Nombre: Paola Iza

BIORREMEDIACION DE LODOS CONTAMINADOS CON ACEITES

LUBRICANTES USADOS
La biorremediacon es un proceso de descontaminación que emplea una serie de reacciones
bioquímicas por una población o consorcios de microorganismos inoculados en la zona
contaminada para convertir la estructura de los hidrocarburos en componentes menos tóxicos
por ello este estudio se realizó por estudiantes de bacteriología y laboratorio clínico de la
universidad de Santander Bucaramanga que consistía en aislar ,identificar y mantenimiento
de cepas nativas de bacteria y hongos con capacidad degradadora de residuos de
hidrocarburos ,para llevar a cabo la descontaminación de dichos residuos se realizaron dos
ensayos inoculando las biopilas conformadas por lodos provenientes de lavaderos de carros
y lodos de alcantarillado de una zona industrial mezclados con lodos deshidratados obtenidos
a partir del tratamiento primario de aguas residuales domésticas.
El método que usaron para el Aislamiento, identificación y mantenimiento de los
microorganismos fue la siguiente las muestras fueron recolectadas de diferentes puntos al
azar, tomando 500 g a una profundidad no mayor de 15 cm de lodos aceitosos provenientes
de lavaderos de carros, lodos de sistemas de alcantarillado de zonas industriales de la ciudad
de Bucaramanga, y lodos estabilizados del tratamiento de aguas residuales domésticas, los
cuales se depositaron en bolsas plásticas selladas, conservadas en refrigeración hasta su
procesamiento, y transportadas a los laboratorios de la Planta de tratamiento de aguas
residuales .
Para el aislamiento se someten las muestras a un pre-enriquecimiento adicionando 100g de
cada una de estas en 250 ml del medio, caldo básico de sales a temperatura ambiente, en
agitación constante a una velocidad de 140 rpm, durante un periodo de doce días.
A partir del sexto día, hasta el día doce, se tomó un inóculo y sembró por agotamiento en
placas de Agar Mac Conkey Agar Nutritivo, Agar Cetrimide, Agar Sangre y Agar Infusión
de suelo 25%, después se incubó a 32 ºC y la identificación de bacterias se realizó a partir de
la serie bioquímica. Al aplicar las bacterias a los suelos contaminados o a las muestras que
se recolectaron se lograron porcentajes considerables de remoción de TPH entre el 74,03 y
87,09% en 40 días y 87, 94 y 95% en 120 días ,con la aplicación de los consorcios
microbianos obtenidos se pudo evidenciar que estos residuos depositados en los suelos no
son degradados sin la realización de un adecuado tratamiento, el uso de microorganismos
nativos representa una alternativa para reducir la contaminación generada por residuos
peligrosos y recuperación de zonas impactadas.
EVALUACION DE BIOESTIMULACION (NUTRIENTES) EN SUELOS
CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS UTILIZANDO RESPIROMETRIA
La industria del petróleo no sólo representa una fuente de ingresos importante para la
economía del país sino también un área en desarrollo. Sin embargo, es considerada como una
de los principales contaminantes del ambiente debido a los residuos generados durante
procesos de extracción, almacenamiento, transporte y refinamiento del crudo; residuos que
según la agencia ambiental de Estados Unidos se clasifican como peligrosos debido a que
algunos compuestos tienen propiedades carcinogénicas y mutagénicas, que pueden afectar la
vida de plantas, animales y humano por ello surge la necesidad de implementar soluciones
como la biorremediación, una alternativa que permite la mineralización completa del
contaminante , la bioestimulación que es la adición de nutrientes, es una de las estrategias
más empleadas para remediar áreas contaminadas con este tipo de contaminantes durante la
bioestimulación, se pueden utilizar sales inorgánicas simples (SIS) o fertilizantes
inorgánicos; numerosos estudios han demostrado la efectividad de los dos tratamientos; sin
embargo, investigaciones realizadas por Wrenn y Vallejo afirman que el uso de SIS, aunque
es costoso, tiene ventajas como su fácil manipulación y ha mostrado efectividad en diferentes
procesos de biorremediación.
