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FACULTAD DE CIENCAS EXACTAS, NATURALES Y

AGROPECUARIAS
GUIA DE LABORATORIO
ORGANIZACIÓN CELULAR
ELABORADA POR: Lic. Biología CECILIA GALVIS BAUTISTA

1. Introducción
La célula es la unidad básica de la vida, por cuanto un organismo es una única célula o está formado por miles o millones de células, a
esta afirmación se llegó después de más de cien años de investigación experimental y gracias a avances tecnológicos en la mejora de
microscopios, según Becker (2007).
El descubrimiento de las células fue posible a partir de la invención del microscopio compuesto, invento fraguado por la inagotable
curiosidad del holandés Antony Van Leeuwenhoek (1632-1723), considerado el fundador de la histología, es decir el estudio
microscópico de los tejidos. Gracias a sus lentes, Van Leeuwenhoek, fue el primero en observar bacterias, fibras musculares del
tejido cardíaco y otras células, ya que el ojo humano solo tiene la capacidad de observar a simple vista, objetos del tamaño desde un
poco menos de 1 mm, por tanto, las células escapan al poder de resolución del ojo humano. (El poder de resolución se define como
la distancia mínima entre dos puntos para que puedan verse como objetos separados).
El conocimiento de la célula y el papel que juega en la formación de los tejidos en seres pluricelulares, animales y vegetales ha
avanzado de manera paralela al perfeccionamiento de las
técnicas de microscopía. La mayoría de las células
vegetales superiores y animales mide entre 10 y 50 µm de
diámetro en cambio las células de las bacterias suelen
medir entre 1 a 5 µm de diámetro, Becker (2007). La mayor
parte de las células son microscópicas, pero su tamaño y
forma varían en un rango muy amplio, lo cual se relaciona
con las funciones que éstas realizan.
La idea de que las células son las unidades fundamentales
de todos los organismos vivos es la base de la teoría
celular propuesta por Matthias Schleiden, Theodor
Schwann y Rudolf Virchow, que constituye uno de los
principios fundamentales de la biología y establece que:
- Todos los seres vivos están formados por células, por
esto es la unidad anatómica de todos los seres vivos.
- Las funciones de un ser vivo son el resultado de la
interacción de las células que lo componen, por esto es la unidad fisiológica de todos los seres vivos.
- Toda célula sólo puede tener origen en una célula progenitora.
- Toda célula tiene la información hereditaria del organismo del cual forma parte, y esta información pasa de una célula progenitora a
una célula hija, por esto es la unidad reproductiva y genética de todo ser vivo.
Según su organización interna las células se clasifican en dos grupos: en procariotas y en eucariotas.

2. Objetivos
- Establecer y describir las diferencias y semejanzas morfológicas, estructurales, forma y tamaño celular, entre los distintos tipos
celulares observados a través de observación de células vivas y de micropreparados.
- Identificar y diferenciar entre individuos procariotas y eucariotas unicelulares, coloniales y pluricelulares microscópicos.
- Identificar estructuras y organelos celulares.
- Adquirir habilidades y destrezas en el manejo del microscopio óptico compuesto, realizar montajes de muestras, enfocar, ubicarlas en
el campo de visión.
3. Equipos, materiales y reactivos
Materiales Reactivos Equipos
Papel de arroz, pipetas Pasteur, baja lenguas, frascos lavadores, Aceite de inmersión Microscopio óptico
gradillas de tinción, fósforos. Azul de metileno, compuesto.
El estudiante debe traer: cebolla cabezona (Allium cepa), Etanol al 70%, Mecheros
planta acuática de acuario Elodea (Elodea canadensis), kumis Lugol
preferiblemente casero, agua de charca o estancada, media
hoja milimetrada, láminas portaobjetos, láminas cubreobjetos,
cuchillas, lápices de colores, lanilla, toalla pequeña o papel
absorbente.

