Licda. Ma.

Remei Gordillo
Jefe de Microbiología
Hospital Roosevelt
Marzo 2017
 Introducción

❖ Las bacterias estan divididas según su estructura y morfología.

❖ Por su coloración que viene dada por su estructura

❖ Gram Positivas
❖ Gram Negativas

❖ Por su morfología
❖ Cocos
❖ Bacilos
❖ Espiroquetas
❖ Cocobacilos
 Estructura Bacteriana

Gram Positivo

Gram Negativo
 Sencilla y Gruesa
Delgada y compleja
60-80% Peptidoglucano: abundante y en
10-20% de Peptidoglicano en fragmentos
Múltiples capas
cortos
Acidos Teicoicos y lipoteicoicos (antígenos y
No posee ácidos teicoicos
adherencia a receptores)
Lípidos de 40-60%
Lípidos 1-5%
Lipopolisacáridos (características Ag)
Carbohidratos y Proteínas
Posee espacio periplásmico
No hay presencia de espacio periplásmico
 Morfología

Coco: forma esférica Bacilos forma alargada

Diplococos 2 cocos juntos

división a lo largo del Diplobacilos: Dos bacilos juntos
mismo plano.

Estreptococos: cadenas de Estreptobac ilos: cadenas de

4 a 20 cocos bacilos

Tétratas: división a lo largo Empalizadas, Bacilos lado con

de 2 planos diferentes lado o en figuras en X, V o Y
 Clasificación Cocos
Gram Positivo

Cocos gram positivo

Firmicutes Actinobacterias

Actinomyces Nocardia
Staphylococcus Bacillus
Arthrobacter Mycobacterium
Streptococcus Listeria
Corynebacterium Popionibacterium
Enterococcus Clostridium
Micrococcus Streptomyces
 Cocos Gram Positivo

Staphylococcus Enterococcus Streptococcus Micrococus

• Esféricos agrupadas • Esféricos, ovoideos • Esféricos, ovoideos • Racimos tetradas o
en racimos • Forman pares o • Forman pares o paquetes
• Microbiota normal cadenas cadenas • Vida libre en el
de la piel y mucosas • Microbiota normal • Microbiota normal de medio ambiente
Staphylococcus del intestino. boca, intestino, piel, • Colonias rojas,
epidermidis • Infecciones aparato tracto respiratorio, amarillas o naranjas
Staphylococcus urinario y genital aparato genital • Son ubicuos y
• Agentes causales de femenino, piel pueden encontrarse
saprophyticus
• Patógeno brotes nosocomiales en cualquier
Staphylococcus ambiente.
aureus
Género Staphylococcus

Cocos gram positivo, de

forma esférica o cocoide,
agrupados en racimos
 Características generales

❖ Staphylococcus
❖ Del griego staphylḗ, "racimo de uvas" y kókkos, "gránula «es
un género de bacterias estafilococáceas de clase Cocci
❖ Comprende microorganismos presentes en mucosa y piel de
humanos y también de otros mamíferos y aves.
❖ Incluye 35 especies incluyendo 17 subespecies, muchas de las
cuales se encuentran en los humanos
❖ Staphylococcus aureus (el miembro más patógeno y conocido del
género),
❖ Staphylococcus epidermidis,
❖ Staphylococcus saprophyticus,
❖ Staphylococcus capitis
❖ Staphylococcus haemolyticus.
 Factores de Virulencia
Componentes Estructurales
Factor de virulencia Función

Cápsula Inhibe quimiotaxis y dificulta la fagocitosis.

Capa de polisacáridos Facilita la adherencia a los cuerpos extraños: marcapasos, catéteres,

extracelulares otros.

Evita la lisis celular (estabilizador osmótico).

Peptidoglucanos Estimula la producción de pirógenos endógenos.
Quimiotaxis leucocitaria --> Abscesos.

Media la adherencia del estafilococo a fibronectina, un componente

Ácido teicoico
mayoritario del tejido conectivo
Aumenta su adherencia tisular. (Componentes de la superficie
microbiana que reconocen moléculas adhesivas de la matriz),
propias de los estafilococos. El ácido teicoico tiene una gran afinidad
MSCRAMM
como fibronectina. Estos factores adhesivos permiten que S.
aureus pueda unirse a fribronectina, fibri´nógeno, elastina y
colágeno.
Protección contra la inmunidad humoral.
Proteína A Fija anticuerpos por la porción Fc.
Propiedades anticomplemento.
 Factores de Virulencia
Componentes Estructurales

• Hialuronidasa
• Lipasas
Enzimas • Nucleasas
• Coagulasa
• Estafiloquinasa

• Leucocidina
• Hemolisinas
Toxinas • Toxina TSST-1 Shock
tóxico
• Exfoliativa: síndrome
de la piel escaldada
 Factores de Patogenicidad
Enzimas
Cataliza la conversión de fibrinógeno en fibrina provocando el
Coagulasa depósito de S. aureus, al estar cubierto por fibrina se vuelve menos
inmunógeno.

