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Facultad de Química-Farmacia
Departamento de Ingeniería Química
TRABAJO DE DIPLOMA
Propuesta tecnológica para la obtención de glucosa por hidrólisis
enzimática a partir del azúcar refino
Santa Clara
2016
"Año 58 de la revolución"
PENSAMIENTO
Lo que hacemos es resultado directo no sólo de qué y cómo pensamos, sino también de qué
y cómo sentimos
Warren Bennis
i
DEDICATORIA
A mis padres por todo lo que me han apoyado y se han sacrificado para que me supere en la
vida.
ii
AGRADECIMIENTOS
A toda mi familia, en especial a mis padres, por el apoyo que me han brindado durante toda
la vida.
A todos los profesores que a lo largo de mi vida han contribuido con mi formación.
RESUMEN
Palabras claves:
Azúcar refino, hidrólisis, enzima invertasa inmovilizada, glucosa.
iv
ABSTRACT
This work is about the study of the production process of glucose through acidic investment
from refined sugar at the milling "Chiquitico Fabregat" with a high consumption of raw
material, the milling according design get 6 t refining / t glucose and also generates 6 t
fructose syrup, due the low conversion by hydrolysis. A low yield crystals caused by the
hydrolyzate crystals doesn’t reach the degree of cooling required, therefore fructose syrup
contains a high per cent glucose fails to crystallize. The formation of colored products with
ash and byproducts due the use of phosphoric acid at high temperatures affect the quality of
the glucose obtained.
It was proposed the enzymatic hydrolysis instead of acid hydrolysis, using invertase-
chitosan enzyme as biocatalyst conjugate, uptaken on a solid support chitin-carboxymethyl,
that biocatalyst was evaluated as lab scale, being of greater functional and operational
stability than the native counterpart in the same time of work, also was evalauted it the high
capacity of reuse, enzyme activity persistence during the time of storage. Through the
economical analysis it was demostrated it, this proposal is feasible because the value of
production obtained by enzymatic hydrolysis exceeds 1,53 times that obtained in the acid
procedure. This behavior is for the continuity of the production process and the higher
degree of conversion can be obtained.
Keywords:
sugar refining, hydrolysis, invertase immobilized enzyme, glucose.
v
Índice
INTRODUCCIÓN .................................................................................................................. 1
2.2 Característica del proceso de obtención de glucosa a partir del almidón de maíz .21
3.3 Diseño del sistema tanque agitado para la disolución de azúcar refino ................. 41
3.4 Principales indicadores del proceso de obtención de glucosa y fructosa por ambas
tecnologías ............................................................................................................................ 44
3.5.2 Volumen y costos asociados a la obtención de glucosa por hidrólisis enzimática ...... 48
CONCLUSIONES ................................................................................................................ 51
Recomendaciones ................................................................................................................. 52
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS……………………………………………………….
ANEXOS……………………………………………………………………………………...
INTRODUCCIÓN
1
INTRODUCCIÓN
En la actualidad la industria química como misión debe basar su desarrollo e
investigaciones hacia la búsqueda de productos que puedan resultar atractivos desde el
punto de vista de su uso, calidad, mercado, lo cual conllevaría también a su factibilidad
técnica, económica y sustentabilidad ambiental.
Es por esta razón que se ha encaminado cada vez con más fuerza a desarrollar los productos
naturales, tanto en la industria alimentaria como farmacéutica. La posibilidad de que la
humanidad tenga acceso a alimentos mejores y más abundantes, a una agricultura más
eficiente, a sistemas analíticos más precisos y a nuevos y mejores fármacos de bajo costo
entre otros, es una necesidad cada día más acuciante. Para lograr estas aspiraciones es
imprescindible la puesta a punto de tecnologías sencillas y de menor costo, donde se
puedan llevar a cabo transformaciones químicas complejas en condiciones
medioambientales amigables.
Problema científico
No se dispone de una tecnología adecuada que garantice una producción de glucosa que
satisfaga los indicadores requeridos para la producción de sorbitol en calidad de materia
prima.
Hipótesis
Objetivo general
Proponer una tecnología de producción de glucosa por vía enzimática que garantice la
calidad de la glucosa destinada a la producción de sorbitol.
Objetivos específicos
1.1 Edulcorante
Durante la época prehispana los únicos edulcorantes usados por los indígenas fueron la
miel de abeja y el aguamiel, con la llegada de los españoles al continente americano se
introdujo el cultivo de la caña de azúcar que marcó el inicio de la participación de la
sacarosa en el mercado de los edulcorantes. Hoy en día, la sacarosa enfrenta fuertes
presiones que atentan contra la preferencia que ha ostentado por casi 500 años de liderazgo
en el mercado nacional y mundial de los edulcorantes (Fuchs, 1987) entre los factores que
han contribuido a la disminución del consumo de la sacarosa se tienen los siguientes:
cambios en los hábitos de alimentación, demanda de alimentos especiales para diabéticos,
descubrimiento y síntesis química de edulcorantes no calóricos de alta intensidad, la
funcionalidad, disponibilidad y precio de los edulcorantes competentes, finalmente el
desarrollo de la biotecnología para la producción comercial de edulcorantes naturales como
los jarabes de alta fructosa y la fructosa cristalina (Fleming, 1979) (Fuchs, 1987)
Respecto a los edulcorantes sintéticos, hay estudios que demuestran que son nocivos para la
salud. Los edulcorantes calóricos proporcionan el sabor dulce y el volumen al alimento al
cual se le han añadido. Así mismo proporcionan frescura y contribuyen a la calidad del
producto. Los edulcorantes calóricos actúan como conservantes en las mermeladas y
gelatinas, y dan un sabor más intenso a las carnes procesadas. Proporcionan fermentación
CAPÍTULO 1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL DE LA INVESTIGACIÓN
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para los panes y salsas agridulces, aumentan el volumen de las cremas heladas y dan cuerpo
a las bebidas carbonatadas. Algunos edulcorantes calóricos se fabrican al procesar los
compuestos del azúcar y otros se producen de manera natural.
