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Planta Piloto de Fermentaciones

Departamento de Biotecnología

Centrifugación

Sergio Huerta Ochoa


UAM-Iztapalapa
Planta Piloto de Fermentaciones
Departamento de Biotecnología

Centrifugación

La centrifugación puede ser definida como el proceso de resolver sistemas de multi-


componentes, con al menos una de las fases líquidas, por la aplicación de la fuerza
centrífuga

a) Tubular
b) Cámara múltiple
Centrífugas de Sedimentación c) Tazón sólido
Simulan y amplifican la fuerza de d) Decantadoras
gravedad por un factor de 2 a 5 e) Discos
órdenes de magnitud en los
Centrífugas tamaños comerciales
Comerciales
Filtros Centrífuga
Combinan los dos principios de
separación mecánica: Filtración y
centrifugación
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Centrífugas

• Las centrífugas son instrumentos que permiten someter a las muestras a intensas
fuerzas que producen la sedimentación en poco tiempo de las partículas que tienen
una densidad mayor que la del medio que las rodea

• En general se diferencian en función de los márgenes de aceleración a que someten a


las muestras en :
a) centrífugas (de pocas g a aprox. 3,000 g),
b) super-centrífugas (o centrífugas de alta velocidad, rango de 2,000 g a 20,000 g) y
c) ultracentrífugas (de 15,000 g a 600,000 g)

• En las centrífugas se suele controlar la temperatura de la cámara para evitar


sobrecalentamiento de las muestras debido a la fricción. En las ultracentrífugas, la
velocidad extrema (más de 100,000 rpm), hace que sea necesario hacer un intenso
vacío en la cámara de la centrífuga para evitar el calentamiento de rotor y muestra.
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Rotores
En una centrífuga el elemento determinante es el rotor, dispositivo que gira y en el que
se colocan los tubos. Existen varios tipos :

– Rotor basculante. Los tubos se colocan


en un dispositivos (cestilla) que, al girar
el rotor, se coloca en disposición
perpendicular al eje de giro. Así pues los
tubos siempre giran situados
perpendicularmente al eje de giro.

– Rotor de ángulo fijo. Los tubos se


insertan en orificios en el interior de
rotores macizos. El caso extremo es el
de los rotores verticales en los que el
tubo se sitúa paralelo al eje de giro.
Este tipo de rotores es típico de
ultracentrífugas.
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En las separaciones centrífugas sólido-líquido la velocidad de sedimentación es mayor


que la sedimentación libre o gravitacional, debido a que los equipos al girar producen
una mayor aceleración de las partículas.
d p2 (ρ S − ρ )w 2 r
vw =
18µ
donde:
w2r = Aceleración centrífuga [L/t2]
w = Velocidad rotacional en radianes [t-1]
r = Distancia radial del eje de rotación a la partícula [L]

w= ⋅ rpm (rad/s)
60

a) El diámetro aparente de las bacterias es del orden de diez veces menor que el de las levaduras , por lo que
su velocidad de sedimentación es cien veces menor, ya que ésta es proporcional al cuadrado de la partícula
b) Las células contienen más del 70% de agua por lo que su densidad es muy semejante a la de los caldos, por
lo tanto el parámetro Δρ puede ser muy bajo
c) Algunos caldos biológicos son muy viscosos propiedad que dificulta la sedimentación
d) La velocidad de sedimentación puede ser incrementada en un equipo centrífugo aumentando la velocidad
de rotación o la distancia de sedimentación (diámetro de la centrífuga)
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Factor G
En la caracterización y escalamiento de centrífugas frecuentemente se emplea el factor G,
que es una medida relativa de la velocidad de sedimentación de una partícula en un
campo centrífugo con respecto a su velocidad de sedimentación en el campo gravitacional
vw w 2 r
G= =
vg g
G puede ser referida a un radio característico el cual generalmente es el radio exterior del
campo centrífugo. Esto permite desarrollar expresiones prácticas para estimar la G de la
siguiente forma

G = 5.6 x10 −7 N 2 D

Donde N está en rpm, el diámetro del tazón de la centrífuga (o punto de interés) D en mm


y G es adimensional y es el número de veces que se aumenta la gravedad
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Diseño de Equipo de Centrifugación


El diseño de los equipos de centrifugación está basado en la teoría de la sedimentación,
1. lo cual puede visualizarse
más fácilmente en el caso
de las centrífugas
tubulares debido a la
sencillez de su geometría

2. Este caso puede ser


extendido al caso de las
centrífugas de discos

Por otro lado, los equipos que operan por filtración centrífuga presentan variantes de
diseño respecto a los dos anteriores
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Diseño de Centrífugas Tubulares


