a un sitio sp o sp serán electrónica porque presentan grupos electroatrayentes.
preferencialmente oxidados con relación a aquellos que se encuentren
junto a un sp3.
[O] R [O] R OH
La oxidación de anillos aromáticos es quizá la más mencionada de todas las CH3 CH2
HO
reacciones. En este tipo de reacción, la introducción del hidroxilo ocurre en la oxidación aromática oxidación alquílica
posición “para” en anillos monosustituidos. Asimismo, cuando una molécula

presente varios anillos aromáticos, la hidroxilación ocurrirá preferentemente [O] OH
O
+ C
en el anillo de mayor densidad electrónica, es decir, aquellos que no tengan R O R O HO
R H
aldehído
sustituyentes electroatrayentes. O-desalquilación hemiacetal
En el caso de las aminas, los nitrógenos terciarios son los que O

OH
presentarán N-oxidación; los aminos secundarios y primarios darán
[O]
+ C
H
R
R NH R NH H2N
aldehído
preferencialmente hidroxilaminas. Un caso especial ocurre con las aminas hemiaminal
N-desalquilación
primarias, se oxidan separando el grupo amino y en su lugar se forma un
O
carbonilo. Esta reacción recibe el nombre de desaminación oxidante.
[O]
OH
+ R
C
H
La oxidación de un átomo de azufre en un tioéter dará lugar a un R S R HS
S
aldehído
sulfóxido y, posteriormente, a una sulfona. La primera reacción generalmente S-desalquilación hemitioacetal
es reversible, pero la segunda prácticamente no lo es.

R
Actualmente, se realizan trabajos de investigación encaminados a R R [O] R OH
R
R + NH3
NH2 NH2 O
utilizar recursos computacionales para tratar de predecir la interacción de
desaminación oxidante
xenobióticos al CYP y estimar la biotransformación que el compuesto vaya a (desaminación oxidativa)
presentar, ya sea con uno o varios CYP, de la misma o diferente familia.8

Desde el punto de vista toxicológico, la oxidación de moléculas que Figura 4.11. Reacciones de oxidación de Fase I con participación de CYP.
presentan dobles o triples enlaces debe considerarse de forma especial. La

razón es que se forma un epóxido, grupo funcional de carácter electrofílico,
En el caso de que los epóxidos evadan la acción de las EH, se convierten en
el cual posteriormente sufre una apertura hidrolítica por la participación de
moléculas de alto impacto toxicológico por su naturaleza electrofílica, como
las enzimas epóxido hidrolasas (EH) para obtener un compuesto diol. Los
se indicará posteriormente en este mismo capítulo.
anillos aromáticos más susceptibles a sufrir oxidación son aquellos que
61
Tabla 4.5. Grupos biotransformados por FMO.

Grupo funcional Producto
-
O
1 2 1 + 2
R N R R N R
3 3
R R
OH
1 2
1 2 R N R
R NH R
OH -
O
1 2
R N R 1 + 2
R N R
H3C H3C
NH NH OH
H2C H2C
-
1 3 O
Figura 4.12. Oxidación de xenobióticos con enlaces insaturados. R N NH R 1 + 3
2 R N NH R
R 2
R
Otro grupo de reacciones mediadas por CYP son las llamadas S + -
S O
deshalogenación oxidativa y la deshalogenación reductiva. La primera se
R NH2 R NH2
caracteriza porque el carbono halogenado del xenobiótico pierde su átomo 1 1
R NH R NH
de halógeno y en su lugar queda un átomo de oxígeno que forma un grupo SO 2
-
SH
2
carbonilo. En la deshalogenación reductiva, el carbono halogenado del R
2
N R N
xenobiótico sufre una ruptura homolítica para generar un radical libre, al 2RSH RSSR
-
recibir un electrón; éste es el caso de la biotransformación del tetracloruro de RSSR 2RSO2
carbono, donde el radical libre que forma es el responsable de la

Algunas de las diferencias cualitativas que presentan las FMO con el CYP se
hepatotoxicidad de este compuesto.2
presentan en la Tabla 4.6. 2
4.2.1.2. La flavin mono-oxigenasa
Tabla 4.6. Diferencias cualitativas entre FMO y CYP.
Otro grupo de enzimas que participan en la oxidación de xenobióticos es la
Actividad FMO CYP
flavín mono-oxigenasa (FMO). Estas enzimas contienen una molécula de
Inducción enzimática – +
FAD (flavín adenosín dinucleótido) por subunidad y requieren, como el CYP, Estabilidad a 50°C por un minuto – +
Preferencia por reacciones estereoselectivas + –
de NADPH para reducir al grupo flavina. Los sustratos para estas enzimas
son nucleófilos sin carga eléctrica; ejemplo de estos grupos se presentan en
La preferencia de FMO por producir metabolitos estereoselectivos se
la siguiente tabla.
presenta en la biotransformación de la nicotina, donde la oxidación catalizada
62
por el CYP produce tanto el isómero trans-N-1´-óxido como el cis-N-1´-óxido; nucleofílica del oxígeno a un átomo de carbono insaturado; esto último puede
sin embargo, esta misma oxidación catalizada por FMO solamente da lugar ser representado como una reacción de hidroxilación:3
al trans-N-1´-óxido (Figura 4.13).5
R-N=CH-R´ + OH¯ → R-N=C(OH)-R´ + 2e¯ + H+
En el proceso de oxidación por la molibdeno hidroxilasa, el átomo de oxígeno

que se incorpora en el producto proviene del agua; mientras que con la
mono-oxigenasa, el átomo de oxígeno incorporado viene del oxígeno
molecular.3
Dos reacciones que ilustran
Figura 4.13. Estereoselectividad de FMO.
4.2.1.2. La aldehído oxidasa y la xantina oxidasa

La aldehído oxidasa (AO) y la xantina oxidasa (XO) pertenecen al grupo de
enzimas citoplasmáticas que presentan un átomo de molibdeno en su
estructura, por lo cual, en ocasiones, se les refiere como molibdeno
hidroxilasas. La AO se presenta en mayor abundancia en el hígado y la XO
en el intestino delgado, leche materna y glándula mamaria.3
Ambas enzimas catalizan la oxidación no microsomal de un rango XO: xantina oxidasa; AO: aldehído oxidasa
de aldehídos y N-heterociclos (Figura 4.14); en este último caso, el que se Figura 4.14. Oxidación no microsomal de xenobióticos.
oxida es el carbono adyacente al heteroátomo. Algunos de los xenobióticos
biotransformados pertenecen al grupo de las purinas, pteridinas, quinolonas, 4.2.2. Reacciones de reducción
y, como casos particulares, el metotrexato y aciclovir. La diferencia en cuanto
Los grupos carbonilos, azo y nitro son objetos de reducción, resultando en la
a la forma de oxidación de los sustratos por las mono-oxigenasas y
formación de grupos hidroxilos y aminos más polares. Hay varias reductasas
molibdeno hidroxilasas se basa en la reacción química realizada. Con las
en el hígado, las cuales dependen de NADH o NADPH, que catalizan tales
mono-oxigenasas, el átomo que se oxida recibe al átomo de oxígeno como
reacciones.2 También las molibdeno hidroxilasas (AO y XO) catalizan este
un electrófilo. Con las molibdeno hidroxilasas se cataliza una adición
tipo de reacciones.3
63
El sitio anatómico donde se presentan con mayor frecuencia las reacciones secuelas de este proceso. En algunos casos ocurre la co-activación porque
de reducción es la parte terminal del íleon y el colon debido a la presencia de los metabolitos formados también son activos, es ejemplo el diazepam que
la microbiota. produce nordiazepam, temazepam y oxazepam. Otros casos son la
En la Tabla 4.7 se presentan las reacciones de reducción más activación de xenobióticos que por sí mismos no presentan ninguna actividad
frecuentes, indicando los grupos funcionales susceptibles a este (ejemplo: probenecid que genera sulfonamida antibacteriana); o que se
comportamiento y la ubicación de las enzimas que participan en este incremente el potencial toxicológico de la sustancia al producir un metabolito
2
proceso. de mayor impacto dañino, como el metanol (depresor del sistema nervioso
central) que se transforma en formaldehído (compuesto que causa ceguera
Tabla 4.7. Reacciones de reducción de la Fase I.
irreversible).
Reacción Sustrato Producto Enzima Ubicación
Tabla 4.8. Reacciones de hidrólisis presentes en la Fase I
Azo ArN=NAr ArNH2 + NH2Ar azo-reductasa Microsoma, Reacción Sustrato Producto Enzimas Ubicación
citosol, microbiota Hidrólisis de R-COO-R´ R-COOH + R-OH Esterasas Microsomas,
Nitro R-NO2 R-NH2 nitro-reductasa Microsoma, ésteres citosol,
citosol, microbiota sangre
Quinona O=Ar=O HO-Ar-OH DT-diaforasa Microsoma citosol
Hidrólisis de R-CONH-R´ R-COOH + R-NH2 Peptidasa Sangre,
Sulfóxido R-S(O)-R R-S-R FMO Citosol
amidas lisosomas
Carbonilo R-CHO R-CH2OH aldehído- Microsoma,
Hidrólisis de R-C(0)C-R R-COH-COH-R Epóxido Microsomas,
reductasa citosol, sangre epóxidos hidrolasa citosol
4.2.3. Reacciones de hidrólisis

Tabla 4.9. Consecuencias de la biotransformación de xenobióticos
Las hidrolasas constituyen un grupo de enzimas, generalmente de baja Consecuencia Xenobiótico Metabolito
Desactivación Cloropromazina 7-Hidroxicloropromazina
especificidad, capaces de hidrolizar ésteres, amidas, lactonas, ésteres de Co-activación* Diazepam Nordiazepam,
fosfatos y sulfatos, disacáridos, glicósidos, péptidos (Tabla 4.8). El grupo temazepam y oxazepam
Activación Sulfasalazina Ácido 5-aminosalicílico
éster es el más lábil a sufrir tales reacciones. Recientemente, se ha mostrado (mesalazina)
que hay múltiples isoenzimas de las esterasas hepáticas, algunas de las Incremento de la toxicidad Metanol Formaldehído
*Tanto el metabolito como el fármaco presentan la misma actividad biológica.
cuales han sido caracterizadas. La hidrólisis de varios ésteres por la
albúmina del suero ha sido también reportada. Como se mencionó desde el principio de este capítulo, el hígado es el
órgano principal de biotransformación de xenobióticos. Sin embargo, otros
4.2.4 Consecuencias de la Fase I en la actividad de algunos xenobióticos órganos pueden participar en las biotransformaciones de algunos
La consecuencia principal de la biotransformación de xenobióticos es su xenobióticos (biotransformación extrahepática). Como en el caso anterior, la
desactivación en caso de que ellos presenten alguna actividad biológica. principal consecuencia de estas biotransformaciones es producir metabolitos
9
Esto aplica para la mayor proporción de fármacos. Sin embargo hay otras polares y, en el caso de moléculas bioactivas (ejemplo fármacos),
64
desactivarlos. También se dan casos de activación hacia compuestos que Los compuestos así obtenidos se les denomina productos conjugados. Las
presenten reacciones adversas. Éste es el caso del pulmón que transforma a reacciones que conforman esta fase son:
los xenobióticos que se presentan en la Tabla 4.10. - Glucuronidación
- Sulfoconjugación (sulfatación)
Tabla 4.10. Activación de xenobióticos en el pulmón (extrahepático).
- Conjugación con glutatión (conjugados con ácido mercaptúrico)
Xenobiótico Enzima Tipo de toxicidad
- Metilación
a
4-ipomeanol CYP Necrosis de células Clara
- Acilación
Benzo[a]pireno CYP, epóxido hidrolasa Carcinoma
b
Tiourea CYP, FMO Daño a pneumocitos Tipo I
Nitrofurantoina CYP reductasa, xantina Fibrosis CYP
oxidasa (microsomas)
Paraquat CYP reductasa Necrosis alveolar, edema

a
Células Clara: se encuentran en el epitelio de los bronquiolos y secretan proteínas
antiinflamatorias. Tolueno
b
Los pneumocitos tipo I son células delgadas que forman la estructura principal de la Ácido benzoico
pared alveolar. Participan en el intercambio gaseoso con las células capilares.
Beta-oxidación Reducción y
de ácidos grasos aromatización por
(mitocondria) microbiota en
humanos (colon)
Un aspecto que se debe mencionar es que un metabolito particular se puede
formar a partir de diferentes xenobióticos. Éste es el caso del ácido benzoico
que puede ser producido por el tolueno o el ácido cinámico o el ácido quínico
(Figura 4.15).2 El conocimiento de esta situación debe ser tomado en cuenta
en el momento de interpretación de resultados del comportamiento de un
determinado xenobiótico que tiene posibilidades de producir un metabolito
Ácido cinámico
Ácido quínico
que también pueda originarse de otro compuesto, co-administrado o de
Figura 4.15. Diferentes xenobióticos con un producto común.
naturaleza endógena.
Muchos organismos, incluyendo los humanos, pueden realizar reacciones de

4.3. La Fase II
conjugación en varios órganos y tejidos. En las ratas y en los seres
En esta etapa, los xenobióticos, o sus metabolitos de Fase I, son modificados
humanos, la mayor cantidad de reacciones de Fase II ocurren en el hígado,
al adicionarles una porción estructural que, en términos generales,
aunque todos los órganos, incluyendo la piel, pueden biotransformar con
incrementará su solubilidad acuosa para facilitar su excreción del organismo.
alguna extensión (Tabla 4.11). En las células, los sistemas de conjugación
65
están concentrados en las membranas, el citosol, las mitocondrias, los a) Tipo 1: son aquellas donde la coenzima necesita estar activada
2
lisosomas y el retículo endoplásmico (Tabla 4.12). químicamente para unirse al sustrato; a este grupo pertenecen las
Las enzimas que participan en la Fase II son llamadas transferasas reacciones glucuronidación, sulfoconjugación.
porque catalizan la adición de pequeñas moléculas polares a los metabolitos b) Tipo 2: el sustrato es el que necesita estar activado para poder unirse a la
o fármacos. Con excepción de la conjugación con glutatión y aminoácidos, porción estructural proveniente de la coenzima; éste es el caso de la
estas porciones estructurales que se adicionan generalmente provienen de conjugación con aminoácidos como reacción de acilación.3
las coenzimas involucradas en estos procesos (Tabla 4.13).
Tabla 4.13. Coenzimas y enzimas de algunas reacciones de la Fase II.
Reacción Coenzima Enzima Grupos a
Tabla 4.11. Reacciones de Fase II en diversos tejidos y órganos. conjugar
Tejido 1 2 3 4 5 6 Ácido uridin-5´-difosfo- UDP-glucuronosil- -OH, -COOH, -
Glucuronidación α-D-glucurónico (UDP- transferasa (UGT) NH2, -NR2, -SH,
Adrenal + +
Vejiga + GA)
3´-fosfoadenosin-5´-
Células sanguíneas + Sulfoconjugación Sulfotransferasa -OH (fenoles),
fosfosulfato (PAPS)
Cerebro + + (ST) NH-OH
Intestino + + + + Conjugación con Glutatión S- Ar-X, epóxido,
Riñón + + + + + + glutatión* transferasa (GST) carbocatión
Hígado + + + + + +
Acilación Acetil coenzima A Acetiltransferasa -OH, -NH2
Pulmón + + + +
Placenta + Metilación S-adenosilmetionina Metiltransferasa -OH, -NH2, -SH,
Piel + + (SAM)
-N (heterociclos)
Bazo + + + *El glutatión no se considera una coenzima.
Timo +
1: glucuronidación; 2: metilación, 3 conjugación con glutatión 4:
acetilación; 5: conjugación con aminoácidos; 6: sulfoconjugación
Tabla 4.12. Ubicación de las reacciones a nivel celular.

Reacción Ubicación intracelular
Glucuronidación Microsomas
Sulfoconjugación Citosol
Conjugación con glutatión Microsomas, citosol
Acilación Citosol, mitocondria
Metilación Microsomas, citosol
Desde el punto de vista de la forma en cómo se comportan los sustratos y las

coenzimas en las reacciones de Fase II, éstas se agrupan en dos tipos
(Figura 4.16).
Figura 4.16. Tipos de reacciones de Fase II.
66
Otro aspecto a resaltar está relacionado con la naturaleza del metabolito En la Figura 4.18 se ilustra el ejemplo de esta reacción utilizando como
formado en la Fase I, que puede ser nucleofílico o electrofílico. Los metabolitos xenobiótico al fenol. Puede observarse que el producto obtenido es más
nucleofílicos son conjugados mediante la mayoría de las reacciones de Fase II soluble en agua que el fenol, porque la porción adicionada presenta un
para ser eliminados del organismo. Por su parte, los compuestos electrofílicos grupo carboxilo, que a pH 7.4 del citosol, está preferentemente en su
pueden reaccionar con las macromoléculas nucleofílicas endógenas forma iónica (pKa ~ 4). Además, la reacción es de tipo SN2, porque el
(proteínas, polisacáridos, lípidos). Esta interacción juega uno de los papeles conjugado presenta una inversión de la configuración del carbono
más importantes en los aspectos de la toxicidad de xenobióticos. Sin embargo, anomérico del ácido glucurónico (inversión de Walden). En este sentido,
hay una reacción de Fase II que se encarga de nulificar este peligro potencial, el fenol quedó en configuración beta (el UDP estaba en posición alfa). 5
la conjugación con glutatión. Adicionalmente, en algunas ocasiones, los Esto es importante de marcar porque la hidrólisis de estos ß-glucurónidos
metabolitos nucleofílicos ya conjugados pueden ser convertidos a compuestos lo realizaría la ß-glucoronidasa. Esta enzima está presente en el retículo
electrofílicos (Figura 4.17). endoplásmico de hepatocitos de ratas y ratones, y en la microbiota
intestinal en humanos.2 En esta última ubicación juega un papel
importante en la hidrólisis de los ß-glucurónidos que son excretados por
la bilis. Una vez hidrolizado, el xenobiótico queda nuevamente disponible
para trasladarse al interior del organismo. La salida del xenobiótico desde
el hígado y su regreso, después de haber sido evacuado por la bilis,
llegar al lumen intestinal y trasladarse a través del intestino, se le conoce
como circulación enterohepática.
X: xenobiótico; M: metabolito
uridin-5-difosfato(UDP)
Figura 4.17. Reacciones para metabolitos nucleofílicos y electrofílicos.
O
4.3.1. Reacciones de glucuronidación HN

O
OH
Estas reacciones involucran la transferencia de un grupo glucuronilo O N
H O
activado desde el ácido uridin-5´-difosfo-α-D-glucurónico (UDP-GA) hacia OH

H
H
O O
O
- -
HO O P O P O CH2
un grupo funcional nucleofílico en el xenobiótico para formar O-, S-, N-, o H OH O O
C- glucurónidos. La enzima que cataliza esta reacción se le denomina UDP HO HO
2 ácido uridin-5-difosfo-a-D-glucurónico
glucuronosiltransferasa (UGT). (UDP-GA)
67
O -
OH O OH porción que se transfiere, el sulfonato (-SO3 ), queda mejor indicada con el
HO
H O
H H O O nombre que se utiliza en el presente material. Cuando el nucleófilo presente
OH H H
HO UDP UDP -glucuronosil-
OH H + UDP
en el xenobiótico es un átomo de nitrógeno o de azufre, se obtienen los
HO
transferasa
H OH
H OH sulfamatos y tiosulfatos correspondientes.
ácido a-UDP-glucurónico
(UDP-GA) b-glucurónido de fenol Cabe mencionar que esta reacción preferentemente se presenta con
xenobióticos con porciones fenólicas. Con compuestos que tienen porciones
Figura 4.18. Reacción de glucuronidación. de alcohol alquílico, aminos y tioles, se lleva a cabo en muy pequeña
proporción.5
En virtud de que grupos funcionales que contienen átomos de oxígeno,
La coenzima que transfiere al grupo sulfonato es la 3-fosfoadenosin-
azufre, nitrógeno y carbono son susceptibles a formar glucurónidos,
5-fosfosulfato (PAPS). Por cada mol que se forme de esta coenzima se
xenobióticos de tipo alcoholes, fenoles, ácidos carboxílicos, hidroxilaminas,
requiere del gasto de dos moles de ATP, así como la participación de dos
aminas aromáticas y tioles, así como compuestos endógenos, tales como la
enzimas: ATP sulforilasa y APS cinasa.
bilirrubina y esteroides, son substratos para la UGT.
Con respecto a esta enzima, se han logrado identificar 35 genes que
producen UGT en diferentes especies. La nomenclatura de las diversas
familias sigue el mismo código que para CYP. Por ello se tienen las familias
UGT1 y UGT2. Para UGT1 se conocen nueve isoenzimas y seis para UGT2.
Al polimorfismo asociado a estas familias se le ha atribuido la presencia de
enfermedades (v.gr. ictericia) y el efecto adverso de algunos fármacos (v.gr.
antiinflamatorios no esteroideos). En particular se menciona el caso de recién
nacidos que de forma congénita carecen la UGT y que al administrarles Figura 4.19. Formación de la coenzima PAPS.
cloranfenicol, no pueden excretar este fármaco por glucuronidación, con su
En la sulfoconjugación participa un grupo de enzimas denominadas
consecuente acumulación que da lugar a lo que se conoce como el síndrome
sulfotransferasas (ST) que presentan un rango de peso entre 61000-64000
del bebé gris.5, 10
Da. En los humanos hay cinco genes que codifican para ST con
reconocimiento para diversos sustratos. Estas enzimas pueden ser ubicadas
4.3.2. Reacción de sulfoconjugación
en dos grupos, las fenol-ST (P-PST, ST1A2, M-PST, EST) y la
Esta reacción ha sido denominada por algunos autores como reacción de
hidroxiesteroidesulfotransferasa (HST). Las isoformas de la fenol-ST de
sulfatación en función de que el producto obtenido, cuando el nucleófilo es
hígado de rata catalizan la transferencia de sulfonatos a diferentes fenoles y
un átomo de oxígeno, es un sulfato;2 sin embargo, en el sentido estricto de la
68
catecoles. Sin embargo, ellas difieren en el pH óptimo, especificidad y O
3
propiedades inmunológicas. NH CH3
O O
O
HN CH3 mayor
HN CH3 mayorporcentaje
porcetaje
O HO O en
enadultos
adultos
ST O
CH3 OH
NH
HO
OH
OH PAPS PAP O
O conjugado
S glucurónido
O _
O Na+ HO
acetaminofén O
Figura 4.20. Reacción de sulfoconjugación del acetaminofén.
NH CH3
mayor porcentaje
en niños
O O
S
HO O
conjugado con
sulfonato
Figura 4.21. Relación entre glucuronidación y sulfoconjugación.
En muchas especies, la sulfonación y glucoronidación de grupos fenólicos

de diversos xenobióticos se presentan como reacciones competitivas. La
ST es una enzima que presenta una alta afinidad y baja capacidad, por lo
que la reacción de sulfonación se lleva a cabo a bajas concentraciones
del xenobiótico; por otro lado, la UGT presenta una baja afinidad y una
alta capacidad catalítica, por lo que participa en concentraciones altas del
sustrato.2,3 En la infancia esta diferencia se hace más evidente; por
ejemplo, en el caso de la biotransformación del paracetamol, el
metabolito mayoritario es el éster de sulfato, mientras que en los adultos
es el glucurónido (Figura 4.21).2, 9
69
4.3.3. Conjugación con glutatión (conjugados con ácido mercaptúrico) A diferencia de la mayoría de las reacciones de Fase II, esta conjugación
Esta reacción también es conocida como glutationilación. Se presenta en la requiere de xenobióticos activados (reacción tipo 2) como electrófilos, en
11
conjugación de los xenobióticos con carácter electrofílico. lugar de co-sustratos activos. Los tipos de metabolitos que se pueden
El glutatión es un tripéptido conformado por ácido glutámico, cisteína conjugar con el glutatión incluyen N-hidroxi-compuestos, uretanos,
y glicina. Su comportamiento como especie nucleofílica está dado por el sulfonamidas, tiofenos, triazinas, éteres difenilos, compuestos halogenados,
2
átomo de azufre de la cisteína. Aunque el glutatión se encuentra en diversos nitro-compuestos, compuestos con dobles enlaces y sulfatos. Los procesos
órganos y tejidos, es en el hígado y riñón donde se presenta en mayor que dan este tipo de reacciones las podemos agrupar como sustitución
5
proporción y alcanza concentraciones de 5 a 8 µM. nucleofílica bimolecular (SN2) y sustitución nucleofílica aromática (SNAr).
El grupo de enzimas que inician el proceso son las glutatión-S-transferasa

(GST). Este grupo enzimático está ampliamente distribuido en la naturaleza.
En las células de mamíferos se presentan dos grupos: las unidas al retículo
endoplásmico y las citoplasmáticas. Estas últimas de agrupan bajo familias
denominadas: alfa (α), kappa (κ), mu (µ), pi (π), sigma (Σ) y teta (θ). Estas
enzimas pueden presentar hasta 2 subunidades.3 Con lo indicado en lo
anterior, la representación de la enzima quedaría como se muestra a Figura 4.22. Tipos de sustituciones en la reacción de xenobióticos
continuación: electrofílicos con glutatión.
Para ilustrar el proceso de conjugación con glutatión y la presencia de

derivados del ácido mercaptúrico, se presenta en la siguiente figura la
biotransformación del naftaleno.
Los procesos no enzimáticos para que ocurra la conjugación se llevan a cabo
Una vez que se ha producido el conjugado con glutatión, se inicia la
en el citosol. Este último proceso ocurre a bajas concentraciones del
remoción del glutámico por la γ-glutamiltranspeptidasa; luego se separa a la
xenobiótico y es una reacción lenta.
glicina con la participación de la enzima cisteinilglicinatranspeptidasa para
70
producir el conjugado con cisteína. En condiciones biológicas, este último mismas harán uso de transportadores. Este tópico se conoce como Fase III
compuesto se presenta como zwitterión, por lo que enseguida ocurre la N- de la biotransformación y se mencionará más adelante.
acetilación para obtener el derivado del ácido mercaptúrico. Con esta
conversión se tiene una molécula soluble en agua para ser más fácilmente gluatión
H2O2 H2 O
peroxidasa
excretada:
GSH GSSG
glutatión glutatión glutatión
reducido NADP+ reductasa NADPH oxidado
Figura 4.24. El glutatión como un “amortiguador redox”.
4.3.4. Acilaciones
Este grupo de reacciones se presentan en dos facetas principales. Las
acetilaciones y la conjugación con aminoácidos.
4.3.4.1. Las reacciones de acetilación

Las reacciones de acetilación de xenobióticos primeramente ocurren sobre
grupos aminos primarios; los aminos secundarios y terciarios, en general, no
son acetilados. De la misma manera, procesos de diacetilación
prácticamente no son observados. En las reacciones de acetilación, la
Figura 4.23. Conjugación del naftaleno con el glutatión y formación de acetilcoenzima A es la molécula donadora del acetilo en aminas alifáticas. La
derivados del ácido mercaptúrico. enzima arilamina transferasa (varias isoenzimas) cataliza la acetilación de
numerosas aminas aromáticas y sulfonamidas. Esta enzima ha sido
Por otro lado, por su comportamiento como entidad que se puede oxidar, el
detectada en el hígado, estómago, pulmones, timo, ovarios, útero, glándulas
glutatión puede llegar a transformar especies oxidantes como el peróxido de
adrenales, leucocitos, riñones, médula ósea, páncreas, glándulas salivales,
hidrógeno para reducirlos y eliminar su potencial toxicológico (Figura 4.24)
cerebro y músculo de muchos animales (excepto los perros), incluyendo al
Dado que los productos de biotransformación de las Fases I y II se
hombre.
forman en el interior de las células, y por su naturaleza polar, para salir de las
71
La acetilación es un proceso que se lleva a cabo en dos etapas. Primero Se han detectado polimorfismos genéticos en más de 30 enzimas que
ocurre la acetilación del sitio activo de la enzima por acetil coenzima A. participan en el metabolismo de xenobióticos (acetiltransferasa, CYP,
Enseguida, el grupo acetilo se transfiere al grupo amino del xenobiótico glucuronidasa, entre otros), algunos de los cuales demuestran diferencias
(Figura 4.25). Este proceso en dos etapas permite que la enzima manifieste étnicas sustanciales en la frecuencia de aparición y en las consecuencias
2
mayor control sobre el proceso catalítico. fenotípicas de su respuesta como son: la ampliación del efecto terapéutico
de los fármacos, aparición de reacciones adversas, dosis efectiva
incrementada de fármacos y aumento de las interacciones medicamentosas,
entre otras consecuencias.
Figura 4.25. Mecanismo de acetilación por la N-acetiltransferasa.
En el hombre, la N-acetilación está determinada genéticamente. Los tres

fenotipos son: a) homocigotos acetiladores rápidos, b) homocigotos
acetiladores lentos y c) heterocigotos acetiladores intermedios. La
distribución de los acetiladores rápidos y lentos depende de la raza de los
individuos. Acetiladores lentos como los egipcios, acetiladores
rápidos/acetiladores lentos (50:50) en los Estados Unidos, y acetiladores
rápidos/acetiladores lentos (90:10) en los orientales.
La respuesta de los individuos a la reacción de acetilación está
determinada por factores genéticos. Las enzimas con este tipo de
Figura 4.26. Acetilación de la isoniazida.
comportamiento presentan el denominado polimorfismo genético (rasgo
4.3.5. Excreción de los metabolitos de Fase II
monogenético heredado que existe en la población en al menos dos
Una vez fuera de las células, los metabolitos de Fase II van a excretarse
genotipos; se considera que el locus es polimórfico si el alelo más raro
principalmente por los riñones o salir por el hígado al intestino delgado,
aparece con una frecuencia mínima del 1%). según sea su peso molecular.
72
En general, los intermediarios reactivos pueden clasificarse en cuatro grupos

Tabla 4.14. Excreción de los derivados de las reacciones de Fase II.
Tipo de reacción principales que son:
Especimen preferente de excreción
a) Compuestos electrofílicos: intermediario químico que presenta
Glucurónidos <250 D (orina), >250 D (heces)
Conjugados del ácido orina deficiencia de electrones: R3C+
mercaptúrico b) Radicales libres: son entidades químicas que contienen un número
Conjugados con glutatión heces
Ésteres de sulfatos orina impar de electrones: R3C·.
Conjugados acetilados heces c) Carbenos: son moléculas en las que el carbono sólo tiene seis
Conjugados con aminoácidos orina
electrones: R2C: y nitrenos (moléculas neutras en las que el
nitrógeno tiene sólo seis electrones: R-N:). Este grupo de
4.4. La bioactivación tóxica intermediarios son los mencionados con menos frecuencia en los
La diferencia entre un proceso de destoxificación y el de activación tóxica diferentes estudios de toxicidad.
radica en la reactividad química de los metabolitos formados.12 En la d) Oxígeno activado: cuando el oxígeno molecular se reduce para
Figura 4.27 se muestra la integración de la Fase I, Fase II y Fase III en su ganar un electrón y producir un anión superóxido: O2·-. Este
relación con el proceso de destoxificación y activación tóxica. intermediario está involucrado en el estrés oxidante y se mencionará
en el siguiente capítulo.
La mayor parte de los intermediarios reactivos son formados por el CYP. Sin
embargo, existen algunos ejemplos donde la activación la provocan
reacciones de conjugación (Fase II), cuando el producto formado sufre
alguna descomposición; por ejemplo, los ésteres de sulfato de las
hidroxilaminas, dan lugar a compuestos electrofílicos al romperse el enlace
Figura 4.27. Separación en las rutas de intoxicación y destoxificación. formado entre el átomo de oxígeno y el átomo de nitrógeno.
Otro aspecto a considerar es la duración de la exposición a un

La oxidación no impedida de los xenobióticos por el CYP produce
xenobiótico por un organismo. Las consecuencias que se presentan en una
metabolitos, los cuales son fácilmente conjugados y, por lo tanto, excretados
exposición aguda o crónica a un xenobiótico, generalmente, tienden a ser
del organismo. La oxidación de los xenobióticos de estructura plana, en
diferentes. En una exposición aguda, el xenobiótico interacciona con su
posiciones impedidas estéricamente por el CYP1 produce intermediarios
macromolécula diana y manifiesta su actividad biológica. En la exposición
reactivos, los cuales no son fácilmente conjugados y eliminados, por lo que
crónica, las enzimas que normalmente participan en la destoxificación del
interaccionan con nucleófilos intracelulares provocando toxicidad.13
73
xenobiótico se saturan y dan lugar a que se formen intermediarios reactivos dentro de la población humana son debidas, primordialmente, a la variación
al ocurrir biotransformaciones por rutas alternas. en la composición y cinética de los sistemas enzimáticos que participan en el
metabolismo.14
enzima Para los compuestos que son ácidos o bases débiles, la ruta que
toxicidad
(diana)
Xenobiótico A A siguen para manifestar un potencial toxicológico se presenta en la siguiente
destoxificación figura. Los ácidos orgánicos pueden conjugarse con el ácido glucurónico y
metabolito dañar al hígado. Las bases o neutras pueden biotransformarse mediante el
CYP para generar electrófilos o radicales libres, en un átomo de carbono,
excreción para dañar este mismo órgano. Alternativamente, las bases o sustancias
neutras se pueden transformar por peroxidasas para generar radicales sobre
GSH citotoxicidad un átomo que sea el carbono y ocasionar discrasia sanguínea.2
intermediario proteínas inmunotoxicidad activación de

xenobióticos
reactivo ADN mutagénesis
Xenobiótico B B receptores
carcinogénesis
destoxificación regulatorios
ácidos bases o neutros
metabolito
excreción UGT acilCoA sintetasa CYP peroxidasas
acilglucorónido acilCoA tioéster

radicales
Figura 4.28. Diferencias en el riesgo de una intoxicación aguda electrófilos radicales (C·) (het· )
y una intoxicación crónica. hepatotoxicidad

discrasia sanguínea
En la toxicidad aguda, el xenobiótico A ejerce su efecto tóxico por la inhibición directa de hepatotoxicidad,
una enzima, y es subsecuentemente desactivado y eliminado. En la toxicidad crónica, el inactivación de CYP
xenobiótico B es activado metabólicamente hacia un intermediario reactivo, el cual se une
covalentemente a glutatión (GSH), proteínas, DNA y, posiblemente, a receptores Figura 4.29. Intermediarios reactivos de ácidos o bases y daño ocasionado.
reguladores.
En la biotransformación de xenobióticos siempre hay que tener presente que

Para muchos agentes tóxicos, la duración de su acción es inversamente se van a producir distintos metabolitos con la participación de diferentes
proporcional a la velocidad a la cual ellos son metabólicamente inactivados. enzimas. La mayor parte de los productos formados facilitan la excreción del
En otras palabras, entre más rápido sea transformada una sustancia in vivo a xenobiótico y solamente algunas rutas llevan a la formación de intermediarios
sus metabolitos inactivos, más corta será la duración de su efecto. Las reactivos. Una manera de ilustrar lo anterior es el caso de la
diferencias observadas en la duración de acción de muchos agentes activos
74
biotransformación del acetaminofén (paracetamol). A continuación se Adicionalmente a lo anterior, existe una ruta alternativa de oxidación del
presenta el esquema que integra las reacciones de Fase I, de Fase II, así paracetamol que llega a producir metabolitos tipo radical libre y al N-acetil-p-
2
como los procesos de desintoxicación como los de activación tóxica. benzoquinoneima (NAPQI) que presenta naturaleza electrofílica con la
O O tendencia a sufrir el ataque de un nucleófilo vía una adición de Michael. A
O
HN CH3 HN CH3
HN CH3 esta entidad electrofílica se le atribuye la hepatotoxicidad del paracetamol
PAP PAPS UDP-GA UDP
porque puede reaccionar con macromoléculas biológicas.
sulfato UDP-glucurosil Otro aspecto a mencionar es que diferentes familias de un grupo de
-
transferasa transferasa
OSO 3 OH -
enzimas pueden producir intermediarios reactivos en posiciones diferentes
OC 6H8O 6
sulfato de acetaminofén
glucurónido de dentro de una misma molécula de xenobiótico. Como ejemplo indicamos al
acetaminofén acetaminofén
diclofenaco (antiinflamatorio) en donde el CYP3A4 produce un intermediario
NADPH2, O2 H+, e- O
electrofílico en el anillo que lleva el grupo carboxilo y el CYP2C9 lo hace en
ROOH el anillo que presenta dos átomos de cloro.
O
CYP 2E1, 1A2, .N CH3
3A4 O O
HN CH3 PHS
Cl OH Cl OH
ROH + H2O NH N
NADP, 2H2O H+, e- CYP3A4
OH O
4
O . Cl CY
P 3A
Cl OH Cl O
O OH
NH
O
N CH3
O
HN CH3 unión a proteínas renales con Cl O
daño a la médula del riñón CY
GSH P2 Cl OH
C9 OH
Cl
diclofenaco NH
N
CYP2C9
SG O unión a proteínas hepáticas
OH N-acetil-p-benzoqui- y producción de cirrosis HO Cl
Cl
O
conjugado noneimina (NAPQI)
con glutatión
Figura 4.31. Biotransformación del diclofenaco a productos hepatotóxicos.
Figura 4.30. Biotransformación del acetaminofén (paracetamol).
Cabe mencionar que las reacciones de conjugación para producir
sulfonatos (generalmente indicados como sulfatos) y glucurónidos son los
Cuando el paracetamol llega al hígado, primero forma un derivado
que primordialmente se forman. En una intoxicación crónica, las enzimas
glucurónido para excretarse del organismo. Como se indicó en un apartado
anterior, también puede formar ésteres de sulfato, aunque en muy poca de Fase II se saturan, por lo que se van a manifestar las reacciones
alternativas que generan compuestos de naturaleza electrofílica.2
proporción. Ambos caminos llevan a la eliminación del fármaco.
75
Aunque se asume que el glutatión es una molécula endógena que ayuda a

