Transfus Clin Biol 2001 ; 8 : 410-21

© 2001 Éditions scientifiques et médicales Elsevier SAS. Tous droits réservés

S1246782001001926/FLA
ARTICLE ORIGINAL

La maîtrise statistique des processus appliquée

au dépistage génomique viral : approche expérimentale

J.M. Reifenberg1*, P. Navarro1, J. Coste2

1
Service qualité, Établissement français du sang Pyrénées-Méditerranée, 240, avenue Émile-Jeanbrau,
34094 Montpellier cedex 5, France ; 2 laboratoire de biologie moléculaire, Établissement français du sang
Pyrénées-Méditerranée, 240, avenue Émile-Jeanbrau, 34094 Montpellier cedex 5, France

Résumé – Dans le cadre de l’étude multicentrique nationale sur l’introduction du Dépistage génomique viral dans la
qualification biologique des dons, pilotée par la direction médicale et scientifique de l’Établissement français du sang,
la chaîne Transcription-Mediated Amplification (Chiron / Gen Probe) fut expérimentée dans le laboratoire de biologie
moléculaire du site de Montpellier de l’Établissement français de sang Pyrénées-Méditerranée. Après une phase
préliminaire de qualification des matériels et de formation du personnel, la recherche des ARN des virus HCV et VIH-1
par cette technologie fut appliquée en routine sur tous les dons homologues (sang total et plaquettes d’aphérèse)
pendant deux mois. Afin d’évaluer les différentes chaînes, un enregistrement exhaustif des opérations journalières et des
données fut effectué. Parmi ces données, les résultats de luminescence émis par les calibrateurs positifs et négatifs et
les contrôles internes associés ont fait l’objet d’une étude relative aux cartes de contrôle, aux mesures, outils de maîtrise
statistique des processus privilégiant la prévention des dysfonctionnements et des dérives. Cette étude illustre l’intérêt
de l’application de ces méthodes provenant du milieu industriel pour le suivi et l’amélioration de la qualité d’un
processus dans le domaine de la transfusion. Elle met aussi en évidence les difficultés engendrées par la recherche a
posteriori des sources de variations non contrôlées d’un processus encore expérimental. De tels outils s’inscrivent
parfaitement dans le cadre de la nouvelle version des normes ISO 9000 qui insiste en particulier sur la maîtrise des
processus par l’utilisation d’indicateurs adaptés, et pourraient être étendus à d’autres activités transfusionnelles comme
le prélèvement et la préparation des PSL. © 2001 Éditions scientifiques et médicales Elsevier SAS

assurance et contrôle qualité / cartes de contrôle / dépistage génomique viral / maîtrise statistique des processus

Summary – The Statistical Process Control applied to viral Nucleic Acid Testing : an experimental approach. During
the National Multicentric Study concerning the introduction of NAT for HCV and HIV-1 viruses in blood donation
screening which was supervised by the Medical and Scientific departments of the French Blood Establishment
(Établissement français du sang – EFS), Transcription-Mediated transcription Amplification (TMA) technology (Chiron /
Gen Probe) was experimented in the Molecular Biology Laboratory of Montpellier, EFS Pyrénées-Méditerranée. After a
preliminary phase of qualification of the material and training of the technicians, routine screening of homologous blood
and apheresis donations using this technology was applied for two months. In order to evaluate the different NAT
systems, exhaustive daily operations and data were registered. Among these, the luminescence results expressed as
RLU of the positive and negative calibrators and the associated internal controls were analysed using Control Charts,
Statistical Process Control methods, which allow us to display rapidly process drift and to anticipate the appearance of

*Correspondance et tirés à part.

