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UNAN-LEON
Tema:
Presentar cuatro informes sobre los laboratorios físico químico y
microbiológico.
Integrantes:
Keylin Abigail Bucardo Puerto.
Eliezer David Carrazco Rodriguez.
Docente: Lic. Sandra Navarrete.
Fecha: 17/5/2019
Contenido
1. Informe NO 1 ............................................................................................................ 4
1.1. Introducción........................................................................................................ 4
1.2. Objetivos. ........................................................................................................... 5
1.2.1. Objetivo General. ......................................................................................... 5
1.2.2. Objetivo Específicos. ................................................................................... 5
Marco conceptual .......................................................................................................... 6
1.3. Normas para trabajar en el laboratorio físico químico y microbiológico. ............ 7
1.3.1. Normas de laboratorio físico Químico.......................................................... 7
1.3.2. Normas para trabajar en el laboratorio de microbiología. ............................ 9
1.4. Ha aplicado usted las normas. ......................................................................... 11
1.5. Cuantos accidentes le han ocurrido en el laboratorio coloque el número. ....... 11
1.6. Bibliografías. .................................................................................................... 11
2.1. Introducción...................................................................................................... 12
2.2. Objetivos. ......................................................................................................... 13
2.2.1. Objetivo general. ....................................................................................... 13
2.2.2. Objetivos específicos. ................................................................................ 13
Marco conceptual. ....................................................................................................... 14
2.3. Procedimiento de la determinación de proteínas por el método de Kjeldahl. ... 15
2.4. Instructivo de los equipos que se utilizan para el análisis. ............................... 16
2.4.1. Objetivo. .................................................................................................... 17
2.4.2. Condiciones y precauciones generales. .................................................... 19
2.4.3. Definiciones. .............................................................................................. 21
2.4.4. Instrucciones de manejo. ........................................................................... 23
2.4.5. Limpieza del equipo. .................................................................................. 26
3. Informe No 3 ......................................................................................................... 28
3.1. Introducción...................................................................................................... 28
3.2. Objetivos. ......................................................................................................... 28
Marco conceptual .......................................................................................................... 29
3.3. Materiales y reactivos descritos en el catálogo ................................................ 30
3.4 Inventario de equipos y reactivos ........................................................................ 30
4. Informe No 4 ......................................................................................................... 34
4.1. Introducción...................................................................................................... 34
4.2. Objetivos .......................................................................................................... 35
4.2.1. Objetivo General ........................................................................................ 35
4.2.2. Objetivos Específicos ................................................................................ 35
Marco conceptual ........................................................................................................ 36
4.3. Clasificación de la cristalería. ........................................................................... 37
4.3.1. Cristalería de almacenaje: ......................................................................... 37
4.3.2. Cristalería de medición: ............................................................................. 37
4.4. Caracterización de los diferentes tipos de cristalería. ...................................... 37
4.4.1. Cristalería general de trabajo. ................................................................... 37
4.4.2. Cristalería de medición .............................................................................. 40
4.4.3. Materiales de porcelana ............................................................................ 41
4.5. Bibliografía ....................................................................................................... 42
1. Informe NO 1
1.1. Introducción.
La seguridad debe ser la primera preocupación del experimentador en el
laboratorio.
El laboratorio es un área de aprendizaje del trabajo práctico profesional
donde no deben subestimarse los riesgos que existen cuando se manipulan
materiales, equipos, reactivos y sustancias químicas y microbiológicas,
aunque parezcan sencillos, inocuos y hasta familiares. Por lo tanto, en el
laboratorio, no es aceptable una conducta irresponsable.
Para reducir riesgos a la salud o a la integridad corporal, deben observarse
reglas de seguridad, a menudo sencillas, en cualquier actividad que
desarrollemos y, en particular, cuando realizamos trabajo práctico en el
laboratorio. A menudo se dice que los accidentes no ocurren por sí solos,
¡son provocados! Las causas son generalmente por ignorancia, por
cansancio, por descuidos, por uso de equipos defectuosos, por voluntad
propia de tomar riesgos o aun por realizar bromas sin evaluar las
consecuencias de las mismas.