Cataliza la destrucción del ácido hialurónico en el tejido conjuntivo

Hialuronidasa
para ayudar a la diseminación del estafilococo.

También conocida como estafilocinasa y disuelve los coagulos de

Fibrinolisina
fibrina

Promueven la hidrolisis de lípidos lo que hace que S. aureus se

Lipasa
disemine en el tejido cutáneo y subcutáneo.

Endonucleasas tipo
Hidrólisis de DNA.
ADNasas

Β-lactamasas S. aureus posee 3 tipos. Por lo general residen en plásmidos.

La resistencia al Oxido nítrico es una cualidad peculiar de S. aureus,

Lactato-deshidrogenasa capacidad que lo distingue de otros microorganismos, incluyendo los
comensales S. epidermidis y S. saprophyticus.
 Factores de Patogenicidad
Enzimas
• S. aureus produce dos formas de coagulasa:
Coagulasa Ligada comocida como Factor de Clumping,
permite la conversio de fiibrinógeno a fibrina
El S. aureus es capaz de revestirse co un a capa de
Coagulasa fribrina al entrar en contacto con la sangre impide la
fagocitosis
Coagulasa ligada modifica el factor de reacción con la
coagulasa y la convierte en estafdilotrombina, esta
cataliza la la conversión de fibrinógeno a fibrina que
forma un coagulo e impide el ataque del sistema
inmunológico

• Las β-lactamasas son enzimas que inactivan a la

penicilina así evitando que esta misma llegue a las
proteínas fijadoras de penicilina.
• Esta forma uno de los mecanismos de defensa de SARM
ß-lactamasa Muchas de estas enzimas pueden inhibirse para así
evitar que destruyan a las penicilinas susceptibles, esto
se logra mediante la administración conjunta de una
penicilina y un inhibidor de las ß-lactamasas (Ampicilina
—Penicilina— y ácido clavulánico —Inhibidor—, por ejemplo
 Factores de Patogenicidad
Toxinas
Toxinas

Citotoxinas Destruye células.

Toxinas
Serina proteasas que atacan a la Desmogleína-1 y
exfoliativas
causan el Síndrome de piel escaldada por estafilococo
(ETA, ETB)
Produce diarrea por apertura de canales o muerte de
Enterotoxinas
eritrocitos. Algunas son Superantígenos
Superantígeno que activa una gran cantidad de
TSST-1 linfocitos con una producción masiva de citocinas.
Síndrome de Shock Tóxico
 Factores de Patogenicidad
Enterotoxinas

Enterotoxina Comentario
Asociada a la mayoría de las intoxicaciones
Enterotoxina A
alimentarias.

Produce colitis pseudomembranosa y se encuentra

Enterotoxina B
con regularidad en infecciones intrahospitalarias.

Enterotoxina C Se atribuye a productos lácteos contaminados.

También se asocia a un gran número de
Enterotoxina D intoxicaciones y se atribuye a productos lácteos
contaminados.
 Factores de Patogenicidad
Citotoxinas

La toxina alfa (hemolisina alfa) es un polipéptido

que se introduce en las regiones hidrofóbicas de
la membrana citoplasmática de células como
eritrocitos, hepatocitos, leucocitos, miocitos,
Hemolisina-α musculo liso vascular y plaquetas.
Forma poros y causa un desequilibrio osmótico
importante debido a la salida rápida de K+ y la
entrada de Na+ y Ca++ que termina en lisis celular.

La toxina beta (hemolisina beta) es una

esfingomielinasa, conocida como esfigomielinasa
C.
Es afin a la esfingomielina y lisofofacidil
Hemolisina-β colina (componentes de la membrana
citoplasmática del hospedero) y cataliza su
destrucción, con lo que trae toxicidad para
distintas células como eritrocitos y fibroblastos
 Factores de Virulencia
Citotoxinas

La toxina delta (hemolisina delta) actúa como

surfactante y detergente en las membranas de
Hemolisina-δ las células blanco afecta a todas las células
pero en especial a los eritrocitos.