Aunque la acetilación frecuentemente destruye la actividad biológica de los
eliminar electrófilos como recurso de desintoxicación, en algunas ocasiones
compuestos, en algunas ocasiones puede provocar lo contrario. Por ejemplo,
estos conjugados pueden generar entidades que producen efectos tóxicos,
la N-acetilación del 2-aminofluoreno genera un compuesto carcinogénico,
como se ilustra a continuación.13
el 2-acetilaminofluoreno. Este metabolito sufre una reacción de oxidación
Br GS +
en el átomo de nitrógeno de la amida. Enseguida, ocurre una reacción de GSH + Br Br GS
sulfatación que conjuga el compuesto hidroxilado previamente formado. De 1,2-dibromoetano
SG
esta manera se esperaría que el 2-aminofluoreno se eliminaría del OH OH
N7 N
organismo; sin embargo, el enlace N-O del conjugado no es lo N
+
N
suficientemente estable y sufre una ruptura homolítica para producir un H2N N N HN N N

. . . .
radical libre, prácticamente de forma espontánea. OH
1 mayoritario
N7 SG
+ 2 N
O
GS + GS O
H2N N N5 O
acetilación GS
N
NH2 NH CH3 . . N N
N
H2N N N
H2N N N
. .
CYP . .
O O
sulfotransferasa Figura 4.33. El glutatión como un generador de especies tóxicas.
N . CH3 N CH3
. OH
O O
_ En algunos casos, la biotransformación de un xenobiótico ocurre en
S diferentes órganos y tejidos de nuestro organismo o de los animales de
O O
experimentación. Estas diferentes posiciones anatómicas están implicadas
O
_ en el daño potencial que estas moléculas puedan ocasionar. Para ilustrar
O _
esto usaremos el caso del benceno y el 2,6-dinitrotolueno. El benceno inicia
N CH3
+ O S O
+ O su biotransformación de Fase I al oxidarse a fenol. Enseguida se transforma
electrófilo a hidroquinona, que es la entidad que ingresa a la médula ósea para
transformarse en un radical libre por la participación de la PHS peroxidasa y
Figura 4.32. Bioactivación del 2-acetilaminofluoreno. unirse a macromoléculas biológicas que llevan a dañar este tejido.2
76
hígado como la última fase del metabolismo de xenobióticos, la cual se refiere al

HO OH
transporte de los productos originados en la Fase II, a través de la membrana
CYP CYP celular.
O glucurÛnido
OH CH3 CH2OH
NO2 O 2N NO2 NO2
O 2N
hígado
O 2N
P450 UDP-GT
estimulación 2,6-dinitrotolueno
médula ósea OH
O . PHS conducto
supresión de mieloperoxidasa biliar
médula ósea
por unión a
proteínas y ADN
O glucurÛnido
OH
OH CH2OH
intestino
NH2
Figura 4.34. Biotransformación del benceno. O 2N β-glucuronidasa nitroreductasa O 2N NO2
En el caso del 2,6-dinitrotolueno su biotransformación de Fases I y II se

llevan a cabo en el hígado. El glucurónido formado, por su peso molecular, vena
porta
sigue la ruta de la excreción biliar que lo lleva al intestino delgado y luego al
grueso. En este sitio, por la presencia de microbiota, se reduce uno de sus
CH2OH CH2OH CH2OH
hígado
grupos nitro y sufre la hidrólisis que separa al glucurónico. El metabolito O 2N NH2 O 2N NH O 2N NHOX
P450 OH
producido re-ingresa al hígado para oxidarse en su grupo amina y formar la
acetilaciÛn,
sulfataciÛn
hidroxilamina correspondiente. Este último se puede sulfatar para tratar de X= COCH3,
eliminarse; sin embargo, el enlace N-O sufre una ruptura homolítica que da SO3H
lugar a un radical libre que daña a las macromoléculas biológicas.

uniÛn covalente
al ADN o proteÌnas
Figura 4.35. Ruta de biotransformación del 2,6-dinitrotolueno.
4.5. Fase III: traslado hacia el exterior de la célula
En general, la biotransformación de xenobióticos se refiere a las Fases I y II, Los transportadores de la Fase III se expresan en varios tejidos como
en donde la Fase I involucra la oxidación de compuestos y la Fase II a la hígado, intestino, riñón y cerebro.15 Este sistema sirve de protección, ya que
conjugación de los productos generados en la Fase I con glucurónico y disminuye la concentración intracelular de estos compuestos polares.16
glutatión, entre otros. Sin embargo, hace poco se reconoció a la Fase III
77
La importancia toxicológica de la Fase III radica en que en algunas ocasiones del ATP para llevar a cabo el transporte. La P-gp es una glicoproteína de
las reacciones de conjugación con glutatión pueden dar lugar a la activación membrana de 107 kDa que regula la salida de ciertos compuestos de las
tóxica de los compuestos en lugar de facilitar su salida de la célula. En estos células.18
casos habrá acumulación de metabolitos que pueden ser tóxicos. 16
Entre los transportadores involucrados en la Fase III se encuentran
la glicoproteína P (P-gp), las proteínas asociadas a la resistencia a fármacos
(MRPs) y el polipéptido transportador de aniones orgánico (OATPs).17
OATP-polipéptido transportador de aniones orgánicos, MRP-proteínas asociadas a la

resistencia a fármacos y P-gp- glicoproteína P.
Figura 4.37. Transportadores en la entrada

y salida de compuestos en hepatocito.
Figura 4.36. Transportadores de la Fase III.
Tanto P-gp, MRPs como OATPs se expresan en la membrana de los Esta proteína se expresa en bajas cantidades en la mayoría de los tejidos,
enterocitos intestinales, los cuales trasladan xenobióticos al lumen pero se encuentra en mayor cantidad en el colon, intestino delgado,
intestinal.16 conductos pancreáticos, conductos biliares, riñones y en las glándulas
Por otro lado, en los hepatocitos hay OATPs que ingresan adrenales.5,6 También se ha encontrado que se expresa en la barrera
xenobióticos al citoplasma y MRPs y P-gp que sacan metabolitos polares hematoencefálica, en donde protege al cerebro de la entrada de compuestos
hacia el torrente sanguíneo o la bilis. tóxicos que pudieran llegar a él a través de la circulación sanguínea.16 En el
epitelio intestinal, las P-gp se encargan de la entrada de xenobióticos de la
4.5.1. Glicoproteína P sangre a la luz intestinal y previene que estos compuestos regresen a la
La glicoproteína-p (P-gp) es uno de los primeros transportadores ABC (ATP circulación sanguínea.
binding cassette) identificados y estudiados, el cual necesita de la hidrólisis
78
El impacto global de P-gp es en los porcentajes del xenobiótico que se conjugación con glutatión son un mecanismo de defensa clave en la
distribuyen en diferentes órganos. En general, la P-gp participa en sacar al desintoxicación de compuestos electrófilos tóxicos y en el mantenimiento de
xenobiótico de los diferentes órganos. Algunas investigaciones marcan que la homeostasis celular.19
aquellos xenobióticos que son reconocidos por CYP3A4 también lo son para En humanos, los MRPs descritos para el transporte de compuestos
P-gp. conjugados son: MRP1, MRP2, MRP3, MRP4, MRP5 y MRP6.20
Los complejos formados con glutatión, glucurónico o sulfato durante
la Fase II son sustratos del MRP1, al igual que algunos aniones orgánicos
como las sales biliares monoaniónicas. Varios miembros de la familia de los
MRPs pueden participar en el traslado de metales pesados, como arsenito y
antimonio. El mecanismo propuesto para la eliminación de estos metales
pesados involucra la conjugación con glutatión. MRP1 y posiblemente MRP5
contribuyen a la resistencia en humanos al arsenito.
Existen metabolitos de xenobióticos presentes en los alimentos que
pueden ser retirados de las células a través de los MRPs. Un ejemplo es el
producto de la conjugación de la aflatoxina B1 con glutatión, el cual es un
sustrato de alta afinidad para el MRP1 (Figura 4.39).21
4.5.3. Polipéptido transportador de aniones orgánicos (OATP, organic anion

transporting polypeptide)
Los OATPs son una gran familia de transportadores de membrana que
regulan la captación de una gran cantidad de compuestos tanto endógenos
Figura 4.38. Ubicaciones de la P-gp en tejidos y su competencia con CYP como exógenos.22 En humanos, se han descrito 11 de estos transportadores:
(dibujo realizado con SmartDraw™). OATP1A2, 1B1, 1B3, 1C1, 2A1, 2B1, 3A1, 4A1, 5C1, 5A1 y 6A1. De ellos, se
han caracterizado OATP1A2, 1B1, 1B3 y 2B1, en la farmacocinética de
fármacos. El OATP1A2 facilita la entrada de sustancias al torrente
4.5.2. Proteínas asociadas a la resistencia a fármacos (MRP, multidrug-
circulatorio a través de la pared duodenal. En humanos, OATP1B1, 1B3, 2B1
resistance-associated protein)
están localizados en los hepatocitos y permiten la entrada de compuestos de
Pertenecen a la familia de transportadores ABC (ATP-binding cassettes).
la circulación sanguínea a esta célula, lo cual representa un paso importante
Para su funcionamiento dependiente de la hidrólisis de ATP. Estos
transportadores son de gran importancia debido a que las reacciones de
79
en la posterior eliminación del compuesto, ya sea a través de

23
biotransformación o eliminación biliar.
Entre los sustratos endógenos del OATP1A1 y 1B1 se encuentran
ácidos biliares (colato y taurocolato), esteroides conjugados con glucurónico
o sulfato, eicosanoides y hormonas tiroideas. Sin embargo, hay compuestos
de origen natural que puede inhibir a estos transportadores; el OATP1A2 se
inhibe por los jugos de naranja y toronja, así como por los flavonoides
presentes en ellos: naringina en el jugo de toronja y hesperidina en el jugo de
naranja. Además, OATP2B1 se inhibe significativamente por el jugo de toronja.23
Figura 4.39. Metabolismo de Fase I (oxidación), Fase II (conjugación)

y Fase III (traslado) de la aflatoxina B1 hacia afuera de los hepatocitos.
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81
Capítulo 5. Estrés oxidante bioquímicas y patológicas que dan origen a este fenómeno, y que
comprenda la naturaleza del comportamiento de algunas de las especies
Francisco Hernández-Luis, María Elena Bravo-Gómez, Sandra María causantes del estrés oxidante, así como las defensas que un organismo
Centeno-Llanos, Perla Carolina Castañeda-López, Circe Mouret- tiene para amortiguar o disminuir los daños ocasionados.
5.1. Efecto de los oxidantes en la salud humana

Uno de los temas de estudio central en el campo de la toxicología es el
Contenido estudio de los procesos de oxidación celular, cómo son desencadenados
5.1. Efecto de los oxidantes en la salud humana ............................ 82 por factores externos e internos y cómo están relacionados con algunos
5.2. Causas del estrés oxidante ...................................................... 82
trastornos clínicos (Tabla 5.1).1,2
5.3. Especies reactivas de oxígeno ................................................. 85
Los procesos de oxidación celular se presentan en todo momento
5.3.1. El anión superóxido…………………………………………....85
5.3.2. El peróxido de hidrógeno………………..……………………88 en el organismo, existen las defensas antioxidantes naturales, las cuales
5.3.3. El radical hidroxilo (·OH)…………………………….………..89 son, generalmente, adecuadas para aminorar o eliminar el daño que se
5.3.4. Otras especies oxidante reactivas que no pudiese ocasionar.1 Sin embargo, estos antioxidantes y las enzimas que los
son radicales libres…………………………………………….90 producen, disminuyen con el envejecimiento.3
5.3.5. Detección de ROS…………………………………………….91
5.4. Daño oxidante al ADN…………………………………………….92
5.5. La peroxidación de lípidos………………………………………..93
homeostasis antioxidantes oxidantes
5.6. Daño oxidante a azucares………………………………………..95
5.7. Biomarcadores para el estrés oxidante…………………………96
5.8 Antioxidantes………………………………………………………..96
5.8.1. El glutatión como agente antioxidante……………………...98 estrés antioxidantes oxidantes
5.8.2. La vitamina E (α-tocoferol, VitE-OH) como antioxidante....99 oxidante
5.8.3 La vitamina C (ácido ascórbico, VitC-(OH)2) como
antioxidante………………………………………………………100
5.8.4. Algunos compuestos antioxidantes presentes en Figura 5.1. Estrés oxidante.
vegetales............................................................................101
Bibliografía ..................................................................................... 102 5.2. Causas del estrés oxidante
El estrés oxidante en las células y tejidos se presenta cuando hay una
En este capítulo se presentan conceptos básicos que ayudarán a sentar las
sobreproducción de especies oxidantes: O2·− (anión superóxido), H2O2
bases para la comprensión del fenómeno denominado estrés oxidante
(peróxido de hidrógeno), entre otros.4 La presencia de estas especies
(estrés oxidativo). El objetivo es que el alumno conozca las bases químicas,
químicas provoca un desajuste en la relación oxidante/antioxidante de la
82
Capítulo 5. Estrés oxidante Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM.
célula, con tendencia favorable hacia el primero.3 Dado que el estado redox -enfermedades autoinmunes -intoxicación por plomo
-artritis reumatoides -efectos por fenilhidrazina
del organismo es prácticamente estable, el estrés oxidante es un fenómeno -anemia
que se presenta sólo en compartimentos corporales.5 Al parecer, son tres Isquemia-estados de reflujo -favismo
-infarto al miocardio
las alteraciones intracelulares que de forma directa ocasionan el estrés -trasplante de órganos Pulmones
oxidante: 6 -efectos del humo del cigarro
Reacciones inducidas por xenobióticos -hiperoxia
§ La sobreproducción de especies oxidantes como el H2O2 y de (efecto yatrógeno**) -efectos por bleomicina
-enfisema
radicales libres, como el anión superóxido.
Alteraciones por fierro -efectos por ozono
§ La liberación de los complejos iónicos presentes en algunas -hemocromatosis idiopática -displasia broncopulmonar
-efectos por bajo consumo -neumoconiosis
macromoléculas de importancia biológica. -efectos por sobredosis -efectos por dióxido de azufre
§ La modificación de las defensas contra los radicales libres. -talasemia y otras anemias tratadas
con transfusiones
Es preciso indicar que, dichas alteraciones son a su vez producto de otros Alcoholismo Sistema cardiovascular
-aterosclerosis
desajustes celulares, tales como la activación incrementada de leucocitos, -deficiencia de selenio (enfermedad
Daño por radiación de Keshan)
alteraciones en el metabolismo del ácido araquidónico o cambios en las -cardiomiopatía alcohólica
concentraciones de antioxidantes celulares (Figura 5.2).5 Envejecimiento
Riñones
A nivel celular, aparte de las especies reactivas de oxígeno (ROS) -daño por aminoglicósidos
provenientes del exterior, las mitocondrias aportan la fracción más Piel -alteraciones por metales pesados
-radiación solar -síndrome nefrótico
importante de ROS intracelular.1 Las ROS afectan a factores de -daño térmico -alteraciones autoinmunes
-porfiria
transcripción como Nrf2, NF-kB o AP-1, quienes al interaccionar con el ADN
-dermatitis por contacto Sistema nervioso
provocan la activación de genes que codifican para enzimas antioxidantes y -Alzheimer
Ojos -distrofia muscular
las de biotransformación (Fase I o II). Todo esto para tratar de neutralizar a -cataratogénesis -esclerosis múltiple
las especies ROS (Figura 5.3).2 -hemorragia ocular -daño por oxígeno hiperbárico
-retinopatía -deficiencia de vitamina E
Para que todas o alguna de estas modificaciones se presenten en -daño degenerativo de retina -neurotoxinas
la célula, es necesario que se den ciertas condiciones, ocasionadas por -enfermedad de Parkinson
-daño cerebrovascular por
factores de naturaleza externa y endógena.6 Tracto gastrointestinal hipertensión
-acción diabetogénica del aloxano -encefalomielitis alérgica
-pancreatitis -daño traumático
Tabla 5.1.Trastornos clínicos en donde están involucradas -compuestos halogenados -sobredosis de aluminio
especies oxidantes.7 -daño por antiinflamatorios no
Daño inflamatorio Glóbulos rojos esteroideos (NSAIDs)
-glomerulonefritis (membranosa, -foto-oxidación de protoporfirina *Idiopática: de causa no determinada; el nombre de xenobióticos se refiere a
intoxicación por los mismos. **Yatrógeno: inducido por administración de fármacos.
idiopática*) -paludismo
-vasculitis por fármacos -efectos por primaquina y análogos
83
Dentro de las externas se encuentran xenobióticos y radiaciones.1 Por lo Tabla 5.2. Factores que favorecen al estrés oxidante en el ser humano.7
que respecta a los endógenos, abarcan una serie de alteraciones Factores exógenos Factores endógenos
patológicas o fisiológicas, algunas de las cuales son determinadas por el alimentos vida sedentaria
5 dietas ricas en proteínas y lípidos ejercicio físico exhaustivo
estilo de vida del individuo (Tabla 5.2).
xenobióticos pro-oxidantes procesos inflamatorios (crónicos)
dietas pobres en antioxidantes cáncer
bebidas (café, alcohol) isquemia/perfusión
contaminantes muerte celular
humo de cigarro estrés psicológico
O3, NO2, SO2, hidrocarburos
plaguicidas: paraquat, DDT, eldrin,
lindano
exposición ocupacional (metales,
asbestos)
fármacos
anticancerígenos
psoralenos (furocumarinas)
radiaciones
radiación ionizante
radiación ultravioleta
microondas
absorbentes dérmicos
Figura 5.2. Causas del estrés oxidante. derivados de psoralenos
(pigmentadores)
citoplasma núcleo
Nrf2
Dado que el oxígeno es la entidad que juega un papel central en la
presentación de estrés oxidante, su concentración en diversos órganos y
NF-kB
tejidos de nuestro cuerpo no es constante. En los vasos capilares es donde
se encuentran los valores bajos fisiológicos. A esa presión (60–45 mmHg)
AP-1 activación difunde al interior de las células para mantener una presión interna de entre
de genes
mitocondria 1-10 mmHg (Figura 5.4). Lo que se conoce en la actualidad es que el
antioxidantes, ARNm
Fase I y II oxígeno no es el que directamente provoca efectos tóxicos en las células,
sino las especies químicas que de esta molécula derivan.
especies oxidantes: antioxidantes:
Nrf2: factor nuclear de transcripción; AP-1: proteína activadora 1; NF-kB: factor nuclear
potenciador de las cadenas ligeras kappa de las células B activadas.
Figura 5.3. Respuesta celular al estrés oxidante.
84
existen sustancias como el peróxido de hidrógeno que no presenta esta

característica.8
Además de su naturaleza química, las especies reactivas son
diferentes en cuanto al valor de su vida media. El peróxido de hidrógeno,
los hidroperóxidos orgánicos y el ácido hipocloroso presentan tiempos de
vida media del orden de minutos; el radical peroxilo y el óxido nítrico, del
orden de segundos; el anión superóxido, el oxígeno singulete y los
radicales alcoxilos, del orden de microsegundos; el radical hidroxilo del
orden de nanosegundos además de que está limitada a su difusión.1 La
contribución exacta de estas especies al daño celular aún no está del todo
clara, dado que pueden ser iniciadores o productos del trastorno
patológico.4
Tabla 5.3. Especies oxidantes reactivas (ROS).5

Especies reactivas con oxígeno (ROS) Especies reactivas con nitrógeno(RNS)
Radicales libres Radicales libres

O 2ꜙ
anión superóxido radical óxido nítrico NO ·
Figura 5.4. Presión parcial de oxígeno en arterias, arteriolas
radical hidroxilo ·OH radical dióxido de nitrógeno NO2 ·
y vasos capilares.1 radical peroxilo ·OOR
radical perhidroxilo ·OOH No radicales libres
radical alcoxilo ·OR ácido nitroso HNO2
(IV) +
radical protein hem ·X-[Fe =O] catión nitronium NO2
5.3. Especies reactivas de oxígeno ferrilo catión nitrosilo NO
+
-
En el campo de la toxicología se conocen dos tipos de especies químicas anión nitroxilo NO
No radicales libres tetróxido de dinitrógeno N 2O 4
que ocasionan daño celular o participan en los procesos para amplificar peróxido de hidrógeno H 2O 2 trióxido de nitrógeno N 2O 3
-
ácido hipocloroso HOCl peroxinitrito ONOO
estas alteraciones: los intermediarios reactivos, de naturaleza electrofílica, y
alquilperoxinitritos ROONO
1
las especies reactivas de oxígeno. oxígeno singulete O2
En el estudio del estrés oxidante son estas últimas las de mayor
relevancia. En términos generales, las especies reactivas de oxígeno se
Uno de los aspectos más estudiados de las ROS es su participación en el
presentan con átomos de oxígeno o con átomos de nitrógeno.1 En la Tabla 5.3
proceso carcinogénico. En este proceso de transformación de células
se presentan las de mayor relevancia biológica con sus nombres y
normales a cancerosas, las concentraciones de ROS juegan un papel dual;
estructuras para identificarlas. Es importante señalar que la naturaleza de
a concentraciones arriba de las consideradas como basales podrían
estas especies reactivas no en todos los casos es de radical libre, ya que
85
promover el crecimiento de células malignas y a mayores concentraciones células aeróbicas. Una manera alterna de presentar al oxígeno molecular y
provocarían la muerte celular (Figura 5.5, A). Se ha encontrado que las sus especies intermedias se ilustra en la Figura 5.7.
células normales toleran mayor concentración de ROS que las células
oxígeno singulete 1O
tumorales (Figura 5.5, B); de allí que un incremento acentuado en la 2
.. .. .. ..
concentración de ROS llegaría a provocar la muerte de células malignas, .O :O .
.. .. .. : O
O .. :
primeramente, luego de las células normales.9 1 Σg O2 1Δ g O2
+ 1e - _ + 1e - + 1e - + 1e -
O2 O2 . H2O2 . OH H2O
.. .. .. .. .. .. .. ..
. H:O H :O .
. O :O .
.. .. :O
.. : O
.. .. : O
.. : H .. H :O
.. : H
anión peróxido de radical
.. .. superóxido hidrógeno hidroxilo
.. : : O
O
..
Figura 5.6. Generación de ROS por reducción de la molécula de oxígeno.
Primero podemos observar que el oxígeno molecular en su estado

fundamental presenta dos electrones desapareados colocados en el orbital
π*2p antienlace, por tal motivo, tiene carácter de radical libre. Asimismo, el
oxígeno molecular puede actuar como agente oxidante; sin embargo, si
el oxígeno intenta oxidar otra molécula aceptando un par de electrones,
Figura 5.5. Efectos de las ROS en las células.
ambos deben presentar el mismo spin para formar pareja con los dos que
A continuación, vamos a mencionar algunas de las características ya tiene el oxígeno. Esto es muy difícil que suceda, puesto que en cualquier
generales de las ROS más estudiadas y mencionadas en la literatura. molécula no se podrían encontrar electrones con esas características, ya
que se colocan según el principio de exclusión de Pauli. Por ello es más
5.3.1. El anión superóxido factible que el oxígeno primero gane un electrón y, posteriormente, gane un
El anión superóxido, el peróxido de hidrógeno y el radical hidroxilo se segundo electrón. Esto favorece el ingreso de ambos electrones de forma
forman como intermediarios en el proceso de reducción de una molécula de más favorable.2
oxígeno a agua, como se muestra en la Figura 5.6.10 En este proceso hay
una ganancia de cuatro electrones. Se ha determinado que,
aproximadamente, el 2% del oxígeno reducido por las mitocondrias forma
anión superóxido.11,12 Esta sustancia se forma en prácticamente todas las
86
Hay que anotar que si ∆E´° es positivo, entonces el ∆G será negativo, por lo
tanto, el proceso será espontáneo.1
Algunos valores de ∆E´° para semi-reacciones de interés en el
campo toxicológico se presentan en la Tabla 5.4. Entre más positivo sea el
valor numérico de la semirreacción, más fácil ser presentará la reducción.
Tabla 5.4. Potenciales de reducción (pH = 7.0).
o
Semi-reacción E (V)
+ -
½ O2 + 2H + 2e ¨ H 2O 0.82
- + - -
NO3 + 2H + 2e ¨ NO2 + H2O 0.43
+ -
O2 + 2H + 2e ¨ H 2O 2 0.31
3+ - 2+
Citocromo c Fe +e ¨ Citocromo c Fe 0.25
3+ 2+
Fe (acuoso) ¨ Fe (acuoso) 0.11
+
FAD + 2H + 2e ¨ FDH2 -0.22
2 +
Figura 5.7. Presentación de las diferentes especies del oxígeno molecular. GSSG + 2H + 2e ¨ 2GSH -0.23
3+ - 2+-
Citocromo b358F +e ¨ Citocromo b358F -0.24
Un adulto de 70 kg de peso utiliza aproximadamente 3.5 mL/kg/min (14.7 + + - +
NADP + H +2e ¨ NADPH -0.32
mol/día) de oxígeno molecular. Si el 1% de este oxígeno genera O2·−, su
- ·−
producción sería 0.147 mol/día. 1 O2 + e ¨ O2 -0.33
3+ - 2+
Dado que la generación de ROS es un proceso de reducción, en Ferredoxina Fe +e ¨ Ferredoxina Fe -0.43
este tópico se aplican los mismos principios de los fenómenos redox. En

primer lugar, el proceso tiene que ser espontáneo, situación determinada La utilidad de los valores de ∆E´° es que se aplican para calcular el
por el signo negativo de ∆G. Esta función de estado está relacionada con potencial de una reacción a partir de los valores de las semirreacciones que
los procesos redox mediante el potencial estándar de reducción (∆E´°), el lo conforman. Ejemplo.
cual representa las semi-reacciones de reducción medidos a valores de pH

1
O + 2H ! + 2GSH → H! O + GSSG + 2H !
de 7.0 para el área biológica, la constante de Faraday ( f ) y el número de 2 !
electrones involucrados (n).1 ∆E´° = 0.82 + 0.23 = 1.05 (V)

A + B → C + D ∆G(−)
Un aspecto importante a indicar es que de los valores para la reducción del
o
oxígeno molecular se pueden llevar a cabo mediante tres semirreacciones
∆G = -nf ∆E´ f = 23.06 Kcal/V mol
de reducción con valores distintos de ∆E´°. Los dos primeros tienen valores
87
positivos (0.82 y 0.31) y el tercero negativo (-0.33). Note que ½O2 se reduce
favorablemente a H2O al oxidarse dos moles de GSH o una mol de NADPH.
En este proceso la reducción del oxígeno molecular implica la ganancia de
dos electrones en un solo paso. Consideración análoga se aplica para la
reducción de 1 mol de oxígeno molecular a H2O2.2
Por otro lado, la reducción de 1 mol de oxígeno a O2·− no es un
proceso favorable y se llevaría a cabo con la participación de una
semirreacción con un valor mucho más negativo que -0.33 para que diera
un ∆E´° positivo para toda la reacción.1
Los valores de semirreacciones para la generación de las ROS a
partir de la reducción del oxígeno molecular se presentan en la Figura 5.8.
Como se puede observar, el primer paso es determinante al presentar un
valor negativo de ∆E´° (entre más negativo sea el valor, más difícil será la NOx: complejo NADPH oxidasa; XO: xantina oxidasa; CYP: citocromo P450
reducción y más fácil la oxidación). Los demás pasos son más factibles de
Figura 5.9. Fuentes de anión superóxido en la célula y extracelular
llevarse a cabo por los valores positivos que presentan; siendo el último el
más espontáneo de todos. Una vez formado el O2·− tenderá a reducirse
(∆E´° = 0.89) preferentemente que oxidarse (∆E´° = 0.33). La NADPH oxidasa (NOx) mejor estudiada es la fagocítica, presente en
neutrófilos y macrófagos. Es un complejo proteínico multimérico cuyos
componentes están en la membrana y el citoplasma. Los componentes de
membrana son las subunidades gp91 y el p22; estas dos subunidades
constituyen el llamado citocromo b558. La parte citoplasmática está
conformada por p47, p67, p40 y una porción reguladora denominada Rac2.
El complejo se activa cuando la serina de p47 se fosforila. Enseguida esta
subunidad migra hacia la membrana para que, conjuntamente con RAC, se
Figura 5.8. Potenciales de reducción del oxígeno molecular. unan al citocromo b558, y de esta forma iniciar la actividad catalítica.
El funcionamiento de este complejo ilustra la realización de un
En el ámbito biológico, el anión superóxido presente en el citoplasma
fenómeno redox en dos compartimentos distintos. La reducción del oxígeno
puede provenir de diferentes sitios. La fuente más importante son las
molecular se lleva a cabo en la parte extracelular y la reducción del NADPH
mitocondrias seguido por el CYP, complejo NADPH oxidasa y la xantina
en la porción intracelular (Figura 5.10).
oxidasa (Figura 5.9).
88
Fe2+, Cu1+
tioles (RSH) + O2 O2·-, H2O2 , . OH , . SR
Fe2+, Cu1+
NADPH + O2 O2·-, H2O2 , . OH , . NADP
Fe2+, Cu1+
catecolaminas + O O·-
2, H2O2 , . OH , semiquinonas
2
y análogos
ácido Fe2+, Cu1+

ascórbico + O2 H2O2 , . OH , radical semiascorbato
lípidos Fe2+, Cu1+

insaturados + O2 . OR , . OOR , aldehídos
Figura 5.11. Generación de ROS con la participación de metales de transición.

Figura 5.10. El complejo NADPH oxidasa de macrófagos y neutrófilos
El H2O2 se descompone en moléculas de agua, por la intervención de las
enzimas catalasa o glutatión peroxidasa (GPO o GSH-Px). La catalasa
·−
Otra forma de producir O2 y las otras ROS es mediante la participación de presenta prácticamente exclusividad de acción sobre el H2O2; la glutatión
2+ 2+
metales de transición; como el Fe , el Cu y otros; y entidades con grupos peroxidasa, por su parte, puede transformar a otras especies oxidantes.
funcionales susceptibles de presentar comportamiento redox (Figura 5.11). Aunque el H2O2 no es un radical libre, puede reaccionar con el
anión superóxido en presencia de metales de transición, para generar al
5.3.2. El peróxido de hidrógeno
radical hidroxilo (reacción de Fenton, Figura 5.12).
Este compuesto puede ser formado espontáneamente o por la participación
Se conoce que la concentración de H2O2 intracelular varía según
de un grupo de enzimas denominadas superóxido dismutasas (SOD) que
sea el tejido estudiado. En el caso del hígado, se considera un rango entre
catalizan la descomposición del anión superóxido. La SOD se localiza en el
0.1 a 0.01 µM. Esta concentración se va a elevar en situaciones de estrés
citosol donde requiere de cofactores Cu2+ y Zn2+ (CuZn-SOD o SOD1), en la
oxidante.
mitocondria donde requiere del Mn2+ (Mn-SOD) y en el espacio extracelular
Una característica importante de mencionar del H2O2 es que a
(ecSOD) también de Cu2+ y Zn2+. Por todo lo anterior, se le considera un
diferencia del radical superóxido, el peróxido de hidrógeno es una molécula
oxidante importante en las células epiteliales y en plaquetas. Cada plaqueta
neutra, lo que le permite difundir a través de la membrana y distribuirse a
humana contiene alrededor de 1 fg de SOD, el cual es la mitad de lo que
otros compartimentos celulares distantes de donde fue formado.
presentan los leucocitos.
89
GSSG 2H 2O _ _
O2 . + NO ONOO
2GSH anión
._ GPO peroxinitrito
O2 O2 _
._ SOD H2O 2 O2 ONOO + H+ ONOOH
O2
+
H2O 2
CAT
2H 2O
ONOO H .OH + .NO 2
2H
Fe2+, Cu+, Mn2+ _

NO3 + H +
. OH _
+ OH Figura 5.13. Alternativa para la generación de ·OH.
reacción de Fe3+, Cu2+, Mn3+
Fenton
5.3.4. Otras especies oxidante reactivas que no son radicales libres
Mencionaremos en primer lugar al oxígeno singulete. Esta especie se forma
SOD: superóxido dismutasa; CAT: catalasa; GPO: glutatión peroxidasa por la inversión en el spin de uno de los electrones desapareados de la
Figura 5.12. Reacción de Fenton y enzimas antioxidantes. molécula de oxígeno. Los electrones de spin contrarios pueden ubicarse en
un solo átomo (1Σ gO2) o en ambos átomos de oxígeno (1Σ gO2).
5.3.3. El radical hidroxilo (·OH) Otra de las especies oxidantes que no es radical libre es el ácido
Este radical es considerado una de las especies oxidantes más dañinas. hipocloroso (HOCl). Esta especie se forma en los neutrófilos. Estas células
-9
Por su vida media corta (t1/2 = 10 s) y alta reactividad, el ·OH generalmente tienen una hemoproteínperoxidasa, llamada mieloperoxidasa (MPO, del
actúa en los sitios cercanos donde se produce. La generación de este griego myelo = médula ósea) en sus gránulos azurofílicos (que se tiñen con
radical se ve favorecida por la presencia de metales de transición a través anilinas azules).8 Cuando los neutrófilos se activan, liberan MPO al medio
de la mencionada reacción de Fenton. Esto constituye un aspecto extracelular donde interactúa con H2O2 y Cl- para formar HOCl (Figura 5.14).
importante del daño oxidante, el cual en cierta forma está determinado por Este ácido tiene un pKa de 7.5 por lo que, a nivel fisiológico, se presenta en
la ubicación de los metales de transición (hierro, cobre) en la célula. igual proporción la porción iónica (base conjugada) y la no iónica. Ambas
Se ha descrito también una segunda forma de producción de ·OH especies son 100 veces más oxidantes que el anión superóxido y el H2O2.
que no requiere de la presencia de metales de transición. Como se muestra Una de las consecuencias de la generación de HOCl es la oxidación
en el Figura 5.13, esta ruta involucra al anión superóxido y al óxido nítrico. y desactivación de la α-1-antiproteasa (α-1-antripsina) (Figura 5.15). Esta
proteína inhibe a la elastasa, la cual es una proteasa importante en los
procesos de inflamación.13 La falta de control de la elastasa, promueve una
proteólisis descontrolada. Prueba de esto es que cuando se previene en los
90
neutrófilos la generación de HOCl, las anti-proteasas permanecen activas y 5.3.5. Detección de ROS
son capaces de inhibir el daño epitelial. Debido a las características propias de las especies reactivas de oxígeno,
su determinación directa solamente se puede llevar a cabo a través de
resonancia paramagnética del electrón (EPR) a temperaturas muy bajas.
Sin embargo, el estrés oxidante se puede evaluar a través de la huella que
dejan estas especies en las biomoléculas, es decir, el daño cuantificable a
través de biomarcadores de exposición a estrés oxidante (8-hidroxiguanosina,
disminución del cociente GSH/GSSG, detección de malondialdehído, etc.).
Una tercera opción es el empleo de colorantes redox como las
sales de tetrazolio, o bien, colorantes redox fluorescentes o con
luminiscencia, que permiten el incremento de la sensibilidad de estas
pruebas. Es importante mencionar que aunque son muy útiles, estas
pruebas no son completamente selectivas, pueden requerir de un
catalizador y son sensibles al pH y la concentración de oxígeno. Por lo que
los resultados que deriven del empleo de este tipo de colorantes deben ser
NOx: complejo NADPH oxidasa; MPO: mieloperoxidasa
analizados cuidadosamente antes de llegar a conclusiones.14
Figura 5.14. Generación de HOCl en neutrófilos activados Una de las técnicas para detectar ROS a nivel intracelular utiliza al
compuesto DCFH-DA, el cual después de ingresar a la célula y en
presencia de ROS se transforma en DCF que emite fluorescencia.10
H2O2 + Cl-
elastasa MPO
(activo)
HOCl
inhibidor α-1 proteasa inhibidor α-1 proteasa
(activo) (inactivo)
elastasa
(inactivo)
Figura 5.15. Relación del daño causado por HOCl y las elastasas.
Figura 5.16. Determinación de especies ROS.
91
5.4. Daño oxidante al ADN

inductor de L
Las macromoléculas biológicas que sufren daño por el estrés oxidante son peroxisomas
lipólisis
respuesta
el ADN, los lípidos, las proteínas y los polisacáridos.11 De todas ellas, al mitogénica
activación de
protooncogén receptor
parecer, el daño más significativo por las consecuencias que se van a LOOH
presentar es sobre el ADN. amplificación
del oncogén
En un primer plano, el daño se presenta en las bases genes replicación
transformación radicales ADN
nitrogenadas. Aunque todas ellas son susceptibles de sufrir oxidación, es celular libres
ARNm
la 8-oxoguanosina, la que más se menciona en la literatura por ser la más peroxidación retículo
estable, lo que permite su cuantificación plasmática.15 .

de lípidos
OH H2O2
endoplásmico
excesivo proliferación
de peroxisomas inducción enzimática
ROS cambios en la permeabilidad
de membranas
oxidación de los
Figura 5.18. Algunas interacciones en los efectos del daño oxidante.
ácidos nucleicos
En las células, la concentración citosólica del Ca2+ se mantiene en un rango

nucleósidos oxidados
de 0.1 a 0.2 µM. En la parte extracelular, la concentración de este ion es de
O O H
≈1.3 µM. Esta diferencia en los valores permite la existencia de un
N N
N
OH
N gradiente electroquímico que favorece la entrada de Ca2+ al interior de la
O
H2N N N
N N célula por medio de la participación de acarreadores. Por otro lado, existen
H2N
R R mecanismos encargados de expulsar el exceso de Ca2+ del interior al
8-hidroxiguanosina 8-oxoguanosina exterior de la célula o secuestrarlo para conservarlo en el interior del
R: desoxiribosa retículo endoplásmico, núcleo o mitocondrias. La importancia del Ca2+ es
Figura 5.17. Daño oxidante sobre las bases nitrogenadas del ADN. que opera como un biosensor para el funcionamiento de varias hormonas y
factores de crecimiento.
En un segundo plano, es importante mencionar que el daño oxidante al El incremento del Ca2+ citosólico provoca alteraciones en las
ADN puede activar a los proto-oncogenes con las implicaciones que sobre membranas (formación de “ampollas”) de células aisladas, lo cual parece
la reproducción celular se vayan a presentar (Figura 5.18). estar asociado a los daños por isquemia y muerte celular. El Ca2+ actúa
En un tercer nivel de daño, los ROS activan a la poli(ADP-ribosa) como segundo mensajero en la regulación de varias funciones
+
sintetasa, una enzima que polimeriza los residuos de ADP-ribosa del NAD . intracelulares. Por ejemplo, cuando la concentración intracelular de Ca2+ se
Estos eventos están asociados con la disminución de NADPH así como la incrementa, se altera la organización del citoesqueleto como resultado de la
elevación intracelular de Ca2+, lo que desencadena alteraciones celulares
que se presentan en la Figura 5.19.
92
disociación de microfilamentos de actina y la activación de fosfolipasas y ataque de radicales libres a estos compuestos forman lípidos
proteasas. hidroperóxidos (LOOH). Esto puede inducir cambios en la permeabilidad de
las membranas y alterar la interacción de las interacciones lípido-proteínas
en las membranas.1
Figura 5.20. Peroxidación de lípidos.
Las consecuencias de la peroxidación de lípidos las podemos enlistar de la

