LABORATORIO

JUAN SEBASTIAN MARTINEZ

RAFAEL RICARDO HOYOS
NELSON DAVID RODRIGUEZ
VIVIANA MARCELA TIRADO PINEDA

Grupo: 526

Análisis muestras

OLGA LUCIA MARTINEZ

SENA AGROINDUSTRIAL
CONTROL Y CALIDAD DE ALIMENTOS
ARMENIA QUINDIO
2010
OBJETIVOS

GENERALES

∙​ ​Conocer los diferentes equipos y materiales que presenta el laboratorio

microbiológico.

∙​ ​Conocer la normatividad del laboratorio con el fin de evitar algún accidente

en las futuras prácticas.
 EQUIPOS DE LABORATORIO

● Microscopio

● Incubadora​: Esta se mantiene a temperatura estable para permitir el crecimiento

de los microorganismos.

● Autoclave manual​: Se utiliza para esterilizar.

● Autoclave automática​: Tiene temporizador y nos permite dejarla sola. descarga.

● Estufa de secado: esta es por medio de calor y allí se esteriliza materiales de

vidrio (los vidrios se envuelven en papel craf), NO medios de cultivo.

120º y se deja 1 hora ò

180º y se deja 30 min.

● Balanza analítica

● Peachimetros

● Neveras para medios de cultivo

● Cámaras de flujo laminar: ​Sirve para hacer siembra de alimentos en el medio de

cultivo, garantizando un mayor control ambiental.

MATERIAL DE VIDRIO

● Frascos bacteriológicos

● Cajas petr​i
● Tubos de ensayo

● Gradillas para los tubos de ensayo

● Erlenmeyer

● Campana de Durham: ​para prueba de coliformes.

● Asas

● Mechero

● Medios de cultivo:
DEV Caldo-triptófano
Peptona
XLD médium

● Desibonizador: ​Es un equipo que sirve para obtener agua destilada de una forma
química

● Destilador: ​Este equipo también sirve para obtener agua destilada pero de una
manera física.

● Osmosis inversa: ​Sirve para obtener agua destilada de una manera física.

● Balón aforado: ​Sirve para preparar soluciones.

● Probeta:​ Este sirve para medir líquidos.

● Pipeta​: Este sirve para medir líquidos.

● Pinzas: ​Metálicas / madera

● Plancha de calentamiento

● Portaobjetos

● Cubreobjetos
Solución del cuestionario

1. DEFINICIONES
❖​ ​Desinfección​: Es un proceso selectivo que se ha empleado para destruir o
inactivar a los organismos patógenos, especialmente las bacterias de origen
entérico

❖​ ​Esterilización​: Esta operación comprende todos los procedimientos físicos,

mecánicos y químicos, que se emplean para destruir, inactivar o retener
gérmenes en general y patógenos en particular. A través de esta, los materiales
de laboratorio para determinados diagnósticos y los elementos quirúrgicos y la
piel del enfermo alcanzan un estado de desinfección que evita la contaminación
operatoria.

