Sunteți pe pagina 1din 114

Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

CONTENIDO

▪ Tema I Microbiología, objeto de estudio y evolución.


▪ Tema II Clasificasión de los microorganismos.
▪ Tema III Características morfológicas.
▪ Tema IV Características estructurales y composición química.
▪ Tema V Fisiología bacteriana.
▪ Tema VI Metabolismo bacteriano.
▪ Tema VII Reproducción bacteriana.
▪ Tema VIII Clasificación de las bacterias.
▪ Tema IX Genética bacteriana.
▪ Tema X Tipo de variaciones.
▪ Tema XI Acción de los agentes físicos, químicos y antimicrobianos.
▪ Tema XII Agentes químicos orgánicos e inorgánicos.
▪ Tema XIII Antibióticos y agentes quimioterápicos.
▪ Tema XIV Ecología microbiana.
▪ Tema XV Flora habitual del cuerpo humano.
▪ Tema XVI Relación hospedero – parasito.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA I MICROBIOLOGÍA, OBJETO DE ESTUDIO Y EVOLUCIÓN.

Microbiología:
Ciencia que estudia los organismos microscópicos o sub microscópicos.
Micros: Pequeño Bios: Vida Logos: Ciencia

Involucra:
- Tipos estructurales, funcionales y taxonómicos heterogéneos.
- Partículas no celulares: virus , viroides y priones
- Organismos celulares: Bacterias, protozoarios, algas y hongos.

EVOLUCIÓN HISTÓRICA DE LA MICROBIOLOGÍA

 Periodo de la especulación: (4000 años A.C. – 1870)


- Hipócrates: Introduce el pensamiento científico (habla por primera vez de la
enfermedad “epidemias y pandemias”)
- Lucrecio: Semilla de la enfermedad
- Roger Bacón: Construye lentes simples
- Girolamo (Frascatorins de Verone): Contagium Vivum
- Antonio Van Leeuwenhoek: Describe microorganismos
- Robert Hooke (1635-1703): Célula.
- Teoria de la generación espontanea o abiogénesis: John Needham.
- Teoria biogénica: Spallanzani, Schwann, Shroeder y Pasteur.
- John Needham: Vida surge de la materia muerta.
- Lázaro Spallanzani: Ebullición macerados
- Theodor Schwann: Aire caliente
- Shroeder y Van Dush: Tapones de algodón
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

 Epoca de oro: (1870-1910)


- Edwuard Jenner: Vacunas
- Louis Pasteur: Fermentación, técnicas pasteurización (define los términos de
aerobios y anaerobios).
- Jhon Tyndall: Técnica esterilización tindalización.
- Joseph Lister: Cirugia antiséptica.
- Robert Koch: Posulados para establecer los agentes etiológicos de las
enfermedades:
▪ Microorganismos aislados de individuos enfermos y obtenido cultivo puro.
▪ Inoculación cultivo puroprovoca enfermedad en animales sanos
▪ Microorganismos obtenidos de cultivos puros a partir del animal inoculado
experimentalmente.
- Beijerinck y Winogradsky: Medios selectivos y enriquecimiento.
- Wurtz: Indicadores de pH en medios de cultivo
- Dimitri Ivanoski y Beijerinck: Virus filtrable, virus
- Ziehl y Neensel: Coloración ácido alcohol resistente
- Christian Gram: Tinción de Gram

 Epoca contemporánea: (1910 hasta la actualidad)

Quimioterapia Antimicrobiana:
- Paul Ehrlich: Derivados axostilo, compuesto 606 (salvarsan)
- Alexander fleming: Descubrimiento de la penicilina
- Gerhard Domagk: Rojo de prontocilo. Sulfamidas.
- Chain y Florey: Penicilina
- René Dubos: Tirotricina
- Selman Waskman: Neomicina
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Genetica Microbiana:
- Watson y Crick: Modelo tredimensional de ADN.
- Jacob y Monod: Modelo de regulación enzimática.
- Avery MacLeod: Factor hereditario y transformante ADN.
- Ochoa y Kornberg: Aislaron, purificaron y sintetizaron ADN y ARN.
- Técnicas de biología molecular: Sondas ácidos nucléicos. Reacción en cadena de
la polimerasa PCR.

Inmunología:
- Bordet: Reacción serológica fijación complemento.
- Calmette y Guerin: BCG profilaxis tuberculosis.

Virología:
- Se descubrieron nevos virus: Retrovirus
- Groos (1950-1960): Virus causante de tumores en ratones y aves.
- Robert Gallo: Aisló 1978 primer retrovirus humano.

Bacteriología:
- Identificación bacteriana a través de equipos automatizados.

