Finalidad .

Sistema para la determinación de calcio en muestras de Los reactivos no abiertos, cuando almacenados en las condiciones
sangre y orina con reacción de punto final. indicadas, son estables hasta la fecha de expiración impresa en el rótulo.
Durante su manipulación, los reactivos están sujetos a contaminaciones
Uso profesional. de naturaleza química y microbiana que pueden provocar reducción de su
estabilidad.
[Solamente para uso diagnóstico in vitro.]
Precauciones y cuidados especiales
Principio . El calcio reacciona con el arsenazo III en medio ligeramente
ácido formando el complejo calcio-arsenazo III de color azul, cuya Los cuidados habituales de seguridad deben ser aplicados en la
intensidad es directamente proporcional a la concentración de calcio en la manipulación de los reactivos.
muestra. La absorbancia del producto de la reacción se mide a 600 o
660 nm de longitud de onda. El Reactivo 1 y el Estándar contienen azida sódica, que es tóxica.
Se debe tener cuidado para evitar la ingestión y en el caso de contacto
con los ojos, se debe lavar inmediatamente con gran cantidad de agua y
Características del sistema . Las mediciones fotométricas del
buscar ayuda médica. La azida puede formar compuestos altamente
calcio en suero y orina a través de métodos directos se basan en la
explosivos con las cañerías de plomo y cobre. Utilizar grandes volúmenes
formación de complejos con moléculas orgánicas. De entre los
de agua para descartar los reactivos.
compuestos que reccionan con el calcio, el arsenazo III es
frecuentemente utilizado en la rutina de los laboratorios clínicos. En los
relevamientos del Colegio de Patologistas Americanos realizados en el Material necesario y no provisto
año 2002, 39% de los participantes utilizaron reactivos que contenían
arsenazo III. 1. Fotómetro capaz de medir con exactitud absorbancias a 600 o 660 nm
(ver INTERFERENCIAS).
El reactivo es provisto en forma líquida, monorreactivo, facilitando así su 2. Pipetas para dosar muestras y reactivos.
aplicación y utilización. El sistema de Labtest no sufre interferencias por
bilirrubina hasta concentraciones de 20 mg/dL, hemoglobina hasta
180 mg/dL y triglicéridos hasta 1100 mg/dL cuando la absorbancia del
Influencias pre-analíticas . El ejercício físico aumenta el valor
del calcio en 3 - 5%.
producto de la reacción se mide a 660 nm.

La concentración de calcio disminuye cerca de 10% durante el embarazo.

El método no sufre interferencias de las proteínas plasmáticas y el efecto
del magnesio está limitado por la adición de 8-hidroxiquinoleína, tornando
Los valores están ligeramente reducidos en el alcoholismo crónico y
al método en uno de los más específicos para la determinación de calcio.
ligeramente aumentados después de la hemodiálisis.
El sistema es fácilmente aplicable en analizadores automáticos y semi-
automáticos capaces de realizar una medición de punto final a 600 o Muestra
660 nm.
Usar suero o plasma (heparina) y orina.
Metodología . Arsenazo III

(
Se debe crear un Procedimiento Operacional Estandar (POE) que
establezca procedimientos adecuados para recoger, preparar y
Reactivos almacenar la muestra. Destacamos que los errores debidos a la muestra
pueden ser mayores que los errores ocurridos durante el procedimiento
1. - Reactivo 1 - Almacenar entre 2-8ºC.

<
Contiene tampón 100 mmol/L, pH 6,8; arsenazo III £0,2 mmol/L;
8-hidroxiquinoleína ³5 mmol/L; azida sódica <0,1% y surfactantes.
2. - Estándar - Calcio 10 mg/dL - Almacenar entre 2-30ºC.
Después de abierto, almacenar bien cerrado para evitar la evaporación.
Contiene azida sódica <0,1%.
analítico.
Debido al aumento de la permeabilidad de los hematíes hacia el calcio, se
debe separar el suero o el plasma hasta una hora después de la
recolección. El analito es estable hasta 2 semanas entre 2-8ºC y 4
semanas a -10ºC. Recoger la muestra de orina en un frasco conteniendo
20 mL de Hcl 6 mol/L (50% V/V). Durante la recolección, la muestra debe
ser bien homogeneizada.

