1.1.1.

DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE NITRÓGENO TOTAL

POR EL MÉTODO DE MICRO-KJELDAHL
El contenido de nitr6geno puede evaluarse mediante el metodo de micro-Kjeldahl
y el porcentaje de la protefna se calcula usando el factor de conversión 6.25 en
caso de maíz, 5.83 para trigo y triticale.
1.1.1.1. EQUIPOS
 Balanza analítica.
 Matraces digestores de 30 ml.
 Unidad digestora de micro-Kjeldahl.
 Unidad destiladora de micro-Kjeldahl.
 Autotransformador, variaci6n de 0 a 140 voltios, Powerstat. *
 Matraz Erlenmeyer de 125 ml.
 Microbureta de 5 ml.
 Material de vidrio (pipetas, vasos, etc.)
1.1.1.2. REACTIVOS

 Ácido sulfúrico concentrado (98%); d = 1.84, libre de nitrógeno.

 Mezcla de catalizadores: 99.0 g de K2S04; 4. 1 g de HgO y 0.8 g de
CuS04, o pastillas de catalizador (7.5 mg Se+ 1.5 g K2S04).
 Solución de hidróxido de sodio-tiosulfato de sodio. Disolver 50 g de NaOH
y 5 g de Na2S203. 5H20 en agua destilada y diluir a 100 ml.
 Solución de ácido bórico al 4%.
 Solución indicadora de rojo de metilo en verde de bromocresol (una parte
de solución etanólica de rojo de metilo al 0.2% con 5 partes de solución
etanólica de verde de bromocresol al 0.2%).
 Solución de ácido clorhídrico 0.02N.
 Peróxido de hidrógeno al 30%.
1.1.1.3. PROCEDIMIENTO
 Pesar de 30 a 40 mg de muestra en un matraz de digestión. Añadir .1.5 g
de la mezcla de catalizadores, o una pastilla catalizadora comercial, 2 ml
de ácido sulfúrico concentrado y 2 ml de peróxido de hidrógeno al 30%.
 Digerir durante 30 minutos, enfriar y añadir la mínima cantidad posible de
agua destilada para disolver los sólidos formados. Dejar enfriar a
temperatura ambiente.
 Transferir esta solución al aparato de destilaci6n, asegurándose que no
queda nada en el matraz lavándolo de 5 a 6 veces con 1 a 2 ml. De agua
destilada.
 Poner un matraz Erlenmeyer de 125 ml con 6 ml de solución de ácido
bórico y 3 gotas de solución indicadora debajo del condensador, cuya
terminal deberá quedar dentro de la solución.
 Anadir al aparato de destilación 8 ml de solución de hidróxido de sodio-
tiosulfato de sodio, y destilar hasta obtener 50 ml del destilado.
 Titular con HCI hasta llegar al punto gris o la primera apariencia del color
violeta.
 Efectuar la determinación de un blanco, usando la misma cantidad de
reactivos y el mismo proceso de digestión, destilación y titulación que para
la determinaci6n de la muestra.
 Calcular el por ciento de nitrógeno.
(ml HCI en muestra − ml blanco) x normalidad HCI x 14.007 x 100
% Nitrógeno =
mg de muestra
% Proteína = % de N x factor de conversión correspondiente