Por otra parte, se está usando la respirometría que es una técnica que cuantifica el consumo
de oxígeno y la producción de CO2, por lo tanto, permite evaluar el crecimiento y
metabolismo activo de microorganismos durante la degradación del contaminante. Así
mismo, permite evaluar el impacto de un compuesto sobre comunidades microbianas y
determinar la factibilidad de un tratamiento de biorremediación, ya que permite en cortos
periodos de tiempo, evaluar tratamientos diferentes en microcosmos antes de su aplicación
en campo. Estas ventajas, se deben a que la respirometría permite calcular tasas de
respiración y realizar cinéticas de degradación, parámetros importantes para determinar la
efectividad de la biorremediación. Por ello el método para el estudio se realizó por medio de
ensayos respirométricos en microcosmos (botellas ámbar de 500 ml) cuantificando el
consumo de oxígeno durante 13 días. Se utilizaron y compararon dos respirómetros
manométricos: HACH y OXITOP bajo condiciones de laboratorio en la unidad de
saneamiento y biotecnología ambiental (USBA), Pontificia Universidad Javeriana (PUJ). Se
analizaron parámetros fisicoquímicos como pH, humedad, hidrocarburos totales de petróleo,
nutrientes (nitratos, amonio y fósforo) y microbiológicos: recuento de heterótrofos totales y
degradadores de HCs. Los análisis se realizaron al inicio (t= 0 d) y final (t= 13 d) de cada
ensayo por duplicado.
En cada microcosmos se colocaron 85 g de suelo contaminado y se colocó LiOH en las
trampas para remover el CO2 producido durante el proceso de biodegradación. Los equipos
HACH y OXITOP son respirómetros cerrados que miden consumo de O2 por cambio en
presión. El equipo HACH realiza esta medición a través de columnas de mercurio conectadas
a cada botella, mientas que el equipo OXITOP utiliza sensores electrónicos de presión que
están incorporados en la cabeza de cada botella. Se realizaron tres ensayos respirométricos,
para cada tratamiento y control en cada equipo, y se determinó el consumo de O2 durante 13
días realizando las lecturas diarias por microcosmos (suelo proveniente de carreteras sin
pavimentar a las cuales se les adicionan lodos aceitosos para su acondicionamiento y
mantenimiento contaminado con lodos aceitosos a una concentración de 40,000 mg TPH/
kgps).
En si la respirometría permitió evaluar la efectividad de un tratamiento de biorremediación,
como la bioestimulación, en periodos de tiempo cortos. La adición de nutrientes en forma de
sales (SIS) estimuló la población degradadora lo cual se reflejó en tasas de respiración altas
obtenidas en OXITOP y respectivamente, indicando que los nutrientes de SIS estimularon el
metabolismo microbiano.
 LA RESTAURACION DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS
EN MEXICO
Para la restauración de los suelos contaminados de mexico Pemex lleva a cabo múltiples y
variadas acciones para reducir las emisiones de contaminantes contando con un inventario
de emisiones atmosféricas de todas las refinerías, el cual se elabora mediante un programa
que incluyo la instalación de 261 puntos de muestreo en las chimeneas de proceso .Los
residuos generados por las actividades de esta industria como son catalizadores gastados y
lodos aceitosos son depositados en tambores patios y fosas rusticas previo a su tratamiento y
disposición final en sitios autorizados ,Pemex tiene el interés de rehabilitar los suelos
contaminados, de acuerdo con la información de Pemex dos de los lugares más contaminados
por hidrocarburos a nivel nacional son la refinería de lázaro y Pantano de Santa Alejandrina
ambos ubicados en el sureste de México en el cual las auditorías ambientales surgen de la
necesidad de verificar las emisiones y la contaminación de agua , México usa la técnica de
biorremediacion usada en la restauración de suelos contaminados con hidrocarburos en
México lo que más les fue difícil es la utilización de microcapsuladores para estabilizar
presas de crudo ya que estos productos actúan por absorción de hidrocarburos y los retienen
en su estructura interna pero la mayoría de estas capsulas no contienen componentes
químicos capaces de llevar a cabo biodegradación para descomponer el petróleo encapsulado
,existen algunos compuestos contaminantes no polares como el aceite la grasa hidrocarburos
aromáticos halogenados y de igual manera compuestos orgánicos polares como alcoholes
ácidos orgánicos que pueden retardar a inhibir la hidratación adecuada de los encapsuladores
evitando así su correcta cementación o endurecimiento interno por eso lo que causa es que
los sitios queden vulnerables a la contaminación del agua freática en caso de que se rompiera
la estructura de retención otra desventaja que tiene esta técnica es el manejo del volumen de
material tratado , en algunos sitios contaminados con hidrocarburos se han aplicado
productos a base de detergentes con el propósito de lavar el suelo y separar la matriz es decir
el suelo el sedimento o agua del hidrocarburo a un costo considerable.