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4. Procedimiento
1. MEDIDAS MICROSCOPICAS
La unidad de longitud más frecuentemente usada en microscopia es la micra, cuyo símbolo es la letra griega “(μ)” μm y
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que equivale a una milésima de milímetro (1/10 mm). En los laboratorios de investigación se utiliza un instrumento, el
micrómetro o retículo micrométrico, para determinar las medidas microscópicas (Cuervo et al., 2010).
A. Coloque un pedazo de papel milimetrado sobre el portaobjeto de tal manera que, al enfocar al microscopio pueda
observarlo. Mida el diámetro del campo correspondiente al objetivo de menor aumento contando el número de
cuadriculas observadas.
¿Cuánto mide el diámetro del campo del objetivo de menor aumento?
En milímetros: En micras:
B. Con el dato anterior es posible determinar el diámetro del campo correspondiente al objetivo de mayor aumento, basta
con dividir el diámetro encontrado por la razón entre las magnificaciones del objetivo de mayor aumento y de menor
aumento. Por ejemplo, si el aumento del objetivo de mayor significación es de 45X y el otro es de 15X la razón
mencionada será 45/15=3; ahora si el campo correspondiente al objetivo de menor aumento tiene un diámetro de
1500mm, el diámetro de campo para el objetivo de mayor aumento será 1500/3=500mm.
¿Cuánto mide el diámetro de campo del objetivo de mayor aumento?
En milímetros: En micras:
2. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS PROCARIOTAS
Tome con una pipeta Pasteur una pequeña cantidad de kumis y extienda la muestra (como muestra el gráfico 1) con una
lámina portaobjetos en posición de 45º arrastrar suavemente la muestra hacia el otro extremo. Después flamee la
muestra rápidamente sobre el mechero, evitando que esta se queme. Agregar una gota de azul de metileno y esperar 5
minutos. Lavar la muestra con agua, escurrir y esperar a que se seque la lámina. Observar al microscopio con los
objetivos 10X, 40X y 100X.

- Realice gráficos de lo observado en cada objetivo. Describa sus observaciones.


- ¿con cuál objetivo pudo visualizar las células que encontró en la muestra? Justifique su respuesta.
- ¿Qué morfologías celulares observó?
- ¿Qué estructuras celulares pudo identificar?
- ¿Puede calcular el tamaño de una de las células qué observa?

3. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS EUCARIOTAS


3.1 Células animales (células epiteliales de la mucosa oral)
1. Para obtener las células epiteliales, raspe suavemente el interior de la mejilla con un baja-lenguas. Repita la
operación varias veces y deposite la mucosa blanca obtenida en el portaobjetos.
2. Extienda la muestra obtenida con el baja lenguas sobre la porta objetos
3. Caliente suavemente el porta objetos con el frotis de la mucosa suavemente a la llama del mechero. Páselo por la
llama varias veces sin detenerlo, no debe calentarse tanto como para que lo note en los dedos, se secará
rápidamente y se fijará la preparación.
4. Adicione unas gotas de azul de metileno sobre la muestra, evite el exceso. Espere 2 minutos.
5. Elimine el exceso de colorante vertiendo, con precaución agua sobre la muestra teñida. Coloque el porta objeto,
ligeramente inclinado. Cuando el agua se vea clara, observará en el porta objetos puntos azules, que indican grupos
de células teñidas.
6. Describa sus observaciones: Señale las estructuras y organelos celulares observados en los distintos aumentos
microscópicos, ¿Qué forma tienen las células?, ¿Por qué se utilizó azul de metileno?
3.2 Observación de organismos eucariotas unicelulares y coloniales
1. Tome el agua de charca o de agua estancada. (también puede tomar agua de floreros, depósitos de agua de
bromeliáceas o pocetas de las plantas, etc., el propósito es que traiga muestra de agua con microorganismos)

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Deposite 1 gota de agua sobre el portaobjetos, coloque encima el cubre objetos y observe la preparación al
microscopio en 10X, 40X y 100X.
- Observe primero en menor aumento e identifique individuos unicelulares, coloniales especialmente.
- Elabore gráficos de lo observado en cada objetivo. Describa sus observaciones, enfoque sus observaciones a
identificar y diferenciar entre individuos unicelulares, coloniales y pluricelulares microscópicos.
- Señale las estructuras y organelos celulares observados en los distintos aumentos microscópicos.
- ¿Qué forma tienen las células?