01 Español - Ref.: 95
Cuando la muestra de 24 horas no fuera acidificada durante su
recolección, añadir 20 mL de HCl 6 mol/L, homogeneizar bien, esperar 60
minutos y tomar la alícuota para el ensayo. La muestra previamente
acidificada debe ser bien mezclada antes de utilizarla.
Como ningún test conocido puede assegurar que muestras de sangre no
transmiten infecciones, todas ellas deben ser consideradas como
potencialmente infectivas. Así siendo, deberán ser manipuladas
siguiendo las normativas establecidas para biosseguridad.
Para descartar los reactivos y el material biológico sugerimos aplicar las
normas locales o nacionales de protección ambienal.
Interferencias
Plasmas con citrato, oxalato, fluoruro o EDTA dan resultados falsamente
disminuídos porque formam complejos estables con el calcio.
El procedimiento sugerido para la medición es adecuado para fotómetros
cuyo volumen mínimo de solución de lectura es igual o menor a 1,0 mL.
Debe hacerse una verificación de la necesidad de ajuste del volumen
según el fotómetro utilizado. Los volúmenes de muestra y reactivo
pueden ser modificados proporcionalmente sin perjuicio para el
desempeño del ensayo, y el procedimiento de cálculos se mantiene
inalterado. En caso de reducción de los volúmenes es fundamental que se
observe el volumen mínimo necesario para la lectura fotométrica.
Volúmenes de la muestra menores a 0,01 mL son críticos en aplicaciones
manuales y deben ser usados con cautela porque aumentan la
imprecisión de la medición.
Cálculos . Ver Linealidad.
Absorbancia de la Prueba
Calcio (mg/dL) = x 10
Absorbancia del Estándar

Valores de bilirrubina de hasta 20 mg/dL, hemoglobina hasta 180 mg/dL y Ejemplo

triglicéridos hasta 1100 mg/dL no producen interferencias significativas
cuando la absorbancia del producto de la reacción se mide a 660 nm.
Absorbancia de la muestra: 0,344
Absorbancia del Estándar: 0,445
Valores de hemoglobina mayores a 60 mg/dL producen interferencias
significativas cuando la absorbancia del producto de la reacción se mide
0,344
a 600 nm.
Calcio (mg/dL) = x 10 = 7,7
Para evaluar la concentración aproximada de la hemoglobina en una 0,445
muestra hemolisada se puede proceder del siguiente modo: diluir
0,05 mL de la muestra en 2,0 mL de NaCl 150 mmol/L (0,85%) y medir la Debido a la gran reproducibilidad que se puede obtener con esta
absorbancia a 405 o 415 nm, ajustando el cero con agua desionizada o metodologia, es posible utilizar el método del factor.
destilada.
10
Hemoglobina(mg/dL) @ Absorbancia405 x 601 Factor de calibración =
Hemoglobina(mg/dL) @ Absorbancia415 x 467 Absorbancia del Estándar

Calcio (mg/dL) = Absorbancia de la muestra x Factor de calibración

Procedimiento
Ver OBSERVACIONES 1, 2 y 3. Ejemplo

Tomar 2 cubetas del fotómetro, rotular ‘‘Prueba’’ y ‘‘Estándar’’, y 10

proceder como sigue: Factor de calibración = = 22,47
0,445
Prueba Estándar
Reactivo 1 1,0 mL 1,0 mL Calcio (mg/dL) = 0,344 x 22,47 = 7,7

