Cultivo de Levaduras

Tipo de Muestra

 Todo tipo de muestra Biológica

Consideraciones

 No aplica.

Materiales, Reactivos y Equipos

 Cámara de Bioseguridad
 Plumón
 Tórulas
 Asas calibradas
 Placa CAN2
 Elementos de protección personal (Anexo Manual de bioseguridad)
 Equipo Vitek 2

Principio

 El objetivo del presente punto es describir el procesamiento y las

diversas etapas que componen el estudio de Levaduras en muestras
Biológicas, atreves del uso de un medio de cultivo cromogénico de
aislamiento selectivo. El medio de cultivo está destinado a:
 El aislamiento selectivo de levaduras.
 La identificación de la especie C. albicans.
 La diferenciación presuntiva de un conjunto de especies que
agrupan C. tropicalis, C. lusitaniae y C. kefyr.

METODOLOGÍA

Recepción de la muestra en Laboratorio y su distribución a la unidad

operativa

TPM de la unidad de recepción (Horario hábil) TPM unidad de Cuarto Turno

(Horario inhábil).
  Recibe las muestras. (Subterraneo\Documentación
laboratorio\LABORATORIO\CALIDAD\3.- CONSTATACIONES\APL 1.3 CCI
MANUALES\SISTEMAS\LIS).
 Evalúa la aceptabilidad de cada muestra (ver procedimiento PC-LAB-
0004).
 Saca hoja de trabajo de Levaduras, Excel situado en el escritorio del
computador de recepción, archivo “Hojas de trabajo Bacteriologia”,
abrir y selecciona pestaña Levaduras, imprimir.
 Saca una etiqueta (código de barra) y la pega sobre la hoja de trabajo
de Cultivo de Levaduras.
 Distribuye y entrega la muestra y hoja de trabajo a la unidad de
Bacteriologia.

Recepción y procesamiento de la muestra en la unidad operativa

TPM de la unidad Bacteriologia o TPM de la unidad de Cuarto Turno

 Recibe la muestra.
 Evalúa la aceptabilidad de cada muestra. (ver procedimiento Criterios
PC-LAB-0004).
 Enumera el recipiente o medio de trasporte de la muestra y la hoja de
trabajo con el correlativo correspondiente, el cual es mensual (parte
desde el número 1 en cada inicio de mes).
 Saca de la estufa las placas necesarias para el cultivo (CAN2) y las rótula
con plumón
 En gabinete de bioseguridad con asa estéril, siembra de acuerdo a la
técnica correspondiente (ver anexo 5).
 Almacena e incuba las placas sembradas a 35 – 36° C durante 24 horas

TPM de la unidad de Bacteriologia

 Trascurridas las 24 horas, saca las placas sembradas e incubadas a 35 –

36°C y las ubica en el carro de transporte, para luego ser llevadas a la
unidad de Bacteriologia.

TM de la unidad de Bacteriologia
 Revisa las placas en búsqueda de crecimiento bacteriano sospechoso
de patogenicidad, re incuba las placas por otras 24 horas y así hasta
completar 72 horas.
 En caso de haber crecimiento procede a identificar el tipo de levadura
según el color de la colonia:
 Azul pálido a azul oscuro: característico de Candida albicans.
 Rosa: característico de Candida tropicalis, Candida lusitaniae y
Candida kefyr. La identificación del microorganismo aislado
debe continuarse por pruebas bioquímicas y/o inmunológicas.
 Blanco crema: sin valor predictivo. La identificación del
microorganismo aislado debe continuarse por pruebas
bioquímicas y/o inmunológicas.

 En caso que el crecimiento de levaduras provenga de Hemocultivos o

Punta de Catéter de unidades criticas (UPC) realizar identificación y
antibiograma según corresponda:

 Azul pálido a azul oscuro: Candida albicans (especie

identificada), realiza solo sensibilidad. Ajusta a densidad
Macfarlánd (ver anexo 7) y procesa por equipo Vitek 2 (ver
anexo 10).
 Rosa: característico de Candida tropicalis, Candida lusitaniae y
Candida kefyr, para identificar la especie, realiza identificación y
 sensibilidad. ajusta a densidad Macfarlánd (ver anexo 7) y
procesa por equipo Vitek 2 (ver anexo 10).
 Blanco crema: sin valor predictivo, realiza identificación y
sensibilidad. ajusta a densidad Macfarlánd (ver anexo 7) y
procesa por equipo Vitek 2 (ver anexo 10).

 Informa de la siguiente manera:

 La negatividad del cultivo como: “No hubo desarrollo a las 72
horas de incubación”.
 La positividad del cultivo como: “Hubo desarrollo de Candida
albicans” (colonias verdes o azules características) o “Hubo
desarrollo de Candida sp” (colonias rosadas o blancas).
 De manera exclusiva a Hemocultivos o puntas de catéter
provenientes de UPC realizar informar identificación y
sensibilidad.

En caso de no contar con materiales para llevar a cabo la

identificación y sensibilidad automatizada por Vitek 2 de
Hemocultivos o catéter de UPC, el estudio llega hasta informar
“cándida albicans o cándida sp.