PRUEBAS GENERALES PARA CARBOHIDRATOS

Diana Carolina Camayo Calambás, Nelly Yamile Chazatar Delgado

RESUMEN
Los carbohidratos o sacáridos son las biomoléculas más abundantes en la tierra y son de gran
importancia debido a que son fuente de energía. Los carbohidratos pueden ser aldehídos o
cetonas con múltiples grupos hidroxilo que se construyen a partir de monosacáridos,
pequeñas moléculas que contienen de tres a nueve átomos de carbono, los cuales varían en
tamaño y en la configuración estereoquímica de uno o más centros asimétricos [1].En esta
práctica por medio de seis pruebas cualitativas o reacciones características se pudo
reconocer la presencia o ausencia de carbohidratos en ocho sacáridos diferentes, una
muestra problema (Jugo de mango) y un blanco de los cuales se pudo determinar si estos
eran o no carbohidratos, cetosas, aldosas, hexosas, pentosas, azúcares reductores,
monosacáridos, disacáridos o polisacáridos según el cambio de color en las reacciones.

OBSERVACIONES, CÁLCULOS Y RESULTADOS

1. Prueba de Molish

Fig 1. Prueba de Molish para carbohidratos

(der – izq: Almidón ,Maltosa ,Ribosa ,Glucosa ,Galactosa ,Sacarosa Lactosa, Fructosa,
Jugo, Blanco)

Tabla 1. Resultados y observaciones al realizar la prueba de molish con cada uno de

los carbohidratos y un blanco.
Carbohidrato Observaciones Resultado para
carbohidrato
Almidón color violeta o morado en la interface Positiva
entre el ácido y la solución acuosa

Maltosa color violeta o morado en la interface Positiva

entre el ácido y la solución acuosa

Ribosa color violeta o morado en la interface Positiva

entre el ácido y la solución acuosa

Glucosa color violeta o morado en la interface Positiva

entre el ácido y la solución acuosa

Galactosa color violeta o morado en la interface Positiva

entre el ácido y la solución acuosa

Sacarosa color violeta o morado en la interface Positiva

entre el ácido y la solución acuosa

Lactosa color violeta o morado en la interface Positiva

entre el ácido y la solución acuosa

Fructosa color violeta o morado en la interface Positiva

entre el ácido y la solución acuosa

Jugo de color violeta o morado en la interface Positiva

mango entre el ácido y la solución acuosa

blanco color blanco Negativa

2. Prueba de Seliwanoff

Fig 2. Prueba de Seliwanoff para carbohidratos

(izq – der: Almidón, Maltosa, ribosa, glucosa, Galactosa, sacarosa ,lactosa, fructosa, jugo,
blanco)
Tabla 2. Resultados y observaciones al realizar la prueba de Seliwanoff con cada uno
de los carbohidratos y un blanco.

Carbohidrato Observaciones Resultado

Almidón Color rojo tenue o suave Aldohexosa

Maltosa Color rojo tenue o suave Aldohexosa

Ribosa Color entre verde y amarillo Positiva para Aldo pentosa

Glucosa Color rojo tenue o suave Aldohexosa

Galactosa Color rojo tenue o suave Aldohexosa

Sacarosa Color rojo intenso Positiva para cetohexosa

Lactosa Color rojo tenue o suave Aldohexosa

Fructosa Color rojo intenso Positivo para cetohexosa

Jugo de mango Color rojo intenso Positivo para cetohexosa

blanco Transparente Negativo para cetosa o

aldosa

3. Prueba de Bial

Fig. 4, 5, 6. Prueba de Bial para cada uno de los carbohidratos y un blanco

(izq - der: 1 almidón, 2 sacarosa, 3 glucosa, 4 galactosa, 5 ribosa, 6 fructosa, 7 muestra
problema, 8 lactosa, 9 maltosa, 10 blanco)
Fuente: Grupo 3

Tabla 3. Resultados y observaciones al realizar la prueba de Bial con cada uno de los
carbohidratos y un blanco
Carbohidrato Observaciones Resultado para hexosa y
 pentosa

Almidón color amarillo positiva para hexosa

Maltosa color amarillo positiva para hexosa

Ribosa color verde oliva positiva para pentosa

Glucosa color amarilla positiva para hexosa

Galactosa color amarilla positiva para hexosa

Sacarosa color verde oliva positivo para pentosa

Lactosa color amarilla positiva para hexosa

Fructosa color verde oliva positiva para pentosa

Jugo de mango color verde oliva positivo para pentosa

Blanco color amarillo positiva para hexosa

4. Prueba para azúcares reductores o reacción de Benedict

Fig. 7, 8. Prueba de Benedict para carbohidratos

(izq - der: maltosa, fructosa, ribosa, galactosa, lactosa, sacarosa, almidón, glucosa, jugo de
mango, blanco)

