Asignatura De Laboratorio de Farmacología

VI Ciclo de Estudios 2019-II

AGONISTAS Y ANTAGONISTAS DE RECEPTORES COLINÉRGICOS

DOCENTE:

Dr. Juan Santillán Martin

ALUMNA:

Tapia Quispe Denisse

HORARIO:

Viernes (12:30-2:00pm)

CHICLAYO-PERÚ

2019
 INTRODUCCIÓN

La acetilcolina es un neurotransmisor de origen natural y actúa

a nivel de unos receptores denominados muscarínicos y
nicotínicos con la función de producir acciones excitatorias o
inhibitorias.
La existencia de fármacos que tienen la misma facultad de
ejercer la función de la acetilcolina son denominados agonistas
colinérgicos, mientras que los antagonistas colinérgicos son
aquellos que se encargan de realizar los “efectos” opuestos.
Mediante el siguiente informe, conoceremos las bases teóricas
y observaremos las interacciones farmacinéticas y
farmacodinámicas de los agonistas y antagonistas
colinérgicos.

OBJETIVOS
Conocer la función de la acetilcolina y los tipos de
receptores en los que actúa.

Conocer la función y clasificación de los agonistas y

antagonistas colinérgicos.

Conocer el mecanismo de acción de la pilocarpina y

atropina.
 MARCO TEÓRICO
FARMACOLOGIA DE LOS SISTEMAS COLINERGICOS
NEUROTRANSMISIÓN COLINERGICA
Biosíntesis
La síntesis de acetilcolina implica la unión de colina con acetilcoenzima A,
reacción catalizada por una enzima específica la colina acetiltransferasa (o
colina acetilasa): Acetilcoenzima A Colina Acetilcolina + Coenzima A
acetiltransferasa Colina Dentro de las terminales nerviosas colinérgicas, esta
enzima se encuentra fijada laxamente a las vesículas sinápticas y, en presencia
de sales en concentraciones fisiológicas, la mayor parte de esta se solubiliza y
permanece en el citoplasma.
La enzima, como toda proteína neuronal, es sintetizada en los cuerpos de las
neuronas colinérgicas y migra a las terminaciones por transporte axonal
anterógrado. La acetil-CoA, para la síntesis de acetilcolina, se produce en las
mitocondrias a partir de tres fuentes: citrato, piruvato o acetato. Luego de ser
sintetizada, la acetil-CoA difunde al citoplasma para su posterior unión con la
colina. El otro elemento clave para la síntesis de acetilcolina es la colina, que
proviene predominantemente de fuentes exógenas a la terminal y es captada por
la misma. Así, la mayor producción de colina proviene de la captación
presináptica, la que se obtiene por la propia hidrólisis del transmisor liberado por
el terminal y una menor proporción se origina en fosfolípidos (fosfatidilcolina).
La colina se incorpora a los terminales presinápticos por un sistema de
transporte, sodio y ATP dependiente que se designa: captación colínica de alta
afinidad (Km: 1-5 mM) y es bloqueada por bajas concentraciones de hemicolinio-
3 (0,1 mM). Este proceso sólo opera en las terminaciones y es el que provee la
mayor parte de la colina necesaria para la síntesis del neurotransmisor. Un
proceso de captación colínica de baja afinidad se describe en cuerpos
neuronales y en tejidos y participa en la síntesis de fosfolípidos que contienen
colina. Se bloquea con hemicolinio-3 en altas concentraciones (10-100 mM). La
colina de captación reciente proviene en su mayor parte de la hidrólisis de la
acetilcolina liberada, por acción de la acetilcolinesterasa y es selectivamente
utilizada para la resíntesis del transmisor.
La máxima capacidad de síntesis de la acetilcolina es similar a la velocidad
máxima de la captación colínica de alta afinidad. En base a éste y otros
argumentos se considera que la captación colínica de alta afinidad es el sitio
regulador (paso limitante) de la síntesis de acetilcolina.
Almacenamiento
Las vesículas sinápticas de las terminaciones nerviosas colinérgicas son
estructuras lúcidas con un diámetro de 300 - 500 nm. Estas vesículas son las
unidades “cuánticas” de almacenamiento del transmisor y contienen proteínas
acídicas (vesiculina) y ATP. La acetilcolina, en parte, ingresa a las vesículas y,
