Sunteți pe pagina 1din 8

DERTERMINAREA GRUPELOR SANGUINE

Determinarea grupelor sanguine se face prin 2 metode :


1. Metoda directă – Beth -Vincent
2. Metoda inversă – Simonin
METODA DIRECTĂ BETH-VINCENT - pentru determinarea
agutinogenului
A. FOLOSIND SERURI HEMOTEST : 0I, AII, BIII
Recoltarea sângelui;
- Se foloseşte fie sânge venos, fie sânge capilar;
- Se recoltează 3-4 ml de sânge din venă, într-o eprubetă perfect uscată şi
sterilizată prin căldură uscată;
- Se va separa serul şi cheagul;
- Se poate recolta şi pe substanţă anticoagulantă (citrat de Na sau heparină);
- Dupa centrifugare rezultă plasmă şi masă eritrocitară;
- Hematiile se utilizeaza pentru determinarea aglutinogenului prin metoda
Beth- Vincent
- Recoltarea sangelui capilar – este o metodă mai expeditivă
- Determinarea aglutinogenului = metoda Beth – Vincent- se face prin
amestecarea eritrocitelor primitorului cu serul standard 0, A,B (aglutinine
cunoscute)
MATERIALE NECESARE
- Ser-test OI- conţine α,β
- Ser-test AII- conţine aglutinina β
- Ser-test BIII- conţine aglutinina α
- Lama cu trei godeuri
- Pipete pentru fiecare ser hemotest în parte
- Pipete pentru sânge cercetat
- Valabilitatea serurilor test = maxim 4 luni
- Lamele de sticlă perfect curate și uscate
- Materialele necesare pentru puncţie venoasă

EFECTUAREA TEHNICII
Pe lama cu godeuri se pune câte 1 picătură de ser hemotest astfel:
- Picătura de test OI – în partea stângă a lamei;
- Picătura de test AII – în mijlocul lamei;
- Picatura de test BIII – în partea dreaptă a lamei.
Picăturile vor fi aşezate întotdeauna în aceeaşi ordine, de la stânga la dreapta.
Lângă fiecare picătura de ser- test se va pune câte o picătură din sângele de
cercetat.
Picătura de sânge să fie aproximativ de 10 ori mai mică decât picătura de
ser-test
Picăturile de sânge se omogenizează cu picăturile de ser prin mişcări circulare;
de fiecare dată se schimbă pipeta sau bagheta.
Când utilizăm sânge capilar (puncție capilară):
- Cu indexul şi policele mâinii stg. prindem inelarul pacientului, strângem
pentru a produce o uşoară hemostază;
- Cu mâna dr. dezinfectăm locul puncţiei cu un tampon de vată îmbibată cu
alcool, ştergem excesul de alcool;
- Efectuăm înţeparea degetului cu un ac de seringă (aproximativ 0,5 cm de
vârful degetului, pe linia mediană a pulpei);
- Cu vată uscată înlăturăm prima picătură de sânge;
- Cu un colţ al lamei şlefuite se ia pe rând câte o picătură de sânge care se
amestecă cu serul-test;
- Niciodată nu se utilizează de două ori acelaşi colţ de lamă.
- Se aşteaptă 2-3 minute – lama se agită prin mişcări uşoare, mişcări de
basculare;
- În acest timp se produce aglutinarea.
INTERPRETAREA REZULTATELOR (prin metoda direct Beth-Vincent cu
seruri –test OI, AII, BIII)
Există 4 posibilităţi:
1. Dacă aglutinarea nu se produce în nici unul din serurile –test, înseamnă că
aglutininele prezente în serurile-test nu au întâlnit nici un aglutinogen → OI
αβ β α

2. Dacă aglutinarea se produce în picăturile de ser-test marginale ( OI, BIII),


înseamnă că aglutinogenele α din OI şi BIII au întâlnit aglutinogene A →AII
αβ β α

3. Dacă aglutinarea se produce în serul-test OI şi AII, înseamnă că aglutininele β


din serul-test au întâlnit aglutinogenul B →BIII
αβ β α

4. Dacă aglutinarea se produce în toate godeurile, înseamnă că aglutininele α şi β


din serurile-test au întâlnit aglutinogenele A şi B din sângele cercetat → AB IV
αβ β α

B. Metada Beth -Vincent fosind ANTI – A şi ANTI – B


- Anticorpii monoclonali ANTI-A (α) şi ANTI- B (β) sunt de tip IgM şi produc
aglutinarea direct pe lamă a antigenelor omologe A şi B.
 Se foloseşte sange venos 3-4 ml;
 Pe o lamă cu 2 godeuri se picură câte o picătură de ser ANTI –A şi ,
respective, ANTI- B;
 În dreptul fiecărei picături de ser se adaugă câte o picătură de eritrocite de
la primitor;
 Se omo genizează;
 După 3 - 4 secunde apar primele semne de aglutinare, reacţia e completă
după 1minut.
INTERPRETAREA REZULTATELOR (prin metoda Beth – Vincent cu serul
ANTI-A şi ANTI- B)
1. Daca nu se produce aglutinarea, înseamnă că sângele cercetat nu are
aglutinogene →OI
ANTI – A (α ) ANTI – B (β)
2. Dacă aglutinarea se produce în serul ANTI- A înseamnă că sângele de
cercetat are aglutinogen A →AII
ANTI – A (α ) ANTI – B (β)

3. Dacă aglutinarea se produce în serul ANTI- B înseamnă că sângele de


cercetat are aglutinogen B →B III
ANTI – A (α ) ANTI – B (β)

4. Daca aglutinarea se produce in ambele seruri-test, inseamna ca sangele de


cercetat contine atat A cat si B →AB IV
ANTI – A (α ) ANTI – B (β)

METODA INDIRECTĂ SIMONIN - pentru detrminarea aglutininelor


- Se folosesc hematii – test – valabilitate maxim 3 zile.

