Aula 2

Cultura de Células e Tecidos Vegetais

Introdução à Cultura de
Células e Tecidos Vegetais

Profa. Dra. Débora Jacomini

Toledo, 2019
 Histórico
Definição:
“Cultivo asséptico de protoplastos, células,
tecidos ou órgãos vegetais sob condições que
induzem à multiplicação celular ou à
regeneração de órgão ou tecidos de plantas”.

Princípio:
Totipotencialidade das células vegetais –
capacidade de se dividir e desenvolver uma
estrutura nova e diferenciada ou um organismo
completo.
 Histórico
Baseado Na Teoria Celular: Schleiden, 1838; Schwann,
1839

• Organismos vivos são constituídos por uma ou mais

células;
• Reações químicas de um organismo vivo ocorrem
dentro das células;
• Células originam-se de outras células;
• Células contêm a informação genética dos organismos
que lhes originaram e esta é passada para células filhas.
 Histórico
HABERLANDT (1902)
• Cultivo de tecidos somáticos de várias espécies de
plantas em solução nutritiva – Não obteve resposta,
falta de fitohormônios, espécies inadequadas ou uso
de tecidos maduros, etc;

HANNIG (1904)
• Primeiro a cultivar embriões imaturos in vitro.
Verificou a necessidade da suplementação de açúcares
e nitrogênio ao meio mineral para a germinação dos
embriões;
 Histórico
KNUDSON (1922)
• Cultivou embriões de orquídeas na ausência de
micorrizas. Verificou a importância da sacarose no
crescimento e desenvolvimento destes embriões in
vitro;

ROBBINS E KOTTE (1922)

• Pioneiros na cultura de órgãos isolados (raízes de Zea
mays e Pisum sativum); Ápices radiculares como
fonte de explantes para o estabelecimento de
culturas in vitro;
 Histórico
DIETERICH (1924)
• Mostrou que embriões cultivados in vitro não
apresentavam dormência;

LAIBACH (1925)
• Uso da cultura de embriões no melhoramento
genético; Recuperação de plantas híbridas de
cruzamentos incompatíveis entre linum austricum x
l. Perenne;
 Histórico
WHITE (1934)
• Primeiro a cultivar e manter um crescimento de ápices
radiculares de lycopersicon esculentum por um período
ilimitado, usando um meio líquido;
• Meio constituído basicamente de sais minerais, sacarose e
extrato de levedura. Posteriormente, substituiu o extrato de
levedura por vitaminas do grupo b, demonstrando a
importância, principalmente da tiamina, para o crescimento
das raízes in vitro;

KOGH ET AL. (1934)

• Descoberta da primeira auxina (ácido 3-indolil-acético);
Manutenção indefinida da cultura de calos de cenoura
(gautheret, 1939; nobécourt, 1939).
 Histórico
BALL (1946)
• Regeneração de plantas a partir de ápices caulinares de
Lupinus e Tropaeolum;

SKOOG & TSUI (1948)

• Formação de parte aérea e raiz a partir de calos de tabaco
em função da relação auxina/adenina e alto nível de
fosfato;
 Histórico
MOREL E MARTIN (1952)
• Recuperação de plantas de Dália livres de vírus a partir
de ápices caulinares – Desinfecção.

Miller Et Al. (1955)

• Descoberta da cinetina (primeira citocinina);
• Sinergismo de auxina/citocinina
 Histórico
STEWARD ET AL. (1958) E REINERT (1959)
• Observaram a formação de embriões somáticos em calos
de cenoura; Potencial para propagação em larga escala;

MOREL (1960)
• Utilizou mesma tecnologia para obter plantas de
orquídeas livres de vírus a partir de ápices caulinares;
 Histórico
COCKING (1960)
• Isolamento de protoplastos de plantas, por meio de
enzimas; Obtenção de híbridos interespecíficos e
intergenéricos; Engenharia genética;
 Histórico
KANTA (1960) E KANTA ET AL. (1962)
• Fertilização in vitro
• Técnicas de polinização intra-ovariana e polinização in
vitro; Óvulos isolados em cultura e depósito de grãos
de pólen, fecundação e formação do embrião;
• Recuperação de híbridos de cruzamentos
incompatíveis;

• MURASHIGE E SKOOG (1962)

• Meio de cultura para tabaco, hoje o mais utilizado
em cultura de tecidos (meio MS); Adição de extrato
de folhas de fumo ao meio de cultura de calo;
 Biotecnologia Vegetal
O que é?
Manipulação de Microrganismo, plantas e
animais;

Micropropagação:
Propagação clonal por técnicas de cultura in
vitro de um genótipo selecionado;

Objetivo:
Obtenção de processos e produtos de
interesse;
 Biotecnologia
• Conceitos:

• Utilização de sistemas celulares para a obtenção de

produtos e desenvolvimento de processos (CNPq);

• Aplicação dos princípios científicos e de engenharia

para o processamento de materiais por agentes
biológicos proporcionando produtos ou serviços
(FAO,1989);

• Técnicas de regeneração in vitro

e do DNA recombinante
(Fernandes, 1987).
 Classificação

• 1- Cultura de órgãos
• Raízes isoladas e/ou parte aérea;

• 2- Cultura de Meristemas;

• 3- Cultura de apices caulinares;

• 4- Cultura de segmentos nodais;

• 5- Cultura de embriões;

• 6- Cultura de células.
 Classificação
• Classificações:
• 1- Cultura de órgãos:
• Célula diferenciada: desenvolve forma especializada, quando a
morfologia ou função (fisiologia).

• Diferenciação é o processo de diversificação das caracterísitcas

bioquímicas, anatômicas, morfológicas e fisiológicas, a partir do
estado meristemático ou juvenil para o adulto.
 Classificação
• Classificações:
• 2- Cultura de Meristemas:

• Tecido composto de células indiferenciadas, que

formam novas células por divisão mitótica;

• Formado de 20/100
cél. isodiamétricas
indiferenciadas, com
caracterísitcas
embrionárias
primárias.
 Classificação
• Classificações:
• 3- Cultura de ápices caulinares:

• Segmento do ápice do caule,

composto pelo meristema apical
(0,05 a 1,0 mm), juntamente com
os primórdios foliares e folhas
emergentes;
 Classificação
• Classificações:
• 4- Cultura de segmentos
nodais:

• Segmento dos nós do caule,

composto pelo meristema
nodal (0,05 a 1,0 mm),
juntamente com os
primórdios foliares e folhas
emergentes;
 Classificação
• Classificações:
• 5- Cultura de embriões: Embriogênese:
• Processo pelo qual novos indivíduos se originam a
partir de células simples, que não são produtos da
fusão de gametas e que não apresentam conexões
vasculares com os tecidos maternos.
 Classificação
• Classificações:
• 6- Cultura de células:
• Calos: Agregados celulares desorganizados que se originam da
proliferação desordenada a partir de tecidos ou órgãos
cultivados in vitro.
• Estado caracterizado por células isodiamétricas, com pouco ou
nenhum vacúolo e grande núcleo.
 Classificação
• Classificações:
• 6- Cultura de Células:
• Crescimento Desorganizado: os tecidos formados in
vitro não apresentam estruturas claramente definidas,
com um número limitado de células especializadas e
diferenciadas:
 Onde Estudar!???

• CID, L. P. B. Cultivo in
vitro de plantas. 4ª
edição. Brasil: Brasília –
DF, EMBRAPA, 2015.
 Aula 3
Cultura de Células e Tecidos Vegetais

Aspectos Biológicos e
Fisiológicos

Profa. Dra. Débora Jacomini

Toledo, 2019