Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
de Fármacos
Prof. M.Diaz
Espectroscopia
Interacciones
Absorción Emisión
Espectroscopia Espectroscopia
Espectroscopia
Ultra Violeta IR
Visible
Prof. M.Diaz
RADIACION ELECTROMAGNETICA
Es una combinación de campos eléctricos y magnéticos
oscilantes, que se propagan a través del espacio transportando
energía por medio de ondas.
RELACION ENTRE λ y ν
Prof. M.Diaz
CARACTERISTICAS DE LA LUZ
TIENE UNA NATURALEZA DUAL
• Como onda
LA LUZ • Como una corriente de partículas o paquetes de
energía (fotones)
Prof. M.Diaz
Espectro electromagnético
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
METODOS ESPECTROSCOPICOS
Se basan en la medición de la radiación electromagnética emitida o
absorbida por los analitos
Se clasifican de acuerdo con la región del espectro electromagnético que se utiliza.
Estas incluyen los rayos X, rayos ultravioleta, infrarrojo, microondas y radiofrecuencias
METODOS DE Se basan en la disminución de la potencia o atenuación de un haz de
ABSORCION radiación EM como consecuencia de su interacción con el analito.
Prof. M.Diaz
https://es.wikipedia.org/wiki/Espectro_visible#/media/File:Electromagnetic_spectrum-es.svg
COLORES
Las longitudes de onda mas largas que las del rojo se
les conoce como infrarrojas y las mas cortas que el
violeta, ultravioletas.
Prof. M.Diaz
COLORES
Prof. M.Diaz
COLORES COMPLEMENTARIOS DEL ESPECTRO VISIBLE
Prof. M.Diaz
Aplicaciones de la Espectroscopia de absorción
UV-Visible
Prof. M.Diaz
ANALISIS CUALITATIVO
Prof. M.Diaz
ANALISIS CUANTITATIVO PROCESO DE ABSORCION
a a = absortividad
I0
I
c = concentración.
(número de partículas por cm3)
Ley de
Lambert
• Los fundamentos de la
interrelación de la luz que
se absorbe y la que se
transmite
Ley de
Beer
Prof. M.Diaz
Ley de Lambert
Cuando un rayo de luz
Ley de monocromática (I0) pasa a través de
Lambert un medio absorbente, su intensidad
disminuye exponencialmente (I) a
medida que la longitud del medio
absorbente aumenta
I = I0e-ab
I0 I I0 I
I0 I
I = I0e-ac
I I
I0 I I0 I0
Prof. M.Diaz
La ley
Ley de Lambert + Ley de Beer = de
Lo que significa que combinando ambas leyes se crea la Ley
de Beer-Lambert donde la fracción de luz incidente que es Lambert -
absorbida por una solución es proporcional a la Beer
concentración de soluto y al espesor de la sustancia
atravesada por la luz. La relación entre la luz incidente
(I0) y la reflejada (I) dará una idea de la cantidad de
radiación que ha sido absorbida por la muestra.
Prof. M.Diaz
La ley de Lambert -Beer
I = I0e-abc
Si despejamos: I/I0 = e-abc
Al cociente de las intensidades se denomina Transmitancia
T = I/I0 = e-abc
Sacando logaritmos:
Loge I/I0 = abc
Convirtiendo a log10: Log10 I/I0 = 2.303 abc
Log10 I/I0 = abc
Absorbancia = Log10 I/I0 = abc
Prof. M.Diaz
La ley de Lambert -Beer
T = I / I0
Se expresa como % T
Prof. M.Diaz
La ley de Lambert -Beer
A = a·b·c
A menudo b es dada en términos de cm.
c en gramos por litro,
la absortividad tiene unidades de l·g–1·cm–1.
Prof. M.Diaz
La ley de Lambert -Beer
¿Qué relación
De acuerdo a las características de la
guardan la
sustancia analizada, la luz que no se
transmitancia y
absorbe atraviesa la solución
la absorbancia? LUZ
A
B Luz transmitida
S
O
I0 R
B
I
I
D
A
T = I/I0
Prof. M.Diaz
La ley de Lambert -Beer
Por lo tanto la absorbancia es reciproca de la transmitancia
Absorbancia % Transmitancia
Concentración
Prof. M.Diaz
La ley de Lambert -Beer
Absorbancia
(A)
A =– log10 T
Prof. M.Diaz
La ley de Lambert -Beer
La representación gráfica correspondiente a absorbancia y
transmitancia en un gradiente de concentraciones es la
siguiente:
Concentr
ación
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
La ley de Lambert -Beer
log10 %T = 2 – A
Ejemplo:
Una absorbancia de 0.6 ¿a que equivale en % T?