Los surfactantes que se usan en el lavado de este suelo ya que su solubilidad es alta moviliza
los contaminantes orgánicos absorbidos al suelo estos tienen a inhibir la actividad
microbiológica sobre las moléculas del contaminante. México usa esta tecnología para la
limpieza de 45000 toneladas de sedimentos contaminados con hidrocarburos en diversas
zonas del país de México al comienzo se ejecutó con un gran éxito ya que las características
de los suelos contaminados pero no todos los suelos de los sitios contaminados eran igualas
las propiedades del sedimento como la textura es decir tenían alto contenido de arcillas y el
contenido de material orgánico les resulto un limítate para la aplicación de esta tecnología
por ellos en algunos sitios contaminados por la industria petrolera se aplica lo que es la
biorremediacion con resultados regulares debido a problemas en la estimulación de las
bacterias y del monitoreo continuo de los sitios pero esas experiencias les ayudara para el
futuro a mejorar la técnica México aplico varias cepas de baterías nativas y en si el resultado
que se utilizo fue un sistema de monitoreo independiente con dos laboratorios que realizan
un control de 21 a 30 días en los sitios de tratamiento de suelos se recuperó 35 sitios
contaminados y se aplicó una tecnología de bajo costo y ecológicamente compatible con
niveles inferiores de 5000 ppm de hidrocarburos y los sitios siguen siendo analizados después
de 9 meses de iniciado el proceso pero la biorremediacion en si no se aplica a la concentración
total de hidrocarburos ni en aquellos suelos que han sido contaminados por metales pesados
y otros compuestos recalcitrantes. Las plataformas en las que se aplicó el tratamiento por más
de 90 días alcanzaron valores de TPH por debajo de 3,000 ppm.
REMEDIACION DE SUELOS CONTAMINADOS POR HIDROCARBUROS Y DE
LOSOSD DE RECORTE ELECTROLISIS, COMPUESTOS OXIDANTES Y
ZEOLITAS

Los lodos de recorte de base de aceite que son generados en pozos petróleos de exploración
o explotación son considerados residuos peligrosos y los suelos contaminados con
hidrocarburos, aunque no son considerados residuos peligroso son un problema ambiental
severo. Por ellos en esta investigación lo que se quiere hacer es depurar ambos con el
tratamiento de la combinación de procesos fisicoquímicos que dejan un ambiente adecuado
para una futura restauración empleando microorganismos que incluye la mezcla de lodos de
recorte o el suelo contaminado con hidrocarburo con zeolitas naturales de impregnación
oxidante y la aplicación de corriente eléctrica durante un tiempo dado dicha restauración de
estos suelos contaminados con hidrocarburo mediante el usos de zeolitas en combinación con
un campo eléctrico generado condiciones oxidantes que permiten la solubilizacion y
movilización de hidrocarburos entonces la muestra que se usa en la de un pozo que han
perforado a 1.700 m de profundidad en donde el fluido de recorte se basa aceite donde la
muestra obtenida se mezcla con zeolita natural en una proporción de 1:1 de ahí se impregna
con la solución oxidante que es el peróxido de hidrogeno y se coloca en la celda de
electrorremediacion la celda es un recipiente rectangular con dos electrodos de grafito
,protegidos con papel filtro ,la corriente se aplica por medio de una fuente de poder ,durante
la realización de este proceso se debe proveer solución oxidante para mantener el nivel de
agua en el pozo anódico y colectar el fluido drenado ,para el PH se usa un electrodo y para
el color y turbiedad se usa un espectrofotómetro .Para el crecimiento de los microorganismos
se usa la técnica bacteriológica de aislamiento y siembra empleando como medios de cultivo
agar soya ,la zeolita se muele y se lava con ácido clorhídrico en donde como es el proceso de
dicho experimento esto al realizar la mezcla de lodo de corte de suelo contaminados con
hidrocarburos con zeolitas naturales permitió incrementar la conductividad del medio ,y en
si lo que se concluyo es que la acción del agente oxidante favorece una alcanizacion del
medio lo cual permite la remoción parcial de los componente base aceite utilizados en la
emulsión inversa ,la acción del proceso de electrorremediacion permite un
acondicionamiento de los lodos de recorte así como de los suelos contaminados ,con lo cual
se favorece el crecimiento de bacterias ya con el uso de las zeolitas naturales favorece al
proceso de electrorremediacion ya que minimiza la concentración de oxidante al emplearlo
solo en la humectación de la muestra asimismo es recomendable el uso de nutrientes ya que
favorece a la remoción y transporte de hidrocarburos .
