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Exámenes de laboratorio

para el estudio de la función


y trastornos de los
eritrocitos.
Rubén Asalde

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Resultado de aprendizaje

 Comprender los fundamentos fisiopatológicos y proponer un


plan diagnóstico considerando los exámenes de laboratorio
para el estudio de la función de las células sanguíneas
(eritrocitos) y su correlación clínica laboratorial.

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Contenido
• Composición de la sangre.
• Hematopoyesis:
– Órganos hematopoyéticos: médula, nódulos linfáticos,
bazo, timo.
– Eritropoyesis:
• Maduración del eritrocito
• Estructura y función del eritrocito
• Metabolismo: Glucólisis / 2, 3 DPG / G6PD / Síntesis Hemo / Fe.
• Formas fisiopatológicas
• Hematología en el laboratorio:
– Conteo celular: MVC, MCH, MCHC, RBC, Reticulocitos
– Hemoglobina
– Microhematócrito

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Contenido
• Hematología en el laboratorio.
– VSG (ESR). Velocidad de sedimentación globular /
eritrosedimentation rate
– Lámina periférica.
– Examen de médula ósea.
• Trastornos de los eritrocitos (Anemias).
– Causas:
• Defectos del ADN (Megaloblástica)
• Fallas en la médula ósea (Aplásica)
• Hemólisis (Hemolíticas: extrínsecas / intrínsecas)
• Defectos en la hemoglobina (Falciforme, Talasemia)
• Estudios del metabolismo del Fe (Ferropénica, Sideroblástica)

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Hematopoyesis

Períodos:
• Mesoblástico. (19d-8 sem). Eritroblastos en el saco
vitelino y células troncales cerca de la aorta. Se puede
medir Hb Portland, Hbs Gower 1 y 2.
• Hepático. (5 a 7 sem-2 sem nac.). Bazo, riñón, timo y
ganglios linfáticos contribuyen al proceso hematopoyético.
El timo, produce células T; riñón y bazo producen células B.
Se observa desarrollo megacariocítico.
• Medular (mieloide). (5° Mes- ). Se puede medir
eritropoyetina (EPO), Factores de crecimiento (G-CSF, GM-
CSF), Hb F y Hb A.

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Hematopoyesis

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Período medular

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Período medular
Funciones:
• Menor: Procesamiento de antígenos de inmunidad
celular y humoral.
• Principal. Producción y proliferación de células
sanguíneas. En tres compartimentos de producción:
– Células madre (Stem Cells). Pluripotenciales (CFU-S) o
multipotenciales; dan lugar a linfocito B y C primitivos.
– Células progenitoras. Unipotenciales: BFU-E y CFU-E, de
eritrocitos; CFU-MEG, de megacariocitos; CFU-GM, de
granulocitos y monocitos.
– Células precursoras. Cada tipo de célula unipotencial
madura en forma de blastos. Ej. Mieloblasto, eritroblasto…

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Hematopoyesis

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Órganos hematopoyéticos: G. Linfáticos
Estructura:
1. Corteza (Folículos linfoides y
centros germinales).
2. Paracorteza (Rica en monocitos,
con linfocitos T)
3. Médula (Cordones y senos
medulares).

Funciones:
1. Forma nuevos linfocitos en
centros germinales.
2. Filtra partículas, desechos y
bacterias que ingresan a la linfa.

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Órganos hematopoyéticos: Timo
Tejido donde desarrollan
linfocitos T.
Estructura:
• Corteza. Tiene células T
primitivas (timocitos), células
epiteliales (efectores de
diferenciación) y macrófagos.
• Médula. Con células T en
maduración, células epiteliales
y corpúsculos de Hassall

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Bazo
Funciones:

1. Filtración de
eritrocitos. Elimina
selectivamente eritrocitos
viejos y anormales.
2. Reparación y
reestructuración
celular de eritrocitos en
la pulpa roja.
3. Reservorio de
plaquetas y linfocitos.
30% de plaquetas son
retenidas
4. Inmunidad. Linfocitos T
(25%) en médula blanca;
Linfocitos B (10-15%) en
nódulos.

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Eritropoyesis
Es un proceso complejo de maduración celular para el
mantenimiento del número de eritrocitos en sangre periférica.
Secuencia de maduración:

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Eritropoyesis

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Eritropoyesis

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Eritropoyesis

Pronormoblasto Normoblasto Normoblasto


basófilo policromático

Eritrocito Normoblasto
Eritrocito
policromático ortocromático
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Eritrocito. Estructura

• Discos bicóncavos 7-8µm,


v=90fL, área=140 µm2
• Membrana con numerosos
determinantes antigénicos
(unos 300), que comprenden
aprox. 15 sistemas de
grupos sanguíneos.