Tabla 4. Resultados y observaciones al realizar la prueba de Benedict con cada uno de

los carbohidratos y un blanco

Carbohidrato Observaciones Resultado para azúcar reductor

Almidón color verde azulado Negativo

Maltosa color anaranjado Positivo

Ribosa color anaranjado Positivo

Glucosa color anaranjado Positivo

Galactosa color anaranjado rojizo Positivo

Sacarosa color azul Negativo

Lactosa color rojo anaranjado Positivo

Fructosa color anaranjado Positivo

Jugo de mango color amarillo oscuro Positivo

blanco color azul Negativo

5. Prueba de yodo para polisacáridos

Fig. 9. Prueba de yodo para carbohidratos

(izq - der: almidón, glucosa, jugo de mango)

Tabla 5. Resultados y observaciones al realizar la prueba de yodo con tres

carbohidratos.

Carbohidrato Observaciones Resultado para polisacárido

Almidón color azul Positivo

Glucosa color amarillo suave Negativo

Jugo de mango color amarillo fuerte Negativo

6. Prueba de Barfoed
 Fig 10. Prueba de Barfoed en cada uno de los carbohidratos
(der - izq: glucosa, ribosa, jugo, fructosa, galactosa almidón, lactosa, sacarosa, blanco,
maltosa)
Fuente: Grupo 4

Tabla 6. Resultados y observaciones al realizar la prueba de Barfoed con cada uno de

los carbohidratos y un blanco.

Carbohidrato Observaciones Resultado para

monosacárido

Almidón Color azul Negativo

Maltosa Color azul Negativo

Ribosa Precipitado rojo Positivo

Glucosa Precipitado rojo Positivo

Galactosa Precipitado rojo Positivo

Sacarosa Color azul Negativo

Lactosa Color azul Negativo

Fructosa Precipitado rojo Positivo

Jugo de mango Precipitado rojo Positivo

blanco Color azul Negativo

ANÁLISIS DE RESULTADOS

Prueba de Molish: La reacción entre un carbohidrato con H2SO4 deshidrata el glúcido hasta
convertirlo en furfural o derivado de este, que al reaccionar con α-Naftol forma un color violeta,
positivo para carbohidratos[2].A partir de lo anterior se puede decir que él todas las muestras
analizadas son carbohidratos a diferencia del blanco puesto que al observar en la fig. 1 en la
interface entre el ácido y la solución acuosa de estos se formó un color violeta, mientras que
para el blanco no se presentó un cambio de color al no ser un carbohidrato.
Prueba de seliwanoff: En presencia de ácidos minerales y en un medio cálido las aldosas y
las cetosas sufren procesos de hidrólisis, lo cual forma un furfural o hidroximetilfurfural y según
sea pentosa o hexosa da una coloración roja, aunque las cetosas se deshidratan más rápido
que las aldosas por lo que las cetosas viran primero que las aldosas[2].Por tanto el almidón
(varias glucosas), la maltosa (dos glucosas), glucosa, galactosa y lactosa (galactosa +
glucosa) como puede notarse en la fig. 2 son positivo para aldohexosas por su color rojo tenue
mientras que la sacarosa, fructosa y el jugo al presentar un color rojo intenso son positivo
para cetohexosa. Por otro lado, la ribosa viró a amarillo lo cual es positivo para Aldo pentosa
y el blanco (agua) no cambió su color al no ser un carbohidrato.
Prueba de Bial: Esta prueba detecta las pentosas. El reactivo de Bial deshidrata las pentosas
formando furfural (derivados de las pentosas). Estos derivados de las pentosas además
reaccionan con orcinol y los iones de hierro presentes en el test reactivo, generan productos
de color verde olivo o azulado [3]. Se obtuvo en esta prueba positivo para pentosa la muestra
de ribosa, sacarosa y fructosa determinándose mal viraje en estas dos últimas ya que no
tienen 5 carbonos mientras que se obtuvo una coloración amarilla para almidón, glucosa,
galactosa, lactosa maltosa y blanco positivo para hexosa.
Prueba de Benedict: Esta prueba se usa para detectar la presencia de azúcares reductores
ya que contiene cobre que se reduce en presencia de azúcares reductores. Durante esta
reacción el azúcar se oxida, porque la oxidación del azúcar sucede simultáneamente con la
reacción de reducción del cobre [4]. en esta prueba la glucosa, ribosa, fructosa, galactosa,
lactosa, maltosa y muestra problema dieron positivo para azúcares reductores mientras que,
para la sacarosa, almidón y blanco, los resultados fueron negativos. En el caso de la sacarosa
pudo deberse este resultado ya que es un disacárido, el cual no posee carbonos anoméricos
libres por lo cual carece de poder reductor.
Prueba de yodo para polisacáridos: En esta prueba el yodo es atrapado por los polisacáridos
y dependiendo de la estructura de éstos da una coloración característica; si el polisacárido es
lineal la coloración será azul, pero si es ramificada la coloración es rojiza [5]. Para el almidón
el yodo se introdujo en las espiras de la molécula del almidona, tomando un color azul, debido
a una adsorción del I3 sobre las unidades de glucosa de la amilosa.
Prueba de Barfoed: Este reactivo distingue entre monosacáridos y disacáridos, siendo más
rápida la reacción en los monosacáridos ya que se hidrolizan primero reduciendo el ion
cúprico a óxido cuproso (precipitado rojo) [2]. Todos los carbohidratos analizados a excepción
del almidón (polisacárido), maltosa, sacarosa, lactosa (disacáridos) y blanco (agua)
presentaron un precipitado rojo como se ve en la fig. 10, indica positivo para monosacáridos.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Escribir todas las reacciones químicas que se presenten durante la práctica