Para minimizar riesgos, y prevenir accidentes es preciso conocer sus
causas y estar siempre alertas para reconocer situaciones de riesgo
susceptibles de desencadenar accidentes que pueden no solo afectarnos
sino también a los demás con los que trabajamos.
1.2. Objetivos.
1.3.1.1. En la indumentaria.
Entrar al laboratorio en forma ordenada, dejar las carteras, libros y otros objetos
personales en el lugar que se les indique para tal fin.
Llevar puesta la bata de laboratorio en todo momento. La misma debe permanecer
completamente cerrada.
Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al finalizar
la sesión práctica.
Lavar las manos con agua y jabón antes de realizar las actividades programadas,
antes de salir del laboratorio y siempre después de manejar materiales que se
sabe o se sospecha que son contaminantes.
Trabajar cerca del mesón, adoptando una buena postura y estando físicamente
cómodo.
Llevar un calzado apropiado, preferiblemente cerrado y de suela antideslizante en
las áreas de laboratorio.
Evitar llevar en el laboratorio accesorios que podrían ser fuente de contaminación
(por ejemplo, joyas).
Recoger el cabello largo.
Evitar desplazamientos innecesarios, movimientos bruscos. Hablar solo lo
indispensable.
No comer, beber, fumar, almacenar comida, objetos persona- les o utensilios,
aplicarse cosméticos ni ponerse o quitarse lentes de contacto en ningún área del
laboratorio.
Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de iniciar las
actividades indicadas en la práctica. Si usted tiene alguna duda, diríjase al
profesor.
Mantener el área de trabajo ordenada, libre de libros, cuadernos u objetos
personales, exceptuando aquellos equipos y materiales necesarios para la
realización del trabajo práctico.
Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero. Nunca debe dejar este
desatendido.
Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero, etc.), limpios
y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada la actividad.
Reporte cualquier daño de los mismos al profesor.
Colocar los materiales de vidrio contaminados en los recipientes dispuestos para
tal fin, por ejemplo: las pipetas en los pepiteros, tubos y placas de Petri en las ollas
de desecho, etc.
No usar ningún reactivo que no esté́ debidamente identificado, verificar las
etiquetas de los mismos y estar seguro de cómo emplearlo.
No devolver sustancias a sus envases originales.
Emplear la propipeta al medir líquidos. Está rigurosamente prohibido pipetear con
la boca. De igual manera las pipetas tendrán tapones de algodón para reducir la
contaminación de estos dispositivos de pipeteo.
Realizar solamente aquellas actividades indicadas por el profesor, no llevar a cabo
experimentos no autorizados.
Reportar inmediatamente cualquier accidente al profesor (derrame de material
contaminado, heridas, quemaduras, etc.), ninguno puede ser catalogado como
menor.
Reducir al mínimo la formación de aerosoles durante la realización de cualquier
trabajo práctico.
Extremar las precauciones cuando se utilicen agujas y jeringas para evitar la
inoculación accidental y la generación de aerosoles durante su manipulación y
desecho.
Emplear técnicas asépticas para el manejo de cultivos de microorganismos.
A continuación, mencionaremos los pasos que se deben seguir en caso de que ocurran
los siguientes accidentes:
1.6. Bibliografías.
http://www.chlaep.org.uy/pdf/normas_de_bioseguridad.pdf
2. Informe No 2
2.1. Introducción
Principio
Este método se basa en la digestión del producto con ácido sulfúrico concentrado el cual
transforma el nitrógeno orgánico en iones amonio en presencia de sulfato de cobre y
sulfato de potasio como catalizador, adición de un álcali, destilación por arrastre con
vapor del amoniaco liberado y combinado con ácido bórico valorándose con HCl 0.02 N.