Fibroblasto: célula alargada y plana del tejido conjuntivo que constituye el elemento de los siguiente forma:
tejidos fibrosos.
Figura 5.19. Daño oxidante a nivel de ADN y consecuencias.
a) pérdida de ácidos grasos poliinsaturados
b) disminución de la fluidez lipídica
5.5. La peroxidación de lípidos c) permeabilidad alterada de la membrana
Los componentes lipídicos de las membranas celulares son vulnerables a la d) efectos en las enzimas asociadas a las membranas
oxidación debido a la presencia de dobles enlaces en sus estructuras. El e) transporte iónico alterado
93
f) generación de metabolitos citotóxicos de hidroperóxidos que también proviene de la peroxidación de lípidos consume glutatión y
liposolubles es capaz también de reaccionar con la guanosina.
g) liberación de material desde compartimientos subcelulares, por
ejemplo, las enzimas en los lisosomas
Una vez que los lípidos inician el proceso de peroxidación, se van formando
productos que a su vez van a presentar algunos efectos fisiológicos en el
organismo. A continuación se mencionan algunos de estos trastornos:
a) peróxidos liposolubles
- estimulan la síntesis de prostaglandinas (activan a la ciclo-
oxigenasa)
- afectan el crecimiento celular
b) ácidos epóxidos
- afectan la secreción de hormonas
c) alquenal 4-hidroxilos (ej. 4-hidroxinonenal)16
- afectan las actividades de la adenilciclasa y fosfolipasa C
- reducen el crecimiento y promueven la diferenciación celular
Figura 5.21. Comportamiento de intermediarios reactivos de dos
- inhiben la agregación de plaquetas
productos de peroxidación.
- bloquean la acción de macrófagos
- bloquean a grupos tioles
Todos los aminoácidos de las proteínas son susceptibles, en mayor o
menor medida, a ser alterados por la presencia de radicales libres. La
Los efectos toxicológicos que ocasionan los productos de la exposición de proteínas al estrés oxidante puede resultar en modificaciones
peroxidación de lípidos no se deben a que presenten un a su estructura terciaria o secundaria.17 El daño a las proteínas se puede
comportamiento de especies oxidantes reactivas, sino a intermediarios dar por su interacción directa con radicales libres, por su interacción con los
reactivos de naturaleza electrofílica. Por esta razón, van a reaccionar aldehídos producidos en la peroxidación de lípidos o en la oxidación de
con especies nucleofílicas presentes en el organismo, tales como el monosacáridos. Tales daños pueden producir cambios en la actividad
glutatión, bases nitrogenadas, proteínas, azúcares. Un ejemplo se enzimática, alteraciones en las membranas, enlaces cruzados entre
muestra en la Figura 5.21, donde el malondialdehído proveniente de la receptores proteicos. El daño a las membranas puede alterar la
peroxidación de lípidos reacciona con guanosina y el 4-hidroxinonenal homeostasis iónica de importancia crucial para la célula. A nivel de
94
membrana plasmática puede provocar la acumulación intracelular del Ca2+ otro lado, la LDL modificada es reconocida por receptores de macrófagos,
lo que provocaría la activación de proteasas y fosfolipasas; y a nivel de los cuales, cuando los incorporan, dan lugar a las capas celulares (células
membranas mitocondriales ocasionaría una exacerbación del daño inicial. espumosas), elementos patológicos en la aterosclerosis.
Los grupos carbonilos de los aldehídos pueden interaccionar con
reconocimiento por
los grupos aminos de los aminoácidos para formar bases de Schiff, receptores para
LDL
alterando su naturaleza estructural. apoproteína B
oxidación
endotelio
O O vascular compuesto
dicarbonilo formación
2P NH2 + H C CH2 C H ingerido por
LDL modificado de células
macrófagos espumosas
P NH CH CH CH N P
Figura 5.23. Oxidación de lipoproteínas de baja densidad.
P: proteína
5.6. Daño oxidante a azúcares
Los monosacáridos, particularmente las aldosas, llegan a oxidarse en
Figura 5.22. Bases de Schiff en proteínas.
presencia de trazas de metales de transición, generando radicales libres,
H2O2, y compuestos dicarbonílicos. La glucosa se considera tóxica en virtud
Un aspecto interesante que se presenta es que el daño ocasionado a un
de su capacidad para comportarse como un aldehído.18 Por esto podría
aminoácido particular se puede transferir a otro en donde realmente se va a
reaccionar con los nucleófilos de las proteínas (glicosilación). Las bases de
ser patente la alteración.
Schiff así formadas se re-arreglan para formar compuestos más estables
metionina ¨ triptófano ¨ tirosina ¨ cisteína conocidos como productos de Amadori. Toda esta transformación es
denominada reacción de Maillard. Ha sido propuesto que los productos de
La formación de bases de Schiff se ha utilizado para explicar cómo la Amadori están implicados en las alteraciones vasculares que se presentan
oxidación de la lipoproteína de baja densidad (LDL) está implicada en uno en la diabetes mellitus.19
*
de los trastornos cardiovasculares conocido como aterosclerosis. La unión
de malondialdehído al amino épsilon de la lisina en la apo-proteína B
(porción proteica de la LDL), disminuye la densidad de carga positiva en la
superficie de la LDL, lo que imposibilita su reconocimiento por los
receptores de la porción apo-proteína para introducirlo a las células. Por
*
Forma común de arteriosclerosis, caracterizada por la formación de depósito de grasa
(ateromas) en la túnica de las arterias.
95
OH O OH
P NH2
R C C H R C C N P
H H H
glucosa (aldehído)
rearreglo
O OH
R C CH2 NH P R C C NH P
producto de Amadori H
Donde P puede ser colágeno u otra proteína de la pared vascular.

Figura 5.24. Reacción de Maillard.
5.7. Biomarcadores para el estrés oxidante

Existen algunos parámetros que se utilizan para determinar el daño oxidante Figura 5.25. Formación del aducto entre el ácido tiobarbitúrico y el
en seres humanos. Ejemplos de ellos se mencionan en la Tabla 5.5. malondialdehído.
En la Figura 5.25 se presentan las reacciones para la generación
del aducto del ácido tiobarbitúrico y el malondialhehído (TBAR) como
5.8 Antioxidantes
ejemplo de la determinación de este tipo de biomarcadores.20
Los antioxidantes son sustancias que, en concentraciones menores
Tabla 5.5. Biomarcadores de estrés oxidante. comparadas con el sustrato oxidable, detienen o previenen significativamente
Peroxidación de lípidos Oxidación de Oxidación de Oxidación de
la oxidación de dicho sustrato. Los antioxidantes pueden ser de origen natural
proteínas carbohidratos ácidos
nucléicos o sintético, ejemplos de ello se muestran en la Tabla 5.6.
Malondialdehído (MDA) Productos Aldehídos 8-hidroxi-2- La ubicación intracelular de los antioxidantes de origen natural se
F2-isoprostanos finales de reactivos deoxiguanosina
presenta en la Figura 5.26. Los antioxidantes se pueden agrupar según sus
Lipoproteína de baja glicación
densidad (LDL) oxidada avanzada funciones de protección celular como se muestra en la Tabla 5.7.
Anticuerpos contra LDL (AGEs)
oxidada Oxidación de
Productos de oxidación tioles
avanzada de lípidos Formación de
Acroleína 3-nitrotirosina
4-Hidroxinonenal
96
Tabla 5.6. Ejemplos de antioxidantes de origen natural y sintético.

Tabla 5.7. Sistemas de protección celulares contra el estrés oxidante.
Primarios Auxiliares
Antioxidantes de Superóxido dismutasa (SOD), α-tocoferol, ácido
origen natural: lipoico, vitamina C, adenosina, transferrina, Antioxidantes Antioxidantes
lactoferrina, glutatión, carotenoides, flavonoides, glutatión (GSH) bilirrubina
desferrioxamina. vitamina E (α-tocoferol) biliverdina
β-caroteno cisteína
Antioxidantes Tioles (por ejemplo, mercaptopropionilglicina, N- vitamina C (ácido ascórbico) histidina
sintéticos: acetilcisteína), agentes quelantes (por ejemplo, ubiquinonas ácido lipóico
hidroxipiridonas), inhibidores de xantina oxidasa, ácido úrico
inhibidores de la generación de radical anión carnosina Regenerador de antioxidantes
superóxido. anserina glutationdisulfuro reductasa
Moléculas de uso Penicilamina, aminosalicilatos (solos o como glucosa-6-fosfato deshidrogenasa
clínico no componentes de la sulfasalazina), tetraciclinas, (fuente de NADPH)
diseñadas como captopril, probucol, propofol, bloqueadores de Ca (II). Enzimas de desintoxicación
antioxidantes: superóxido dismutasa (SOD) Exportadores
catalasa acarreador de glutatión oxidado
(GSSG)
peroxidasas acarreador de conjugados de con
glutatión peroxidasa/transferasa glutatión (E-SG)
Secuestradores de metales
Extracelulares
vitamina E y GSH vitamina E y GSH albúmina (Fe, Cu)
vitamina E y GSH metalotioneínas SOD (Mn) transferrina (Fe)
glutatión peroxidasa
β-caroteno glutatión transferasa ceruplasmina (Cu)
glutatión transferasa ubiquinonas Intracelulares
glutatión peroxidasa ferritina (Fe)
vitamina C y E metalotioneina (Cu)
núcleo GSH
retículo mitocondrias SOD (Cu/Zn)
endoplásmico
ADN glutatión peroxidasa
catalasa citoplasma glutatión transferasa
ferritina La relación entre las especies reactivas (ROS o RNS) y los antioxidantes en
melationeína
carnosina
peroxisoma lisosoma anserina los humanos es compleja. Los mecanismos antioxidantes protectores no
actúan de forma aislada, sino al parecer lo hacen en forma cooperativa y
bicapa de tienden a presentarse en forma de cascada. La importancia relativa de los
membranas
vitamina E vitamina C y E antioxidantes depende de cuál, cómo y dónde se generan las ROS. Por
β-caroteno β-caroteno
ejemplo, cuando el plasma se expone al ozono o NO2·, el ácido úrico actúa
como antioxidante; en contraste, cuando el plasma se expone al HOCl, la
Figura 5.26. Distribución de los antioxidantes intracelulares.
protección del ácido úrico es mínima.
97
En el ámbito de la peroxidación de lípidos, los antioxidantes se pueden La GSH-Px actúa como la enzima más importante para eliminar al H2O2 e
clasificar en dos categorías: los inhibidores preventivos, los cuales retardan hidroperóxidos orgánicos (LOOH) de la célula. Las otras dos enzimas que
la fase de iniciación de la oxidación, y los inhibidores de la fase de utilizan glutatión como sustrato y que participan en los procesos de
propagación (anti-propagadores). Los preventivos pueden inducir la desintoxicación son la glutatión transferasa y el fosfolípido peróxido
descomposición de hidroperóxidos en compuestos inactivos; por ejemplo, glutatión peroxidasa dependiente de selenio.
catalasa, glutatión peroxidasa (GSH-Px), glutatión transferasa, β-caroteno,
α-tocoferol. Los anti-propagadores interrumpen la auto-oxidación al
reaccionar con radicales libres. Ejemplo de estos antioxidantes son vitamina
C, β-caroteno, ácido úrico, fenoles, furfurales, furanonas. Es importante
señalar que si un antioxidante protege contra la peroxidación de lípidos no
necesariamente protegerá al ADN o a las proteínas de sufrir oxidación.
5.8.1. El glutatión como agente antioxidante

El glutatión (GSH) es un compuesto que la célula utiliza como agente de
defensa. Por un lado, actúa como agente reductor en el metabolismo de
H2O2 y peróxidos orgánicos; por otro lado, actúa como nucleófilo para
conjugarse con intermediarios electrofílicos (Fase II de la
biotransformación). Como agente reductor se oxida formando un enlace
disulfuro entre dos moléculas de este compuesto (GSSG). Este último se Figura 5.27. Glutatión como agente antioxidante.
puede reducir para regenerar al GSH; por esta razón algunos
investigadores le denominan el “amortiguador redox”. En organismos vivos, Tabla 5.8. Enzimas que utilizan glutatión como sustrato y cofactores
la oxidación es catalizada por varias enzimas, una de ellas es la glutatión Enzima Cofactores
glutatión peroxidasa Se(II)
peroxidasa (GSH-Px) dependiente de selenio; la reducción, por su parte, es 2 GSH + H2O2 ¨ GSSG + H2O
catalizada por glutatión reductasa. Bajo condiciones de estrés oxidante, la 2 GSH + LOOH ¨ GSSG + LOH + H2O
glutatión transferasa (con actividad endoperoxidasa)
velocidad de oxidación del GSH es mayor que la velocidad de reducción,
2 GSH + LOOH ¨ GSSG + L(OH)2 + H2O
provocando que GSSG se acumule en el interior de la célula. Para evitar GSH + aldehídos ¨ GS-alcanal
efectos dañinos por esta situación, tales como formación de enlaces fosfolípido peróxido-glutatión peroxidasa Se(II)
2 GSH + ROOH ¨ GSSG + ROH + H2O
disulfuros con grupos tioles proteicos, la célula excreta activamente GSSG,
ROOH = fosfolípido, colesterol, colesterol hidroperóxido
con la consecuente disminución de sus reservas de GSH (Figura 5.27 y glutatión reductasa
+ +
Tabla 5.8). GSSG + NADPH + H ¨ 2GSH + NADP
98
superóxido dismutasa Zn (II), Cu (I), Mn(II)

O 2¯ ¨ H 2O 2
Catalasa Fe(II)
2 H 2O 2 ¨ H 2O + O 2
citocromo C peroxidasa Fe (II)
ROOH ¨ ROH + H2O
5.8.2. La vitamina E (α-tocoferol, VitE-OH) como antioxidante
La vitamina E es el principal antioxidante liposoluble en las membranas

celulares (Figura 5.28). Además de prevenir el daño oxidante a la célula,
esta vitamina bloquea la formación de nitrosaminas, protege al organismo
de las lipoproteínas de baja densidad (LDL) y reduce el daño por oxidación
provocado por el ejercicio excesivo. El efecto fisiológico de la vitamina E,
incluye: Figura 5.28. Forma de eliminación de radicales libres por la Vitamina E.
§ el control de la fluidez de la membrana, La vitamina C dona un electrón para dar el semi-dehidroascorbato (•O-VitC-
§ el incremento de ciertas respuestas inmunes mientras disminuye la OH) también conocido como radical ascorbilo. El potencial estándar de
quimiotaxis de los neutrófilos, reducción para el par semidehidro-ascorbato/ascorbato es de E° = 0.28 V.
§ la reducción del daño isquémico por alteraciones cardiacas, La pérdida de un segundo electrón convierte al semidehidroascorbato en
§ la agregación plaquetaria. dehidroascorbato (O=VitC=O) (Figura 5.30). Este último es mucho menos
reactivo que aquellos radicales que son eliminados por esta vitamina. Sin
Los sitios en donde la vitamina E actúa en el proceso de peroxidación de embargo, se descompone dando lugar a varios productos.1
lípidos se muestran en la Figura 5.29. La vitamina C está presente en el plasma humano en
concentraciones de 20–90 µM, aunque se han reportado niveles mayores
5.8.3. La vitamina C (ácido ascórbico, VitC-(OH)2) como antioxidante
en el fluido cerebroespinal y jugo gástrico. A nivel intracelular, los niveles de
La vitamina C es un sólido blanco cristalino, muy soluble en agua. En su esta vitamina suelen estar en el rango milimolar.21
estructura presenta dos grupos polares, con valores de pKa de 4.25 y 11.8,
respectivamente. De aquí que el mono anión (ascorbato) es la forma
predominante en todos los compartimentos del organismo, excepto en el
jugo gástrico.
99
Generalmente, se acepta que la vitamina C (y posiblemente GSH) puede

reducir al radical VitE-O• a VitE-OH, formando dehidroascorbato
(O=VitC=O) según las ecuaciones que se muestran a continuación.
VitE-O . + VitC-(OH)2 VitE-OH + .O-VitC-OH
VitE-O . + .O-VitC-OH VitE-OH + O=VitC=O
Figura 5.31. Reducción del radical VitEO• a Vitamina E

(rápido) (lento)
Varias enzimas pueden regenerar vitamina C desde dehidroascorbato
usando NADH o GSH. Sin embargo, estas enzimas son intracelulares, por
lo que los niveles extracelulares de vitamina C disminuyen bajo condiciones
de estrés oxidante (Figura 5.33). Un aspecto importante a señalar es que la
vitamina C in vitro se comporta como agente pro-oxidante, de tal manera
que cuando la vitamina C entra en contacto con metales de transición
genera anión superóxido, por lo que se tiene que analizar su utilidad en la
formulación de alimentos y poli-vitamínicos.
VitC-(OH)2 + Fe(III) Fe (II) + H+ + . O-VitC-OH

PLH: fosfolípidos; LOH: ácido graso hidroxilado; Vit E-OH: vitamina E; (PL)-GSH-Px:
glutatión peroxidasa (fosfolípido hidroperóxido); PLA2: fosfolipasa A2. O2
_
Figura 5.29. Peroxidación de lípidos y protección por vitamina E. H+ + O2 . + O=VitC=O
OH OH
Figura 5.32. Papel pro-oxidante de la vitamina C.
HO O O HO O O
2e-
OH OH O O
vitamina C dehidroascorbato
Figura 5.30. Estructura química de la Vitamina C y del dehidroascorbato.

100
(A)
H2O 5.8.4. Algunos compuestos antioxidantes presentes en vegetales
5.9.4.1. Los flavonoides
Las frutas y vegetales constituyen una fuente rica de este tipo de

CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3
CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3
compuestos y han recibido mucha atención en la prevención de

. enfermedades degenerativas.
X X-H
. .
O2
OO. OOH
O2
OO. OOH El contenido de flavonoides en el vino tinto ha sido utilizado para
explicar lo que internacionalmente se conoce como la “paradoja francesa”.
Ésta nos indica que los franceses sufren de menor incidencia de

CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3
LÌpido LÌpido LÌpido LÌpido LÌpido LÌpido

LÌpido LÌpido LÌpido
insaturado radical peroxil perÛxido peroxil perÛxido
insaturado insaturado
radical
radical radical enfermedades coronarias a pesar de su consumo de tabaco y su dieta ricas
en grasa.
INICIACI” N PROPAGACI” N
5.9.4.2. Los compuestos polifenólicos como antioxidantes

(B)
En tiempos recientes, se ha estudiado la capacidad antioxidante de los
ascorbato radical
H2O HO HO dehidroascorbato polifenoles presentes en algunas bebidas alcohólicas. A continuación, se
HO O HO O
Px
O O
G
presentan como ejemplo de esta actividad los resultados obtenidos con los
. O
-
.
OH O
-
O . FA
-C
oA
CH3 CH3 CH3 OO OH CH3 OOH O OH

polifenoles presentes en la cerveza y en los vinos de mesa en dos estudios
PH-GPx
CH3 CH3
PLA2
H3 C CH3 H3 C CH3 H3 C CH3
H3 C
O
H3 C
O
H3 C
O
diferentes.22, 23
.
H3 C H3 C
X X-H
En un primer estudio, se evaluó la capacidad antioxidante del
.
CH3 CH3 CH3
plasma en tres grupos (de tres personas cada uno) que tomaron: cerveza,
O2
OO. CH3 CH3 CH3
cerveza sin alcohol y una solución de etanol (4.5% v/v). En cada individuo
CH3 CH3 CH3
CH3 CH3 CH3

CH3 CH3
CH3
CH3 H3 C CH3 H3 C H3 C
CH3 CH3
se tomaron muestras de plasma al tiempo 0, así como a 1 y 2 h después de
LÌpido LÌpido LÌpido α-tocoferol LÌpido radical
insaturado radical peroxil perÛxido α-cromanoxilo
radical la ingestión. Los resultados se muestran en la Tabla 5.9.
INICIACI” N
X
Figura 5.33. Etapas de iniciación y propagación de la peroxidación de
lípidos (A); y participación cooperativa entre los antioxidantes α-tocoferol y
ácido ascórbico para detener la etapa de propagación (B).
101
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103
Capítulo 6. Mutagénesis química producen dichos cambios son: la radiación ionizante, mostazas
1
nitrogenadas, epóxidos, sulfonatos de metilo.
Es importante señalar la diferencia entre dos términos que con
frecuencia suelen utilizarse como sinónimos: mutagénesis y genotoxicidad
(Figura 6.1). La mutagénesis es la capacidad de un xenobiótico para
causar alteraciones en el material genético que lleguen a ser transmisibles
Contenido a la progenie celular. La genotoxicidad es un término que incluye
6.1. Introducción ................................................................................ 104
alteraciones al material genético, tales como intercambio de cromátidas
6.2. Niveles de acción de mutágenos .............................................. 106 hermanas o rupturas de hebras de ADN, que no necesariamente son
6.3. Interacción de xenobióticos con el ADN ................................... 106 transmitidas a la decendencia.1
6.3.1. Agentes alquilantes…………………………………………..107
6.3.2. Agentes desaminantes…...………………………………….112
6.3.3. Agentes intercalantes…..……………………………………113
6.4. Evaluación de la actividad mutagénica de xenobióticos ......... 115
6.4.1. Pruebas en procariotes………………………………………….114
6.4.2. Pruebas in vitro en células eucariotas…………………………118
6.4.3. Pruebas in vivo en células eucariotas………………………...118
Bibliografía ......................................................................................... 122 Figura 6.1. El concepto de citotoxicidad, genotoxicidad y mutación.
En el presente capítulo se presentan conceptos relacionados con el Los tipos de efectos genotóxicos que se pueden presentar dependerán si la
proceso de mutagénesis, los tipos de efectos mutagénicos producidos por interacción se llevó a cabo sobre el ADN o sobre los cromosomas. En el
xenobióticos, así como diversas técnicas que permiten evaluar la actividad primer caso, se denomina microlesión; si la alteración se manifiesta en
mutagénica de compuestos químicos. la progenie se denotará como una mutación puntual. En el segundo
caso, la alteración se denomina macrolesión (Figura 6.2).2
6.1. Introducción
Mutación es todo cambio transmisible a la progenie celular en el material

genético de un organismo. Algunos de los agentes físicos y químicos que
104
Capítulo 6. Mutagénesis química Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM
La probabilidad de que un xenobiótico pueda causar daño genético

depende de los siguientes factores:
a) Concentración del xenobiótico en el medio ambiente.
b) Ingreso del xenobiótico y su distribución corporal.
c) Biotransformación por el tejido en el cual el compuesto se
distribuye.
d) Reactividad del xenobiótico o sus metabolitos con las
macromoléculas, especialmente con el ADN.
e) Capacidad de la célula para rectificar o amplificar el daño y que
éste se exprese.
Figura 6.2. Consecuencias de la genotoxicidad. f) Competencia del tejido para reconocer y suprimir la multiplicación
de las células con propiedades aberrantes.
De las alteraciones que se producen en el ácido desoxirribonucleico (ADN)
(Figura 6.3), no todas son necesariamente dañinas, ya que muchas Por todos estos factores, es importante tener en cuenta que para que un
mutaciones han ocasionado mejores adaptaciones de los individuos en los compuesto presente en el medio ambiente afecte al material genético no es
procesos evolutivos. El peligro se presenta con aquellas mutaciones cuyos un evento simple y fácil de llevarse a cabo.
efectos provocan reacciones adversas para el organismo (Figura 6.4). Las
consecuencias nocivas de las mutaciones incluyen desórdenes en la
fertilidad, muerte embrionaria y perinatal, malformaciones, enfermedades
hereditarias y cáncer. Los propósitos de la toxicología en este campo son:
a) Identificar aquellas sustancias que presenten potencialidad
genotóxica (mutagénica).
b) Tratar de establecer el mecanismo de acción y las consecuencias
fenotípicas de los agentes que provocan mutaciones.
c) Establecer los parámetros o condiciones necesarias para minimizar
la exposición humana a los genotóxicos, con el propósito de evitar
alteraciones en la información hereditaria que ya posee el
individuo. Figura 6.3. Consecuencias del daño al ADN.
105
riesgo de exposición trastorno biológico 6.3. Interacción de xenobióticos con el ADN

(reacción adversa)
La molécula diana endógena que es la directamente afectada en los eventos
ruta de ingreso y
distribución fisiológica expresión mutagénicos es el DNA. Por ello se mencionarán a los cuatro grupos de
biotransformación
xenobióticos que interaccionan con esta macromolécula (Tabla 6.1).
etapa procesos de
etapa
excreción
toxocinética reparación Los compuestos del grupo de agentes alquilantes, agentes
toxodinámica
desaminantes y análogos de bases pueden provocar cambios estructurales
traslado por membranas reacción con el ADN
celulares (mutación) en las bases púricas y pirimídicas del ADN. Cuando los cambios
transmisibles ocurren en las bases nitrogenadas se llaman mutaciones
traslado por la membrana
aproximación al ADN
del núcleo puntuales (point mutation). En la Figura 6.6, se presentan los nombres de
las mutaciones puntuales ocasionadas; por ejemplo, un cambio de una
Figura 6.4. Integración de la toxocinética, toxodinámica y la genotoxicidad.
base purina por otra purina se llama transición; el cambio de una base
pirimidina por una purina se llama transversión; así mismo, se ilustran las
6.2. Niveles de acción de mutágenos
consecuencias de los cambios de los aminoácidos en las estructuras primarias
Las consecuencias de la mutagénesis se pueden esquematizar como se de las proteínas que se presentan en las mutaciones puntuales.
muestra en la Figura 6.5, según sea afectada una célula somática o una
célula germinal. Como debe remarcarse, el evento mutagénico se
Tabla 6.1. Genotóxicos puntuales y sus mecanismos de acción.
caracteriza por ser transmitido a la descendencia. En el caso de células Tipo de Mecanismo Ejemplo Alteración
somáticas puede ocasionar cáncer; en el de células germinales provocaría compuesto genética
alteraciones en el fenotipo de la progenie. Agentes Forman enlaces covalentes Sulfato de alquilo, Transición,
alquilantes con las purinas y pirimidinas mostazas Transversión
provocando los sitios nitrogenadas,
alquilados. nitrosourea
Agentes Desaminan adenina y la Ácido nitroso Transición

desaminantes transforman en hipoxantina;
y a la citosina en uracilo.
Análogos de Sustituyen a las bases 2-aminopurina Transición
base púricas y pirimidínicas
normales durante la
replicación del ADN.
Agentes Se intercalan en las hebras Acridinas, Alargamiento que
intercalantes de ADN. antraciclinas altera la lectura en
el ADN
Figura 6.5. Consecuencias de mutaciones en células somáticas Transición: cambio de una purina por otra purina (o pirimidina por otra pirimidina) en la replicación del ADN;
y germinales. Transversión: cambio de una purina por una pirimidina en el mismo proceso.
106
(microlesiones). El mecanismo de la reacción involucra la adición de una

A
porción nucleofílica del ADN a la parte electrofílica (alquilo) del agente
alquilante. Las características de los agentes alquilantes son:
§ Naturaleza electrofílica.
§ Altamente reactivos.
§ Forman enlaces covalentes.
§ Alteran la función del ADN y muerte celular.
§ Manifiestan escasa selectividad hacia los tipos de células
(antineoplásicos [antiproliferativos] y carcinógenos).
§ Deprimen la médula ósea.
Entre los agentes alquilantes se encuentran varios compuestos de

importancia industrial y algunos fármacos antineoplásicos. La mayoría de
ellos son genotóxicos directos (porque no requieren biotransformación
B
previa para ejercer su acción) y los llamados pro-alquilantes que requieren
de la biotransformación como paso previo.
Figura 6.7. Alquilantes directos y pro-alquilantes.

Figura 6.6. A. La transición y transversión en las bases
nitrogenadas del ADN. B. Tipos de mutaciones puntuales
Por la forma de actuar sobre el ADN, se clasifican en dos grupos: aquellos
6.3.1. Agentes alquilantes que van a provocar una sola alquilación (monofuncionales) y aquellos que
Los agentes alquilantes pueden adicionar un grupo alquilo (metilo, etilo, logran provocar dos alquilaciones (bifuncionales). Ejemplos del primer
propilo, etc.) al ADN o a cualquier otra molécula de carácter nucleofílica. En grupo lo constituyen el sulfato de dimetilo (DMS) y la β-propiolactona (BPL);
el ADN provocan alteraciones estructurales en los ácidos nucleicos

107
este último ha sido utilizado en Medicina como agente esterilizante y para R OH

O R
inactivar al virus del sida presente en las muestras biológicas. 7 6 +
N
N 5 N N
N1 N
8
6.3.1.1. Agentes alquilantes monofuncionales 2 N N NH2

9 N 4
N N N NH2
Algunos de los agentes que pueden actuar de forma directa sobre el ADN H 3 ADN
ADN
se muestran en la Tabla 6.2. Todos ellos presentan un sitio electrofílico que O6 AlqG 7AlqG
reacciona con la parte nucleofílica de la base nitrogenada. guanina alquilada (AlqG) en el guanina alquilada (AlqG) en
oxígeno exocíclico en posición 7
posición 6
Tabla 6.2. Alquilantes monofuncionales.

Figura 6.8. Monoalquilación de la guanina.
Xenobiótico Estructura
Alquiliminas La alquilación de la guanina (G) en el oxígeno exocíclico en posición 6

H2C CHR (O6AlqG) es la primera lesión que ocasionan los agentes alquilantes y su
Etilenimina N
presencia ha correlacionado con la aparición de tumores en ratas. Cuando
H
el alquilo es un metilo (O 6MeG) provoca la transición G ¨ A (adenosina)
Sulfato de alquilo
en el proceso de replicación de ADN. Sin embargo, existe en las células de
Sulfato de dimetilo (CH3)2SO4
los mamíferos una enzima no inducible llamada la O6-alquilguanina ADN
Lactonas pequeñas
alquiltransferasa (MGMT) que se encarga de reparar el daño ocasionado al
O
β-propiolactona (BPL) revertir el proceso de alquilación y recuperar a la G para que siga

O
realizando su función en el ADN.3
Compuestos halogenados
Cloruro de bencilo CH2Cl
Yoduro de metilo CH3I
Los ejemplos de los sitios mono-alquilados de las bases nitrogenadas que

se han encontrado se muestran en la Figura 6.8.
108
6.3.1.2. Agentes alquilantes bifuncionales

Los agentes alquilantes bifuncionales se caracterizan porque pueden
alquilar dos sitios nucleofílicos en el ADN. Tales sustancias pueden
provocar enlaces cruzados entre una base nitrogenada y una proteína o
con otra base nitrogenada, la cual puede estar en la misma hebra o en la
hebra alterna del ADN (Figura 6.10). El compuesto prototipo para los
agentes bifuncionales es el gas mostaza, el cual pertenece a su vez al
grupo de los compuestos referidos como mostazas, que pueden presentar
al átomo de azufre o al átomo de nitrógeno como elemento para la
cooperación de grupo vecino (cooperación ananquimérica).
ADN
OH
alquilante alquilación alquilación alquilación alquilación

hidrolizado dos hebras una hebra ADN-proteína dos ADN
agente alquilante bifuncional proteína
Figura 6.10. Modos de alquilación bifuncional.
6
MGMT: O -alquilguanina ADN alquiltransferasa Algunos ejemplos de agentes alquilantes bifuncionales se presentan en la
Figura 6.9. Daño ocasionado o reparación de una monoalquilación.3 siguiente tabla. En ellos se puede apreciar la presencia de dos sitios
electrofílicos que van a reaccionar con las bases nitrogenadas del ADN.
109
Tabla 6.3. Ejemplos de algunos alquilantes bifuncionales.

