CROMATOGRAFÍA EN COLUMNAS EMPACADAS

CORDOBA SALGADO JUAN C

GÓMEZ HERNÁNDEZ RIKARDO E

GUERRA GARCÉS JUAN C

MARTÍNEZ MORA ÍNGRID D

NISPERUZA ACOSTA FARLEIDYS

PATERNINA RHENALS LISA M

SUÁREZ RAMOS KEYDER A

EDINELDO LANS CEBALLOS

Msc.

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA

MONTERÍA

2016
 INTRODUCCIÓN

La cromatografía con columna rellena es la menos madura de las técnicas de

separación. En este método, un solvente polar se transporta por flujo
electroosmótico a través de un capilar que contiene un relleno característico para la
HPLC en fase inversa. Las separaciones dependen de la distribución del analito
entre la fase móvil y la fase estacionaria líquida retenida por el relleno.
En el desarrollo de la práctica de laboratorio sobre cromatografía de columna se
quiere afianzar el conocimiento en cuanto a esta técnica de separación, debido a la
amplia utilización de esta cromatografía, tanto en su vertiente preparativa como en
la analítica, por otra parte, el desarrollo conjunto de la cromatografía con otras
técnicas analíticas, así como el desarrollo de otros tipos de cromatografía, como lo
es por ejemplo la de fluidos supercríticos, hace una extensión mayor a su uso.
 OBJETIVOS

 Analizar el proceso cromatográfico desarrollado en el laboratorio.

 Comprender la técnica de cromatografía en columnas empacadas, sus

características y los factores que intervienen en ella.
 MARCO TEÓRICO.

La cromatografía en columna es quizás el método más general, utilizado para la

separación y para la purificación de diferentes compuestos orgánicos que se
encuentren en estado sólido o líquido.

En este tipo de cromatografía, la fase estacionaria utilizada, es decir, el absorbente,

se coloca en el interior de una columna de vidrio, la cual finaliza con una llave para
controlar el paso de sustancias al exterior de la columna. La fase estacionaria se
impregna con el eluyente o fase móvil. Seguidamente la mezcla orgánica que nos
interesa separar la depositamos por la parte superior de la fase estacionaria, y así
la fase móvil podrá ir atravesando el sistema.

Los compuestos que se encuentran disueltos en la fase móvil, poco a poco saldrán
de la columna cromatografía, y se recogen en fracciones. Las fracciones menos
polares, que son por lo general las que se retienen poco o nada en el absorbente,
serán las primeras en salir de la columna. En cambio, las sustancias más polares,
quedan retenidas por más tiempo en el absorbente, y a menudo es necesario el uso
de diferentes disolventes con la finalidad de incrementar su polaridad para que sean
arrastradas por estos.
El tiempo que se necesita para hacer fluir un compuesto por la columna, se conoce
con el nombre de tiempo de retención. Este tiempo varía, siendo característico de
cada compuesto en unas condiciones cromatografías determinadas, que varían
según el absorbente usado, el disolvente, la presión, el diámetro que tenga la
columna utilizada, etc.
El absorbente mayormente utilizado para las cromatografías en columna, es el gel
de sílice. A veces, en sustitución del gel de sílice, cuando éste es incompatible con
la mezcla a cromatografiar, se utilizan la alúmina o el florisil (silicato magnésico).
PROCEDIMIENTO
 ANEXOS

1) Inicio de la práctica

2) Adición de la muestra
 3) Fase de descarte

4) Separación del KMnO4

5) Separación del K2Cr2O7

6) Proceso final
7) Separaciones finales
 CONCLUSIÒN

En esta práctica se realizó la separación por columna de una mezcla de dicromato

y permanganato obteniendo las fracciones (eluatos) colectados, cumpliendo todos
los objetivos propuestos al iniciar el procedimiento.

La cromatografía por columna se emplea para la separación de mezclas o

purificación de sustancias, reteniendo en su fase estacionaria (en este caso la
alúmina) a algunos compuestos por su propiedad de adsorción, por la que a través
de ella se hará pasar una corriente de disolventes o mezcla de disolventes (fase
móvil: eluyente) que arrastrará a los compuestos constituyentes de la mezcla,
haciéndoles avanzar a través de la columna. Este tipo de cromatografía se utiliza
para saber en qué recipientes se encuentra un componente buscado y para
determinar la cantidad de este cuantitativamente, contrario a la cromatografía por
capa fina donde solo se puede hacer un análisis cualitativo.

Es importante saber que no todos los compuestos avanzan a la misma velocidad,

algunos compuestos se ven fuertemente retenidos por la fase estacionaria debido
a la polaridad del compuesto por tanto fluirá más despacio a través de la columna y
otros que no son tan retenidos por tanto su flujo será mayor.
 BIBLIOGRAFÍA

 SKOOG, CROUCH, HOLLER, Principios de análisis instrumental, sexta

edición. Pág. 884.

 Daniel. Harris, Análisis Químico Cuantitativo 3 Edi. Editorial Reverte.