TOMA DE MUESTRA SANGUÍNEA Y CUANTIFICACIÓN DE

HEMATOCRITO
TAKING BLOOD SAMPLE AND QUANTIFICATION OF HEMATOCRIT
Castro, D*; Echeverry, S** y Tunja, J***

RESUMEN

La toma de Muestra Sanguínea es una actividad inherente a la comunidad médica y la

capacidad de desarrollar esta práctica es también propia del Estudiante de Medicina el cual
debe conocerla y ejecutarla adecuadamente. En el presente artículo se da a conocer esta
práctica desarrollada en los laboratorios de Bioquímica de la Universidad del Magdalena. De
igual manera se presentan los análisis de Hematocrito realizados por los estudiantes que se
realizaron con la punción capilar en la pulpa del dedo. Todos estos datos fueron objeto de
análisis para el desarrollo de las pruebas de laboratorio básicas que el cuerpo médico ordena
para establecer grados de diferencia entre la presencia o ausencia de patologías
específicamente las asociadas a los niveles anormales de componentes en sangre. Por último
se realizaron las discusiones respectivas de los resultados obtenidos en cada grupo de
laboratorio.

PALABRAS CLAVE: Toma de Muestra, Sangre, Hematocrito, Centrifugación y Plasma.

ABSTRACT

The Taking Blood Sample is an activity so inherent to the medical community and the
capacity for develop it also is a own feature of the Medicine Student. He must know it and
also do it correctly. At the present paper, is showed the practice developed at the
Biochemistry Laboratories of the Magdalena University. Therefore is presented the analysis
of Hematocrit done by the students that were developed with capillary puncture at the finger
pulp. All this dates were object of analysis for the basics test laboratory growth that the
medical community order for to establish different grades about the present or absent of
pathologies, specially, the associated with abnormal levels of Blood elements. By last, were
developed the respectively discussions about the answers obtained in every Laboratory team.

KEYWORDS: Taking Blood Sample, Blood, Hematocrit, Centrifugation and Plasm.

MARCO TEÓRICO la presencia, ausencia, característica o

comportamiento de algún elemento en el
La toma de Muestra sanguínea es una cuerpo humano.
técnica utilizada para obtener volumenes
de tejido hematopoyético destinados al Hay varios métodos para la obtención de
análisis biomédico con el fin de determinar sangre, siendo los más empleados el de la
* Estudiante de Medicina. Universidad Cooperativa de Colombia. COD: 2018261071
** Estudiante de Medicina. Universidad Cooperativa de Colombia. COD: 2018261059
*** Estudiante de Medicina. Universidad Cooperativa de Colombia. COD: 2018261063
venopunción y el de la punción capilar. La un color especifico teniendo en cuenta su
diferencia entre estos métodos es que la funcion o el anticoagulante que posean.
venopunción permite extraer grandes
volúmenes de sangre (usados en
procedimientos en donde la concentración
de los componentes a investigar es alta)1.

Haciéndose énfasis en la técnica de

venopunción se pueden mencionar entre
las valoraciones más comunes que se
pueden realizar con la extracción de tejido
sanguíneo las siguientes:

- Hemocultivos
- Hemogramas (hematíes, leucocitos,
plaquetas)
- Ionogramas
- Gasometría Arterial
- Estudios de Coagulación

