PRACTICAS DE LAS SEMANAS 19 Y 20

PRACTICA DE LA SEMANA 16 2010

2011

SEMANAS 19 Y 20
PRACTICA DE LA SEMANA 16
ACTIVIDAD DE LISOSOMAS Y PEROXISOMAS

I. LISOSOMAS.

INTRODUCCIÓN

Los lisosomas están presentes en casi todas las células eucarióticas, son organelos
membranosos (vesículas membranosas)

Los lisosomas contienen algunas de las proteínas fabricadas en el retículo endoplamático

rugoso que son enviadas al complejo de Golgi, éstas proteínas son enzimas (hidrolasas)
digestivas intracelulares que pueden degradar sustratos orgánicos en las subunidades que
los componen.

La principal función de los lisosomas es digerir las partículas alimenticias, que van desde
proteínas individuales hasta microorganismos complejos.

Muchas células “comen” o digieren mediante FAGOCITOSIS, mecanismo que consiste en

rodear con extensiones de la membrana a partículas extracelulares que pueden ser
alimenticias, organelos defectuosos, sustancias dañinas o microorganismos infecciosos.
Estas partículas ya rodeadas de membrana se mueven entonces dentro del citoplasma,
dentro de sacos o vesículas membranosas que reciben el nombre de fagosoma, los
lisosomas (primarios) reconocen estas vesículas y se fusionan con ellas (secundarios). El
contenido de las dos vesículas de mezcla y las enzimas lisosómicas digieren los alimentos
(o cualquier otra partícula extraña), convirtiéndolos en aminoácidos, monosacáridos, ácidos
grasos y otras moléculas pequeñas. Las moléculas pequeñas o simples se difunden luego
fuera de esta vesícula hacia el citosol para nutrir a la célula. Cuando los microorganismos
o sustancias extrañas no pueden digerirse se forman los cuerpos residuales.

Los glóbulos blancos o leucocitos presentes en la sangre, son células, capaces de efectuar
el proceso de fagocitosis. Los leucocitos tienen como función defender al organismo
humano mediante el reconocimiento de microorganismos extraños, dañinos o infecciosos a
los cuales fagocitan y digieren mediante las enzimas presentes en los lisosomas.

Si entre los microorganismos que ingieren los leucocitos se encuentran bacterias que
todavía no han sido digeridas completamente, estas son observables en microscopía de
campo claro, y con coloración de Gram; entre estas esta la Neisseria gonorrhoeae
(bacteria infecciosa), la cual se observa como diplococos gram negativo dentro de los
leucocitos que se obtienen a partir de muestras de secreciones de personas con infección.

II. OBJETIVOS.
Al terminar la práctica, el estudiante será capaz de:
-Observar diplococos intra y extra celulares, en leucocitos humanos.

III. MATERIALES:
 Microscopio óptico compuesto
 Preparaciones microscópicas fijas de frotes de secreción coloreados con técnica de Gram.
 Aceite de inmersión
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 Papel limpia lentes

I. PROCEDIMIENTO.

Observación de Preparaciones Microscopicas.

1. Tome el frote coloreado con coloración de Gram. y colóquelo sobre la platina del microscopio.
2. Haga su enfoque inicial, utilizando el objetivo seco débil para localizar el área con más
muestra.
3. Luego observe con el objetivo seco fuerte y trate de localizar leucocitos.
4. Coloque una gota de aceite de inmersión sobre el área localizada y enfoque ahora utilizando el
objetivo de inmersión.
5. Haga un esquema de lo observado con el objetivo de inmersión y complete su reporte de
laboratorio de MICROSCOPIA.
6. Cuando termine sus observaciones con el papel limpia lentes, limpie al objetivo de inmersión y
la preparación del frote coloreado.

APLIACIÓN DE CIENCIAS BÁSICAS EN MEDICINA

Investigue y resuma las siguientes enfermedades. Indique en estas enfermedades que
defectos hay a nivel CELULAR Y MOLECULAR, puede incluir imágenes ó dibujos.
No es necesario escribir los tratamientos

ENFERMEDADES
A. Enfermedad de Tay Sachs
B. Enfermedad de Gaucher
C. Enfermedad de Krabbe

2. ACTIVIDAD DE CATALASA

INTRODUCCION.