3.3 Células epidérmicas de la cebolla


A. Tome un bulbo de cebolla (Allium cepa) y córtelo en 4 partes, observe cómo se separa en capas, llamadas catafilos.
Tome un catafilo de tal forma que la parte cóncava quede mirando hacia Usted y con los dedos rómpalo, de tal manera
que se desprenda una delgada capa transparente llamada epidermis.
Coloque en una lámina portaobjetos una gota de agua, luego corte con una cuchilla una porción de epidermis y ubíquela
de modo que la superficie que estaba en contacto con el catafilo quede hacia arriba, cúbrala con una laminilla. Realice las
observaciones en el microscopio a 4X, 10X y 40X, dibuje e identifique las estructuras visualizadas.
B. Retire la preparación del microscopio y colóquele una gota de Lugol en el borde del cubreobjetos para que la solución
penetre por difusión. Retire el líquido sobrenadante con una toalla de papel. Observe al microscopio nuevamente y dibuje
las observaciones a 4X, 10X, 40X y 100X
- ¿Qué forma tienen estas células? ¿Poseen adaptaciones relacionadas con su función?
- Con el objetivo de 10X ¿cuál es el color y la forma del núcleo después de la adición del Lugol?
- ¿Cuál es la otra estructura celular que se observa dentro del núcleo?
- ¿Qué diferencias se encuentran entre la célula teñida y la que no lo está?
- Compara las células de la cebolla con las células de la mucosa oral. ¿En qué se asemejan, en qué se diferencian?

3.4 observación de cloroplastos


Coloque una hoja de Elodea sp. en un portaobjetos, agregue una gota de agua y cubra con una laminilla. Observe con el
objetivo de 10X, 40X y 100X. Identifique las siguientes estructuras: pared celular, citoplasma, vacuola central, cloroplastos
y núcleo.

Para orientar la elaboración del informe…


Elabore un cuadro comparativo sobre las principales características de la célula eucariota – procariota, y otro sobre la
célula vegetal y célula animal.
Confronte lo consultado con los hallazgos encontrados a través de las observaciones realizadas
Establezca comparaciones entre los diferentes tipos de células observadas, clasifíquelas de acuerdo al reino al que
pertenecen, describa si encuentra alguna característica en particular.
A partir de lo observado ¿Qué características y estructuras le permiten clasificar las células en procariota o en eucariotas?
¿Cuáles son las diferencias principales entre las células vegetales y animales?
¿Cuáles son las diferencias principales entre organismos unicelulares, coloniales o pluricelulares?ç

Bibliografía
Chataing, B. & Nieves, E. (2009) (1st ed.). Manual de laboratorio de Biología. Universidad de los Andes.
Cooper’s GM. 2004. La célula. España: Marban Libros.
Cuervo, R., Gómez, F., Narváez, M. (2010). Manual de prácticas de laboratorio - Biología. Universidad de San Buena
Aventura Cali.
http://ies.rosachacel.colmenarviejo.educa.madrid.org/aurora/adjuntos/labora3/celulas_animales.pdf
https://portalacademico.cch.unam.mx/materiales/prof/matdidac/sitpro/exp/bio/bio1/GuiaBioI/Anexo7EST.pdf
http://dea.unsj.edu.ar/biologia1/proca.pdf
https://ecciambiental.files.wordpress.com/2014/05/guia-3-cc3a9lula-1.pdf

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