1.Prueba de Molish: Esta prueba determina la presencia de carbohidratos en un muestra
hidrolizando el glúcido(monosacárido, disacárido o polisacárido) con ácido sulfúrico
concentrado hasta llegar a monosacárido y convertirse en derivado del furfural el cual al
reaccionar con α-Naftol produce un complejo de color morado o violeta en la interface [5].
 Fig 11. Reacción reactivo de Molish
Fuente: Experimentos de química en micro escala para nivel medio superior
María de Carmen Doria Serrano

2.Prueba de Seliwanoff Por medio de esta prueba se puede determinar cetohexosas (cetosas
hexosas) deshidratando o hidrolizando las cetohexosas hasta formar 5-hidroximetilfurfural el
cual reacciona con el resorcinol presente en el reactivo de Seliwanoff [3]

.
Fig. 12. Reacción con reactivo de Seliwanoff
Fuente: [2]

3. Prueba de Bial El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico el cual forma
complejos de coloración sólo con las pentosas. Esta prueba se basa en la formación de
furfural, al hacer reaccionar pentosas con HCl y posteriormente con orcinol. El furfural es un
aldehído electrofílico, en presencia de ácido, adiciona fenoles (con pérdida de agua)
produciendo sustancias altamente coloreadas, las pentosas originan una coloración azul-
verde o verde oliva y las hexosas originan un color amarillo oscuro [4]
 Fig 13. Reacción con reactivo de Bial
Fuente: [3]

4.Prueba para azúcares reductores o reacción de Benedict El ensayo de Benedict permite el

reconocimiento de carbohidratos reductores, al igual que el reactivo de Felhing, el de Benedict
contiene ion cúprico en medio alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en presencia de
azúcares con el hidroxilo hemiacetálico libre [5]. El color verde, amarillo, naranja y rojo indican
resultado positivo para azúcares reductores.

Fig. 14. Reacción prueba de Benedict

Fuente: [3]

5.Prueba de yodo para polisacáridos: La interacción del yodo o yodo potásico con el almidón forma
coloraciones azules oscuras, debido a la ocupación de los espacios libres del glúcido, este es un
glúcido alterado, al cual, sus propiedades físicas son modificadas, como la no absorción lumínica. Una
coloración azul o roja oscura es positivo para almidón. [6]

Fig 15. Vista esquemática de una hélice de amilosa, con iones I3− embebidos
Fuente: [12]

6.Prueba de Barfoed Esta prueba detecta monosacáridos reductores los cuales son oxidados
por el ion cobre formando un ácido carboxílico y un precipitado de color rojo (óxido cuproso).
Los disacáridos también responden a esta prueba pero de forma más lenta [3].

Fig 16. Reacción reactivo de Barfoed

Fuente: [3]
2. ¿Porque la fructosa da una prueba positiva con el reactivo de benedict el cual es específico
para azúcares reductores?
la fructosa es un monosacárido, su grupo carbonilo es una cetona. Al estar menos expuesto
esto no posibilita su reacción, sin embargo, gracias al medio básico en el que se encontraba,
se da la enolización de su estructura a glucosa y manosa, lo que hace posible que reaccione
con el cobre del reactivo y resulte positiva la reacción [7].

3. ¿Por qué se dice que la maltosa y la lactosa tienen un grupo aldehído potencial?

La maltosa y lactosa son disacáridos reductores los cuales mantienen su grupo carbonilo
aldehído intacto o carbono anomérico libre, por el cual pueden participar como reductores con
otras moléculas o monómeros a los que pueden unirse. La maltosa y sacarosa tienen el grupo
hidroxilo de sus carbonos anoméricos libre por lo que por medio de este se unen a otros
monosacáridos, sin embargo, a medida que estos aumentan su capacidad reductora
disminuye. La sacarosa también es un disacárido pero no es reductor ya que sus dos
monómeros se encuentran unidos a través de sus carbonos anoméricos [8].

