Les notions de stérilisation

 Définition
 Généralités sur les méthodes de stérilisation
 La stérilisation par la chaleur
 La filtration stérilisante
 La préparation aseptique
 Les antiseptiques
 Questions de synthèse

Définition
La stérilité

La stérilité se définit comme l'absence de micro-organismes viables.

Les produits stériles en pharmacie

En pharmacie, il faut stériliser toutes les catégories de produits suivants :

1. les préparations pour usage parentéral

2. les collyres et autres préparations ophtalmiques
3. les médicaments à appliquer sur les plaies et brûlures
4. les médicaments dont la conservation ne peut se faire qu'en l'absence de micro-organismes viables
5. les sutures et fils à ligatures
6. les objets de pansement stériles
7. le matériel d'administration des préparations parentérales (injection, perfusion ...)
8. le matériel utilisé pour le conditionnement aseptique

Les préparations pour usage parentéral " Parenteralia"

Produits stériles destinés à être injectés ou implantés dans le corps humain ou animal

Les catégories de préparations pour usage parentéral

1) Préparations injectables :

 Solutions stériles
 Émulsions stériles
 Suspensions stériles

2) Préparations pour perfusion

 Solutions aqueuses stériles et apyrogènes

 Émulsions à phase externe aqueuse stériles et apyrogènes

3) Préparation à diluer pour injection ou pour perfusion

 = Préparations stériles administrées après dilution. Une fois diluée = idem 1) ou 2)

4) Poudres pour préparations injectables

 = Poudres stériles + liquides stériles appropriés => solutions limpides ou suspensions uniformes
5) Comprimés d'implantation et Implants stériles

La stérilisation

Opération qui, théoriquement, consiste à détruire ou à éliminer tous les microorganismes viables qui souillent les
objets, liquides ou les solides.

Généralités sur les méthodes de stérilisation

Généralités

La stérilisation fait l'objet d'un important développement dans les BPF au niveau du chapitre "5.1.1 : Fabrication
des médicaments stériles". Avant de stériliser un produit, il faut vérifier que la méthode de stérilisation convient au
produit à stériliser. En effet chaque technique de stérilisation utilise un mécanisme d'action différent pour éliminer
les microorganismes viables. Ainsi, il est possible de classer les méthodes de stérilisation selon leur mécanisme de
destruction :

1. - La stérilisation par la chaleur sèche :

o destruction protéique par apport de quanta d'énergie.
2. - La stérilisation par la chaleur humide :
o destruction par hydrolyse et dénaturation protéique
3. - La stérilisation par les rayonnements
o destruction par oxydation
4. - La stérilisation par l'acide per acétique
o destruction par oxydation
5. - La stérilisation par le gaz plasma
o destruction par oxydation
6. - La stérilisation par les gaz
o destruction par l'alkylation
7. - La stérilisation par filtration
o élimination physique des micro-organismes
8. - La préparation aseptique
o Quand il n'est pas possible de stériliser mais qu'il est nécessaire d'obtenir un produit stérile, il
faut travailler en n'apportant aucun germe, c'est la préparation aseptique.

La stérilisation par la chaleur

A Les hypothèses de mécanismes d'action

C'est la technique de choix pour la stérilisation des médicaments car elle est utilisable sur des médicaments
conditionnés dans un matériel perméable à la chaleur humide. Comme nous l'avons vu précédemment le
mécanisme d'action de la chaleur humide est double :

1) Hypothèse de CHICK et MARTIN

La chaleur entraîne la coagulation des protéines

2) Hypothèse de HOLWEK et LACASSAGNE

Dans cette hypothèse la chaleur est assimilée à un rayonnement. Ce rayonnement est porteur de quanta d'énergie «
à pouvoir destructeur » Ce pouvoir destructeur est d'autant plus important que la longueur d'onde est courte. Dans
cette théorie, les microorganismes sont bombardés par des quanta d'énergie. Chaque type de germe va supporter
une quantité maximale de quanta d'énergie sans être détruit. La limite de viabilité est d'autant plus vite atteinte que
la longueur d'onde est courte. Quand cette limite est atteinte, le germe meurt.

Cette théorie a l'avantage d'introduire 2 notions essentielles en stérilisation :

Fondamental
1) La sensibilité des microorganismes est variable

2) Il n'y a pas d'altération progressive des germes viables. Il n'y a que des microorganismes morts ou vivants

B Les Paramètres influençant la sensibilité des micro-organismes

La sensibilité des micro-organismes à une stérilisation par la chaleur est fonction :

1. de l'espèce microbienne
2. de la forme microbienne
o les spores sont plus résistantes que les formes végétatives.
3. de la durée du traitement
4. de la contamination initiale
5. de la température
6. du milieu dans lequel se trouvent les germes

B-1 Espèces microbienne

Tous les germes ne sont pas équivalents, certains sont très résistants à la chaleur ; cette propriété est utilisée pour
tester l'efficacité d'une stérilisation ainsi on a utilisé un germe très résistant pour vérifier l'efficacité des
stérilisations, clostridium botulinum. Toutefois, étant donné la toxicité de ce germe, on utilise maintenant un
germe non pathogène tel que Bacillus subtilis pour la chaleur sèche ou Bacillus stearothermophilus pour la chaleur
humide.

B-2 La durée de survie

Comme nous l'avons vu précédemment, chaque microorganisme meurt pour une quantité donnée d'énergie. Sur
une population de micro-organismes, il est montré que la durée de survie est inversement proportionnelle à la
durée de temps durant laquelle on maintient une température déterminée. Ainsi, le nombre de micro-organismes
viables peut être déterminé par la loi exponentielle suivante :

N/N0=exp(-k*t)

où

N=le nombre de germes viables au temps t

N0 = nombre de germes initiaux

k = constante

Loi exponentielle de la destruction des germes viables subissant une stérilisation

Fondamental
Il est donc impossible d'atteindre la stérilité absolue en théorie. La stérilité est une probabilité, non une certitude.

