Giovani Daniel Olvera Cardenas 15/sep/14
Previo de microbilogia I cultivo con agar
Axenico: Un cultivo axénico consiste en una sola especie microbiana, proveniente de una sola célula. Los cultivos axénicos son muy extraños en
la naturaleza. En los medios naturales como por ejemplo, en el suelo, agua, o en el cuerpo humano. Existen cultivos mixtos.
Selectivo: es un medio de cultivo en el que solo puede crecer un tipo de microorganismo.
Diferencial: es un medio de cultivo que es capaz de distinguir dor microorganismos por su crecimiento diferencial en el mismo, usando sus
propiedades metabólicas.
Medio Microorganismos Composición del medio
Caldo tetrationato Enriquecimiento selectivo Peptona, sales biliares,
de Salmonella carbonato de calcio, tiosulfato
de sodio
Agar Bismuto Sulfito Salmonella typhi y otras Extracto de carne, caseína,
enterobacterias peptona, dextrosa, fosfato de
sodio, sulfato ferroso, indicador
de sulfito de bismuto, agar,
verde brillante
Agar Baird Parker Staphylococcus Peptona de caseína, extracto de
carne, extracto de levadura,
cloruro de litio, glicina, piruvato
de sodio, agar
Caldo LMX-Fluorocult Escherichia coli y otros Triptosa, NaCl, sorbitol,
coliformes triptófano, fosfato hidrogenado
dipotásico, fosfato
dihidrogenado de potasio, lauril
sulfato de sodio, 5-bromo-4-
cloro- 3-indolil-ß-D-
galactopiranósido (X-GAL), 4-
metilo- belliferyl-ß-D-
glucurónido (MUG), 1-isopropil-
ß-D-1- tiogalactopiranósido
(IPTG)
Forma de Preparación
46 g en 1 litro de agua destilada. Calentar
con agitación y llevar a ebullición, enfriar a
45°C y agregar 20 ml de solución iodurada
(no esterilizar en autoclave)
45.5g en agua destilada, calentar agitando
hasta ebullición, vaciar en placa (no
esterilizar en autoclave)
60 g 940 ml de agua destilada,
calentar agitando hasta ebullición y
disolución total. Esterilizar en autoclave 121
ºC/15 min, Enfriar a 45°-50°C y agregar 50
ml de emulsión de yema de huevo y 10 ml
de la solución de telurito
17 g en 1 litro de agua destilada, calentar a
ebullición para disolución completa,
distribuir en tubos de 20mL, esterilizar en
autoclave a 121ºC/15 minutos
Interpretación
El caldo se observa turbio después
de incubación (crecimiento de
Samonella)
Las colonias de Salmonella typhi son
marrones o negras, con brillo
metálico alrededor de las colonias (la
mayoría de veces)
Bacterias que reducen el telurito de
potasio: colonias de color grisáceo-
negro.
Bacterias que no reducen el telurito
de potasio: colonias del color del
medio, transparentes.
Bacterias con actividad lecitinásica:
halo claro alrededor de la colonia.
Bacterias sin actividad lecitinásica:
ausencia de halo claro
Presencia de coliformes: vire del
caldo a verde/azul
Presencia de E. coli: el medio se
vuelve fosforescente con luz UV
Presencia de E. coli: Anillo rojo al
añadir reactivo de Kovacs (reacción
de indol positiva)
Giovani Daniel Olvera Cardenas 15/sep/14
Previo de microbilogia I cultivo con agar
Agar Chromocult Coiformes Peptona, NaCl, fosfato
dihidrogenado de potasio,
fosfato hidrogenado dipotásico,
piruvato de sodio, triptófano,
agar, sorbitol, Tergitol®, mezcla
cromogénica
Caldo BHI Enriquecimiento para Infusión cerebro corazón, tejido
bacterias de difícil animal de digestión pancreática,
crecimiento y algunos gelatina de digestión
hongos pancreática, NaCl, Dextrosa y
fosfato disódico.
Agar TSI Prueba bioquímica para Extracto de carne pluripeptona,
enterobacterias cloruro de sodio, lactosa,
sacarosa, glucosa, sulfato de
hierro y amonio, tiosulfato de
sodio, rojo de fenol, agar
Agar LIA Prueba bioquímica para Peptona de gelatina, Extracto de
enterobacterias levadura, Glucosa, Lisina, Citrato
de hierro y amonio, Tiosulfato
de sodio, Púrpura de
bromocresol, Agar
Agar Entérico Hektoen Selectivo de Salmonella y Extracto de levadura, Sales
Shigella biliares, Lactosa, Sacarosa,
Salicina, Cloruro de sodio,
Tiosulfato de sodio, Citrato de
hierro y amonio, Agar, Azul de
bromotimol, Fucsina ácida
26.5 g en 1 litro de agua destilada, calentar
en baño maría por 35 minutos agitando, no
esterilizar en autoclave, no sobre calentar
Suspender 37 g en 1 litro de agua destilada,
calentar a ebullición por 1 minuto,
esterilizar en autoclave a 121ªC/15 minutos
62,5 g 1 litro de agua destilada, calentar con
agitación frecuente a ebullición hasta
disolución total. Distribuir en tubos,
llenandolos con un volumen que ocupe
hasta la tercera parte de los mismos.
Esterilizar en autoclave a 121°C por 15
minutos. Enfriar y dejar solidificar el agar en
pico de flauta profundo.
35 g en 1 litro de agua destilada, calentar
agitando a ebullición hasta la disolución
completa. Distribuir en tubos y esterilizar en
autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Enfriar y dejar solidificar en posición
inclinada (pico de flauta profundo).
68.5 g en un litro de agua destilada, calentar
a ebullición hasta disolución completa, no
esterilizar en autoclave
E. coli: Colonias azul oscuro a violeta
Coliformes totales: Colonias salmón
a colonias y azul oscuro a colonias de
color violeta (E. coli).
Otros Gram-negativos: colonias
incoloras, a excepción de
algunos organismos que poseen
actividad ß-D-glucuronidasa.
Colonias aisladas en áreas
extendidas y crecimiento confluente
en áreas de inoculación densa.
Vire del medio a rojo:
Ácido/Ácido: positivo a lactosa,
sacarosa y glucosa
Alcalino/ácido: positivo a sacarosa y
glucosa
Alcalino/alcalino: negativo a
fermentación de azúcares
Precipitado negro: positivo a
producción de ácido sulfhídrico
Burbujas de aire/medio deshecho:
positivo a producción de Gas
Vire del medio a lila/morado:
positivo.
Sin cambios: negativo
Shigella spp.: Verdes, colonias
húmedas
Salmonella spp.:Colonias azules-
verdes con o sin centros negros
Coliformes: Colonias de color
salmón-rosa hasta naranja rodeadas
de una precipitación biliar
Giovani Daniel Olvera Cardenas 15/sep/14

Previo de microbilogia I cultivo con agar

Agar EMB Enterobacterias Peptona, lactosa, sacarosa, 36 g en 1 litro de agua destilada, calentar Microorganismos fermentadores de
fosfato dipotásico, eosina, azul con agitación frecuente y llevar a ebullición lactosa y / o sacarosa: colonias de
de metileno, agar hasta su disolución total. Esterilizar en color negro azulado o amarronado.
autoclave 121°C durante 15 minutos Pueden tener centro oscuro y brillo
metálico.

Microorganismos no fermentadores
de lactosa y sacarosa: colonias del
color del medio, incoloras.