Log10 % T = 2 – 0.6 = 1.4
Log10 % T = 1.4
%T = antilog101.4
% T = 25
Prof. M.Diaz
La ley de Lambert -Beer
Prof. M.Diaz
Ejercicio 1. Una disolución de concentración C
tiene una transmitancia del 80%. Determinar el
porcentaje de transmitancia de una disolución
de la misma sustancia de concentración 3C
Ejercicio 2. Una disolución tiene una transmitancia de
0.10 a una cierta λ,
a) determinar su absorbancia
b) si su concentración es de 0.020 g / l, su masa
molecular de 100 y su transmitancia fue medida en
celdas de 1.0 cm, determinar su absortividad y su
absortividad molar. Prof. M.Diaz
Limitaciones de La ley
de Lambert -Beer
• Solo describe bien el comportamiento de disoluciones diluidas (< 10
μmolar).
Prof. M.Diaz
CUANTIFICACION DE SUSTANCIAS POR
ESPECTROFOTOMETRIA
Prof. M.Diaz
CUANTIFICACION DE SUSTANCIAS POR
ESPECTROFOTOMETRIA
Prof. M.Diaz
Métodos de cuantificación
Prof. M.Diaz
Curva de calibración con estándares externos
Patrones
Blanco Muestra
Prof. M.Diaz
INSTRUMENTACION
ESPECTROFOTOMETRO
Prof. M.Diaz
INSTRUMENTACION
ESPECTROFOTOMETRO
1
2 3 4
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
ESPECTROFOTOMETRO
Prof. M.Diaz
INSTRUMENTACION
1. Fuente Radiación
Intensidad continua, estable e intensa en el rango de
longitud de onda que cubre
160-375 nm
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
INSTRUMENTACION
Monocromadores
•Monocromadores de
prismas
ESPECTROFOTOMETROS
Prof. M.Diaz
INSTRUMENTACION
3. CUBETAS
CARACTERISTICAS
UV Visible
Prof. M.Diaz
INSTRUMENTACION
4. DETECTORES
CARACTERISTICAS
1. Deben responder a un amplio rango de longitudes de onda
2. Deben dar respuestas rápidas.
3. Deben ser sensibles a bajos niveles de irradiación
4. Deben producir señal eléctrica fácilmente amplificable
5. La señal debe ser proporcional a la potencia radiante
Prof. M.Diaz
Principios básicos de la Espectroscopia UV
Según su energía, la
radiación
electromagnética
puede interaccionar
con la materia de
diferentes formas:
Prof. M.Diaz
Como se aplica y se utiliza la Espectroscopia UV-Visible
1.- Excitación M + hv → M*
Electrónica
2. Relajación en especial la
conversión de esa energía M* → M+ calor
de excitación en calor Prof. M.Diaz
Relajación Molecular
Prof. M.Diaz
Tipos de transiciones moleculares
Prof. M.Diaz
Teoría de absorción molecular
La absorción de radiación ultravioleta o visible resulta, generalmente, de la excitación de
los electrones de enlace; como consecuencia, los picos de absorción pueden
correlacionarse con los tipos de enlaces de las especies objeto de estudio
Electrones Electrones
σ, π y n dyf Electrones
de transferencia
• Comp. Orgánicos • Lantánidos de carga
• Aniones inorgánicos • Actínicos Prof. M.Diaz
Especies absorbentes que contienen electrones σ, π y n
Enlazantes No Enlazantes n
Electrones externos no
Electrones compartidos que
compartidos, no participan en
participan directamente en la
ningún enlace y están en gran
formación de enlaces entre átomos,
parte localizados alrededor de
asociándose con más de uno de ellos
átomos como oxigeno, halógenos,
azufre y nitrógeno Prof. M.Diaz
Transiciones de Electrones
Prof. M.Diaz
Especies absorbentes que contienen electrones σ, π y n
Prof. M.Diaz
Especies absorbentes que contienen electrones σ, π y n
Grupo Grupo atómico presente en una molécula que lleva asociada una
Cromóforo banda de absorción electrónica ejemplos C = O, C = C, N = N…..
Los electrones que participan en enlaces dobles y triples no están unidos tan
fuertemente, y por lo tanto, pueden ser excitados más fácilmente por la
radiación. Presentan picos de absorción en la región UV ( > 180 nm).
Prof. M.Diaz
ESPECTROFOTOMETRIA UV Y VISIBLE
CROMOFORO
AUXOCROMO
Prof. M.Diaz
Transiciones electrónicas n→π* y π→π*
Prof. M.Diaz
Análisis Cualitativo
Prof. M.Diaz
Como se aplica y se utiliza la Espectroscopia UV-Visible
Bandas de absorción
ξ = 104-105 Y P= 0,1-1
intensas
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
Cromóforos simples carbonilos y derivados
Prof. M.Diaz
Cromóforos simples carbonilos y derivados
Prof. M.Diaz
Absorción por compuestos orgánicos con grupos cromóforos
Prof. M.Diaz
Efecto de la conjugación de los cromóforos
Prof. M.Diaz
Efecto de la conjugación de los cromóforos
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
ABSORCION DE SISTEMAS AROMATICOS
Prof. M.Diaz
ABSORCION DE SISTEMAS AROMATICOS
Prof. M.Diaz
Prof. M.Diaz
Bibliografía consultada para la clase
Prof. M.Diaz