Adresse e-mail : jean-marc.reifenberg@efs.sante.fr (J.M. Reifenberg).
 Cartes de contrôle en transfusion 411

incidents. This study demonstrated the interest of these quality control methods, mainly used for industrial purposes, to
follow and to increase the quality of any transfusion process. It also showed the difficulties of the post-investigations of
uncontrolled sources of variations of a process which was experimental. Such tools are in total accordance with the new
version of the ISO 9000 norms which are particularly focused on the use of adapted indicators for processes control,
and could be extended to other transfusion activities, such as blood collection and component preparation. © 2001
Éditions scientifiques et médicales Elsevier SAS

quality assurance and control / control charts / Nucleic Acid Testing / Statistical Process Control

Née aux Etats Unis dans les années 1930, la maîtrise
statistique des processus (MSP) ou Statistical Process
Control (SPC) réunit un ensemble de méthodes mathé-
matiques permettant de surveiller et d’améliorer un
processus de production [1]. Développés dans un pre-
mier temps dans le domaine militaire, ce n’est qu’après
la seconde guerre mondiale, lors de la généralisation des
normes militaires à l’industrie, que les experts japonais
ont adapté ces outils dans le domaine de la qualité en
entreprise. L’apparition de la MSP en Europe débuta à
partir de la fin des années 70, poussée par les effets de la
mondialisation des échanges et de l’accroissement de la
concurrence internationale. De nos jours, ces méthodes
sont utilisées dans de nombreuses industries pour la
maîtrise des processus de production, pour la détection
et la prévention des défauts, et constituent une étape
importante de démarche de qualité orientée vers le
« zéro défaut ».
Peu décrites dans le domaine transfusionnel, ces
méthodes statistiques ont fait l’objet d’une première
approche expérimentale appliquée à des paramètres de
prélèvement par aphérèse et de préparation des produits
sanguins labiles [2] au site de Montpellier de l’EFS
Pyrénées-Méditerranée. Cette étude et un suivi d’une
année ont permis d’éprouver l’intérêt de ces outils, de
les améliorer, et aussi de remettre en question le bien-
fondé du contrôle statistique de tant de paramètres,
rappelant que les outils de la MSP, comme tout autre
indicateur qualité, doivent faire l’objet d’une analyse
collective préalable de pertinence et de faisabilité.
Afin de compléter cette première approche, l’applica-
tion de ces méthodes au processus du dépistage géno-
mique viral (DGV) a été mise à l’épreuve à l’issue de
l’étude nationale sur l’introduction des techniques de
biologie moléculaire dans la qualification biologique
des dons, diligentée par la direction médicale et scien-
tifique de l’EFS [3]. La méthodologie reste identique, à
la différence que dans l’étude précédente il était néces-
saire de tenir compte des contraintes réglementaires
détaillées dans les caractéristiques des produits sanguins
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labiles [4] ; ici les paramètres sélectionnés ne sont
soumis qu’aux spécifications du fournisseur de réactifs,
lorsqu’elles existent.
Parmi les sites évaluateurs du DGV, le laboratoire de
biologie moléculaire du site de Montpellier participa à
l’expertise de la chaîne Transcription-Mediated Amplifi-
cation (TMA, Chiron), en trinôme avec les sites de
Grenoble (EFS Rhône-Alpes) et de Dijon (EFS Bour-
gogne, Franche-Comté) [5]. Après une phase prélimi-
naire de qualification des matériels, de formation et de
qualification au poste de travail du personnel, l’expéri-
mentation en temps réel dura environ deux mois, au
terme desquels les données brutes de luminescence des
calibrateurs et de leurs contrôles internes, issues de la
chaîne testée à Montpellier, ont été collectées et ont fait
l’objet de la présente étude.
RAPPELS SUR LE PRINCIPE DE LA CARTE
DE CONTRÔLE AUX MESURES
La carte de contrôle aux mesures [6], outil graphique
couramment utilisé dans le cadre de la maîtrise statis-
tique des processus, permet de suivre les fluctuations
d’un processus en distinguant les causes de variabilité
aléatoires (imputables au hasard), prévisibles à condi-
tion que les variations naturelles de ce processus aient
été caractérisées, des causes assignables, dues à des fac-
teurs identifiables, sur lesquelles il est possible d’inter-
venir. Une fois opérationnelle, la carte de contrôle aux
mesures permet de surveiller la stabilité d’un processus
