Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias
Biológicas
Departamento de Fisiología
Laboratorio de Fisiología celular
Práctica 3: Estudio de la penetración
de sustancias a células normales
Grupo: 4FM1
Equipo: 4

Integrantes
Profesores:
*Duran Escobedo José Andres
*Jessica Campos Blazquez
* Gomez Macias Mariana del Carmen
*Ana Lilia Gutiérrez Lozano
* González Hidalgo Claudia Alejandra
*Sergio Roberto Zamudio Hernandez
* Ramírez Luz Gerardo Sajin
 Membrana celular
Funciones
-Delimita a la célula
- Transporte de
sustancias
-Reconocimiento celular
-Comunicación celular
-Endocitosis y exocitosis

Características
­Permeabilidad selectiva
­Propiedad de autosellada
­Asimétricas
­Coloides
­5­10 nm grosor

INTRODUCCIÓN
 Composición de la membrana celular

INTRODUCCIÓN
 Tipos de transporte

*Transporte pasivo

*Transporte activo

INTRODUCCIÓN
 Transporte pasivo

● Energía cinética
de las moléculas
● Difusión
● Gradiente de
concentración

Difusión simple

Difusión facilitada

INTRODUCCIÓN
 A través de la bicapa Ley de Fick J= D ∆C/ ∆X

Bajo PM
Apolares
Lipofílicas

Selectivos
Difusión simple

A través de canales
iónicos
Estimulos

Gradiente de presión
osmótica
π=RTC i
Tonicidad

Ósmosis Movimiento de H 2 O

Osmolaridad
 ¿Qué es la osmosis?

Difusión que tiene lugar entre dos

líquidos o gases capaces de
mezclarse a través de una
membrana semipermeable.

INTRODUCCIÓN
 Presión osmótica

Es la presión ejercida en las

células debido a la existencia
de diferentes concentraciones
de soluto en dos
compartimentos celulares
unidos por una membrana
semipermeable .

INTRODUCCIÓN
 Osmolaridad

 Es la medida que
expresa el nivel de
concentración de
solutos en una
solución

INTRODUCCIÓN
 Tonicidad

INTRODUCCIÓN
Difusión facilitada

Tamaño y polaridad
Cantidad de
transportadores
Se pueden inhibir
Se pueden saturar
Son específicos
 Transporte activo primario

● Depende de bombas
● Es electrogénica
● Genera un gradiente
electroquímico

INTRODUCCIÓN
 Transporte activo secundario

Depende de
cotransportadores:

­Altiporte

­Simporte

INTRODUCCIÓN
 Objetivos
❏ Determinar la concentración hemolizante de distintas soluciones de
electrolitos y no electrolitos en eritrocitos humanos.
❏ Determinar la osmolaridad hemolizante de distintas soluciones de
electrolitos y no electrolitos en eritrocitos humanos
❏ Determinar el tiempo de hemólisis de una serie homologa de
alcoholes con diferente coeficiente de partición

OBJETIVOS
 Fundamento
¿Por que obtuvimos la muestra de sangre por punción venosa ?

La toma de muestra de sangre se obtiene por punción venosa, arterial o
capilar, aunque de forma general se obtiene por punción venosa debido a:
*Causa un menor traumatismo para el paciente.
*Posibilidad de un volumen suficiente de sangre.
*Mayor facilidad para el técnico.

FUNDAMENTO
 ¿Por qué ocupamos los eritrocitos?
*Se pueden obtener fácilmente

* Puede sufrir hemólisis al estar en
contacto con una solución
hipertónica

* Son células muy permeables al
agua

FUNDAMENTO
 Uso del NaCl al 0.9%
La solución salina es
ocupada porque es una
concentración isotónica
por lo que no afecta a los
eritrocitos, haciendo que
no haya hemólisis.

FUNDAMENTO
 Coeficiente de partición

FUNDAMENTO
 Patrones positivo y negativo

FUNDAMENTO
 Preparación de la suspensión de glóbulos rojos

En un tubo de ensayo
Extraer sangre por
con 5 mL de NaCl al
punción venosa en
0.2M adicionar 5 gotas
un tubo heparinizado
de sangre

Preparación de los patrones de comparación

Añada 5 Observar a
gotas de la Al primero 5 Al segundo 5 travès del
suspensión a mL de agua mL de NaCl líquido si
2 tubos de destilada 0.2M ocurre
ensaye hemólisis

METODOLOGIA
 ● Soluciones de NaCl
Determinar la ● Sustancias de electrolitos y no
concentración electrolitos (sacarosa, KCl, BaCl2)
hemolizante

● 1M
● 0.5M
Diluir las ● 0.25M
soluciones a las ● 0.125M
concentraciones ● 0.0625M

Adicionar 5
gotas de la
suspensión de
eritrocitos

Realizar lecturas
cada 30 s

METODOLOGIA
 Realizar para el
alcohol metílico, Tomar el tiempo de
etílico, propílico y hemólisis
butílico

En un tubo de ensaye
Colocando una hoja
adicionar 5 mL del
blanca con letras atrás
alcohol

Adicionar 5 gotas de Comparar con el tubo
la suspensión de patrón (hubo
eritrocitos hemólisis)
  Resultados

Figura 1.­ Efecto de la concentración de soluciones de electrolitos (NaCl, KCl y BaCl 2) y
no electrolitos (sacarosa) en los eritrocitos de una suspensión de sangre humana en
solución salina isotónica.

RESULTADOS
Figura 2.­ Efecto de la osmolaridad de soluciones de electrolitos (NaCl, KCl y BaCl 2) y
no electrolitos (sacarosa) en los eritrocitos de una suspensión de sangre humana en
solución salina isotónica.
Figura 3.­ Relación entre el coeficiente de partición con el tiempo (s) de hemólisis de los
eritrocitos de una suspensión de sangre humana en solución salina isotónica.
Figura 4.­ Relación del peso molecular de sustancias lipofílicas con el tiempo (s) de
hemólisis de eritrocitos de una suspensión de sangre humana en solución salina
isotónica.
Figura 5.­ Relación del peso molecular y el coeficiente de partición con el tiempo (s) de
hemólisis de los eritrocitos de una suspensión de sangre humana con solución salina
isotónica.
Análisis de resultados
 Conclusiones
● Los eritrocitos en soluciones hipotonicas tienen distinta concentración
osmolaridad hemolizante, su osmolaridad dependerá del grado de
disociación del electrolito
● A mayor coeficiente de partición menor tiempo se toma en llegar a la
hemólisis
● El tamaño de una molécula no influye en el tiempo del paso de esta a
través de la membrana plasmática de la célula, si no la liposolubilidad
de dicha molécula.

CONCLUSION
 Bibliografía
Guyton, A.C.& Hall, J.E. (1996). "Tratado de Fisiología médica". 9ª Edición.
Interamericana­McGraw.
•
Ganong, W.F. (1994). "Fisiología Médica". 13ª Edición. El manual moderno.
México.