Xenobiótico Estructura
Alquilenepóxidos
1,2,3,4-butadienepóxido H2C CH CH CH2
O O
Mostazas
Sulfuro de bis(2-cloroetilo), (gas mostaza, CH2CH2Cl
S
yperita) CH2CH2Cl
CH2CH2Cl
Bis(2-cloroetil)amina
HN
CH2CH2Cl
Ciclofosfamida (cytoxan) H
O N
(necesita bioactivarse) ClCH2CH2
N P
ClCH2CH2 O
Figura 6.11. Forma de acción de un agente alquilante bifuncional.
6.3.1.3. Agentes pro-alquilantes

Para ilustrar la forma en que este tipo de agentes alquilantes ejercen su
acción, en el siguiente esquema se presenta el mecanismo propuesto para 6.3.1.3.1. Las nitrosaminas
las mostazas nitrogenadas. La mayoría de los carcinógenos N-alquilados requieren de activación
Los compuestos alquilantes no se identificaron inicialmente como enzimática para transformarse en compuestos activos contra el ADN. Estas
agentes carcinogénicos en pruebas con animales de laboratorio; sin biotransformaciones involucran generalmente reacciones de oxidación
embargo, al estudiarse los casos de trabajadores japoneses que laboraban mediadas por el citocromo P450. Como ejemplo, presentamos a
en la fabricación de gas mostaza con fines bélicos, se llegó a la conclusión continuación la bioactivación de la N,N-dimetilnitrosamina (NDMA). El
de que tenían esa actividad tóxica. Estos trabajadores presentaron alta primer paso es la oxidación de uno de los grupos metilos para generar un
incidencia de cáncer en el tracto respiratorio. compuesto hemiaminal; el cual, al ser poco estable, libera el grupo metilo
en forma de formaldehído. De esta transformación se obtienen dos
hidroxildiazometano en configuración cis y trans. Estas últimas, generan
diazometano que será el agente alquilante directo.
110
OH OH
N=N
CH3 CH2
P 450 CH3 trans +
N N O N N O CH3 N=N
CH3 CH3 N=N diazometano
NDMA H
CH3 OH (especie
C O
cis alquilante)
H
hidroxildiazometano
Figura 6.12. Activación y alquilación por una nitrosamina.
6.3.1.3.2. Las nitrosoureas y nitrosoguanidinas

Algunos agentes alquilantes necesitan hidrolizarse para liberar a la especie
reactiva, tal es el caso de las nitroureas, nitrosoguanidinas y
nitrosouretanos. La N-metil-N-nitrosourea (MNU) se hidroliza rápidamente a
pH 7 y 37°C, para dar hidroxildiazometano, mientras que la N-metil-N-nitro-
N´-nitrosoguanidina (MNNG), lo hace lentamente (ruta a de la Figura 6.10).
Como resultado de esto, se ha postulado que una forma acelerada de Figura 6.13. Generación de hidroxildiazometano por MNU y MNNG.
alquilación por MNNG, implicaría una catálisis que involucre a un grupo tiol
de biomoléculas intracelulares (ruta b, Figura 6.13). Se ha propuesto una teoría denominada región bahía. En ésta, se considera
Este tipo de compuestos se utilizan en los laboratorios de síntesis, que aquellos HAP que presente esta región estructural serán de riesgo
como precursores de diazometano. carcinogénico, ya que al metabolizarse producirán dos epóxidos, donde el
segundo será el responsable de interaccionar con el ADN (Figura 6.14). Esta
6.3.1.3.3. Los hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP) biotransformación, catalizada por CYP1A1 y CYP1B1, implica algunas
Este grupo de compuestos se presentan en forma de mezclas complejas consideraciones estereoquímicas que se presentan en la Figura 6.15.
en una variedad de productos ambientales tales como hollín, alquitrán,
humo de tabaco, combustión incompleta del petróleo. Dos ejemplos de
este tipo de compuestos lo constituyen el benzo[a]pireno (BP) y el
dibenzo[a,h]antraceno, cuyas estructuras se han presentado
anteriormente. En 1964, se demostró que el BP se unía covalentemente
al ADN de la piel del ratón in vivo y este fenómeno se reprodujo in vitro
utilizando microsomas de ratas como fuente de citocromo P450.
111
El BP 7,8-dihidrodiol-9,10-epóxido de conformación (+)anti (dado por la

relación entre el epóxido y el hidroxilo en posición 7) es el que va a
interaccionar con las bases nitrogenadas (Figura 6.16).
Figura 6.16. Interacción del BP-7,8-dihidrodiol-9,10-epóxido con la guanina.
Figura 6.14. Propuesta de bioactivación de benzo[a]pireno

10 Es importante puntualizar que la biotransformación de estos compuestos
9
primeramente conducirá a la destoxificación mediante la reacción de
8
7 glucuronidación del intermediario BP-7,8-dihidrodiol. Otra ruta de
benzo[a]pireno (BP)
destoxificación será la reacción del BP-7,8-dihidrodiol-9,10-epóxido con el
a) CYP1A1/CYP1A2
b) épóxido hidrolasa GSH. Sólo cuando estos procesos se saturan, el BP seguirá la otra ruta de
c) CYP1A1/CYP1B1
biotransformación que provocará se presenten aquellos cambios
O O
estructurales que lleven a la producción de sustancias con riesgo
R R
S S
S R carcinogénico (Figura 6.17).
R S
HO HO
OH OH
(+) anti-BP-7,8-dihidrodiol-9,10-epóxido (+)-syn-BP-7,8-dihidrodiol,9,10-epóxido
O O
S S
R R
R S
S R
HO HO
HO OH
(-) anti-BP-7,8-dihidrodiol-9,10-epóxido (-)-syn-BP-7,8-dihidrodiol,9,10-epóxido
Figura 6.15. Aspectos estereoquímicos en la biotransformación

16
del benzo[a]pireno.
112
BP: benzo[a]pireno; Ah: aromatic receptor

Figura 6.17. Alternativas de biotransformación para BP. Figura 6.18. Desaminación de bases nitrogenadas por acción del HNO2.
6.3.2. Agentes desaminantes 6.3.3. Agentes intercalantes
Otro ejemplo de transformación química de bases nitrogenadas es A diferencia de los agentes alquilantes y desaminantes, los agentes
provocado por el ácido nitroso (HNO2), el cual induce la transformación de intercalantes no forman enlaces covalentes con el ADN.
citosina a uracilo o de la adenina a hipoxantina (Figura 6.18). En este punto Los agentes intercalantes son un grupo importante de agentes
es importante recordar que el reconocimiento entre las bases para mutágenos utilizados en los laboratorios de investigación. El fenómeno de
aparearse entre ellas se da a través de la formación de puentes de intercalación se describió por primera vez por Lerman en 1961 como una
hidrógeno, 3 para el par G-C y 2 para el par T-A. La transformación química interacción no covalente en la cual el agente intercalante se coloca de
que produce el ácido nitroso y otros agentes desaminantes altera el número forma perpendicular al eje de la doble hélice (Figura 6.19). Las fuerzas que
de puentes de hidrógeno que pueden formarse entre las bases y, por tanto, mantienen la estabilidad de la interacción del complejo ADN-intercalante
generan mutaciones puntuales del tipo transiciones. El ácido nitroso puede son interacciones de van der Waals, puentes de hidrógeno, hidrofóbicas o
formarse en el cuerpo por la reacción de nitritos con compuestos orgánicos de transferencia de carga.4 Algunos autores sugieren también las
(aminas secundarias) en las condiciones ácidas del estómago. interacciones de orbitales frontera.4 Algunos ejemplos de agentes
intercalantes se presentan en la Figura 6.20.
113
H2N NH2
N+
H2N N NH2 Br -
C2H5
acriflavina
bromuro de etidium
C2H5
P P
N
NH C2H5
C O C O
OCH3
N
Cl N
O O
CH3 CH3
quinacrina
actinomicina
P = pépt ido
Figura 6.19. Intercalación del ADN. Figura 6.20. Agentes intercalantes del ADN.
Los compuestos intercalantes se caracterizan por su dimensión, que Las investigaciones señalan que los agentes intercalantes interfieren con la
corresponde a tres anillos aromáticos condensados (o heterocíclicos), la
topoisomerasa II4 (Figura 6.21). Esta enzima cataliza la ruptura pasajera de
cual es semejante al diámetro de la doble hélice del ADN. La intercalación la doble hélice de ADN para propósitos tales como replicación o
provoca una separación vertical de los pares de bases, distorsionando la transcripción. Aunque la separación ocurre en presencia de los
conformación del enlace azúcar-fosfato y una distorsión de la hélice tal que intercaladores, la topoisomerasa II permanece firmemente unida en el punto
la longitud de la misma se incrementará. La intercalación ocurre
dañado y entonces previene el acoplamiento de las hebras nuevamente.
preferentemente en la secuencia pirimidina-3´-5´-purina que dentro de la Actualmente, se piensa que la intercalación es la primera etapa en una
secuencia purina-3´-5´-pirimidina. serie de eventos que provocarán daño al ADN por otros mecanismos.
114
ADN Polimerasa III 6.4.1. Pruebas en procariotes

cadena adelantada
3’ 6.4.1.1. Prueba de Ames
Topoisomerasa Basados en la hipótesis de que los carcinógenos son inicialmente
5’ 3’ mutágenos, Bruce Ames y colaboradores, en la década de los años 70,
Helicasa realizaron experimentos con varios microorganismos para encontrar
5’
sustancias con actividad mutagénica. La cepa bacteriana que mejores
Agente intercalante resultados proporcionó fue la Salmonella typhimurium (en la actualidad
cebador también se utiliza Escherichia coli WP2 uvr A-). Las cepas originales fueron
genéticamente incapaces de sintetizar histidina (his-). En este ensayo, se
5’ Fragmentos de Okasaki
incuban cepas de esta bacteria con algún xenobiótico y en medio de cultivo
ADN Polimerasa III
sin histidina. En estas circunstancias, un crecimiento de colonias es
Figura 6.21. Afectación de la topoisomerasa. indicativo de acción mutagénica del compuesto estudiado, al convertir un
organismo auxotrófico que requiere de un nutriente específico para subsistir
(histidina) hacia un organismo prototrófico, que puede sintetizar el nutriente
6.4. Evaluación de la actividad mutagénica de xenobióticos
requerido desde un precursor más simple, presente en el medio de cultivo.5
Muchas sustancias químicas y agentes físicos pueden provocar
Dos variantes de esta técnica, se utilizan al verter las mezclas de
citotoxicidad por diferentes mecanismos, uno de los cuales involucra la
microorganismos y xenobióticos, a las cajas de Petri para posterior
interacción con los ácidos nucleicos provocando alteraciones de la
incubación. Estas variantes son: la incorporación inmediata y la
información genética, con la consecuente producción, ya sea, de un
preincubación.
efecto letal para la célula o daños débiles o severos a una o más de las
En la incorporación inmediata, el control, el microorganismo y el
funciones celulares a nivel de ARN, membranas, proteínas y enzimas.
xenobiótico, una vez que han sido mezclados, se vierten inmediatamente a
Los experimentos para poder evaluar estos efectos llegan a ser
las cajas de Petri, para enseguida incubarlas a 37 °C durante 48 h. Esta
complejos y prolongados, ya que implican animales completos y
variante se presenta esquemáticamente en la Figura 6.22.
estudios a través de varias generaciones. Ante tal situación, se han
desarrollado una serie de pruebas in vitro de corta duración (short-term)
utilizando microorganismos, plantas, insectos y cultivos celulares de
mamíferos. Estas pruebas sirven para monitorear (screening) posibles
agentes con actividad mutagénica, teratogénica o carcinogénica.
115
Figura 6.23. Obtención de la fracción S9.
Para mejores resultados, se prepara la mezcla S9 que consiste en la

fracción S9 (0.1-0.3 mL), MgCl2 (0.4 M, 0.02 mL), KCl (1.65 M, 0.02 mL),
glucosa 6-fosfato (1M, 0.005 mL), NADPH (0.1 M, 0.04 mL), NADH (0.1M,
0.04 mL), amortiguador de fosfato de sodio (0.2M, 0.5 mL). Todo esto se
Figura 6.22. Pruebas para la actividad mutagénica en bacterias.
afora a 1 mL.
Un elemento adicional a considerar es la adición de la fracción S9. Esta La variante de preincubación se esquematiza en la Figura 6.24 y
fracción se obtiene del hígado de mamíferos (usualmente ratas), a las se describe brevemente a continuación. En tubos de ensayo se incuban 108
cuales se les administra previamente Aroclor 1254 (en la actualidad se microorganismos mutantes/mL, por 30 o 60 min, con medios pocos
prefiere usar una mezcla de fenobarbital y 5,6-benzoflavona) para inducir nutritivos, una capa de agar y en presencia o ausencia del xenobiótico a
las enzimas que metabolizan xenobióticos (Figura 6.23). evaluar. Transcurrido el tiempo, el contenido de los tubos se vierte sobre
cajas de Petri que contiene una cantidad mínima de medio de cultivo y se
incuban a 37°C por 48 h.
116
actividad mutagénica específica, parámetro que nos sirve para evaluar

la actividad mutagénica del xenobiótico estudiado.
n.c./caja
500
_ efecto tóxico
_ sobre el
400
_ m microorganismo
300
200
_
100
_
0 | | | |
0 10 20 30 40
8
mg/caja
Los tubos de ensayo deben presentar 10 organismos por mL. En el tubo (A) se presenta
medio de cultivo más agar, en el tubo (B) se presenta el medio de cultivo más la fracción m = actividad mutagénica específica (n.c./mg)
S-9 del hígado de rata inducido por ß-naftoflavona; el tubo (C) presenta el medio de n.c. = número de colonias
cultivo, la fracción S-9 y el compuesto químico que se va a evaluar. Los tubos se incuban
a 37°C por 48 h. Sobre un rango de concentraciones del compuesto de prueba, el número
de colonias debe incrementarse al aumentar la cantidad de sustancia. Figura 6.25. Consideraciones para la prueba de Ames.
Figura 6.24. Pasos generales de la prueba de Ames.

En la actualidad, se disponen de varias cepas de Salmonella typhimurium
para realizar las evaluaciones de actividad mutagénica. Algunas de ellas se
Un aspecto importante a tomar en cuenta es la concentración del xenobiótico
presentan en la siguiente tabla.
que se va a estudiar. Por esta razón, primero se lleva a cabo un estudio de
sensibilidad de la cepa a diferentes concentraciones del xenobiótico. Las
Tabla 6.4. Algunas cepas de Salmonella typhimurium utilizadas para la
concentraciones tóxicas (pendientes negativas, Figura 6.25) de entrada se
prueba de Ames.6
rechazan. Cepas de Salmonella Tipos de mutaciones detectadas
typhimurium
Para cada estudio se recomienda de 5 a 6 concentraciones diluidas TA 1535 Detecta mutaciones por sustitución de pares de
a una relación del doble o triple. Cada estudio por duplicado. En la gráfica bases.
TA 100 Es derivada de la TA 1535, pero contiene el
siguiente, la recta de pendiente positiva es la de utilidad. De esta parte se plásmido pKM101, el cual incrementa la
determina el valor de dicha pendiente (m) que se interpreta como la sensibilidad al provocar fallas en los procesos
de reparación del ADN.
117
TA 102, TA 104 Detectan mutaciones por sustitución de pares 6.4.1.2. Prueba SOS en bacterias (Escherichia coli) (Chromotest)
de bases que no detectan las cepas TA 1535 y
TA 100. El Chromotest es un ensayo en bacterias diseñado para evaluar el daño al
TA 1537 Detecta mutaciones por adición de bases. ADN con base en la propiedad inducible de la respuesta SOD, un grupo de
Presenta una mutación en el gen hisC3076
TA 1538 Detecta mutaciones por adición de bases. aproximadamente 60 genes que incrementan su expresión cuando ocurre
Presenta la mutación en el gen hisD3052. daño al ADN. En la cepa estándar que se emplea para este ensayo (PQ37),
TA 98 Es derivada de la TA 1538, presenta el
plásmido pKM101. el gen lacZ que codifica para la ß-galactosidasa está fusionado a suIA, que
TA 1535 Detecta mutaciones por deleción de bases.
YG 1024 Cepa sensible a aminas aromáticas
pertenece a la vía SOS, por lo que la enzima de la síntesis permanece
heterocíclicas. asociada a la respuesta SOS y se transcribe sólo cuando se induce,
indicando daño genético.8, 9 Debido a que los xenobióticos que se evalúan
en esta prueba potencialmente pueden inhibir la síntesis de proteínas o ser
Para ilustrar la aplicación de la prueba de Ames, se presenta a continuación
tóxicos provocando una estimación incorrecta de la inducción de la ß-
los resultados obtenidos al evaluar al café soluble con este procedimiento.
galactosidasa y en consecuencia falsos negativos, el kit comercial incluye
en esta cepa la transcripción constitutiva de fosfatasa alcalina como
15
Tabla 6.5. Actividad mutagénica específica (n.c./mg) del café soluble. indicador de la síntesis proteica e, indirectamente, como indicador de
Incorporación inmediata Preincubación toxicidad. El ensayo emplea cromóforos que son sustratos de estas
Cepa Sin S9 Con S9 Sin S9 Con S9
TA 98 1.92 ± 0.91 negativo 9.15 ± 0.90 2.43 ± 0.24 enzimas y se realiza en placas de 96 pozos, la lectura espectrofotométrica
TA 100 5.02 ± 0.70 negativo 28.11 ± 2.85 6.66 ± 0.94 a 615 nm evalúa la actividad genotóxica y la respuesta a 405 nm, la
TA 102 15.05 ± 0.61 9.83 ± 0.57 30.38 ± 2.87 26.70 ± 2.87
TA 104 negativo negativo 34.10 ± 2.28 negativo viabilidad. Esta prueba puede también realizarse en presencia de fracción
YG negativo negativo 14.47 ± 3.77 negativo
S9 para evaluar la actividad mutagénica de los metabolitos.
1024
La capacidad de la prueba de Ames para identificar carcinógenos
Los resultados obtenidos con cepas de distintas sensibilidades a es más alta que la del Chromotest SOS. Sin embargo, debido a que el
compuestos genotóxicos sugieren que los componentes del café soluble número de falsos positivos es menor en el Chromotest SOS, la
lesionaron al ADN por diferentes mecanismos. En este estudio, el especificidad, entendida como la capacidad para discriminar entre
procedimiento de preincubación fue más eficiente en detectar la actividad carcinógenos y no carcinógenos es mayor en esta prueba que en la prueba
mutagénica que el de incorporación inmediata. En ambos casos, la adición de Ames. Por lo que los resultados de ambas pruebas son
8
de la fracción S9, disminuyó la actividad mutagénica del café, lo que indica complementarios.
que los compuestos responsables, al metabolizarse, perdieron sus
características genotóxicas3.
118
6.4.2. Pruebas in vitro en células eucariotas luminosos y obscuros en los cromosomas, quienes reciben el nombre de
6.4.2.1. Intercambio de cromátides hermanas (SCE) arlequines.
Esta prueba ha sido utilizada para detectar rupturas cromosómicas por
xenobióticos.
6.4.3. Pruebas in vivo en células eucariotas
6.4.3.1. Pruebas con Drosophila melanogaster
Las principales ventajas de la mosca de la fruta (Drosophila melanogaster)
como un organismo de prueba en estudios toxicológicos, se enlistan a
continuación:
§ Es una especie eucariota de reproducción sexual.
§ Presenta paralelismo entre sus células germinales con las del ser
humano.
§ Es un organismo genéticamente bien conocido.
§ Presenta tres cromosomas grandes
BrdU: bromodesoxiuridina § Muchas de sus mutaciones tienen efectos visibles que pueden
Figura 6.26. Pasos generales para la prueba de intercambio de cromátidas. emplearse como marcadores útiles de daño.
§ Presenta cromosomas especiales combinados con marcadores y
En esta prueba se puede realizar tanto in vitro como in vivo. Para la versión rearreglos.
in vitro se emplean cultivos celulares de ovario de hámster (CHO) o § Tiene un tiempo de generación corto y gran número de progenie.
pulmonares (V79) y se toman muestras que se incuban con el xenobiótico § Es capaz de metabolizar una gran cantidad de xenobióticos, lo que
en presencia y en ausencia de alícuotas de la fracción S9 durante 2 h. En resulta conveniente en la transformación de promutágenos a
seguida, se lava para remover el compuesto que no se haya absorbido; las mutágenos.
células se transfieren a un medio que contiene 5-bromo-2-deoxiuridina
(BrdU) y se permite que ocurran dos replicaciones de ADN (24 o 30 h). Uno de los sistemas de prueba con este organismo tiene su fundamento en
Transcurrido el tiempo, se adiciona colchicina para detener el proceso de que los machos de una especie tienen un gen ligado al cromosoma X, que
reproducción en la etapa de metafase. Se preparan laminillas que se tiñen le da un color amarillo a su cuerpo (Figura 6.27). Los machos de dos días
con colorantes fluorescentes y se fijan con Giemsa. Los daños causados de edad se exponen al xenobiótico a evaluar, disuelto en diferentes
por la exposición al xenobiótico (rupturas, fragmentaciones, etc.) se verán concentraciones en agua con azúcar. Los machos sobrevivientes se
reflejados en el intercambio de piezas entre los cromosomas. Este efecto se aparean con hembras no expuestas al xenobiótico. Si no hay machos de
observará en el microscopio por la presencia de una variedad de patrones cuerpo amarillo en la progenie, se asume que ha ocurrido una mutación
119
letal. Con cantidades menores a la concentración letal, se podrán observar 6.4.3.2. Prueba de micronúcleos
algunos machos de cuerpo amarillo, cuyo número guardará una relación Un micronúcleo (MN) se forma durante la transición metafase/anafase del
inversa con la concentración de xenobiótico a la que los progenitores se proceso mitótico. Surge de: a) un cromosoma entero o b) de un pedazo del
han expuesto. mismo. El primer caso es ocasionado por una sustancia aneuploidogénica y
el segundo, por una sustancia clastogénica. Éstos no se incorporan al
núcleo de las células hijas por carecer de un centrómero.
La evaluación de la frecuencia de micronúcleos in vivo es una
prueba fundamental en la batería de pruebas de genotoxicidad y se
recomienda por las agencias regulatorias alrededor del mundo, para que se
lleve a cabo como parte de la evaluación de seguridad de los productos.10,11
El ensayo emplea Giemsa como colorante para realizar una tinción
Figura 6.27. Ejemplo de cambios detectados en D. melanogaster. diferencial; sin embargo, una vez que en ensayo resulta positivo, se puede
determinar el mecanismo de formación del micronúcleo (aneuploidógenesis
Cuando se quiere monitorear un gran número de sustancias, para evaluar o clastogénesis) empleando anticuerpos específicos dirigidos hacia el
los daños letales recesivos ligados al sexo (SLRL), la Drosophila centrómero y un microscopio de fluorescencia.10
melanogaster es la mejor elección. En este ensayo se detectan efectos

letales asociados con mutaciones como microlesiones, deleciones, o
rearreglos cromosómicos. Los parámetros estudiados en células germinales
de las Drosophila son:
§ Inducción de mutaciones relativas a citotoxicidad.
§ La proporción de aberraciones cromosómicas para las mutaciones
letales recesivas.
§ El papel de los procesos de reparación.
§ La influencia del tiempo de expresión en la formación de
aberraciones cromosómicas.
§ La inducción de mutaciones relativas a uniones cuantitativas al
ADN.
Figura 6.28. Micronúcleos ocasionados por a) daño clastogénico
y por b) daño aneuploidogénico.
120
Los micronúcleos se pueden presentar en cualquier tipo de células de 6.4.3.3. El ensayo cometa
tejidos proliferativos (tejido hepático, eritrocitos en médula ósea, linfocitos). El ensayo cometa se utiliza para evaluar el potencial genotóxico de diversas
Estas células, recolectadas de animales expuestos a xenobióticos, pueden sustancias químicas. Este ensayo se emplea para la identificación del
utilizarse para este ensayo; sin embargo, también se han encontrado riesgo para sustancias como químicos industriales, biocidas, agroquímicos,
resultados útiles empleando cultivo de linfocitos. El ratón es la especie aditivos de alimentos y, desde luego, productos farmacéuticos.12, 13
preferida para este tipo de estudios. Reportes recientes señalan el uso de
peces, los cuales tienen eritrocitos nucleados, como especies disponibles
para el monitoreo de daño mutagénico por contaminantes de cuerpos de
aguas. Asimismo, se han utilizado algunas especies vegetales como
Tradescantia spp y Vicia faba, para evaluar la actividad mutagénica de
algunos contaminantes y fármacos. El ensayo permite la detección de:
µm
§ Clastógenos (sustancias que rompen los cromosomas).
§ Aneuploidógenos (sustancias que afectan el huso mitótico). Figura 6.29. Ensayo cometa: Nucloide (izquierda) y Cometa (derecha).
§ Apoptosis.
El fundamento del ensayo es la migración de fragmentos rotos de ADN
§ Retraso mitótico.
durante un proceso electroforético, el cual es una técnica sensible que
§ Ruptura de cromosomas.
detecta:
§ Pérdida de cromosomas.
§ Rompimiento de cadenas sencillas.
§ No disyunción de cromosomas.
§ Sitios álcali-lábiles.
§ Sitios de reparación por escisión de bases nitrogenadas.
Ventajas del ensayo de micronúcleos
§ El ensayo de MN es una alternativa al test de aberraciones
Las principales ventajas del ensayo cometa incluyen:
cromosómicas convencional.
§ La obtención de datos genéticos a nivel de células individuales,
§ Se pueden analizar las alteraciones presentes en metafases
lo que permite que el estudio estadístico sea robusto.
mitóticas.
§ Requiere de un pequeño número de células (<10 000) por
§ Permite detectar aberraciones cromosómicas que responden a
cada compuesto a evaluar.
alteraciones de tipo estructural (efecto clastogénico) o alteraciones
§ Permite el empleo de cualquier población de células
numéricas (efecto aneuploidogénico) del agente en estudio.
eucariotas.
121
De manera general se procede de la siguiente manera: 9. Janion, C. Inducible SOS response system of DNA repair and
mutagenesis in Escherichia coli. Int J Biol Sci 2008, 4, 338-344.
a) Se mezclan linfocitos u otras células, con microgeles de agarosa
10. Krishna, G. & Hayashi, M. In vivo rodent micronucleus assay:
extendida sobre placas portaobjetos sumergidos en solución de protocol, conduct and data interpretation. Mut Res 2000, 455, 155-
166.
lisis y luego el ADN es desnaturalizado con NaOH.
11. States, U. & Substances, T. Health Effects Test Guidelines
b) Se realiza un corrido electroforético después de lisar las células en Mammalian Erythrocyte Micronucleus Test. (1998).
12. Brendler-Schwaab, S.; Hartmann, A., Pfuhler, S. & Speit, G. The in
el microgel de agarosa.
vivo comet assay: Use and status in genotoxicity testing.
c) Se colorea el ADN con bromuro de etidio y se estima el daño Mutagenesis 2005, 20, 245-254.
13. Tice, R. R. et al. Single cell gel/comet assay: Guidelines for in vitro
mediante la visualización de la fluorescencia del ADN que migra.
and in vivo genetic toxicology testing. in Environ Mol Mutagen 2000,
35, 206-221.
14. Kirkland, D. & Speit, G. Evaluation of the ability of a battery of three
La cola del cometa representa la migración del ADN, la longitud se mide en
in vitro genotoxicity tests to discriminate rodent carcinogens and
micras desde el centro del núcleo hasta el último punto de fluorescencia non-carcinogens. III. Appropriate follow-up testing in vivo. Mutat.
Res Genet Toxicol Environ Mutagen 2008, 654, 114-132.
(Figura 6.29). El ensayo cometa se puede emplear como prueba
15. María Paula Duarte, Antonio Laires, Jorge Gaspar, Daniela Leão,
complementaria a la prueba de micronúcleos, ya que detecta casi el 90% José Santos Oliveira, José Rueff. Genotoxicity of instant coffee:
possible involvement of phenolic compounds. Mut. Res-Genetic
de los carcinógenos que resultaron negativos en la prueba de
Toxicology and Environmental Mutagenesis 1999, 442, 43-51.
14
micronúcleos. 16. HiteshV. Motwani, EmelieWestberg & Margareta Törnqvist.
Interaction of benzo[a]pyrene diol epoxide isomers with human
serum albumin: Site specific characterisation of adducts and
associated kinetics. Nature, Scientific Reports 2016, DOI:
10.1038/srep36243.
Bibliografía
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1375-1390 (McGraw Hill Education, 2013).
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Inc., 2010).
3. Gerson, S. L. MGMT: its role in cancer aetiology and cancer
therapeutics. Nat Rev Cancer 2004, 4, 296-307.
4. Martínez, R. & Chacón-García, L. The search of DNA-intercalators
as antitumoral drugs: what it worked and what did not work. Curr
Med Chem 2005, 12, 127-151.
5. Maron, D. M. & Ames, B. N. Revised methods for the Salmonella
mutagenicity test. Mutat Res 1983, 113, 173-215.
6. Claxton, L. D. et al. Guide for the Salmonella
typhimurium/mammalian microsome tests for bacterial mutagenicity.
Mutat Res 1987, 189, 83-91.
7. Duarte, M. P. et al. Genotoxicity of instant coffee: Possible
involvement of phenolic compounds. Mutat Res - Genet Toxicol
Environ Mutagen 1999, 442, 43-51.
122
Capítulo 7. Carcinogénesis química límites normales y pueden invadir partes adyacentes del cuerpo y
propagarse a otros órganos.
Según cifras de la Organización Mundial de la Salud (OMS),
8.2 millones de personas murieron de cáncer en 2012 (el 13% de las
muertes a nivel mundial) y se estima que para el 2030 se
incrementarán hasta 13.1 millones. El cáncer de pulmón, próstata,
Contenido
7.1. Generalidades de la célula cancerosa ......................................... 123 seno y colon son los que causan mayor número de muertes cada año.
7.2. Agentes causales del cáncer ....................................................... 125 En México, las cifras registradas por el Instituto Nacional de
7.3. Aspectos de la biología molecular del cáncer .............................. 126 Cancerología (INCan) muestran que del total de defunciones registradas en
7.4. Agentes carcinógenos ................................................................. 127 el país durante 2008 (539,530), 13 de cada 100 tuvieron como causa
7.5. Etapas principales de la carcinogénesis química ........................ 131 principal algún tipo de cáncer (71,074); mientras que, de acuerdo con el
7.6. Clasificación de los carcinógenos químicos ................................ 132 Instituto Nacional de Estadística y Geografía (INEGI), en 2010, el cáncer fue
7.6.2. Carcinógenos epigenéticos ....................................................... 133 la tercera causa de muerte (70,240 defunciones). El cáncer de próstata, el
7.7. Cocarcinogénesis y sincarcinogénesis ........................................ 134 de seno y el cervicouterino son los que presentan una mayor incidencia y
Bibliografía .......................................................................................... 135 mortalidad en el país.

Los tumores se componen de poblaciones celulares heterogéneas,
para explicar esta observación biológica existen dos teorías (Figura 7.1):
El objetivo de este capítulo es presentar los principios básicos sobre las - Modelo estocástico: las células que conforman al tumor son
causas y características que presentan las células cancerosas, así como el equivalentes, por lo que cualquiera de ellas sería capaz de iniciar
papel que desempeñan algunos de los xenobióticos involucrados en su un nuevo tumor, el comportamiento diferencial implica la
origen y desarrollo. participación de señales intrínsecas y extrínsecas.
- Modelo jerárquico: existen poblaciones celulares biológicamente
7.1. Generalidades de la célula cancerosa
diferentes y sólo aquellas con características de células troncales
De acuerdo con la Organización Mundial de la Salud (OMS), el cáncer es
(son aquellas que funcionalmente se caracterizan por su capacidad
un término genérico que designa a un amplio grupo de enfermedades que
de autorenovación y multipotencialidad), son capaces de generar
pueden afectar cualquier parte del cuerpo; se caracteriza por la
un nuevo tumor.
multiplicación rápida de células anormales que se extienden más allá de los
123
Capítulo 7. Carcinogénesis química Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM
- Metaplasia: producción de una especie de tejido distinto del que

producen normalmente las células.
- Anaplasia: cambio marcadamente regresivo de un tipo de célula
específica (diferenciada) hacia células que presentan naturaleza
indiferenciada (no especializada). En sentido estricto, anaplasia
significa “formarse en sentido retrógrado”.
- Quiste: bolsa cerrada con una membrana propia que se desarrolla
anormalmente en una cavidad o estructura del cuerpo. Pueden
contener aire, fluidos o material semisólido.
- Metástasis: proceso por el cual las células tumorales invaden y
destruyen otros órganos y tejidos.
Los tumores se clasifican como benignos o malignos, dependiendo de las

características que presentan (Tabla 7.1).
Tabla 7.1. Clasificación de tumores.

Figura 7.1. Modelos de la heterogeneidad de un tumor. Tumor benigno Tumor maligno
A continuación, se describen algunos conceptos básicos para el desarrollo Encapsulado No encapsulado
No invasivos Invasivos
de este capítulo.
Poca división celular Divisiones celulares comunes
- Neoplasia: formación de un tejido nuevo. El término tumor se utiliza Altamente diferenciados Poco diferenciados
Crecimiento lento Crecimiento rápido
como sinónimo. Escasa anaplasia Presentan anaplasia
- Cáncer: término genérico que designa un amplio grupo de No hay metástasis Hay metástasis
Material genético estable Inestabilidad en el material genético
enfermedades que tienen en común la formación de un tumor maligno. Poca secreción de proteasas Alta secreción de proteasas
Requiere de factores de No requiere de factores de
- Hiperplasia: incremento del tamaño de órganos y tejidos provocado
crecimiento crecimiento
por un aumento del número de células.
- Hipertrofia: incremento de masa debido al aumento del tamaño de las Las células que conforman a un tumor maligno se definen como cancerosas
células. y poseen características adquiridas que las distinguen de una célula normal.
- Displasia: cambio reversible que incluye una alteración, en la forma o Estas características distintivas incluyen: el mantenimiento de las señales
tamaño, y en la relación de la organización de los órganos. de crecimiento, la evasión de los supresores de crecimiento, la invasión
124
activa y metástasis, la capacidad de replicación inmortal, la inducción de - Hemorragia: ocurre como una consecuencia de la invasión de tumores
angiogénesis y la resistencia a la muerte celular (Figura 7.2); a los vasos sanguíneos, provocando coagulación intravascular y
adicionalmente, en la última década se han propuesto nuevas trombocitopenia.
características que pueden generalizarse para la mayoría de los tumores: la - Fiebre: se presenta en muchos pacientes, usualmente provocada por
reprogramación del metabolismo energético, la inestabilidad genómica, la infecciones oportunistas.
evasión del sistema inmunológico y la promoción de un ambiente - Caquexia: resulta de una combinación de anorexia (falta de apetito),
inflamatorio que, en conjunto, permiten a la célula cancerosa sobrevivir, deterioro orgánico y debilitamiento físico en general.
proliferar y diseminarse. - Dolor: debido principalmente a desórdenes neurológicos.
7.2. Agentes causales del cáncer

Aunque existen muchas causas que originan este grupo de padecimientos,
éstas se pueden agrupar en los siguientes grupos:
- Predisposición genética que puede interaccionar con factores
ambientales.
- Factores ambientales (ocupacionales, dieta, fármacos, contaminantes).
- Factores desconocidos.
El segundo y tercer grupo probablemente son los responsables del 60% al
90% de todos los tipos de cáncer.
7.2.1. Predisposición genética

Ejemplos del primer grupo lo constituyen los padecimientos que se
muestran en la Tabla 7.2.
Figura 7.2. Características distintivas de la célula cancerosa. Tabla 7.2. Predisposición genética y cáncer.
Condición Tipo de cáncer
Enseguida se mencionan algunos de los síntomas que se manifiestan en el Retinoblastoma heredado Retinoblastoma
Xenoderma pigmentoso Melanoma, carcinoma de células escamosas
cáncer: Tumor de Wilms Nefroblastoma
- Anemia: presente en casi la mitad de los enfermos de cáncer. Se Síndrome de Li-Fraumeni Sarcomas, leucemia, cerebro, seno
Poliposis adenomatosa familiar Colon, recto
considera el primer síntoma de la enfermedad. Enfermedad ósea de Paget Osteosarcoma
Anemia de Fanconi Leucemia
125
La predisposición genética influye para el desarrollo de algunos tipos de desarrollar tumores en pulmón, cavidad bucal, labios, laringe, faringe y
cáncer, como es el caso del cáncer de seno, donde una mutación en un esófago.
alelo del gen BRCA1 representa un incremento del 60% de riesgo de
desarrollar cáncer en mujeres mayores de 50 años. 7.2.3. Factores desconocidos
En ocasiones, la predisposición genética requiere interaccionar con Aquellos tipos de cáncer en donde la etiología no puede ser clasificada
factores ambientales para la generación de cáncer, por ejemplo; el entre los factores antes mencionados se describen como de origen
xenoderma pigmentoso (XP) es una condición con herencia autosómica desconocido, porque a la luz de los conocimientos actuales, no puede ser
recesiva, caracterizada por una deficiencia en los mecanismos de determinado. Entre las nuevas aportaciones en este rubro, se ha descrito la
reparación de las rupturas de ADN, provocadas por la exposición a la luz participación del microambiente, es decir, las células y moléculas solubles
ultravioleta. Al incrementar la exposición del paciente con XP a la radiación que rodean al tumor, donde se plantea la hipótesis de que no sólo sea el
solar, se promueve el desarrollo de melanomas y carcinomas de células tumor el que modifica al tejido que le rodea, sino que el mismo
escamosas. microambiente sea permisivo y promueva el establecimiento y el
Ciertos tipos de cáncer presentan incidencia prevalente en algunos mantenimiento del tumor; por ejemplo, en modelos de inflamación crónica.
países, esto podría deberse a la predisposición genética de las razas

7.3. Aspectos de la biología molecular del cáncer
predominantes que habitan estos lugares; sin embargo, es difícil determinar
En la biología del cáncer es importante destacar el papel de los genes y los
el grado de influencia de la predisposición genética, debido al movimiento
efectos que pueden tener las mutaciones que sobre ellos inciden. Las
constante de grupos poblacionales a nivel mundial, además de los factores
características principales se enuncian a continuación:
ambientales involucrados.
§ Oncogenes
7.2.2. Factores ambientales Son genes que codifican para proteínas que pueden transformar células en
Los factores ambientales involucran, en este contexto, no sólo factores cultivo o de inducir cáncer en animales. Muchos tienen su origen en genes
físicos como el agua, el aire o el suelo, sino también alimentos, bebidas, normales, llamados por esto proto-oncogenes.
microorganismos, estilos de vida, exposición ocupacional, fármacos y Las mutaciones involucradas en la producción de oncogenes a
prácticamente todas las interacciones de los individuos con su medio partir de proto-oncogenes, en general, son de ganancia de función y de
ambiente. herencia dominante, entre las que se encuentran mutaciones puntuales,
Cerca del 30% de los tipos de cáncer son prevenibles al disminuir o amplificación de genes y translocaciones.
evitar la exposición a algunos factores ambientales, tal es el caso de los § Genes supresores de tumor
cánceres asociados al tabaquismo, donde se ha demostrado que los Son genes que codifican para proteínas que inhiben la proliferación celular,
carcinógenos químicos presentes en el tabaco incrementan el riesgo de como reguladores de ciclo, proteínas involucradas en reparación de ADN.
Las mutaciones involucradas en la producción de inactivación de genes
126
supresores de tumor, en general, son de pérdida de función y de herencia con la evidencia experimental y epidemiológica con la que se cuenta. A
recesiva, entre las que se encuentran mutaciones puntuales y deleciones. continuación se mencionan algunas de estas clasificaciones (última revisión
Es importante destacar la estrecha relación que existe entre la julio de 2015).
genética clásica que se ha descrito para el cáncer, que incluyen a las § IARC (International Agency for Research on Cancer) (Figura 7.3).
mutaciones en los genes antes mencionados, y las alteraciones a nivel - Grupo 1: carcinógenos para humanos: 117 agentes.
epigenético, donde cambios en el patrón de marcas del ADN o histonas - Grupo 2A: probable carcinógeno para humanos: 74 agentes.
(marcas como acetilaciones, metilaciones, fosforilaciones, entre otras) - Grupo 2B: posible carcinógeno para humano: 287 agentes.
provocan modificaciones en la estructura de la cromatina, lo que lleva a - Grupo 3: no clasificables con respecto a su efecto carcinógeno
establecer un contexto más complejo del desarrollo y mantenimiento para humanos: 503 agentes.
tumoral. - Grupo 4: probable no carcinógeno para humanos: 1 agente.
7.4. Agentes carcinógenos § EPA (Enviromental Protection Agency)

Un carcinógeno se define como aquella sustancia cuya administración en - Grupo A: carcinógeno para humanos.
animales de laboratorio induce un incremento estadísticamente significativo - Grupo B: probable carcinógeno para humanos.
en la incidencia de uno o más tipos de neoplasia, comparado con los - Grupo C: evidencias lo sugieren como carcinógeno potencial.
animales en el grupo control (no expuestos).4 - Grupo D: información insuficiente para clasificarlo como
Los carcinógenos se pueden clasificar como físicos (radiación UV, carcinógeno potencial.
rayos X), biológicos (Tabla 7.3) y químicos. El resto de este capítulo se - Grupo E: probable no carcinógeno para humanos.
destina a la revisión de éstos últimos.
§ NTP (National Toxicology Program)

Tabla 7.3. Carcinógenos biológicos. - Carcinógenos para humanos conocidos.
Agente Tipo de cáncer asociado
Virus de Epstein-Bar Linfoma de Burkitt - Se puede anticipar de manera razonable que son carcinógenos
Virus del papiloma humano Cáncer cervicouterino para humanos.
Virus de la hepatitis B y C Hepatocarcinoma
Virus de herpes asociado con Sarcoma de Kaposi
sarcoma de Kaposi
Helycobacter pylori Cáncer de estómago
7.4.1. Clasificación de carcinógenos

Diversas agencias internacionales se han dado a la tarea de catalogar a los
agentes carcinogénicos, independientemente de su naturaleza, de acuerdo
127
hulla presente en esos lugares. Sus anotaciones no fueron confirmadas

sino hasta 1916, cuando se pudo inducir cáncer de piel en conejos, al
aplicarles tópicamente, alquitrán de hulla. En la década de 1920, el alquitrán
de hulla fue analizado, y los componentes activos encontrados fueron
hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP), tales como el
dibenzo[a,h]antraceno y el benzo[a]pireno (Figura 7.4).
Tabla 7.4. Descubrimientos de carcinógenos para seres humanos