Seleccionar la longitud de onda a 600 (600 - 610) nm o 660
(650 - 660) nm (ver INTERFERENCIAS).
Tomar la cubeta ‘‘Prueba’’ y ajustar el cero del fotómetro. En seguida, sin
cambiar los controles del fotómetro, añadir 0,01 mL de la muestra en
dicha cubeta. Mezclar bien y determinar la absorbancia (A Prueba).
Tomar la cubeta ‘‘Estándar’’ y ajustar el cero del fotómetro.
Inmediatamente, sin cambiar los controles del fotómetro, añadir
0,01 mL de patrón en dicha cubeta. Mezclar bien y determinar la
absorbancia (A Estándar).
Calcio urinario (mg/dL) x Vol. urinario (mL)
Calcio urinario (mg/24 horas) =
100
Calcio por volumen de filtrado glomerular . El calcio
urinario (CaU) dosado en una muestra de orina puede ser relacionado al
volumen del filtrado glomerular (FG). Esta relación es una alternativa para
obtener valores de la calciuria cuando la muestra de 24 horas no estuviera
disponible. Obtener una muestra de sangre y orina después de un ayuno
de 8 horas.

Este procedimento elimina la interferencia causada por trazas de calcio

presentes en el material de vidrio.

02 Español - Ref.: 95
Realizar los dosajes de calcio y creatinina en la orina y creatinina en suero, Intervalo de referencia . Los intervalos deben ser usados sólo
y aplicar en la siguiente fórmula: como orientación. Se recomienda que cada laboratorio establezca su
propio rango de valores de referencia en la población atendida.
CaU (mg/dL) x Creatinina sérica (mg/dL)
Ca (mg/100 mL de FG) = Suero
Creatinina urinaria (mg/dL) Cálcio
Niños8,9
Calibración . El estándar es trazable al Standard Reference Material Edad mg/dL
(SRM) 915 del National Institute of Standards and Technology (NIST). Cordó umbilical 8,2 a 11,2
Neonatos 6,2 a 11,0
Calibraciones Manuales 0 a 10 días 7,6 a 10,4
Obtener el factor de calibración al usar un nuevo lote de reactivos. Lactentes 9,0 a 11,0
Obtener el factor cuando lo indique el control de calidad interno. 2 a 12 años 8,8 a 10,8

Sistemas Automáticos
Blanco de reactivos: agua o solución de NaCl 150 mmol/L (0,85%); Cálcio
Estándares: usar calibradores proteicos. Las concentraciones de calcio mg/dL
Adultos
en calibradores de la línea Calibra - Labtest son trazables al SRM 915 del 8,8 a 11,0
NIST;

Intervalo de calibraciones Cálcio Ionizado (mg/dL)

8,9 4,80 a 5,52
Se debe recalibrar el sistema en las siguienes situaciones: 1 a 18 años
Calibración en 2 puntos al cambiar de lote; Adultos 4,60 a 5,40
Calibración en 2 puntos cuando lo indique el control de calidad interno.