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Eritrocito. Metabolismo de carbohidratos

• Vía Embden-Meyerhoff. Glucólisis anaeróbica que


produce 2 ATP, necesario para mantener la flexibilidad y
energía en las bombas de sodio, potasio y calcio.

• Vía de Luebering-Rapaport: Necesaria para la


producción de 2,3-DPG (se une a la Hb y disminuye la
afinidad por el oxígeno de la Hb, liberando así más
oxígeno a los tejidos). Depende de la enzima limitante de
la tasa de glucólisis, la fosfofructoquinasa y de fosfato
inorgánico.

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Eritrocito. Síntesis de Hemoglobina

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Hemo
• Ferroporfirina,
grupo prostético de:
– Hemoglobina
– Mioglobina
– Citocromos
– Peroxidasas

• Formado por un ciclo tetrapirrólico derivado de


protoporfirina III (o IX), con 4 metilos (R1) en 1, 3,
5 y 8, 2 vinilos (R2) en 2 y 4; y 2 propionatos (R3)
en 6 y 7. Un Fe++, que une nitrógeno de pirroles.
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Biosíntesis del Hemo
1. Síntesis de ácido -aminolevulínico (ALA). A
partir de succinil CoA + glicina.
2. Formación de porfobilinógeno (PBG). Por
acción de ALA deshidratasa (se inhibe por Pb).
3. Formación de uroporfirinógeno inactivo
(UROgen I). A partir de 4 moléculas de PBG.
4. Activación a UROgen III por cosintasa.
5. Descarboxilación de UROgen III para formar
Coproporfirinógeno III.

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Biosíntesis del Hemo
6. Descarboxilación de Coproporfirinógeno III para
formar Protoporfirinógeno IX.
7. Oxidación del Protoporfirinógeno IX y formación
de Protoporfirina IX.
8. Incorporación de Fe2+ por ferroquelatasa para
formar el grupo Hemo

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Regulación de la Síntesis del Hemo

• Inhibición alostérica de ALA sintasa (10-5M de


Hemo)
• Inhibición del transporte de la enzima del citosol
a la mitocondria
• Represión de la transcripción del gen de la
enzima. Requiere concentraciones bajas de
Hemo (10-7M).

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Degradación del Hemo
1. Ruptura del anillo para formar biliverdina. La
hemo oxigenasa cataliza la liberación de Fe+3
CO y biliverdina (microsomas).
2. Reducción de biliverdina a bilirrubina (citosol).
Se une a la albúmina y va al hígado donde se
conjuga con ác. glucurónico, por acción de
bilirrubina glucuronil transferasa.

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Eritrocito. Historia de vida

• Los eritrocitos viejos o anormales son removidos de la


circulación por un atrapamiento esplénico. Se produce
lisis y degradación de la hemoglobina: Hemo oxigenasa.
• Los macrófagos del sistema reticuloendotelial degradan
la Hb y recuperan aminoácidos y hierro. Este es liberado
del grupo hemo y llevado a la transferrina del plasma.
Pueden permanecer pequeñas cantidades como ferritina
o hemosiderina.
• La destrucción intravascular de RBC es menos del 10%.
La Hb libre se disocia en dímeros α1 β1, que se unen a
la haptoglobina, evitando su excreción renal.

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Eritrocito. Historia de vida

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Variaciones en el tamaño del eritrocito

Microcitos Normocitos Macrocitos


< 80 fL 80-100 fL >100 fL
Anemia ferropénica, Enf. Hepática, deficiencia
talasemia menor, de Vit B12, deficiencia de
envenenamiento Pb, folato; neonatos.
anemia siderobástica

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Variaciones en el tamaño del eritrocito
(Anisocitosis)
Esta variación se correlaciona con la amplitud de distribución
eritrocitaria (RDW) determinada electrónicamente. Una RDW
mayor de 14,5% indica una población heterogénea de hematíes.
Una RDW baja no tiene importancia.

Asociada con anemias Asociada con S. mielodisplásico,


ferropénica, megaloblástica y anemia sideroblástica; def. Fe,
hemolítica folato, Vit. B12.
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Variaciones en el color del eritrocito

Hipocromía Población dicrómica Policromasia

La zona de palidez central La zona de palidez Retención de RNA.


es > 1/3 del diámetro del central es > 1/3 del
hematíe. MCHC disminuye. diámetro del hematíe.