en parte, se concentra (loosely bound: unida laxamente) en la cara externa de
las mismas. Liberación La llegada al terminal nervioso del potencial de acción
induce la descarga del transmisor al espacio sináptico. Es conocida la
postulación de Katz sobre liberación “cuántica”del neurotransmisor.
En condiciones basales (fuera de los períodos de estimulación nerviosa) en la
placa mioneural, se detectan los llamados “potenciales de placa miniaturas” que
corresponden a eventos de despolarización mínimos provocados por la
liberación desde la terminación colinérgica de unos pocos “paquetes” o “cuanta”
del transmisor, que no alcanzan para provocar una despolarización propagada
en la placa. A este tipo de liberación de acetilcolina se la denomina: liberación
espontánea.
La llegada del impulso nervioso a la terminación lleva a la liberación sincronizada
de numerosas vesículas (liberación inducida), los eventos de despolarización
postsinápticos se suman y se produce el potencial de placa motora que se
propaga luego a la fibra generando la contracción muscular. Se estima que cada
potencial de placa miniatura está compuesto por unos 1.000 eventos
elementales de combinación de moléculas de acetilcolina y receptores
nicotínicos de la placa.
Varios cientos (un múltiplo) de potenciales miniatura sincronizados generan un
potencial de placa completo. La vesícula, luego del ingreso transiente de Ca ++
y al activarse proteínas contráctiles del citoesqueleto, se adosa a la membrana
de la terminación y descarga su contenido íntegro al espacio sináptico (cuanta).
La demostración de la liberación exocitótica no es definitiva, pero hay evidencias
directas morfológicas(obtenidas con procedimientos de criofractura, imágenes
en omega, etc.) y bioquímicas (se libera la proteína acídica vesiculina) y,
también, indirectas, ya que, al abrirse el poro a través del cual se descarga el
transmisor, las vesículas se cargan con elementos presentes en el espacio
sináptico (peroxidasa, toxina tetánica) que pueden ser luego demostrados en el
interior del nervio colinérgico en las vesículas de endocitosis. Este proceso es un
verdadero "reciclaje" del organoide de almacenamiento.
Las vesículas de endocitosis transportan por flujo axonal retrógrado los
compuestos internalizados hasta los cuerpos (somas) neuronales donde pueden
seguir diversos caminos (transporte transináptico a terminales aferentes en el
caso de la toxina tetánica, degradación por lisosomas, etc.).
El calcio está involucrado de manera fundamental en el proceso de liberación y
su entrada a la terminación a través de un canal operado por voltaje (influjo
transiente de Ca ++) es una etapa fundamental entre la despolarización del
terminal nervioso y la descarga del transmisor (acoplamiento estímulo-secreción
o estímulo-liberación).
Terminación de acción
La neurotransmisión colinérgica concluye con la inactivación biológica de la
acetilcolina. Esta se produce por hidrólisis, catalizada por la acetilcolinesterasa,
con producción de colina (prácticamente sin acción sobre el receptor), que se
reincorpora por captación de alta afinidad para ser reutilizada en la síntesis de
acetilcolina y ácido acético.
RECEPTORES COLINÉRGICOS
Farmacológicamente, se subdivide a los receptores colinérgicos en muscarínicos
y nicotínicos. Esta clasificación, postulada originariamente por Henry Dale, se
basa en el análisis de las respuestas de ciertos agonistas y antagonistas
colinérgicos en relación con las distintas acciones farmacológicas promovidas
por dos agentes colinérgicos naturales: la muscarina y la nicotina.
RECEPTORES Y EFECTORES MUSCARÍNICOS
La muscarina es un alcaloide que se obtiene del hongo venenoso Amanita
muscaria. Este compuesto natural posee la propiedad de desencadenar
acciones parasimpaticomiméticas por interactuar específicamente con ciertos
receptores sobre los cuales también actúa la acetilcolina. Las acciones de la
muscarina reciben el nombre de acciones muscarínicas y los receptores
