12.

¿Qué es la ADN Ligasa, cuál es su función biológica natural y cuál es su

función en aplicaciones de tecnología de ADN recombinante?

Es una enzima de tipo ligasa que forma enlaces covalentes entre el extremo 5’ de una
cadena polinucleotídica y el extremo 3’ de otra cadena polinucleotídica. También se
denomina enzima de unión de polinucleótidos.

La reparación por escisión puede ser realizada por 3 enzimas: la correndonucleasa U.V.,
iniciadora del proceso, la ADN polimerasa I, que elimina y reconstruye el fragmento de
ADN, y la ADN ligasa, que realiza la unión de los fragmentos nuevos y antiguos.

La proteína ADN ligasa designa una proteína cuya función natural es reparar las hebras
de ADN mediante la creación de enlaces covalentes (enlaces entre dos átomos). Está
formada por un lugar de reconocimiento de las moléculas y por un sitio activo y que
garantizan la reacción enzimática. Gracias a una molécula de ATP (nucleótido que
forma parte de las purinas), el ADN ligasa tiene energía suficiente para ensamblar las
cadenas de ADN. Distinguimos el ADN ligasa 1 que está implicado en la replicación del
ADN y el ADN ligasas 2, 3 y 4 que están involucrados en la reparación del ADN.

para obtener variedades de animales y plantas más productivos). La moderna biología y

bioquímica hacen uso intensivo de la tecnología del ADN recombinante, introduciendo
genes de interés en organismos, con el objetivo de expresar una proteína recombinante
concreta, que puede ser:

 aislada para su uso posterior: por ejemplo, se pueden transformar

microorganismos para convertirlos en auténticas fábricas que producen grandes
cantidades de sustancias útiles, como insulina o vacunas, que posteriormente se aíslan y
se utilizan terapéuticamente
 necesaria para reemplazar la expresión de un gen endógeno dañado que ha dado
lugar a una patología, lo que permitiría el restablecimiento de la actividad de la proteína
perdida y eventualmente la recuperación del estado fisiológico normal, no patológico.
Este es el objetivo de la terapia génica, uno de los campos en los que se está trabajando
activamente en medicina, analizando ventajas e inconvenientes de diferentes sistemas
de administración del gen (virales y no virales) y los mecanismos de selección del punto
de integración de los elementos genéticos (distintos para los virus y los transposones) en
el genoma diana. En este caso, antes de plantearse la posibilidad de realizar una terapia
génica en una determinada patología, es fundamental comprender el impacto del gen de
interés en el desarrollo de dicha patología, para lo cual es necesario el desarrollo de un
modelo animal, eliminando o modificando dicho gen en un animal de laboratorio,
mediante la técnica ‘’knockout’’Sólo en el caso de que los resultados en el modelo
animal sean satisfactorios se procedería a analizar la posibilidad de restablecer el gen
dañado mediante terapia génica.

 utilizada para enriquecer un alimento: por ejemplo, la composición de la leche

(una importante fuente de proteínas para el consumo humano y animal) puede
modificarse mediante transgénesis, añadiendo genes exógenos y desactivando genes
endógenos para mejorar su valor nutricional, reducir infecciones en las glándulas
mamarias, proporcionar a los consumidores proteínas antipatógenas y preparar proteínas
recombinantes para su uso farmacéutico.

 útil para mejorar la resistencia del organismo transformado: por ejemplo, en

plantas se pueden introducir genes que confieren resistencia a patógenos (virus,
insectos, hongos…), así como a agentes estresantes abióticos (salinidad, sequedad,
metales pesados

Ruiz Magda, 4 de abril del 2011, aplicaciones del ADN en diferentes campos.
Recuperado de : https://procesosdeladn.blogspot.com/2011/04/aplicaciones-del-adn-en-
diferentes.html
2012, biopedia, recuperado de: https://www.biopedia.com/contacto/

13. Describa el mecanismo de funcionamiento de la ADN ligasa. Utilice

imágenes como gestión visual para explicar el proceso.
Gutiérrez Damián, 2015, funcionamiento ADN, recuperado de:
http://slideplayer.es/slide/4057946/

14.Mencione una técnica que se utilice para separar fragmentos de ADN y explique
el principio de funcionamiento de esta.

Electroforesis en gel:

La electroforesis en gel es una técnica utilizada para separar fragmentos de ADN (u

otras macromoléculas, como ARN y proteínas) por su tamaño y carga. La electroforesis
consiste en aplicar una corriente a través de un gel que contiene las moléculas de
interés. Con base en su tamaño y carga, las moléculas se desplazarán por el gel en
diferentes direcciones o a distintas velocidades, con lo que se separan unas de otras.
Todas las moléculas de ADN tienen la misma cantidad de carga por masa. Debido a
esto, la electroforesis en gel separa los fragmentos de ADN únicamente por su tamaño.
La electroforesis nos permite ver cuántos fragmentos diferentes de ADN están presentes
en una muestra y cuán grandes son unos con respecto a otros. También podemos
determinar el tamaño absoluto de un fragmento de ADN examinándolo junto a una
"escala" estándar de fragmentos de tamaño conocido.

Electroforesis en gel, recuperado de:

https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-
pcr-electrophoresis/a/gel-electrophoresis (S.F)