Orina . 5 a 40 mg / 24 horas en dieta isenta de cálcio. Até 200 mg / 24

Linealidad horas en dieta restricta de cálcio (500 mg / 24 horas). Até 300 mg / 24
El resultado de la medicion es lineal hasta 17 mg/dL. Cuando se obtuviera horas en dieta irrestricta de cálcio.
un valor igual o mayor a 17 mg/dL, diluir la muestra 1:2 o 1:4 con NaCl
150 mmol/l (0,85%), realizar una nueva medición y multiplicar el Amostra de orina . <0,16 mg/ 100 mL de FG.
resultado por el factor de dilución.
Conversión . Unidades Convencionales (mg/dL) X 0,25 = Unidades SI
(mmol/L).
Control de calidad interno . El laboratorio debe mantener un
programa de control interno de calidad que defina con claridad los
reglamentos aplicables, objetivos, procedimientos, criterios para Características de desempeño10
especificaciones de la calidad y límites de tolerancia, acciones
correctivas y registro de las actividades. Controles deben ser utilizados Exactitud . A tres muestras con concentraciones de calcio iguales a
para evaluar la imprecisión e desviaciones de calibración. Recomienda- 7,0, 11,0 y 13,0 mg/dL les fueron añadidas cantidades diferentes del
se utilizar un sistema de reglas de control para verificar la estabilidad del analito, obteniéndose recuperaciones de entre el 90 y 92%. El error
sistema de medición7. sistemático proporcional medio obtenido para un valor de 11 mg/dL fue
igual a 0,96 mg/dL o 8,7%.
Se sugiere utilizar las preparaciones estabilizadas de la línea Qualitrol -
Labtest para el control de calidad interno en los ensayos de química Especificidad . El método propuesto fue comparado con un método
clínica.
similar utilizando 60 muestras con valores situados entre 2,7 y
17,6 mg/dL. De la comparación resultó una ecuación de regresión: y =
Calcio ionizado . El calcio ionizado (CaI) puede ser determinado 1,001x - 0,071 y un coeficiente de correlación (r) igual a 0,999. El error
utilizando los dosajes de calcio sérico, proteína total y albúmina. sistemático total (constante y proporcional) verificado en el nivel de
decisión de 11 mg/dL fue igual a 0,088 mg/dL o 0,8%. Como las
6 x Ca - [(0,19 x P) + A] muestras fueron seleccionadas aleatoriamente en pacientes
3 ambulatorios y hospitalizados, se puede inferir que el método tiene una
CaI (mg/dL) = especificidad metodológica adecuada.
(0,19 x P) + A+6
Repetitividad - imprecisión intra-ensayo
Ca = Calcio sérico (mg/dL)
P= Proteína total (g/dL) N Media DE CV (%)
A= Albúmina (g/dL) Muestra 1 20 8,4 0,11 1,29
Muestra 2 20 11,8 0,15 1,31
Muestra 3 20 14,3 0,16 1,12

03 Español - Ref.: 95
Reproducibilidad - imprecisión total 3. El uso de detergente iónico para la limpeza del material es una fuente
N Media DE CV (%) de contaminación con calcio.
Muestra 1 20 8,4 0,16 1,90
Muestra 2 20 11,8 0,17 1,49 4. Para uma revisión de las fuentes fisiopatológicas y medicamentosas
Muestra 3 20 14,3 0,21 1,44 de interferencia en los resultados y en la metodología se sugiere consultar
<www.fxol.org/>.

Sensibilidad metodológica . Una muestra proteica que no

Referencias
contenía calcio fue utilizada para calcular el limite de detección del
ensayo, habiéndose encontrado un valor igual a 0,083 mg/dL,
1. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, Burtis CA, Ashwood ER eds, 2a.
equivalente al promedio de 20 ensayos más dos desviaciones estándar.
edição, Philadelphia: W.B. Saunders Co., 1994.
Utilizando la absorbancia del estándar como parámetro, se verificó que el
limite de detección fotométrico es de 0,024 mg/dL, correspondiendo a
2. Leary NO, Pembroke A, Duggan PF. Clin Chem 1992;38:904-8.
una absorbancia igual a 0,001.

3. Morgan BR, Artiss JD, Zak B. Clin Chem 1993;39:1608-12.

Efectos por diluición de la matriz . Dos muestras con valores
iguales a 17,4 y 17,7 mg/dL fueron utilizadas para evaluar la respuesta del
sistema cuando se hicieron diluciones de la matriz con NaCl 150 mmol/L
(0,85%). Usando factores de dilución que variaron de 2 a 4, se
encontraron recuperaciones de entre el 103 y 105%.
4. Jansen JW, Helbing AR. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1991;29:197-
201
5. Pottgen P, Davis ER. Clin Chem 1976;22:1752.