Asociada con anemias Asociada con anemia Asociada a hemorragias


ferropénica, sideroblástica sideroblástica, aguda y crónica,
talasemia; envenenamiento transfusiones. hemólisis, neonatos.
con Pb.
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Variaciones en la forma el eritrocito
(Poiquilocitosis)

Acantocitos Esquistocitos Equinocitos


(spur cells) (burr cells)
Asociada con enf. severa Asociada con anemia Asociada a uremia, def.
del hígado, esplenectomía, hemolítica microangiopática de piruvato quinasa,
malabsorción, (síndrome urémico, púrpura anemia hemolítica
hipotiroidismo, def. Vit. E, trombocitopénica, CID), microangiopática,
abetalipoproinemia. quemaduras, rechazo de neonatos prematuros .
injerto renal.
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Variaciones en la forma el eritrocito
(Poiquilocitosis)

Esferocitos Codocitos Drepanocitos


(Target cells) (sickle cells)

Asociada con esferocitosis Asociada con talasemias, Asociada a enf. de Hb S


hereditaria, algunas hemoglobinopatías, anemia homocigota (anemia
anemias hemolíticas, ferropénica, esplenectomia, falciforme).
transfusiones, enf. hepática obstructiva.
quemaduras graves.

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Variaciones en la forma el eritrocito
(Poiquilocitosis)

Cristales de Hb CC Hb SC Eliptocitos /
Ovalocitos

Asociada a enf. de Hb C Asociada a enf. de Hb SC Asociada a eliptocitosis u


homocigota. ovalocitosis hereditaria,
talasemia mayor, anemia
ferropénica,
megaloblástica.

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Variaciones en la forma el eritrocito
(Poiquilocitosis)

Dacriocitos Estomatocitos Rouleaux*


(teardrop cells)

Asociada a mielofibrosis Asociada a Asociada a trastornos


primaria, talasemia, estomatocitosis inflamatorios crónicos,
anemia mieloptísica. hereditaria, alcoholismo, mieloma de células
enf. hepática, fenotipo Rh plasmáticas, linfoma
nulo. linfoplasmacítico.

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Inclusiones

Cuerpos de Howell-Jolly Punteado basofílico Cuerpos de


Pappenheimer

Asociada a Asociada a intoxicación Asociada a


esplenectomía, anemia por plomo, talasemia, esplenectomía, anemia
megaloblástica, síntesis anormal del hemolítica, sideroblástica,
hemolítica. Hemo. megaloblástica,
hemoglobinopatías.

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Conteo Celular Multiparámetro
• RBC (Red blood cells)
• WBC (White blood cells)
• Hb (Hemoglobin)
• HCT (Hematocrit)
• MCV (Mean corpuscular volume)
• MCH (Mean corpuscular Hb)
• MCHC (Mean [Hb] corpuscular)
• MPV (Mean platelet volumen)
• RDW (Red cell distribution width)

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Índices RBC
• MCV. Es el volumen promedio de un eritrocito expresado
en volumen (fL).

Ej. Hto=45% y eritrocitos=5x1012/L; MCV=90 fL.


VN = 80 – 100 fL (< o > Micro o Macrocítico)
• MCH. Es el peso promedio de la Hb en un eritrocito
expresado en picogramos (pg).

Ej. Hb= 16 g/dL y eritrocitos=5x1012/L; MCH=32 pg


VN = 26 – 32 pg

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Índices RBC
• MCHC. Es el promedio de la concentración de Hb en
cada eritrocito (g/dL).

Ej. Hb=16 g/dL y Hto=48%; MCHC= 33,3 g/dL.


VN = 32 – 36 g/dL
(< o > Hipo o Hipercrómico)

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Conteo manual

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Valores referenciales (eritrocitos)

(Unidades tradicionales: millones de células/mm3).

• Hombres: 4 500 000 - 5 500 000


• Mujeres: 4 000 000 - 5 000 000
• Niños (4 años): 4 200 000 - 5 200 000
• Lactantes (1-6meses): 3 800 000 - 5 200 000
• Recién nacidos: 5 000 000 - 6 000 000

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Determinación de Hemoglobina
Método de la cianmetahemoglobina.
La hemoglobina de la muestra de
sangre total es liberada de los eritrocitos
y es oxidada por hexocianoferrato de
potasio (III) formando metahemoglobina.
Esta reacciona con el cianuro formando
cianmetahemoglobina estable cuya
absorbancia a 540nm es directamente
proporcional a la concentración de la
hemoglobina de la muestra.