Para realizar esta técnica se requiere

localizar una vena preferiblemente en
donde no se hayan colocado las vías
intravenosas, así como zonas que
contengan, cicatrices, hematomas,
quemaduras1.
Ademas, en esta técnica es indispensable,
el uso adecuado de elementos de
bioseguridad, realizar una adecuada
tecnica aseptica, asi como el uso de un
torniquete que va a aumentar la presion
intravascular y facilitar la palpacion de la
vena, se recomienda no dejar el torniquete
por mas de 2 minutos, ya que puede
ocasionar hemoconcentracion e infiltracion
de sangre en los tejidos1.
La recoleccion se lleva a cabo mediante el
uso de tubos de recolección sanguinea al
vacio (tambien los hay sin vacio), los
cuales van a facilitar el proceso segun el
analisis que se requiera y se clasifican por
Figura 1. Clasificación de tubos segun materia de
ensayo, color de la tapa y contenido que posean.
Tomado de Guía de Uso de Tubos para
Recolección de Muestras. [Internet].
Nipromexico.com. 2019 [citado el 25 de Marzo del
2019]. Disponible en:
https://www.nipromexico.com/_pdf/Guia_de_uso_d
e_tubos.pdf
El tubo de tapa transparente, es un tubo
que no contiene aditivos, aqui la materia
de ensayo es el suero y es utilizado para
liquidos biologicos y/o bioquimica
clinica2.
El Tubo tapa azul: contiene aditivo de
citrato de sodio al 3.2% y es tilizado para
tirmpo de protombina, TTPK,
Fibrinogeno, Factores de coagulacion2.
El tubo de tapa roja: No contiene aditivo y
se usa para sepración suero y plasma 2.
El tubo tapa verde: su activador es
heparina de litio y es utilizado para perfiles
bioquimico, hepatico, lipídico, así como
para el monitoreo de drogas terapéuticas,
hormonas, electrolitos, enzimas
2
serolgia .
El tubo tapa lila: su aditivo es EDTA-K2
O EDTA-K3 y su uso es fndamental para
Hemograma, Hematocrito, Hemoglobina,
Recuento celular, Diferenciacion celular,
biologia molecular2.
Y el tubo tapa negra: inhibidor de a
glicolisis (fluoruro de sodio) y
anticoagulante (EDTA-K3 u oxalato de
potasio) y es utilizado para glucosa y
lactato2.
Por otra parte, la cuantificación de
Hematocrito, es la técnica por la cual se
mide el porcentaje (%) de la proporción de
eritrocitos en el total de la Sangre. Este
parámetro no debe emplearse para
establecer la existencia de anemia. Los
valores normales del Hematocrito
dependen también del sexo, edad e incluso
la altitud del lugar de residencia3.
El hematocrito normal oscila entre 46 -
56% en los hombres y del 39 - 50% en las
mujeres3. Los niveles de hematocrito
tienen otras características específicas que
los evan a variar o mantenerse constante
en varios casos.
El hematocrito es elevado en el recién
nacido por ejemplo, y desciende aun valor
mínimo hacia el año de edad y después
asciende gradualmente hasta llegar a los
valores de adultos4. También existen
tendencias a descender estos niveles en el
hombre y la mujer después de los 50 años,
en los que se encuentran los valores de
recuentos más bajos. De igual manera, los
niveles de Hematocrito de una mujer
Embarazada son menores que los de una
mujer normal sin gravidez4.
y Cuando hay pérdida de la volemia, los
niveles de Hematocrito no se afectan
enseguida, pero una vez se recupera el
volumen sanguíneo, el hematocrito y el
recuento de hematíes disminuye4. Se
puede aseverar que el hematocrito tiende a
no tener unos registros estrictos