Toxinas gama-PV más frecuentes

Subunidad S Subunidad F Características
HlgA HlgB Alta actividad hemolítica
HlgC HlgB Alta actividad hemolítica
HlgA LukF-PV Alta actividad hemolítica
Leucocidina de Panton-Valentine
LukS-PV Lukf-PV
Es leucotóxica, pero no hemolítica
Elaborado sobre la base de: Lina, Piémont, Godail-Gamotl et al y Murray
 Factores de Patogenicidad
Citotoxinas

❖ La leucocidina de Panton-Valentine (PVL) tiene más

actividad leucotóxica que todas las demás, pero no es
hemolítica. Se encuentra en <5% de las cepas de S.
aureus resistente a la meticilina (SARM) intrahospitalarias
y prácticamente en todas las cepas SARM comunitarias.
❖ La producción de esta ha sido preferentemente vinculada a
los forúnculos, abscesos cutáneos, e infecciones graves de
la piel necrótica.
 Clasificación

Género
Staphylococcus
Cocos sueltos o racimos

30 especies
17 subespecies

S. aureus S. epidermidis S. saprofiticus

Coagulasa Positivo Coagulasa Negativo Coagulasa Negativo
Género Streptococcus

Cocos gram positivo, de

forma cocoide, en parejas o
cadenas
 Manifestaciones Clínicas

Infección Enf. Post-

Invasión Infección local
invasiva estreptocóccica

Erisipela
Glomérulo-
Faringitis Síndrome
Celulitis nefritis
estreptocóccica shock tóxico
aguda
Gangrena
(Fascitis
necrosante)

Fiebre Fiebre Fiebre

puerperal Pioderma
escarlatina reumática
Septicemia
Clasificación de las patologías
más comunes

• Faringitis
• Pioderma
• Erisipela
Enfermedad • Celulitis
Supurativa • Fascitis Necrosante
• Sdx del Shock Toxico Estreptococico
• Fiebre Puerperal
• Bacteremia

Enfermedad • Fiebre Reumatica

No • Glomerulonefritis Aguda
Supurativas
 Clasificación de Streptococcus

Hemólisis Clasificación de Lancefield

• β hemolíticos (hemólisis • Grupo A
completa) Ramnosa N acetilglucosamina
• α hemólíticos (lisis • Grupo B
incompleta) Ramnosa glucosamina
• ɣ hemolíticos (no • Grupo C
hemólisis) Ramnosa N acetilgalactosamina
• Grupo D
Acido teicoico y glicerol
• Grupo F
glucopitanosil N-acetilgalactosamina

La especificidad serológica esta determinada por un amino azucar

 Factores de Patogenicidad

• Superficie de
las células • De tejidos y
del huésped células
epiteliales

Adherencia Invasión

Toxinas y
Evasión
Enzimas
• Mecanismo
para evitar la
opsonización • Producción
y fagocitosis
 Mecanismo de Patogenicidad

Adhesión Toxicidad Enzimática

Proteína M Estreptolisisna O Estreptocinasa

Proteína F Toxina Eritrogénica Hialuronidasa
Acido lipoteicoico Toxinas piógenas Nucleasas
Proteina Fijadora de Estreptocóccicas Peptidasa C5a
IgG EstrepSag Acido Hialurónico

Factor de Patogenicidad
 Enzimas y Toxinas
Estrepto O: estimula la
respuesta inmune y se usa
Confiere las propiedades para hacer el ASO
Estreptolisina S y O
β-hemolíticas
Estrepto S: lisa eritrocitos,
leucocitos y plaquetas

Toxinas eritrogénicas
Fiebre escarlatina,
Toxina Piogénica SpeA, SpeB, SpeC, SpeF
Shock Tóxico y
ENZIMAS Y TOXINAS

Fascitis necrotizante

Estreptoquinasa Lisa coágulos de fibrina

Peptidasa de C5a Degrada el complemento

Difosfopiridina
Lisis de leucocitos
Nucleotidasa
Diseminación de la
Hialuronidasa
bacteria

Ac. Hialurónico Inhibición de la fagocitosis

Proteína M Inhibición de la fagocitosis

 Género Enterococcus

Cocos gram positivo, de

forma cocoide, en parejas o
cadenas
 Características del Género

❖ El Género Enterococcus esta constituido por bacterias gram

positivo que se agruparon inicialmente en el género
Estreptococos del grupo D.