On considère qu'un produit est stérile si la probabilité de trouver un produit non stérile soit inférieureà 1 sur 1
million. On dit que le Niveau d'Assurance de Stérilité (NAS) est inférieur à 10-6.

B-3 La contamination initiale

La stérilité d'un produit dépend de la contamination initiale. Le risque de survie après traitement thermique est
d'autant plus faible qu'il y a moins de germes au départ.

Ce qu'il faut retenir, c'est qu'avant la stérilisation, le nombre de germes doit être le plus petit possible pour
augmenter les chances de stérilité parfaite après la stérilisation.

Pour éviter les germes initiaux :

- employer du matériel propre et stérile

- utiliser de l'eau fraîchement distillée

- utiliser des matières premières les plus pures possibles

- travailler la plus proprement possible

- travailler dans une atmosphère la plus propre possible.

B-4 Les paramètres environnementaux

1. Rôle de l'eau

Les germes sont plus difficiles à tuer dans une atmosphère sèche (150°C durant 3 H ou 170°C durant 1 H)
alors que dans une atmosphère humide, nous le verrons par la suite les temps de stérilisation sont
beaucoup plus courts.

2. Influence des autres composants du milieu (pH,...)

Ces paramètres ne seront pas développés dans ce cours.

3. Température

Il existe une relation exponentielle entre le temps et la température qui, avec des coordonnées semi
logarithmiques, donne une droite.
Relation temps-température : exemple de la destruction des spores de Cl.Botulinum

Sur cette courbe, on voit qu'il faut moins de 3 minutes à 120°C pour détruire des spores de Cl.botulinum ; il faut
30 min à 110°C et plus de 4h à 100°C.

Chaque traitement thermique a une «valeur stérilisatrice» à une température T Désignée par FT.

En général, cette valeur est de l'ordre de 15' - 20' à 121°C pour les préparations aqueuses ou les objets.

C La chaleur sèche
Historique :

Le flambage est la première technique utilisée pour stériliser

pui le chauffage à seca fait son apparition à des températures
comprises entre 150 - 180 °C :

Exemple : le Poupinel

Le poupinel est une enceinte qui stérilise les matières en

portant la température à 160°C pendant 2 H ; ou à 170°C
pendant 1 H ou à 180°C pendant 30 minutes.

Le problème de cette technique est la mauvaise conductibilité

de l'air, il est donc nécessaire pour stériliser :

- de ne pas trop remplir l'enceinte,

- d'avoir une ventilation,

Poupinel
- de filtrer l'air qui entre dans l'enceinte.

Cette méthode est de moins en moins utilisée ; elle peut être

utilisée pour stériliser les objets métalliques ou en verre
(récipients, petits matériels...). Cette technique peut également
être utilisée pour les huiles.
Poupinel
Attention Problème des ATNC

La chaleur sèche est inactive sur les ATNC, et par conséquent les fours Poupinel sont proscrits à l'hôpital.

D La chaleur humide

L'eau assure le transport des calories et provoque une hydrolyse. On distingue

1) T = 100°C Bain-marie bouillant (seringues, collyres, récipients) Vapeur fluente

2) T < 100°C : Tyndallisation ex : 70°C pendant 1 h et répéter 3 fois à 24h d'intervalle

3) T > 100°C : Autoclavage ou Stérilisation à la vapeur d'eau : c'est la technique de référence.

Les autoclaves les plus simples se composent :

1. d'une enceinte, le plus souvent en acier inoxydable munie d'une porte.

2. l'étanchéité est assurée par des joints épais.
3. il existe un système de sécurité de type soupape en cas de surpression
4. d'une arrivée de vapeur d'eau
5. d'un échappement pour la vapeur et l'air
6. d'un manomètre gradué en excès d'atmosphère sur la pression normale. Ainsi, il existe une relation simple
entre pression et température
o Excès de pression Température

0 bar ========> 100°C

0,5 bar =======> 110°C

1 bar ========> 121°C

2 bars ========> 134° C

3 bars ========> 144°C

Exemples d'autoclaves hospitaliers
Les conditions de référence

Les conditions de référence pour la préparation des médicaments stériles sont pour la pharmacopée : 15 minutes à
121°C.

Néanmoins en cas de présence potentielle d'ATNC, ce qui peut être le cas à l'hôpital, les recommandations en
vigueur sont de 18 minutes à 121°C.

En ce qui concerne le matériel (dispositifs médicaux, objets de conditionnement) résistants à la chaleur, la

stérilisation est plutôt conduite à 134°C pendant 10 minutes.

Que stériliser à l'autoclave ?

1. Solutions aqueuses injectables en ampoule (si principe actif thermostable)

2. « Solutés massifs » en flacons ou poches ==> stérilisation dans le conditionnement (ampoule, flacon)
3. Récipients, matériel en verre
4. Dispositifs médicaux en verre, métal, plastique thermostable
5. Textiles (draps, champs,...)
6. Articles de pansement (coton hydrophile, compresses, bandes, gazes...)

E- Les contrôles de la stérilisation

Les techniques intégrant un seul paramètre

1. la température
o Tubes témoins scellés :

Les tubes contiennent un colorant qui change de couleur quand une température donnée est
atteinte.

