INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Licenciatura en Biología

LABORATORIO DE BIOLOGÍA DE PROCARIONTES

Sección 2

PRÁCTICA 3

TAXONOMÍA E IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

2OM2

EQUIPOS 6 Y 7

INTEGRANTES:

● Fuentes Diaz Beatriz Veronica

● Mejia Roldan Angelica Janeth
● Ávila Méndez Jonatan Daniel

● García Hernández Adrián

ENTREGA DE LA PRÁCTICA: 04/Septiembre/2019

OBJETIVOS:
● Identificar por medio de la primera etapa de Cowan el grupo o género al que
pertenece la cepa.
● Realizar una serie de pruebas para una buena identificación de las cepas.

RESULTADOS

Equipo 7

Tabla 1. Morfología Colonial Y Microscópica de bacterias

Características Colonia 1 Colonia 2 Colonia 3

Tamaño (mm) 3 4 2

Color Blanco Blanco Amarillo

Forma Irregular Circular Circular

Elevación Plana Bajo convexo Bajo convexo

Superficie Lisa Lisa Lisa

Aspecto Húmedo Húmedo Seco

Bordes Lobulado Entero Entero

Luz reflejada Brillante Brillante Brillante

Luz transmitida Opaca Translúcida Opaca

Consistencia Suave, butirosa mucosa Suave, butirosa

Gram + - +

Forma bacilos bacilos cortos cocos

Agrupación Empalizada, Empalizada, Estafilococos,

diplobacilos diplobacilos tétradas
sarcinas

Esporas Si No No

Tabla 1.1 Tabla primera etapa del sistema de Cowan

Prueba Cepa No.

1 2 3
 Movilidad Ausente Presente Ausente

Aerobios Presente Presente Presente

Anaerobios Negativa Positiva Negativa

Catalasa Positiva Positiva Positiva

Oxidasa Negativa Positiva Negativa

Produccion de Acido Positiva Positiva Negativa

Oxidación/ Ausente Fermentación Ausente

Fermentación

Producción de indol Ausente Presente Ausente

Equipo 6

Tabla 2.1. Morfología colonial y microscópica de las bacterias.

Características Colonia 1 Colonia 2 Colonia 3

Tamaño (mm) 5 mm 5mm 5mm

Color Amarillo Blanca Amarilla

Forma Toruloide Rizada Irregular

Elevación Plana Plana Plana

Superficie Lisa Lisa Lisa

Aspecto Húmeda Húmeda Húmeda

Bordes Ondulado Crenado Ondulado

Luz reflejada Brillante Brillante Brillante

Luz transmitida Opaca Opaca Translúcida

Consistencia Butirosa Butirosa Butirosa

Gram Positiva Positiva Negativa

Forma Coco Bacilos Bacilos

Agrupación Tetrada Diplobacilos Diplobacilos

Esporas Ausentes Central Ausentes

Tabla 2.1. Primera etapa de del sistema de Cowan

Prueba Cepa No.

1 2 3

Movilidad Ausente Presente Presente

Aerobios Presente Presente Presente

Anaerobios Negativo Positivo Negativo

Catalasa Positivo Positivo Poistivo

Oxidasa Negativa Positiva Negativa

Produccion de Acido Positivo Positivo Negativo

Oxidación/ Ausente Fermentación Ausente

Fermentación

Producción de indol Ausente Presente Ausente

DISCUSIÓN.

Para identificar a las diversas bacterias se realizaron un considerable número de

pruebas, además de anotar sus características observando tanto la morfología
colonial como la de las bacterias. En la prueba de movilidad se determina si las
bacterias tienen movimiento, lo cual puede indicar, a su vez, si tiene presencia o
ausencia de flagelos. Ciertas especies de bacterias móviles mostrarán un crecimiento
difuso en todo el medio, mientras otras pueden mostrar difusión de uno o dos puntos
que aparecen como resultados nodulares junto a la inoculación (Mac Faddin, 2003).
En esta prueba también se determinó la producción de indol, lo cual sirve para
determinar la habilidad del organismo de romper el indol del aminoácido triptófano.
Esta división molecular es lograda por una serie de enzimas intracelulares diferentes,
un sistema que en conjunto se le llama con frecuencia triptofanasa (Martinko y Parker,
2003). En ambos equipos la prueba de movilidad- indol fue positiva en el cultivo 2, sin
embargo, el equipo 6 arrojó igualmente resultados positivos en el cultivo 3 , lo cual
debe tomarse en consideración, ya que esto pueden indicar que se trata de diferentes
tipos de bacterias. Otra diferencia que se observa en el caso de ambos equipos es la
morfología colonial y microscópica, sin embargo esto se puede deber a que solo se
observó una colonia por cultivo en cada equipo. En cuanto a las demás pruebas
realizadas se obtuvieron los mismos resultados en ambos equipos, cabe mencionar
que no se observó la placa en condiciones anóxicas debido a problemas con la
incubación por lo cual no se puede saber si hay otra diferencia significativa en dicha
prueba que se deba resaltar.
CONCLUSIONES
Para la taxonomía de un cultivo bacteriano se requiere de una caracterización
detallada.
Los criterios para la clasificación de las bacterias utilizado fue el de Cowan.
Las pruebas más utilizadas para la identificación de bacterias son la de movilidad y
el crecimiento en presencia de oxígeno y/o en anaerobio.