défini préalablement par son centrage (ex. moyenne) et
sa dispersion (ex. écart–type). Elle privilégie la préven-
tion en permettant de visualiser rapidement les fluctua-
tions anormales et les dérives ; ainsi, il est possible
d’anticiper sur l’apparition de dysfonctionnements en
mettant en place des actions correctives (réglage d’un
automate, changement de lot de réactifs, renouvelle-
ment de formation des techniciens, etc.).
En terme de management, ces outils représentent
aussi des moyens efficaces d’autocontrôle, responsabili
412 J.M. Reifenberg et al.
Figure 1. Principe de la carte de contrôle.
sant les opérateurs en mettant à leur disposition un
moyen de visualisation de leur processus, de prévention
des problèmes et de décision.
Une carte de contrôle aux mesures est composée de
deux graphiques : l’un pour suivre la tendance centrale
du processus, l’autre pour suivre sa dispersion. Sur
chaque graphique sont représentés des seuils de proba-
bilités appelés limites de contrôle, au-delà desquels on
considère que le processus n’est plus maîtrisé, et limites
de surveillance, au-delà desquelles le processus doit faire
l’objet de contrôles renforcés. Ces limites de contrôle et
de surveillance représentent les échantillons de la popu-
lation de données se situant respectivement à 1,96 σ et
3,09 σ (σ : écart–type) de la tendance moyenne de la
population (figure 1). La probabilité de rencontrer un
point au-delà des limites de contrôle est inférieure à
1 ‰ et celle de rencontrer un point entre les limites de
surveillance et de contrôle est de 2,5 %. Si pour un
échantillon donné la valeur considérée est extérieure
aux limites de contrôle, la méthode statistique estime
cette éventualité très peu probable mais significative
d’une variabilité anormale, qui doit être identifiée, ana-
lysée puis faire l’objet d’une action corrective.
Outre les points situés au-delà des limites de contrôle,
d’autres configurations témoignent d’une fluctuation
anormale ou d’une dérive du processus, les plus cou-
rantes étant les séries (succession de points au-dessus ou
au-dessous de la moyenne), et les tendances (succession
de points ascendants ou descendants). Le nombre
minimum de points significatifs d’une variation anor-
male peut varier de 5 à 9 points consécutifs. En général,
il est recommandé de ne pas fixer trop hâtivement ces
critères et d’observer préalablement le comportement
d’une carte de contrôle avant de définir les règles de
décision. D’autres informations peuvent être également
interprétées sur une carte de contrôle et peuvent contri-
buer à la mise en place d’actions préventives ou correc-
tives [7], mais les plus importantes sont celles décrites
précédemment.
La carte de contrôle aux mesures diffère de la carte de
contrôle dite aux attributs par un raisonnement a priori
sur le fonctionnement d’un processus, alors que la carte
de contrôle aux attributs donne des indications a pos-
teriori sur la qualité d’un produit. Cette dernière
s’applique à des variables discrètes (oui / non,
conforme / non conforme), alors que la carte de contrôle
aux mesures s’applique à des variables continues, c’est à
dire mesurables. Sa mise en place est conditionnée par
l’hypothèse que les valeurs du paramètre considéré sui-
vent la loi normale.
Parmi les différentes catégories de cartes de contrôle
aux mesures existantes, il a été choisi dans le cadre de
cette étude la carte de contrôle (X, R), fondée sur la
moyenne X et l’étendue R (différence entre la plus
grande et la plus petite valeur). La méthodologie de
mise en place est décrite dans le chapitre 4.
DESCRIPTION DE LA CHAÎNE TMA
Le principe de la technologie multiplex TMA VIH-1/
HCV ARN (Chiron / Gen Probe) permet de réaliser
l’ensemble des étapes allant de l’extraction à la révéla-
tion des ARN des virus VIH-1 et HCV dans un même
tube. Lorsque le test est positif, il n’est pas possible de
distinguer une infection par le virus VIH-1 d’une infec-
tion par le virus HCV. Pour cela, un second test discri-
minatoire est nécessaire. Comme la majorité des
techniques d’amplification génique, trois étapes princi-
pales composent la technologie TMA : l’extraction des
acides nucléiques potentiellement présents dans les
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 Cartes de contrôle en transfusion
échantillons, l’amplification des séquences ribonucléi-
ques recherchées, initiée par différentes amorces spéci-
fiques, et enfin la détection des produits amplifiés ;
cette dernière phase est assurée par un lecteur d’émis-
