BIOQUÍMICA

CQU 310
Instituto de Ciencias Naturales

Enzimas II
Clase 8
MATERIAL PROPIEDAD DE UDLA.
AUTORIZADA SU UTILIZACIÓN SÓLO PARA FINES ACADÉMICOS.
Resultados de aprendizaje:

Identificar la clasificación, función y regulación de las enzimas

analizando factores físicos y químicos del medio.

Bioquímica/clase 08
2019
FACTORES QUE DETERMINAN LA VELOCIDAD
DE UNA REACCIÓN ENZIMÁTICA

• Temperatura
• pH
• [ Sustrato ]
• [ Enzima ]
• Inhibidores

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2019
 EFECTO DE LA TEMPERATURA

Enzimas

Temperatura

En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas.

Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general. Sin embargo, al ser
proteínas, a partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar por calor.
La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima.
Por sobre la temperatura óptima, el aumento de velocidad de la reacción debido a la
temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la
desnaturalización térmica, y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse.
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EFECTO DEL PH

Enzimas

pH
Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH;
imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus aminoácidos. Según el pH del medio, estos
grupos pueden tener carga eléctrica positiva, negativa o neutra.

Como la conformación de las proteínas depende, en parte, de sus cargas eléctricas, habrá
un pH en el cual la conformación será la más adecuada para la actividad catalítica. Este es
el llamado pH óptimo.

La mayoría de las enzimas son muy sensibles a los cambios de pH.

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 EFECTO DEL PH

Cambio en el estado de ionización de los

grupos funcionales de las cadenas laterales
de los residuos aminoacídicos

Ejemplo: Ureasa a pH 7 Ejemplo: Ureasa a pH ácido

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EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE
SUSTRATO

En una reacción enzimática en que un sustrato

da origen a un producto se obtiene este gráfico

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EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE
SUSTRATO

o Para una reacción catalizada por

una enzima que sigue una
cinética de Michaelis-Menten, la
unión de cada punto del
experimento, da lugar a una
curva hiperbólica

o A bajas [S], la curva tiende a una

recta que asciende con mucha
pendiente. En esta región la
curva depende de la [S]

o Para altas [S], la enzima esta casi

saturada y la Vo de la reacción no
cambia mucho cuando aumenta
la [S]

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EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE
SUSTRATO

ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTEN Y PARAMETROS

CINÉTICOS.

Km (constante de Michaelis-Menten)
- Es la concentración de sustrato que se requiere para alcanzar la mitad de la velocidad
máxima.
- Es una medida de la afinidad del Enzima por el Sustrato.
- Cuanto menor es Km, mayor es la afinidad del enzima por sustrato.
- Se mide en unidades de Concentración.

Kcat (número de recambio)

- número de moléculas de sustrato convertidas en producto por molécula de enzima y
unidad de tiempo,(1seg) en condiciones de saturación de sustrato.

Vmax (velocidad máxima teórica)

- la velocidad cuando todos los centros activos están ocupados con sustrato (nunca alcanzada
en la realidad)

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EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE
SUSTRATO

De acuerdo a los datos de velocidad de una enzima

X, conteste:

a) ¿Cuál es la Vmáx de la [S] V

reacción? (M) (mol /min)

5 x 10 -2 0.25
b) ¿Cuál es el Km de la enzima?
5 x 10 -3 0.25
c) Demuestre, si esta reacción
sigue la cinética de Michaelis y
5 x 10 -4 0.25
Menten. 5 x 10 -5 0.20
e) ¿Que esperaría que pasara con 5 x 10 -6 0.125
la velocidad máxima si estamos en
presencia de un inhibidor no 5 x 10 -7 0.071
competitivo?
5 x 10 -8 0.0096
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EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE
SUSTRATO

”Lehninger Principles of Biochemistry” 3th.ed. Nelson, DL

and Cox, M.M. Worth Publishers, 2000.)
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 Eficiencia Catalítica
kcat/Km
Una estimación de la perfección
Unidades 1/sxM

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EFECTO DE INHIBIDORES

INHIBIDOR
Molécula que hace disminuir la actividad enzimática, a través de
interacciones con el centro activo u otros centros específicos

• Inhibidor Irreversible

• I. Competitiva
• Inhibidor Reversible • I. No Competitiva
• I. Acompetitiva

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EFECTO DE INHIBIDORES

Inhibidor Irreversible
Modifica químicamente a la enzima

E+I E’
o A diferencia de la inhibición reversible, el efecto de los inhibidores irreversibles
depende del tiempo que actúa el inhibidor.

o Los inhibidores irreversibles son, por lo general, altamente tóxicos.

o Los inhibidores irreversibles reaccionan con un grupo químico de la enzima,

modificándola covalentemente

E
S
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EFECTO DE INHIBIDORES

Inhibidores Irreversibles

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INHIBICIÓN REVERSIBLE COMPETITIVA

a) Inhibición Competitiva: El inhibidor se fija al

sitio activo de la enzima libre, impidiendo la
fijación del substrato

Km
Vmax =

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2019 and Cox, M.M. Worth Publishers, 2000.)
INHIBICIÓN REVERSIBLE COMPETITIVA

Inhibidor Competitivo: Inhibidores de proteasas. Fármacos

antiretrovirales. Forma eficiente de
tratar el VIH

Estructura del Ritonavir

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INHIBICIÓN REVERSIBLE NO COMPETITIVA

b) Inhibición NO Competitiva: el inhibidor se une a

un sitio distinto al sitio activo, pero se puede unir
tanto a E como a ES

Km =
Vmax

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2019 and Cox, M.M. Worth Publishers, 2000.)
INHIBICIÓN REVERSIBLE ACOMPETITIVA

c) Inhibición Acompetitiva: el inhibidor se fija a un

sitio distinto al sitio activo, sólo se une al complejo
ES

Km
Vmax

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Anti-Inflamatorios No Esteroideos
(AINEs)
AINEs:
- Ácido acetilsalicílico
- Diclofenaco
- Naproxeno
- Paracetamol
- Ibuprofeno

Estímulos fisiológicos Lesiones / Infecciones

Enzima Enzima
AINEs COX 1 COX 2 AINEs e inhibidores específicos de la COX-2
(Constitutiva) (Inducible)
(meloxicam, celecoxib)

Prostaglandinas protectoras Prostaglandinas inflamatorias

Mucosa estomacal Adherencia de Fiebre Dolor Inflamación

las plaquetas
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Mecanismo de acción:

Aspirina: Inhibidor irreversible de COX-1

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2019
Mecanismo de acción:

Ibuprofeno: Inhibidor competitivo reversible de la COX-1

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2019
Fuentes Bibliográficas
Feduchi, E., Blasco, I., Romero, C. y Yañez, E.
Bioquímica conceptos esenciales Editorial Medica Panamericana
2011

Nelson, Cox Lehninger: Principios de Bioquímica

5º Edición, Omega Ediciones S.A 2009.

Mathews, Christopher Bioquímica

Pearson Education 2002 Editorial McGraw-Hill Interamericana.
2002

Voet, Voet, Pratt Fundamentos de Bioquímica

Editorial Panamericana 2003

McKee, Trudy McKee, James R.

Bioquímica Editorial McGraw-Hill Interamericana.
2003
http://watcut.uwaterloo.ca/webnotes/Pharmacology/eicosaAspirin.html
http://tmedweb.tulane.edu/pharmwiki/doku.php/aspirin
Bioquímica/clase 08
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