En algunos casos, los edulcorantes no calóricos se emplean en lugar de los calóricos. Ellos
no proporcionan calorías pero sí el sabor dulce. Todos los edulcorantes no calóricos son
químicamente procesados.
El dulzor que presentan los edulcorantes se ve afectado por varios factores como: la
temperatura, la concentración y la presencia de otros compuestos; por ejemplo, cuando los
azúcares se disuelven en agua, se presentan reacciones de mutarrotación y se produce una
mezcla de tautómeros con diferente dulzor, esto se observa en las soluciones de fructosa
recién preparadas, las que son más dulces que las soluciones de fructosa que se dejan en
reposo y alcanzan su equilibrio tautomérico. La temperatura afecta de manera inversa la
capacidad endulzante de los carbohidratos, un ejemplo claro es, que se ha comprobado que
la fructosa es más dulce a temperaturas bajas, propiedad que se aprovecha en la elaboración
de bebidas refrescantes; por otro lado también se ha establecido que jarabes de glucosa y de
sacarosa al 40% presentan el mismo grado de dulzor. Dentro de otros factores que
influencian el dulzor se encuentran: la viscosidad, la presencia de sales, ácidos y algunos
polímeros; por ejemplo, el alcohol aumenta el poder edulcorante de la sacarosa, mientras
CAPÍTULO 1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL DE LA INVESTIGACIÓN
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Existen varias formas de clasificar los edulcorantes, (Badui, 1993) entre las que destacan
las siguientes:
Sacarosa
El azúcar constituye uno de los productos alimenticios de mayor desarrollo a nivel mundial.
La producción en el periodo 1999-2000 superó los 133 millones de toneladas, un 2% más
que el periodo inmediatamente anterior.
Los principales productores son Brasil, la Unión Europea, India, Estados Unidos y China,
concentrando cerca del 55% de la producción mundial, como se puede observar en la Tabla
1.2. (mailxmail.com.)
Brasil 19,70
India 18,94
China 7,20
CAPÍTULO 1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL DE LA INVESTIGACIÓN
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Fructuosa
Los jarabes con alto contenido de fructosa son de importante valor comercial y se han
logrado obtener por hidrólisis enzimática del almidón de maíz principalmente; estos jarabes
están constituidos por una mezcla del 42 al 90% de fructosa y el resto de glucosa. El
método tradicional para su producción requiere por lo menos de tres enzimas; α-amilasa
(EC 3.2.1.1), glucoamilasa (EC 3.2.1.3) y glucosa isomerasa (EC 5.3.1.18); así como, de
varias etapas de separación, purificación, conversión, decoloración y concentración, de esta
manera se obtienen jarabes con una concentración de fructosa superior al 42. (Beynum,
1987, Marcelli, 2000)
Glucosa
saturada que contiene sólo un 57.6%. Es soluble en metanol e insoluble en éter. Las
moléculas de glucosa se condensan en diferentes maneras para formar almidón, dextrana y
celulosa. (CHEN, 1996)
Sorbitol
Se encuentra en forma natural en las algas rojas y las frutas y en cantidades mínimas en las
uvas, por lo que se utiliza su ensayo para detectar la adulteración del vino. En forma
anhidra, es un polvo blanco de masa molecular 182,17 kg/kmol; inodoro y cristalino, muy
soluble en agua, ligeramente soluble en etanol y casi insoluble en solventes orgánicos
comunes. Es inerte ante ácidos diluidos y álcalis a 97 °C. (MINAZ, 1989)
Es uno de los tres glúcidos (sacarosa, almidón y sorbitol) principales producidos por la
fotosíntesis en las hojas adultas de ciertas plantas de las familias Rosaceae y
Plantaginaceae. Se emplea como edulcorante en los alimentos dietéticos. Se le califica
como edulcorante nutritivo porque cada gramo contiene 2,4 calorías, bastante menos que
CAPÍTULO 1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL DE LA INVESTIGACIÓN
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Son edulcorantes como la glucosa, dextrosa y jarabes de alta fructosa. Los jarabes de alta
fructosa son los edulcorantes de maíz más importantes desde el punto de vista industrial y
comercial ya que al ser líquidos, poseen una ventaja práctica respecto al azúcar. La glucosa
es un jarabe cristalino y viscoso, obtenido por hidrólisis ácida o enzimática del almidón de
maíz. Tiene un poder edulcorante del 60 % (base azúcar). Se la emplea en conjunto con la
sacarosa en diversos productos como dulces, mermeladas, helados, productos lácteos,
panificación y galletería, dentro de las propiedades que la caracterizan es su capacidad
anticristalizante y humectante.