sions lumineuses, le luminomètre, qui injecte automa-
tiquement dans le tube les réactifs de détection
produisant un signal luminescent mesuré en unités
lumineuses relatives (RLU).
Chaque série d’analyses est validée par la présence de
trois calibrateurs (témoin négatif, positif VIH-1, positif
HCV) intervenant dans le calcul du seuil de détection,
et par la co-amplification d’un ARN synthétique, le
contrôle interne (IC), ajouté dans chaque échantillon et
témoin au moment de l’extraction, qui permet de valider
l’ensemble du processus.
La traçabilité des opérations est assurée par une fiche
de suivi accompagnant chaque série d’analyse sur
laquelle sont enregistrées de nombreuses informations,
en particulier les durées des différentes étapes et les
problèmes rencontrés. Ces derniers ont de plus fait
l’objet d’une déclaration systématique sur une fiche
d’anomalie détaillant le contexte de l’incident et leur
correction immédiate. De nombreuses informations
peuvent donc rapidement être retrouvées à partir de la
date de l’analyse, les dossiers relatifs à chaque série étant
classés chronologiquement.
D’autres informations peuvent également être retrou-
vées dans les systèmes informatiques, tels les logiciels
qui pilotent les automates de distribution et de poolage.
MÉTHODES
Les données exploitées dans le cadre de cette étude sont
les résultats bruts des signaux chimioluminescents des
calibrateurs positifs (HCV, VIH-1) et négatifs, ainsi
que ceux de leurs contrôles internes associés issus de la
chaîne testée à Montpellier (n = 261).
Une vérification préalable de la normalité supposée
de la distribution des valeurs pour chaque paramètre est
effectuée, clause d’application impérative d’une carte de
contrôle aux mesures. Pour chaque paramètre, cette
épreuve de normalité est réalisée graphiquement, condi-
tion nécessaire et suffisante pour la poursuite de l’étude,
puis éprouvée par le test de Pearson (χ2) [8]. L’étape
suivante consiste à calculer les limites provisoires de
contrôle et de surveillance du processus pour chaque
paramètre considéré [9], et à enregistrer les données sur
les cartes de contrôle pré-établies sur des fichiers
Excel [2].
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413
L’examen des cartes provisoires porte sur les points
situés hors des limites de contrôle, les séries et tendances
d’au moins neuf points successifs. Les causes assignables
de variation sont analysées au travers des fiches de suivi
journalières (fiches manuelles et fichiers informatiques)
et des fiches d’anomalies émises au cours de l’étude,
après vérification de l’absence d’erreur de transcription
des données. Chaque point suspect fait ainsi l’objet
d’investigations minutieuses afin d’identifier le ou les
facteurs incriminés (figure 1).
Ces valeurs sont ensuite éliminées du calcul des
limites, et la répartition des points entre les nouvelles
limites provisoires est à nouveau examinée. La séquence
identification des points hors limite / élimination de ces
points après analyse / révision des limites est renouvelée
jusqu’à ce que les points se répartissent aléatoirement
autour de la ligne centrale des graphiques de centrage et
de dispersion : la variabilité naturelle du processus est
alors considérée comme stabilisée entre ces limites que
l’on peut fixer. À partir de là, les cartes de contrôle sont
opérationnelles pour une surveillance permanente du
processus.
RÉSULTATS
Études de normalité
Pour chaque paramètre, l’examen des histogrammes de
fréquences montre un contour du polygone de fré-
quences très proche de la forme d’une courbe de Gauss ;
cette distribution apparaît asymétrique pour le calibra-
teur VIH-1, le calibrateur négatif et son contrôle
interne. L’hypothèse de normalité est rejetée par le test
de χ2 pour ces paramètres, alors qu’elle est acceptée
pour le calibrateur HCV et les IC associés aux calibra-
teurs HCV et VIH-1, ces derniers présentant une dis-
tribution très symétrique (figure 2).
Un deuxième test de normalité a été réalisé pour
chaque paramètre après élimination des valeurs aber-
rantes, confirmant la normalité de chaque distribution
(∝ = 5 %).
Examen des cartes de contrôle
L’examen général des cartes de contrôle révèle une
répartition plus ou moins régulière des points de part et
d’autre de la ligne centrale. L’observation des graphi-
ques de centrage des calibrateurs HCV (figure 3) montre
une dispersion des points plus accentuée que pour les
calibrateurs VIH-1 (figure 4) ; ce constat apparaît bien
414 J.M. Reifenberg et al.