Procedimiento
A. Preparación de la porción de ensayo: Se pesa con exactitud en balanza
analítica g entre 0.1 y 0.2 g de muestra bien homogenizada en un papel de filtro
libre de cenizas. Una vez pesada la muestra, se transfiere con el papel a un balón
Kjeldahl, se le añaden 10 g de sulfato de potasio, 0.5 g de sulfato de cobre y 25
mL de ácido sulfúrico, se agita y el balón se tapa con un embudo pequeño.
Balanza técnica
Aparatos de digestión o mecheros de gas
Aparato de destilación con trampa Kjeldahl
Buretas
Pipetas
Cilindro graduado
Frasco lavador
Erlenmeyer de 100 mL
Balón Kjeldahl de 100 o 500 mL
Equipo de destilación provisto de una trampa Kjeldahl
Matraz aforado de 200 o 250 mL
2.4.1. Objetivo.
1. Cañón.
2. Base.
3. Compuerta.
4. Válvula.
5. Entrada de gas.
6. Llave.
La solubilización posterior en la
solución ácida permite la conversión
de amoníaco (NH3) a catión amonio
+
(NH4 ), el cual se encuentra junto con el exceso de solución ácida añadido.
El amoníaco (NH3) puede recogerse sobre dos medios: ácido fuerte en exceso de
concentración conocida, o bien, ácido bórico en exceso no medido.
c) Llenar la bureta con el valorante y enrasar con la llave (ver que no hay burbujas).
e) Colocar un papel blanco bajo el Erlenmeyer que contiene la muestra para ver
mejor el cambio de color (ver preparación de la muestra).
h) Los volúmenes obtenidos deben ser reproducibles (diferencias < 0,1 mL)
Pipetas:
a) El líquido se aspira mediante un ligero vacío usando bulbo de succión o propipeta,
nunca la boca.
2.4.3. Definiciones.
Mechero de gas: El mechero bunsen está constituido por un tubo vertical que va
enroscado a un pie metálico con ingreso para el flujo de gas, el
cual se regula a través de una llave sobre la mesa de trabajo. En
la parte inferior del tubo vertical existen orificios y un anillo
metálico móvil o collarín también horadado. Ajustando la
posición relativa de estos orificios (cuerpo del tubo y collarín
respectivamente), los cuales pueden ser esféricos o
rectangulares, se logra regular el flujo de aire que aporta el
oxígeno necesario para llevar a cabo la combustión con
formación de llama en la boca o parte superior del tubo vertical.
2.ª Destilación: Separación por arrastre con vapor del amoníaco (NH3) y posterior
solubilización en una solución ácida de
concentración conocida.
En esta etapa se adiciona NaOH a la disolución
de amonio obtenida previamente, generándose
amoníaco (NH3) y vapor de agua, que arrastra al
mismo.
La solubilización posterior en la solución ácida
permite la conversión de amoníaco (NH3) a
catión amonio (NH4+), el cual se encuentra junto
con el exceso de solución ácida añadido.
El amoníaco (NH3) puede recogerse sobre dos
medios: ácido fuerte en exceso de concentración
conocida, o bien, ácido bórico en exceso no medido.
3.ª Valoración: Medición de la cantidad de ácido neutralizado por el amoníaco disuelto,
lo que indica la cantidad de Nitrógeno presente en la muestra inicial.
Según el medio de recogida en la destilación, el amonio se valora de dos formas:
Recogida sobre ácido fuerte en exceso medido: se emplea una base (álcali) y el
indicador rojo de metilo, por ejemplo.
Recogida sobre ácido bórico en exceso no medido: se emplea un ácido y el
indicador rojo de metilo, por ejemplo.
Bureta: La bureta es un tubo graduado de gran extensión, generalmente construido de
vidrio. Posee un diámetro interno uniforme en toda su extensión, esta provista de una
llave o adaptadas con una pinza de Mohr, que permite verter líquidos gota a gota.