correspondientes se denominan muscarínicos. La muscarina, pilocarpina,
metacolina y el carbacol son algunos de los agentes colinérgicos que poseen la
propiedad de estimular los receptores muscarínicos.
Receptores muscarínicos
Anatómicamente, los receptores muscarínicos se encuentran en:
- Los efectores autonómicos con inervación parasimpática (músculo liso, corazón
y glándulas).
- Ciertos tejidos que no poseen inervación colinérgica (el endotelio vascular
carece de inervación parasimpática, pero presenta una alta densidad de
receptores muscarínicos).
- Los ganglios autonómicos (simpáticos y parasimpáticos).
- Neuronas del SNC (corteza, núcleo caudado, putamen, etc.).
- Ciertas terminaciones nerviosas autonómicas simpáticas y parasimpáticas
(como receptores presinápticos inhibidores, que actúan modulando la liberación
del neurotransmisor correspondiente).
- La célula cromafín.
Los estudios de clonado molecular han identificado subtipos de receptores
muscarínicos, pero sólo 3 de ellos pueden ser discriminados en la actualidad por
estudios farmacológicos (empleando agonistas y antagonistas) y de binding: los
denominados M1, M2 y M3.
Receptores muscarínicos: principales propiedades
Los diferentes subtipos de receptores muscarínicos están constituidos por las
correspondientes proteínas que se ubican en las membranas plasmáticas donde
se expanden en forma típica con 7 pasos transmembrana. Estos receptores son
parte de una gran familia de receptores, los cuales transducen sus señales
celulares a través de proteínas Gi. Los receptores M1 y M3 se acoplan activando
la fosfolipasa C con la consecuente hidrólisis del fosfatidilinostitol difosfato y la
producción de los segundos mensajeros IP3 y DAG (tabla 1).
Los receptores M2 se acoplan inhibiendo la actividad de la adenililciclasa o
promoviendo la apertura de los canales de K+ (este último mecanismo se
observa a nivel de las células marcapasos del nodo sinoauricular). Efectores y
efectos muscarínicos.
RECEPTORES Y EFECTORES NICOTINICOS
La nicotina, principio activo de la Nicotiana tabacum es un alcaloide natural que
desencadena acciones farmacológicas estimulantes a nivel de los ganglios
autonómicos y en la placa mioneural estriada. La nicotina carece de afinidad por
los receptores muscarínicos, habiendo recibido los sitios específicos de
interacción del agonista con la célula efectora la denominación de receptores
nicotínicos.
La nicotina, el dimetilfenilpiperazinio (DMPP) y la acetilcoïna son ejemplos de
agonistas nicotínicos. Anatómicamente, los receptores nicotínicos se encuentran
en:
- Placa mioneural (en la membrana postsináptica de terminales nerviosas
motoras provenientes de las motoneuronas alfa).
- Placa terminal (membrana plasmática de fibras intrafusales del huso
neuromuscular, que recibe inervación de las motoneuronas gamma).
- Ganqlios autonómicos (a nivel del soma y dendritas de las neuronas
noradrenérgica y colinérgica).
- Célula cromafin de la médula adrenal.
- Neuronas del SNC (por ejemplo: en la neurona de Renshaw de la médula
espinal que recibe la inervación colateral recurrente de las motoneuronas alfa y
en autoreceptores de las terminaciones dopaminérgicas de la vía nigro-estriatal).
- Ciertas terminaciones nerviosas colinérgicas y noradrenérgicas (como receptor
presináptico facilitador de la liberación del neurotransmisor correspondiente).
AGONISTAS COLINERGICOS
Las drogas que producen acciones farmacológicas caracterizadas
fundamentalmente por su similitud a las observadas por la activación del sistema
parasimpático pueden clasificarse, de acuerdo con el mecanismo de acción en:
-Estimulantes colinérgicos de acción directa.
-Estimulantes colinérgicos de acción indirecta (inhibidores de las colinesterasas).
ESTIMULANTES COLINERGICOS DE ACCION DIRECTA
Los estimulantes colinérgicos de acción directa sobre los receptores nicotínicos
y/o muscarínicos se pueden subdividir, en base a su estructura química.