Figure 2. Étude de la normalité des distributions de chaque paramètre.

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Figure 3. Cartes de contrôle du calibrateur HCV et de son IC associé (données de mars uniquement).

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416 J.M. Reifenberg et al.

Figure 4. Cartes de contrôle du calibrateur HIV-1 et de son IC associé (données de mars uniquement).

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 Cartes de contrôle en transfusion
plus nettement entre les contrôles internes associés aux
calibrateurs HCV (points dispersés) et ceux associés aux
calibrateurs VIH-1 (points régulièrement répartis et
resserrés autour de la ligne centrale). Les calibrateurs
négatifs et leurs contrôles internes montrent aussi
une dispersion des points relativement importante
(figure 5).
Globalement aucun paramètre ne se distingue au
niveau du graphique des étendues. Aucune série ni
tendance significative n’est apparue pour les différents
paramètres.
Sur la carte de contrôle provisoire du calibrateur
HCV, 29 points ont été mis en évidence à l’extérieur
des limites de contrôle du graphique de centrage, dont
15 (51,7 %) se situaient au-dessus de la limite de
contrôle supérieure et 14 (48,3 %) au-dessous de la
limite de contrôle inférieure.
Concernant le calibrateur VIH-1, dix points ont été
relevés à l’extérieur des limites de contrôle du graphique
de centrage, dont cinq se situaient au-dessus de la limite
de contrôle supérieure et cinq au-dessous de la limite de
contrôle inférieure (50 / 50 %) ; un point a été localisé
au dessus de la limite de contrôle supérieure du gra-
phique de dispersion.
Six points hors limites de contrôle supérieure
(85,7 %) et un au-delà de la limite de contrôle infé-
rieure (14,3 %) ont été localisés sur le graphique de
centrage des calibrateurs négatifs
Pour le contrôle interne associé aux calibrateurs HCV,
neuf points ont été repérés à l’extérieur des limites de
contrôle du graphique de centrage, dont 7 (77,7 %)
au-dessus de la limite de contrôle supérieure et 2
(22,3 %) au-dessous de la limite de contrôle inférieure.
Aucun point hors limite n’a été détecté pour le para-
mètre IC VIH-1.
Vingt-trois points hors limites ont été localisés à
l’extérieur des limites de contrôle sur le graphique de
centrage des contrôles internes des calibrateurs négatifs
(IC CAL–), dont 20 (86,9 %) au-dessus de la limite de
contrôle supérieure et 3 (13,1 %) au-dessous de la
limite de contrôle inférieure.
Après élimination des valeurs associées à ces points
hors limites et calcul des nouvelles valeurs des limites
provisoires, les paramètres HCV (quatre points supplé-
mentaires au-dessus des limites de contrôle supérieures
des moyennes), VIH-1 (trois points supplémentaires
au-dessus des limites de contrôle supérieures des moyen-
nes), IC CAL– (trois points supplémentaires au-dessus
des limites de contrôle supérieures et 1 point au-dessous
des limites de contrôle inférieures des moyennes) et
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417
CAL– (deux points supplémentaires au-dessus des
limites de contrôle supérieures) ont nécessité une
seconde révision du calcul des limites après élimination
de nouveaux points hors limites de contrôle. Une troi-
sième révision a été nécessaire pour fixer les limites des
paramètres CAL– et IC CAL– (1 et 2 points supplé-
mentaires au-dessus des limites de contrôle supérieures,
respectivement).
En conclusion, les limites de contrôle et de sur-
veillance ont pu être fixées après trois révisions des
limites provisoires pour les paramètres CAL– et IC
CAL–, après deux révisions pour les paramètres HCV
et VIH-1, et après une révision pour le paramètre IC
HCV ; les limites du paramètre IC VIH-1 n’ont pas
nécessité de correction.
Recherche des causes assignables
Parmi les points hors limites relevés, il est intéressant de
noter que huit (10,1 %) concordent avec des séries dans
lesquelles des anomalies d’extraction avaient été enre-
gistrées en cours d’étude. Ces anomalies portent sur des
problèmes de pipetage, de distribution de réactif ou
d’échantillon, de lecture de codes à barres au niveau des
automates de distribution, ayant surtout entraîné des
retards dans le traitement des échantillons.
L’analyse individualisée des différents points hors
limite n’a pas révélé d’influence marquante de la série
(série du matin / après-midi), ni d’effet « jour de la
semaine » pouvant orienter vers une cause assignable de
variation se répétant dans le processus. Le tableau I
montre que dans la majorité des cas, à l’exception du
calibrateur négatif, de nombreux points hors limites se
révèlent communs avec plusieurs calibrateurs. En par-
ticulier, il est intéressant de noter que 72,7 % (8/11)
des variations équivoques observées sur les calibrateurs
VIH-1 ont été retrouvées dans les mêmes séries que
celles dans lesquelles des variations anormales avaient
été observées avec le calibrateur HCV, orientant les
investigations vers une origine commune des fluctua-
tions des calibrateurs positifs. Le test de comparaison
des moyennes des durées respectives des étapes d’extrac-
tion, d’amplification et de détection des séries corres-
pondants aux points hors limite avec celles
correspondant aux situations « normales » montre une
différence (d) hautement significative (α = 1 p.100)
entre les durées d’extraction respectives (d = 13,8 min.,
2,6 Sd = 11,7 min., d > 2,6, Sd étant l’écart standard
théorique) : l’hypothèse d’appartenance de ces deux
échantillons de données à une même population est
418 J.M. Reifenberg et al.