 Benzonaphtol (110°C),
 Ac. Benzoique (121°C),
 Phénacétine (135°C)
o Thermomètres à maxima :

Ces thermomètres enregistrent la température maximale atteinte par le système

2. Attention : ces techniques ne donnent aucune notion du temps passé la température donnée
Contrôles de la température

2. Colorants indicateurs imprégnant sparadraps et rubans adhésifs.

Ces techniques intègrent plusieurs paramètres tels que : température / durée / présence ou non de la vapeur.

Les intégrateurs

3. Enregistrement continu de la température et de la pression (+++)

Cette technique est la méthode de référence

Cycle de stérilisation

4. Tests microbiologiques

Ce sont des tubes qui contiennent un colorant et des germes viables. Quand les germes sont détruits, ils modifient
le milieu ce qui entraîne une modification de couleur. Pour tester la stérilisation à la chaleur sèche , on utilise
Bacillus subtilis, pour la chaleur humide = Bacillus stéarothermophilus

Tests microbiologiques

La filtration stérilisante
Rappels

La filtration stérilisante est applicable à tous les fluides soit les liquides monophasiques (c'est à dire les solutions),
soit les gaz.

Comme ces notions sont vues par ailleurs : cf le cours correspondant.

En ce qui concerne les préparations galéniques, cette technique n'est appliquée qu'aux solutions qui ne supportent
pas l'action de la stérilisation par la chaleur. L'usage de la filtration stérilisante, du fait de la découverte de principe
actif de plus en plus fragile est de plus en plus utilisé.

La filtration stérilisante des gaz est la technique de référence pour stériliser l'air des enceintes "stériles". Cette
technique sera étudiée dans le paragraphe suivant.

1. Différents types de filtres

1. Les filtres profondeur

o Deux mécanismes d'action : le criblage et l'adsorption
o Inconvénient : il existe un relargage de fibres
2. L e s filtres écran
o Un seul mécanisme d'action : le criblage
o Cette catégorie de filtre est la seule à permettre une filtration stérilisante
o Ces filtres sont composés de polymères ayant des pores de 0,20 à 0,22µm

Inconvénient : il existe un colmatage rapide, d'où l'utilisation d'un pré-filtre, souvent de type
filtre profondeur.

2. Conduite de la filtration

Une filtration stérilisante se déroule de la manière suivante :

 Utilisation d'un matériel (de filtration et répartition) stérile

 Préparation aseptique de la solution à filtrer aussi peu souillée que possible ; il faut limiter la
contamination initiale
 Généralement, la filtration est réalisée sous pression
 La répartition aseptique du filtrat dans des récipients stériles est l'étape finale qui se déroule
immédiatement après la filtration.

3. Les contrôles

Deux types de contrôles sont réalisés :

 Vérification de l'intégrité du filtre. On utilise la technique du point de bulle.

 Vérification de l'efficacité du filtre en filtrant une suspension de micro-organismes de petite taille. Le
germe de référence est Pseudomonas diminuta qui est un germe d'une taille de 0,3µm.

La préparation aseptique
Généralités

Quand la stérilisation dans son conditionnement définitif pas possible, il est indispensable de réaliser un
CONDITIONNEMENT ASEPTIQUE.

1) Filtration stérilisante de l'air

Préparation aseptique

Le conditionnement aseptique consiste en la réalisation d'une préparation dans une enceinte où règne une asepsie
+/- rigoureuse (exigences différentes selon le type de fabrication et le principe actif) .

A La contamination de l'air

L'air transporte des micro-organismes. Ces microorganismes, d'une taille inférieure à 1 µm vont faire partie de la
flore saprophyte mais également de la flore pathogène. Pour se maintenir suffisamment longtemps et contaminer
un organisme, les micro-organismes vont se fixer sur différents supports :
 1. Les poussières d'origines diverses dont la taille est comprise entre 10 à 100 µm. Ces particules ont
tendance à sédimenter très rapidement.

==> Attention : les surfaces planes ont tendance à se contaminer rapidement, d'où l'importance du
nettoyage.

2. Les gouttelettes provenant surtout des muqueuses nasales et pharyngées et dont le diamètre varie de 10
µm à 1 – 2 mm. Ces gouttelettes projetées dans l'atmosphère subissent une évolution qui dépend du degré
hygrométrique et de la température de l'air. Les plus grosses gouttelettes se sédimentent rapidement, mais
les plus petites en atmosphère sèche se transforment en petites particules sèches de 1 à 3 µm qui se
déposent que très lentement et peuvent rester en suspension très longtemps et donc parcourir de très
longue distance.

L'élimination de ces particules est réalisé par la filtration stérilisante.

B Rôle de la filtration

Le rôle de la filtration est double :

- apporter de l'air propre dans la zone de travail.

- éviter l'élimination de produits dangereux dans l'environnement

Rôle de la filtration
C Montage filtrant

Etant donné la pollution de l'air et pour éviter des colmatages très rapide des filtres stérilisants, il est fréquent de
retrouver le montage suivant :

 Système de pré filtre

 Appareil de conditionnement d'air
 Filtre stérilisant

Les prés filtres sont des filtres classiques, par contre les filtres stérilisants sont des filtres à très haute efficacité
dénommés filtres absolus ou HEPA. (Haute Efficacité pour les Particules de l'Air)
La structure d'un filtre HEPA

Pour vérifier l'efficacité de ces filtres HEPA, le test de la fumée DOP (Di Octyl Phtalate) est utilisé. Cette fumée
de DOP est constituée de particules de la taille de 0,3µm. Les filtres HEPA doivent retenir 99,97 % de ces
particules, mais certains peuvent éliminer beaucoup plus (99,99 voire >99,999 % des particules).