Microbiologia en Venezuela:
- José Gregorio Hernández: Cátedra bacteriológica UCV, estudio fiebre amarilla
- Luis Daniel Beanperthuy: Fiebre amarilla.
- Rafael Rangel: Fundador de la parasitología en Venezuela, Descubrio el Necator
americanus y Tripanosoma venezolae.
- Santos Anibal Dominicci: Fundador del instituto Pasteur Caracas, estudió
Plasmodium falciparum.
- Arnoldo Gabaldón: Lucha antipalúdica en Venezuela.
- Jacinto Convit: Vacuna contra la lepra.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

MICROBIOLOGÍA Y SU OBJETO DE ESTUDIO

- Bacteriología: Estudia las bacterias.


- Virología: Estudia los virus, viriones y priones
- Micología: Estudia los hongos.
- Parasitología: Estudia los parásitos.
- Ficología: Estudia las algas

MICROBIOLOGÍA Y SUS APLICACIONES CON OTRAS CIENCIAS

▪ Biología
▪ Inmunología
MICROBIOLOGÍA
▪ Genética
▪ Bioquímica

MICROBIOBIOLOGÍA Y SUS APLICACIONES

Microbiología Básica ▪ Microbiología médica y veterinaria.


▪ Microbiología de suelos y agrícolas.
▪ Microbiología Industrial.
Microbiología ▪ Microbiología Sanitaria.
▪ Microbiología de los Alimentos.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA II CLASIFICASIÓN DE LOS MICROORGANISMOS. .


HISTORIA DE LA CLASIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS
Lamarck (finales siglo XIX):
▪ Reino plantae : Algas y hongos
▪ Reino animalia: Infusoria y protozoarios

Copeland (1938):
▪ Reino monera

Whittaker (1969)
▪ Reino monera
▪ Reino protista o procaryote
▪ Reino fungi

Haeckel (1866)
▪ Reino vegetal
▪ Reino animal
▪ Reino protista

Microscópio electrónico (mediados siglo XX)


▪ Célula eucariota
▪ Célula procariota

Actualmente:
▪ Dominio: Bacterias
▪ Phylum: Proteobacterias
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

CARACTERISTICAS DE UNA CÉLULA PROCARIOTA (BACTERIAS)


▪ Organismo unicelular (0,5-3μ).
▪ Pared celular compleja.
▪ Membrana citoplasmática funciones respiración y fotosíntesis.
▪ Nucleoplasma sin membrana nuclear.
▪ Ribosoma del tipo 705.
▪ Sin retículo endoplasmático.

CÉLULA EUCARIOTA (MICROORGANISMOS)


▪ Célula más compleja que una célula procariota.
▪ Tienen organelos.
▪ Tienen su núcleo delimitado.

GRUPOS DE ORGANISMOS EUCARIOTAS


 Algas:
▪ Unicelulares o multicelulares.
▪ Tamaño variable.
▪ Reproducción sexual y asexual.
▪ Presentan clorofila.
▪ Realizan fotosíntesis.
▪ Pigmentos accesorios.
▪ No patógenos para el hombre.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

 Protozoarios:
▪ Unicelulares.
▪ Móviles.
▪ Carecen de clorofila.
▪ Sin pared celular.
▪ Nutrición holozóica.
▪ Presentes en la naturaleza.
▪ Causan enfermedades.

 Hongos:
▪ Unicelulares o pluricelulares.
▪ Inmóviles.
▪ Pared celular rígida y de quitina.
▪ Reproducción sexual y asexual.
▪ No fotosintéticos.
▪ Dimórficos.
▪ Flora normal del hombre o patógenos.
▪ Obtienen energía de compuestos químicos.

GRUPOS DE ORGANISMOS PROCARIOTAS


 Bacterias:
▪ Unicelulares.
▪ Reproducción por división simple.
▪ Mayormente de vida libre.
▪ Contienen estructuras de información genética.
▪ Sistemas productores de energía y biosintéticas.
▪ Desplazamiento flagelos o movimientos deslizantes por flexión.
▪ Pueden ser inmóviles.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

 Cianobacterias:
▪ Bacterias fotosintéticas autótofas.
▪ Unicelulares o pluricelulares.
▪ Forman filamentos o tricomas.
▪ Tamaño entre 1 – 10 μm.
▪ Pared celular Gram negativa.
▪ Metabolismo fotosintético, factores ATP, sintetasa y complejo enzimático.
▪ Poseen clorofila.
▪ Desplazamiento vesícula gaseosa o microfibras.
▪ Reproducción, escisión simple o multiple, gemación o fragmentación.
▪ Producen acinetos.
COMPARACIÓN ENTRE UNA CELULA PROCARIOTA Y UNA EUCARIOTA
PROCARIOTA:
▪ Más sencilla.
▪ Tamaño 0,5- 3 μm.
▪ Ribosoma 705.
▪ ADN extra cromosómico.
▪ No posee Aaparato de golgi.
▪ No posee mitocondrias.
▪ No posee Retículo endoplasmático.

EUCARIOTA:
▪ Más compleja.
▪ Tamaño 2- 100 μm.
▪ Ribosoma 805.
▪ ADN nuclear.
▪ Aparato de golgi.
▪ Mitocondria.
▪ Retículo endoplasmático.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA III CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS.