Carcinógeno Órgano afectado Registrado por Año
Hollin Escroto Pott 1775
Humo de pipas Labios Sommering 1795
Alquitrán de hulla Piel Volkman 1875
Colorantes sintéticos Vejiga Rehn 1895
Rayos X Piel Van Trieben 1902
Extracto de tabaco Cavidad oral Abbe 1915
Luz solar Piel Molesworth 1937
Figura 7.3. Clasificación de carcinógenos por la IARC. Humo de tabaco Pulmón Muller 1939
Asbestos Pleura Wagner 1960
Kipling,
7.4.2. Carcinógenos químicos Cadmio Próstata 1967
Waterhouse
El hecho de que ciertas sustancias del medio ambiente provoquen varios
tipos de cáncer se conoce desde hace aproximadamente 200 años. Las
primeras conjeturas de que los xenobióticos pudiesen provocar cáncer
surgieron de las observaciones de la alta incidencia de esta enfermedad en
grupos expuestos laboralmente; aunque se tuvo que esperar mucho tiempo
para que las investigaciones en los laboratorios confirmaran estas
dibenzo[a,h]antraceno benzo[a]pireno
sospechas. En la Tabla 7.4 se presenta de forma resumida la historia de los
descubrimientos y las confirmaciones que se dieron a los primeros Figura 7.4. Carcinógenos encontrados en el alquitrán de hulla.
carcinógenos químicos.
En 1860, Alemania se convirtió en el centro de manufactura de los
Una de las primeras observaciones registradas fue por Sir Percivall
colorantes sintéticos, que se formaban por aminas aromáticas. Treinta años
Pott en 1775. En Londres, este doctor se percató de que muchos de sus
más tarde, fue señalado que la exposición a este tipo de compuestos era
pacientes con cáncer de escroto (bolsa de piel que cubre los testículos)
peligroso. En 1895, Ludwig Rehn, un cirujano de Frankfurt, reportó
eran limpiadores de chimeneas domésticas, por lo que relacionó la
carcinomas de vejigas en trabajadores de las empresas de colorantes.
presencia de esta anormalidad con la exposición al hollín y al alquitrán de
Evidencias epidemiológicas mostraron que la 2-naftilamina era el
128
carcinógeno probable; pero esto no fue confirmado sino hasta 1938, cuando O CH2 HO CH3 CH3
H OH O
O O
Hupper y colaboradores, en experimentos con perros, indujeron carcinoma O
N O
de vejiga, al alimentarlos con 2-naftilamina. safrol
H3C
O O
alcaloides de pirrolidizina
(canela, albahaca, Cl H3C
Después de estos primeros descubrimientos históricos, se han nuez moscada) (senecio y heliotropos)
carcinógeno en ratas griseofulvina
reportado otras sustancias carcinogénicas. En la actualidad se encuentran (Penicillium griseofulvum)
cáncer de tiroides
registrados varios compuestos, tanto sintéticos (Figura 7.5) como de origen O
O O O
natural (Figura 7.6), que han sido confirmados como carcinógenos para el O
OH
O O
NH2 O
humano. O NO 2 H2N
O CH3
O O
N O H3C N NH
CH2 O CH3
O O
S P N O O O
S
formaldehído N H3C O S
H3C O
mitomicina C aflatoxina B1
ácido aristolóquico
busulfán
tiotepa
Figura 7.6. Ejemplos de carcinógenos de origen natural
HO CH3 Cl
(http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/latest_classif.php).
Cl NH CH3
Cl
O Asimismo, debido a la importancia que se ha dado a la contaminación, hoy

H3C O
H3C OH
Cl Cl en día se ha establecido el potencial carcinogénico de algunos
Cl
contaminantes ambientales (Tabla 7.5).
dietilestilbestrol lindano fenacetina
Tabla 7.5. Contaminantes ambientales que producen cáncer.
Figura 7.5. Ejemplos de carcinógenos de origen sintético Xenobiótico Órgano afectado
Arsénico Piel, pulmón
(http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/latest_classif.php). Asbestos Pulmón, pleura*
Benceno Leucemia
Éter di(clorometílico) Pulmón
Cromo Pulmón
2-naftilamina Vejiga,
Níquel Pulmón, fosas nasales
Cloruro de vinilo Hígado
Productos de la combustión del Piel, pulmón, vejiga
carbón
Productos de la combustión del tabaco Pulmón, faringe, boca, esófago,
laringe, páncreas, vejiga, riñón
*membrana serosa que recubre al pulmón.
129
Algunos contaminantes ambientales presentan, aparte de los efectos NH2

CH3 N
carcinógenos, efectos mutagénicos y teratogénicos en roedores (Tabla 7.6).
N
N CH3
N NH2
Tabla 7.6. Efectos crónicos de algunos compuestos presentes en la N
gasolina. H
3-amino-1-metil-5H-pirido(2,3-b)indol 2-amino-3-metilimidazo(4,5-f)quinolina
Efecto en ratas y ratones Benceno Tolueno Xileno (Trp-P-2) (IQ)
Carcinógeno +++ +++ +++ NH2

Teratógeno ++ +++ ++ N N
Mutágeno +++ ++ --- H3C N N NH2
CH3
++++: acción pronunciada; +++ acción menos pronunciada; ---:no presenta N N
efecto. N CH3
2-amino-3,8-dimetilimidazo(4,5-f)quinoxalina 2-amino-1-metil-6-fenilimidazo(4,5-b)piridina
(MeIQx) (PhIP)
Otro grupo de carcinógenos son aquellos que se generan en el proceso de
cocción de los alimentos, algunos ejemplos de ellos son: la formación de Figura 7.7. Carcinógenos formados durante la cocción de alimentos.
aminas aromáticas por sobrecalentamiento de las carnes (Figura 7.7); las

7.4.3. Similitudes y diferencias entre carcinógenos y xenobióticos
carnes cocidas a las brasas que se impregnan de HAP liberados del
En muchos aspectos, los carcinógenos químicos son similares a los
carbón; la formación de oxiesteroles, radicales libres, benzopiranos y
fármacos o a otros xenobióticos; sin embargo, existen algunas
monoepóxidos como consecuencia del sobrecalentamiento de las grasas de
características que los distinguen de ellos.
origen animal, como ocurre en la preparación de papas a la francesa,
Similitudes:
chicharrón y carnitas; y la generación de acroleína debido a la fritura
- Son susceptibles de ser biotransformados.
profunda a altas temperaturas de almidones (papas fritas).
- Sus efectos cambian dependiendo de la especie, raza y sexo de
los animales de experimentación.
- Interaccionan con otros agentes ambientales; sus efectos son
algunas veces incrementados o disminuidos (sinergismo y
antagonismo).
Diferencias:
- Los efectos biológicos que provocan son persistentes,
acumulativos y tardíos.
- A dosis fraccionadas son, en algunos casos, más efectivos que una
sola dosis alta (cercana a su DL50).
130
- Tienen como blanco biológico preferencial el ADN. 7.5.1. Aspectos esenciales de iniciación y promoción en los estudios de
laboratorio
7.5. Etapas principales de la carcinogénesis química
Enseguida se abordan algunos factores a considerar en las dos primeras
El proceso como una sustancia provoca cambios en una célula normal y la
etapas de la carcinogénesis química (Figura 7.9).
transforma en una célula neoplásica no ha sido totalmente comprendido
- El iniciador debe ser administrado primero. Pocos o ningún tumor
para todos los compuestos. Sin embargo, en algunos de ellos se ha logrado
se presenta si el promotor se administra inicialmente.
un avance en la comprensión de sus mecanismos carcinogénicos. Hoy se
- Si el iniciador es administrado en dosis única con un nivel inferior al
sabe que el cáncer es un fenómeno que se lleva a cabo en dos tiempos, la
que pueda provocar cáncer, no produce la formación de tumores
conversión y el desarrollo neoplásico, mismos que a su vez abarcan tres
durante la vida del animal de experimentación. Sin embargo, dosis
etapas: iniciación, promoción, progresión. La ubicación de todos ellos se
repetidas del iniciador pueden formar tumores aún en ausencia del
ilustra en la Figura 7.8.
promotor.
- La acción del iniciador es irreversible; los tumores generados se
presentan aproximadamente en las mismas proporciones, si el
intervalo de administración entre el iniciador y el promotor es
extendido de una semana o un año.
- El iniciador es un electrófilo, el cual se une de forma covalente al
ADN para provocar un cambio mutagénico que no se expresa, pero
que es permanente y hereditario.
- La función esencial del agente promotor es completar el proceso
carcinogénico suscitado por el iniciador.
- Los promotores generalmente no son electrófilos y no se tienen
evidencias de que se unan de forma covalente a macromoléculas.
- La acción de los promotores es reversible en una etapa inicial y,
usualmente, se requieren varias exposiciones a dichos
compuestos.
Figura 7.8. Etapas principales de la carcinogénesis química.
131
7.6. Clasificación de los carcinógenos químicos

Los carcinógenos químicos se clasifican de acuerdo con su mecanismo de
acción para inducir cáncer (Tabla 7.8).
Tabla 7.8. Clasificación de carcinógenos.
Categoría Posibles mecanismos Ejemplos
Carcinógenos
genotóxicos
No necesitan Son electrófilos que alteran el Agentes alquilantes
bioactivación material genético por medio (mostazas nitrogenadas,
(directos) de mutaciones o sulfato de dimetilo, etc.)
clastogénesis
Necesitan Sus productos metabólicos Hidrocarburos
bioactivación son electrófilos que actúan de aromáticos policíclicos,
(pro-carcinógenos) manera semejante a los nitrosaminas
anteriores
Inorgánicos Alteran la fidelidad de Metales como el níquel,
replicación del DNA el cromo y el cadmio
Carcinógenos
Figura 7.9. Consideraciones de la iniciación y promoción. epigenéticos
Promotores Complementan la acción de Ésteres de forbol,
En la Tabla 7.7 se muestran algunos ejemplos de sustancias que en los sustancias inductoras en el catecoles, disolventes,
proceso carcinogénico etanol, insecticidas
trabajos de experimentación se les ha clasificado como iniciadores, organoclorados,
sacarina
promotores y agentes progresivos.
Citotóxicos Incrementan la incidencia de Ácido nitriloacético,
mutaciones espontáneas tetracloroetileno
Tabla 7.7. Xenobióticos que participan en la carcinogénesis. Modificadores Promueve el crecimiento Estrógeno, amitrole
Xenobiótico Iniciación Promoción Progresión hormonales celular
Sulfato de dimetilo Fuerte ----- -----
Cloruro de bencilo Fuerte ----- ----- Inmunosupresores Deprimen el sistema Análogos de purina,
Acetona ----- ----- Débil inmunológico permitiendo el azatioprina
TPA ----- Fuerte Débil crecimiento de células
Peróxido de benzoilo ----- Débil Fuerte malignas
Peróxido de hidrógeno ----- Débil Fuerte
Partículas sólidas Se desconoce su mecanismo Plásticos y asbestos
TPA: 13-Acetato12-O-tetradecanoilforbol.
Proliferadores de Estimulan la sobreproducción Clofibrato, ésteres de
peroxisomas de H2O2 que activa la ftalatos, lactofen
expresión de oncogenes
132
7.6.1. Carcinógenos genotóxicos organización espacial del ADN alrededor de las histonas y el marcaje
Se ha establecido que el ADN es la molécula blanco de varios agentes que bioquímico. El conjunto de los factores epigenéticos que inciden en el
generan cáncer; las evidencias que sustentan esta afirmación son las estado de una célula se denomina epigenoma.
siguientes: A continuación, se mencionan algunos de los mecanismos de
a) Muchos carcinógenos reaccionan químicamente con el ADN. acción descritos para los carcinógenos epigenéticos:
b) Muchos carcinógenos son mutágenos. - Alterar el comportamiento toxocinético del carcinógeno (absorción,
c) Individuos con problemas de reparación en su ADN están distribución, etc.).
predispuestos a desarrollar cáncer. - Incrementar la penetración del carcinógeno dentro de las células.
d) Muchos tumores muestran anormalidades cromosómicas. - Inhibir los mecanismos de reparación del ADN.
- Acrecentar la proporción de carcinógenos activos.
Dentro del grupo de compuestos que actúan sobre el ADN, se encuentran - Disminuir los nucleófilos que puedan nulificar al carcinógeno
aquellos que no necesitan de ninguna biotransformación para poder actuar. electrofílico.
Este tipo de compuestos se consideran de alto riesgo para la población o - Aumentar la conversión de lesiones del ADN a alteraciones
grupo profesional que esté expuesto. El manejo de estos compuestos permanentes.
dentro de los laboratorios se hará con precauciones extremas, cuidando
todo el tiempo la protección del organismo. 7.6.3. Agentes promotores
Por otro lado, se encuentran aquellos compuestos que requieren al Los promotores son sustancias que, cuando son administradas después de
menos un paso de biotransformación para dar lugar al metabolito que es una dosis pequeña de un iniciador, complementan el desarrollo del cáncer.
capaz de reaccionar con el ADN; la importancia de este grupo radica en que Pueden incrementar el número de tumores o disminuir el periodo de
está conformado por algunos de los principales contaminantes ambientales, latencia para la aparición de los mismos. Los promotores son generalmente
lo que, como se comentó al inicio del capítulo, correspondería a los factores no electrofílicos y no se unen al ADN. El ejemplo típico de un agente
ambientales como agentes causales de cáncer. promotor es el 13-acetato de 12-O-tetradecanoilforbol (TPA) (Figura 7.10),
un compuesto presente en el aceite de crotón. El mecanismo por el que
7.6.2. Carcinógenos epigenéticos induce la promoción es a través de la estimulación de la proliferación de la
El concepto de la epigenética se refiere a fenómenos que no afectan la célula iniciada mediante la activación constitutiva de la vía de señalización
secuencia de ADN, pero que sí varían su expresión. La epigenética de la proteína cinasa C, debido a su similitud estructural con el DAG, un
describe la herencia de patrones de expresión de genes que no vienen ligante endógeno de dicha proteína.
determinados por la secuencia genética. Entre los mecanismos

epigenéticos que pueden afectar la función genómica se incluyen la
133
agrandamiento de la tiroides e inducción de neoplasia de tiroides.6 El

fenobarbital, la carbamazepina y la fenitoína son ejemplos de fármacos que
tienen esta actividad.
7.7. Cocarcinogénesis y sincarcinogénesis

Un cocarcinógeno es un agente que, administrado de manera conjunta, o
antes de un carcinógeno, incrementa la formación de tumores. Otro término
de importancia es el de sincarcinogénesis, este término deriva del
comportamiento sinergista que presentan algunos compuestos bioactivos.
Para distinguir entre los términos de cocarcinogénesis, sincarcinogénesis y
promoción se presentan en la Tabla 7.9 algunas características de los
Figura 7.10. TPA como agente promotor. mismos.
7.6.4. Modificadores hormonales Tabla 7.9. Distinción entre sincarcinogénesis,

cocarcinogénesis y promoción.
Las hormonas pueden jugar un papel importante en la modulación del Proceso Característica operacional Diferencias mecanísticas
proceso de carcinogénesis. Por ejemplo, las ratas macho son más Cocarcinogénesis Un compuesto que aumenta El cocarcinógeno favorece
susceptibles a la incidencia de tumores con 2-AAF (2-acetilaminofluoreno) la acción del carcinógeno la acción del carcinógeno
cuando se administra antes o al facilitar su ingreso a las
que las ratas hembras. Esto se debe, en parte, a la mayor actividad de simultáneamente; o cuando el células o afecta la acción
efecto carcinógenico todavía de enzimas que degraden
sulfotransferasas en ratas machos. Esta actividad se puede deprimir en
persiste al carcinógeno
ratas castradas por la administración de ß-estradiol.
Sincarcinogénesis Dos carcinógenos actúan Ambos carcinógenos son
Existen compuestos denominados disruptores endócrinos o simultánea simultáneamente genotóxicos
modificadores endócrinos que son químicos, que a ciertas dosis interfieren
Sincarcinogénesis Dos carcinógenos Ambos carcinógenos son
en los circuitos hormonales en mamíferos. Estos disruptores pueden causar secuencial administrados en tiempos genotóxicos
neoplasias, defectos de nacimiento y otras irregularidades en el desarrollo. diferentes; el orden de la
secuencia puede ser revertida
Un ejemplo de este tipo de compuestos son los goitrógenos, los cuales son conservando el efecto
carcinógeno.
sustancias que suprimen la función de la tiroides provocando la disminución
Promoción Compuesto que complementa Facilita el desarrollo
de Tiroxina (T4) y alterando el eje tiroides-pituitaria como consecuencia, el
secuencia de la acción neoplásico
cual responde liberando desde la pituitaria la hormona tiroides estimulante carcinogénica iniciada por el
genotóxico
(Tirotropina o TSH). La estimulación crónica de la tiroides por TSH genera
134
Varios cocarcinógenos han sido investigados por su relación con la Bibliografía

generación de tumores del tracto respiratorio. Los polvos de SiO2 en 1. Dick, J. E. Looking ahead in cancer stem cell research. Nature Biotecth
combinación con benzo[a]pireno, presenta un comportamiento de 2009, 27, 44-46.
cocarcinógeno para la formación de tumores de la laringe, tráquea y 2. Hanahan, D. & Weinberg, R.A., Hallmarks of cancer: the next generation.
pulmones en animales de experimentación. Un comportamiento similar lo Cell 2011, 144(5), 646-674.
presentan los polvos de asbestos y el hábito de fumar. Los trabajadores que 3. You, J. S. & Jones, P. A. Cancer genetics and epigenetics: two sides of
están expuestos a asbestos y fuman presentan una incidencia once veces the same coin? Cancer Cell 2012, 22, 9-20.
mayor de cáncer de pulmón en relación a las personas que no están en 4. Wogan, G. N, Hecht, S. S., Felton, J. S., Conney, A. H., Loeb, L. A.
contacto con asbestos, pero que sí fuman; y una proporción 53 veces Enviromental and chemical carcinogenesis. Seminars in Cancer Biology,
mayor, cuando se comparan con personas que no fuman y no están 2007, 14(6), 473-486.
expuestas a las partículas de asbestos. 5. Goel, G.; Makkar, H. P.; Francis, G. & Becker, K. Phorbol esters:
En el caso de la sincarcinogénesis, se puede presentar cuando dos structure, biological activity, and toxicity in animals. Inter J Toxicol 2007, 26,
genotóxicos son administrados de manera secuencial o de manera 279-288.
simultánea. Se ha enfatizado que estas dos formas de la sincarcinogénesis 6. Hard, G. C. Recent developments in the investigation of thyroid regulation
pueden tener mecanismos diferentes de acción y además, deben ser and thyroid carcinogenesis. Environ Health Perspect 1998, 106(8), 427-436.
distinguidos de los conceptos de iniciación-promoción y cocarcinogénesis. 7. McGregor, D. Carcinogenicity. En Fundamental Toxicology for Chemists.
La promoción y la cocarcinogénesis se distinguen de la Editado por Duffus, J.H., Worth, G.J. The Royal Society of Chemistry.
sincarcinogénesis en que los dos primeros términos comprenden aspectos UK.1996, 90-99.
de no genotoxicidad, mientras que en el último concepto, el daño 8. Huici A. et al. Antecedentes genotóxicos en la industria de los encurtidos.
genotóxico es considerado como esencial. Además, si en la AQEIC. 1992, 3, 119-127.
sincarcinogénesis secuencial el orden de aplicación es revertido, el efecto 9. Mehlman, M.A. Dangerous properties of petroleum refining products:
se presenta. Éste no es el caso para los cocarcinógenos o los promotores, Carcinogenecity of motor fuel. Teratogenesis, Carcinogenesis and
a menos que el agente tenga adicionalmente propiedades genotóxicas. El Mutagenesis 1990, 10, 399-408.
fenómeno de la sincarcinogénesis ha sido reportado en varios órganos,
incluyendo la piel, el hígado y la vejiga. La sincarcinogénesis ocurre cuando
ambos agentes tienen el mismo órgano blanco.
135
Capítulo 8. Teratogénesis química 8.1. Aspectos históricos

Históricamente en las diferentes culturas la aparición de niños deformes
fue atribuida a la hibridación entre humanos y dioses, o humanos y
demonios. Entre los antiguos griegos y romanos, se consideraba a los
niños con alteraciones estructurales como divinidades, de allí que sus
figuras mitológicas se encuentren derivadas de alteraciones
Contenido
8.1. Aspectos históricos…………………………………………...136 morfológicas. En Europa, durante los siglos XV y XVI, la presencia de
8.2. Causas de las alteraciones congénitas…………………….137 malformaciones estaba asociada con los hechiceros, demonios u otras
8.3. Definición de términos………………………………………..138 criaturas malignas.
8.4. Factores a considerar en la teratogénesis…………………139
8.4.1. Factores genéticos………………………………………139 La teratogénesis es una ciencia moderna que ha cobrado
8.4.2. Periodos críticos de susceptibilidad …………………..140 ímpetu en los últimos años. En algunos textos se ha cambiado esta
8.4.3. Mecanismos de acción ……………………………...…141
palabra por el de toxicología del desarrollo, por considerarlo un término
8.4.4. Consecuencias del desarrollo anormal………………..143
8.4.5. Acceso hacia el embrión y feto…………………………144 que integra aspectos estructurales y funcionales de las alteraciones que
8.4.6. Relación de la dosis teratogénica y DL50 para se presentan.
la madre………………………………………….............145
La teratogénesis o toxicología del desarrollo trata principalmente
8.4.7. Cambios fisiológicos en la mujer
embarazada…………………………………..…………..145 de los defectos persistentes (permanentes o semi-permanentes) del
8.5. Agentes teratógenos para el ser humano .......................... 146 desarrollo que se originan en la gestación y que se manifiestan después
8.5.1. Sustancias que causan teratogénesis en el ser
del nacimiento. Muchos de los primeros trabajos en este campo se
humano…………………………………………………….146
8.5.2. Clasificación de los fármacos de acuerdo a su riesgo concentraron en reportar sólo cambios morfológicos observables,
teratogénico……………………………………………….147 referidos como “taras”, por lo que originalmente esta disciplina estuvo
Bibliografía………………………………………………………...149
asociada con la anatomía. Las investigaciones de las últimas dos
décadas han señalado el origen prenatal de otras alteraciones que no
El objetivo de este capítulo es presentar los conceptos y problemáticas son de índole morfológicas, tales como defectos mentales, incapacidad
involucradas en el estudio de la teratogénesis como disciplina que reproductiva, disfunción metabólica, incoordinación motora, neoplasias,
estudia las anormalidades estructurales o funcionales que se producen disfunción inmunológica y otras alteraciones provocadas por defectos en
durante el desarrollo embrionario. sistemas u órganos (corazón, riñón, hígado, etc.) que pueden
presentarse sin manifestar cambios morfológicos detectables.
136
Capítulo 8. Teratogénesis química Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM
8.2. Causas de las alteraciones congénitas ambientales, tales como la deficiencia en la dieta materna o las
Hoy en día no se conoce la causa de las dos terceras partes de las radiaciones, podrían afectar el desarrollo intrauterino de diversos
anomalías congénitas. Se piensa que algunas malformaciones cardiacas organismos. Sin embargo, para los mamíferos se creyó que la madre y
y de la columna vertebral son poligénicas es decir, producidas por la en última instancia, la placenta, presentaban verdaderas barreras a la
presencia simultánea de varios genes anómalos. Otras anomalías influencia de los agentes ambientales y las malformaciones que se
congénitas parecen ser multifactoriales, esto es, producidas por genes lograban presentar estaban genéticamente determinadas.
anormales que interactúan con agentes ambientales perjudiciales. En los años veinte, se reportó que las mujeres embarazadas
Algunas malformaciones se producen con más frecuencia en padres de expuestas a radiaciones ionizantes procrearon hijos con defectos en el
edades avanzadas; por ejemplo, el riesgo de que nazca un niño con sistema nervioso central y alteraciones del esqueleto. En 1941, Gregg
síndrome de Down se incrementa con la edad de la madre. señaló la asociación de la rubéola materna con muertes, ceguera,
Diferentes infecciones padecidas por una gestante pueden sordera en los niños engendrados. Algunos otros eventos
lesionar al feto. La más típica, la rubéola, puede producir retraso mental, posteriormente reportados se presentan en la Tabla 8.1.
ceguera o sordera en el recién nacido. La vacunación de niñas y
adolescentes evita que se produzca la infección durante los embarazos Tabla 8.1. Reportes de efectos teratogénicos por xenobióticos.
futuros de esas mujeres. Otras infecciones que pueden dañar al feto si Año Xenobiótico Actividad farmacológica
se producen durante la gestación son el síndrome de inmunodeficiencia
1948 Mustina Antineoplástico
adquirida (sida), la varicela, la toxoplasmosis y la infección por 1950 Aminopterina Antiabortivo
citomegalovirus. 1959 Metilmercurio Enfermedad de Minamata (Japón)
1960 Hormonas Antiabortivos y anticonceptivos
Las mujeres con diabetes mellitus tipo I (insulino-dependiente), sexuales (Progesterona)
mal controlada durante la gestación, pueden tener hijos con cardiopatías 1961 Talidomida Hipnótico
congénitas y otros problemas. La fenilcetonuria (enfermedad del

metabolismo) puede producir polimalformaciones y retraso mental en el De los eventos antes mencionados, destaca el de la talidomida,
niño, si no se controla durante el embarazo. prescrito como sedante en las décadas de 1950 y 1960, efecto
El trabajo experimental de los años cuarenta, con los trabajos farmacológico que fue aprovechado para tratar las molestias iniciales del
de Warknay y colaboradores, con embriones de pescados, anfibios y embarazo. El producto comercial estaba constituido por la mezcla de
pollos, mostraron la susceptibilidad de éstos en condiciones adversas. enantiómeros, siendo la (S)-talidomida la causante del efecto
Estos investigadores demostraron que la influencia de factores teratogénico (Figura 8.1).
137
Por los acontecimientos citados, entre 1950 y 1960, se empezó a Agente fetotóxico. Cualquier agente (xenobiótico, fármaco, virus, rayos X)
estudiar con mayor atención el papel que jugaba la barrera placentaria que cause daño fetal de cualquier clase.
en el nacimiento de hijos deformes, de mujeres que habían consumido Teratógeno. Un agente (químico o físico) que provoque desarrollo de
los diferentes compuestos antes reportados. Con lo que se llegó a la anormalidades de naturaleza estructural o funcional.
conclusión de que los factores ambientales podían afectar a los Cigoto. Es la célula que resulta de la fertilización de un oocito con un
embriones humanos, aunque la integridad de la madre no fuese espermatozoide.
alterada. Embrión. El producto de la concepción desde la implantación hasta la
octava semana después del periodo menstrual.
Feto. El producto de concepción desde la octava semana hasta el
nacimiento.
Malformaciones congénitas. Cualquier cambio estructural o funcional de
origen prenatal. Se dividen en:
§ Menores: no tienen ninguna importancia funcional que
comprometan la existencia del individuo: un dedo extra.
§ Mayores: dificultan la supervivencia, requieren tratamiento o
cirugía mayor, provocan discapacidad importante o tienen un
impacto cosmético fuerte: ciclopía (ojo único).
Las anormalidades o malformaciones congénitas más frecuentes son:

a) Defectos del tubo neural:
Figura 8.1. Estructura de los dos enantiómeros § Espina bífida, en la cual no hay un cierre completo de las
de la talidomida y su interconversión. vértebras (2.5 de cada 10 000 nacidos vivos).
§ La anencefalia, falta de la bóveda craneana, el feto muere al
8.3. Definición de términos nacer.
Para iniciar el estudio de la teratogénesis es necesario dar definiciones b) Anormalidades del esqueleto:
de algunos términos utilizados en el desarrollo e investigación de este § Microcefalia, cabeza pequeña y retraso mental.
tema.
138
§ Hidrocefalia, cabeza de gran volumen por acumulación de D. Consecuencias del desarrollo anormal.
líquido cefalorraquídeo. E. Acceso hacia el embrión y feto.
§ Polidactilia, presencia de dedos supernumerarios. F. La relación dosis-respuesta y alteraciones fisiológicas en la
§ Luxación congénita de cadera. mujer embarazada.
c) Atresias: malformación en la cual hay ausencia congénita o 8.4.1. Factores genéticos

cierre de orificio de algún tejido u órgano tubular (tubo digestivo, La susceptibilidad a la teratogénesis depende del genotipo del
vías nasofaríngeas). organismo, incluyendo especie y raza.
d) Deformaciones faciales: labio leporino y paladar hendido. La variación en la respuesta puede ser debida en parte a las
e) Defectos cardiacos y en el sistema genitourinario diferencias en la distribución, metabolismo materno o capacidad de un
xenobiótico para atravesar la barrera placentaria. Esto llevará a un
Cabe mencionar que algunas de estas anormalidades comprometen la efecto de exposición diferente del feto a los agentes que lo pueda
vida del producto, la Tabla 8.2 cita la frecuencia con la que se presentan afectar.
trastornos en la viabilidad debido a teratogénesis. Por ejemplo, los ratones y los conejos son muy susceptibles a la
inducción de paladar hendido por cortisona, mientras que las ratas no lo
Tabla 8.2. Trastornos de viabilidad por teratogénesis.
son. La talidomida es otro teratógeno que presenta especificidad de
Evento Causados por
especie; los humanos, algunos mamíferos superiores (macacos,
malformación
marmosetas) y ciertas cepas de conejos blancos son extremadamente
Muerte neonatal 15% susceptibles a sus efectos, mientras que otros mamíferos son
Nacidos muertos 12%
Abortos espontáneos 1er mes 35% resistentes.
8.4. Factores a considerar en la teratogénesis

En el estudio de la teratogénesis se han establecido seis factores
principales que hay que tomar en cuenta, éstos son:
A. Factores genéticos.
B. Periodos críticos de susceptibilidad.
C. Mecanismos de acción.
139
teratogénicos específicos que ocurran en este periodo. El efecto que

más se ha presentado es la muerte del embrión debido al daño
sustancial que sufren las células no diferenciadas.
Posteriormente, en los periodos embrionario y fetal, el tipo de
respuesta teratogénica está determinada por el estado de desarrollo del
embrión en el momento de la exposición, esto es, hay “periodos críticos”
para diferentes malformaciones de órganos y sistemas (Figura 8.4). El
periodo de la organogénesis es el más sensible a malformaciones
específicas; siendo las alteraciones estructurales, a nivel de órganos y
tejidos, o las deficiencias funcionales los daños más frecuentes a nivel
fetal. Aunque los daños estructurales son generalmente considerados
Figura 8.2. Susceptibilidad genética de roedores a la cortisona. como los criterios principales para evaluar el riesgo teratogénico por ser
los más obvios, hay que señalar también que los desórdenes
8.4.2. Periodos críticos de susceptibilidad funcionales pueden llegar a provocar serias incapacidades o provocar
El complejo proceso de la embriogénesis involucra procesos de una alta mortalidad entre los fetos, al igual que las anormalidades
proliferación celular, diferenciación, migración, organogénesis y, morfológicas (Figura 8.3).
finalmente, maduración de los tejidos, cada uno de los cuales debe Ciertos fármacos tomados al comienzo del embarazo (antes del
ocurrir en una secuencia de tiempo determinada. El desarrollo día 17 después de la fecundación) pueden actuar en función de la ley
embrionario se puede dividir en tres periodos de susceptibilidad: a) el del todo o nada, es decir, pueden matar al embrión o no afectarlo
periodo de implantación (primeras dos semanas), b) el periodo en absoluto. Durante esta fase, el feto es muy resistente al
embrionario (de la semana 2 a la semana 8), y c) el periodo fetal (a partir desarrollo de anomalías congénitas. Sin embargo, el feto es
de la semana 8). Siendo el periodo embrionario o de organogénesis el particularmente vulnerable entre los días 17 y 57 después de la
más susceptible a efectos teratogénicos (Figura 8.3). fecundación, que es cuando sus órganos se están desarrollando
Las primeras dos semanas del desarrollo embrionario es un (organogénesis). Los fármacos que alcanzan al feto durante esta fase
periodo de rápida proliferación celular. Después de la fertilización, las pueden provocar un aborto, una anomalía evidente en el momento del
células se dividen aceleradamente, formando los blastocitos, con muy nacimiento o un defecto permanente pero imperceptible, que resulta
poca diferenciación morfológica. Se conocen muy pocos efectos evidente con el paso de los años, aunque también es posible que no
140
provoquen ningún efecto notable. Los fármacos administrados después Periodo de Periodo embrionario Periodo fetal
implantación
de que el desarrollo de los órganos se haya completado probablemente
Tiempo en semanas
no causarán anomalías congénitas evidentes, pero sí podrán alterar el 1 2 3 4 5 6 7 8 9 16 20-36 38
Rápida división Periodo de organogénesis Periodo de maduración
crecimiento y la función de los órganos y tejidos. celular funcional
Abortos Principales anormalidades y Defectos funcionales y
La extensión del tiempo del desarrollo de los órganos varía espontáneos malformaciones congénitas (rojo) anormalidades congénitas
entre las diferentes especies (Tabla 8.3). Sin embargo, en todas ellas el menores (amarillo)
Sistema Nervioso Central
periodo está comprendido entre la diferenciación de la capa germinal y Corazón
la formación del órgano mayor. En los seres humanos el periodo crítico Miembros Superiores
Miembros Inferiores
se presenta entre los días 20 y 56 de embarazo. Ojos
Dientes
Paladar
Genitales Externos
embrión feto Oído
Figura 8.4. Tiempo de desarrollo de diferentes órganos en el humano.

susceptibilidad
organogénesis
histogénesis Tabla 8.3. Tiempos de embarazo en diversas especies

Días después de la concepción
Maduración funcional
Implantación Periodo Periodo fetal
Especie
(disfunción metabólica) embrionario a
Humano 6-7 20 - 56 56 - 280