MATERIALE NECESARE
- Eritrocite –test (cu aglutinogen cunoscut);
- Ser sau plasmă (nu e suficientă puncţia pulpei degetului de aceea se recoltează
sânge prin puncţie venoasă);
- Pipete;
- Pipete Pasteur;
- Lamele de sticlă uscate, curate, degresate;
 Materiale necesare puncţiei venoase:
- garou;
- pernuţă pentru cot;
- ace de recoltat sterile;
- eprubete sterile;
- tampoane de vată;
- alcool sanitar.
TEHNICA
 Cu o pipetă Pasteur se pune câte o picătură din serul sau plasma de
cercetat în 2 godeuri;
 Deasupra fiecărei picături se pune câte o picătură din hematiile –test AII
şi respectiv BIII;
 Picătura de ser-test este de 10 ori mai mare decat cea de hematii;
 Se omogenizează cu câte o pipetă/baghetă de sticlă, având grijă să
schimbăm pipeta pentru fiecare godeu.

INTERPRETAREA REZULTATELOR (metoda Simonin)


1. Dacă aglutinarea se produce în ambele godeuri înseamnă că serul de cercetat
are ambele aglutinine (α,β) → 0 I
A B

2. Dacă aglutinarea se produce în picătura de ser în care am pus eritrocite – test


B III, înseamnă că aglutinogenul B s-a întâlnit cu aglutinina β →A II
A B

3. Dacă aglutinarea se produce în picătura de ser în care am pus eritrocite – test


A II înseamnă că aglutinogenul A s-a întâlnit cu α → B III
A B

4. Dacă aglutinarea nu s-a produs în niciuna din picăturile serului de cercetat


înseamnă că nu are aglutinine → AB IV
A B

DETERMINAREA FACTORULUI Rh

- Factorul Rh, este un aglutinogen (antigen) legat de eritrocit independent de


aglutinogenele din sistemul 0AB;
- Nu are anticorpi naturali.

Materiale necesare:
- Lame curate, uscate, degresate;
- Ser anti-Rh;
- Pipetă;
- Taviţă renală;
- Casoleta cu tampoane sterile de vată;
- Alcool medicinal sau iodat;
- Mănuşi
- Materiale pentru puncţie.

Determinarea pe lamă a factorului Rh:


- Spălarea mâinilor, mănuşi sterile;
- Verificarea valabilităţii serului anti-Rh, aspect- culoare, limpezime;
- Se pune pe lamă 1picătură de ser - test cu diametrul de 5-6 mm;
- Se înţeapă pulpa degetului, se sterge prima picătură, se ia cu colţul unei lamele
şlefuite o picătură de sânge care se pune peste picătura de ser;
- Se omogenizează prin mişcări circulare;
- Se aşează lama în camera umedă, apoi la termostatul la 370C;
- Se citeşte rezultatul după 30-60 de min.

Interpretarea rezultatelor
1. Dacă aglutinarea s-a produs înseamnă că sângele de cercetat are Rh pozitiv.
2. Daca aglutinarea nu s-a produs înseamnă că sângele de cercetat are Rh
negativ.
Pentru copii:
Se recoltează sânge:
- din călcâî;
- de pe faţa plantară a halucelui.

Proba de compatibilitate directă majoră – JeanBreau (in vitro)


Scop:
- Decelează anticorpii din serul primitorului care ar putea distruge hematiile
donatorului;
- Pune în evidenţă incompatibilitatea în sistemul 0AB;
- Pune în evidenţă prezenţa de anticorpi imuni din sistemul Rh.

Materiale necesare:

- Lamele de sticlă curate, degresate, uscate;


- Punga sau flaconul cu sângele de cercetat;
- Seringi, ace sterilizate, pipete, mănuşi de protecţie;
- Termostat, vată, alcool;
- Materiale necesare pt. puncţia venoasă.

Executia tehnicii (a testului):


- Spălare pe mâini, manuşi sterile;
- Recoltare de sânge prin puncţie venoasă;
- Introducerea sângelui la centrifugă;
- Pe o lamă se pune o picăturaă din plasma primitorului;
- Peste ea se adaugă o picătură de eritrocite de la donator;
- Se respectă proporţia de 1/10 între globule şi ser;
- Se citeşte rezultatul după 5 minute la rece.

Interpretare
- Dacă în picătură s-a produs aglutinarea sângele primitorului nu e compatibil
cu cel al donatorului;
- Dacă nu s-a produs aglutinarea sângele e compatibil şi poate fi transfuzat.

S-ar putea să vă placă și