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Práctica Nº 3
I. Objetivos
Realizar la observacioí n de ceí lulas sanguííneas tras una tincioí n de Wright de un
frotis sanguííneo
Reconocer los detalles estructurales de ceí lulas de mohos ambientales.
Realizar una tincioí n simple a una suspensioí n de levaduras y observar su
morfologíía y estructura con un microscopio oí ptico.
Los seres vivos estaí n formados por ceí lulas, pequenñ os compartimientos rodeados
de membrana y llenos de una solucioí n acuosa concentrada de compuestos
quíímicos. La historia de este descubrimiento se remonta al anñ o 1665 cuando el
fíísico ingleí s Robert Hooke (1665-1703), encontroí que la corteza del alcornoque
Quercus suí ber, y los tallos de diversas plantas estaban formados por níítidas hileras
de compartimientos de gruesas paredes que le recordaron un panal de abejas, por
lo cual les llamoí ceí lulas. Posteriormente, en el anñ o 1839, el botaí nico Matthíías
Schleiden y el zooí logo Theodor Schwann, despueí s de realizar numerosas
investigaciones independientes en diversos tejidos vegetales y animales, llegaron a
concluir que todos los seres vivos, independientemente de su clase, estaban
formados por ceí lulas. Esta afirmacioí n pasoí a constituir una de las maí s amplias y
fundamentales de todas las generalizaciones bioloí gicas conocidas como la Teoríía
Celular.
La gran variedad de formas, tamanñ os y tipos de asociacioí n que presentan las
ceí lulas, corresponden a una adaptacioí n evolutiva a diferentes ambientes o a
distintas funciones especializadas dentro del organismo celular. Sin embargo,
dentro de la diversidad, las ceí lulas deben poseer tres estructuras baí sicas: una
membrana celular, que separe a la ceí lula y, a su vez, la relacione con el medio, el
ADN, que contenga instrucciones para el control de las funciones vitales, para el
crecimiento y especializacioí n celular y una maquinaria metaboí lica para obtener
energíía del medio y utilizarla en la mantencioí n de los procesos vitales.
Estos tres requisitos baí sicos, soí lo se cumplen en dos formas de organizacioí n de
distinta complejidad: la organizacioí n procarionte y el eucarionte.
3.1 Materiales.
Portaobjetos
Lanceta esteí ril
Alcohol
Piseta con agua destilada
Puente de tincioí n
Colorante Wright
Aceite de inmersioí n
Microscopio compuesto
3.2 Procedimiento.
a) Realización del frotis o extensión sanguínea
1. Con la lanceta esteí ril realizar una puncioí n en el dedo medio
Departamento Acadeí mico de Microbiologíía y Parasitologíía Baí sica y Aplicada, 1
Facultad de Farmacia y Bioquíímica-UNMSM
Guíía de Praí cticas de Biologíía Celular 2016-
I
2. Se deposita una gota de sangre a 1cm del borde derecho del portaobjeto
3. Sujetando el portaobjeto con la mano izquierda, el otro con la mano derecha se
apoya este uí ltimo sobre el primero con un aí ngulo de 45º
4. Se hace retroceder el portaobjetos de la mano derecha hasta la gota de sangre,
esta se extiende por capilaridad. Se lleva el portaobjetos hacia adelante con
decisioí n.
5. La extensioí n no debe llegar a los bordes, ni al derecho ni al izquierdo, ya que
las ceí lulas maí s voluminosas se quedaríían en los bordes; por ello antes de
llegar al final se eleva la mano derecha.
6. Dejar secar el frotis.
4.1 Materiales.
Material Bioloí gico: mohos ambientales
Laí minas portaobjetos
Laí minas cubreobjetos
Azul de metileno
Tijera
4.2 Procedimiento.
a) Colocar una gota de azul de metileno en la superficie de una laí mina
portaobjetos
b) Con ayuda de una cinta adhesiva, extraer fracciones de mohos ambientales y
colocar en la laí mina portaobjetos del punto a).
c) Observar al microscopio con el objetivo de 10X y 40X
d) Anotar y dibujar sus observaciones
5.1 Materiales.
Levadura Saccharomyces cerevisiae
Portaobjetos
Cubreobjetos
Solucioí n salina fisioloí gica
Microscopio oí ptico compuesto
Colorante vital (azul de metileno)
Aceite de inmersioí n
5.2 Procedimiento.
1.- Coloca una gota de solucioí n salina fisioloí gica en un portaobjeto limpio
2.- Con un asa de siembra prepara una suspensioí n de levaduras en solucioí n salina
fisioloí gica
3.- Coloque una porcioí n de la suspensioí n en un portaobjeto limpio y cubra la
suspensioí n con un cubreobjetos, luego realice las observaciones con el objetivo
de 10X y 40X
4.- La porcioí n restante de la suspensioí n fije suavemente a la llama
5.- Posteriormente se tinñ e con III gotas de azul de metileno durante 5 minutos.
6.- Lave con agua destilada y seque cuidadosamente con papel de filtro
7.-Observar al microscopio con el objetivo de inmersioí n 100X y aceite de
inmersioí n.
8.- Anotar y dibujar sus observaciones
VI. CUESTIONARIO
1. Mencione las diferencias estructurales entre las ceí lulas eucariotas y
procariotas
2. Clasifica las ceí lulas observadas en procariotas y eucariotas.
3. Describa el fundamento de la tincioí n Wright y de Giemsa