ESTIMULANTES COLINERGICOS DE ACCION INDIRECTA

Los estimulantes colinérgicos de acción indirecta son los inhibidores de las
colinesterasas, que constituyen un grupo heterogéneo de fármacos con la
propiedad de antagonizar la hidrólisis de la acetilcolina, provocando incrementos
en la intensidad y duración de sus efectos.
Tipos de colinesterasas
La acetilcolinesterasa es la enzima encargada de la inactivación biológica de la
acetilcolina, a quien hidroliza, originando colina y ácido acético. La colina posee
una potencia vasodilatadora 100.000 veces menor que la acetilcolina. Esta
enzima es altamente específica para la acetilcolina.

La acetilcolina también puede ser biotransformada por la enzima denominada

butirilcolinesterasa o pseudocolinesterasa o acilcolinesterasa que, a diferencia
de la acetilcolinesterasa, no se ubica selectivamente a nivel de las sinapsis
colinérgicas, sino que se encuentra ampliamente difundida en el organismo
(plasma, hígado, glía, etc.).
BLOQUEANTES MUSCARINICOS CONCEPTOS GENERALES
Los receptores muscarínicos para la acetilcolina, tanto los ubicados en el SNC
como los que se localizan fuera de él, son pasibles de ser bloqueados
específicamente por drogas denominadas anticolinérgicas antimuscarínicas.
También reciben el nombre de atropínicos por ser el alcaloide atropina el fármaco
patrón de este grupo de drogas.
Los receptores muscarínicos que se encuentran fuera del SNC se hallan:
- A nivel de las células efectoras autonómicas (músculo liso, músculo cardíaco,
glándulas exocrinas y algunas endocrinas). Estos receptores muscarínicos son
los de mayor relevancia funcional, por lo tanto, su bloqueo medicamentoso
promueve modificaciones fisiológicas que se deben conocer en detalle.
- A nivel de los ganglios simpáticos se describen receptores muscarínicos que
participan en el funcionamiento de la neurona ganglionar. Se ubican receptores
de este tipo en la propia célula ganglionar y en la neurona intercalar
dopaminérgica.
Todos los fármacos atropínicos actúan por un mecanismo de bloqueo
competitivo de los receptores muscarínicos.
Los efectos que tienen son:
· Bradicardia (debida al SNC a dosis bajas), taquicardia (a dosis elevadas),
relajación de la musculatura lisa (igual al SNC en dosis bajas.
· Los que cruzan la barrera hematoencefálica tienen efectos muy variados,
excitación, depresión, amnesia.
 EXPERIMENTO

MATERIALES

GENERAL:
Jeringas hipodérmicas→ 1mL
Vaso de plástico → 200mL

FÁRMACOS:

Atropina → sol 1 mL/mg

Pilocarpina→2% (2x10) = 20 mg/mL
Sevoflurano (Anestésico) →200mL

ANIMALES:
Conejo grande: Peso 1.5 Kg
PROCEDIMIENTO

Cálculos iniciales → DOSIS

1.SEVOFLURANO → VÍA INHALATORIA

2.PILOCARPINA → VÍA TÓPICA – VÍA EV
DOSIS: 1mg/ 1mL → 1.5Kg = 1.5 mg
3.ATROPINA → VÍA EV → DOSIS: 0.5 mg/Kg
PESO 1.5 Kg → (0.5x1.5) = 0.75 mg

Se le administró un anestésico inhalatorio → Sevoflurano (Sevogesic) al conejo

en experimentación, sobre una superficie alta, cabeza orientada hacia abajo.

Posteriormente se le instiló pilocarpina tópica (2 gotitas) en el saco conjuntival

del ojo derecho.
Unos minutos después se le administró por vía
endovenosa pilocarpina (efecto sistémico) a
través de las venas marginales de la oreja.