Filtre à très haute efficacité (HEPA)

C les enceintes stériles

On distingue 2 catégories d'enceinte stérile :

1. Les enceintes physiquement fermées dénommées isolateurs

2. Les enceintes physiquement ouvertes à flux d'air laminaire dénommées hottes à flux d'air laminaire.

D. Les isolateurs

Les isolateurs sont généralement de taille réduite, ils sont clos et

l'opérateur se trouve à l'extérieur. Les opérations sont réalisées

1. soit l'aide de gants étanches fixés à la paroi,

Exemple de manchette
Schématisation d'une manchette

2 . soit à l'aide d'un demi-scaphandre.

Schéma d'un hémi scaphandre

Le principe de fonctionnement est décrit par le schéma suivant :

Principe d'un isolateur

Les parois peuvent être rigides ou souples, dans ce dernier cas, on les appelle également "bulles".

Exemple d'un isolateur rigide en plastique rigide

E. Les hottes à flux d'air laminaire

Les hottes à flux d'air laminaire sont des enceintes qui sont traversées par un flux d'air qui se déplace à une vitesse
uniforme suivant des lignes parallèles. On distingue 2 types de flux :

1. Le flux horizontal
Poste dépoussiéré à écoulement laminaire horizontal sortant

2. le Flux vertical

Poste dépoussiéré à écoulement laminaire vertical sortant

Le principe

Le principe des hottes à flux d'air laminaire consiste à absorber de l'air et à le filtrer avec un filtre HEPA avant de
le projeter sur la paillasse de travail. Ce flux d'air entraîne un effet piston qui repousse les micro-organismes. Le
schéma suivant montre le fonctionnement d'une hotte à flux d'air laminaire à flux vertical utilisé pour la fabrication
des médicaments.
Poste de Sécurité Microbiologique de Type II
Les zones à atmosphère contrôlée

Généralement, les hottes à flux d'air laminaire sont placées dans des pièces où l'atmosphère est filtrée, on parle de
zone à atmosphère contrôlée (ZAC). Afin d'éviter la contamination des hottes par l'air puisé dans la pièce, il est
nécessaire que cet air soit le plus pur possible. Pour obtenir ce résultat, l'air entrant dans la pièce est filtré à l'aide
de filtre HEPA, comme pour les systèmes précédents. Comme toutes les opérations de fabrication ne présentent
pas le même niveau de risque, vis à vis de la rupture du processus de stérilité, les ZAC sont classées selon le
niveau un contamination maximal autorisé.

Voir classification

Hottes à flux d'air laminaire dans une salle blanche

Les antiseptiques
Les antiseptiques en solution sont très utilisés pour la désinfection des dispositifs médicaux. Pour les
médicaments, l'addition d'antiseptique est très réglementée. Ils sont utilisés à des doses si faibles qu'ils ne sont que
bactériostatiques. Cette méthode n'est utilisée que lorsque la méthode de stérilisation n'est pas suffisante pour
garantir la stérilité du médicament ( ex des flacons multidoses...)

Quelques exemples d'antiseptiques:

 o.crésol en concentration < 3 0/00

 phénol en concentration < 50/00
 p.chloro m. crésol en concentration < 30/0

Les conditions suivantes interdisent l'utilisation des antiseptiques :

1. volume unitaire supérieur à 15 ml

2. médicament destiné à l'une des 3 voies d'administration suivantes :
1. intrarachidienne
2. intraoculaire
3. intracardiaque

3. Questions de synthèse
4. Décrire les moyens existants de stérilisation par la chaleur.
5. Décrire la préparation aseptique
6. Faire les schémas de fonctionnement d'un isolateur et d'une hotte à flux d'air laminaire vertical

La stérilisation
Présentation
Publié le 25/01/2013 à 16:26 par tpe-sterilisation Tags : cadre bonjour divers

Bonjour, nous nous appelons Déborah Goletto et Laura Palacio, nous sommes en première scientifique
au lycée Amiral de Grasse, promotion 2012-2013. Notre Tpe porte sur la stérilisation en milieu
médicale, qui rentre dans le cadre "Avancée scientifique et réalisation technique". Nous nous sommes
demandé quelles étaient les différents techniques utilisé et son utilité? Nous avons réalisé cette épreuve
du bac à l'aide de nos professeurs de svt et de physique.
Introduction
Publié le 01/02/2013 à 15:31 par tpe-sterilisation Tags : recherches divers introduction stérilisation monde background
société

Nos projets d'études supérieures se situant dans la santé, cela nous a permis de nous diriger directement
dans le domaine médical. Nous avons alors pu constater au cours de nos recherches que la médecine
évoluait sans cesse de nos jours, mais que la lutte contre les maladies et notamment les infections était
toujours au cœur de ces progrès. Nous avons alors approfondi cette piste et découvert que parmi les
différentes mesures de lutte et de prévention contre ces problèmes de santé, la stérilisation du matériel
chirurgical et médical jouait un rôle fondamental. En effet c’est vers 1858 que Louis Pasteur identifie
les premiers micro-organismes et qu’il constate que la chaleur peut les tuer, il émet alors les prémices de
ce procédé devenu maintenant une mesure de sécurité obligatoire dans les hôpitaux du monde entier et
qui a pourtant été laissé de côté pendant un long moment. C'est donc cette technique, base de la
médecine moderne qui nous a intéressé puisque finalement connue uniquement par son nom car au final
ces procédés et conséquences ne sont pas très clairs pour la société. Nous nous sommes donc tout
naturellement demandé qu'elle était son utilité et qu'elles en étaient les différentes techniques ?