CUESTIONARIO.

1.- ¿Cómo se relaciona la fisiología de las bacterias con su diversidad?

● La fisiología está estrechamente ligada con la diversidad de microorganismos, es estos
organismos la fisiología y los cambios en la misma permiten su permanencia, adaptación y
evolución.
● La fisiología explica cómo los microorganismo se relacionan directamente con su entorno y
cómo pueden obtener energía, almacenarla y desarrollar sus funciones (subsistir). Por ello la
gran diversidad de bacterias que existen se debe a las modificaciones y adaptaciones que
sufre su fisiología, les permite ser cosmopolitas o dependientes de ambientes.
2.- ¿Cuáles son los fundamentos bioquímicos para las pruebas de catalasa-oxidasa y
oxidación/fermentación?
● La prueba de catalasa-oxidasa se basa en la reacción del citocromo; estos son proteínas
encargadas del transporte de energía química, donde las oxidasas generar peróxido de
hidrógeno al oxidar los citocromos y las catalasas hidrolizan los citocromos generando agua
y oxígeno gaseoso. Nos sirve para identificar a grupos aerobios (catalasa), y grupos que
generan citocromo c (oxidasas).
● La prueba de oxidación/fermentación se lleva a cabo al determinar la utilización de de los
hidratos de carbono por parte de un microorganismo, se realiza por vÌa oxidativa (proceso
aeróbico, presencia de oxígeno) o por vÌa fermentativa (proceso anaeróbico, ausencia de
oxígeno).

3.-Enlistar otras 5 pruebas bioquímicas útiles para la identificación de bacterias

● LAP: Enzima leucina aminopeptidasa (LAP) es una prueba para la identificación de cocos
grampositivos catalasa negativa; diferencia especÌficamente los géneros Aerococcus y
Leuconostoc de Streptococcus, Enterococcus, Lactococcus, y Pediococcus.
● Fermentación de azúcares: Se utiliza para la identificación de bacterias anaerobias y
anaerobias facultativas, estas fermentan carbohidratos y se pueden diferenciar al ver sus
desechos ya sea hidrógeno gaseoso o dióxido de carbono.
● Reducción de nitratos: Se fundamenta en la capacidad de algunas bacterias de reducir
nitratos en nitritos, es útil para la asignación de la familia Enterobacteriaceae.
● Utilización de citrato: Se basa en los organismos que utilizan compuestos derivados del citrato
como fuente de carbono y derivados del amoniaco como única fuente de nitrógeno, esto
provoca una alcalinización del medio y al generar un viraje en el cultivo podemos identificar
bacterias como Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Citrobacter y algunas especies de
Salmonella.
● Agar Hierro de Kligler: Nos ayuda a lo diferenciación de bacterias que metabolizan azúcares,
este procedimiento utiliza, hidratos de glucosa y lactosa así como un componente
denominado “Triple Sugar Iron” (ITS) que posee un tercer hidrato de carbono, la sacarosa. Al
 reaccionar en el medio uno, dos o inclusive los tres son consumidos y nos denota su vía
metabólica.

BIBLIOGRAFÍA

Mac Faddin J. F. 2003. Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de

importancia clínica. 3ª edición Médica Panamericana, S. A. De C. V. México Madigan,
M. T., J. M. Martinko y J. Parker. 2003. Brock. Biología de los microorganismos. 10ª Ed.
Prentice Hall Iberia. España.
Ramírez-Gama, R. M., B. Luna Millán, O. Velásquez Madrazo, L. Vierna García, A. Mejía
Chávez, G. Tsuzuki Reyes, L. Hernández Gómez, I. Müggenburg, A. Camacho Cruz y M
del C. Urzúa Hernández. 2006. Manual de Prácticas de Microbiología General. 5ª
edición. Facultad de Química, UNAM. México