Desde que surgieron los jarabes de maíz con alto contenido de fructosa (HFCS) y los
edulcorantes de alta intensidad (aspartame y sacarina) el consumo de la sacarosa ha venido
perdiendo terreno en el mercado. Los HFCS se empezaron a producir en 1 967 y para 1 979
se habían colocado en segunda posición de la demanda total de los edulcorantes
representando un 17%, esta participación para 1985 alcanzó el 31% y para el 2005 llegó al
37%, de esta forma ocuparon el primer sitio, en segundo y tercer lugar los edulcorantes de
CAPÍTULO 1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL DE LA INVESTIGACIÓN
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El principal uso del almidón es para la producción de jarabes, principalmente los altos en
fructosa. El 90% del almidón producido en los EUA es transformado a edulcorantes. Los
jarabes de almidón están compitiendo fuertemente con el azúcar de caña. Las industrias
refresqueras prefieren a los jarabes. La ventaja de los jarabes es su alta versatilidad:
dextrinados, maltosados, glucosados, fructosados y más nichos de mercado.
Existen dos métodos para hidrolizar el almidón de maíz. Hidrólisis ácida y enzimática.
Hidrólisis ácida
El proceso tecnológico industrial consta de siete etapas principales las cuales son:
acidulación, conversión, neutralización, refinación, sacarificación, evaporación,
almacenamiento.
Hidrólisis enzimática
El azúcar invertido tiene un sabor más dulce que la sacarosa (factor 1,15) y una tendencia
menor de cristalizar, lo que es importante para ciertos productos alimenticios.
El proceso de inversión ácida de la sacarosa se lleva a cabo con una tecnología de origen
nacional que opera en régimen discontinuo. Desarrolla la producción de glucosa y sirope
rico en fructosa a partir del azúcar refino, mediante la inversión ácida de la sacarosa. Este
método de hidrólisis tiene como inconveniente el empleo de un ácido (tales como
clorhídrico, fosfórico, cítrico, etc) a elevada temperatura (85-90°C), lo que puede originar
productos coloreados con presencia de cenizas y subproductos no deseados. (Albertini,
2012, Duarte, 1997)
Se hidroliza al incorporar una molécula de agua lo que origina que el enlace glucosídico
entre los dos monómeros que forman la sacarosa se hidrolicen. Este proceso se realiza en
un reactor del tipo tanque agitado.
Según (Kurup, 2005, Nasef, 2005) la inversión de la sacarosa en medio ácido presenta los
siguientes inconvenientes:
• Bajo % de inversión
• Origina corrosión
En este método se emplean resinas de intercambio iónico catiónicas fuertemente ácidas que
contienen ácido sulfónico. El interior de este tipo de resina hinchada con agua, puede
considerarse como una solución de ácido bastante concentrada. Estas resinas producirán
reacciones catalizadas por ácidos tales como la inversión de la sacarosa. Esta propiedad
puede utilizarse industrialmente como una alternativa de la catálisis mediante ácidos para
invertir la sacarosa, evitando reacciones laterales no deseables mediante el empleo de un
catalizador de intercambio iónico.
Enzimas
Las enzimas son catalizadores biológicos que, como los catalizadores químicos, aceleran
los procesos químicos y no se consumen durante la reacción, por lo que pueden intervenir
varias veces catalizando la misma reacción: son moléculas eficientes. A diferencia de otros
catalizadores, las enzimas tienen un sitio activo que les permite unir y orientar las
moléculas que intervienen en la reacción y de esa forma maximizan la posibilidad de
formación o ruptura de enlaces necesarios para la obtención de productos. De ahí su
importancia dentro de los procesos industriales.
Los primeros pasos en el estudio de su naturaleza y acción comenzaron en los siglos XVIII
y XIX, pero no fue hasta la década del 60 del pasado siglo que se extendió la producción
microbiológica de enzimas a gran escala. La aplicación industrial de las mismas ha
CAPÍTULO 1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL DE LA INVESTIGACIÓN
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Las enzimas industrialmente pueden ser utilizadas en forma libre o inmovilizada. Las
enzimas libres como son solubles no se pueden recuperar de la mezcla sustrato-producto
para el reuso, por lo que se hace necesario someter a calentamiento el producto final para
eliminar la misma lo que encarece dicho proceso.
• Posibilidad de emplear una alta actividad enzimática por volumen del reactor
comparada con preparaciones de enzimas solubles.
• La actividad enzimática puede ser afectada tanto por las condiciones en que se lleve a
cabo la inmovilización como por el entorno de las enzimas.
- El diámetro de poro: debe ser aproximadamente dos veces el tamaño del eje mayor de
la enzima.
CAPÍTULO 1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL DE LA INVESTIGACIÓN
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Los métodos de unión a soportes son los más utilizados y de los que se dispone de una
mayor información. La elección del soporte y del tipo de enlace resultan determinantes en
el comportamiento posterior del biocatalizador. Se debe procurar que la inmovilización
incremente la afinidad por el sustrato, disminuya la inhibición, amplíe el intervalo de pH
óptimo y reduzca las posibles contaminaciones microbianas.
Tipos de soportes
Desde el punto de vista químico, las sustancias usadas para soportar a los biocatalizadores
pueden ser divididas en inorgánicas u orgánicas, y el origen de las mismas puede ser
natural u obtenido por síntesis.
CAPÍTULO 1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL DE LA INVESTIGACIÓN
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Inorgánicos:
Orgánicos:
(Woodward, 1988)
1.3 Invertasa
rafinosa.(Rubio,2002)
Por otro lado, la enzima además de tener actividad de hidrólisis, en condiciones de altas
concentraciones de sustrato (sacarosa) puede tener actividad fructosiltransferasa, para la
CAPÍTULO 1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL DE LA INVESTIGACIÓN
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La actividad de la invertasa, al igual de todas las enzimas puede ser afectada por diferentes
condiciones del medio de trabajo y diversos compuestos, por ejemplo, el pH por debajo de
4 o por arriba de 5.6 ocasiona cambios en el punto isoeléctrico de la enzima e inhibe su
actividad catalítica. Las temperaturas por debajo de los 25 °C inactivan a la enzima
reversiblemente y por encima de los 55 °C ocasionan la desnaturalización de la misma y su
inhibición se vuelve irreversible. (Martínez, 2007)
Un inhibidor es una sustancia que, cuando interacciona con una enzima, provoca una
disminución de la actividad catalítica.