Conejo 7-8 8 - 16 17 - 32
Rata 6-8 9 - 17 18 - 22
Ratón 4-6 7 - 16 17 - 20
0
0 1 2 3 4 5 8 9 a: Periodo de organogénesis y de mayor riesgo teratogénico.
meses de embarazo
8.4.3. Mecanismos de acción
Figura 8.3. Periodos críticos de susceptibilidad a teratógenos y sus efectos.
Los xenobióticos que se administran durante el embarazo pueden
afectar al feto de varias formas:
- Actuando directamente sobre el feto y causando lesiones, desarrollo
anormal o muerte.
141
- Alterando la función de la placenta, generalmente estrechando los

vasos sanguíneos y reduciendo el intercambio de oxígeno y
nutrientes entre el feto y la madre.
- Provocando la contracción de los músculos del útero, lo cual puede
lesionar indirectamente al feto, debido a que se reduce la cantidad de
sangre que recibe.
Los efectos adversos de un fármaco dependen de la edad del feto y de

la potencia y de la dosis del fármaco. Las diversas publicaciones en
teratogénesis experimental muestran que muchos tipos de compuestos
frecuentemente causan malformaciones similares si son administrados
durante el mismo periodo crítico. Debido a que los eventos iniciales del
desarrollo anormal generalmente ocurren a nivel subcelular o molecular,
el daño no es detectado fácilmente hasta que la célula muere, sufre
algún cambio morfológico o se presenta algún cambio funcional. Esta
observación ha permitido proponer que los agentes teratogénicos son
capaces de iniciar desarrollos anormales a nivel molecular por los
siguientes mecanismos (Figura 8.5):
Microlesiones genéticas. Se ha estimado que aproximadamente del 20
al 30% de los desarrollos anormales son debidos a mutaciones en
las células germinales de los padres, tales cambios son hereditarios.
Asimismo, cambios en las células somáticas del embrión pueden
Figura 8.5. Etapas sucesivas en el desarrollo de una malformación.
llegar a alterar la suficiente cantidad de células como para provocar
defectos estructurales o funcionales en el individuo.
142
Macrolesiones cromosómicas. El exceso, deficiencia y rearreglo de Falta de precursores o sustratos para procesos celulares. La falta de
cromosomas son probablemente responsables del 3% de desarrollos vitaminas y minerales inhiben el crecimiento o provocan efectos
anormales en los seres humanos; este porcentaje bajo, posiblemente teratogénicos. Los embriones muestran efectos teratogénicos antes
se debe a que un exceso o deficiencia de cromosomas provocará la que la madre presente los síntomas por desnutrición. El cretinismo
muerte del embrión; la excepción se presenta cuando se presentan endémico, caracterizado por retraso mental y físico, parecidos al
excesos o deficiencias de cromosomas sexuales. síndrome de Down, se presenta en áreas donde el yodo en el suelo
Interferencias mitóticas. Ciertos citotóxicos, tales como la hidroxiurea, o está en baja concentración.
las radiaciones detienen la síntesis de DNA, por lo tanto, inhiben el Deficiencias o alteraciones en las fuentes energéticas. El crecimiento del
proceso de mitosis. Otros agentes químicos, tales como la colchicina embrión requiere de altos niveles de energía, por lo que aquellos
y la vincristina, interfieren con la formación del huso mitótico y factores que interfieran con esta función provocarán efectos
previenen la separación de los cromosomas en la anafase. Las teratogénicos. Estos factores son aquellos que provocan un
células tetraploides generadas ocasionan la fetotoxicidad. inadecuado suplemento de glucosa, aquellos que interfieren con la
Alteraciones en las funciones de los ácidos nucleicos. Muchos glucólisis (iodoacetato, 6-aminonicotinamida), aquellos que inhiben el
antibióticos y antineoplásicos son teratogénicos porque interfieren ciclo del ácido cítrico o ciclo de Krebs (deficiencia en riboflavina, 6-
con la replicación, la transcripción o el traslado del RNA. Ejemplos de aminonicotinamida), aquellos que bloquean el transporte de
estas sustancias son el arabinósido de citosina, la cual inhibe la DNA electrones (hipoxia, cianuro, dinitrofenol).
polimerasa, y la 6-mercaptopurina, la cual detiene la incorporación de Cambios en la osmolaridad. Acumulación anormal de fluidos provocan
adenina y guanina al DNA. distorsión en los tejidos que ocasionan teratogénesis. Por ejemplo, la
Estrés oxidante. Un mecanismo adicional que se ha considerado hipoxia en embriones de pollo provoca edema y hematomas, los
recientemente es la formación de especies reactivas de oxígeno cuales provocan desarrollo anormal de los ojos, cerebro y alas.
(ROS) y los niveles de estrés oxidante endógeno, los cuales causan Asimismo, sustancias como las hormonas adrenales provocan este
oxidación de proteínas, lípidos y ADN, provocando daño teratogénico “síndrome de edema” con las consecuencias antes mencionadas.
o muerte embrionaria. Es por eso que, todos los procesos Cambios ultraestructurales en la membrana celular. La permeabilidad
embrionarios que regulan la formación de ROS, el daño oxidante al alterada de la membrana provoca desbalance osmolar como los
ADN y su reparación, así como las señales de transducción descritos previamente. Se ha sugerido que el disolvente
reguladas por ROS son determinantes en el riesgo teratogénico y se dimetilsulfóxido (DMSO) y un exceso de vitamina A actúan en esta
1,2
consideran también un mecanismo de iniciación. forma.
143
Inhibición enzimática. Los compuestos químicos que inhiben la actividad 8.4.5. Acceso al embrión y al feto
de aquellas enzimas que participan en el metabolismo normal Sólo unos cuantos agentes físicos, tales como la radiación o el
provocan alteraciones en el desarrollo de los fetos, como los ultrasonido, pasan directamente a través del tejido de la madre hacia el
xenobióticos que detienen los procesos de reparación del ADN o que embrión o feto. Para los compuestos químicos o sus metabolitos, la ruta
inhiben el proceso de polimerización de la tubulina, necesaria para la de acceso es a través de la barrera placentaria, de ahí arriban al fluido
formación del huso mitótico. Algunos compuestos que actúan por que rodea al embrión. Antes del desastre de la talidomida, se pensaba
este mecanismo son: el 5-fluorouracilo, que inhibe la timidilato que la placenta protegía al feto de las sustancias químicas
sintetasa; la hidroxiurea, inhibidora de la ribonucleasa difosfato administradas a la madre. Ahora se sabe que la placenta tiene cuatro
reductasa, y la citosina arabinosa, que inhibe la ADN polimerasa. funciones: a) función endócrina y exocrina que permite el mantenimiento
del embarazo, b) barrera física e impermeable a compuestos polares, c)
8.4.4. Consecuencias del desarrollo anormal función de biotransformación y d) función de suministro de oxígeno y
Existen cuatro manifestaciones de desarrollo anormal: la muerte, la nutrientes. Por lo que, cualquier cosa que la dañe, dañará también al
malformación, el crecimiento retardado y el desorden funcional. Previa a producto.
la diferenciación, el embrión, por lo general, no es dañado por muchos Algunos xenobióticos pueden pasar de la sangre materna al
agentes; sin embargo, una dosis suficientemente alta provoca, con torrente sanguíneo fetal por difusión simple, por lo que el proceso está
frecuencia, la muerte del mismo. Los xenobióticos embriotóxicos no son limitado por la permeabilidad de la membrana placentaria (Figura 8.6).
usualmente calificados como teratógenos; pero, si son administrados a Generalmente, compuestos con pesos moleculares menores a 600
dosis pequeñas o en diferentes periodos de tiempo, pueden ser Dalton y poco polares pasan a través de la placenta. El tiempo de vida
teratogénicos. El periodo de la organogénesis es el más sensible a media de un compuesto determina si éste puede viajar de su sitio de
malformaciones específicas; siendo las alteraciones estructurales, a metabolismo en el hígado de la madre al tejido del embrión. Metabolitos
nivel de órganos y tejidos, o las deficiencias funcionales, los daños más muy reactivos serán inestables y reaccionarán en el sitio de su
frecuentes a nivel fetal. Aunque los daños estructurales son formación y no alcanzarán al feto. Por otro lado, existen también
comúnmente considerados como los criterios principales para evaluar el compuestos que pueden atravesar la placenta y ser bioactivados, en la
riesgo teratogénico por ser los más obvios, hay que señalar también que sangre o tejidos fetales, para ejercer sus efectos dañinos.
los desórdenes funcionales pueden llegar a provocar serias Un punto importante a considerar es que algunos xenobióticos o
incapacidades o una alta mortalidad entre los fetos, al igual que las metabolitos pueden quedar atrapados en el feto, ya que el pH en la
anormalidades morfológicas. circulación fetal es más bajo. Debido a esto, algunas sustancias básicas
144
pueden ionizarse y volverse más polares, impidiendo su difusión hacia el 8.4.6. Relación de la dosis teratogénica y DL50 para la madre
exterior de la placenta lo que finaliza en acumulación. Algunos Uno de los aspectos importantes que hay que señalar es que la dosis de
transportadores de Fase III, como la glicoproteína P y las proteínas un agente teratógeno para producir su efecto es mucho menor a aquella
asociadas a resistencia a fármacos, ayudan a minimizar la exposición dosis que le pueda producir a la madre alguna molestia que la pueda
3
del feto a los xenobióticos. alertar y evitar su exposición o consumo. Esto se ilustra con la sustancia
Después de que los xenobióticos atraviesan la placenta, se 5-fluorodesoxiuridina. En algunos casos se logra percatar del daño
encuentran disponibles para el metabolismo hepático fetal. Los sistemas cuando el embrión ha muerto porque rebasó su dosis letal embrionaria.
enzimáticos de biotransformación en el feto se detectan entre las
primeras 5 y 6 semanas de gestación, y sus actividades se incrementan 8.4.7. Cambios fisiológicos en la mujer embarazada
entre la semana 12 y 14, aunque dicha actividad es menor en relación a Al estudiar el comportamiento de los diversos compuestos sometidos a
la de los adultos. Es necesario mencionar que algunas isoenzimas del un proceso de investigación, es necesario tener presente que durante el
3
CYP450 se expresan también en el tejido placentario. embarazo se presentan algunas alteraciones fisiológicas en
comparación con las mujeres que no se encuentran en ese estado.
Dichas alteraciones pueden llegar a modificar los parámetros
toxocinéticos observados y generalizados para un determinado
3
xenobiótico. Las alteraciones referidas se manifiestan como:
- Disminución del vaciamiento gástrico.
- Incremento del peristaltismo intestinal.
- Incremento en el volumen plasmático.
- Disminución del hematocrito.
- Incremento del agua corporal.
- Incremento de la grasa corporal.
- Disminución de albúmina plasmática.
- Disminución de la unión a proteínas.
- Deficiencia de ácido fólico.
Figura 8.6. La placenta en el paso de teratógenos hacia el feto. - Incremento del flujo plasmático renal.
- Incremento de filtración glomerular.
145
- Inducción o inhibición de reacciones, tanto de Fase I (CYP450) humano incluyen: antimetabolitos, fármacos, productos químicos, y
3
como de Fase II (UDP-glucoronosiltransferasa). contaminantes ambientales. En la Tabla 8.5 se enlistan algunas
sustancias con un alto potencial teratogénico en seres humanos.
Estas alteraciones fisiológicas van a influir en los parámetros
Tabla 8.5. Sustancias con alto potencial teratogénico en seres humanos.
toxocinéticos de algunos xenobióticos como son: cambios en la
absorción, en el tiempo de vida media (t½), en los volúmenes de Xenobiótico Malformación
distribución y en la eliminación como se ilustra a continuación. Esto Talidomida (sedante e Focomelia

hipnótico)
obliga a ajustar las dosis de algunos fármacos o aditivos (cafeína) que
Andrógenos Masculinización
llegaran a consumirse durante el embarazo. Antagonistas de folato Efectos múltiples
(metotrexato)
Dietilestilbestrol Adenosis vaginal
Tabla 8.4. Valores de t1/2 de varios fármacos durante el embarazo. 4
(anticonceptivo)
Semanas de gestación
Metilmercurio Lesión en SNC
Xenobiótico 10 20 30 40 Yoduros inorgánicos Bocio congénito
Ampicilina 36 45 57 68 Etanol Síndrome de alcoholismo fetal
Cafeína 2 8 16 32 Fenitoina (anticonvulsivo) Labio leporino, paladares
Furosemida 1 9 20 29 hendidos, microcefalia, hipoplasia
Meperidina (analgésico, sedante) 32 27 21 16 de dedos
Agentes alquilantes (sulfato Efectos múltiples
de dimetilo)
Compuestos de tiourea Bocio congénito
8.5. Agentes teratógenos para el ser humano (antitiroideas: carbimazol)
Warfarina (anticoagulante) Defectos en la nariz
A pesar del esfuerzo que se realiza en los procesos de investigación de Tetraciclinas Manchas en los dientes
moléculas destinadas al consumo humano, ha sido difícil establecer el Bifenilos policlorados Múltiples (bebes con cola)
Ácido 13-cis-retinoico Hidroencéfalo
potencial teratogénico de las mismas. Los compuestos con actividad Ácido valproico Defectos en el tubo neural
teratogénica que se conocen es porque ya han ocasionado este efecto (antiepiléptico)
Penicilamina (agente Piel arrugada
en los embriones humanos. quelante)
Aminoglucósidos Daño al octavo nervio craneal
8.5.1. Sustancias que causan teratogénesis en el ser humano (antibiótico)
Entre los xenobióticos que han sido reportados como inductores de

malformaciones en pruebas de animales de laboratorio y en el ser
146
Además, las radiaciones ionizantes, ciertos factores genéticos,

mutaciones cromosómicas y desórdenes hormonales son conocidos
como causas de malformaciones estructurales, crecimiento retardado,
defectos funcionales y abortos espontáneos.
A pesar de la lista mencionada, la mayoría de los efectos
teratogénicos en humanos no han sido del todo elucidados.
Uno de los compuestos que se ha estudiado para tratar de
elucidar los mecanismos de acción con los cuales ocasiona cambios
teratogénicos es la cocaína. Se ha informado que provoca daños en el
desarrollo del ser humano como se muestra en la Figura 8.7.5 El efecto
de la cocaína se produce principalmente por su influencia sobre los
receptores dopaminérgicos en el Sistema Nervioso Central y Sistema
Nervioso Periférico. Produce problemas fisiológicos, en el desarrollo, y
problemas conductuales en los infantes cuyas madres consumieron
cocaína durante la gestación; sin embargo, los efectos se confunden
normalmente debido al uso concomitante de otras drogas como
marihuana y factores como tiempo, dosis y ruta de administración.6
La mayoría de las mujeres toman medicamentos durante el
embarazo, ya sean prescritos o de venta libre. La prescripción durante
este periodo es complicada debido a los cambios fisiológicos tanto en el
feto como en la madre que obligan a una evaluación adecuada del
riesgo-beneficio. Las decisiones en cuanto a la prescripción deben
considerar la condición de salud materna, los cambios fisiológicos en la
madre durante este periodo que derivan en cambios farmacocinéticos y
farmacodinámicos, el perfil de seguridad de la medicación y la etapa del
desarrollo en la cual se encuentre el producto (periodo embrionario o
Figura 8.7. Efectos adversos de la cocaína sobre el feto. 5
fetal).
147
Es importante señalar que, en ocasiones, es mayor el riesgo de no Tabla 8.7. Sustancias a considerar durante el embarazo.
Hacia el embarazo Primeros meses de Últimos meses de
tomar la medicación y dejar una condición médica sin tratamiento que
embarazo embarazo
tomarla. Una condición médica que no está controlada puede poner en Evitar Evitar Evitar
riesgo tanto a la madre como al producto; por ejemplo, las convulsiones Etanol Co-trimoxazol Aspirina (grandes dosis)
Hormonas Metronidazol Co-trimoxazol
tónico-clónicas que produce la epilepsia que además de estar asociadas esteroidales (especialmente con
con la muerte materna, se vinculan también con bajos coeficientes defieciencias en G6PD)
Yoduro Antidepresivos Dextropropoxifeno
intelectuales. Por lo que es necesario balancear el posible daño de tricíclicos
tomar la medicación y el riesgo de no tomarla. En la mayoría de los Estreptomicina Ácido retinoico Sulfonamidas
Tetraciclina
casos, se recomienda cambiar la medicación por opciones más Warfanina
seguras.3 En las Tablas 8.6 y 8.7 se muestran algunos ejemplos de Usar con cuidado Usar con cuidado
Anticonvulsivante Antitiroideos (derivados de
fármacos que pueden producir teratogénesis en diferentes periodos del tiouracilos)
embarazo, así como en los recién nacidos. Aspirina Benzodiazepinas
Barbitúricos Hipoglucemiantes orales
Gentamicina Antidepresivos tricíclicos
Tabla 8.6. Fármacos que producen efectos adversos perinatales. Kanamicina
Fármaco Efectos
Quinina Trombocitopenia
Diuréticos tiazidas Trombocitopenia, muerte perinatal
8.5.2. Clasificación de los fármacos de acuerdo con su riesgo
Heroína, morfina Depresión respiratoria, muerte del
neonato teratogénico
Mepivacaína (anestésico Bradicardia fetal, depresión neonatal
Se han desarrollado múltiples clasificaciones para los fármacos en
local)
Cloranfenicol Síndrome gris, muerte neonatal función del riesgo que tienen para producir teratogénesis. La
Nitrofurantoina Hiperbilirubinemia
clasificación más usada es la de la Food and Drug Administration (FDA)
Sulfonamidas Hiperbilirubinemia
Análogos de vitamina K Hiperbilirubinemia en la que los fármacos se dividen en cinco grupos (A, B, C, D, X).3 La
Reserpina Bloqueo nasal
Tabla 8.8 indica las características de cada una de estas categorías y
algunos ejemplos.
148
Tabla 8.8. Clasificación de fármacos para embarazos de acuerdo con la FDA. Sin embargo, esta clasificación tiene como desventaja que se interpreta
como un riesgo progresivo de la categoría A a la X, siendo esto una
Categoría Descripción Ejemplos
interpretación incorrecta, ya que las categorías C, D y X no están
A Estudios adecuados y bien controlados en Doxilamina, basadas únicamente en el riesgo teratogénico, sino en el balanceo del
mujeres embarazadas no han demostrado Ácido fólico
riesgo-beneficio, por lo que pueden tener el mismo riesgo teratogénico.
evidencia de riesgo durante los primeros tres
meses de embarazo y tampoco en meses Por otra parte, es importante mencionar que muchas de ellas
posteriores.
están fundamentadas en ensayos en animales. Debido a estas
B Se han realizado estudios no adecuados o Diclofenaco, desventajas en la clasificación, el 30 de junio de 2015 entró en vigor en
que no están bien controlados en mujeres Penicilina Estados Unidos la conocida como “regla final”, que describe el nuevo
embarazadas, pero estudios empleando
animales de laboratorio no han demostrado formato en el que se debe presentar la información teratogénica en tres
riesgo, o bien, estudios en animales de
nuevas secciones: embarazo, lactancia y potencial de riesgo
laboratorio han encontrado riesgo, pero este
no ha sido confirmado por estudios reproductivo para hombres y mujeres. El nuevo formato exige
adecuados en mujeres embarazadas.
especificar las evidencias y conclusiones que se tienen indicando, en
C No se han realizado estudios adecuados y Salbutamol, secciones independientes, aquellas que surgen de ensayos en animales
bien controlados en mujeres embarazadas, Ramapril,
pero estudios en animales han demostrado Pednisolona, y las que provienen de información en nuestra especie.7 Dado que esta
un efecto dañino en el feto, o bien, no se Trimetoprim regla es muy reciente, seguramente aún encontraremos información
han realizado estudios ni en animales ni en
mujeres. basada en la clasificación anterior.
SE RECOMIENDA PRECAUCIÓN, pero
el beneficio de la medicación es aún de
mayor peso que el riesgo.
Bibliografía
D Existe clara evidencia DE RIESGO EN Diazepam,
FETOS HUMANOS. Se deben evaluar los Fenitoína, 1. Wells, P. G. et al. Molecular and biochemical mechanisms in
beneficios si la mujer tiene una condición Atenolol
teratogenesis involving reactive oxygen species. Toxicol. Appl.
seria que no puede tratarse efectivamente
por un fármaco más seguro. Pharmacol. 207, 1-12 (2005).
X Clara evidencia de que la medicación Metotrexato, 2. Wells, P. G. et al. Oxidative damage in chemical teratogenesis.
CAUSA ANORMALIDADES EN EL FETO. Talidomida, Mutation 396, 65-78 (1997).
El riesgo es mayor que los beneficios para Simvastatin
las mujeres que están o pueden llegar a 3. Freyer, A. M. Drug-prescribing challenges during pregnancy.
estar embarazadas. Obstet. Gynaecol. Reprod. Med. 18, 180-186 (2008).
149
4. Matthew J. Ellenhorn y D.G. Barreloux. Medical Toxicology :

Diagnosis and Treatment of Human Poisoning. Elsevier, (1988).
5. Volpe, J. J. Effect of cocaine use on the fetus. N. Engl. J. Med.
327, 399-407 (1992).
6. Askin, D. F. & Diehl-Jones, B. Cocaine: effects of in utero
exposure on the fetus and neonate. J. Perinat. Neonatal Nurs.
14, 83-102 (2001).
7. Pregnancy, Lactation, and Reproductive Potential: Labeling for
Human Prescription Drug and Biological Products - Content and
Format Guidance for Industry. (2015).
8. James G. Wilson and F. Clarke Fraser. Handbook of Teratology.
Plenum Press, (1977).
150
Capítulo 9. Toxicología de metales 9.1. Introducción

Francisco Hernández-Luis, María Elena Bravo-Gómez, Sandra María La Química de la vida es la Química de los elementos ligeros, es
Centeno-Llanos, Perla Carolina Castañeda-López, Circe Mouret- decir, metales y no metales con número atómico menor a 35, sólo
yodo, molibdeno y estaño son elementos pesados esenciales para la
vida. Los elementos inorgánicos juegan un papel crucial en los
procesos biológicos y biomédicos.1 Existen 11 elementos constantes
Contenido en todos los sistemas biológicos, el 99% de ellos son C, H, O y N; el
9.1. Introducción ....................................................................... 151
0.9% corresponde a Na, K, Ca, Mg, P, S, Cl; y finalmente, el 0.1%
9.2. Aspectos sobre la emisión y exposición a los metales ...... 152
9.3. Consideraciones toxocinéticas y toxodinámicas................ 153 restante corresponde a 10 elementos necesarios en la mayoría de
9.4. Defensas biológicas contra la toxicidad de metales .......... 155 las especies: Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn, Mo, B, Si, Se; y siete
9.5. El plomo ............................................................................. 156
necesarios en sólo unas cuantas especies: V, Cr, F, I, As, Br, Sn.2
9.5.1. Factores de exposición…………………………………..156
9.5.2. Aspectos toxocinéticos…………………………………..158 La vida seleccionó elementos de prácticamente todos los
9.5.3. Aspectos toxodinámicos…………..……………………..160 grupos y sub-grupos de la tabla periódica, exceptuando las familias IIIA,
9.6. El mercurio ......................................................................... 163
IVA y gases inertes, razón por la cual están asociadas todo tipo de
9.6.1. Formas químicas del mercurio y fuentes exposición....163
9.6.2. Toxocinética del mercurio……………………..…………164 propiedades químicas con los procesos biológicos, según los límites
9.6.3. Toxodinámica del mercurio……………………...………165 impuestos por el medio. Cabe recordar que los procesos químicos
9.7. El arsénico ......................................................................... 166
9.7.1. Aspectos de exposición…………………...…………….167 involucrados en la vida toman lugar en medio acuoso, por lo cual, los
9.7.2. Aspectos toxocinéticos …………………………...…….169 elementos que la conforman y sus compuestos deben ser estables en
9.7.3. Aspectos toxodinámicos…………...……………………170 agua a temperatura y pH biológicos. La disciplina que estudia y elucida
Bibliografía ................................................................................ 169
los mecanismos a través de los cuales los iones metálicos (por lo
general, metales de transición) intervienen en los procesos biológicos
En este capítulo se presentan las fuentes principales de exposición a los (naturales, tóxicos o terapéuticos) se denomina Química bioinorgánica.1
metales pesados, así como sus aspectos generales de toxocinética, Fundamentalmente, todos los elementos que hemos
toxodinamia y los procesos biológicos para su destoxificación. Se mencionado fueron seleccionados en función de su abundancia y
muestran los casos particulares del plomo, el arsénico y el mercurio. disponibilidad en el medio ambiente. Estos dos puntos son muy
importantes para entender su toxicidad, ya que (como sabemos) ésta
depende de la dosis; debido a que estos elementos se encuentran en
151
Capítulo 9. Toxicología de metales Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM.
los sistemas biológicos en concentraciones muy pequeñas y actividad biológica. Un buen ejemplo de la importancia de la especiación
controladas, se toleran sólo dosis limitadas. es el selenio, el cual es un elemento esencial; no obstante, algunos de
Una conclusión que parece obvia en este punto es que la sus compuestos son extremadamente tóxicos (ejemplo H2Se).
toxicidad de un elemento dependa entonces de su esencialidad y las
concentraciones a las cuales se presente en sistemas biológicos; sin
embargo, esta deducción es incorrecta. La toxicidad de un elemento no
depende solamente de su esencialidad; por ejemplo, el papel biológico
del cromo está rodeado de controversia.2 En la actualidad, se sabe que
los compuestos de Cr (VI) se encuentran reconocidos como
carcinógenos clase I para el humano; en contraste, la mayoría de los
nutriólogos señalan al Cr (III) como un micronutriente esencial, el cual
actúa como activador de insulina; no obstante, esta opinión es discutible
ya que hasta la fecha ninguna biomolécula dependiente de Cr (III), como
Figura 9.1. Diagrama de Bertrand.3
enzimas o cofactores, se ha descrito aún.2
Debido a que los requerimos en pequeñas concentraciones
pueden provocar efectos tóxicos. De hecho, todos estos compuestos
metálicos son tóxicos; sin embargo, dependiendo de la dosis, algunos 9.2. Aspectos sobre la emisión y exposición a los metales
de estos metales son cruciales para la vida, ya sea como elementos Por su amplia distribución en el medio ambiente y sus numerosos usos
traza, o bien, presentes en un fármaco. Es por eso que no resulta útil en diversos procesos industriales, los metales se consideran como
describir a los elementos como “tóxicos” y “no tóxicos” ya que, incluso sustancias de riesgo para los seres humanos. Los metales difieren de
aquellos descritos como “compuestos o elementos tóxicos” pueden ser otros agentes tóxicos en que no son creados ni destruidos por los seres
tolerados a bajas dosis, e incluso, pueden presentar efectos terapéuticos humanos; siempre han estado presentes en el planeta. Sin embargo, el
dentro de un rango de concentraciones estrecho; mientras que los uso de estas sustancias y el riesgo de exposición a ellas por las
elementos esenciales pueden convertirse en tóxicos a altas dosis necesidades de la vida actual, las convierte en peligrosas para la salud.4
(Figura 9.1). Por otra parte, el mismo elemento puede ser benéfico o Los diversos caminos que siguen de forma natural en la biosfera
nocivo según la especiación o la forma química en que se presente, la los elementos metálicos, después de ser emitidos por actividades
naturaleza química de la molécula o ion es crucial y determina su humanas y fenómenos naturales, se presentan en la Figura 9.2.4
152
Aunque el riesgo de exposición ocupacional siempre se debe

considerar, en la actualidad su importancia cuantitativa ha disminuido,
ya que muchas empresas que utilizan metales en sus procesos han
tomado las medidas adecuadas para la protección del personal que en
ellas labora. Por otro lado, el riesgo de exposición por los estilos de vida,
adquiere mayor relevancia por el interés del efecto a largo plazo que los
metales ocasionen en la salud de los individuos. Por ejemplo, las
personas que fuman están mayormente expuestas al Cd (II) presente en
el humo de los cigarrillos. La ingestión de alcohol puede alterar el
consumo de elementos esenciales presentes en la dieta, tales como el
Ca (II), que influye en la disminución tóxica del Pb (II) y el Cd (II). La
principal exposición a agentes metálicos en niños es a través de los
Figura 9.2. Rutas que siguen los metales en la naturaleza. alimentos, ya que éstos consumen una mayor cantidad de calorías por
La emisión de los metales se lleva a cabo por dos fuentes principales: kilogramo de peso en relación a los adultos; además, presentan una
las derivadas de las actividades humanas y las que resultan de los tendencia de mayor absorción gastrointestinal de los metales.
fenómenos naturales. Por lo que respecta a las alteraciones bioquímicas, muchos de
Algunos de los aspectos generales que deben tomarse en los metales ejercen sus efectos tóxicos al sustituir a metales esenciales
cuenta al tratar de entender los efectos dañinos de los metales son: que participan como cofactores en las reacciones bioquímicas. Ejemplos
a) La contribución de las actividades humanas para incrementar la específicos se mencionarán más adelante en este capítulo.
cantidad de metales en el aire, agua, suelos y alimentos.

b) El riesgo de exposición ocupacional, las costumbres y hábitos de los 9.3. Consideraciones toxocinéticas y toxodinámicas
individuos (estilos de vida). La toxicología ocupacional o laboral ha La velocidad de absorción de los metales pesados, en general, es
disminuido la incidencia de casos de intoxicación. dependiente de su naturaleza física y química. Los metales se pueden
c) La alteración de las formas de participación bioquímicas de los presentar en sus formas elementales, unidos a iones inorgánicos o a
elementos metálicos esenciales en los procesos naturales. ligantes orgánicos. La forma elemental y las sales se absorben como
resultado de su similitud con los nutrientes metálicos del organismo, la
153
similitud con sustancias esenciales se conoce con el nombre de Aunque los síntomas por efecto tóxico de metales puede variar
5
biomimetismo. ampliamente a nivel fisiológico, los mecanismos por los cuales estos
Existen al menos dos mecanismos diferentes de ingreso de los eventos se desencadenan se pueden agrupar en los siguientes:6
iones metálicos a través de los intestinos humanos. En el primer caso, a. Unión a biomoléculas y bloqueo de la actividad enzimática. Los
se encuentra el transporte de absorción del Fe (II). En este sistema se aminoácidos serina-OH, cisteína-SH e histidina-N, con frecuencia,
ha demostrado que el Co (II) o el Mn (II) compiten con el Fe (II) para ser forman parte de los sitios activos de las enzimas. En este sentido, el
transportados. Aunque la diferencia en el tamaño del Co (II) o Mn (II) Hg (II) se une con fuerza a la cisteína-SH, bloqueando la actividad
con el Fe (II) no es muy grande, presentan diferentes afinidades por el enzimática.
acarreador. En segundo lugar, se encuentra el transporte del Ca (II), en b. Desplazamiento de iones metálicos esenciales para la actividad
donde van a competir para ingresar el Cd (II), Hg (II) y el Pb (II) debido a biológica de biomoléculas. Cuando este fenómeno ocurre, por lo
6
sus características de tamaño y carga eléctrica. general, la biomolécula pierde sus propiedades de actividad
Un aspecto importante que ocurre dentro del organismo y que biológica.
podría influir en la selectividad del efecto tóxico de los metales, se debe c. Modificación de la conformación activa de las biomoléculas, en
a su comportamiento frente a reacciones de oxidación biológica. En este especial enzimas y polinucleótidos. Estos cambios en su
rubro señalaremos el ejemplo del Fe (II) y el Co (II). Una vez que estos conformación se llevan a cabo por enlaces de coordinación de los
dos metales han sido absorbidos mediante transporte activo en el metales con la biomolécula.
intestino, pasan a la corriente sanguínea de la vena porta; en este sitio d. Alteración de la integridad estructural de las biomembranas. Los iones
van a ser transportados por una proteína llamada transferrina. Para que metálicos se pueden unir a la carga negativa de los fosfolípidos de
ocurra la unión a la proteína, ambos metales necesitan oxidarse, vía la membrana, alterando sus características de permeabilidad.
participación de la enzima ferroxidasa; el Co (II) no es sustrato para la e. Modificación de la actividad biológica de algunos compuestos
oxidación y en consecuencia no se puede unir a la transferrina. orgánicos. Por ejemplo, el Cd (II) y el Pb (II) parecen potenciar la
Las formas orgánicas de los metales son más liposolubles que actividad de toxinas producidas por bacterias, al bloquear las
las formas inorgánicas y se pueden absorber bien sin necesidad de enzimas que degradan a estos compuestos tóxicos.
6
sistemas de transporte especiales. Las formas liposolubles logran f. Unión con aniones endógenos, en particular PO4-3. Esto provoca una
mayores concentraciones en áreas de alto contenido lipídico, tales como disminución en su concentración o un desplazamiento de cationes
el sistema nervioso central (SNC). esenciales. Por ejemplo, el Pb (II) puede bajar las concentraciones
154
de los iones fosfatos del citoplasma celular o puede reemplazar al Ca (II), Hg (II) y Ag (I), se asume que esta proteína actúa como un
(II) de los depósitos óseos. mecanismo de defensa, al secuestrar a los iones antes mencionados
y a otros más, evitando que puedan actuar sobre otras biomoléculas
El Cd (II), Hg (II), Cu (I), Ag (I) Au (I), Cu (II) y Ni (II) pueden desplazar al del organismo. A pesar de lo anterior, su actividad no está exenta de
Zn (II) de algunas proteínas. Una enzima que requiere del Zn (II) es la problemas, uno de los cuales se manifiesta con la estabilidad del
ADN polimerasa. En este contexto, se atribuye el efecto de necrosis complejo MT-Cd a nivel renal; este complejo se descompone rápido,
testicular del Cd (II) al desplazar al Zn (II) de la ADN polimerasa. Otro probablemente por la disminución del valor de pH, para liberar Cd
ejemplo de este mismo caso lo constituye el efecto carcinógeno del Ni (II), que daña al túbulo proximal.
(II). Debido a su tamaño diferente, el Ni (II) parece incrementar la d. Selenio. La presencia de este elemento puede actuar como
probabilidad de que se presenten secuencias erróneas en el material mecanismo de defensa, ya que a nivel de laboratorio se ha
genético. encontrado que esta sustancia puede proteger de la necrosis de
testículo provocado por el Cd (II); asimismo, ha mostrado actividad
protectora contra la destrucción de ovarios, placenta y efectos
9.4. Defensas biológicas contra la toxicidad de metales
teratogénicos de este mismo ion metálico.
a. Tolerancia. Muchos elementos metálicos pueden ser tolerados a e. Cuerpos de inclusión. Una estructura de defensa granular,
ciertas concentraciones. El grado de tolerancia se debe al denominada cuerpos de inclusión de plomo (LIB = Lead Inclusion
organismo, su forma de vida y el elemento de que se trate. Body), fue descubierta en el núcleo de células renales y hepáticas de
b. Secreción de mucosidad. Este mecanismo se encuentra niños intoxicados por este metal. Las proteínas de LIB tienen un alto
principalmente en pescados. La mucosidad está constituida de contenido de ácido aspártico, ácido glutámico, glicina, cisteína y
polisacáridos aniónicos, tales como el sulfato de condriotina, triptófano. Se ha sugerido que la presencia de estos cuerpos de
ascofilán y fucoidan. Estos compuestos contienen grupos inclusión sirve como un mecanismo de defensa contra el plomo.
carboxilatos y sulfatos a los cuales se unen los cationes metálicos. f. Conversión en formas de fácil excreción. En este aspecto podemos
c. Metalotioneínas (MT). Son proteínas de bajo peso molecular (6000 a citar a la reacción de metilación como un mecanismo de defensa, en
7000 D), ricas en cisteína. Se unen a iones, como son, Zn (II), Cd (II), el caso del arsénico, a través de la S-adenosilmetionina, ya que el
Hg (II). Las MT son ampliamente distribuidas en muchos organismos, (CH3)4As+ es fácilmente eliminado del organismo. Uno de los
desde bacterias y hongos hasta plantas y mamíferos. Ya que se ha órganos que con más frecuencia es afectado por la intoxicación de
demostrado que la síntesis de MT es inducida por iones Cd (II), Zn metales son los riñones. Los metales pueden causar nefrotoxicidad
155
en varias formas. Algunos forman complejos o quelatos con ligantes 9.5. El plomo
orgánicos, por ejemplo, el mercurio se une a grupos sulfhidrilos. 9.5.1. Factores de exposición
Otros sustituyen a metales endógenos alterando las funciones El plomo es uno de los agentes tóxicos más antiguos que se conocen.
fisiológicas; por ejemplo, el plomo puede sustituir al Ca (II), las sales Su toxicidad fue descrita desde el tiempo de los romanos. En la
de arsénico al fosfato. Algunos otros interfieren con los sistemas de actualidad, a pesar de los esfuerzos realizados, constituye uno de los
transporte o reabsorción renal. problemas de salud pública de nuestro país. La industrialización y la
Los metales ingresan a las células del túbulo proximal por gasolina han incrementado la cantidad de plomo en el medio ambiente y
endocitosis. Una vez dentro, el metal es liberado por degradación de en el cuerpo humano. En la Ciudad de México, en la décadas de los
los lisosomas. Bajas dosis de ciertos metales provocan la salida de setenta y ochenta, se estimó un depósito ambiental de 15 000 toneladas
glucosa y aminoácidos (acidosis tubular renal), asociado con un métricas de plomo provenientes de la combustión de la gasolina NOVA.
incremento en la diuresis. Si estos daños se hacen permanentes, El plomo está presente en algunos artículos cerámicos como jarras y
entonces ocurre la necrosis (muerte de tejido) tubular renal que platos.7 En casas antiguas se encuentran tuberías de plomo que
puede llevar a fallas renales graves, con elevación de urea en sangre contaminan el agua, así como la pintura de sus paredes contienen
y finalmente la muerte. La necrosis también puede ser provocada por carbonato de plomo (blanco) y óxido de plomo (rojo), lo que provoca
una combinación de isquemia (detención de la circulación provocada toxicidad crónica por dicho elemento, sobre todo en niños. Otras fuentes
por vasoconstricción) y una acción citotóxica directa (Figura 9.3). de contaminación del plomo son los acumuladores, juguetes de plomo,
cenizas y humos de maderas pintadas, desechos de joyerías. Sin
Dosis Efecto bioquímico Muerte celular Regeneración
embargo, la exposición no ocupacional ha disminuido notablemente en
Compensación los últimos años. Los trabajadores de fundiciones de plomo y fábrica de
Enfermedad Disminución de Daño irreversible
por
crónica la función renal Pérdida de nefronas acumuladores presentan el máximo potencial de exposición.
hiperfiltración
En la actualidad se sabe que la mayor fuente de ingreso del
Figura 9.3. Efectos de la exposición del riñón a xenobióticos.
plomo en el organismo es por la vía oral.8 El plomo que ingresa por esta
vía proviene de diferentes fuentes como se presenta en la Figura 9.4.
156
plomo en el aire La cerámica vidriada a baja temperatura libera plomo al contacto con
alimentos. En 1995, se seleccionaron 27 vasijas de barro vidriado
depósito depósito depósito y (cocción ≈990°C) procedentes de los estados de Oaxaca (Sta. María
polvo captación
agua suelos Atzompa), México (Metepec, Tecomatepec), Puebla (Amozoc, Barrio de
inhalación
almacenada la Luz, San Jerónimo Ocotitlán, Aquixtla) y Tlaxcala (Tzompantepec,
agua superficial inhalación
plantas Españita, Trinidad Tenexyecac) para determinar la liberación de plomo
y profunda
inhalación bajo condiciones de “curado ácido”. A cada una de las piezas se les
organismos
animales
acuáticos adicionó una solución de ácido acético al 3% por un lapso de 24 h a
ingestión ingestión ingestión ingestión ingestión ingestión temperatura ambiente. Las concentraciones de plomo en las soluciones
(alimentos) (agua) (hábito mano-boca (alimentos) (alimentos)
en niños)
se determinaron mediante espectrofotometría de absorción atómica. Los
resultados obtenidos se muestran en la siguiente tabla.10
organismo humano
Tabla 9.2. Presencia de plomo (ppm) en recipientes de barro