 Disminución del extracto orgánico total en suelos
contaminados con hidrocarburos
Las muestras procedieron de suelos contaminados localizados en un área industrial con
altos niveles de manipulación de petróleo y sus derivados, localizada en la zona costera
de Santiago de Cuba. El área de estudio escogida de 10 m 2 es cercana a la bahía y con
una actividad de carga y descarga de buques cisternas para el trasiego de petróleo, que
se ha mantenido por más de 10 años por ello se realizó la toma de muestras mediante
la técnica de cuarteo, a 5,0 cm de profundidad y se tamizó hasta 0,42 mm para eliminar
las piedras y fracciones más gruesas. Todos los análisis se realizaron por triplicado. Al
principio se comenzó por las muestras de suelo que fueron sometidas al análisis
granulométrico por tamizado para partículas gruesas y por el método del hidrómetro
para partículas finas. La determinación de los sólidos totales, totales fijos, totales
volátiles y Carbono Orgánico Total se realizó según Jackson . El pH, conductividad
eléctrica, contenido de nitrógeno y fósforo, según APHA .2.- Se dobló un papel de filtro
a lo largo de sus diámetros y se colocaron dos muestras de suelo (punta de una espátula)
en los extremos opuestos del papel. Se añadieron dos gotas de HCl c(x/Z*)=0,1 N a
cada una de las muestras y una gota de la disolución de Tiocianato de potasio (KCNS) y
otra de Hexacianoferrato (III) de potasio en las zonas húmedas. La aparición de
coloración roja con KCNS indicó la presencia de hierro férrico. La aparición de color azul
con K3Fe (CN)6, indicó la presencia de hierro ferroso.3.- Se dispuso una cantidad de
suelo conocida, secada previamente a 105 ºC, sobre un embudo con papel de filtro para
impedir el paso del mismo (el peso del papel de filtro debe tenerse en cuenta). Se regó
el sistema con agua destilada hasta aniego. Cuando cesó el goteo de agua se pesó el
conjunto del papel con la muestra de suelo húmeda. Descontando de este valor el peso
de la muestra de suelo seca y el peso del papel de filtro (realizando todo el proceso sin
suelo) se obtuvo el peso del agua que retiene el suelo.4.- Se tomó 1 g de suelo y se
añadió en 9 mL de solución salina 0,9 %; se agitó vigorosamente durante 2 minutos. Un
mL de la fase acuosa se añadió a 9 mL de caldo nutriente. Se incubó por un tiempo de
24 horas. La aparición de turbidez respecto al tubo control corrobora la existencia de
población microbiana heterótrofa. El recuento de viables se realizó a partir de la solución
salina, realizándose diluciones y se inoculó en placa . La población degradadora de
hidrocarburos se determinó a partir de la población heterótrofa. Un mL de la fase acuosa
se añadió en 9 mL de medio nitrogenado. Se añadió 1 mL de la fuente de carbono a
evaluar (petróleo), se incubó durante 48 a 72 horas y se procedió igual que en la
determinación de la población heterótrofa.5.- Los microcosmos se prepararon en 9
bandejas de aluminio con 600 g de suelo cada una. Se realizaron los tres tratamientos
ya descritos en el ensayo de actividad respirométrica del suelo. Durante 12 semanas se
determinó cada 7 días la materia orgánica extraíble.6.- El lodo procedió de un digestor
anaerobio de primera generación utilizado para el tratamiento de estiércol vacuno y la
pleurotina de la planta experimental de producción de setas comestibles (Pleurotus
ostreatus). Ambos sustratos de trabajo fueron suministrados por el Centro de Estudios
de Biotecnología Industrial (CEBI) de la Universidad de Oriente (Cuba).Tanto al lodo de
digestión anaerobia como a la pleurotina se le realizaron los análisis de nitrógeno,
fósforo, población microbiana heterótrofa y degradadora de hidrocarburos según
procedimientos descritos anteriormente.

Ya realizando todos los métodos antes mencionados o procedimientos llega ala

conclusión que el suelo analizado es arenoso, con un contenido de extracto orgánico
total soluble en solventes orgánicos de 107,5 g/kg de suelo, y con una población
microbiana muy deprimida. La mayor remoción de HCs en el suelo arenoso evaluado se
obtiene al añadir pleurotina; combinándose la bioaumentación y bioestimulación de la
población microbiana, por el alto contenido de nutrientes y la población degradadora de
hidrocarburos presentes en el sustrato. Se pueden ensayar simultáneamente ambas
estrategias de biorremediación en suelos contaminados con hidrocarburos, empleando
como sustratos residuos orgánicos de procesos biotecnológicos.