Significado clínico . El calcio sérico se mantiene dentro de los 6.Tonks DB. Quality Control in Clinical Laboratories, Warner Chilcott
límites fisiológicos por la acción combinada de la paratohormona y de la Laboratories, Diagnostic Reagents Division, Scarborough, Canada,
vitamina D a través de sus efectos sobre los huesos, intestinos y riñones. 1972.

La mayoría de las veces, la hipercalcemia indica la presencia de 7.Westgard JO, Barry PL, Hunt MR, Groth T. Clin Chem 1981;27:493-501.
hiperparatiroidismo o de enfermedades malignas. La hipercalcemia está
asociada al uso de drogas como los tiazídicos, vitaminas A y D, 8. Burtis CA, Ashwood ER. Textbook of Clinical Chemistry, 2a. Edição,
antiácidos alcalinos y carbonato de litio. La inmovilización (fracturas), Philadelphia: W.B. Saunders, 1986:2175-2211.
enfermedad de Paget y enfermedades granulomatosas (sarcoidosis) son
causas de hipercalcemia. 9. Soldin SJ, Brugnara C, Wong EC: Pediatric Reference Ranges, 5a.
edição, Washington: AACC Press, 2005: 45-46.
Las causas más comunes de hipocalcemia son: hipoparatiroidismo
idiopático o quirúrgico, pseudo hipoparatiroidismo, insuficiencia renal, 10. Labtest: Datos de archivo.
desórdenes del metabolismo de la vitamina D, deficiencia de magnesio,
drogas, tetania neonatal, pancreatitis aguda, transfusiones sanguíneas Presentación
múltiples.
Producto Referencia Contenido
Observaciones 1 2 x 50 mL
Ca Arsenazo Liquiform 95-2/50
1 x 5 mL
1. La limpeza y secado adecuados del material utilizado son factores Ca Arsenazo Liquiform 1 4 x 43 mL
95-4/43
fundamentales para la estabilidad de los reactivos y obtención de Labmax 560/400 1 x 5 mL
resultados correctos.
Están disponibles aplicaciones para sistemas automáticos y semi-
2. El laboratorio clínico tiene como objetivo fornecer resultados exactos automáticos.
y precisos. La utilización de agua de calidad inadecuada es una causa
potencial de errores analíticos. El agua desionizada o destilada utilizada El número de tests en aplicaciones en los sistemas automáticos depende
en el laboratorio debe tener la calidad adecuada para cada aplicación. Así, de los parámetros de programación.
para preparar reactivos y usar en las mediciones y para su uso en
enjuague final de la vidrería, debe tener resistividad ³1 megaohm.cm o Algunas presentaciones pueden estar disponibles mediante consulta.
conductividad £1 microsiemens/cm y concentración de silicatos
<0,1 mg/L. Cuando la columna desionizadora está con su capacidad
saturada, se produce agua alcalina con liberación de varios iones,
silicatos y sustancias con gran poder de oxidación o reducción que
deterioran los reactivos en pocos días o incluso horas, alterando los
resultados de modo imprevisible. Por lo cual es fundamental establecer
un programa de control de la calidad del agua.

04 Español - Ref.: 95
Informaciõnes al consumidor

[Términos y Condiciones de Garantía] Labtest Diagnóstica S.A.

CNPJ: 16.516.296 / 0001 - 38
Labtest Diagnóstica garantiza el desempeño de este producto dentro de Av. Paulo Ferreira da Costa, 600 - Vista Alegre - CEP 33400-000
las especificaciones hasta la fecha de expiración indicada en los rótulos, Lagoa Santa . Minas Gerais Brasil - www.labtest.com.br
siempre que los cuidados de utilización y almacenamiento indicados en Customer Service e-mail: customerservice@labtest.com.br
los rótulos y en estas instrucciones sean seguidos correctamente.

Revisión: Abril, 2013 Copyright by Labtest Diagnóstica S.A.

Ref.: 260117 Reproducción bajo previa autorización

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