2. METODOS DE ESTERILIZACION
Los métodos de esterilización pueden ser de 3 tipos:​
​Por destrucción total de microorganismos
‚​ ​Por muerte o inactivación; y
ƒ​ ​Por eliminación con medios físicos.
Por destrucción total​: Se entiende un proceso muy violento, que casi siempre implica
calentamiento apreciable del material, como ocurre con la aplicación de una llama, que
es lo que hacemos en el laboratorio cuando flameamos un ansa de platino o las bocas
de tubo de ensayo o Erlenmeyer. Otra manera de destruir contaminantes es con el uso
de poderosos agentes oxidantes. Por supuesto ésta metodología, aunque es efectiva,
está muy restringida en su empleo.
La muerte o inactivación​: Significa la eliminación de microorganismos sin que exista
necesariamente desintegración de las células. Se puede efectuar por calentamiento,
seco o húmedo, por radiaciones o por agentes químicos. El calor húmedo,
generalmente en forma de vapor bajo presión, es muy útil y de gran valor en la
esterilización en el laboratorio, que se efectúa en autoclave, o en la industria cuando se
esterilizan los medios de cultivo y los equipos de fermentación. En el caso de los
autoclaves, se pueden alcanzar presiones de 1 a 3 atmósferas. En escala grande el
equipo de producción es esterilizado con vapor saturado bajo presión, y la presión
requerida debe ser alcanzada en todas las partes del equipo y el aire debe ser purgado
totalmente del sistema (como ocurre también en el caso de los autoclaves) porque la
transferencia de calor disminuye mucho en ese caso. Después de la esterilización se
mantienen las condiciones asépticas, haciendo pasar vapor por las válvulas y sellos.
La eliminación física​: Está restringida a la esterilización de gases líquidos, y es
fundamentalmente llevada a cabo por filtración mediante filtros absolutos o filtros
fibrosos.
Los filtros absolutos son de materiales cerámicos, de vidrio o de metal sinterizado con
poros tan pequeños que la penetración de los microorganismos no es posible.
Los filtros fibrosos no son absolutos y el material filtrante puede ser lana de vidrio,
amianto y esteres de celulosa, siendo las fibras de un diámetro variable de 0.5 a 15
micrones.

3. METODOS DE DESINFECCION
​ esinfección física; y
D
‚​ ​Desinfección química.

Desinfección Física​: ​Calor, calor más presión (autoclave), calor húmedo, luz
ultravioleta.
De todos los agentes desinfectantes, el calor es el más efectivo. En las instalaciones y
equipos donde sea factible, debería aplicarse y tomando las precauciones de rigor. Los
rayos ultravioletas del sol, ejercen una importante acción germicida.
Desafortunadamente hay limitaciones de orden práctico para su uso

Desinfección química​: Con desinfectantes

4. DEFINICIONES
❖​ ​punto térmico letal​: la temperatura más baja que se necesita para matar a
los organismos en 10 minutos.

❖​ ​tiempo térmico letal o de destrucción térmica F: tiempo necesario para

destruir los microorganismos a una temperatura determinada y bajo condiciones
específicas

❖​ ​tiempo de reducción decimal o valor D: tiempo (en minutos y a una

temperatura determinada) que se requiere para reducir la población viable al
 10% de su valor.

5. CLASIFICACION Y MANEJO DE RESIDUOS SOLIDOS Y LIQUIDOS DE

LABORATORIO.
RESIDUOS SOLIDOS
Material que no representa una utilidad o un valor económico para el dueño, el dueño
se convierte por ende en generador de residuos. Desde el punto de vista legislativo lo
mas complicado respecto a la gestión de residuos, es que se trata intrínsicamente de
un termino subjetivo, que depende del punto de vista de los actores involucrados
(esencialmente generador y fiscalizador)
 CLASIFICACION:

● Clasificación por estado:​ Un residuo es definido por estado según el estado físico
en que se encuentre.

● ​ e puede definir el residuo por la actividad que lo origine,

Clasificación por origen: S
esencialmente es una clasificación sectorial. ​Esta definición no tiene en la practica
limites en cuanto al nivel de detalle en que se puede llegar en ella.
Tipos de residuos más importantes :

∙​ ​ esiduos municipales: ​La generación de residuos municipales varia en

R
función de factores culturales asociados a los niveles de ingreso, hábitos de
consumo, desarrollo tecnológico y estándares de calidad de vida de la población.