Se observaron los efectos del fármaco durante 5

minutos. Descritos más adelante.
Finalmente, se inyectó atropina por vía
endovenosa para contrarrestar los efectos de la
pilocarpina.
RESULTADOS
Peso del Fármaco Dosis Volumen a Manifestaciones
conejo administrar colinérgicas muscarínicos
Pilocarpina 1.5 mg 1.5 ml -Anisocoria, el ojo derecho,
donde se aplicó 2 gotas de
pilocarpina, presento
mayor manifestación de la
miosis
-Sialorrea
-Bradicardia
-Epifora (lagrimeo)
-Respiración forzada
-Erección genital
1.5kg -Micción
-Relajación de esfínteres
que produjo defecación
Atropina 0,5 mg 0.75 ml -Midriasis
-Fin de la erección
-Disminución de las
secreciones salivales y
lagrimales
*Se aplicó una segunda
dosis de atropina (0.25mg) a
los 5minutos con 30
segundos*
-Culminación de toda
secreción glandular
Diámetro pupilar del ojo derecho
2 gotas de Pilocarpina vía Atropina vía
Basal pilocarpina en la endovenosa endovenosa
conjuntiva ocular
7 mm 6mm 5mm Midriasis (8mm)
DISCUSIÓN Y ANÁLISIS
La pilocarpina es un fármaco alcaloide colinomimético natural, también llamado
parasimpáticomimético o agonista colinérgico que posee una actividad
farmacológica similar a la acetilcolina de tal manera que produce los mismos
efectos.
MECANISMO DE ACCIÓN
La pilocarpina al ser administrada, actuará en los receptores colinérgicos
muscarínicos ( M3 principalmente) , a diferencia de la acetilcolina que actúa tanto
en receptores nicotínicos como muscarínicos.
Los receptores M3 se encuentran en el musculo liso del TGI, endotelio, vías
aéreas superiores, algunas glándulas secretoras, músculo liso del esfínter
pupilar y ciliar. Posee un efecto excitatorio .
Este tipo de receptor es metabotrópico y activa la proteína Gp dando lugar a la
fosfolipasa que hidrolizará compuestos de la membrana (fosfatidilinusitol)
transformándolos en trifosfato de inositol( IP3) y diacilglicerol (DAG).
El DAG estimula la actividad de algunas enzimas sensibles al Ca+2 como la
fosfoquinasa C, que fosforila algunas proteínas.
El IP3 provoca la liberación de calcio de los depósitos intracelulares, estimulando
los procesos calcio-dependientes : SECRECIONES y CONTRACCIONES del
músculo liso.
Esto explica los efectos COLINÉRGICOS de la PILOCARPINA que se
observaron en la experimentación:
MIOSIS
Medida basal: 7mm → Medida con administración
de pilocarpina: 5mm aprox.

Debido a la contracción del músculo circular o

esfínter del iris, sobretodo, en el ojo derecho,
debido a que se le administro pilocarpina tópica
(efecto local).
EFECTO HIPERCRÍNICO
Glándulas exocrinas: Estimulación de las secreciones
glandulares:
Salival, lagrimal, bronquial, gástrica, pancreática,
intestinal, faríngea y traqueal. No hay diaforesis
debido a que el conejo no presenta glándulas
sudoríparas.
Se observaron macroscópicamente los efectos en
glándula salival (sialorrea), lagrimal y bronquial
(espiración ruda).
APARATO RESPIRATORIO
Broncoconstricción y aumento de las secreciones → ESPIRACIÓN RUDA.
TRACTO URINARIO
Existe contracción del músculo detrusor, aumento de la presión vesical y
disminución de la capacidad de la vejiga → relajación del esfínter externo y
produciendo un vaciamiento vesical. Se observaron pequeñas gotas.
SISTEMA CARDIOVASCULAR
Inotropismo negativo (Contracción disminuida)
Cronotropismo negativo (Frecuencia respiratoria disminuida) →
Frecuencia basal: 155 rpm → Frecuencia con la administración de
pilocarpina: 135rpm
Dromotropismo negativo (Conducción lenta)

