RECUENTO DE Escherichia coli EN ALIMENTOS

Método de recuento en medio líquido NMP

1 mL 1 mL 1 mL

Agua de triptona
225 mL
9 mL 9 mL 9 mL
Suspensión Agua de triptona
Preparación de madre 1:1000 1:10000
la muestra: 1:100

Unidad analítica Dilución 1:10

de 25g 1mL en cada tubo 1mL en cada tubo 1mL en cada tubo

Caldo Lauril Sulfato Triptosa

10 mL en tubos de 150 x 15mm
ó
Caldo MacConkey
10 mL en tubos de 150 x 15mm

Incubar a 35-37°C
Hacer lecturas a las 24 si no hay presencia de gas incubar 24 horas más

A partir de los tubos

gas+

Caldo E. coli (E.C.)

10 mL en tubos de 150 x 15mm
ó
Caldo Lactosa Bilis
Producción de gas Si no hay producción
Verde Brillante (BRILA) dentro de las 24Hrs de gas reincubar
Sin gas a las 24Hrs
reincubar 24 Hrs más
10 mL en tubos de 150 x 15mm en cualquier tubo 24Hrs más

Prueba positiva Prueba dudosa Prueba negativa

Estriar

Incubar a 35-37°C x 24 Hrs

Agar Eosina
Azul de EMB In
Metileno cu
b ar
a
35
-3
7°
C
x
24
Colonias no típicas
H
rs de coliformes

Colonias típicas de
coliformes

Transferir

Caldo Triptona
Agar nutritivo
(Prueba de indol)

Cuando coincide: Crecimiento positivo (gas) en caldo BGBL ó caldo E.C. a 44.5°C,
producción de indol y colonias características en EMB, hacer la lectura en la Tabla del NMP
para obtener el número de Escherichia coli por gramo o mililitro de muestra