Fluorometría

- La suma de todas las formas de energía que entran en la muestra debe ser igual a la
suma de todas las formas de energía que sale de la muestra, más la energía que queda
en el
- La luminiscencia se puede dividir en fluorescencia y fosforescencia (diferente
comportamiento de emisión luz)
- Se reserva el termino luminiscencia para referirse a fluorescencia y fosforescencia: luz
entrante – luz saliente
- Fosforescencia: una vez que cesa la materia es iluminada, la emisión puede persistir
durante un tiempo determinado

Fuente: Diferencia entre fluorimetro y espectrofluorimetro

- Lámpara de xenón o mercurio

- Espectrofluorimetro la radiación debe de ser continua se emplea una lámpara de
xenón a una elevada presión
- Lámpara mas corriente para fluorimetros de filtro es la lámpara de arco de mercurio
de baja presión equipado con una ventana fundida

Filtros y monocroma dores

- Se emplea tanto filtros de interferencia como los de absorción

Detectores

- La señal de fluorescencia típica es de baja intensidad, por lo tanto necesitan factores

de amplificación
- Los fotomultiplicadores son utilizados en instrumentos de fluorescencia sensible

Aplicación de métodos fluorimetricos

- Los métodos fluorescentes y fosforescentes se aplican a intervalos a la concentración

más baja que aquellos de espectrometría
- La sensibilidad en fluorometro puede mejorarse aumentando el Po por amplificación

Determinación flourimetricas de especies inorgánicas

- Método directo: implica la formación de un quelante fluorescente

- Método indirecto: basado en la disminución de fluorescencia que resulta de la acción
de la sustancia atenuadora que se determina. Esta técnica ha sido ampliamente usada
en la determinación de aniones

Determinación fluorimetrica de especies orgánicas

- Análisis de enzimas, coenzimas, productos naturales, esteroides, vitaminas

- Análisis de productos alimenticios y farmacéuticos

Métodos fosforimetricos

- Métodos fluorescentes y fosforescentes tienden a ser complementarios

- Empleado en la determinación de diferentes especies bioquímicas; acidos nucleicos,
etc.