dependiendo del casos de la persona y su
estado.
MATERIALES Y MÉTODOS
El desarrollo de la práctica se utilizaron
alrededor de una docena de materiales
distintos para poder llevar a cabo
correctamente la técnica de extracción de
muestra sanguínea. Entre estos materiales
se encontraban tubos de ensayo con su
respectiva gradilla, jeringas de 5cc para la
toma de muestra, guantes estériles con los
que se realizó el debido procedimiento
aséptico, torniquetes para detener el fluido
venoso, algodón para impedir pérdidas
sanguíneas, micropipetas graduadas de
1ml para tomar los componentes de la
solución sanguínea, lancetas para la
punción capilar, una microcentrífuga para
determinación de Hematocrito, así como
una centrífuga para obtención de Suero y
alcohol antiséptico.
Se llevó a cabo un diseño experimental, en
el cual se empleó la muestra de sangre
correspondiente a 5 estudiantes voluntarios
con el fin de desarrollar la tecnica de
extraccion de sangre, medir los niveles de
hematocritos e interpretarlos y lograr
separar las fases del plasma sanguíneo,
para esto se realizaron los siguientes
procedimientos:
EXTRACCIÓN DE SANGRE VENOSA
Para la extracción de sangre Venosa se
realizó el respectivo lavado de manos con
el fin de eliminar el máximo de
microorganismos presentes.
Se preparó la dispensa de materiales para
realizar la venopunción tales como las
torundas de algodón. Posterior a ello se
colocó torniquete, se palpó la vena en este
caso medial, se limpió la zona donde se
fué a realizar la venopunción, y se realizó
la venopunción.
OBTENCIÓN DEL SUERO
Se depositó la muestra en un tubo de tapa
roja. Luego se llevó la muestra a la
centrífuga durante 10 minutos a 3000rpm.
Al finalizar la centrifugación se retiró el
tubo con cuidado y separó el suero con
ayuda de una pipeta. Se trasvasó el suero
extraído en un tubo de ensayo con
anticoagulante EDTA, de tapa Lila y se
mezcló suavemente el suero con el
anticoagulante.
Fotografía 1. Muestras de Sangre Venosa en
Centrífuga. Tomada por los autores.
PUNCIÓN CAPILAR
Para la punción capilar se hizo uso de una
lanceta, previamente se realizó el
respectivo lavado de manos con el fin de
eliminar el máximo de microorganismos
presentes. Se empapó una torunda de
algodón con alcohol antiséptico para
limpiar el dedo en donde se realizaría la
punción. Luego se realizó la punción y se
puso en contacto el capilar con la gota de
sangre extraída hasta que este se llenó por
completo, se ubicó el capilar en la
microcentrífuga y se esperó un minuto.
Fotografía 2. Punción Capilar Realizada por los
Estudiantes. Tomada de los autores
RESULTADOS
OBTENCIÓN DEL SUERO
SANGUÍNEO
La obtención del suero sanguíneo se pudo
observar una vez los tubos cesaron en el
proceso de centrifugación y se pudo
observar tanto la serie roja (glóbulos
rojos), el Buffy Coat (glóbulos blancos) y
el plasma obtenido.
Cabe mencionar que entre estas tomas de
muestra unas fueron extravasadas de
nuevo, esta vez a tubos de tapa Lila.
Fotografía 3. Separación del suero y las células
sanguíneas. Tomada por las atores.
Fotografía 4. Suero Sanguíneo en tubos con EDTA
de tapa Lila. Tomada por las atores.
CUANTIFICACIÓN DE
HEMATOCRITO
Después de que cada grupo de Laboratorio
obtuvo su muestra de Sangre Capilar en
los tubos para Capilares esta fué llevada a
la Microcentrífuga para la cuantificación