Ocasionalmente en una reacción simple catalizada por enzimas, la dependencia de la
velocidad sobre la concentración de sustrato no da una curva hiperbólica; la velocidad
puede alcanzar un máximo y luego decae a medida que se incrementa la concentración de
sustrato, este fenómeno se llama inhibición por sustrato.
Aminas aromáticas como la anilina, iones metálicos como Ag+1, Cu+2, Cd+2, Zn+2, Pb+2 son
potentes inhibidores, los mismos interaccionan con grupos reactivos de la enzima que son
de importancia para la reacción de hidrólisis. Para evitar el efecto nocivo de los iones
metálicos sobre la invertasa, se utiliza un regulador de acetatos el cual forma complejos con
dichos iones, protegiendo así a las enzimas de la inhibición.
CAPÍTULO 2. TECNOLOGÍAS CONVENCIONALES EMPLEADAS PARA LA OBTENCIÓN DE GLUCOSA EN CUBA
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Las principales materias primas para la obtención de glucosa en Cuba son el almidón de
maíz y el azúcar refino.
El almidón está formado por gránulos esféricos submicroscópicos; las propiedades de estos
gránulos, como el tamaño, es característico de los diferentes tipos de almidones, las causas
de esta variación son las diferentes especies de las plantas, sus condiciones de crecimiento
y el tipo de tecnología empleada. Es una sustancia que se presenta en forma de polvo
blanco, incristalizable e insoluble en el agua, propiedad aprovechada para extraerlo. Se
encuentra en las raíces de la zanahoria, malva, regaliz, etc.; en los tubérculos como en las
patatas, batata, etc., en las semillas de los cereales en proporciones variables y bastante
elevada: trigo, 70 a 75 por ciento; maíz, 65 a 70 %; arroz, 70 a 75 %, en la cebada, etc.,
designándose con el nombre de almidón a la sustancia amilácea extraída de los cereales y
fécula a la de la papa. (Bennion, 1980)
Para obtener almidón del maíz, puede emplearse cualquier tipo de maíz siempre que sea
sano y limpio. Sin embargo, se prefiere el blanco, por ser de más fácil elaboración y ser
menos rico en gluten. En general, pueden elegirse los de cascara delgada y ricos en harina.
almidón, limpieza y desecación del producto obtenido que tiene muy bajo tenor de agua y
un color muy blanco. (Whistler, 1984)
2.2 Característica del proceso de obtención de glucosa a partir del almidón de maíz
Hidrolizado el almidón con las enzimas se obtienen productos con cualquier grado de
sacarificación. Durante este proceso se forma solamente una pequeña cantidad de los
productos de reversión, los productos son más puros; con menor coloración y la corrosión
es, relativamente más baja. El proceso se puede automatizar y regular.
CAPÍTULO 2. TECNOLOGÍAS CONVENCIONALES EMPLEADAS PARA LA OBTENCIÓN DE GLUCOSA EN CUBA
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En Cuba, actualmente se produce una pequeña cantidad de sirope de glucosa con hidrólisis
ácida y enzimática. La mayor parte se importa como también la glucosa cristalina. (Zajac,
1984)
La obtención de glucosa mediante la hidrólisis ácida cuenta con siete etapas: acidulación,
conversión, neutralización, refinación, sacarificación, evaporación, almacenamiento.
Acidulación
Conversión
El convertidor se arranca y se corre con agua hasta que alcance la temperatura esperada de
140 – 142 °C, se comienza a recircular la suspensión acuosa y se realiza la prueba de yodo
para determinar si hay presencia de almidones, si el resultado es negativo (color ladrillo).
Una coloración azul denota presencia de almidón, positivo.
Neutralización
Refinación
Sacarificación
El hidrolizado neutralizado se bombea hacia los tanques que están en el patio de tanques.
Estos se utilizan como balance en el proceso tecnológico. En ellos se mantiene la agitación
y la temperatura de salida del ciclón de expansión. Cuando por razones tecnológicas o
estratégicas de producción el producto se retiene más tiempo que el previsto se chequea el
pH por parte del laboratorio.
Evaporación
Almacenamiento
Al tanque almacén elegido para el llenado llega el sirope de glucosa por bombeo
proveniente del homogenizador. Aquí permanecerá inmóvil hasta que se inicie la extracción
en carros cisterna o bidones para su envío a los consumidores.
(LABIOFAM, 1999)
La representación del esquema tecnológico de todas las etapas del proceso de obtención de
glucosa a partir del almidón de maíz por vía ácida se muestra en la Figura 3.
Figura 2.1. Diagrama del proceso de obtención de glucosa a partir del almidón de maíz por
vía ácida.
CAPÍTULO 2. TECNOLOGÍAS CONVENCIONALES EMPLEADAS PARA LA OBTENCIÓN DE GLUCOSA EN CUBA
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Conversión
El convertidor se pone en marcha y se corre con agua hasta que alcance la temperatura de
105 a 115 oC. El operador realiza la prueba de yodo para determinar si el producto se
encuentra convertido; si el resultado es de color violeta podemos evaluar la prueba de
positiva.