Figura 9.4. Rutas de ingreso del plomo al organismo. después de lavarlos con ácido.*10
En un estudio realizado en la República Mexicana en 1986, se Días de lavado
‡
determinaron las concentraciones de plomo en cabellos de niños de Procedencia n 1 2 3 4 exceso
Oaxaca 2 4239.90 1913.32 1941.87 1037.75 148.25
medios urbanos y rurales. En la Tabla 9.1 se muestran los resultados
Puebla 9 731.06 905.61 841.06 640.49 91.50
obtenidos.
México 4 663.38 327.86 244.73 560.18 80.02
Tlaxcala 12 668.35 258.39 2237.87 849.34 121.33
Tabla 9.1. Exposición al plomo de niños mexicanos ‡
*Ácido acético al 3% durante 24 h. Razón de exceso = plomo observado/plomo
de diferentes medios urbanos.9 permitido (6.99 ppm); con base en el resultado del cuarto lavado.
a b c
Grupo 0–13 mg de Pb 14–30 mg de Pb >30 mg de Pb En ningún caso el total del plomo en los recipientes se liberó bajo
I 60% 35% 5% condiciones ácidas. Por lo que el proceso de “curado” en estas
II 50% 25% 25%
III 80% 20% condiciones no resuelve el problema de riesgo de exposición a este
IV 100%
metal. En este sentido, hace falta la evaluación de otros procesos de
V 20% 13.3% 60.7%
mg de Pb por g de cabello. Grupos: I: México, D.F. (norte); II: Puebla, Puebla; “curado” con ajo, manteca o soluciones básicas. Algo importante que
III: Tepeaca, Puebla; IV: Matamoros, Coahuila; V: Torreón, Coahuila y Gómez
Palacio, Durango. resalta en el uso cotidiano de recipientes de barro es que en ellos se
a b c
Exposición normal, Exposición elevada, Exposición excesiva.
157
almacenan chiles en vinagre o depositan caldos picantes, que ayudan a de los tejidos. La absorción gastrointestinal varía con la edad: los
liberar el plomo presente en estos recipientes. En la actualidad se adultos absorben alrededor del 10-15% del plomo ingerido, mientras que
recomienda sustituir el plomo por el boro para los procesos de vidriado; los niños absorben hasta un 50%. Como se ha mencionado
con esto se abatirán los niveles del plomo en este tipo de materiales. En anteriormente, el Pb (II) y el Ca (II) compiten por el mismo mecanismo
la Tabla 9.3 se presenta el análisis del contenido de plomo en algunos de transporte a nivel gastrointestinal, ya que se presenta una relación
suplementos alimenticios de productos comercializados en Hermosillo, recíproca entre el calcio de la dieta y cantidad del plomo absorbido.
Sonora. Asimismo, la deficiencia de hierro y una dieta rica en lípidos y vitamina D
incrementa la absorción del plomo.
Tabla 9.3. Contenido de plomo en algunos suplementos alimenticios En el tracto respiratorio se ha observado que las partículas de
de productos comercializados en Hermosillo.11
plomo logran atravesar la membrana basal de los alvéolos. El daño
producido a las mucosas por el hábito de fumar facilita el paso del plomo
Código Plomo Ingreso de plomo diario
(µg/g peso seco) (µg/día) hacia la sangre. Se ha estimado que una concentración de 1 a 2 µg/m3
N-SE 3.04 3.04
de Pb (II) en el aire inhalado determina una concentración de 1 a 2
U-SD 6.16 11.09
µg/dL en la corriente sanguínea. Las partículas que no se absorben van
X-SA 66.32 198.96
a constituir depósitos en el sistema respiratorio, los cuales son
W-SE 8.32 23.24
eliminados por los macrófagos.
(USA)
Se ha estimado una absorción diaria de plomo que oscila entre
El consumo de estos productos llega a propiciar otro elemento de riesgo de
exposición a este metal. 0.15 a 0.30 mg, para los habitantes del medio urbano. De esta cantidad,
N-SE: polivitamínico con Damiana, polen, ginseng, ginkgo biloba.
U-SD: L-carnitina, soya.
el mayor porcentaje del plomo absorbido proviene de los alimentos y en
X-SA: polivitamínico, proteinato de calcio. segundo lugar del aire. Después que el plomo se ha absorbido, se
W-SE: Damiana, carnitina, polivitamínico.
distribuye en los tejidos blandos, como el hígado y los riñones. Luego, el
plomo es redistribuido y se deposita mayoritariamente en los huesos,
9.5.2. Aspectos toxocinéticos
dientes y cabellos. Con el tiempo, en el hueso se encuentra el 95% de la
Las vías principales de absorción del plomo son el tracto gastrointestinal
carga metálica ingerida. La sangre total es un biomarcador para evaluar
y el sistema respiratorio, en menor proporción se presenta un ingreso a
la exposición reciente al plomo en un individuo, pero no sirve como un
través de la piel. La absorción del plomo depende de factores propios
indicador de la exposición crónica (Figura 9.5).12
del organismo, tales como la edad, el estado fisiológico y la integridad
158
demasiado lento para proteger a los tejidos blandos durante la

alimentos
ingestión tracto gastrointestinal heces acumulación rápida.
y/o agua (85-90% de
lo ingerido)
absorción hígado ** El t½ en los huesos se ha estimado entre 20 a 30 años. La
10-15% (adultos)
piel sudor, pelo,
50% (niños) uñas (8%) concentración de plomo en hueso es un biomarcador de exposición,
glándulas saliva. leche
sangre tanto de dosis interna como de dosis biológica efectiva para sistemas
huesos 92-94% (adultos)
(eritrocitos) depósito 70-75% (niños) como el óseo. Por otra parte, es un indicador que revela una exposición
92-94% de
lo absorbido músculos
cerebro
crónica, a diferencia de la concentración sanguínea que indica una
absorción riñones orina (75% de exposición aguda.
30-50% (adultos)
* lo excretado)
mayor en niños La fisiología del hueso es compleja, ya que diferentes tipos de
tracto respiratorio aire
aire inhalación exhalado huesos tienen distintas tasas de crecimiento, mineralización y densidad
* Puede deglutirse por movimiento ciliar hasta un 40% del plomo inhalado. final. Se conoce como hueso cortical a aquel que tiene
** Implica secreciones gastrointestinales incluyendo la bilis.
predominantemente este tipo de tejido óseo (cortical) y cuyos ejes
Figura 9.5. Aspectos toxocinéticos del plomo.
longitudinales coinciden con las líneas de mayor esfuerzo; este hueso es
más denso y mineralizado. El hueso trabecular está compuesto en su
En el ser humano, el plomo se elimina por vía renal y la concentración
mayoría de tejido óseo de tipo esponjoso, en el cual el hueso laminar se
en orina es directamente proporcional a la concentración plasmática. Sin
dispone en forma de trabéculas y, por ello, es menos denso que el
embargo, se filtra muy poco de este metal por las nefronas, ya que el
cortical. La concentración y la vida media del plomo no parecen ser
plomo sanguíneo mayoritariamente se encuentra en los eritrocitos. Este
iguales en hueso trabecular y cortical, algunos trabajos sugieren que hay
elemento también se excreta por la leche y el sudor, y se deposita en el
una mayor movilidad del plomo en los primeros.
cabello y las uñas. La vida media del metal en la sangre es de 1 a 2
Una de las técnicas para medir la cantidad de plomo en hueso
meses. Si la ingesta diaria de plomo es de 0.6 mg, no se presentan
es la de rayos X-fluorescentes (XRF). El principio de esta técnica no
síntomas de toxicidad en el transcurso de la vida. No obstante, el tiempo
invasiva es la utilización de una radiación gamma de bajo nivel para
para acumular cantidades tóxicas se acorta en forma desproporcionada
provocar la emisión de fotones fluorescentes del área anatómica de
a medida que se incrementa la cantidad ingerida. Por ejemplo, una
interés. Los fotones son detectados y caracterizados, según su longitud
ingesta diaria de 2.5 mg de plomo requiere casi cuatro años para que se
de onda, y los datos obtenidos procesados mediante programas
acumule una carga tóxica, mientras que sólo se necesitan unos pocos
computacionales. Se considera que la exposición a la radiación equivale
meses cuando se ingieren 3.5 mg por día, ya que el depósito óseo es
a estar diez minutos al sol.
159
pierna presenta es generalmente en niños que por accidente fueron expuestos

fuente detector a este metal. Los signos y síntomas de intoxicación crónica por plomo
peroné rayos X de rayos
tibia
incidentes reciben el nombre de saturnismo. Esta sintomatología se manifiesta en
seis niveles:
rayos X
fluorescentes
§ Gastrointestinal
§ Neuromuscular
procesador § Sistema Nervioso Central
de señal
§ Hematológico
computadora
§ Renal
Figura 9.6. Elementos de la técnica de rayos X fluorescentes (XRF).
§ Sistema cardiovascular
9.5.3. Aspectos toxodinámicos

9.5.3.1. A nivel gastrointestinal
El mecanismo tóxico del plomo está dado por las siguientes
En el tracto gastrointestinal produce fuertes dolores intestinales,
modalidades:8
conocidos como cólicos saturninos. Se atribuyen efectos como pérdida
a) Competir con metales esenciales, especialmente el Ca (II) y
del apetito, constipación, diarrea. Aparece una línea oscura (gris
el Zn (II).
azulado) de 1 mm de espesor en las encías llamada ribete de Burton, la
b) Interaccionar con grupos sulfhidrilos (grupos tioles) de las
cual se forma por depósitos de sulfuro de plomo.
proteínas.
c) Alterar el transporte de iones esenciales.
9.5.3.2. A nivel neuromuscular
d) Propiciar la generación de estrés oxidante.
En el sistema neuromuscular produce parálisis y síntomas menos
e) Alterar la homeostasis del Ca (II).
severos como debilidad muscular y fatiga. El plomo es particularmente
f) Estimular la liberación del Ca (II) de las mitocondrias.
tóxico al sistema nervioso, sobre todo en niños. En adultos la exposición
g) Abrir los poros de las mitocondrias.
produce neuropatía (afección nerviosa) periférica. Los primeros
h) Alterar el metabolismo de lípidos.
síntomas en niños incluyen anorexia (falta de apetito), cólicos
i) Movilizar al plomo de sus sitios de reserva.
abdominales, vómitos. Si la exposición se vuelve continua, los niños son
más susceptibles que los adultos a desarrollar encefalopatías que se
Los efectos tóxicos del plomo se pueden presentar por una exposición
aguda o crónica. En el caso de la primera es poco frecuente y cuando se
160
manifiestan por irritabilidad, ataques y coma, aproximadamente, un 30% hemo es muy sensible, ya que dos enzimas de su biosíntesis resultan
presentan secuelas permanentes. particularmente inhibidas por el plomo, lo que produce anemia (Tabla 9.4).9
Los daños a las actividades enzimáticas se detectan antes que
9.5.3.3. A nivel del SNC
la anemia se manifieste. El efecto a nivel del sistema hematopoyético es
Las bajas concentraciones de plomo pueden ser de riesgo especial para
de los más importantes en el ser humano. Las alteraciones se
los niños. Daños neurológicos son detectados por índices bajos del
manifiestan por la aparición en sangre y orina de los precursores
coeficiente intelectual y problemas de aprendizaje a concentraciones de
metabólicos de la ruta afectada y una palidez acentuada (anemia). Las
10 µg/dL de sangre. Asimismo, se presentan problemas de
mujeres y los niños son más sensibles a nivel del sistema
hiperactividad, trastornos convulsivos, pérdidas de habilidades motoras,
hematopoyético que los hombres.
e incluso del habla. Aunque hay que señalar también la coparticipación
de otros factores tales como la nutrición y las determinantes genéticas
9.5.3.5. A nivel renal
del individuo.
El plomo provoca lesiones a nivel de túbulos, las cuales se caracterizan
El plomo se puede acumular en el sistema nervioso inmaduro
por aminoaciduria generalizada, hipofosfatemia relativa y glucosuria.
porque puede atravesar la barrera hematoencefálica más fácil en niños,
Existe un síndrome denominado nefropatía saturnina crónica, que
y su sistema nervioso puede ser incapaz de removerlo. Los adultos
comprende alteraciones tales como fibrosis peritubular, retracción renal,
expuestos al plomo, generalmente, presentan dolores de cabeza y
arteriosclerosis, atrofia glomerular y degeneración de los vasos que
mareos. En los pacientes intoxicados con plomo, las concentraciones en
pueden desembocar en insuficiencia renal.
sangre son los mejores indicadores de exposiciones recientes. Cuando
la concentración se eleva, el daño al encéfalo se incrementa, aunque los
9.5.3.6. A nivel cardiovascular
síntomas sólo comienzan cuando la concentración alcanza un valor
El efecto que ha sido más destacado a este nivel es la hipertensión
aproximado de 50 µg/dL. En adultos, las concentraciones aceptables de
arterial provocada por altas concentraciones de plomo en sangre.
plomo son valores menores a 10 µg/dL.
Existen dudas sobre si los efectos de incremento en la permeabilidad
vascular, aumento de la arterioesclerosis y la hipertensión arterial llegan
9.5.3.4. A nivel hematológico
a ser provocados por el efecto directo del plomo sobre los vasos
El plomo se une a grupos sulfhidrilos (grupos tioles) y otros sitios activos
sanguíneos o son consecuencias del daño ocasionado por este metal a
de muchas enzimas, provocando su inactivación. Aunque sus efectos
nivel de los riñones.
son difusos, ciertas manifestaciones predominan. La síntesis del grupo
161
Tabla 9.4. Efectos del plomo en la síntesis del grupo HEMO Tabla 9.5. Efectos del plomo en adultos a diferentes concentraciones
9 sanguíneas.9
y sus expresiones bioquímicas.
µgPb/dL de Efectos adversos
sangre
10 Inhibición de la enzima deshidratasa del ácido
δ-aminolevulínico (AAL-D)
20 Elevación de protoporfirinas eritrocitarias en mujeres
Elevación de protoporfirinas eritrocitarias en hombres
30 Disminución en la conducción de nervios periféricos
Respuestas electrofisiológicas alteradas del SNC
Elevación de la presión arterial en hombres mayores
de 40 años
Incremento del ácido δ-aminolevulínico en suero y orina
Aumento de las protoporfirinas eritrocitarias
Disfunción nerviosa periférica
40 Alteración de la función visual-motriz (coordinación ojo-mano)
Alteraciones en el sueño, memoria
Nefropatías
Síntomas gastrointestinales
Alteraciones espermáticas
Disminución en la producción de hemoglobina
Alteraciones morfológicas de los eritrocitos
Parestesias en miembros superiores
50 Debilidad de los miembros inferiores
Fatiga, olvido, distracción
Subencefalopatía
AAL: ácido δ-aminolevulínico; AAL-S: ácido δ-aminolevulínico sintetasa; AAL-D: ácido Alteración de la función testicular
δ-aminolevulínico deshidratasa
Acortamiento de la vida de los hematíes
60 Aumento exponencial de protoporfirinas eritrocitarias
En la actualidad se disponen de algunos parámetros establecidos que Efectos reproductivos en la mujer
nos indican el nivel de daño que el plomo puede provocar según su 80 Anemia
concentración sanguínea. Estos valores se presentan en la Tabla. 9.5. 100 Encefalopatía grave
Los niveles de concentración de plomo encontrados Nefropatía crónica
normalmente en la población varían entre 10–35 µg/ dL, con una media
de 17.0 µg/dL.9
162
9.6. El mercurio
Tabla 9.7. Valores de concentración de mercurio y sus efectos.4
9.6.1. Formas químicas del mercurio y fuentes de exposición 3
Aire, mg/m Sangre, µg/100 mL* Orina, µg/L* Efectos
Deben distinguirse tres formas químicas principales de este metal: 0.05 3.5 150 Síntomas no
específicos
mercurio elemental (vapor de mercurio), sales de mercurio y mercuriales 0.1-0.2 7-14 300-600 Temblores
orgánicos. *Valores a un año de exposición.
Tabla 9.6. Riesgo de exposición al mercurio

Por lo que respecta a las sales del mercurio, este metal se va a
Mercurio Sales inorgánicas de Organomercuriales
mercurio presentar en dos formas de oxidación, Hg (I) monovalente y Hg (II)
Odontólogos Desinfectantes Bactericidas divalente. El cloruro mercuroso, HgCl es también conocido como
Mineros y Joyeros Explosivos Fungicidas calomel, aunque hoy se le utiliza como electrodo en trabajos de Química
Fotógrafos Taxidermistas Farmacéuticos
Ceramistas Laboratoristas Técnicas histológicas Analítica o Fisicoquímica, fue usado hace algunos años como
Refinerías de mercurio Fabricantes de vinilos Pesticidas
antiséptico en cremas cutáneas o como diurético. Las sales de mercurio,
Fabricantes de pinturas Curtidores Embalsamadores
Procesadores de papel Procesamiento de pieles Recolectores de granos en general, se utilizan en algunas empresas, por lo que se han
Fabricantes de
Fabricantes de tintas Agricultores convertido en un serio problema cuando estas instituciones tiran dichas
amalgamas
Procesamiento de plata Insecticidas sales a los cuerpos de agua (ríos, lagos).
Procesamiento de
bronce Los organomercuriales son derivados de este metal en donde
Productos con cloro se presentan enlaces covalentes con compuestos de carbono. Dentro de
Termómetros
Aux. Odontología este grupo destacan los alquilmercurios por su peligrosidad, siendo el
metilmercurio el representante más estudiado por su uso como
La exposición al vapor de mercurio en la población en general se da por
fungicida. El riesgo de exposición más frecuente a esta forma mercurial
la alimentación o por la presencia de amalgamas dentales. La
lo constituye el consumo de semillas mal lavadas y contaminadas por
exposición ocupacional se presenta en los trabajadores de empresas
este tipo de compuestos o el consumo de carnes de animales
electrónicas, productoras de cloroálcalis, plásticos, fungicidas, de
alimentados con dichas semillas o harinas y por pescados que viven en
elaboración de amalgamas dentales o de termómetros. Uno de los
lagos, ríos y mares contaminados por estos organomercuriales. Uno de
aspectos interesantes, actualmente, es la exposición crónica a estos
los ejemplos más citados en la bibliografía, sobre la intoxicación con
vapores en personas que laboran en lugares poco ventilados, como
este tipo de compuestos, es la enfermedad de Minamata, que se
algunos laboratorios, en donde los termómetros se rompen y el mercurio
presentó en el Japón, por el consumo de pescado crudo con altos
elemental se volatiliza y es inhalado de forma inadvertida.
163
niveles de metilmercurio formado por la biotransformación del mercurio patente una mayor concentración de mercurio en saliva y heces en
inorgánico en los ríos y lagos arrojados como desecho de varias comparación con individuos que no tienen amalgamas dentales. Estas
empresas (Figura 9.7). concentraciones de mercurio permanecen por 14 días en saliva después
de la remoción de las amalgamas. Se ha establecido que sólo entre el 5
9.6.2. Toxocinética del mercurio
y el 15% del mercurio elemental ingerido se absorbe y el resto es
Los vapores del mercurio se absorben de forma muy escasa en el tracto
excretado con las heces fecales.
gastrointestinal. Sin embargo, su inhalación alcanza rápidamente al
Aunque sólo un 10% de las sales inorgánicas del mercurio que
pulmón, en donde se oxida a la forma divalente por la acción de la
son solubles en agua se van a absorber por el tracto gastrointestinal,
catalasa eritrocitaria. Dado que una cantidad de vapor de mercurio no se
una cantidad adicional se va a quedar unida a las mucosas intestinales.
oxida, alcanza a llegar al cerebro.
Una vez que atraviesan el tracto gastrointestinal, las sales de mercurio
se acumulan primordialmente en los riñones. Las sales de mercurio no
logran atravesar la barrera hematoencefálica ni la placenta. Se eliminan
por la orina y las heces fecales, presentando una vida media de
alrededor de 60 días. En animales de laboratorio la pérdida fecal es la
de mayor importancia cuantitativa.
Los compuestos organomercuriales se absorben con mayor
facilidad y de forma casi completa por su mayor liposolubilidad. Por esta
HgCH3
Hg2+ misma característica, logran atravesar la barrera hematoencefálica y la
placenta. Su distribución es más uniforme en todo el organismo. Sin
embargo, una porción importante se encuentra en los eritrocitos, aunque
esta cantidad depende del tipo de compuesto organomercurial, por
ejemplo, para el metilmercurio, la relación eritrocito-plasma es de 20:1.
Figura 9.7. Bioacumulación y biomagnificación del mercurio. La unión carbono-mercurio en los arilmercurios es débil, por lo que la
En la actualidad, es materia de controversia las consecuencias toxicidad de estos compuestos se debe a la forma inorgánica divalente
toxicológicas del mercurio liberado de las amalgamas dentales. En del metal. En los seres humanos la excreción del metilmercurio se
personas con más de seis amalgamas se ha reportado una media de 2.3 realiza principalmente por las heces; su vida media en el hombre es de
µg/g en tejidos distantes de la cavidad oral. Asimismo, se ha hecho alrededor de 65 días.
164
9.6.3. Toxodinámica del mercurio intersticial (inflamación crónica del tejido intersticial del pulmón
El mercurio reacciona fácilmente con los átomos de azufre, por lo que caracterizada por la presencia de células plasmáticas en los alvéolos).
sus efectos tóxicos importantes se van a tratar de explicar con base en Si la persona logra recuperarse, se pueden presentar secuelas de
esta propiedad química. Por ejemplo, la unión del mercurio divalente a fibrosis intersticial residual.
los sulfhidrilos para formar los mercapéptidos del tipo: X-Hg-SR y Hg Las exposiciones crónicas a los vapores de mercurio provocan
(SR)2. La afinidad del mercurio por los tioles dio origen a las el síndrome vegetativo asténico, que es un trastorno neurológico, al cual
investigaciones para encontrar la forma de mejor tratamiento a su hay que agregar taquicardia (aceleración de los latidos cardiacos),
intoxicación mediante el uso de agentes quelantes como el dimercaprol gingivitis (inflamación de las encías), bocio (aumento del volumen de la
y la penicilamina, cuyos mecanismos se basan en la unión mercurio-tiol. glándula tiroides) y cambios hematológicos. En estudios clínicos se
El mercurio también puede enlazarse a otros ligandos biológicos como demostró una mayor captación de yodo radiactivo por las glándulas
son los fosfatos, carboxilatos, amidas y aminas. tiroides. Si la exposición se hace muy prolongada, se pueden presentar
cambios psicológicos como depresión, irritabilidad, confusión,
SH O enrojecimiento corporal incontrolado (eretismo). La salivación intensa y
H3C
la gingivitis son los síntomas característicos de la intoxicación crónica
OH OH
H3C
HS por vapores de mercurio.
SH
NH2 La intoxicación aguda por las sales de mercurio provoca la
precipitación de proteínas de las mucosas, lo que va a producir un color
penicilamina dimercaprol
grisáceo en boca, faringe e intestino, acompañado de dolor intenso y
vómito. El vómito no debe ser inhibido ya que ayuda a eliminar mercurio
En las distintas acciones tóxicas del mercurio hay que considerar de que se encuentra en el tracto gastrointestinal. La toxicidad renal se
forma integral las características químicas que afectan su solubilidad presenta como un efecto grave, ya que se produce necrosis tubular que
acuosa, la disociación y la afinidad relativa de varios receptores lleva a la oliguria (secreción escasa de orina). En las exposiciones
celulares, así como su distribución y eliminación. prolongadas predominan las lesiones en los glomérulos, provocadas por
La exposición breve a los vapores del mercurio produce el daño a la membrana basal del glomérulo y por el efecto tardío de
síntomas como escalofríos, sabor metálico, náuseas, debilidad, diarrea, complejos inmunes. El complejo de síntomas de acrodinia se presenta
tos y una sensación de opresión torácica. La toxicidad pulmonar puede como un eritema de las extremidades, el tórax y la cara, con fotofobia,
comprometer la función respiratoria provocada por una neumonía
165
anorexia, dolor, taquicardia y constipación o diarrea. Este conjunto de señala que en áreas no cercanas a la fundición de cobre, la
síntomas se cree que resulta de reacciones de hipersensibilidad. concentración de arsénico no debe exceder a 0.1 mg/m3. El agua para
Los organomercuriales provocan daños principalmente de tipo beber, normalmente, contiene unos cuantos microgramos por litro de
neurológico que consisten en alteraciones en el campo visual, ataxia este metal. La mayor fuente ocupacional de exposición al arsénico se
(desórdenes en la función del sistema nervioso), neurastenia (debilidad puede presentar en la fabricación de pesticidas, fertilizantes y
del sistema nervioso), pérdida de la audición, temblor muscular, aleaciones.
alteraciones en el movimiento corporal; con exposiciones prolongadas, En México se ha investigado la presencia de arsénico en
parálisis y muerte. diversos alimentos, a manera de ejemplo, en la Tabla 9.8 se muestran
los resultados obtenidos en la determinación de la cantidad de arsénico
9.7. El arsénico
presente en las tortillas,13 alimento base de la dieta de este país, en
El arsénico es difícil de hallar en su forma elemental como responsable
varias ciudades de diferentes estados.
de acciones nocivas. Por otro lado, se encuentran dificultades en sus
Tabla 9.8. Arsénico presente en tortillas.13
estudios de detección por la existencia de muchos compuestos que
Ciudad Estado As, µg/g
presentan a este elemento, producto de su Química tan compleja. Cuernavaca Morelos 0.044
Puede ser trivalente o pentavalente y está distribuido ampliamente en la Culiacán Sinaloa 0.056
Guadalajara Jalisco 0.045
naturaleza. La forma más común del arsénico trivalente la encontramos Irapuato Guanajuato 0.059
Manzanillo Colima 0.047
en el trióxido de arsénico, arsenito de sodio, tricloruro de arsénico; la
Oaxaca Oaxaca 0.029
forma trivalente es considerada la más tóxica. La forma pentavalente se Puerto Jalisco 0.043
Vallarta
encuentra en el pentóxido de arsénico, el ácido arsénico, arsenatos de Tepic Nayarit 0.054
plomo y arsenatos de calcio. Cuando el arsénico forma compuestos Tlacolula Oaxaca 0.033
Uruapan Michoacán 0.040
organometálicos, se encuentra en forma trivalente o pentavalente, tales
como el ácido arsanílico o como compuestos metálicos. Aunque las En la Tabla 9.9 se muestran los datos en otros alimentos. De los datos
formas inorgánicas son las de mayor importancia toxicológica. obtenidos, afortunadamente, en ningún caso se encontraron valores que
pudiesen ocasionar intoxicación aguda por este elemento, queda
9.7.1. Aspectos de exposición
pendiente establecer si dichas cantidades podrían tener alguna
Los arsénicos inorgánicos son liberados dentro del medio ambiente por
implicación de intoxicación crónica. En la Tabla 9.10 se presentan los
actividades desarrolladas en la fundición del plomo, cinc o cobre, o en la
manufactura de vidrio. La agencia de protección ambiental (EPA),
166
límites permitidos en varios países para el arsénico en agua que se Tabla 9.10. Límites permitidos de arsénico en agua de varios países.15
considera potable.
País/Organización [As] µg/L agua
Tabla 9.9. Arsénico presente en diversos alimentos.14 OMS 10
Alimento Cantidad ingerida Los Ángeles, Lago Moreno, EEUU 10

por día Durango Coahuila Unión Europea 10
Frijoles 400 g 12 µg/día 244 µg/día Chile 50
Tortillas 221 g 19.9 µg/día 75.1 µg/día India 10
Huevos 52 g 1.35 µg/día 7.8 µg/día México 50
Papas 112 g 2 µg/día 17.9 µg/día
Salsa 26 g 0.8 µg/día 9.6 µg/día Los indicadores para la exposición al arsénico son la sangre, la orina y
Sopa de pasta 99 g 2.5 µg/día 39.6 µg/día los cabellos, como se muestra en la Tabla 9.11.
Té o café 0.26 L 15.3 µg/L 412.1 µg/L
Agua 1.69 L 18.9 µg/L 497.3 µg/L
Tabla 9.11. Espécimen para la excreción de arsénico.
Espécimen Normal Exposición excesiva

Debido al tiempo de vida corto del arsénico, los niveles sanguíneos de
Sangre < 10 µg/L > 50 µg/L
este elemento son útiles sólo por pocos días después de la exposición Orina* < 20 µg/L > 50 µg/L
aguda, pero no son muy útiles en exposiciones crónicas. Las Cabellos < 1 µg/L
* Es el mejor indicador para exposición reciente.
evaluaciones en los cabellos suelen ser de utilidad para las exposiciones
crónicas, aunque deben tomarse en cuenta las posibles 9.7.2. Aspectos toxocinéticos
contaminaciones externas de este material que podría arrojar resultados El arsénico presente en el aire es el trióxido de arsénico. Su deposición
erróneos del arsénico cuantificado. en los pulmones depende del tamaño y la forma de la partícula. Diversas
investigaciones llevadas a cabo con ratones han mostrado que cerca del
6 y el 9% de arsénico trivalente o pentavalente, administrado por vía
oral, es eliminado por las heces fecales, lo que indica su casi completa
absorción desde el tracto gastrointestinal. La excreción del arsénico
absorbido es principalmente por vía renal. El tiempo de vida media
biológica del arsénico trivalente o pentavalente ingerido de forma oral es
167
de aproximadamente 10 h, cerca del 80% se excreta en un plazo de tres sulfhidrilos presentes en las células, tales como glutatión, se reduce aún
días. a pH neutro.
El arsénico puede ser excretado por la descamación de la
As(V) + 2GSH GSSG + As(III)
epidermis y por el sudor. Se concentra en la uñas y los cabellos. El pH neutro
arsénico en la uñas produce las líneas de Mee (líneas blancas
transversales) que aparecen después de 6 semanas de presentarse los La excreción biliar del arsénico trivalente puede ser alterada por la
primeros indicios de toxicidad. El tiempo de exposición puede ser presencia de grupos sulfhidrilos no protéicos tales como el glutatión, al
estimado al medir la distancias de estas líneas hacia la base de la uña, formarse un complejo con esta especie.
considerando que ésta tiene un crecimiento de 0.1 mm/día. El arsénico As(III) + 3GSH As(SG)3
en el cabello puede reflejar las exposiciones pasadas, aunque se debe
distinguir el absorbido del depositado de manera externa. 9.7.3. Aspectos toxodinámicos
El metabolismo del arsénico implica primordialmente reacciones Sobre el efecto tóxico del arsénico, se conoce que es la forma trivalente
de metilación; el dimetilarsénico es el producto principal. Al parecer, la la que mayores trastornos nocivos provoca sobre las enzimas que
formación de este compuesto forma parte del proceso de presentan grupos sulfhidrilos, en relación a la forma pentavalente. Uno
desintoxicación, ya que rápido es eliminado del organismo. Sin de los puntos de alteración es la inhibición de sistema piruvato
embargo, la exposición a arsénico inorgánico puede exceder la deshidrogenasa (Figura 9.8), ya que utiliza al ácido lipóico para formar
capacidad de su biotransformación. Se ha reportado que la reducción de un complejo.
arsénico pentavalente a trivalente ocurre in vivo. El mecanismo O O
ácido lipóico
bioquímico para la metilación in vivo es mediante un proceso de H3C
OH
+ CoA H3C S
CoA
+ CO 2
O piruvato deshidrogenasa
reducción; esto ha sido propuesto por los experimentos realizados con Mg (II), NAD+, FAD
hepatocitos de ratas, que reducen al arsénico trióxido, pero no al
arsénico pentavalente. El arsénico trivalente sufre una oxidación fácil en O
medio acuoso debidamente oxigenado. El pH es un factor que influye en HS (CH 2)4
OH HS
los procesos de oxidación acuoso. El arsénico trivalente, en medio
HS HS OH
alcalino, se oxida más rápido que en medio ácido. La forma
pentavalente es relativamente estable en aire y a pH neutro o alcalino; ácido lipóico dimercaprol
pero fácil se reduce a pH ácido. En presencia de moléculas con grupos
168
Figura 9.8. Inhibición del sistema piruvato deshidrogenasa. elevación de las enzimas hepáticas en el torrente sanguíneo. Se han
Este sistema es particularmente sensible a la inhibición por arsénico
observado trastornos vasculares periféricos, que se conocen como el
trivalente debido a la formación de un anillo de seis miembros con los
fenómeno de Raynaud, y puede progresar a gangrena en las
grupos sulfhidrilos (-SH) del ácido lipoico. El dimercaprol compite para
extremidades inferiores (la enfermedad del pie negro).
reaccionar con el arsénico y forma un complejo estable que evite la
Aunque la EPA ha clasificado al arsénico como una sustancia
acción tóxica de este metal.
carcinógena en la piel, ha sido difícil de confirmarlo experimentalmente
Además, el As (III) puede sustituir al fosfato y desacoplar la
con modelos animales. Los estudios sobre actividad mutagénica del
fosforilación oxidativa. Como se ha señalado, al reaccionar el arsénico
arsénico han sido negativos.
con el glutatión, puede ser ésta una vía de desintoxicación; por lo tanto,
si la célula presenta una baja concentración de glutatión, los efectos Bibliografía
tóxicos del arsénico pueden ser de mayor extensión.
1. Biological Chemistry of the Elements. (Oxford: Oxford University
Algunas de las alteraciones que se presentan sobre las Press, 2001).
enzimas, son de naturaleza reversible, ya que pueden recobrar su 2. Levina, A. & Lay, P. A. Mechanistic studies of relevance to the
actividad al adicionar sustancias monotioles tales como glutatión. Para biological activities of chromium. Coord. Chem. Rev. 249, 281-
298 (2005).
las enzimas que presentan uno o dos grupos sulfhidrilos, se utilizan
3. Bertrand, G. On the role of trace substances in agriculture. in 8th
sustancias ditioles, como el 2,3-dimercaptopropanol (BAL) para provocar Int Congr Appl Chem 30-40 (1912).
el mismo efecto. 4. Cassarett and Doull's Toxicology. (Mc Graw Hill, New York,
2013).
La exposición crónica al arsénico inorgánico provoca
5. Bridges, C. C. & Zalups, R. K. Molecular and ionic mimicry and
neurotoxicidad, tanto en el sistema nervioso central como en el the transport of toxic metals. Toxicol. Appl. Pharmacol. 204, 274-
periférico. Esta neurotoxicidad, generalmente, se empieza a manifestar 308 (2005).
6. Ochiai, E. Toxicity of heavy metals and biological defense. J.
con cambios sensoriales, parestesias, debilidad muscular. La neuropatía
Chem. Educ. 72, 479-484 (1995).
periférica puede ser progresiva e involucra tanto a las neuronas motoras 7. Pocock, S. J., Smith, M. & Baghurst, P. Environmental lead and
como a las sensoriales. children’s intelligence: a systematic review of the epidemiological
El daño hepático es característico de una exposición a largo evidence. BMJ 309, 1189-1197 (1994).
8. Ahamed, M. & Siddiqui, M. K. J. Environmental lead toxicity and
plazo, al inicio se presenta como ictericia, pero puede progresar hasta nutritional factors. Clin. Nutr. 26, 400-408 (2007).
manifestarse como cirrosis o ascitis (acumulación de líquido en el 9. Corey, G. & Galvao, L. A. C. Plomo. Serie vigilancia 8. (1989).
vientre). La toxicidad a las células del parénquima hepático provoca una
169
10. Torres-Sánchez, L.; López-Carrillo, L. & Ríos, C. Eliminación del

plomo por curado casero. Salud Pública México 41, S106-S108
(1999).
11. García-Rico, L.; Leyva-Pérez, J. & Jara-Marini, M. E. Content
and daily intake of copper, zinc, lead, cadmium, and mercury
from dietary supplements in Mexico. Food Chem. Toxicol. 45,
1599-1605 (2007).
12. Sanín, L. H., Sc, D., González-Cossío, T., Ph, D. & Romieu, I.
Acumulación de plomo en hueso y sus efectos en la salud. Salud
Pública Mex. 40, (1998).
13. Huato, S. J.; Trejo, L. P.; Jiménez, C. & Ogura, T. Arsenic, lead
amd other heavy metals in lime and tortilla in México. Rev. la
Soc. Química México 40, 210-214 (1998).
14. Del Razo, L. M. et al. Arsenic levels in cooked food and
assessment of adult dietary intake of arsenic in the Region
Lagunera, Mexico. Food Chem. Toxicol. 40, 1423-1431 (2002).
15. Mohan, D.; Pittman Jr, Ch. U. Arsenic removal from
water/wastewater using adsorbents—A critical review. Journal of
Hazardous Materials 142, 1–53 (2007).
170
Capítulo 10. Toxicología preclínica 10.1 Introducción

El descubrimiento de un nuevo fármaco es un proceso de largo plazo
Francisco Hernández-Luis, María Elena Bravo-Gómez, Sandra María dividido en cuatro etapas: inicia con el cernimiento de un fármaco
Centeno-Llanos, Perla Carolina Castañeda-López, Circe Mouret- candidato y la identificación de un compuesto líder; a esto le sigue la
evaluación de la seguridad y toxicidad en la etapa preclínica, lo que
Contenido eventualmente ayuda al diseño de los ensayos clínicos y, por último, la
10.1 Introducción ………………………………………………….171
10.2 Etapas del desarrollo de un fármaco ………………………172 aprobación regulatoria del fármaco antes de ser comercializado. Este
10.3. Estudios de seguridad preclínica necesarios para proceso en Estados Unidos puede tomar alrededor de 15 años antes de
conducir ensayos clínicos en humanos con productos obtener la aprobación por parte de la Administración de Alimentos y
farmaceúticos (Guía M3)…………………………………...175
10.4. Estudios de evaluación de seguridad para productos Medicamentos de Estados Unidos (FDA, por sus siglas en inglés) y que
farmaceúticos derivados de la biotecnología…………………...178 el fármaco se distribuya en el mercado.1 En el caso de México, la
10.4.1. Especificación del material de prueba……………….179
instancia equivalente es la Comisión Federal para la Protección contra
10.4.2. Evaluación preclínica de seguridad …………………179
10.4.3. Actividad biológica/farmacodinamia………………… 180 Riesgos Sanitarios (Cofepris).
10.4.4. Especie Animal / Selección del modelo…………….. 180
10.4.5. Inmunogenicidad……………………………………….181
10.4.6. Seguridad farmacológica……………………………...181 Investigación
básica
10.4.7. Evaluación de la exposición…………………………..181 10,000 moléculas
10.5. Estudios de toxicidad de dosis única……………………...182
10.6. Estudios de dosis repetida………………………………….182
10.7. Estudios de inmunotoxicidad……………………………….183 Fase preclínica
250 compuestos
10.8. Estudios de toxicidad reproductiva y del desarrollo……..183
10.9. Estudios de carcinogenicidad………………………………183
15 años
10.10. Estudios de tolerancia local……………………………….183
Ensayos clínicos Fase I Fase II Fase III
Bibliografía ………………………………………………………....183 5 compuestos
Este capítulo tiene como objetivo destacar la importancia de la

Agencia reguladora
participación de la toxicología en procesos multidisciplinarios; como 1 compuesto
su aplicación en las diversas pruebas clínicas y preclínicas realizadas

durante el desarrollo de nuevos fármacos. Asimismo, se integrarán
los conceptos estudiados en los capítulos anteriores. Figura 10.1. Etapas que involucra el desarrollo de fármacos.
171

Capítulo 10. Toxicología preclínica Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM
El proceso del desarrollo de un fármaco comienza con el cernimiento de necesario cumplir con dos condiciones: 1) validar la significancia del
cientos de moléculas y puede terminar en los casos exitosos con pocos blanco en la enfermedad que se desea tratar (ya que de lo contrario, el
o solo un fármaco aprobado por la FDA y disponible comercialmente. La cernimiento resultará inadecuado),2,3 los blancos terapéuticos
mayoría de las veces, muchas moléculas candidato que son muy seleccionados para el cernimiento deben haber sido reportados como de
potentes se quedan en alguna de las primeras etapas o fases de los relevancia biológica en la enfermedad en cuestión, y 2) tener un sistema
ensayos clínicos, debido a problemas de eficacia o toxicidad durante el de cernimiento que también sea relevante y, por tanto, permita evaluar
estudio. Por ello, es extremadamente importante evaluar a la molécula el efecto de la molécula candidato sobre el blanco biológico.1 Este
candidata de forma adecuada con respecto a su eficacia y toxicidad en sistema de cernimiento puede ser in vitro, in vivo o in silico.
un sistema de evaluación relevante, es decir, una especie adecuada Actualmente, la tecnología cernimiento de alto rendimiento permite
para observar los efectos. Estos datos servirán para diseñar la dosis ensayar una gran cantidad de moduladores biológicos contra un blanco
adecuada de inicio, el régimen y las condiciones del ensayo para los en particular.4,5
estudios clínicos en humanos.
El descubrimiento de un fármaco es una investigación 10.2.2 Optimización del líder
interdisciplinaria que involucra estudios de caracterización química y de Después del cernimiento primario, se requiere de la confirmación de la
cernimiento in vitro para la selección adecuada de la molécula actividad de la molécula candidato y debe atravesar por algunos pasos
candidata, de acuerdo con su potencia biológica antes de los estudios de optimización. La optimización es un paso crucial para confirmar la
en animales. Incluso, después de muchos años de investigación y de eficacia de los fármacos candidato contra el blanco biológico en
inversiones enormes, no existe la seguridad de que la molécula cuestión, a través de un ensayo de cernimiento primario y secundario.
seleccionada transitará a través de todas las pruebas clínicas con éxito y Éstos pueden abarcar ensayos in vitro e in vivo preliminares para
alcanzará la aprobación de las instancias correspondientes para su eficacia, toxicicidad y perfil ADME (Absorción, Distribución, Metabolismo
ingreso al mercado. y Excreción), incluyendo el análisis de la formulación (estabilidad,
impurezas e ingredientes activos).6 A la optimización le siguen los
10.2. Etapas del desarrollo de un fármaco estudios preclínicos detallados de Farmacología, toxicología (perfil
10.2.1. Cernimiento de moléculas candidato mutagénico y toxicidad animal en dos especies), junto con estudios
Este proceso inicia con el cernimiento de las moléculas en un blanco en farmacocinéticos y toxicocinéticos.
particular. Usualmente, estas moléculas están dirigidas contra un blanco
biológico específico, por lo que antes de iniciar con el cernimiento es
172