respectiva del Hematocrito de cada uno de
los estudiantes que habían realizado la
práctica, tanto hombre como mujer,
arrojando así los siguientes resultados
observados en la Tabla 1.
Tabla 1. Resultados de Hematocrito para cada uno
de los participante de Laboratorio.
Nombre Hematocrito
Ramiro 51
Santiago 55
Aura 49
Daniela 46
Mary 52
Fotografía 5. Resultado prueba de hematocrito de
la estudiante Aura. Tomada por las autores.
Como se observan los niveles de
Hematocrito para cada estudiante se
encuentran en el rango promedio de los
niveles de Hematocrito para Hombres (46
- 56%) y Mujeres (39 - 46%) lo que indica
que los estudiantes tienen buenos niveles
de serie roja.
DISCUSIÓN
El proceso de extracción de sangre que se
realizó, permitió observar cuales son los
factores indispensables a la hora de tomar
una muestra sanguínea, factores como la
técnica aséptica, la postura del torniquete,
la dirección adecuada de la aguja, el
tiempo, entre otros que llegan a ser
relevantes para los resultados que se
esperan. Además el uso de esta técnica
permite obtener la destreza necesaria para
la toma de muestras futuras, así como la
realización adecuada para el objetivo de la
misma, resaltando la importancia que se
tiene al obtener una buena recolección.
Una vez obtenida la muestra se procedió a
trasvasarla a un tubo de ensayo y llevada
posteriormente a centrifugación durante 10
minutos, al finalizar el centrifugado la
muestra se encontraba separada en dos
fases (plasma y Células sanguíneas), pero
esta se encontraba en estado coloidal como
lo muestra la Fotografía 6 y por ende no
se pudo realizar la separación
correspondiente con ayuda de la pipeta.
Fotografía 6. Tubo de ensayo inclinado,
separación del plasma y las células sanguíneas.
Tomada por las atores.
En la imagen se logra evidenciar que tanto
el plasma como las células sanguíneas se
encuentran coagulados. según el instituto
de salud Carlos III de España manifiesta
que la recolección de la muestra debe
hacerse en un tubo tapa lila el cual
contiene un aditivo (EDTA) que como
finalidad busca no permitir la coagulación
del plasma13, este fue la principal causa de
la coagulación de la muestra debido que el
tubo que se usó para llevar a cabo la
experimentación fue un tubo de tapa roja
que no contiene aditivos, del mismo modo
cuando se saca la sangre de circulación
esta se coagula de inmediato (eritrocitos
incluidos en una red de fibras compuestas
por fibrina)14, así como el contacto de esta
con el oxígeno es por esta razón el uso
necesario de anticoagulantes ya que el
proceso de centrifugación tardaba 10
minutos, tiempo suficiente para que ésta se
coagule.
Por otra lado, una vez que se realizó la
punción correspondiente, se analizaron los
resultados obtenidos para observar los
niveles de hematocritos presentes en los
estudiantes voluntarios en donde se
identificó que todos estaban en un rango
dentro de los límites, sin embargo se
evidencia que el resultado obtenido por las
mujeres es un poco alto con respecto a los
valores normales, pero se establece que
son verídicos ya que el uso de la plastilina
en el momento para sellar los capilares
antes de ser llevados a la microcentrífuga
en estos casos pudo haber desplazado en
un porcentaje promedio aproximado de 5
haciendo variar de este modo los
resultados Fotografía 7.