∙​ ​Residuos industriales : ​La cantidad de residuos que genera una industria es

función de la tecnología del proceso productivo, calidad de las materias primas o
productos intermedios, propiedades físicas y químicas de las materias auxiliares
empleadas, combustibles utilizados y los envases y embalajes del proceso.
∙​ ​ esiduos mineros : ​Los residuos mineros incluyen los materiales que son
R
removidos para ganar acceso a los minerales y todos los residuos provenientes
de los procesos mineros. Residuos hospitalarios :
● Clasificación por tipo de manejo​: Se puede clasificar un residuo por presentar
alguna características asociada a manejo que debe ser realizado :
Desde este punto de vista se pueden definir tres grandes grupos:
a)​ Residuo peligroso: Son residuos que por su naturaleza son inherentemente
peligrosos de manejar y/o disponer y pueden causar muerte, enfermedad; o que
son peligrosos para la salud o el medio ambiente cuando son manejados en
forma inapropiada.
b)​ Residuo inerte: Residuo estable en el tiempo, el cual no producirá efectos
ambientales apreciables al interactuar en el medio ambiente.
c)​ ​ Residuo no peligroso: Ninguno de los anteriores
​MANEJO
Básicamente el sistema de manejo de los residuos se compone de cuatro sub
sistemas:
a)​ ​Generación: Cualquier persona u organización cuya acción cause la
transformación de un material en un residuo. Una organización usualmente se
vuelve generadora cuando su proceso genera un residuo, o cuando lo derrama o
cuando no utiliza mas un material.
b)​ ​Transporte: Es aquel que lleva el residuo. El transportista puede
 transformarse en generador si el vehículo que transporta derrama su carga, o si
cruza los limites internacionales (en el caso de residuos peligrosos), o si
acumula lodos u otros residuos del material transportado.
c)​ Tratamiento y disposición: El tratamiento incluye la selección y aplicación
de tecnologías apropiadas para el control y tratamiento de los residuos
peligrosos o de sus constituyentes. Respecto a la disposición la alternativa
comúnmente más utilizada es el relleno sanitario.
d)​ Control y supervisión: Este sub sistema se relaciona fundamentalmente
con el control efectivo de los otros tres sub sistemas.

LIQUIDOS DE LABORATORIO
Manejo de sustancias químicas: La seguridad en el laboratorio no se limita únicamente
a la protección personal o de la infraestructura, sino también a un manejo adecuado de
los reactivos químicos encaminado a preservarlos de la contaminación y del
desperdicio.
CLASIFICACION:

● Sustancias sólidas​: ​Como costumbre se debe leer la etiqueta de un reactivo antes

de usarlo. Los reactivos sólidos normalmente se almacenan en recipientes de
boca ancha y antes de abrirlos se gira e inclina la vasija de tal manera que algo
del contenido pase a la tapa plástica. A continuación se remueve cuidadosamente
la tapa con sólido dentro de ella y se golpea suavemente hasta obtener la
cantidad deseada. Cuando se requieren cantidades apreciables comparadas con
el contenido del frasco, se inclina la botella suavemente y se gira hacia atrás y
hacia adelante hasta retirar lo necesario. Si el reactivo se encuentra compactado,
se tapa el recipiente y se agita fuertemente para lograr romper los terrones. Evitar
introducir elementos como destornilladores, espátulas de hierro u otro objeto que
pueda contaminar el sólido. Si el reactivo es muy fino y libera polvo fácilmente,
debe utilizarse una mascarilla apropiada.

● Sustancias líquidas:​ Los líquidos se almacenan por lo general en recipientes de

boca angosta o en frascos con gotero. Para medir una cantidad de líquido, sea
una solución o un líquido puro, se debe sacar una pequeña porción a un vaso
limpio y seco, y de allí se toma la cantidad requerida mediante una pipeta. No
deben introducirse pipetas o cualquier otro dispositivo directamente dentro de la
botella que contiene el liquido, esto conduce generalmente a la contaminación de
todo el contenido. ​Cuando se van a transferir líquidos desde un gotero tipo
medicinal, la manera más correcta es verter el líquido sin introducir el gotero en el
recipiente en el cual se va a almacenar el líquido, para evitar la posibilidad de
contaminación del gotero y de la solución original.​ ​Campana de extracción
 ● Sustancias explosivas:​
Peligro​: Este símbolo señaliza sustancias que pueden explotar bajo
determinadas condiciones. Ejemplo: dicromato de amonio.
Precaución: Evitar choques, percusión, fricción, formación de chispas y contacto
con el calor.

● Sustancias oxidantes (comburentes):

Peligro: ​Los compuestos comburentes pueden inflamar sustancias combustibles o
favorecer la amplitud de incendios ya declarados, dificultando su extinción.
Ejemplo: permanganato de potasio, peróxido de sodio.
Precaución​: Evitar cualquier contacto con sustancias combustibles.