Pour cela nous allons donc voir dans une première partie qu'est ce que la stérilisation et surtout qu'elle
est son utilité qui reste très vague pour une technique aussi indispensable. Et puis nous verrons les
différentes techniques qui composent ce processus universel dans le monde médical, ainsi que leurs
efficacités.

I) La stérilisation
Publié le 16/03/2013 à 20:01 par tpe-sterilisation

La stérilisation qu'est ce que c'est ?

Publié le 17/03/2013 à 19:02 par tpe-sterilisation Tags : stérilisation background image tube divers exposition
Nous avons tout d'abord cherché à savoir ce qu'était la stérilisation, il s'agit d'un procédé complexe
permettant de détruire divers micro-organismes (bactéries, virus, champignons, parasites ...) présents sur
un support matériel. La stérilisation est indiquée pour tout le matériel médical et chirurgical, devant être
utilisé dans des conditions d'asepsie stricte telles que les compresses, mèches, matériels servant à
l'injection de médicaments, à l'instillation de collyres ou à l'incision de la peau, etc.. La stérilisation se
distingue de la désinfection (pour les objets) et de l'antisepsie (pour la peau) par son caractère plus
poussé. Après stérilisation, la probabilité de trouver un objet demeuré non stérile est de 1 pour 1 million,
la stérilité partielle n'existe pas. Un instrument qui vient d'être utilisé pour un patient doit tout d'abord
être pré-désinfecté sur son lieu d'utilisation, puis lavé minutieusement, séché, vérifié, conditionné,
stérilisé, puis redistribué après validation. Toutes ces étapes prennent au strict minimum 3,5 heures.

Il y a diverses techniques permettant la stérilisation, elles se divisent en deux groupes. Tout d'abord des
méthodes physiques, c'est a dire que l'on peut stériliser des objets à la chaleur sèche, on les place pour
cela dans le four poupinel ou pasteur, à la vapeur en utilisant un autoclave ou en encore grâce aux
rayonnements UV. Il existe cependant des méthodes beaucoup plus poussées, les traitements par
ionisation comme la stérilisation au rayons gammas ou grâce au traitement par faisceaux d'électrons
accélérés, car quand un électron est accéléré, il fait rayonner de l'énergie sous forme de photons(sous
forme d'ondes radio, de micro-ondes, d'infrarouges, de lumière visible, d'ultraviolets, de rayons X ou
de rayons gamma) dit « rayons bêta » . Les plasmas froids sont aussi une méthode physique, il s'agit
d'un gaz inerte comme le peroxyde d’hydrogène, activé par un champ électromagnétique entraînant la
formation de radicaux libres et de photons ultraviolets provoquant la stérilisation.

Le deuxième groupe se compose de méthodes chimiques, l'application d'un produit chimique liquide ou
gazeux comme l'oxyde d’éthylène, l'alcool éthylique, l'hypochlorite de sodium, les vapeurs de formol ou
encore les comprimés antiseptiques généralement utilisés pour les biberons. Aujourd'hui, l'emploi de
seringues, aiguilles et autres instruments à usage unique, pré-conditionnés et jetables, dispense l'usager
d'avoir recours à certaines méthodes de stérilisations dangereuses pour le personnel s'en occupant.

Une fois qu'un objet a été stérilisé, il est dit aseptique, ou stérile. Il doit alors être placé dans un
emballage hermétique, ne laissant pas passer les micro-organismes.

Il est possible de vérifier le stérilisation afin d’éviter toute erreur. En effet pour cela il existele test de
Bowie Dick, qui se fait le matin avant de commencer la stérilisation, dans la chambre vide, après un
cycle de préchauffage, un feuillet indicateur est placé au milieu de deux épaisseurs de multi-feuillets. Il
y a aussi le contrôle de l'exposition au moyen d'un ruban adhésif avec indicateur physico-chimique qui
vire de couleur au passage dans l'autoclave (les indicateurs). Dans certains cas ces rubans adhésifs sont
utilisés pour la fermeture des gaines ou sachets de stérilisation. Ou encore un petit tube témoin, dont le
changement de couleur indique que la stérilisation a été efficace.
Certaines précautions sont nécessaires pour que l'asepsie dure suffisamment longtemps après ouverture
de l'emballage : le médecin ou l'infirmière ne manipule les objets stériles qu'avec des gants eux-mêmes
stérilisés, l'air des salles d'opération est également stérilisé.

Le procédé de stérilisation est réalisé parfois au sein même des hôpitaux notamment pour les objets
destinés aux malades en chambre stérile mais plus généralement les objets chirurgicaux sont envoyés
dans des centres spécialisé qui regroupent plusieurs hôpitaux d'un même secteur, comme dans les alpes
maritimes où les principaux hôpitaux (Nice, Cannes, Grasse) envoient par convoi leurs objets usagés au
centre se situant à Cannes la Bocca.

Ces entreprises se composent de personnels qualifiés : les agents de stérilisation, dirigés par un
pharmacien spécialisé dans ce domaine. Tout le personnel est soumis à de nombreuses normes et a des
règles au sein de l'entreprise afin de limiter les erreurs lors du processus. Ils sont ainsi obligés de porter
des tenues adaptées, charlottes, sur-chaussures, blouses adaptées. Et l'obligation de fermer une porte
pour en ouvrir une autre limitant ainsi l'entré d'air contaminé.

Tout au long du processus les objets sont suivis de leur départ des hôpitaux à leur retour. Ils sont
étiquetés avec un code barre et tout au long du processus chaque étape est détaillée ( durée,
confirmation, nom de l'employé ect..)

Pourquoi on l'utilise en milieu médical ?