Figure 5. Cartes de contrôle du calibrateur négatif et de son IC associé (données de mars uniquement).

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 Cartes de contrôle en transfusion
Tableau I. Synthèse de l’analyse des causes assignables.
Paramètres Nombre de points hors limite (%)
Calibrateur positif HIV-1 11 (13,9)
IC associé au calibrateur HIV-1 0 0
Calibrateur positif HCV 29 (36,7)
IC associé au calibrateur HCV 9 (11,4)
Calibrateur négatif CAL- 7 (8,9)
IC associé au calibrateur CAL- 23 (29,1)
TOTAL (n) 79
(1) Causes spécifiques : points hors limites retrouvés sur un seul paramètre ; (2) causes communes : points hors limites communs à plusieurs
paramètres.
rejetée, la durée moyenne de l’étape d’extraction corres-
pondant aux points hors limite apparaît donc anorma-
lement élevée. En revanche, la différence entre les durées
d’amplification et de détection n’apparaît pas significa-
tive (d < 2 Sd, α = 5 %).
DISCUSSION
La recherche des causes assignables de variations pou-
vant justifier la présence de points hors des limites
représentatives de la normalité du procédé a constitué la
partie la plus complexe et la plus longue de la démar-
che ; elle requiert souvent l’utilisation d’outils classi-
ques de la qualité : méthodes de résolution de
problèmes, plans d’expérience, AMDEC, Pareto, etc.
La difficulté a été accrue du fait que les investigations
ont été réalisées a posteriori, malgré la mine d’informa-
tions relevées sur les fiches de suivi et les fiches d’ano-
malies. La démarche suivie pour la mise en place des
limites de contrôle était volontairement empirique, en
éliminant toutes les valeurs « anormales » comprenant
celles rattachées à des phénomènes clairement identi-
fiés, et celles ne répondant qu’à de simples hypothèses ;
la variabilité naturelle du processus peut être ainsi sous-
évaluée. Ce n’est que pendant la phase de routine, en
temps réel, que les causes aberrantes de variation pour-
ront être plus facilement identifiées, et la normalité du
processus pourra être alors plus objectivement appré-
hendée.
L’influence des réactifs a été volontairement minimi-
sée : l’étude de faisabilité a été réalisée avec un seul lot de
réactifs, réduisant les risques de variations inter-lots.
Concernant l’équipement, une qualification opéra-
tionnelle rigoureuse des automates et du petit matériel
(pipettes, vortex …) avait été réalisée [10]. Cependant,
l’hypothèse de problèmes ponctuels de justesse, de répé-
tabilité et/ou de reproductibilité ne peut être exclue,
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419
(1) (2)
Causes spécifiques (%) Causes communes (%)
2 (18,1) 9 (81,9)
0
12 (41,3) 17 (58,7)
1 (11,1) 8 (88,9)
5 (71,4) 2 (28,6)
3 (13,0) 20 (87,0)
23 56
particulièrement dans un processus ponctué de nom-
breuses opérations manuelles ; des irrégularités de pipe-
tage et de distribution pourraient être à l’origine de
variations n’influençant pas la validation des résultats
mais agissant significativement sur la normalité du pro-
cédé. Il est malheureusement impossible d’éprouver de
telles hypothèses du fait qu’elles sont dépourvues d’enre-
gistrements adéquats.
Il a été observé que dans la majorité des cas, les
fluctuations anormales des calibrateurs VIH-1 et HCV
étaient recensées dans les mêmes séries. Les prospec-
tions ont donc porté sur des étapes du processus com-
munes à ces calibrateurs et leurs IC associés. Après avoir
vérifié l’absence d’un effet « série » et « technicien », la
comparaison statistique des moyennes des durées des
étapes d’extraction, d’amplification et de détection entre