● Sustancias fácilmente inflamables:

a. Sustancias autoinflamables. Ejemplo: alquilos de aluminio, fósforo.
Precaución. Evitar contacto con el aire
b. Gases fácilmente inflamables. Ejemplo: butano, propano.
Precaución. Evitar la formación de mezclas inflamables gas-aire y aislar de
fuentes de ignición.
c. Sustancias sensibles a la humedad​
● Líquidos inflamables: ​En términos muy sencillos, los líquidos inflamables son
aquellos que fácilmente pueden arder. El que un líquido arda con más o menos
facilidad depende de su ​punto de llama​. Entre más bajo sea este punto más
fácilmente arde el reactivo y por lo tanto mayor cuidado se ha de tener en su
manejo, almacenamiento y transporte. Con estos líquidos se ha realizado una
clasificación teniendo en cuenta lo anteriormente expuesto y su solubilidad en el
agua:

PELIGRO CLASE A: E ​ sta clasificación se le asigna a líquidos que tienen un punto de

llama por debajo de 100 ºC y que no se disuelven en el agua a 15 ºC.
AI ​ ​Líquidos con punto de llama por debajo de 21 ºC.
AII​ ​Líquidos con punto de llama entre 21 y 55 ºC.
AIII​ ​Líquidos con punto de llama entre 55 y 100 ºC.
PELIGRO CLASE B​: Esta clasificación se le asigna a líquidos que tienen punto de
llama por debajo de 21 ºC y que se disuelven en agua a 15 ºC, o a aquellos cuyos
componentes inflamables se disuelven en agua también a 15 ºC. Este tipo de líquidos
no se puede apagar con agua.
● Sustancias tóxicas
Peligro​:​ ​Tras una inhalación, ingestión o absorción a través de la piel pueden
presentarse, en general, trastornos orgánicos de carácter grave o incluso la
 muerte. Ejemplo: trióxido de arsénico, cloruro de mercurio (II).
​ vitar cualquier contacto con el cuerpo y en caso de malestar acudir
Precaución​: E
inmediatamente al médico.

● Sustancias nocivas
Peligro:​ ​La incorporación de estas sustancias por el organismo produce efectos
nocivos de poca trascendencia. Ejemplo: tricloroetileno.
Precaución:​ E ​ vitar el contacto con el cuerpo humano así como la inhalación de
vapores. En caso de malestar acudir al médico.

● Sustancias corrosivas
Peligro: ​Por contacto con estas sustancias se destruye el tejido vivo y también
otros materiales. Ejemplo: bromo, ácido sulfúrico.
Precaución:​ ​No inhalar los vapores y evitar el contacto con la piel, los ojos y la
ropa.

● Sustancias irritantes
Peligro​: ​Este símbolo destaca en aquellas sustancias que pueden producir acción
irritante sobre la piel, los ojos y sobre los órganos respiratorios. Ejemplo:
amoníaco, cloruro de bencilo.
Precaución: ​No inhalar los vapores y evitar el contacto con la piel y los ojos.

● Ácidos y bases:​ ​ ​Los ácidos y las bases inorgánicas (excepto los cianuros) se
deben neutralizar antes de ser agregadas al desagüe. Como agentes
neutralizantes se utilizan el carbonato de calcio y el ácido clorhídrico.

● Metales Pesados:​ Muchos iones metálicos son tóxicos por encima de una
concentración límite. Los compuestos de cadmio, cobalto, cromo, manganeso y
níquel son cancerígenos, algunos son teratogénicos. Una estrategia económica
para eliminar iones cargados positivamente consiste en tratar los residuos con
carbonato de sodio y formar los hidróxidos o los carbonatos correspondientes, los
cuales en la mayoría de los casos son lo bastante insolubles para reducir la
concentración del metal en solución hasta límites aceptables.