10.2.3. Estudios preclínicos fármaco, lo cual ayudará en el cálculo de una dosis inicial para los
Los estudios preclínicos incluyen una amplia batería de ensayos que estudios en humanos y que su régimen correspondiente sea seguro y
permiten conocer los efectos de una molécula en diferentes aspectos. efectivo.
En general, estos estudios preclínicos incluyen estudios de Según sea la indicación, la población a la cual va dirigida el
Farmacología (farmacocinética y farmacodinamia), toxicidad de dosis tratamiento, la duración y frecuencia del consumo del fármaco de
única, ensayos in vivo de mutagenicidad, toxicidad a dosis repetida y, acuerdo con la enfermedad, la evaluación toxicológica puede extenderse
dependiendo de la indicación, estudios crónicos o subcrónicos y a otros estudios de dosis repetida como crónicos o sub-crónicos. Si la
toxicidad reproductiva. indicación de uso para el fármaco cubre personas en edad reproductiva,
Los estudios de Farmacología preclínica miden el efecto entonces se deben realizar estudios de toxicidad reproductiva en
biológico, el rango de dosis eficaces y, sobre todo, la potencia de la animales. Basados en los resultados de las evaluaciones preclínicas
molécula optimizada. Es muy importante llevar a cabo todos los estudios (seguridad farmacológica, eficacia, ADME y perfil toxicológico) es que
farmacológicos preclínicos en especies o sistemas relevantes que los órganos regulatorios autorizan los ensayos clínicos.
guarden la mayor semejanza posible con la enfermedad que se quiere Los resultados de los ensayos preclínicos impactan
tratar. Estos estudios dan un mejor entendimiento del mecanismo de directamente en la selección de la dosis inicial en los ensayos clínicos
acción y se encuentran vinculados con los estudios farmacodinámicos. en humanos, en la identificación de los posibles efectos adversos, los
Mientras que los estudios farmacocinéticos dan una visión detallada de efectos reversibles e irreversibles, y de los biomarcadores útiles para
la distribución del fármaco en los diferentes órganos en animales; los monitorear la toxicidad durante los ensayos clínicos y, desde luego,
estudios apoyan el perfil de toxicidad y seguridad para la evaluación de impactan en el etiquetado del producto.
la molécula candidata, los cuales incluyen una batería de estudios in Actualmente, existen guías internacionales para la realización
vivo e in vitro de mutagenicidad y toxicidad animal en dos especies. de los ensayos preclínicos que proprocionan una dirección sobre las
Los estudios de dosis única pueden ayudar a determinar el acciones a realizar para cubrir todos los aspectos de seguridad y
tiempo de aclaramiento o wash out y su correlación con los signos de eficacia. Las guías no son de carácter legal, por lo tanto, su seguimiento
toxicidad, si es que se presentan. Por otra parte, la toxocinética de dosis es opcional. Sin embargo, las instancias regulatorias como Cofepris (en
repetidas ayuda a determinar el rango de dosis tolerables del área bajo el caso de México) valoran su seguimiento.
la curva (AUC) de los niveles plasmáticos. Estos resultados, Las guías más reconocidas son las emitidas por el Consejo
eventualmente, ayudarán a determinar los niveles de dosis de efectos Internacional para la Armonización de los Requisitos Técnicos para
no adversos (NOAEL) y la dosis máxima tolerada (MTD) para el Fármacos de Uso Humano (ICH, the international Council for
173

Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for productos farmaceúticos, son publicados por la FDA con el auspicio del
Human Use). Este Consejo es el único que reúne a las autoridades ICH. Las guías pretenden recomendar estándares internacionales para
regulatorias y a la industria farmaceútica para discutir los aspectos promover la armonización de los estudios de seguridad no clínicos.
científicos y técnicos del registro de fármacos. Desde su creación en Estos dos documentos son:
1990, el ICH ha evolucionado gradualmente para responder al • Guía M3. Estudios de seguridad preclínica necesarios para
incremento global del desarrollo de fármacos. Con el objetivo de conducir ensayos clínicos en humanos con productos
armonizar las diferencias entre regiones (Europa, Estados Unidos y farmaceúticos (Nonclincal Safety Studies for the Conduct of
Japón) acerca de las distintas etapas del desarrollo clínico, se Human Clinical Trials for Pharmaceuticals).7
publicaron una serie de guías que representan el consenso que existe • Guía S6. Estudios de evaluación de seguridad para productos
entre las regiones ICH, con respecto a la visión y duración de los farmaceúticos derivados de biotecnología (Preclinical Safety
estudios de seguridad no-clínica para apoyar las Fases Clínicas de los Evaluation of Biotechnology Derived Pharmaceuticals).8
productos farmacéuticos. La misión del ICH es alcanzar la mayor
armonización mundial para garantizar la seguridad, efectividad y alta A continuación, se presentan extractos de ambos documentos que
calidad de los medicamentos desarrollados y registrados de la forma pueden servir como referencia para dar una idea general de los ensayos
más eficiente posible. El ICH ha producido una serie de guías de requeridos para evaluar la seguridad de nuevas entidades químicas,
seguridad que comprenden riesgos potenciales como carcinogenicidad, antes de las fases clínicas y los casos particulares. Las guías se pueden
genotoxicidad y reprotoxicidad. encontrar en el sitio web de la FDA (http://www.fda.gov/cder/guidance) y
En México, el comité de moléculas nuevas de Cofepris toma en del sitio web del ICH (http://www.ich.org/products/guidelines/
cuenta estas recomendaciones para realizar su propia evaluación safety/article/safety-guidelines.html). El sitio web de la FDA contiene
acerca de los productos farmacéuticos que pretenden obtener además otras referencias sobre las expectativas regulatorias para el
autorización para su comercialización y uso en nuestro país. desarrollo no clínico de nuevas entidades químicas. Los temas incluyen
Para el éxito de cualquier programa de desarrollo de fármacos varios aspectos de la seguridad; por ejemplo, reproductiva,
es crítico diseñar y ejecutar estudios preclínicos. Estos estudios deben carcinogénesis y genotoxicidad; ADME (bioanalítica, farmacocinética y
evaluar de una forma confiable la seguridad de cualquier molécula toxicocinética) y seguridad farmacológica. Los objetivos primarios de la
nueva, sentar las bases para los ensayos clínicos y, finalmente, la evaluación preclínica de seguridad son:
aprobación regulatoria. Existen dos documentos guía principales que 1. Identificar una dosis inicial segura y la escalación subsecuente
directamente abordan el tema de la evaluación de seguridad de nuevos de la dosis en los esquemas de tratamiento en humanos.
174

2. Determinar los posibles órganos blanco a presentar toxicidad y como puede observarse, algunas pruebas se realizan de forma paralela
si ésta es reversible. a la fase clínica I y son necesarias para continuar en las demás fases.
3. Señalar los parámetros de seguridad (biomarcadores) para
monitorear durante el ensayo clínico.
Investigación de un nuevo fármaco
Las recomendaciones de seguridad no clínica incluyen estudios de dosis
Descubrimiento
única y repetida, de toxicidad reproductiva, de genotoxicidad, tolerancia
local y, para fármacos que están desarrollados para usarse por largos Desarrollo
periodos, se requiere evaluar el potencial carcinogénico. Otros estudios
no clínicos incluyen a la Farmacología para hacer evaluaciones de Estudios preclínicos en animales
seguridad y farmacocinética.
Estudios clínicos fase I
Esta guía aplica a las situaciones usuales durante el desarrollo
convencional de productos farmaceúticos. Los estudios en animales Pruebas clínicas
deben planearse y diseñarse con una visión científica y ética apropiada
para la molécula en cuestión. Figura 10.2. Proceso de evaluación toxicológica.
Se debe considerar que esta guía no siempre es apropiada o
relevante para productos biotecnológicos, por lo que la evaluación de 10.3. Estudios de seguridad preclínica necesarios para conducir
seguridad de los mismos se considera caso por caso, tal y como se ensayos clínicos en humanos con productos farmaceúticos (Guía M3)
describe en la Guía S6. De igual modo, aquellos productos 10.3.1 Seguridad farmacológica
farmacéuticos en desarrollo para el tratamiento de enfermedades graves Estos estudios deben realizarse antes de la exposición a humanos e
o que ponen en peligro la vida, para las cuales aún no existe terapia incluyen la evaluación de los efectos sobre las funciones vitales; por
efectiva, debe garantizarse también un acercamiento para cada uno de ejemplo, efectos cardiovasculares, en el sistema nervioso central y en el
ellos y así optimizar el tiempo de desarrollo. En esos casos, algunos sistema respiratorio. Estas evaluaciones deben realizarse de forma
estudios particulares pueden abreviarse, diferirse o incluso omitirse. adicional a los estudios de toxicidad o por separado.
La Figura 10.2 representa un esquema temporal de la etapa de
desarrollo en donde normalmente se realizan los estudios preclínicos,
175

10.3.2. Estudios de toxicocinética y farmacocinética Tabla 10.1. Duración máxima de los estudios de dosis repetida
9
Esta información se requiere antes de dar inicio a la fase clínica I. La necesarios para iniciar Fase I (Farmacología en humanos) y II
información ADME en animales permite comparar las vías metabólicas (Exploración terapeútica) en Estados Unidos.
con la de los humanos. Duración de los Duración mínima de los estudios de toxicidad a
ensayos clínicos dosis repetida
Especie murina Especie no murina
10.3.3. Estudios de toxicidad de dosis única Dosis única 2-4 semanas 2 semanas
También conocidos como toxicidad aguda, deben realizarse en al menos Hasta dos semanas 2-4 semanas 2 semanas
Hasta un mes 1 mes 1 mes
dos especies de mamíferos antes de la primera exposición en humanos. Hasta 3 meses 3 meses 3 meses
Una alternativa complementaria a este estudio se obtiene realizando un Hasta 6 meses 6 meses 6 meses
>6 meses 6 meses Crónico
escalamiento de la dosis.
Tabla 10.2. Duración de los estudios de toxicidad a dosis repetida

10.3.4. Estudios de toxicidad de dosis repetida necesarios para dar inicio a la Fase III en Estados Unidos y
La duración recomendada para este tipo de estudios, normalmente, se comercialización en todas las regiones.
relaciona con el periodo de la indicación terapeútica y la escala
Duración del ensayo Duración mínima de los estudios
propuesta para los ensayos clínicos. En principio, estos estudios de clínico de dosis repetida
Roedores No roedores
toxicidad deben realizarse en dos especies de mamíferos (una de ellas
Hasta 2 semanas 1 mes 1 mes
no murina) y su duración debe ser igual o exceder la duración de los Hasta un mes 3 meses 3 meses
ensayos clínicos, teniendo como límite la duración máxima Hasta 3 meses 6 meses 3 meses
>3 meses 6 meses Crónico
recomendada en los estudios de dosis repetida (Tablas 10.1 y 10. 2).
Bajo ciertas circunstancias, los ensayos pueden extenderse La Tabla 10.2 también refleja las recomendaciones para la
más allá de la duración recomendada, para ello es necesario analizar la comercialización en todas las regiones, excepto que se aconseja un
pertinencia caso por caso. estudio crónico en una especie distinta a los roedores para fármacos
que tendrán un uso mayor a un mes.10
10.3.5. Estudios de tolerancia local

La tolerancia local se debe estudiar en animales empleando rutas de
administración relevantes, en función de las propuestas para la
176

administración clínica. Dicha evaluación se debe realizar antes de la Tabla 10.3. Estudios requeridos de acuerdo con el tipo de individuos
exposición a humanos y debe ser parte de otros estudios de toxicidad. expuesto y condiciones para incluirlos en los ensayos clínicos.
Población Estudios requeridos y condiciones para los
ensayos clínicos
10.3.6. Estudios de genotoxicidad
Hombres Pueden incluirse en Fase I y II antes de los
Antes de la primera exposición en humanos, se requiere de los estudios de fertilidad, debido a que la
resultados de la evaluación in vitro de mutaciones y daño cromosomal. evaluación de los órganos reproductivos
masculinos se realiza en los estudios de
Si se encuentran resultados inequívocamente positivos, se deben toxicidad a dosis repetida y con esto es
realizar estudios adicionales.11 La batería estándar de estudios de suficiente. Sin embargo, son necesarios para
el inicio de los ensayos de Fase III.14,15
genotoxicidad12 debe completarse antes de iniciar los de Fase II. Mujeres sin capacidad Se pueden incluir en los ensayos clínicos sin
reproductiva estudios de toxicidad reproductiva.
(permanentemente
10.3.7. Estudios de carcinogenicidad esterilizadas o
Éstos no se requieren antes de iniciar los ensayos clínicos a menos que postmenopáusicas)
Mujeres en edad Para mujeres en edad reproductiva siempre
exista una razón de preocupación. Las condiciones relevantes para los reproductiva existe la preocupación de que exista una
estudios de carcinogenicidad se discuten en un documento del ICH.13 En exposición no intencional de un embrión o
feto antes de que esté disponible la
caso de requerirse para fármacos desarrollados para el tratamiento de información acerca de los beneficios vs los
enfermedades serias o graves, estos estudios pueden concluirse riesgos. Por lo anterior, en Estados Unidos se
incluyen sólo mujeres con control natal.
posteriores a la aprobación del mismo. Existen diferencias en cuanto al momento
para realizar estos estudios; por ejemplo, en
Japón se requiere antes de Fase I la
10.3.8. Estudios de toxicidad reproductiva evaluación de fertilidad femenina y la
Los estudios de toxicidad reproductiva14,15 se deben conducir toxicidad en el desarrollo embrio-fetal. En
Estados Unidos, se requiere antes de Fase I
sólo en caso de ser apropiados para la población que se va a exponer la evaluación de la toxicidad embrio-fetal, y
(Tabla 10.3). antes de Fase III, la evaluación de la toxicidad
en la fertilidad femenina y la toxicidad del
desarrollo embrio-fetal.
Para la comercialización en las tres regiones,
se requieren de los estudios de toxicidad en el
desarolllo pre y postnatal antes de la
aprobación.
Para incluir mujeres en edad reproductiva sin
control natal o sin prueba de embarazo
177

previa, se requiere en todas las regiones los 10.4. Estudios de evaluación de seguridad para productos
estudios de toxicidad reproductiva y toda la
farmaceúticos derivados de la biotecnología
batería estándar de estudios de
genotoxicidad.12 Los fármacos derivados de la biotecnología, conocidos como
Mujeres embarazadas Se requieren todos los estudios de toxicidad biofarmacéuticos, comenzaron a desarrollarse a principios de los años
reproductiva14,15 y la batería estándar de
estudios de genotoxicidad,12 además de los ochenta y las primeras autorizaciones se dieron más tarde, en esa
de seguridad estándar. misma década.
La Guía S6 aplica para los productos derivados de diferentes
10.3.9. Estudios suplementarios
sistemas de expresión, incluidos bacterias, levaduras, insectos, plantas
Se requieren si se identifican, durante los estudios preclínicos o clínicos,
y células mamíferas. Las indicaciones pueden incluir usos diagnósticos
hallazgos que lleven a pensar que puede existir un riesgo especial o
in vivo, terapéuticos, o bien, profilácticos. Las sustancias activas
particular.
incluyen proteínas y péptidos, sus derivados y productos de los cuales
son componentes; pueden derivarse de cultivos celulares o producirse
10.3.10. Requisitos para ensayos clínicos en poblaciones pediátricas
empleando DNA recombinante, incluyendo la producción por plantas
Antes de dar inicio se requiere, desde luego, toda la información que se
transgénicas y animales. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a:
genera antes de la exposición en humanos adultos. Adicionalmente, se
citocinas, plasminógenos activadores, factores plasmáticos
requieren ensayos adecuados de dosis repetidas, todos los estudios de
recombinantes, factores de crecimiento, proteínas fusionadas, enzimas,
toxicidad reproductiva14 y la batería estándar de genotoxicidad.12 Se
receptores, hormonas y anticuerpos monoclonales (Figura 10.3).
debe considerar la realización de estudios en animales jóvenes cuando
También puede aplicarse esta guía a vacunas con proteínas de
los datos previos en animales adultos o de seguridad en humanos
ADN recombinante, péptidos químicamente sintetizados, productos
adultos sean insuficientes. Los estudios de carcinogénesis sólo se
derivados del plasma, proteínas endógenas extraídas de tejidos
requieren si la exposición a la población pediátrica es a largo plazo,
humanos y fármacos oligonucleótidos. El documento no cubre
considerando que este esquema de tratamiento es potencialmente un
antibióticos, extractos alergénicos, heparina, vitaminas, componentes
riesgo.13
celulares de la sangre, vacunas convencionales, vacunas de DNA o
terapias celulares o génicas.
178

nucleicos contaminantes, teóricamente, podían incluir la potencial
Factores de integración en el genoma del hospedero.

crecimiento
Para productos derivados de insectos, plantas y células
mamíferas o plantas y animales transgénicos, hay riesgos adicionales
Enzimas como las infecciones virales.
Citocinas
En general, el diseño de los estudios de toxicología debe ser
comparable con el esquema de dosificación y tiempo de exposición
Biotecnológicos
propuesto para los estudios clínicos iniciales. Se debe considerar que
los cambios en la manufactura potencialmente pueden provocar
cambios importantes en el producto final. La comparabilidad del material
Anticuerpos de prueba durante el programa de desarrollo debe demostrarse cuando
Hormonas
monoclonales
se haya modificado el proceso de manufactura o se hayan realizado
otros cambios significativos en el producto o formulación. La
Figura 10.3. Ejemplos de productos biofarmacéuticos. comparabilidad puede evaluarse con base en la caracterización
bioquímica y biológica; por ejemplo, identidad, pureza, estabilidad y
10.4.1. Especificación del material de prueba potencia. En algunos casos, se pueden llegar a requerir estudios
La presencia de impurezas o contaminantes en este tipo de productos adicionales.
son potencialmente un problema de seguridad. Se prefiere que la

producción se centre en tener procesos de purificación para remover las 10.4.2. Evaluación preclínica de seguridad
impurezas y los contaminantes, en vez de establecer un programa de El abordaje convencional de los estudios de toxicidad de productos
evaluación preclínica para obtener la calificación. En todos los casos, el farmaceúticos no es completamente apropiado para los productos
producto debe estar lo suficientemente caracterizado para permitir un biofarmacéuticos, debido a las características estructurales tan diversas
diseño adecuado de los estudios de seguridad preclínica. y a que las propiedades biológicas pueden ser específicas para una
La presencia de contaminantes provenientes de las células especie en particular; por ejemplo, la inmunogenicidad o las actividades
hospederas puede provocar reacciones alérgicas y otros efectos pleiotrópicas. Esta caracterización de la toxicidad puede llevarse a cabo
inmunopatológicos. Los efectos adversos asociados con ácidos tanto in vitro como in vivo. Aquellos biofarmacéuticos que estructural y
179

farmacológicamente son comparables a un producto muy conocido en la contribuyen a la extrapolación adecuada de los hallazgos a los
práctica clínica pueden requerir estudios menos exigentes o extensivos. humanos.
Los estudios de seguridad preclínica de biotecnológicos deben Para anticuerpos monoclonales, las propiedades inmunológicas
considerar lo siguiente para su diseño: 1. selección de especies del anticuerpo deben describirse a detalle, incluyendo su especificidad
animales relevantes, 2. edad, 3. estado fisiológico, 4. forma de antigénica, la unión al complemento y cualquier reactividad no
liberación, incluyendo dosis, ruta de administración y régimen de intencional o citotoxicidad hacia tejidos humanos distintos del blanco
tratamiento, y 5. estabilidad del material de prueba bajo las condiciones terapeútico. Estos estudios de reactividad cruzada deben llevarse acabo
de uso. a través de procedimientos adecuados, empleando un rango amplio de
Se espera que los estudios de toxicidad se lleven a cabo de tejidos humanos.
acuerdo con las buenas prácticas de laboratorio; sin embargo, se
reconoce que algunos estudios son tan especializados que no 10.4.4. Especie Animal / Selección del modelo
necesariamente cumplen por completo con estas prácticas. Debido al tipo de actividad biológica en conjunto con la especificidad de
especie o tejido de muchos fármacos biotecnológicos, se utilizan
10.4.3. Actividad biológica/farmacodinamia especies que comúnmente se emplean en los estudios toxicológicos
La actividad biológica puede evaluarse usando sistemas in vitro para como son rata y perro, aunque muchas veces no es la elección
determinar cuáles efectos del producto pueden relacionarse con la adecuada. La evaluación de la seguridad debe realizarse en especies
actividad clínica. El empleo de líneas celulares o cultivos primarios que sean relevantes, es decir, aquella en la cual el material de prueba
pueden ser útiles para examinar los efectos directos sobre el fenotipo es farmacológicamente activo, debido a que expresa el receptor, o bien,
celular y la proliferación. Debido a que la actividad biológica de muchos un epítope (en el caso de los anticuerpos monoclonales). Las especies
productos biotecnológicos es específica para una o unas cuantas animales relevantes para la evaluación de anticuerpos monoclonales
especies, es importante seleccionar la especie animal relevante para los deben demostrar un perfil de reactividad cruzada, similar al de los tejidos
estudios de toxicidad. El modelo in vitro de líneas celulares, derivadas humanos.
de células de mamífero, pueden emplearse para predecir aspectos Por lo regular, la evaluación de seguridad debe incluir dos
específicos de la actividad in vivo y para evaluar cuantitativamente la especies relevantes. Sin embargo, en ciertos casos se justifica que sea
sensibilidad relativa de varias especies (incluida la especie humana). suficiente sólo una especie cuando no hay otra, o bien, cuando la
Los resultados de las pruebas in vitro y los estudios in vivo, en conjunto, actividad biológica del biofarmaceútico es bien conocida.
180

Cuando no existen especies relevantes, una opción viable puede ser el considerarse en la interpretación el efecto de la formación de
empleo de animales transgénicos que expresen el receptor humano de anticuerpos sobre los parámetros farmacocinéticos y farmacodinámicos,
interés o también puede considerarse el empleo de proteínas la incidencia o severidad de los efectos adversos, la activación del
homólogas. En años recientes, los avances en biotecnología han complemento o los hallazgos de nuevos efectos tóxicos con particular
permitido el desarrollo de modelos animales muy similares a la atención a los posibles cambios patológicos relacionados con la
enfermedad humana (knock-out(s), knock-in(s) y animales transgénicos) formación de complejos inmunes y la deposición de los mismos.
y permiten identificar la acción farmacológica del producto, la La inducción de la producción de anticuerpos en animales no es
farmacocinética, la dosimetría y, de forma muy importante, la seguridad predictiva de la potencial formación de anticuerpos en humanos, quienes
del producto. Al igual que para los farmoquímicos, se deben emplear pueden desarrollar anticuerpos contra proteínas humanizadas y,
animales de ambos sexos, excepto en casos justificados. La ruta y frecuentemente, la respuesta terapeútica persiste en su presencia. La
frecuencia de administración debe ser tan cercana como sea posible a la ocurrencia de reacciones anafilácticas severas a proteínas
que se propone para el estudio clínico. recombinantes es rara. Al respecto, los resultados de pruebas
Deben seleccionarse los niveles de dosificación para anafilácticas en cobayos se consideran de poco valor para la evaluación
proporcionar información sobre las relaciones dosis-respuesta, de rutina de estos productos.
incluyendo la dosis tóxica y el nivel de dosis donde no se observan
efectos adversos (NOAEL). Para ciertos productos con poca toxicidad 10.4.6. Seguridad farmacológica
puede que no sea posible definir una dosis máxima. En estos casos, se Es importante investigar la actividad farmacológica no deseada en
debe justificar adecuadamente la dosis seleccionada. modelos animales apropiados, por lo que es recomendable monitorear
esta actividad durante los estudios de toxicidad.
10.4.5. Inmunogenicidad
Muchos productos biotecnológicos para uso humano son inmunogénicos 10.4.7. Evaluación de la exposición
en animales. Por lo tanto, la medición de los anticuerpos asociados con Es difícil establecer guías uniformes para los estudios farmacocinéticos
la administración de este tipo de productos debe realizarse durante los para productos biotecnológicos. Se considera que son útiles los estudios
estudios de dosis repetida. La respuesta de anticuerpos debe de farmacocinética, toxicocinética y distribución en tejidos a dosis única
caracterizarse (título, número de animales que responden, neutralización o repetida en especies relevantes; sin embargo, un punto importante a
o no neutralización) y estos resultados deben correlacionar con los considerar es que los estudios de rutina que se basan en el balance de
cambios farmacológicos o toxicológicos. Específicamente debe de masa no son útiles. Las diferencias en farmacocinética entre diferentes
181

especies animales pueden tener un impacto muy importante en la 10.5. Estudios de toxicidad de dosis única
predicción de los efectos dosis-respuesta. Se debe tener en Los estudios de dosis única pueden generar datos útiles para describir la
consideración que es posible que se modifiquen los perfiles relación de la dosis con la toxicidad sistémica o local. Estos datos
farmacocinéticos debidos a mecanismos de aclaramiento inmunes. pueden emplearse para seleccionar la dosis para los estudios de dosis
Las alteraciones en el perfil farmacocinético debidas a repetidas.
mecanismos de aclaramiento mediados inmunológicamente pueden
afectar los perfiles cinéticos y la interpretación de los datos de toxicidad. 10.6. Estudios de dosis repetida
Para algunos productos, puede haber de forma inherente retrasos Para la selección de la especie animal para los estudios de dosis
significativos en la expresión de los efectos farmacodinámicos con repetidas se deben considerar aquellas especies que sean relevantes.
relación a los perfiles farmacocinéticos (por ejemplo con las citocinas) o La ruta y el régimen de dosificación (diario contra intermitente) deben
puede haber expresión prolongada de los mismos efectos con relación a reflejar cómo se empleará en el uso clínico o la exposición. Cuando sea
los niveles plasmáticos. posible, estos estudios deben incluir toxicocinética.
Los estudios farmacocinéticos deben, cuando sea posible, La duración de los estudios de dosis repetida debe basarse en
utilizar preparaciones que sean representativas de aquellas que el lapso de la exposición clínica y la indicación terapéutica.
evaluarán la toxicidad y, posteriormente, el uso clínico, además debe Generalmente, debe ser de uno a tres meses para la mayoría de los
emplearse una ruta de administración que sea relevante en los estudios fármacos biotécnológicos. Para aquellos biofármacos que se planeen
clínicos. para un empleo a corto plazo (por ejemplo siete días) y para
Una parte importante de los estudios de toxicología clásicos es enfermedades agudas que amenacen la vida, los estudios de dosis
la identificación de las rutas de biotransformación y de los metabolitos repetidas superiores a dos semanas de duración se han considerado
que se generan, ya que éstos potencialmente pueden ser tóxicos; sin como adecuados para apoyar los estudios clínicos, así como la
embargo, la consecuencia esperada del metabolismo de los productos autorización sanitaria para su venta.
biotecnológicos es la degradación a pequeños péptidos y aminoácidos Para aquellos biofarmacéuticos que se emplearán para
individuales, por lo que los estudios clásicos de biotransformación que indicaciones crónicas, los estudios de seis meses de duración se
se emplean para productos farmaceúticos no se requieren para los consideran generalmente apropiados; sin embargo, en algunos casos,
biotecnológicos. estudios por periodos más largos o más cortos pueden apoyar las
autorizaciones para comercialización. Para biofármacos de uso crónico,
182

la duración de los estudios de largo plazo debe justificarse 10.9. Estudios de carcinogenicidad
científicamente. Los bioensayos estándar de carcinogenicidad son, por lo general,
inapropiados para productos biotecnológicos; sin embargo, la evaluación
10.7. Estudios de inmunotoxicidad del potencial carcinogénico puede requerirse en casos específicos,
Un aspecto de la evaluación inmunotoxicológica incluye la evaluación según sea la duración de la dosificación en la clínica, la población que lo
del potencial de inmunogenicidad. La estrategia para evaluar la empleará y la actividad biológica del producto (por ejemplo, factores de
inmunotoxicidad requiere estudios de cernimiento seguidos de estudios crecimiento, agentes inmunosupresores, etc.). Los productos que
mecanísticos. Las evaluaciones de rutina o baterías estándar de pueden tener el potencial para inducir proliferación en células
pruebas no se recomiendan para los productos biotecnológicos. transformadas y expansión clonal, posiblemente produzcan neoplasias y
deben evaluarse con respecto a la expresión del receptor en varias
10.8. Estudios de toxicidad reproductiva y del desarrollo células humanas normales y transformadas, que son potencialmente
La necesidad de este tipo de estudios es dependiente del producto, de relevantes a la población de estudio. Tal es el caso de algunas citocinas
la indicación clínica y de la población a la cual va dirigido el tratamiento. y factores de crecimiento.
El diseño de estudios específicos y del esquema de dosificación puede
modificarse con base en datos relacionados con la especificidad de 10.10. Estudios de tolerancia local
especie, la inmunogenicidad, la actividad biológica o la vida media de Para estos estudios se debe evaluar la formulación que se pretende
eliminación. comercializar; sin embargo, en ciertos casos justificados puede ser
suficiente la evaluación de formulaciones representativas.
10.8.1. Estudios de genotoxicidad
El rango y tipo de estudios de genotoxicidad rutinarios que se realizan Bibliografía
para productos farmacéuticos no aplican para los derivados 1. Hughes, J. P., Rees, S. S., Kalindjian, S. B. & Philpott, K. L.
biotecnológicos, por tanto, no son necesarios. Los estudios en sistemas Principles of early drug discovery. British Journal of
disponibles y relevantes incluyen el desarrollo de nuevos sistemas, y Pharmacology 162, 1239-1249 (2011).
deben realizarse en aquellos casos donde haya una preocupación 2. Chen, X. P. & Du, G. H. Target validation: A door to drug
relacionada con el producto; por ejemplo, debido a la presencia de una discovery. Drug Discov. Ther. 1, 23-9 (2007).
molécula orgánica que funcione como eslabón en un producto que sea 3. Smith, C. Drug target validation: Hitting the target. Nature 422,
conjugado protéico y que por tanto pueda liberarse y biotransformarse. 341, 343, 345 passim (2003).
183

4. Macarron, R. et al. Impact of high-throughput screening. Nature 14. ICH Harmonised Tripartite Guideline (S5A) ‘Detection of Toxicity
10, 188-195 (2011). to Reproduction for Medicinal Products’.
5. Szymanski, P., Markowicz, M. & Mikiciuk-Olasik, E. Adaptation of 15. ICH Harmonised Tripartite Guideline (S5B) ‘Toxicity to Male
high-throughput screening in drug discovery-toxicological Fertility’.
screening tests. International Journal of Molecular Sciences 13,
427-452 (2012).
6. Kerns, E. H. & Di, L. Pharmaceutical profiling in drug discovery.
Drug Discovery Today 8, 316-323 (2003).
7. M3(R2); ICH, E. ICH M3(R2) - Guidance on non-clinical safety
studies for the conduct of human clinical trials and marketing
authorization for pharmaceuticals. Int. Conf. Harmon. 3, 25
(2009).
8. ICH Expert Working Group. Preclinical safety evaluation of
biotechnology-derived pharmaceuticals S6(R1). Int. Conf.
Harmon. Tech. Requir. Regist. Pharm. Hum. Use 1-23 (2011).
9. ICH Harmonised Tripartite Guideline (S3A) Note for
"Toxicokinetics: The Assessment of Systemic Exposure in
Toxicity Studies".
10. 11. ICH Topic S4 Document ‘Duration of Chronic Toxicity Testing
in Animals (Rodent and Nonrodent Toxicity Testing)’.
11. ICH Harmonised Tripartite Guideline (S2A) ‘Guidance on Specific
Aspects of Regulatory Genotoxicity Tests’.
12. ICH Topic S2B document ‘Standard Battery of Genotoxicity
Tests’.
13. ICH Harmonised Tripartite Guideline (S1A) ‘Guideline on the
Need for Carcinogenicity Studies for Pharmaceuticals’.
184

Fundamentos de Toxicología para Químicos Farmacéuticos Biólogos
es una obra editada por la Facultad de Química.
La publicación de esta obra fue posible gracias al apoyo

de la Coordinación de Comunicación,
a través del Departamento Editorial.
El cuidado de la edición estuvo a cargo de

M en C Brenda Álvarez Carreño
Diseño de portada: DG Norma Castillo Velázquez.
Publicación autorizada por el Comité Editorial

de la Facultad de Química.
Mayo de 2019

Fundamentos de Toxi QFB 2019

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Primera edición: 2017

Fecha de edición: 8 de septiembre de 2017

“Prohibida la reproducción total o parcial por cualquier medio,

Esperamos que la obra cumpla sus objetivos y sea de utilidad.

Capítulo 1. Aspectos históricos y definiciones 1.1. Aspectos históricos

básicas Mucha de la historia de la toxicología ha quedado asentada en manuscritos

mecanismos de toxicidad para entender el funcionamiento de un sistema

Aunque posteriormente se presentaron varios acontecimientos que Descriptiva Forense

Ante esta entidad se realizan los siguientes trámites relacionados con el

1.2.2. Áreas especializadas

del riesgo. de los compuestos químicos.1, 3

mando. de la toxicología con el propósito de interpretarlos adecuadamente a lo

para ser empleadas como medicamentos o ingredientes del

Las definiciones anteriores no deben tomarse en términos absolutos, ya

Xenobiótico: toda sustancia extraña al ser viviente, incluye sustancias

Figura 1.4. Comportamiento de hormesis de la sacarina.

1.4. Clasificación de los agentes tóxicos

DL50 (mg/kg de peso), (ratón)

En la Tabla 1.6 se puede apreciar que para la procaína y la nicotina,

Tabla 1.7. Influencia de la especie en la toxicidad letal de un xenobiótico.

sc: subcutáneo; ip:intraperitoneal; iv: intravenosa

Por lo que se refiere a la clasificación, según los mecanismos de acción

La tercera clasificación de los compuestos tóxicos toma en cuenta un (http://www.bvsde.ops-oms.org/bvsair/e/repindex/repi92/cdeco/titulo.html).

órgano o tejido sobre el que sus efectos dañinos son preponderantes;6

1. Klaassen, C. D., Casarett and Doull's Toxicology. The Basic Science of

1. Complejos inmunes a penicilinas, inmunoglobulinas, sulfonamidas pueden depositarse

Capítulo 2. Etapa de exposición alterar dependiendo de la ruta de ingreso de las sustancias al

Francisco Hernández-Luis, María Elena Bravo-Gómez, Sandra María

general la mayoría de los xenobióticos, en ocasiones, ésta se puede

fisiológicas o sitios anatómicos por donde los xenobióticos pueden leucemia

Dosis única: se trata de realizar una sola administración de un

Exposición crónica 2.3. Evaluación del riesgo de exposición a xenobióticos

tiempo sustancia, sino el riesgo o peligro asociado a su uso o exposición. La

que se presentan. condiciones específicas.

ii) Frecuencia de exposición el daño no ocurra bajo condiciones específicas.

xenobiótico. controlar los peligros identificados en la evaluación del riesgo.11

RfD = NOAEL / (UF) (MF) =NOAEL/100

Debido a las limitaciones de NOAEL, se ha propuesto un método

2.4.3. Biomarcadores de la susceptibilidad -Micronúcleo

biomarcadores. atmosférica mediante comparación de rangos o en relación a un nivel

contaminación o colectar para ser estudiados en laboratorio, lejanos al

Figura 2.6. Ejemplo del uso de los bioindicadores.

3.1.1. Transporte a través de las membranas biológicas

El propósito de este capítulo es que el alumno integre los diferentes

Aunque todas estas propiedades deben tomarse en cuenta cuando se

De los parámetros anteriores, ya se mencionó al gradiente de

Figura 3.3. Gradiente de concentración de un xenobiótico. 3.1.1.1.1. Coeficiente de difusión

Figura 3.5. Interpretación de los valores de log P.

Para ilustrar la utilidad del coeficiente de partición, en la tabla siguiente se

Tabla 3.2. Relación log P con la permeabilidad celular a esteroides.

En la tabla anterior, los valores de comparación en el log P, hacen

membranas disminuye. distante a su sitio de ingreso) se quiere extrapolar a un mamífero, se diría

encuentren presentes.1, 6 xenobiótico que lo presente tendrá la mayor probabilidad de alcanzar su

Xenobiótico log P Absorción en el humano

Cafeína -0.07 Bien absorbido codeína log P = 1.20

Tetraciclina -1.37 Absorción irregular e incompleta O N

Teofilina 0.0 Bien absorbido C

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pccompound metropolol log P = 1.72

log P y pKa calculados con ACDlabs software v. 9.

representa el grado de disociación o fuerza de un ácido. Por comodidad, se O O CH3

Ejemplos de algunas sustancias con sus correspondientes valores de pKa, O CH3

Tabla 3.4. Valores de pKa para algunos xenobióticos.28 O N N

Para encontrar valores de pKa para xenobióticos en general puede [HA]