Sobrenadante

Hechos a considerar en el diseño


Torta

1. Las propiedades del caldo, la velocidad de rotación R0


Interfase
y el radio de giro de la centrífuga determinan la líquida
velocidad de sedimentación que se puede lograr en R1
un equipo de sedimentación centrífugo L
2. La velocidad de sedimentación conjuntamente con
la distancia de sedimentación, determinan el z
tiempo de sedimentación
3. El gasto (Q) determina el tiempo de residencia de r
las partículas en un equipo dado
Trayectoria
de las partículas Alimentación (Q)

El gasto manejable en una sedimentación centrífuga depende de la geometría específica del equipo, de su
velocidad de giro y de las propiedades del caldo.
Para producir un líquido libre de sólidos, el tiempo de sedimentación en el equipo debe ser igual o menor
al tiempo de residencia de las partículas impuesto por el flujo de gasto volumétrico (Condición de diseño)
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Suposiciones para el diseño


a. La alimentación es una solución diluida
b. Las partículas se distribuyen uniformemente en la capa anular
c. Las partículas sedimentan de acuerdo a la Ley de Stokes
d. La distancia entre la superficie del líquido y la pared de la centrífuga es constante

Tiempo de residencia
La velocidad del fluido en el sentido axial está dado por:

dz Q
vz = =
dt A
donde:
Q = Gasto volumétrico [L3/t]
A = Área de flujo [L2]
vz = Velocidad de la partícula en el sentido axial [L/t]
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El área de flujo es igual a la sección transversal de la capa anular del fluido y está dada por:

A = πR − πR = π R − R
2
0 1
2
( 2
0 1
2
) R0
R1
A

R1 = Distancia radial del eje de giro a la superficie del líquido


R0 = Distancia del eje de giro a la pared del tazón

Con los límites de integración adecuados se puede obtener el tiempo de residencia de las
partículas dentro de la centrífuga
L Q tr
∫0
dz =
(
π R02 − R12 )∫ 0
dt
L = Longitud de la centrífuga
tr = tiempo de residencia de la partícula
π (R02 − R12 )L
Integrando tr =
Q
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Tiempo de Sedimentación y Gasto Volumétrico

a). 100% de sedimentación


El tiempo de sedimentación ts de una partícula localizada en la superficie de la capa anular del
fluido en R1 (que es la más alejada de la pared, o más difícil de sedimentar), puede ser obtenida de
la Ley de Stokes considerando el movimiento de la partícula en el sentido radial,

dr d p (ρ s − ρ )w r
2 2

vr = =
dt 18µ
En este caso inicialmente la partícula se localiza en R1 y en el momento ts debe alcanzar la pared
en R0, de tal manera que:
dr d p (ρ s − ρ )w
2 2
R0 ts
∫R1 r
=
18µ ∫ 0
dt
Integrando tenemos:

18µ R0
ts = ln
d p2 (ρ s − ρ )w2 R1
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Expresando la ecuación anterior en términos de vg:

g R0
ts = 2
ln
vg w R1
La condición de diseño donde el tiempo de sedimentación debe ser menor o igual al tiempo de
residencia se obtiene igualando las ecuaciones respectivas. Este resultado permite obtener una
expresión para el gasto manejable en una centrífuga tubular para producir un líquido claro o lograr
un 100% de sedimentación.

 
 πw2 L R 2 − R 2 
[ ]
Q = vg ⋅  0 1
R0 

 g ln
 R1 
Es importante hacer notar que el flujo es función de las propiedades del caldo contenidas en vg, y
de las características de la centrífuga contenidas en el paréntesis cuadrado de la derecha.
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b). 50% de sedimentación


Es una práctica común en las bioseparaciones sólido-líquido, el que los equipos se especifiquen
para la remoción del 50% de las partículas de una suspensión de un tamaño dado o tamaño de
corte.

Haciendo un desarrollo similar obtenemos el tiempo de sedimentación, t’s:

g R0
t s' = 2
ln 1
vg w
R +R
2 2
 2
 0 1

 2 
Por lo tanto, el flujo, Q’, es el flujo para sedimentar el 50% de las partículas de diámetro d50 en una
centrífuga tubular .
 
 πw2 L R 2 − R 2 
Q' = vg
πw2 L R02 − R12 ó Q' = (2v g ) 0 1 
 g 2 R0 
2
g R0 ln
ln 1  R02 + R12 

R +R
2 2
 2
0 1

 2 
Ejemplo 4.3
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Definición de Sigma

El concepto de Sigma ha sido muy utilizado en el campo de la sedimentación centrífuga desde que
éste fue desarrollado (Ambler, 1957). Sigma es un área característica de cada tipo de centrífuga y
se utiliza para efectuar comparaciones y escalamiento de equipo.

