 ANÁLISIS INSTRUMENTAL

 Docente: MSc.William A. Sagástegui G.

 Material Lectura Nº 3

 Selección de un método Analíticos

 Evaluación estadística de datos experimentales 2

1 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 Terminología:

2 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 Terminología 2:

Ejm: Análisis de sulfas: Técnica por Espectrofotometría. Método

de Bratton and Marshal, Procedimiento, partes.

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 B. Selección de un método analítico

1) ¿Qué exactitud se requiere? Determina los errores (muestreo,

metodológicos, instrumentales, personales)
2) ¿De cuánta muestra se dispone?
3) ¿En qué intervalo de concentraciones está el analito?
4) ¿Qué componentes de la muestra interfieren en el análisis?
Determina la selectividad
5) ¿Cuáles son las propiedades físicas y químicas del analito?
Ej.: Un analito termolábil no puede ser determinado con una técnica que requiera calentamiento

}
6) ¿Cuál es el estado de agregación de la muestra?
Ej.: Hay técnicas que sólo sirven para muestras sólidas Determinan la sensibilidad
7) ¿Cuántas muestras hay que analizar? Determinará la velocidad de
análisis
8) ¿Que tipo de información se requiere? Cualitativa, cuantitativa y/o
estructural
9) ¿Puede ser destruída la muestra? Importante en seres vivos
4 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental
 Selección de un método analítico
La selección de un método analítico exige definir la naturaleza del
problema analítico; estableciendo:
 Exactitud y precisión requeridas,
 Muestra y número disponibles,
 Intervalo de concentración del analito,
 Componentes de la muestra interferentes en el análisis, y
 Componentes probables y límites porcentuales; y propiedades
de la matriz.

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 Selección del método analítico 2:
 Los parámetros de calidad son las características numéricas del
instrumento y permiten al químico reducir el nivel de elección del
método.
 El investigador o analista debe comprender las condiciones acerca
del método de medición, diseño y los componentes
instrumentales, para poder:
a. Seleccionar el instrumento adecuado para la medición
b. Usar efectiva y eficientemente el instrumento seleccionado.
 La selección deficiente de un principio físico en el diseño, o
de un componente, limitará la seguridad, sensibilidad y
utilidad de un instrumento.

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 Control de variables:

 Factores que influyen en las mediciones:

a. Sobre la propiedad que va observarse o su medición
b. Sobre el funcionamiento seguro del instrumento
- Se debe considerar entonces:
 Condiciones bajo las cuales se harán las determinaciones
 Variables con influencia conocida sobre las mediciones
 Variables que deben ser reguladas y las no reguladas
 Así todas las variables que afectan el valor de las propiedades
físicas o su observación, deben ser reguladas o señalárseles en
alguna forma un margen durante la medición. Ejm:
Temperatura, presión atmosférica, hondas sonoras, emanaciones
radiactivas, campos eléctricos o magnéticos.

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 Otros factores que influyen en las mediciones y
su control:
a. Uso de las curvas de calibración: puede compensar multitud
de factores cuyos efectos no pueden calcularse con facilidad o
regularse convenientemente.
b. Uso de un testigo: puede asumirse que la mayoría de las
influencias perturbadoras afectan igualmente al testigo y a la
muestra. Ejm:
 En fotometría de absorción al visible se utiliza una solución
“Blanco”, con la finalidad de conocer la absorción propia
del material de interés solamente.

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 CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO DE LOS
INSTRUMENTOS, PARÁMETROS DE CALIDAD:
 Estas características se expresan en términos numéricos que
se denominan parámetros de calidad.
Criterio Parámetro de calidad
1. Precisión Desviación estándar absoluta, Desviación
estándar relativa, coeficiente de variación,
varianza
2. Sesgo Error absoluto sistemático, error relativo
sistemático.
3. Sensibilidad Sensibilidad de calibración, sensibilidad analítica

4. Límite de detección Blanco más tres veces la desviación estándar del

blanco
5. Intervalo de Concentración entre el límite de cuantificación
concentración (LOQ) y el límite de linealidad (LOL)

6. Selectividad Coeficiente de selectividad

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 Otras características a tener en cuenta en la
elección del método:
 Para un problema analítico dado, los parámetros de calidad
permiten al químico reducir la elección de los instrumentos a
tan sólo unos pocos. La selección entre estos puede entonces
basarse en los criterios cualitativos de funcionamiento
señalados a continuación:
1. Velocidad
2. Facilidad y comodidad
3. Habilidad del operador
4. Coste y disponibilidad del equipo
5. Coste por muestra.

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 1. Precisión:
 Describe el grado de reproducibilidad de los resultados, es
decir la concordancia entre los valores numéricos de dos o
más mediciones repetidas, o que se han realizado
exactamente en la misma forma.
 En general la precisión de un método analítico se obtiene con
facilidad simplemente repitiendo la medición.
 Para describir la precisión de un conjunto de datos se usan
principalmente tres parámetros: desviación estándar absoluta
s, desviación estándar relativa RSD, varianza y coeficiente de
variación.

11 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 Precisión:

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 2. Exactitud:
 Describe la veracidad de un resultado experimental.
 Estrictamente hablando, el único tipo de medición totalmente
exacta es el contar objetos.
 Todas las demás mediciones contienen errores y dan solo una
aproximación a la realidad.
 La exactitud es un término relativo ya que el hecho de que un
método sea o no exacto depende en gran medida de las
necesidades del científico y de la dificultad del problema analítico.
Ejm: Un método analítico se considera razonablemente exacto si
sus resultados están dentro del ± 10 % o de una parte por billón,
de la cantidad real de Hg en una muestra de pescado que contiene
10 partes por billón del metal.
13 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental
 … exactitud:
 La exactitud se expresa en términos de error absoluto o de
error relativo.
 El error absoluto Ea de la media o promedio M de un
pequeño conjunto de análisis repetitivo viene dado por la
relación:
 Ea = M – Xt 1
 En la Xt es el valor aceptado de la cantidad que se mide.