Dextrinización
Cuando se termina de convertir un ciclo el producto que queda por debajo del reboso se le
da una hora y media de retención en el reactor y después se extrae por debajo para el
tanque de sacarificación que se esté llenando.
Sacarificación
Para lograr la temperatura de trabajo en el hidrolizado (de 60 a 61 oC) se debe circular agua
fresca a través del serpentín del tanque dispuesto a sacarificar y utilizar agitación constante.
Estando el hidrolizado en condiciones óptimas de pH y temperatura se procede a realizar la
dosificación de la enzima AMG, los litros a añadir serán calculados a partir del contenido
de materia seca y porciento del tanque, comenzando aquí el proceso de sacarificación.
Inactivación
Refinación
Evaporación
Inicialmente se pone en marcha la sección con agua hasta lograr el calentamiento previsto
de la instalación. Una vez alcanzado un proceso continuo se puede conmutar a un
funcionamiento con producto, alimentándose la cantidad diseñada. Al inicio el producto
que sale del superconcentrador no es muy concentrado por lo que se recircula al recipiente
de alimentación hasta alcanzar la concentración deseada.
A la salida del tercer efecto el jarabe sale con una concentración de 65 oBx de aquí es
o
enviado al superconcentrador alcanzándose la concentración final de 85 Bx,
posteriormente el producto se envía al tanque receptor en el cual mediante un agitador se
homogeniza, finalmente se almacenan en los tanques de producto final. El vacío por el cual
se realiza la pre evaporación aumenta del efecto I al efecto III. El superconcentrador utiliza
vapor directo y los vapores producidos se condensan en un condensador de superficie.
Almacenamiento
Al tanque almacén elegido para el llenado llega el sirope de glucosa por bombeo
proveniente del tanque homogenizador. Aquí permanecerá inmóvil hasta que se inicie la
extracción en carros cisterna o bidones para su envío a los consumidores.
(LABIOFAM, 2013)
Las principales enzimas utilizadas en nuestro país para la hidrólisis enzimática del almidón
de maíz son:
La α-amilasa: es clasificada como una endoenzima debido a que hidroliza enlaces
glucosídicos α 1-4 al azar. Por esta razón a esta enzima se le conoce como tijera. El
proceso de conversión de almidón a dextrinas con esta enzima se le conoce como
licuefacción (reducción en viscosidad). Produce jarabes con 15-25% equivalente de
dextrosa. La mayoría de ellas trabajan óptimamente a pH de 5,5 -7. Son termoestables
(trabajan a 85 a 95°C) aunque resisten temperaturas de 130°C. Obtenidas de Aspergillus
Oryzae o Bacillus licheniformis.
Amiloglucosidasa: Clasificada como una exoenzima denominada industrialmente como
enzima sacarificante. La amiloglucosidasa hidroliza tanto a los enlaces α 1-4 y α 1-6. Por lo
tanto convierte a las dextrinas en prácticamente 100% glucosa o dextrosa. Trabaja
CAPÍTULO 2. TECNOLOGÍAS CONVENCIONALES EMPLEADAS PARA LA OBTENCIÓN DE GLUCOSA EN CUBA
28
En la Figura 2.2 se muestra el esquema tecnológico de todas las etapas del proceso de
obtención de glucosa a partir del almidón de maíz por vía enzimática.
Figura 2.2. Diagrama de proceso de la obtención de glucosa a partir del almidón de maíz
por vía enzimática.
CAPÍTULO 2. TECNOLOGÍAS CONVENCIONALES EMPLEADAS PARA LA OBTENCIÓN DE GLUCOSA EN CUBA
29
2.3 Característica del proceso de obtención de glucosa a partir del azúcar refino en
Cuba
Tanto en Villa Clara como en Camagüey para obtener glucosa a partir del azúcar refino se
emplea la tecnología propuesta por el ICINAZ la cual se fundamenta en realizar la
inversión ácida de la sacarosa operando en régimen discontinuo. A la hidrólisis de la
sacarosa en medio ácido o enzimático se le denomina inversión dado que se invierte el
sentido de la rotación óptica de positivo en la sacarosa a negativo en el producto de su
hidrólisis (mezcla equimolar de glucosa – fructosa, denominada azúcar invertido),
obteniéndose la glucosa cristalizada y un sirope rico en fructosa. Este método de hidrólisis
tiene como inconveniente el empleo de ácido fosfórico a elevada temperatura (85-90°C), lo
que puede originar productos coloreados con presencia de cenizas y subproductos no
deseados. (Albertini, 2012, Duarte, 1997)
Las principales etapas de proceso de obtención de glucosa a partir del azúcar refino son:
disolución, inversión, enfriamiento, primera cristalización, filtración, disolución, segunda
cristalización, centrifugación, envase.
Disolución
En un tanque cilíndrico horizontal de 28 m3 de volumen con tapas semiesféricas se adiciona
el azúcar refino y agua a 50 oC; 22,5 t de refino para cada hidrólisis, se adiciona aire a
presión de un compresor con potencia de 22 Kw durante 1,5 horas que demora la
disolución. Se emplean 3 agitadores de hélice con motores de potencia: uno de 5 Kw y 2 de
13 Kw para obtener una disolución que debe tener de 77-78 oBrix y temperatura de 87 a 90
o
C, la cual se logra alimentando vapor directo de la caldera con regulación manual de la
temperatura.