En el caso de la centrífuga tubular el valor de Sigma puede ser definido a partir de la ecuación
anterior de la siguiente forma:

Q ' = 2v g Σ
donde: Factores Sigma
πw L R − R
2 2 2
∑ (m2)
Σ= 0
2
1 Centrífuga
g 2R 0 Intermitente 20 – 200
ln
R02 + R12
Decantadora 150 – 2,500
Sigma es una constante que contiene sólo parámetros Tubular 2,000 – 3,000
relacionados a la geometría de la centrífuga y su Discos 400 – 120,000
velocidad angular (es independiente del tipo de caldo).
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Diseño de Centrífuga de Discos


En el análisis se supone que el flujo global Q se divide equitativamente entre los espacios formados
por todos los discos, de tal manera que el flujo en cada espacio es Qn = Q/n, donde n es el número
de espacios formados entre los discos
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Tiempo de residencia
En una centrífuga de discos la partícula que se desea sedimentar se mueve por convección y por
sedimentación. El movimiento convectivo es paralelo a los discos y el movimiento por
sedimentación es en sentido horizontal

El movimiento producido por sedimentación tiene componentes tanto en x como en y, de tal


manera que la velocidad neta de la partícula en la dirección x, es la resultante de la velocidad
convectiva del fluido (aquí se supone que la partícula se mueve a la misma velocidad que el fluido) y
la componente en x de la velocidad de sedimentación que se opone a este movimiento
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Expresión para vx
Si se considera una sección de película de longitud L, donde la velocidad vx sólo depende de y
pero no de x; cuando se desprecian los efectos inerciales , se considera que el sistema se
encuentra en el estado estacionario y el flujo es laminar, la ecuación de movimiento para este
sistema puede ser escrito de la forma:

dP d 2vx

dx dy 2
Esta expresión puede ser integrada dos veces entre los límites:
a
a
Para y= , vx = 0
2
−a y
Para y= , vx = 0 x
2
Y obtener la expresión:
∆Pa 2   2 y 2 
vx = 1 −   
8µL   a  
donde: a es el espesor de la película y P es la presión
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La ecuación anterior se puede expresar en términos de Qn si se integra a lo largo del área de


flujo con los límites apropiados. Considerando que el área de flujo puede ser aproximada
por un rectángulo de ancho a y largo 2πr entonces:
2
∆Pa 2   2 y 
a
2πr
Qn = ∫ ∫2
−a 1 −  a  dydz
0
2
8µL   
donde: Qn es el flujo volumétrico entre dos discos de la centrífuga.
La integración de la ecuación anterior conduce a:
π∆Pa 3 r
Qn =
6 µL
Combinando las expresiones para vx y Qn tenemos:

 3Qn    2 y  
2

vx =   1 −   
 4πra    a  
O bien en términos de flujo volumétrico total:

 3Q    2 y  
2

vx =   1 −   
 4nπra    a  
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De la ecuación anterior se puede obtener una expresión para un diferencial del tiempo de
residencia de la siguiente forma:
dx
dtr =
 3Q    2 y  
2

  1 −   
 4nπra    a  

Tiempo de Sedimentación y Gasto Volumétrico


a). 100% de sedimentación
En este caso la partícula más difícil de capturar se localiza en la parte inferior derecha de la
película en (x = 0, y =-a/2), y la parte más lejana en la que puede sedimentar es la parte superior
izquierda de la película en :
x=
(R0 − R1 ) , y=
a
senθ 2
La velocidad de sedimentación en el sentido radial está dada por la Ley de Stokes:

dr w2 r
= vg
dt s g
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Por lo tanto: gdr


dt s =
vg w2 r
La condición de diseño que establece que el tiempo de sedimentación debe se menor o igual que
el tiempo de residencia puede lograrse igualando las ecuaciones respectivas para obtener la
expresión:
gdr dx
=
vg w2 r 3Q   2 y  
2

1 −   
4nπra   a  

De acuerdo a la geometría del sistema se puede efectuar el siguiente cambio de variables:

dy = cos θdr
r = R0 − xsenθ
Con estas nuevas variables la ecuación anterior se transforma en:

3   2y 
2
  2πnvg w2 
1 −    dy =   (R0 − xsenθ ) cos θdx
2

2a   a    Qg 
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La ecuación anterior puede ser integrada utilizando el cambio de variable u = (R0 − xsenθ )
y los límites siguientes:
−a
Para x = 0, y=
2
R0 − R1 a
Para x= , y=
senθ 2
obteniéndose:

 2πnw2 3
Q = vg 
3 g
(3
)
R0 − R1 cot θ 
 

La ecuación anterior también puede ser expresada en función del parámetro Σ

Q = vg Σ
De manera análoga, la expresión para el 50% de sedimentación es:

Q − = 2vg Σ Ejemplo 4.4


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Escalamiento
En el análisis de la operación de la sedimentación centrífuga se desarrollaron expresiones para el
cálculo del gasto manejable por una centrífuga de geometría particular, debido a que los equipos
se construyen de tamaños específicos. Así gran parte del problema se reduce a una selección del
equipo más que a un diseño específico para un trabajo particular.