Pipeta: Las pipetas, salvo que se especifique lo contrario, son instrumentos destinados
a la medición de volúmenes exactos. Existen varios tipos comerciales como son las
volumétricas, las de Mohr o graduadas, las serológicas y más recientemente las
micropipetas y pipetas automáticas. Dentro de todas ellas las más utilizadas en el análisis
químico clásico son las volumétricas y las de Mohr.
Erlenmeyer: Poseen forma cónica y se comercializan de diferentes tamaños. Se
emplean para calentar líquidos sin que se produzcan grandes pérdidas por evaporación,
por lo cual deben construirse de un material resistente al calor. En el análisis volumétrico
son ampliamente utilizados en el proceso de valoración. En la actualidad también de
construyen de material plástico.
Balanza analítica:
a) Antes de iniciar el uso de la balanza, asegúrese que todo el sistema esté a
0(calibrado).
b) Para pesar un reactivo, debe pesarse primero el papel para film o papel
encerado y a ese peso sumarle la sustancia que se desea pesar.
Mechero de gas:
a) Conectar un extremo del tubo de goma a la boca de toma de gas con la llave
cerrada y el otro extremo del mismo a la entrada de gas ubicada en la base del
mechero.
e) Permitir el ingreso de aire por medio de la apertura de los orificios o del giro de la
roldana. A medida que ingresa más oxígeno la llama se vuelve azulada, difícil de
ver, con un cono interior coloreado y se oye un sonido grave (llama “sonora”).
Cualquiera de las dos situaciones mencionadas representa una llama útil para
calentar. Cuando se usa una llama de tipo “sonora” tener presente que la
temperatura más alta de la misma se encuentra en el vértice superior del cono
interno coloreado.
Bureta:
a) Al trabajar con una bureta, mantener ésta en posición vertical, fijándola en un
soporte. Colocar la pinza de Mohr en el tubo de goma.
e) Abrir la pinza que cierra el pico de la bureta permitiendo que éste se llene.
Examinar que no queden burbujas de aire, eliminándolas si las hay (para ello tapar
con un dedo el orificio de salida del pico, sacar la pinza y presionar sucesivamente
la goma hasta eliminar todas las burbujas; si es necesario, volver a llenar la bureta
nuevamente, siempre por encima de la marca de 0,00mL)
g) Apoyando el pico en la pared limpia y seca del recipiente usado para descartar
líquidos, abrir la pinza hasta que el nivel del líquido llegue a 0,00mL, es decir, la
base del menisco deberá ser tangente al trazo que marca 0,00mL. Los ojos
deberán estar a la altura de dicho trazo.
h) Durante la valoración, se ha de observar cuidado especial al manejar la llave de
la bureta o la pinza de Mohr que se utiliza para cerrar el pico. Ésta se manejará
con la mano no hábil, de manera que la mano rodee la bureta, y con los dedos se
pueda realizar la presión necesaria en la pinza para dejar salir el líquido. La mano
hábil queda así en libertad para agitar el matraz de valoración.
d) No es recomendable succionar el líquido con la boca para evitar riesgos. Para tal
fin se hace uso de la propipeta o bomba, cerrando con la punta del dedo índice
la boquilla al llegar a la medida requerida.
f) Una vez que el líquido se encuentra en la pipeta, esta debe ser colocada en un
ángulo de 10 a 20 °.
Balanza analítica:
Si se derrama algún reactivo durante la pesada, hay que limpiar de inmediato con
un paño limpio y seco).
No manipular con los dedos, hay que utilizar las pinzas que se encuentran en la
caja de pesas. Limpieza del interior
Utilizar una brocha para barrer suavemente los restos de la base. Ojo, cuidado al
barrer los residuos para que no caigan dentro del hueco dejado al quitar el plato.
