Universidad del Atlántico, programa de Ingeniería Química.
Barranquilla, Colombia.
Mayo 10 de 2018
nm) dependiendo el tipo de indicador
utilizado. RESUMEN Este laboratorio tuvo como objetivo separar Los compuestos ascienden por la capa de los componentes de una mezcla, cuyos absorbente a diferentes velocidades con componentes fueron azul de etileno y relación al eluyente, realizándose de esta diclorofluoresceina, por medio de la forma la separación de los compuestos de la cromatografía en capa delgada (CCD). mezcla. A veces es posible identificar los componentes midiendo la velocidad relativa de cada uno con relación a aquella del frente del solvente. Esta movilidad relativa se 1. INTRODUCCION conoce como el valor del Rf del compuesto y La cromatografía de capa delgada (CCD) es se define por: uno de los métodos más ampliamente El valor de Rf es una constante de cada utilizados para separar, identificar y, en compuesto bajo un conjunto de condiciones algunos casos hacer el seguimiento de una definidas (eluyente, fase estacionaria, reacción química. En principio del CCD es temperatura, espesor del absorbente y sencilla. se produce una capa uniforme de humedad). Los valores de Rf se encuentran absorbente sólido adecuado (fase en el rango de 0 a 0.999%. La distancia se estacionaria) sostenida sobre una placa de mide al centro de la mancha. aluminio o vidrio. Se coloca con un capilar en el origen de la placa una mancha de solución La cromatografía de columna (CC) es otro de de compuesto orgánico o mezcla en estudio, los métodos más efectivos utilizados para la se deja que un solvente adecuado (eluyente separación de compuestos, especialmente o fase móvil) ascienda por la capa del cuando otros métodos de separación más absorbente por capilaridad. El compuesto o comunes han resultado poco efectivos. En compuestos separados se localizan en la esta técnica cromatográfica las mezclas se placa directamente en el caso de resuelven pasando una fase líquida móvil compuestos coloreados, con la ayuda de un (eluyente) a través de la fase estacionaria indicador, o con luz ultravioleta cuando la sólida empacada en una columna de vidrio. fase estacionaria tiene el indicador En la CC clásica el sistema más empleado ultravioleta (químicamente inerte) el cual es el de adsorción; como las fuerzas de produce fluorescencia al irradiarse con luz atracción son diferentes para los distintos UV de onda corta (254 nm) u onda larga (366 compuestos, estos fluyen de arriba hacia abajo con velocidades diferentes, los menos subiera por la placa de sílice, así mismo se atraídos fluyen primero. observó la separación de la mezcla. Finalmente, la placa se sometió a luz UV. Se obtuvo una pigmentación amarilla que 2. RESULTADOS poseía luteína, que es un compuesto químico que contienen muchas plantas en En esta práctica se empleó la técnica de sus hojas, la luteína tiene propiedades cromatografía en capa delgada para antioxidantes y reducen la sensibilidad de la comprobar la utilidad que tiene dicha técnica piel frente a los rayos UV. Por otra parte se para separar compuestos, determinar obtuvo un color verde en la placa, se puede concentraciones, polaridad de los eluyentes, decir que es clorofila b, el cual es un criterios de pureza de las muestras e pigmento accesorio presente en los identificaciones de sustancias. vegetales y células fotosintéticas complejas. Para llevar a cabo esta técnica, es necesario conocer los eluyentes como azul de etileno y diclorofluoresceina y reveladores, como una 4. CUESTIONARIO lámpara de luz ultravioleta. Finalmente se obtuvo la separación de la 1) ¿Cuáles son algunos criterios que deben mezcla, llevada a cabo por medio de esta tenerse en cuenta en la elección de técnica. La manchas de la mezcla fueron de absorbente en una separación color amarillo y verde. cromatográfica determinada? R: Debe ser insoluble en el disolvente que se va a utilizar para la separación y no debe 3. ANÁLISIS DE RESULTADO. reaccionar con las sustancias que van a separarse ni debe actuar como catalizador Por definición, la cromatografía en capa de sus descomposición, transposición o delgada es una técnica meramente analítica, isomerización, ha de tener un compuesto ideal para la identificación, separación de uniforme prescindiendo de su origen y debe compuestos y determinación de su ser incoloro cuando sean de localizar impureza. visualmente las unas correspondientes a La cromatografía que se realizo fue en capa compuestos coloreados. delgada. 2) ¿En qué consiste la cromatografía de Primeramente, se realizó una línea de 1mm CCD preparativa? en la placa de sílice, luego se calentó un R: La cromatografía de CCD preparativa se capilar de manera que quedara con una lleva a cabo en placas de gel de sílice de 1- 2 mm de espesor sobre un soporte de vidrio. punta fina, para luego marcar la placa con la Se utiliza para la separación y aislamiento de mezcla en la mitad de la línea dibujada, los componentes de una mezcla en después se introdujo la placa de forma cantidades comprendidas entre 100-200 mg. diagonal en un beaker, quedando así en la En la superficie del absorbente (gel de parte inferior la línea con la mezcla. Luego se sílice). Mediante una pipeta Pasteur, se traza añadió una pequeña cantidad de alcohol, una línea continua con la muestra disuelta y fijándose de que estuviera por debajo de la se introduce la placa en posición vertical en línea dibujada. Se esperó a que el alcohol una cubeta. Durante la elución debe permanecer tapada para evitar la evaporación del disolvente. Una vez se han separado los componentes de la mezcla, se marca con una cuchilla el contorno del compuesto a aislar y con ayuda de una espátula se desprende del soporte de vidrio el gel de sílice con el compuesto absorbido. Una vez transferido a un Erlenmeyer, se añade un disolvente en el cual sea soluble el producto, se filtra el gel de sílice y una vez eliminado el disolvente tenemos producto nuevo.
3) Usted tiene un compuesto impuro y
quisiera saber cuántas sustancias están Fig 1. Cromatografía en capa delgada. contaminando su compuesto. Explique cómo lo haría utilizando cromatografía de capa delgada o de papel. R: Al realizar el procedimiento respectivo 6. REFERENCIAS para una cromatografía de capa delgada, la cual separa compuestos orgánicos de una Tomado de: muestra sirve para determinar si el http://brauedro106a.blogspot.com.co/2 compuesto orgánico esta impuro y que 010/08/cromatografia.html sustancias lo están contaminando. Por Consultado: 09/05/18 consiguiente, en la placa se mostraron Tomado de: puntos o manchas al ser absorbida o https://es.slideshare.net/silvyvargas/ atraídas con mayor fuerza por la capa 2011-135-manual-cromatografia estacionaria, por ende, entre menos Consultado: 09/05/18 manchas haya en el extendido, menos impura será, esas machas corresponderán a las sustancias que contaminan.
5. CONCLUSIÓN A partir de esta práctica se concluyó que