El término peroxisoma fue introducido por De Duve para identificar cualquier microcuerpo que presente
la secuencia flavín oxidasa-catalasa.
Los peroxisomas son cuerpos delimitados por una membrana y contienen algunas enzimas. Son
abundantes en las células hepáticas y en la de los túbulos renales, pero muy escasos o ausentes en
otros tipos de células.
Los peroxisomas contienen 3 enzimas que actúan catalizando reacciones en las que se forma peróxido
de hidrógeno y una enzima que constituye alrededor de 40% del total de enzimas del peroxisoma, que
degrada el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno gaseoso, recibiendo el nombre de CATALASA.

Flavín oxidasa
R H2 + 02 R + H2O2

Catalasa
2H202 2H2O + O2 (gas)

II. OBJETIVO:

Al finalizar la práctica cada estudiante será capaz de analizar los mecanismos subyacentes de la
actividad de la catalasa en tejido animal y vegetal.

III. MATERIALES:

 Vidrio de reloj
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 Papa y rábano*
 Agua oxigenada* (Peróxido de hidrógeno)
 Trozo de hígado y riñón de res*
 Hojas de afeitar (dos)*
El material marcado con asterisco* lo aporta el estudiante por grupo.

IV. PROCEDIMIENTO:

Para poder estimar la velocidad de reacción considere una escala entre 0 y 3 (O = no hay
reacción, 1 = lento, 2= rápido y 3 = muy rápido). Registre los datos en una tabla. La reacción es
observar la producción de burbujeo cuando se aplica Agua oxigenada a los diferentes tejidos.

A. Actividad de la Catalasa de Tejido Vegetal sobre Agua Oxigenada.

1. Haga un corte fino de rábano y uno de papa, cuyas dimensiones sean iguales, colóquelos
cada uno en diferente vidrio de reloj. Agregue tres gotas de H 2O2. Anote los resultados en la
tabla respectiva.

B. Actividad de la Catalasa de tejidos animales sobre Agua Oxigenada.

1. Hacer un corte fino de tejido hepático y renal, cuyas dimensiones sean iguales, colóquelos
sobre diferentes vidrios de reloj, agregue tres gotas de agua oxigenada. Anote los resultados
en la tabla respectiva.

C. Complete su reporte de laboratorio de VARIOS.

TABLA PARA REGISTRO DE ACTIVIDAD

TEJIDO/ESCALA 0 1 2 3
Papa
Rábano
Hígado
Riñón
0= NINGUNA ACTIVIDAD. 3= MAYOR ACTIVIDAD

Cuestionario:

¿Cuál es el tejido con mayor actividad y cuál el que tiene menor actividad?

¿Qué tienen en común y en qué se diferencian?

Mencione algunos procesos metabólicos de la célula que producen H 2O2.

El H2O2 se usa frecuentemente, como antiséptico. ¿Por qué?

Cuando es agregado a heridas produce burbujas. ¿Qué indica esto?

APLIACIÓN DE CIENCIAS BÁSICAS EN MEDICINA

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Investige y resuma la siguiente enfermedad. indique en esta enfermedad que defectos

hay a nivel CELULAR Y MOLECULAR, puede incluir imágenes ó dibujos.
No es necesario escribir los tratamientos

A. Zellweger

V. BIBLIOGRAFIA.

1. Rodríguez Echandía, Eduardo. Introducción a la Biología Celular. 1ª. Edic. Pirámide, 1979.
2. Avers J., Charlotte. Biología Celular. 1ª. Edic. México, Iberoamericana, 1989.
3. Audesirk, Teresa, Audesirk Gerald. Biología. México. Prentice Hall. 1996. Pp. 947
4. Konoman, Elmer. Et. Al. Diagnóstico Microbiológico. 3ra. Edic. Buenos Aires,
Panamericana,. 1992. Pp. 909.