Con un paño empañado el alcohol, que no sea de algodón ni tenga restos de fibra
y por supuesto nada de papel, se limpia frotando el plato de pesaje y con cuidado
la base si tiene restos sólidos.
Mechero de gas: Antes de limpiar asegúrate de que cierras por completo la válvula de
gas. Tanto la cabeza del quemador como el cuerpo, se deben limpiar frecuentemente
para que pueda funcionar perfectamente.
Siempre tienes que enfriar la cabeza del quemador y sacarlo, antes de desinfectarlo.
Para limpiarlo bastara un trapo con agua y jabón, o con un producto a base de etanol al
70%.
Bureta: La llave de paso debe estar bien engrasada para que ajuste bien y pueda
moverse con facilidad, teniendo cuidado
de evitar el área cerca del orificio. El
lubricante más adecuado es la vaselina por
la suavidad que imparte a la rotación de la
llave. Se usa también lanolina, que por ser
muy adherente logra un buen ajuste
impidiendo el escape del líquido. Estos
lubricantes grasos se emplean
corrientemente cuando se van a medir
soluciones acuosas. Si el líquido fuera
solvente de grasas se puede emplear
algún otro lubricante como el engrudo de
almidón o lubricantes a base de parafina y
caucho. Antes de usar la bureta, se
procede a curarla. Una vez curada la
bureta, se llena por su extremo superior con el líquido, ayudándose con el embudo.
Llene la bureta por encima de la graduación cero. Abra luego la llave de la bureta y deje
escapar líquido, con el objeto de eliminar el aire contenido entre la llave y la punta.
Continúe dejando salir líquido hasta que la curva inferior del menisco sea tangente a la
graduación cero. Este procedimiento se denomina enrasar la bureta. Ahora está lista
para efectuar la medición. Valoración: La figura ilustra el método preferido para la
manipulación de una llave. Con el pico bien colocado sobre el matraz de valoración,
hacer girar (o agitar) la muestra constantemente para asegurar una mezcla eficiente.
Cuando se juzgue que sólo faltan unas pocas gotas, lavar bien las paredes del recipiente
de valoración antes de terminar la titulación.
Pipetas: Realice prácticas de llenado de la pipeta utilizando agua. Introduzca la punta
de la pipeta dentro del líquido, luego succione, hasta que el líquido ascienda hacia arriba
de la marca superior. Controle la descarga con la propipeta. Ahora succione una cantidad
del líquido que trata de medirse, enjuague la pipeta y deseche el líquido de lavado. La
pipeta de encuentra lista para usarse. Enjuáguese bien con agua una vez que se haya
terminado de emplear.
Erlenmeyer: Es importante ser cuidadoso al enjuagar o lavar los Erlenmeyer, y evitar
que caigan en la pileta de lavado o golpeen contra el grifo. La mayoría de las roturas se
producen de este modo. Los Erlenmeyer y otros artículos de vidrio se deben colocar
hacia abajo para su secado al aire. Otra alternativa es colocarlos en cubetas y secarlos
en horno. La temperatura de secado no debe superar los 140°C. (Nunca aplique el calor
directamente sobre el material de vidrio vacío empleado para mediciones volumétricas.
Dicho artículo debe secarse a temperaturas que no excedan los 80°C o 90°C).
2.4.6. Bibliografía
Zumbado Fernández, Héctor (2004). Análisis químico de los alimentos:
métodos clásicos. Ciudad de La Habana: Editorial Universitaria (Cuba). --
ISBN 978-959-16-0253-4. -- 439 pág.
3. Informe No 3
3.1. Introducción.
Debemos tomar en cuenta que existe una gran variedad de instrumentos del
laboratorio, los cuales son de diferentes materiales tales como: madera,
vidrio, porcelana, metal, plástico, etc. Cada uno de estos instrumentos
cumple una función específica dentro del laboratorio, es por esta razón que
debemos reconocerlos, saber su nombre y determinar su uso, de esta
manera evitamos accidentes e imprudencias dentro del laboratorio con
alguna sustancia u otro material de trabajo.