Fotografías 7 y 8. Tubo capilar en donde se
evidencia el uso de la plastilina (color marrón)
como sellante. Tomada por las autores
De esta manera se concluye que los
valores altos de Hematocritos desplazan el
plasma y puede conllevar a problemas
como la deshidratación y falta de
minerales y que los niveles bajos de
hematocritos (eritrocitos circulantes)
producen diversos problemas entre los
principales la anemia14. Aunque en las
mujeres los niveles bajos de hematocrito
suele presentarse en el periodo menstrual.
CUESTIONARIO
1. ¿Cual es la diferencia entre Suero y
Plasma sanguíneo?
El plasma sanguíneo es un líquido
amarillento constituido por 95% de agua y
un 5% de otras sustancias que se
encuentran en suspensión, entre los cuales
podemos encontrar iones (sodio, potasio.
cloro), glucosa, proteínas (albúmina,
fibrinógeno), ácidos grasos, entre otros.
Por otro lado El suero sanguíneo es
aquella sustancia sobrenadante similar al
plasma que queda cuando la sangre se
coagula5.
2. ¿Explique el fundamento entre las
pruebas de TPT y TP y porqué
estas no deben realizarse en el
Suero Sanguíneo?
TP: Tiempo de Protombina
La prueba de consumo de protrombina es
un índice de la eficiencia de conversión de
protrombina en trombina en el proceso de
coagulación6. La muestra de sangre se deja
coagular en condiciones estandarizadas y
luego se determina la cantidad de
complejo de protrombina removida del
suero, en presencia de fibrinógeno
extrínseco. En condiciones normales se
consume como mínimo el 80% de la
protrombina6. Un consumo reducido de
protrombina (<80%) se observa en los
defectos de la coagulación (hemofilia)
relacionados con la generación de
tromboplastina.
TPT: Tiempo de Tromboplastina.
Constituye la detección de deficiencias
específicas de los factores V, VIII, IX, X,
XI o XII6. En la fase inicial de este
procedimiento se determina el tiempo de
coagulación del plasma absorbido del
paciente, en presencia de un reactivo de
factor plaquetario estandarizado, cloruro
de calcio, reactivo sustrato plasmático
(factores I, II y V) y el suero del paciente.
Si el tiempo de coagulación es anormal
(>16 segundos), se realizan nuevos
estudios con el plasma o el suero del
paciente. La absorción de la muestra de
plasma en el Sulfato de Bario remueve los
factores II, VII, IX y X y facilita la
diferenciación de una deficiencia de
factores IX a X y de factores V a VIII en el
mecanismo de generación de
6
tromboplastina . Este último proceso está
reducido en la Hemofilia y en la
trombocitopenia.
No se debe realizar en el suero sanguíneo,
ya que este no posee fibrinógeno ni
factores de coagulación7.
3. ¿Cuál es el mecanismo de acción
de los siguientes Anticoagulantes
EDTA, Heparina, Oxalato y
Citrato?
HEPARINA
Se une a antitrombina III (ATIII),
produciendo un cambio conformacional
que aumenta la capacidad inhibitoria de
esta enzima sobre los factores de
coagulación: trombina, Xa y IXa. Para que
la inactivación de trombina sea acelerada
debe formarse un complejo terciario de
ATIII + heparina + trombina. El factor Xa
sólo requiere del cambio conformacional8.
EDTA
El ácido etilendiaminotetraacético (EDTA)
libre, en forma de sal disódica
(Na2EDTA), di o tripotásica (K2EDTA -
K3EDTA), actúa mediante un efecto
quelante sobre el calcio (Ca2+). Al fijarlo,
impide la activación de la trombina
(protrombina), la conversión del
fibrinógeno en fibrina y, por tanto, la
coagulación sanguínea. Las sales de
potasio tienen la ventaja con respecto a la
de sodio, de ser más solubles en sangre.9
CITRATO
El citrato trisódico (C6H5O7Na3) actúa
impidiendo que el calcio se ionice,
evitando así la coagulación. La proporción
es una parte de 3.8 ó 3.2 % de solución
acuosa y 9 partes de sangre total9.
OXALATO
También llamada anticoagulante de
Wintrobe. Contiene oxalato de amonio,
oxalato de potasio, formol y agua10. Para
5ml de sangre se utilizan 0.5ml de la
mezcla de anticoagulante. Esta solución
anticoagulante actúa como tal para fijación
de calcio y debe usarse siempre desecado
para no diluir la sangre.10
4. ¿Cuál es el valor normal del
Hematocrito en un adulto sano?
¿Sus resultados están acordes a
este valor?
Como se mencionó previamente, los
valores normales de Hematocrito oscilan
entre 39 - 50% en las Mujeres y entre el 46
- 56% en los hombres3.
Con respecto al análisis comparativo de
los resultados desarrollados durante la
práctica es posible determinar que los
estudiantes poseen muy buenos niveles de
serie roja un tanto aumentados en el caso
de la Estudiante Mary Narváez por encima
de los niveles normales de la mujer, pero
que no indican ninguna condición
patológica.
5. ¿Explique el fundamento de la
determinación del Hematocrito y
Cual es su utilidad Diagnóstica?
El fundamento de la técnica del
Hematocrito consiste en utilizar un tubo
capilar para poder tomar muestra MedicaPanamericana; 2009. Pag
sanguínea capilar que a su vez va a ser 14.
leída en la centrífuga11. Primeramente se 4. Miale J. Hematología, medicina de
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limpia el extremo de los tubos y se sella Reverté; 1985. pg 384
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