Inversión
Este proceso ocurre en el mismo tanque disolutor para ello se adiciona 600 mL de ácido
fosfórico al 85% por cada tonelada de refino disuelta, se mantiene la disolución en
agitación durante tres horas, tiempo necesario para que ocurra la inversión. Esto se
comprueba en el laboratorio midiendo la lectura sacarimétrica la cual debe ser menor de 6
0
S para considerar buena la inversión, la disolución así obtenida en esta etapa debe tener un
CAPÍTULO 2. TECNOLOGÍAS CONVENCIONALES EMPLEADAS PARA LA OBTENCIÓN DE GLUCOSA EN CUBA
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alimentando vapor directo se funde la glucosa hasta obtener una disolución de 74-76 oBrix
y temperatura de 80 oC, la misma se bombea al enfriamiento empleando bomba de 13 kW
y demora 15 min. El filtro descarga 2 veces para preparar un tanque de glucosa fundida. El
enfriamiento se realiza con aire hasta alcanzar temperaturas inferiores a 43 oC.
Segunda cristalización
La glucosa fría pasa a la segunda cristalización por medio de una bomba de 22 kW que
demora 30 min, este cristalizador contiene un pie de semilla al cual se le alimenta el licor
de glucosa, el mismo tiene agitación mecánica y enfriamiento por aire. Cuando la masa esté
agotada debe lograrse un rendimiento en cristales de 26 a 27 %, esto debe ocurrir en un
período de tiempo de 10-12 días, de no lograrse ese rendimiento se adiciona glucosa sólida
al cristalizador. La masa obtenida pasa por gravedad al mezclador de la centrífuga.
Centrifugación
Se realiza en centrífugas discontinuas que tienen un ciclo de 20 min en dependencia de la
calidad de la masa a centrifugar donde, se separa la glucosa cristalina con 7-8% de
humedad y 89-90% de pureza del sirope de glucosa (63-65 oBx) el cual retorna a la primera
cristalización. Este proceso se realiza durante 8-9 h diaria y se obtienen 2,22 t de glucosa.
Envase
La glucosa cristalina que contiene 7-8 % de humedad se envasa en sacos de papel
multicapa de 34 kg.
La glucosa producida en esta planta se envia a Camaguey como materia prima para la
fabrica de sorbitol, el mismo tiene como destino final su empleo como aditivo en las
producciones que desarrolla la corporación Suchel S.A. Como en la producción de esta
glucosa se emplea la inversión ácida de la sacarosa, esto origina que en determinados
momentos el sorbitol recibido por Suchel tenga valores de pH en el orden de 3,5 unidades
siendo la norma establecida por dicha entidad de 5-7.
En la figura 2.3 se representa el diagrama de flujo del proceso de obtención de glucosa a
partir de azúcar refino por vía ácida.
CAPÍTULO 2. TECNOLOGÍAS CONVENCIONALES EMPLEADAS PARA LA OBTENCIÓN DE GLUCOSA EN CUBA
32
Figura 2.3. Diagrama de flujo del proceso de obtención de glucosa a partir de azúcar refino
por vía ácida.
En el proceso actual de producción de glucosa que se desarrolla en Chiquitico Fabregat se
presentan dificultades que influyen en el rendimiento y calidad de la glucosa obtenida, entre
ellas se identifican:
CAPÍTULO 2. TECNOLOGÍAS CONVENCIONALES EMPLEADAS PARA LA OBTENCIÓN DE GLUCOSA EN CUBA
33
• Alto índice de insumo de azúcar refino, la planta según diseño consume 6 t refino/t
glucosa y además genera 6 t de jarabe de fructosa.
• El refino insumido no siempre cumple los parámetros de calidad establecidos lo que
influye en el rendimiento de la inversión. No se controla el contenido de
polisacáridos que tiene el crudo que insume la refinería ni el que llega con el refino
a la planta de glucosa , siendo este un factor importante que incide en la velocidad
de cristalización de la glucosa y por tanto en el rendimiento en cristales del
proceso.
• El tanque donde se realiza la disolución e hidrólisis de la sacarosa se encuentra en
posición horizontal esto origina zonas muertas que afectan la disolución de la
sacarosa y el proceso de inversión en si.
• En los filtros hay problemas mecánicos en el ajuste placa- marco, esto provoca que la
glucosa cristalina que se obtiene se contamine con jarabe de fructosa.
• El rendimiento en cristales que se obtiene en la primera y segunda etapa de
cristalización depende del grado de enfriamiento alcanzado, este enfriamiento se
logra por circulación de aire ambiental ya que los cristalizadores carecen de un
sistema de enfriamiento forzado.
• El bajo rendimiento en cristales que se obtiene en las etapas de cristalización
implica que el sirope de fructosa que se obtiene en la cristalización y el de glucosa
de la centrifugación contengan un elevado porciento de glucosa que no logró
cristalizar.
• Según la tecnología propuesta por el ICINAZ el sirope de glucosa que sale de la
centrífuga con Brix de 63 – 65 se debe concentrar en un evaporador a vacío hasta 80
o
Brix, en la práctica esto no se realiza , se plantea que el alto consumo de vapor
para llevar a cabo ese proceso no justifica la mejora que se puede obtener en la
cristalización, lo que se hace es tomar ese sirope y emplearlo para lubricar la masa
que está a punto de salir de cada cristalización, con esto se logra mejorar la
capacidad de purga de las mismas lo cual incide directamente en el rendimiento de
la cristalización.