les séries « hors normes » et les séries « normales » tend
à montrer une influence significative de la durée de
l’étape d’extraction dans la variabilité observée. Cela est
indépendant du nombre d’échantillons de la série, les
calibrateurs étant traités systématiquement en début de
série. En revanche, alors que les durées d’incubation
recommandées par le fournisseur semblent avoir été
respectées, les opérateurs ont reconnu des difficultés à
standardiser les étapes des lavages (durée, agitation avec
vortex, appréciation visuelle de l’efficacité …) qui figu-
raient en outre parmi les plus difficiles à qualifier en
début d’étude.
Si l’on admet l’hypothèse d’une source de variation
commune, le calibrateur HCV apparaît beaucoup plus
affecté par ces variations que le calibrateur VIH-1. Le
fait qu’il y ait deux sites d’hybridation pour la sonde
VIH-1 au cours des différentes étapes (capture de la
séquence cible, amplification et détection), alors qu’il
n’y en a qu’un seul pour la sonde HCV pourrait justifier
que toute variation anormale dans la technique ait plus
de répercussions sur le calibrateur HCV que sur le
420
Tableau II. Valeurs des limites de contrôle et des critères d’acceptation.
Paramètres
Calibrateur positif HIV-1 fournisseur
Calibrateur positif HIV-1 étude
IC associé au calibrateur HIV-1 fournisseur
IC associé au calibrateur HIV-1 étude
Calibrateur positif HCV fournisseur
Calibrateur positif HCV étude
IC associé au calibrateur HCV fournisseur
IC associé au calibrateur HCV étude
Calibrateur négatif CAL - fournisseur
Calibrateur négatif CAL - étude
IC associé au calibrateur CAL - fournisseur
IC associé au calibrateur CAL - étude
NS : non spécifié.
calibrateur VIH-1. L’exploitation des données issues
des autres chaînes TMA expérimentées permettra de
vérifier si cette observation relève d’une réalité ou d’un
effet mathématique lié à la distribution des valeurs. En
revanche, dans l’état actuel des connaissances, aucune
hypothèse plausible ne permet d’expliquer le compor-
tement des calibrateurs négatifs et de leurs contrôles
internes : distribution des valeurs asymétrique, forte
dispersion des points sur les cartes de contrôle qui ont
nécessité trois révisions préalables des valeurs des limites.
Il est important de rappeler l’échelle dans laquelle se
situent les résultats de cette étude. Le tableau II met en
parallèle les valeurs des limites de contrôle de chaque
calibrateur avec celles des spécifications du fournisseur.
Ces limites se situent confortablement à l’intérieur des
critères d’acceptation établis par le fournisseur, enca-
drant des événements au cœur même du processus.
Cette marge importante entre les limites des cartes de
contrôle (normalité du processus) et ces critères d’accep-
tation (calibration et calcul du seuil) illustre bien la
contribution que pourraient amener de tels indicateurs
à titre préventif, d’autant plus que certains (contrôles
internes associés aux calibrateurs positifs) ne bénéfi-
cient pas de seuils spécifiés.
CONCLUSION ET PERSPECTIVES
Bien que l’examen des causes assignables de variation
ait suscité une analyse fine du processus, cela n’était pas
l’objectif principal de cette étude. Certains points sen-
sibles avaient déjà été appréhendés lors de la phase
préliminaire de qualification opérationnelle de la chaîne,
et l’approche statistique n’est pas nécessaire pour
J.M. Reifenberg et al.
Limite inférieure Limite supérieure
300 000 1 400 000
843 710 1 004 576
NS NS
136 396 206 708
200 000 800 000
413 493 451 400
NS NS
153 966 194 735
0 35 000
6 472 13 080
75 000 300 000
158 462 177 893
prendre conscience de la difficulté de standardiser cer-