3.2. Objetivos.
3.2.1. Objetivo general.
Realizar un inventario para familiarizarse con los nombres y
aplicaciones del material y reactivos del laboratorio fisco químico y
microbiológico.
Precios de reactivos.
Rectivo Formula quimica ml de rectivo Precio
Acido acetico CH3COOH 500 ml 39.15
Acetona CH3COOCH3 500 ml 18.65
Precios de materiales.
Nombre Precio
espátula $ 15.35
Acetato de magnesio 1
CH3COO)2
Fosfato de sodio ácido 1 Na3PO4
Cianuro de sodio 1 NaCN
4.1. Introducción
En el presente informe abordaremos un tema de gran importancia siendo
este lo que concierne al conocer el uso de los diversos materiales de
cristalería que existen en un laboratorio, ya que gracias a estos se llevan a
cabo en estos experimentos que, ayudan a fomentar la comprensión de las
practicas,
Ahora bien, los equipos de laboratorio nos permiten interactuar directamente
con los datos que sean recopilados. Con su respaldo, teniendo así una
experiencia de aprendizaje de primera mano realizando varios experimentos
Es de gran importancia el conocer correctamente la utilización de la
cristalería en un laboratorio y saber cómo manipular cada uno siguiendo las
normas de seguridad que se requiere ya que así evitamos accidentes a la
hora de la manipulación de estos o de algún reactivo que sea corrosivo.
El laboratorio debe estar dotado de una serie de infraestructuras que ayuden
al desarrollo de las actividades, garanticen su adecuado funcionamiento, y
la minimización de riesgos debido a la mala manipulación de los mismos. La
limpieza y desinfección de estos también posee una gran importancia ya
que así evitamos un error en la práctica por lo cual debe ser sometida
previamente a un proceso de limpieza y desinfección antes de esterilizarla.
4.2. Objetivos
Detallar las clasificaciones que posee la cristalería y el uso adecuado de cada una
de estas.
Fundamentar conceptualmente en que se basa la cristalería de medición y la
importancia que esta posee.
Marco conceptual
La cristalería de Laboratorio Se denomina, al conjunto de objetos utilizados en la
realización de diferentes procedimientos técnicos, que independientemente de su forma
y tamaño están constituidos solamente por vidrio.
Limpieza y desinfección.
La cristalería que vaya a ser utilizada en las investigaciones microbiológicas de
laboratorio, debe ser sometida previamente a un proceso de limpieza y desinfección
antes de esterilizarla. Si la cristalería es nueva: Debe pasarse previamente por agua
caliente para eliminar la presencia de vestigios fabriles. Después se sumerge en una
solución de ácido clorhídrico al 1%, dejando actuar el desinfectante por un espacio de
tiempo no menor de 4 horas. Posteriormente se lava con detergente, se enjuaga con
agua corriente y finalmente con agua destilada. Después de escurrida se deja secar al
aire o si se desea secado con mayor rapidez se puede introducir en una incubadora.
Cuando la cristalería haya sido utilizada: Si mantiene material infeccioso, por haber
estado en contacto directo con microorganismos o contiene cultivo de ésta, debe ser
sometida previamente a un proceso de esterilización en autoclave a 1210C, durante 30
minutos, para evitar que el técnico o la persona encargada de la limpieza de la cristalería
se contamine con microorganismos patógenos. Después de la esterilización, la cristalería
se enjuaga para eliminar los restos groseros del material que contenía y se sumerge
durante 10 ó 15 minutos en mezcla sulfocrómica, o más tiempo si la mezcla ya ha sido
utilizada y mermada su efectividad. La cristalería así tratada, se friega con detergente,
se enjuaga con agua corriente y finalmente con agua destilada, procediendo a su secado
en la forma explicada.
4.5. Bibliografía