CAPÍTULO 3. PROPUESTA DE MODIFICACIONES A LA TECNOLOGÍA DE OBTENCIÓN DE
GLUCOSA POR HIDRÓLISIS ÁCIDA 34
cambiadas por la formación de múltiples enlaces entre la enzima y el soporte sólido. Sin
embargo, se pueden presentar alteraciones en propiedades del biocatalizador como su
actividad, el enlace al sustrato y el pH óptimo de los derivados inmovilizados. (Brady,
2009, Fagain, 1991)
No obstante las ventajas que ofrece la utilización de enzimas inmovilizadas, estos procesos
presentan algunos inconvenientes, entre los que se señalan: la alteración de la conformación
de la enzima respecto a su estado nativo, la gran heterogeneidad del sistema enzima-
soporte, la pérdida parcial de actividad durante la inmovilización y el biocatalizador es más
caro que la enzima nativa. (Arroyo, 1998, Bayramoglu, 2003)
Como resultado del estudio realizado por (Brizuela, 2015), en la evaluación del
biocatalizador se aprecia un incremento de la estabilidad funcional y operacional de la
enzima. Con el propósito de evaluar esta propiedad realizó un estudio de ciclos de reuso al
biocatalizador sintetizado, en un reactor empacado operado a 30°C y almacenado a 4°C, los
resultados se muestran en la Figura 3.1.
La estabilidad operacional de las enzimas es uno de los factores más importantes que define
las aplicaciones sucesivas de los sistemas inmovilizados (Dincer, 2007, Sandar, 2003) han
planteado que la mayor virtud de la inmovilización en la práctica real es la reusabilidad del
biocatalizador, independientemente de su termoestabilización.
Figura 3.2. Estabilidad durante el almacenaje de la invertasa nativa (○) e inmovilizada (●) a
37ºC en solución tampón de acetato de sodio 50 mmol/L, pH 5,0.
El tiempo de vida media del reactor se obtuvo por la ecuación de (Rajalakshmi, 1995): t1/2 =
(1/ki).ln 2, la constante de velocidad correspondiente al proceso de inactivación térmica del
-4
biocatalizador (ki) fue obtenida por estudios cinéticos y su valor es de 1,7 * 10 h -1. El
tiempo de vida medio calculado para el biocatalizador propuesto fue de 170 días.
La velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas presenta una dependencia
característica de la concentración de sustrato. A bajas concentraciones de sustrato, la
velocidad inicial es proporcional a la concentración de la enzima sola. Esta dependencia de
la rapidez en la concentración de sustrato fue observada por Brown y Henry en 1902.
(Martínez, 2007) estudió el efecto que origina la concentración de sacarosa sobre la
actividad enzimática de la invertasa inmovilizada, para ello efectuó la hidrólisis de una
disolución de sacarosa a diferentes concentraciones de sacarosa y de enzima y encontró
que a concentraciones de sacarosa mayor de 1mol/L (1M) se produce una disminución de la
CAPÍTULO 3. PROPUESTA DE MODIFICACIONES A LA TECNOLOGÍA DE OBTENCIÓN DE
GLUCOSA POR HIDRÓLISIS ÁCIDA 38
actividad enzimática dado que ha ocurrido la inhibición por sustrato según se observa en la
Figura 3.4.
Figura 3.5. Diagrama de flujo del proceso de obtención de glucosa a partir de azúcar refino
por vía enzimática.
CAPÍTULO 3. PROPUESTA DE MODIFICACIONES A LA TECNOLOGÍA DE OBTENCIÓN DE
GLUCOSA POR HIDRÓLISIS ÁCIDA 40
A partir de los resultados obtenidos en la defectación técnica del proceso se proponen las
siguientes medidas para intensificar la producción de glucosa.
• Colocarle al tanque de enfriamiento de licor invertido además de la inyección de aire,
un sistema de paletas móviles para intensificar la transferencia de calor.
• Tapar los cristalizadores de primera y segunda cristalización y colocarles toberas para
la alimentación de aire y sacar el aire caliente con un extractor para intensificar el
proceso de enfriamiento y con ello aumentar la velocidad de cristalización de la
glucosa.
• Insumir azúcar refino que cumpla con la (NE-01-2012), puesto que la calidad de esta
materia prima influye directamente en el rendimiento de la glucosa.
• Mejorar las condiciones de los filtros para evitar derrame de sirope de fructosa que se
mezcla con la glucosa obtenida.
En la Tabla 3 se reporta el listado de los equipos requeridos en las dos tecnologías. En la
hidrólisis enzimática se sustituye el reactor discontinuo (hidrólisis ácida) por un reactor de
lecho fijo empacado con el biocatalizador INV-QSA: Quit-CMC, que da la posibilidad de
la operación continua. La proyección se realiza a partir del diseño del reactor de invertasa
inmovilizada como lecho fijo propuesto. Para llevar a cabo la obtención de glucosa por vía
enzimática se realizarán 15 ciclos de inversiones mensuales y se operará en la etapa de
disolución-inversión con los parámetros que se indican en la Tabla 4 según recomienda.
(Brizuela, 2015)
Columna 1 -
Bomba 1 1
CAPÍTULO 3. PROPUESTA DE MODIFICACIONES A LA TECNOLOGÍA DE OBTENCIÓN DE
GLUCOSA POR HIDRÓLISIS ÁCIDA 41
Tabla 3.2. Parámetros de diseño y condiciones de operación continua del reactor de lecho
fijo empacado con el biocatalizador INV-QSA: Quit-CMC.