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Valores referenciales (Hb)

• Niños al nacer: 13,6 - 19,6 g/dL


• Niños de 1 año: 11,3 - 13,0 g/dL
• Niños de 10 -12 años: 11,5 - 14,8 g/dL
• Mujeres: 11,5 - 16,5 g/dL
• Hombres: 14,0 - 18,0 g/dL

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Microhematócrito (Hto)
Es el volumen que ocupan los eritrocitos
en un tubo capilar, después de
centrifugar una muestra de sangre total,
expresado en porcentaje.
Cuando la muestra tiene eritrocitos
normocíticos y normocrómicos, se
puede estimar la Hb dividiendo entre 3.
Valores de referencia:
• Hombres: 40 – 50%
• Mujeres: 38 – 44%
• Niños (5ª): 38 – 44%
• Lactantes (3 m): 37 – 42%
• Recién nacidos: 50 – 58%

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Conteo de Reticulocitos
• El reticulocito es la última etapa
de eritrocitos inmaduros.
• Normalmente, un reticulocito
pasa de 2 a 3 días en la
médula ósea y 1 día en la
sangre periférica antes de
convertirse en un eritrocito
maduro.
• El reticulocito contiene ácido ribonucleico citoplasmático
(ARN) remanente y orgánulos como las mitocondrias y los
ribosomas.
• El recuento de reticulocitos se utiliza para evaluar la
actividad eritropoyética de la médula ósea.
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Conteo de Reticulocitos

Valores de referencia:
• Adultos : 0,5 – 1,5%
• Recién nacidos : 2,5 – 6,0%

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Conteo absoluto de reticulocitos

• Es el conteo absoluto de reticulocitos en un litro o µL de


sangre.

• Ej. Si un paciente tiene 2% de reticulocitos y el conteo de


eritrocitos es 2,20 x 1012/L

• Valores de referencia: 20 x 109/L – 115 x 109/L

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Eritrosedimentación o Velocidad de
sedimentación globular (VSG)
• Útil para el monitoreo de
enfermedad inflamatoria.
• Es normal en pacientes con
osteoartritis las primeras 24 h o
apendicitis aguda; pero es
elevada en pacientes con fiebre
reumática, estados tempranos
de enfermedad inflamatoria
pélvica, tuberculosis pulmonar,
anemia y macrocitosis.
• Valores de referencia:
Hombres: 1-10 mm/1hora
Mujeres: 3-14 mm/1hora
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Lámina periférica

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Lámina
periférica

56 www.usat.edu.pe
Examen de médula ósea

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Anticipated Distribution of Cells and
Cell Maturation Stages in Aspirates

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Trastornos de los eritrocitos (Anemias)

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Algorithm for evaluating causes of anemia based on absolute reticulocyte count and mean cell volume (MCV). DIC, Disseminated intravascular
coagulation; Hb, hemoglobin; HUS, hemolytic uremic syndrome; RBC, red blood cell; TTP, thrombotic thrombocytopenic purpura.

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Results of Iron Studies in Microcytic,
Hypochromic Anemias

62 www.usat.edu.pe
Porfirias eritropoyéticas

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Evaluación de anemia perniciosa

64 www.usat.edu.pe
Investigación de anemias macrocíticas

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Anemias hemolíticas

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Anemias por defectos en Hb
Características clínicas de anemia de células falciformes:

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Anemias por defectos en Hb
β-Thalassemia Associated with Structural β-Globin Variants
(Compound Heterozygotes)

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Distribución geográfica de variantes estructurales
de Hb heredadas mas frecuentes y de talasemias.

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Referencias
• Kehoane EM, Smith LJ, Walenga JM. Rodak’s Hematology: Clinical Principles
and Applications. 5a. Ed. España: Elsevier; 2012.
• Mac Pherson RA, Pincus MR. Henry’s Clinical Diagnosis and Management
by Laboratory Methods. 23rd Edition. USA: Elsevier; 2017.
• Gonzales, A. Principios de Bioquímica Clínica y Patología Molecular. 2ª ed.
España: Elsevier; 2014.
• Baynes JW, Dominiczak MH. Bioquímica Médica. 4a ed. España: Elsevier-
Mosby; 2014.
• Torrens M. Interpretación clínica del hemograma. REV. MED. CLIN. CONDES
- 2015; 26(6) 713-725 [en línea]. Disponible en:
https://www.elsevier.es/es-revista-revista-medica-clinica-las-condes-202-
pdf-S0716864015001480

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Rubén Asalde Ramos
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