taines opérations dans un contexte qui n’est pas entiè-
rement automatisé. L’intérêt de ce travail était, outre
d’en décrire le principe, de montrer l’échelle de
l’influence de ces points sensibles sur le comportement
d’une carte de contrôle.
Cette étude ne représente qu’une première étape de
mise en place d’une méthode qui ne doit pas être
réduite au seul outil statistique, mais devenir à terme un
réel outil d’autocontrôle pour la matériovigilance et la
réactovigilance. Sa performance passe avant tout par
son aptitude à faire réagir rapidement : cela implique la
possibilité de visualiser très rapidement les graphiques
(transfert en temps réel des données en sortie de chaîne
sur les cartes de contrôle), et de former le personnel afin
qu’il soit autonome pour l’interprétation des graphes et
la conduite à tenir face à l’apparition d’anomalies.
La mise en place et le suivi d’indicateurs qualité se
révèle d’une importance majeure pour quantifier les
dysfonctionnements et améliorer les processus. La ver-
sion 2000 des normes ISO 9002 cadrant depuis fin
1999 les principales activités de l’Établissement français
du sang Pyrénées-Méditerranée [11] est sur ce sujet plus
exigeante que la version précédente. Elle insiste en
particulier sur la notion de maîtrise des processus au
travers de tableaux de bord efficaces. Les cartes de
contrôle, mais également d’autres outils de la MSP, tels
que les indices de capabilité [12], représentent des
outils de choix pleinement adaptés à ces problémati-
ques ; ils mériteraient d’être plus largement exploités
dans d’autres secteurs du milieu transfusionnel, comme
les activités de prélèvement et de préparation des PSL.
Transfus Clin Biol 2001 ; 8 : 410–21
 Cartes de contrôle en transfusion
REMERCIEMENTS
Nous remercions Mr Jean-Louis Alain, chargé de mis-
sion à Qualipôle et spécialisé dans les outils de la MSP,
pour ses conseils méthodologiques, Christiane Segarra,
Nathalie Combet ainsi que toute l’équipe du labora-
toire de biologie moléculaire pour la relecture du manus-
crit et l’aide précieuse dans la recherche et l’analyse des
causes assignables de variation.
RÉFÉRENCES
1 Norme NF X 06-030. Application de la statistique – Guide
pour la mise en place de la Maîtrise Statistique des Processus.
2 Reifenberg JM. Contrôle qualité des produits sanguins labiles.
Rapport de mission, 1998. p. 1-114.
3 Cornillot C, Mercier B. Étude nationale de faisabilité. Introduc-
Transfus Clin Biol 2001 ; 8 : 410–21
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tion du dépistage génomique Viral en qualification biologique
des dons. Rapport final, juin 2000.
4 AFS. Caractéristiques des produits sanguins labiles. Paris : AFS ;
1995.
5 Coste J. Rapport final de la chaîne TMA évaluée par les EFS de
Bourgogne Franche Comté, Rhône Alpes, Pyrénées-
Méditerranée, mai 2000.
6 Norme NF X 06-031-1. Application de la Statistique – Cartes
de contrôle – Partie 1 : Cartes de contrôle de Shewhart aux
mesures.
7 Lamouille JL, Murry B, Potié C. La maîtrise statistique des
procédés (SPC). Démarche et outils. 2e édition. Paris : Afnor ;
1989. p. 1-126.
8 Schwartz D. Méthodes Statistiques à l’usage des médecins et des
biologistes. 2e édition. Paris : Flammarion Médecine-Sciences ;
1963. p. 67-73.
9 Centre d’enseignement et de recherche de statistique appliquée
(CERESTA) : tables statistiques, 17.
10 Coste J, Segarra C, Lemaire JM. Rapport de qualification de la
chaîne TMA de l’EFS PM site de Montpellier, avril 2000.
11 Lettre Qualipôle n ° 36, avril 2000.
12 Norme NF X 06-033. Aptitude des moyens de production et
des processus de fabrication, 1995.