.4. ¿Por qué el glucógeno y el almidón dan resultados negativos como azúcares reductores?
El glucógeno y almidón son polisacáridos que al no poseer grupos carbonilos libres ya que
intervienen los carbonos anoméricos en el enlace entre los monosacáridos integrantes,
carecen de poder reductor dando pruebas negativas como azúcares reductores [9].

5.Explique por qué en la prueba de Barfoed los disacáridos reaccionan más lentamente que
los monosacáridos?
En la prueba de Barfoed los disacáridos reaccionan más lentamente con el acetato cúprico lo
cual puede deberse al tamaño molecular, sin embargo esto puede deberse también a otros
factores tales como a la interacción compleja que existe en los dos anillos monosacáridos,
por tanto la velocidad de la reacción está limitada al tamaño de la molécula, siendo más rápida
la reacción de los monosacáridos que la de los disacáridos [10].

6. ¿Que se deduce de la solubilidad del ácido glucosacárido?

La oxidación de los monosacáridos puede producirse de diversas formas, según el agente
oxidante utilizado. Los ácidos aldónicos libres, como el ácido glucónico, están en equilibrio
con las lactonas en disolución.
La oxidación de los monosacáridos catalizada por enzimas da lugar a diversos productos
específicos, entre ellos las lactonas y los ácidos urónicos como el ácido glucurónico que es
altamente hidrosoluble, en el que la oxidación se ha producido en el carbono seis [11].

CONCLUSIONES

● La muestra problema de jugo analizada en el laboratorio es un carbohidrato,

cetohexosa, monosacárido y azúcar reductor según los resultados de las pruebas
practicadas. Al tratarse de un jugo de origen frutal (mango) se podría decir que estamos
hablando de la fructosa.
 ● Se logró clasificar por medio de las pruebas de Molish, yodo y Barfoed los nueve
carbohidratos de la práctica según la cantidad de monómeros presentes en cada uno,
siendo así monosacáridos (ribosa, glucosa, galactosa y fructosa), disacáridos (maltosa,
lactosa y sacarosa) y polisacáridos (almidón).

● Se identificó mediante la Prueba de Yodo la presencia de almidón (polisacáridos). En

el agua, no se produce una reacción con el yodo, esto debido a que el agua no es un
azúcar, mientras que con el almidón se presentó un resultado positivo debido a que
el yodo reacciona con las dos estructuras que forman el almidón

● Gracias a la reacción de Benedict hemos podido comprobar algunos azúcares

reductores (ribosa, glucosa, galactosa, fructosa, maltosa, lactosa y jugo de mango) ya
que en estas muestras se produjo la formación del precipitado de color verde rojo
anaranjado o amarillo , lo que se evidenció en los resultados

BIBLIOGRAFÍA

[1] Stryer, Lubert (1990). Bioquímica (3° edición). Barcelona: Revertė S.A. p.

[2] Vieda, Rafael. Santacruz, María del Pilar (2014).Reconocimiento de carbohidratos.

Universidad distrital Francisco José de Caldas. Bogotá D.C., Colombia.

[3] Cristancho, Leidy. Monroy, Ricardo (2014). Manual de métodos generales para
determinación de carbohidratos. UTPC.

[4] Laboratorio 4.Moléculas esenciales para la vida. Carbohidratos. Tomado de

http://academic.uprm.edu/~jvelezg/labmoleculas.pdf

[5] Laboratorio de química orgánica. Reconocimiento y diferenciación de carbohidratos.

Universidad de Bogotá Jorge Tadeo Lozano. Bogotá D.C., Colombia.

[6] laboratorio de bioquímica. Identificación de carbohidratos. Universidad Mariana. Pasto,

Colombia

[7]Laboratorio de Química de alimentos. Identificación de azucares reductores y no

reductores. Universidad de Antioquia. Medellín-Colombia

[8]McKee, T. (2009). Bioquímica. (4a. ed.) McGraw-Hill Interamericana. Tomado de

http://www.ebooks7-24.com.acceso.unicauca.edu.co

[9]Laboratorio de bioquímica. Identificación de azúcares reductores y no reductores.

Universidad del Quindío. Armenia-Colombia
[10]Cañola, Alison (2014). Año de la promoción de la industria responsable y del compromiso
climático. Reconocimiento de carbohidratos. Universidad Nacional de Piura. Perú.

[11]Mathews, C. K.; Van Holde, K. E.; Ahern, K. G. Bioquímica. PEARSON EDUCACIÓN, S.

A., Madrid, 2002. Pág. 325-326.

[12] Laboratorio de química II. Ensayos para la identificación de azúcares, prueba de yodo.
Universidad Nacional de San Juan.2018.