Las velocidades de sedimentación que se predicen con la Ley de Stokes pueden ser adecuadas
para el caso de centrífugas tubulares, pero pueden resultar hasta dos veces mayores de las
realmente obtenidas en las centrífugas de discos.

En la selección de equipo de centrifugación una combinación adecuada de los principios teóricos


con pruebas experimentales directamente con el material, es lo más recomendable.

Tiempo equivalente:
G1t1 = G2t 2

Q'1 Q'2
Factor Sigma: =
Σ1 Σ2
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Diseño de Equipo para Filtración Centrífuga


La filtración centrífuga combina los dos principios de separación mecánica: Filtración y Centrifugación.

El interés de diseño es contar con expresiones para el


cálculo del gasto volumétrico manejable por la centrífuga
y del tiempo de filtrado para realizar una determinada
operación en un equipo dado.
R0

Rt
L
R1

Geometría cilíndrica
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Gasto Volumétrico, Q
El gasto volumétrico a través de la torta en una operación de filtración centrífuga, está
relacionado con la ecuación de D’arcy para medios porosos. Debido a que la torta no es plana, el
área de filtrado varía con r, entonces la ecuación de D’arcy debe expresarse en forma diferencial
como:
− dP
= µαρ 0 v
dr

Donde v es la velocidad superficial del filtrado

En el instante t el flujo volumétrico Q en la dirección radial es constante a lo largo del espesor de


la torta, y se relaciona con la velocidad de filtración (varía a lo largo del espesor de la torta)
mediante la siguiente expresión:
Q
v=
2πrl

donde l es la altura de la canasta de la centrífuga.


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Combinando las dos ecuaciones anteriores, tenemos:


− dP Q
= µαρ 0
dr 2πrl
Integrando entre R0 y Rt para encontrar la caída de presión de la torta

µαρ 0Q R0
∆P = ln
2πl Rt
El gradiente de presión generado por el movimiento circular del líquido puede ser calculado
utilizando la expresión:
dP
= ρ L w2 r
dr
Donde ρL es la densidad del líquido
Integrando entre R0 y R1 se puede encontrar una expresión para el gradiente de presión generado
por la fuerza centrífuga:

ρ L w2
∆P =
2
(R
2
0 − R12 )
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Sustituyendo la ecuación anterior en la ecuación del gradiente de presión obtenido con la


ecuación diferencial de la Ley de D’arcy, se obtiene una expresión para el gasto volumétrico en
cualquier instante t

 
πw2 ρ Ll  R02 − R12 
Q=  
µαρ 0  ln 0 R
R0
 Rt 
Rt
L
Durante una operación de filtración centrífuga, Rt R1
disminuye conforme transcurre el tiempo de
filtración (al aumentar el espesor de la torta),
disminuyendo también Q
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Tiempo de filtración Centrífuga

La ecuación anterior puede ser utilizada para desarrollar una expresión para calcular el tiempo
necesario para procesar un volumen de caldo dado (o una torta de un espesor físicamente
alcanzable)

El gasto volumétrico Q puede ser relacionado con el volumen de filtrado por la ecuación:

dV
Q=
dt
Por medio de un balance de masa en la película cilíndrica que forma la torta se obtiene:

ρ 0V = ρT [π (R02 − Rt2 )l ]

Donde ρT es la densidad de la torta en peso seco por unidad de volumen. A partir de la ecuación
anterior se puede definir el diferencial de volumen de filtrado
− 2 ρT πl
dV = Rt dRt
ρ0
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Combinando la ecuación obtenida del gasto volumétrico con las ecuaciones anteriores e
integrando entre los límites:
t = 0, Rt = R0

t = t, Rt = Rt

Se obtiene:
µαρT R   R0 
2
2
 R0 
t=   − 1 − 2 ln 
( )
t
Ejemplo 4.6
2 ρ L w R0 − R1  Rt 
2 2 2
 Rt 

Donde t es el tiempo necesario para obtener una torta de espesor (R0-Rt):

NOTA: Debido a que la torta puede sufrir compactación cuando se expone a un campo
centrífugo, las mediciones de resistencia específica en equipos de laboratorio de filtración
intermitente pueden conducir a resultados incorrectos

Es preferible realizar estas mediciones en equipo de laboratorio apropiado para la filtración


centrífuga
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Tomado de: López-Munguía Canales (2000) Ch.18, Producción de enzimas microbianas. Biotecnología Alimentaria. Ed. Limusa

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