Publié le 17/03/2013 à 19:19 par tpe-sterilisation Tags : background

La stérilisation en milieu médical est utilisée pour la prévention des infections comme les infections
nosocomiales, infections contractées dans un établissement de santé. C'est un objectif majeur pour les
établissements hospitaliers car il doit être dispensé au malade la meilleure qualité de soins possible. Cela
permet de réduire les exo-infections, qui sont les infections transmises par un dysfonctionnement
technique d'un matériel (filtre à air, autoclave…) destiné à la protection des patients qui, ne remplissant
plus son office, les laisse en contact avec des germes qui ne devraient, en principe, pas faire l'objet d'une
infection, au vu des mesures prises pour les prévenir soit à une erreur commise dans l'exécution des
procédures de traitement du matériel médico-chirurgical.

De plus la stérilisation est utilisée quand certains dispositifs médicaux (instruments chirurgicaux,
endoscopes,…) ne peuvent, souvent pour des raisons de coût, bénéficier d'une approche industrielle : le
matériel à usage unique qui améliore le confort du patient et représente la garantie en matière de qualité
et de sécurité sanitaire

Démonstration de l'utilité de la stérilisation

Publié le 17/03/2013 à 19:37 par tpe-sterilisation Tags : introduction tube divers
Nous avons cherché à démontrer l'utilité de la stérilisation qui est l'un des fondements de la médecine.
Nous avons alors entrepris de trouver une expérience démontrant l'importance d'un procédé aussi
complexe, long et coûteux que la stérilisation. Après avoir longuement réfléchi nous nous somme
souvenue d'une expérience réalisée en cours de svt qui devait se réaliser en conditions d' asepsie stricte,
c'est à dire avec du matériel stérile et dans un environnement sain c'est a dire sous la flamme donc dans
un champ stérile, il s'agit de la mise en culture de levures. Nous avons donc réaliser un protocole, cette
expérience consiste à déposer des levures dans une boite de pétrie, de manière a ce qu'elles puissent se
développer.

Il faut tout d'abord mélanger dans un tube à essai des levures de préparation pour gâteau et de l'eau. On
en prélevé ensuite quelques-unes à l'aide d'une pipette que l'on étale sur le milieu nutritif à l'aide d'un
râteau et on laisse les levures se développer dans ces boites. Notre expérience est composée de deux
étapes, premièrement une mise en culture témoin sans stérilisation, pour cela nous avons pris tout le
matériel que nous avons rendu non stérile en y déposant toute sorte de germes et divers micro-
organismes, nous avons ensuite appliqué le protocole à l'air libre sans précautions particulières et sans
champ stérile. Dans un deuxième temps, nous avons renouvelé la même expérience ou chaque élément a
été stérilisé au préalable, de plus l'introduction des levures dans la boite de pétrie s'est déroulé sous la
flamme qui a créé un champ stérile évitant ainsi la contamination des levures par différents
champignons, bactéries ou autres...

Nous avons alors laissé les levures se développer et avons constaté nos premiers résultats au bout d'une
semaine, seulement ceux-ci n'étaient pas assez explicites, les levures se sont bien développées mais les
deux boites de pétrie ne présentaient aucune différence. Nous avons donc laissé reposer nos levures une
semaine de plus, ce qui n'a pas non plus été concluant. C'est alors que les premiers résultats concrets
sont apparus au bout de trois semaines. Nous avons pu constater que de nombreux champignons étaient
apparus, dont certains d'une couleur pour le moins suspecte comme vert ou orangé et de tailles variées
certain était en effet vraiment imposants. Alors que les boites de pétries témoins, elles ne présentent que
très peu, voir aucun champignons.

L'apparition de ces micro-organismes rend notre expérience concluante, en effet cela nous permet
d'affirmer que la stérilisation à bien un rôle à jouer puisqu'entre les cultures de levures stériles et les
non-stérile, on note une grande différence dans le nombre de champignons développés et dans leurs
tailles.
On peut affirmer que la stérilisation tient un grand rôle puisque elle permet de limiter voir d’empêcher
la prolifération de champignons et d'autres divers organismes dans nos cultures de levures.

On peut ainsi penser que lors des opérations chirurgicales la stérilisation permet d'éviter au divers
micro-organisme d’être déposés et donc de se développer dans l'organisme lors d'une opération ou lors
de n'importe qu'elle acte médical impliquant un contact direct avec l'organisme. Cela permet donc très
certainement d’éviter de nombreuses maladies et infections issues de ces micro-organismes. On a voulu
savoir qu'elles étaient les conséquences médicales d'une mauvaise stérilisation des instruments
chirurgicaux, ce qui va nous permettre d'encore mieux démontrer l'utilité de la stérilisation dans le
milieu médical.

Les conséquences médicales d'une mauvaise stérilisation

Publié le 17/03/2013 à 19:54 par tpe-sterilisation Tags : mort france femme homme nature