● Compuestos orgánicos​: ​Los solventes orgánicos se deben recuperar por

destilación. Teniendo en cuenta que las cantidades de solventes que se utilizan
en el laboratorio son pequeñas, se recomienda almacenarlos en recipientes
debidamente rotulados hasta disponer de la cantidad suficiente para su
recuperación. Se debe evitar mezclar residuos de solventes ya que esto hará mas
dispendiosa la separación.
Si los residuos orgánicos no contienen halógenos ni nitrógeno se pueden eliminar por
incineración. Dado que los productos de la combustión no contienen ácidos o sus
precursores, los gases no requieren ser lavados.
Si los residuos orgánicos contienen halógenos o nitrógeno, los gases deben lavarse
con solución de carbonato de sodio para atrapar ácidos como el clorhídrico o nítrico
que se generan durante la combustión.

MANEJO
La alta calidad en un análisis ​químico requiere reactivos y soluciones de excelente
pureza. Las siguientes normas deben observarse para prevenir la contaminación
accidental de los reactivos y de las soluciones.
● Seleccionar el reactivo químico de mejor calidad que se encuentre disponible.
Elegir la botella de menor volumen para obtener la cantidad deseada.
● Tapar la botella inmediatamente después de haber tomado la cantidad deseada.
Por ningún motivo delegue a otro esta acción.
● Mantener los tapones de las botellas de los reactivos entre los dedos, nunca debe
colocarse un tapón sobre la mesa.
● A menos que se diga otra cosa, nunca se debe devolver el reactivo a una botella.
El dinero ahorrado por retornar el exceso de reactivo rara vez supera el riesgo de
contaminar toda la botella.
● A menos que se diga otra cosa, nunca se deben insertar espátulas, cucharas, o
cuchillos en una botella que contenga un reactivo sólido. Ver instrucciones
respectivas en apartado siguiente.

6. QUE ES EL ANTIDOTO UNIVERSAL Y EN QUE CONSISTE.

Es una fórmula empírica usada en primeros auxilios utilizada universalmente para
suministrar en caso de ingerir un veneno; o ser inoculado al torrente sanguíneo (siendo
poco efectivo). Esta especialmente indicado para inertizar sustancias venenosas
ingeridas y contenidas aun en el estómago dentro de un corto lapso de tiempo de la
ingesta.
Brebaje de inertización
∙​ ​Carbón activo 2 partes (puede ser pan bien tostado)
∙​ ​Hidróxido de magnesio 1 parte (puede ser leche de magnesia)
∙​ ​Ácido tánico 1 parte. (puede ser tartratos de uva negra)
∙​ ​Agua potable 6 partes
II.-Brebaje para Lavado gástrico
∙​ ​¼ de litro de leche
∙​ ​6 claras de huevos (albúmina)
 ∙​
7. QUE ES UNA AUTOCLAVE:
Una ​autoclave de laboratorio es un dispositivo que sirve para esterilizar material de
laboratorio, utilizando vapor de agua a alta presión y temperatura, evitando con las
altas presiones que el agua llegue a ebullir a pesar de su alta temperatura. El
fundamento de la autoclave es que coagula las proteínas de los microorganismos
debido a la presión y temperatura, aunque recientemente se ha llegado a saber de
algunas formas acelulares, tal como los priones, que pueden soportar las temperaturas
de autoclave.

8. De una lista de materiales que se deben esterilizar preferentemente en un

horno de aire caliente en vez del autoclave, indicar en el caso de cada ​material,
porqué el aire caliente es el mètodo elegible para esterilizar.
Probeta, espátula, pipetas, frascos bacteriológicos, tubos de ensayo, cajas petri,
cuchillos, hazas y cucharas.
Se puede esterilizar las pipetas en el horno en vez de la autoclave.

9. CUÁLES son las precauciones que se deben manejar en el laboratorio

microbiologia.

1. Mantenga limpio el sitio de trabajo.

2. No fume, coma ni beba en el laboratorio.

3. Conozca la ubicación del extinguidor de incendios y manta no inflamable más

cercanos a su sitio de trabajo.

4. no trasvase líquidos inflamables ​si hay mecheros ​encendidos cerca. Los solventes
no deben colocarse en vasos de precipitados.

5. Al calentar solventes inflamables en pequeña cantidad, utilice un baño maría con el

mechero apagado.