La atropina es un antagonista competitivo de la acetilcolina, parasimpáticolítico,

de naturaleza alcaloide, y un antídoto especifico de los efectos muscarínicos
(receptores muscarínicos), debido a que contrarresta sus efectos. Actúa
bloqueando los receptores colinérgicos.
Está formado por la combinación de un ácido aromático, el ácido trópico y una
base orgánica, tropina.
Es liposoluble, por esta razón atraviesa la BHE y placenta con facilidad. Su vida
media es de 2 a 4 horas.
MECANISMO DE ACCIÓN
Es un antagonista competitivo, por lo que bloquea las acciones muscarínicas de
la acetilcolina.
Su acción se da mediante el acoplamiento de la sustancia al receptor
muscarínico. Sin embargo, la especificidad de la atropina frente un tipo de
receptor muscarínico es disminuido, por tal razón existen probabilidades de
efectos colaterales y adversos.
Los efectos que produce son los opuestos a los colinérgicos→ EFECTOS
ANTICOLINÉRGICAS.
MIDRIASIS
Medida con administración de pilocarpina: 5mm aprox. → ATROPINA: 8mm
aprox.
Debido a la parálisis del músculo esfínter del iris (midriasis y fotofobia) y del
músculo ciliar del cristalino.
EFECTO HIPOCRÍNICO
Glándulas exocrinas:
Sequedad y viscosidad de las secreciones.
Salival, lagrimal, bronquial, gástrica, pancreática, intestinal, faríngea y traqueal.
Se observaron macroscópicamente los efectos en glándula salival: viscosidad y
bronquial (desaparición de la espiración ruda).
APARATO RESPIRATORIO
Disminuye el tono del musculo liso produciéndose broncodilatación (agonistas
beta-2-adrenérgicos).
Sequedad de las mucosas respiratorias, por diminución del barrido de los cilios
epiteliales.
TRACTO URINARIO
Existe disminución del tono y la amplitud de las contracciones del uréter y vejiga
→ favorece la retención urinaria.
SISTEMA CARDIOVASCULAR
Inotropismo positivo (Contracción aumentada)
Cronotropismo positivo (Frecuencia respiratoria aumentada) →
Frecuencia con la administración de pilocarpina: 135rpm → ATROPINA:
165 rpm.
Dromotropismo positivo (Conducción rápida)

Al realizarse la práctica, se obtuvieron los mismos datos esperados desde el

punto de vista teórico, concluyéndose la práctica satisfactoriamente.
 CONCLUSIONES
La acetilcolina es un neurotransmisor de origen natural,
sintetizado en el citoplasma de la neurona. Actúa nivel de las
fibras pre y post- ganglionares, en sus receptores
muscarínicos y nicotínicos, ejerciendo acciones inhibitorias o
excitatorias.

Los agonistas colinérgicos ejercen una actividad directa o

indirecta (AChE) a nivel de los receptores, “imitando” las
acciones de la ACh. Los antagonistas colinérgicos ejercen las
acciones “opuestas” de la ACh, actuando a través de un
mecanismo competitivo.

La pilocarpina es un agonista colinérgico que actúa

principalmente a nivel del receptor M3, ejerciendo acciones
excitatorias en el músculo liso y aumenta las secreciones. La
atropina es un antagonista colinérgico que actúa compitiendo
a nivel de los receptores muscarínicos de tal manera que
ejerce efectos “opuestos” a la pilocarpina.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Goodman & Gilman. Las bases farmacológicas de la terapéutica. Ed 13.
Editorial Mc Graw Hill. 2019.
2. Rothlin R. Colinérgicos y anticolinérgicos. Farmacología I. 2003.
3. CAVIME. Terapéutica internacional. Farm Hosp 1995; 19 (6): 368-370.
4. Universidad Francisco Marroquín-Facultad de medicina. Sulfato de
atropina. 2003.