Afin de démontrer encore mieux que la stérilisation est un procédé indispensable dans le milieu médical
nous avons voulu savoir qu'elles étaient les conséquences d'une mauvaise stérilisation du matériel
médical pour l'homme. Comme nous l'avons dit précédemment les patients hospitalisés sous soumis au
risque d'infections nosocomiales (Dérivé du grec « Nosokoméone » qui signifie hôpital). De plus il est
prouvé par plusieurs études qu'en France 5% à 10% des malades hospitalisés contractent une infection
nosocomiale. Le matériel est potentiellement un réservoir de micro-organismes et peut devenir une
source de contamination. A l'origine de cela on retrouve le plus souvent des fautes ou des erreurs dans le
cycle d'entretien, dans le nettoyage, la désinfection ou encore le stockage avant la réutilisation de ce
matériel. La mauvaise qualité de ces nettoyages est surtout favorisée par la complexité de certains de
ces matériels comme les conduits fins des endoscopes, les valves d'aspiration… Ou encore par le non-
respect des procédures de désinfection et/ou de stérilisation. Cela peut aussi être du à une re-
contamination après la stérilisation. Ainsi certains instruments médicaux augmentent aussi
considérablement les risques de contaminations comme par exemple le matériel utilisé pour le maintien
de la liberté des voies aériennes et pour réaliser la ventilation mécanique ( humidificateurs chauffants,
nébuliseurs, ballons de ventilation manuelle, systèmes d'aspiration) qui causent surtout des cas de
bacille pyocyanique. Ainsi que le matériel d'hémodialyse qui a été incriminé dans la transmission
d'infections à staphylocoques, à bacilles Gram négatif et surtout d'hépatites B.
La mauvaise stérilisation peut donc être à l'origine des contaminations bactériennes c'est à dire qu'il y a
risque de colonisation bactérienne et d'adhésion notamment autour de plaies recousues. De plus il existe
certains risques de réaction pyrogène, de collapsus ou encore de réactions immunopathologiques.

Les erreurs dans le processus de stérilisation sont aussi à l'origine d'infection. Les infections urinaires
sont les plus fréquentes et représentent 50-80% des infections selon les établissements. Avec une
possible colonisation de matériel prothétique situé à distance en particulier de prothèses orthopédiques
et vasculaires qui entraîne de nombreuses complication y compris la mort.

Les infections de sites opératoires (infection de la zone opérée) sont les deuxièmes par ordre de
fréquence et représentent en moyenne 20% des infections nosocomiales. La peau et les muqueuses
intactes représentent des barrières efficaces contre les bactéries des flores commensales et des flores
extérieures. Mais lors d’un traumatisme ou d’une ouverture chirurgicale, cela offre l’opportunité à ces
bactéries de franchir et de se multiplier au sein du corps humain, et d’y créer une infection pouvant se
rependre. Les bactéries responsables de ces infections proviennent de la flore du patient : flore cutanée
(staphylocoque) ou flore muqueuse (entérobactéries). Les infections de sites opératoires comprennent
les infections superficielles qui concernent le tissu sous-cutané et les infections profondes qui
concernent le site opératoire lui-même. Les conséquences des infections de sites opératoires sont la
mortalité dans le cas des endocardites sur valve cardiaque prothétique par exemple, la dégradation
fonctionnelle dans le cas des prothèses orthopédiques et surtout des surcoûts en soins. Des infections
pneumologiques et des bactériémies peuvent êtres des complications d'un problème dans le processus de
stérilisation.

Mais les erreurs de stérilisation peuvent aussi être la cause d'hépatites essentiellement en cas d’infection
de matériel prothétique par des entérobactéries.

Il se peut aussi que ces erreurs induisent des maladies beaucoup plus importantes comme les cas récents
de méningites à la clinique Amina de Blida en Algérie. En effet 13cas de méningites nosocomiales ont
étaient recensés dans cet hôpital De plus cette épidémie est l'origine de la mort de deux personnes, une
femme de 57 ans et un jeune homme de 27. Bien qu'il soit difficile de déterminer les causes de
l'épidémie, car la responsabilité peut être collective ou individuelle. Cependant les premières
investigations révèlent un manque flagrant d’asepsie lors des soins et des problèmes au niveau de la
stérilisation des objets médicaux eux-mêmes.

Beaucoup moins connu, on sait tout de même que certaines techniques ne détruisent pas les prions,
des agents pathogènes de nature protéique qui au contraire des agents infectieux conventionnels tels que
les virus, les bactéries ou encore les parasites, sont exempt d’acide nucléique (ADN et ARN) comme
support de l’information infectieuse. Ils sont à l’origine de maladies comme la Creutzfeldt-Jakob

II) Les différentes techniques de stérilisations

Publié le 17/03/2013 à 20:06 par tpe-sterilisation

La stérilisation à la vapeur
Publié le 17/03/2013 à 20:08 par tpe-sterilisation Tags : bleu vapeur sortie autoclaves divers papier bébé
 Autoclaves et plan du centre de stérilisation
Nous avons tenté de stériliser les instruments utiles à nos expériences à la vapeur, une, voire la
technique la plus répandue, cependant notre expérience à échoué. En effet nous avons placé quelques
râteaux et pipettes dans une cocotte-minute pendant 40 minutes mais la température n'a pas atteint un
seuil suffisant puisque les indicateurs que nous avions placés n'ont pas changé de couleur.

C'est pour cette raison que nous avons décidé de visiter l'entreprise en charge de la stérilisation du
matériel des hôpitaux de notre région. Ainsi la pharmacienne en chef du service a accepté de nous
rencontrer. Après nous être perdus dans l'entreprise nous avons rencontré un technicien qui a pu nous
conduire jusqu'au bon bâtiment. Et après les présentations nous avons eu droit à une visite guidée des
différents services. Nous avons été obligés de porter une tenue appropriée, qui se compose d'une
combinaison, d'une blouse ainsi que de sur-chaussures et d'une charlotte.

Nous sommes tout abord passé dans la zone dite « sale » ou « verte », c'est dans cette pièce qu'arrivent
les instruments des hôpitaux à peine rincés dans des casiers fermés à clé et étiquetés. Ils sont donc
relavés minutieusement dans des machines à laver « de compétition » pour citer le pharmacien, ou à la
main pour les objets complexes tels que les ciseaux. Ils sont ensuite séchés directement dans les
machines ou encore par air médical comprimé ce qui évite donc de rajouter des germes et bactéries sur
les objets à stériliser.

