Guía Ejercicios Espectrometría Catedra

Bioquímica Clínica Básica 2018

1. Una muestra de 25.0 ml que contiene Cu2+ dio una señal en el instrumento de 23.6 unidades (corregida por un
blanco). Cuando se añadieron exactamente 0.500 ml de Cu(NO3)2 0.0287 M a la solución, la señal aumentó a
37.9 unidades. Calcule la concentración molar de Cu2+ si se supone que la señal fue directamente proporcional
a la concentración del analito. (R: 0.047 M)

2. Los datos de la tabla siguiente se obtuvieron durante una determinación colorimétrica de glucosa en suero
sanguíneo.
Concentración Glucosa Absorbancia
(mM)
0 0.02
2 0.15
4 0.294
6 0.434
8 0.570
10 0.704

a) Si se supone que hay una relación lineal, determine la estimación de mínimos cuadrados de la pendiente y la
ordenada al origen. (R: Y= 0,0692x- 0,0048)
b) Una muestra de suero tuvo una absorbancia de 0.350. Calcule la concentración de glucosa (R: 5,13 mM)

3. Se midieron exactamente alícuotas de 5.00 ml de una disolución que contiene fenobarbital en matraces
volumétricos y se hicieron básicas con KOH. Después se vaciaron en cada matraz los siguientes volúmenes de
una solución patrón que contiene 2.000 mg/mL de fenobarbital: 0.000, 0.500, 1.00, 1.50 y 2.00 ml y la mezcla
se diluyó a cierto volumen. La fluorescencia de cada una de estas soluciones se midió con un fluorímetro, que
dio los valores de 3.26, 4.80, 6.41, 8.02 y 9.56, respectivamente.
a) Grafique los datos y deduzca la ecuación de mínimos cuadrados para los datos. (R: A= 3,246Vs + 3,164)
b) Con la gráfica de a) calcule la concentración de fenobarbital en la incógnita. (R: 410 mg/ml)

4. Los siguientes datos de calibración de obtuvieron mediante un método instrumental para determinar las
especies X en solución acuosa
Concentración X N° Repeticiones Señal Analítica Desviación Estándar
(ppm) media
0 25 0.031 0.0079
2 5 0.173 0.0094
6 5 0.422 0.0084
10 5 0.702 0.0084
14 5 0.956 0.0085
18 5 1.248 0.0110

a) Calcule la sensibilidad de calibración (R: y=0,0671x -0,0018, Sensibilidad= m= 0,0671).

b) Determine la sensibilidad analítica en cada concentración del analito (R: 7,14; 7,99; 7,99; 7,89; 6,1)
c) ¿Cuál es el límite de detección para el método? (R: LOD= 0,35)
5. Los datos siguientes se obtuvieron al pesar en forma repetida un peso patrón de 1.004 g en una balanza:

1.003 1.000 1.001

1.004 1.005 1.006
1.001 0.999 1.007

a) Suponga que el ruido es aleatorio y calcule la relación señal/ruido de la balanza. (S/N= Promedio
datos/Desviación Estándar) (R: 380)

6. Convierta los siguientes valores de absorbancia en porcentaje de transmitancia:

a) 0.278 b) 1.499 c) 0.039 (R: a) 0,297; b) 0,0317; c) 0,914)

7. Convierta los siguientes porcentajes de transmitancia en valores de absorbancia:

a) 29.9 b) 86.1 c) 2.97 (R: a) 0,524; b) 0,065; c) 1,53)

8. Una solución de X cuya concentración era de 3.78 * 10-3 M tenía una transmitancia de 0.212 cuando se midió
en una celda de 2.00 cm. ¿Qué concentración de X se requerirá para que la transmitancia se incremente por
un factor de 3 cuando se use una celda de 1,00 cm? (R: 22,7 mM)

9. La absortividad molar de un compuesto es de 3.03*103 Lcm_1mol_1. ¿Qué concentración de compuesto se

requiere para producir una solucion que tenga una transmitancia de 9,53% en una celda de 2.50 cm? (R:
1,34*10-4 M)

10. Una solución que contiene 6.23 ppm KMnO4 presenta una transmitancia de 0.195 en una celda de 1.00 cm a
520 nm. Calcule la absortividad del KMnO4 a 520 nm. (R: =114 g/L_1*cm_1)

11. Una solución que contiene 5.24 mg/100 mL de A (335 g/mol) presenta una transmitancia de 55.2% en una
celda de 1.50 cm a 425 nm. Calcule la absortividad molar de A en esta longitud de onda. (R: =1102 M_1 cm_1)

12. Las absorbancias de soluciones que contienen K2CrO4 en 0.05 M KOH se midieron en una celda de 1 cm a 375
nm. Se obtuvieron los siguientes resultados:

Conc. De K2CrO4 (g/L) A (375 nm)

0.0050 0.123
0.0100 0.247
0.0200 0.494
0.0300 0.742
0.0400 0.991

Determine la absortividad del cromato, K2CrO4 en L/g-1cm-1 y la absortividad molar del cromato en L/mol-1 cm-1
a 375 nm. (R:  =24,79 L/ g-1 cm-1; = 4813 L/mol-1 cm-1)
13. Se quiere determinar un compuesto X mediante espectrofotometría UV-visible. Se elabora una curva de
calibración a partir de soluciones patrón de X con los resultados siguientes: 0.50 ppm, A = 0.24; 1.5 ppm, A=
0.36; 2.5 ppm, A = 0.44; 3.5 ppm, A= 0.59; 4.5 ppm, A = 0.70. solución de concentración desconocida de X
tiene una absorbancia de A= 0.50. Determine la pendiente y la intersección con el eje Y de la curva de
calibración, la concentración de la solución de X y la desviación estándar en la concentración de X. Trace una
gráfica de la curva de calibración y determine la concentración incógnita en forma manual en la gráfica.
Compare ésta con la que se obtiene en la recta de regresión. (R: m=0,115; b=0,1785; Conc X=2,8 ppm; 1,12)

14. Se sacan alícuotas de 5 mL de la muestra y se vacían en matraces volumétricos de 50.00 mL. Luego, en cada
matraz, se agregan con una pipeta 0.00, 2.00, 4.00, 6.00 y 8.00 mL de una solución patrón que contiene 10.00
μM de nitrito, y se añaden los reactivos que forman el color. Después de la solución por volumen, se mide la
absorbancia de cada una de las cinco soluciones a 550 nm. Las absorbancias son 0.139, 0.299, 0.486, 0.689 y
0.865. Determine la concentración de nitrito en la muestra original. (R: y= 0,0921Vs + 0,1272; Cx= 2,76 uM)