6. Al mezclar o calentar sustancias evite que la boca del recipiente esté dirigida hacia
el rostro

7. Extreme las precauciones cuando use ETER ETÍLICO.

8. No caliente sistemas cerrados.

9. Las recristalizaciones se harán en un tubo, erlenmeyer o balón, nunca en un vaso

de precipitados.

10. Cuide que las uniones esmeriladas estén limpias. Es conveniente cargar los
balones con un embudo (líquidos) o proteger el esmerilado con papel satinado
(sólidos).

11. Cuando deba desmenuzar o despegar sustancias del fondo de un recipiente de

vidrio, use una espátula flexible (no una varilla de vidrio), apoyando el recipiente sobre
la mesada.

12. Cuando deba introducir un tubo de vidrio en un tapón, tome el tubo con un
repasador cerca del tapón. No presione los tubos acodados cerca del sitio doblado.

13. Use soportes que se apoyen bien en la mesa y controle especialmente los
aparatos con centro de gravedad alto.

14. Retire los capilares usados de los baños de punto de fusión. Nunca enfríe con
agua los baños de punto de fusión.

15. Evite que caigan papeles, vidrios y todo tipo de material en las piletas.

16. LOS SOLVENTES ORGANICOS PERFORAN LAS PILETAS, DESÉCHELOS EN

LAS DAMAJUANAS DESTINADAS A TAL FIN.

17. NUNCA TIRE SOLUCIONES BÁSICAS EN LAS DAMAJUANAS DE SOLVENTES.

10. Mencione 10 aspectos de primeros auxilios en el laboratorio microbiología.

 1.​ ​Vendas estériles
2.​ ​ Esparadrapos​
3.​ ​Curas​
4.​ ​Alcohol antiséptico
5.​ ​Izodine
6.​ ​Analgésico​
7.​ ​Sal de cocina
8.​ ​Sulfato de magnesio material
9.​ ​Bicarbonato de sodio
10.​ ​Mertolafe

11.​ ​Investigar en que consiste una ficha tècnica de

reactivos - equipos y disenar una para un medio de cultivo y otra
para el autoclave.
TIEMPO DE
DOSIFICACIO
area PRODUCTO ACCION EXPOSICIO USO
N
N
Realice este
proceso una vez
por semana
laborato después de haber
tego 51 desinfectante 2% (2º ml/lt) 10 min
rio realizado la bebida
y limpieza de todo
el area

dosis Desinfectant Realizar una vez

de e germicida por mes para que
choque microbicida(a los
monio microorganismos
cuaternario) 240 ppm no creen
orión 5p-50 10-15 min
(2.4 ml/lt) resistencias a
desinfectantes
utilizado por
semana

aspersi Aplicar con el

ón de atomizador todos
ambien los días después
tego 51 desinfectante 2% (20 ml/lt) dejar actuar
te de realizadas las
labores de trabajo.

Área tego 51 ∙​
de flujo alcohol Al desinfectante 2% (20 ml/lt) dejar actuar Emplear
laminar 70% luz uv pintes y/o
 después de
la siembra
∙​ ​Espejar
el ambiente
∙​ ​En el
caso de la
luz ultra
violeta
prender la
carrera de
flujo
laminarzo
antes de la
siembra.

jabón liquido Se
4/o utiliza
desinfectante para el
lavado
del
material
Extran 2% (20 ml/lt) lod15 min
contami
nado
del
laborato
material rio

MICROBIOLOGY

Caldo brila (tipo de medio)

VMO 74854 925
PA= 72​ ​± 0.2 a 25ºc
40gr ​ ​1000ml
X​ ​100ml

PREPARACION

Disolver 40gr en lt de agua desmineralizada introducir en tubos de

ensayos dotados de tubitos de fermentación tratar en la autoclave 15min
a 121ºc.

CONCLUSIONES
● En esta práctica de laboratorio pudimos conocer mejor la normatividad que tiene
un laboratorio

● Conocimos las diferentes formas de esteriliza y desinfectar.

● Conocimos otros materiales que hacen parte del laboratorio.