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 SESGO

 El sesgo mide el error sistemático, o determinado, de un

método analítico. El sesgo se define por la ecuación:
 Exactitud = µ - Xt 2
 Donde µ es la media de la población para la concentración
de un analito de una muestra cuya concentración verdadera
es Xt
 Para determinar la exactitud hay que analizar uno o varios
materiales estándar de referencia cuyas concentraciones de
analito se conozcan.

15 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 …Sesgo
 Sin embargo, los resultados de dichos análisis contendrán
tanto errores aleatorios como errores sistemáticos, a
menos que se realicen suficientes análisis para que el error
aleatorio se reduzca a un valor próximo a cero.
 La media de 20 o 30 análisis repetidos puede suponerse
normalmente, que está libre de errores aleatorios y en
consecuencia, ser una buena estimación de la media de la
población µ en la ecuación 2. Cualquier diferencia entre esta
media y la concentración conocida de analito del material
estándar de referencia puede atribuirse a un error. Si no es
posible repetir 20 análisis de un estándar, la probable
presencia o ausencia de error, aún puede evaluarse.
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 Exactitud, precisión, sesgo

17 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 …sesgo
 En general, al desarrollar un método analítico,
todos los esfuerzos se dirigen hacia la
identificación de la fuente de error y a su
eliminación o corrección mediante el uso de
blancos y la calibración del instrumento.

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 3.SENSIBILIDAD

 La sensibilidad de un instrumento o de un método mide su

capacidad de discriminar entre pequeñas diferencias en la
concentración del analito.
 Dos factores limitan la sensibilidad:
- La pendiente de la curva de calibración y
- la reproducibilidad o precisión del sistema de medida.
Para dos métodos que tengan igual precisión, el que tenga
mayor pendiente de la curva de calibración será el más sensible.
Un corolario a esta afirmación es que si dos métodos tienen
curvas de calibración con igual pendiente, el más sensible será
aquel que presente la mejor precisión.

19 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 … Sensibilidad
 Sensibilidad de calibración
Seqún la IUPAC, se define como la pendiente de la curva de
calibración a la concentración de interés.
La sensibilidad de calibración como parámetro de calidad
tiene el inconveniente de no tener en cuenta uno de los
factores que determinan la sensibilidad, esto es, la precisión.
 Sensibilidad analítica
= m/Ss
Donde, m es la pendiente de la curva de calibración y
Ss es la desviación estándar de la señal correspondiente a la
concentración de interés del analito.
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 4. LIMITE DE DETECCIÓN

 Es la concentración o el peso mínimo de analito que pueden

detectarse para un nivel de confianza dado.
 Este limite depende de la relación entre la magnitud de la
señal analítica y el valor de las fluctuaciones estadísticas de la
señal del blanco.
 Esto es, a menos que la señal analítica sea mayor que la del
blanco en un múltiplo k de las variaciones del blanco debidas
a errores aleatorios, no será posible detectar con certeza la
señal analítica. Así, cuando nos aproximamos al limite de
detección, la señal analítica se aproxima a la señal media del
blanco Sbl.

21 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 5. INTERVALO DE CONCENTRACIÓN:

 El intervalo útil de un método analítico, va desde la

concentración más pequeña con la que puede realizarse
medidas cuantitativas (limite de cuantificación, LOQ) hasta
la concentración a la que la curva de calibrado se desvía de la
linealidad (límite de linealidad, LOL).
 Como limite inferior de las medidas cuantitativas se toma, en
general, a aquel que es igual a diez veces la desviación
estándar cuando la concentración del analito es cero (10 Sbl).

22 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 Intervalo útil de un método analítico

Definición: Intervalo de concentraciones que va desde la

concentración más pequeña que se puede determinar (CLQ) hasta
la concentración a la que la curva de calibrado se desvía de la
linealidad (CLL)

Señal

Intervalo útil

CLD CLQ CLL

23 MSc. W. Sagástegui G. [Analito] Análisis Instrumental
 6. SELECTIVIDAD

 La selectividad de un método analítico denota el grado de

ausencia de interferencias debidas a otras especies contenidas
en la matriz de la muestra.
 Ningún método analítico está totalmente inafectado por otras
especies y con frecuencia, diversas etapas se deben realizar
para minimizar los efectos de estas interferencias.

24 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 CALIBRACIÓN DE LOS MÉTODOS INSTRUMENTALES

 Todos los métodos instrumentales, excepto dos, requieren

una calibración, proceso que relaciona la señal analítica
medida con la concentración del analito.
 Los tres métodos más frecuentemente utilizados para la
calibración son:
1. La realización y el uso de una curva de calibrado,
2. El método de la adición estándar y
3. el método del patrón interno.

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 CURVAS DE CALIBRADO

 Para realizar el método de la curva de calibrado se

introducen en el instrumento varios patrones que contienen
concentraciones exactamente conocidas del analito y se
registra la señal instrumental. Normalmente esta señal se
corrige con la correspondiente señal obtenida con el blanco.
En condiciones ideales el blanco contiene todos los
componentes de la muestra original excepto el analito.
 Los datos obtenidos se representan para obtener una gráfica
de la señal corregida del instrumento frente a la
concentración de analito.

26 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 Preparación de los estándares

27 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 Curva de calibración

28 MSc. W. Sagástegui G. Análisis Instrumental

 Criterios numéricos para selección del método
analítico: Resumen

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