Nous sommes ensuite passées dans la salle de conditionnement et de stérilisation, la zone dite « bleue ».
Cette salle permet de conditionner les objets par la suite stérilisés dans un autoclave donc à la vapeur,
seule technique utilisée dans cette entreprise. En effet on place tous les instruments chirurgicaux et
médicaux dans des sachets spéciaux ou encore dans des boites équipées de papier filtre laissant
uniquement passer la chaleur, appelées conteneurs. Cette phase est contrôlée par ordinateur en effet
l'agent en service doit d’identifier au cas où il y ai des erreurs de plus c'est aussi à ce moment-là que les
indicateurs sont attachés aux différents objets qui sont encore étiquettes afin de prévenir les erreurs. Les
objets restent alors placés dans cet autoclave pendant 45 minutes, à très haute température soit plus de
135 degrés, ainsi les micro-organismes sont détruits. Le processus de stérilisation est vérifié tout au long
par ordinateur notamment grâce à plusieurs graphiques et alarmes. Les objets sont ensuite replacés dans
leurs casiers d'arrivage qui ont eu même été stérilisés. Ces casiers sont stockés dans la dernière zone, de
couleurs rouge ou noire, qui est la zone de transport, en attendant les camions des divers hôpitaux.
Le chef du service nous à donc expliqué que les objets et techniciens ne pouvait effectuer se déplacé que
dans un sens, de la zone verte à la zone rouge. Ils ne peuvent aucunement rebroussé chemin en aucune
raison. De plus, les objets sont étiquetés et suivis par ordinateur tout au long du processus de
stérilisation.

Vidéo d'explication de la stérilisation.

Bien que nous n'ayons pas pu tester cette technique de stérilisation, on peut tout de même affirmer que
la chaleur humide ou plus communément appelé vapeur est très efficace puisqu'il s'agit de la méthode de
référence dans les établissements de santé pour tous les dispositifs médicaux thermorésistants. Cette
méthode, qui utilise la vapeur d’eau comme agent stérilisant permet d’assurer la préparation du matériel
stérile pour les blocs opératoires et les services de soins dans des conditions maximales de sécurité.
Puisque si celle-ci n'était pas fiable elle mettrait en danger les patients soignés avec les objets stérilisés
par cette technique. Et pourrait provoquer de nombreuses complications comme nous l'avons dit
précédemment.

De plus la stérilisation par la vapeur ne laisse aucun résidu pouvant être nocif pour la santé
contrairement à certaines autres techniques comme la stérilisation par vapeur d'oxyde d’éthylène qui a
été interdite notamment à cause de l'affaire des biberons, puisqu'il a été prouvé que cette technique
laissait des résidus nocif pour les bébés.

D'autres méthodes de stérilisation

Publié le 17/03/2013 à 20:10 par tpe-sterilisation Tags : sortie recherches homme papier

De manière à mieux approfondir notre sujet nous avons décidé de tester différentes techniques de
stérilisation que nous avons découverte pendant nos recherches. Et nous nous sommes ainsi demandé s'il
y avait une différence dans leur efficacité.

Après réflexion nous avons décidé de réaliser la même expérience de mise en culture de levures mais en
variant les techniques. C'est à dire que nous avons tenté de stériliser les outils aux UV, à la chaleur
sèche et aux comprimés antiseptiques.
Pour toute les techniques nous avons tout d'abord lavé au savon et à l'alcool les instruments, que nous
avons ensuite emballés individuellement dans du papier aluminium suivant le pliage de l'enveloppe que
nous avons appris lors de notre sortie (sauf pour les comprimés antiseptiques)

Ainsi pour les UV nous avons passé les instruments pendant 45 min dans une cabine prévue à cet effet.
Puis pour la technique à chaleur sèche, nous avons tout placé dans un four poupinel pendant également
45 minutes. Pour finir nous avons stérilisé grâce aux comprimés antiseptique habituellement utilisés
pour les biberons, et nous avons suivi les instructions au dos de la boite, nous avons donc immergé les
pipettes et râteaux pendant 20 minutes dans une solution aqueuse de dichloroisocyanurate de sodium.

Nous avons ensuite remis en culture des levures dans des boites de pétrie comme précédemment mais en
utilisant les objets que l'on a utilisés, ainsi nous avons attendu trois semaines pour pouvoir observer les
résultats de nos expériences et finalement nous avons pu les comparer afin de savoir laquelle de ces
méthodes était la plus efficace.

On constate donc que la technique la plus efficace est la stérilisation à la chaleur sèche, car on ne voit
aucun champignon dans la boite de pétrie. De plus on ne voit également aucun champignon dans la
boite de pétrie ou les levures était mise en culture avec les objets stérilisés pas les comprimés
antiseptiques. Cependant on remarque que la stérilisation aux UV elle n'est pas vraiment efficace
puisque beaucoup de champignons se sont développés dans la boite de pétrie.

D’après nos observations on peut en déduire que dans les procèdes de stérilisation il en existe des plus
ou moins efficaces, en effet la stérilisation à la chaleur sèche et les comprimées antiseptiques sont bien
plus efficaces que les UV par exemple et sont utilisés pour le bien-être et la santé de l'homme
contrairement au UV qui sont une technique beaucoup moins efficace et de ce fait on l'utilise
uniquement pour les aquariums ou les piscines. De plus certaines méthodes de stérilisation sont plus
nocives pour la santé que d'autres comme on la vue précédemment ce qui en fait des techniques
beaucoup moins efficaces puisqu'elles augmentent les risques de maladies au lieux de les réduire.