❖ Se reconoció oficialmente como Enterococcus en 1984, por una

diferencia en la secuencia 16S rRNA.

❖ Microorganismos comensales del tracto gastrointestinal.

❖ Sobreviven largos períodos de tiempo.

 Características del Género

❖ Se transmiten de persona a persona en los hospitales, a través

de las manos o instrumental como termómetros.

❖ Se consideran patógenos nosocomiales relevantes

responsables del 12% de procesos infecciosos.

❖ Pueden causar infecciones:

❖ tracto urinario,
❖ bacteremias,
❖ endocarditis,
❖ infecciones intra-abdominales.
 Manifestaciones Clínicas

Transmisión Infecciones Otras infecciones

Sistema
Manos urinario
personal Meningitis
hospitalario Heridas

Vías biliares
Dispositivos
Endocarditis
médicos
Bacteremia
 Características de los Enterococos

❖ Crece en 6.5% de NaCl, 40% sales biliares

❖ A temperaturas 10-45ºC
❖ Sobrevive hasta por 30 min a 60ºC
❖ Amplio margen de pH
❖ Resistente a algunos detergentes
❖ Produce bacteremias por pasar a través de la barrera
intestinal, por vía intravenosa, abscesos e infecciones del
tracto urinario
Aislamiento Primario
Identificación
 GRAM: COCOS GRAM POSITIVO

PRUEBA DE CATALASA

POSITIVO NEGATIVO

Staphylococcus sp Streptococcus sp

Coagulasa Manitol-sal Beta-hemólisis alfa-hemólisis

S. aureus + + Observar halo claro alrededor de la Observar halo verde alrededor
S. epidermidis - - colonia, redonda, blanca, brillante de la colonia, pequeña, puntiforme
S. saprofiticus - +

TAXO A TAXO P
BACITRACINA (Optoquina)

SENSIBLE RESISTENTE SENSIBLE RESISTENTE

Streptococcus pyogenes Prueba de Streptococcus

CAMP
Taxo SXT
pneumoniae Streptococcus sp
Estreptococo Grupo A

POSITIVO NEGATIVO
SENSIBLE
S. agalactie seguir Prueba de Bilis esculina
Estreptococo no A,
Estreptococo procedimiento Prueba de NaCl 6.5%
no B, no D
Grupo B Taxo SXT

POSITIVO NEGATIVO
Enterococcus sp S. viridans
Grupo D enterococo Grupo D NO enterococo
 Aislamiento Primario e Identificación

Transporte Aislamiento Pruebas

• Stuart Primario Identificación
• Amies • Agar Sangre • Catalasa
• Amies con carbón • Agar Columbia • Coagulasa
• Manitol Sal
• Azucares
Aislamiento Primario e Identificación

Agar Sangre Agar Columbia

Agar Columbia CNA.

Agar Sangre Agar suplementado
suplementado con con Sangre de
Sangre de Carnero al 5% y un
Carnero al 5% inhibidor Acido
Nalidíxico
 Aislamiento Primario e Identificación
Staphylococcus sp

Catalasa Coagulasa Manitol Sal

• Producción de
catalasa enzima que
convierte el peróxido
Producción de la • Los estafilococos
de hidrógeno en agua
enzima coagulasa que coagulasa positiva
y oxígeno
coagula el plasma por hidrolizan el manitol
• Es la prueba activación de la acidificando el medio
difeencial para protrombina
separar los
estafilococos de los
estreptococos
Aislamiento Primario e Identificación
Streptococcus β-Hemolíticos

❖ Taxo de Bacitracina
❖ S. pyogenes +

❖ Prueba de Pirrolidina PYR

❖ S. pyogenes +
Aislamiento Primario e Identificación
Streptococcus β-Hemolíticos

❖ Prueba de CAMP
❖ S. agalactie +
Identificación Streptococcus β-Hemolíticos

❖ Prueba de grupaje por aglutinación en látex

Reacciona con los diferentes azucares de la membrana que
determinan el grupo
 Identificación de Enterococcus sp

❖ Prueba de Tolerancia al Cloruro de Sodio

❖ Prueba de Bilis Esculina

Enterococcus faecalis +
Enterococcus faecium Enterococcus faecalis
 Enterococcus hirae

Enterococcus faecium Enterococcus faecalis

Preguntas?

Gracias