Parámetros Valor
Flujo de alimentación(m3/h) 2
Temperatura (°C) 30
pH 4,5
3.3 Diseño del sistema tanque agitado para la disolución de azúcar refino
Para diseñar los tanques que se requieren en la disolución del azúcar que alimentará de
forma continua al reactor se procede:
Cada ciclo de inversión enzimática equivale a dos días. Para alimentar los 96 m3 de
disolución de forma continua al reactor se proponen dos tanques de 3 m 3 cada uno, los
mismos trabajaran en paralelo y se empleará una sola bomba para alimentar el licor al
reactor. En un tanque se prepara la disolución empleando 1026 kg de azúcar refino y en el
otro se bombea la disolución ya preparada al reactor.
V= 3m3
V= 0,785*D2*H
V= 0,785* D3
D=1, 96 m
H= 1,96 m
Considerando un 20 % de sobrediseño:
H0= 2,35m
Cálculo de parámetros:
Para un agitador de hélice de tres paletas (Z=3) se tiene d/D=0,25. (Rosabal, 2006)
d=0,25 D
d= 0,5 m
h= (0,5-1) d
h=0,6 *d
h=0,3 m
Tabla 3.3. Principales parámetros para seleccionar un agitador de hélice de tres paletas.
Parámetros Valor
n= (Rem*µ)/ (d2* ρ)
Con un agitador de hélice de tres paletas y un Rem= 8*104 se selecciona una Kn de 0,3.
(Rosabal, 2006)
N= Kn*n3*d5*ρ
N=10,5 kW
Ninst=β*N
Ninst=12 kW
CAPÍTULO 3. PROPUESTA DE MODIFICACIONES A LA TECNOLOGÍA DE OBTENCIÓN DE
GLUCOSA POR HIDRÓLISIS ÁCIDA 44
Con la Ninst se selecciona el motor adecuado el cual presenta las siguientes características:
220/440 V, 60 Hz y una velocidad de 900 rpm.
Para efectuar el análisis comparativo del proceso de obtención de glucosa por medio de la
hidrólisis ácida y la enzimática, solo se tendrá en cuenta el efecto que origina la
modificación de la etapa de hidrólisis. Se considera como tiempo de trabajo 170 días que es
Tabla 3.4. Comparación de los principales indicadores del proceso de obtención de glucosa
y fructosa por ambas tecnologías para 170 días de operación.
Consumo de ácido fosfórico (H3 PO4) = 600mL (H3 PO4)/ t Refino *1913 t Refino
=1147,8 L (H3 PO4)/170 días.
m (H3PO4) = ρ * V
Compresor 22 1,5 33
m vapor * λ = m licor * cp * ΔT
m vapor = [13048 kg/h * 1,071 kJ/ kg oC *(85 – 30) oC]/1962, 1 kJ/kg = 392 kg/h
m disolución = ρ * V
Vdisolución = 2 m3 /h * 48 h = 96 m3
Vdisolución = 96 m3
Bx = 30 %
CAPÍTULO 3. PROPUESTA DE MODIFICACIONES A LA TECNOLOGÍA DE OBTENCIÓN DE
GLUCOSA POR HIDRÓLISIS ÁCIDA 47
ρ = 1127 kg/m3
m azúcar = 33000 kg
1026 kg/tanque
32 tanque/ciclo (48 h)
16 tanques/24 h
Consumo total de Energía = 796 kWh / ciclo * 85 ciclos = 67652 kWh / 170días
La valoración económica se realizó considerando como año de trabajo 170 días, lo cual se
corresponde con el tiempo obtenido como tiempo de vida media del biocatalizador (glucosa
CAPÍTULO 3. PROPUESTA DE MODIFICACIONES A LA TECNOLOGÍA DE OBTENCIÓN DE
GLUCOSA POR HIDRÓLISIS ÁCIDA 48
enzimática). Durante los 170 días de operación del reactor enzimático y del método
tradicional de hidrólisis ácida (glucosa ácida) se realizan 85 ciclos de producción
trabajando la planta a máxima capacidad (15 ciclos por mes). Además, solo se toma en
cuenta la etapa de hidrólisis de la sacarosa. Los precios estimados para las materias primas,
productos y servicios auxiliares en el proceso de hidrólisis de la sacarosa se muestran en
(Anexo VI).
Para cada día se producen 2,22 t de glucosa y 13,33 de fructosa que en total son 15,55 t
diarias de producto. Para 170 días se producen 2644 t.
Para una conversión a 0,75 para el tiempo de vida del biocatalizador y un consumo de
33000 kg de azúcar refino por hidrólisis:
La Tabla 3.7 muestra los principales elementos de costo del proceso de obtención de
glucosa y fructosa por ambas tecnologías teniendo en cuenta los 170 días de operación.
Biocatalizador 1 252 -
Salario para dos obreros que cobran 600 $ / mes 6 792 6 792
Vapor - 409
CONCLUSIONES
1. La glucosa obtenida a partir del azúcar de caña y del almidón de maíz es de gran
aplicación en la industria alimenticia como edulcorante y en la preparación de
medicamentos en la industria farmacéutica.
Recomendaciones
1. Continuar profundizando en el estudio de los métodos para obtener glucosa a partir
de azúcar refino usando técnicas novedosas reportadas por la comunidad científica
relacionada con la temática.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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ANEXOS
57
ANEXOS
Anexo III Norma de calidad del sirope de fructosa (NE 02: 2012)
Brix ........................................... 81 – 83
Equivalente de dextrosa ........... 36 – 40
pH……………………………..4,4 – 5,2
Color…………………………. Patrón 2 máx
ANEXOS
58
Anexo VII Esquema de las etapas del proceso de obtención del biocatalizador
invertasa- quitosana inmovilizado en un soporte de quitina - carboximetilcelulosa.