IDENTIFICACION DE LÍPIDOS

INTRODUCCION
Los lípidos biológicos integran un grupo de moléculas orgánicas diversas que se caracterizan por su
solubilidad en solventes orgánicos como cloroformo, benceno y otros. Entre las funciones se pueden
mencionar: Reserva energética (fosfolípidos, grasas, ceras), moléculas que hacen parte de la estructura
de las biomembranas (fosfolípidos, glucolípidos, lípidos éter en Archaea, esfingolípidos y esteroles);
finalmente, entre 5% a 10% actúan como cofactores enzimáticos, transporte de electrones, emulsiones,
hormonas, mensajeros intracelulares y vitaminas liposolubles. Los lípidos por su estructura son
moléculas insolubles en un ambiente acuoso, por lo tanto para su reconocimiento, extracción e
identificación se requiere de métodos y solventes orgánicos que son poco usados para los estudios de
carbohidratos, proteínas y ácidos nucleicos; en consecuencia, entre los métodos más comunes se
encuentran las pruebas de: solubilidad, tinción (Prueba de Sudán), saponificación, instauración (Prueba
de Yodo), para la glicerina (prueba de acroleína), glicerol, fusión (presencia de fósforo inorgánico), valor
de acidez, reacción de Lieberman; asimismo. Los lípidos se pueden extraer con éter etílico, cloroformo,
benceno, etanol, metanol y se separan mediante cromatografía de capa fina, adsorción, gas-liquido,
cromatografía liquida de alta resolución (HPLC), finalmente la espectrofotometría de masas revela la
estructura molecular del lípido de forma completa.

OBJETIVOS
 Identificar la presencia de lípidos de origen vegetal y animal.
 Cada grupo elabora los objetivos específicos y los presenta al inicio del laboratorio.

HIPOTESIS
Cada grupo elabora la hipótesis correspondiente y la presenta al inicio del laboratorio.

MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

 POR GRUPO
- 2 Pipetas graduadas de 2 y 5 ml. - 6 tubos de ensayo por grupo.
- 6 tapones para los tubos de ensayo. - 1 pinza para tubos de ensayo.
- 1 Beaker de 50 o 100 ml. - Gradilla para los tubos de ensayo.
- Aceite vegetal. - Grasa animal usada.
- Leche.

 DE USO COMUN
-4 Baños de agua hirviendo para el experimento. - 4 mecheros.
-Soluciones de sacarosa 1% p/v. - Tinta roja.
-Cloroformo. - Éter.
-Solución alcohólica de Sudán lll.

PROCEDIMIENTO

1. PRUEBA DE SOLUBILIDAD

 En cuatro tubos de ensayo desarrolle el siguiente procedimiento:

- Tubo 1: 2 ml de aceite vegetal y agregue 2 ml de agua.
- Tubo 2: 1 ml de aceite vegetal y agregue 1 ml de éter o cloroformo.
- Tubo 3: 1 ml de grasa animal usada y agregue 1 ml de agua.
 - Tubo 4: 1 ml de grasa animal usada o no y agregue 1 ml de éter o cloroformo.

 Agitar en forma muy fuerte y deje reposar

 Observe y anote los resultados.

 ENSAYO DE TINCIÓN

 En cuatro tubos de ensayo desarrolle el siguiente procedimiento:

- Tubo 1: 2 ml de aceite vegetal y añada 0.25 ml de solución alcohólica de sudan III
- Tubo 2: 1 ml de grasa animal usada más 0.25 ml de solución alcohólica de sudan III
- Tubo 3: 1 ml de leche y añada 0.25 ml de solución alcohólica de sudan III
- Tubo 4: 1 ml de aceite vegetal agregue 0.25 ml de tinta roja

 SAPONIFICACION

 En cuatro tubos de ensayo desarrolle el siguiente procedimiento:

. - Tubo 1: 2 de aceite vegetal y añada 2 ml de una solución de NaOH 20% p/v.
- Tubo 2: 2 ml de grasa animal usada más 2 ml de una solución NaOH 20% p/v.
- Tubo 3: 2 ml de leche y añada 2 ml de una solución de NaOH 20% p/v.

 Agitar fuertemente y ubicar los tubos en un baño de maría por 20 o 30 minutos.

 Después del tiempo anterior (20 a 30 minutos), observe la formación de varias capas.

 ENSAYO DE LIEBERMAN-BURCHARD

-En un beaker se colocan 10 ml de cloroformo y se le agrega 1 ml de yema de huevo.

-A un tubo de ensayo seco se le adiciona 1 ml de la solución anterior; posteriormente, se
adiciona 1ml de anhídrido acético y enseguida se agrega 0.2 ml (4 gotas) de H 2SO4 con
precaución.
- Un color verde azuloso indica una prueba positiva para colesterol; mientras, la formación
rápida de un color rojo señala la presencia de ergosterol.

PREGUNTAS

 Cuál es el fundamento y reacciones de cada uno de los ensayos?