Tamaño de la célula bacteriana


▪ Cocos: 1 μm de diametro.
▪ Bacilos: entre 1,5 y 6 a 8 μm de longitud.
▪ Espiroquetas: 10 a 15 μm de longitud.

Ejemplos:
▪ Familia Micrococcaceae: 0,5 a 1 μm de diametro.
▪ Bacillus megaterium: 1,3 μm de diametro por 3,0 μm de longitud.
▪ Haemophilus influenzae: 0,25 μm de diametro por 1,2 μm de longitud
▪ Microplasma: 0,2 μm de diametro
▪ Beggiatoa gigantea: 100-700 μm de diametro
▪ Epulopiscium fishelsonii: 80 μm de diametro, 200-500 μm de longitud.

FORMAS Y TIPOS DE AGRUPACIÓN


▪ COCOS: Células en forma esferica.

Micrococos.

Diplococos: Cocos en grupos de dos y la división ocurre en un solo plano. Ejemplo:


Neisseria sp.

Estreptococos: Cocos en cadenas, la división celular ocurre en un solo plano.


Ejemplo: Streptococcus sp.

Tetradas: Cocos en grupos de cuatro y la division celular ocurre en dos planos.

Estafilococos: Cocos en grupos irregulares o en racimos y la división celular ocurre


en varios planos. Ejemplo: Staphylococcus sp.

Sarcinas: Cocos en grupos de ocho y la división celular ocurre en tres planos.


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

▪ BACILOS: Células en forma de bastones.


Diplobacilos.

Estreptobacilos.

Empalsadas o letras chinas.

Cocobacilares: bacilos cortos.

Corineformes : forma de clava o pesa.

▪ ESPIRALES O HELICOIDALES:
Vibrios o vibriones: Son bacilos en forma de coma. Ejemplo: Vibrio sp.

Espirilos: Forma helicoidal rígidas o en forma de tirabuzón. Ejemplo:


Campylobacter sp. Helicobacter sp.

Espiroquetas: En forma de tirabuzón (flexibles). Ejemplo: Treponema pallidum.


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

ESQUEMA DE FORMAS Y TIPOS DE AGRUPACIÓN

COCOS BACILOS ESPIRALES O


HELICOIDALES

Diplococos Diplobasilos Vibrios o vivriones:

Estreptococos Estreptobacilos Espirilos:

Tetradas Empalsadas o letras chinas Espiroquetas:

Estafilococos

Sarcinas
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA IV CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES Y COMPOSICIÓN QUÍMICA.

COMPOSISIÓN QUÍMICA BACTERIANA

Tipo de componente % peso seco


- Proteinas → 50 %
- ARN → 10-20 %
- ADN → 3%
- Lípidos → 15%
- Carbohidratos → 12%

ULTRAESTRUCTURAS DE LAS CELULAS BACTERIANAS

Elementos obligados Elementos facultativos


- Pared celular. - Cápsula.
- Membrana citoplasmática. - Glicocalix.
- Citoplasma. - Flagelos.
- Misosomas. - Fimbrias.
- Ribosomas. - Incluciones citoplasmáticas.
- Nucleoides. - Esporas.

ENVOLTURA CELULAR:
Constituida por pared celular, membrana citoplasmática, polisacaridos
especializados, proteinas y materiales adherentes externos.

PARED CELULAR:
Conformada por péptidoglucano muréico: 2 aminoácidos (n – acetilglucosamina y n
– acetilmurámico). Unidos mediante enlaces beta 1 – 4, unido al acetilmurámico,
hay proteínas D y L (polipéptido).
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Grampositivas
▪ No tienen lipopolisacáridos.
▪ Su envoltura está constituida por la pared celular o mureína y la membrana
citoplasmática.
▪ Pueden envolver polisacáridos y proteínas de superficie asociados al
péptidoglucano.

Gramnegativas
▪ Más complejas.
▪ Tienen una estructura trilaminar:
- Membrana citoplasmática: Fosfolípidos y proteínas transmembrana.
- Membrana interna: Péptidoglucano, espacio periplasmático.
- Membrana externa: Por encima del péptidoglucano, aquí se encuentra adosado
el lipopolisacárido, está constituido por un lípido denominado A, que tiene
carácter toxigénico y polisacáridos que dan carácter antigénico conocido como
antígeno O (Antígeno Osmótico), además esta membrana puede presentar
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

proteínas conocidas como porinas las cuales forman carácter transmembránico,


esta membrana se encuentra unida con el péptidoglucano por lipoproteínas.

FUNDAMENTO DE GRAM
La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de
péptidoglucano, además de dos clases de ácidos teicóicos: Anclado en la cara
interna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido
lipoteicóico, y más en la superficie, el ácido teicóico que está anclado solamente en
el péptidoglucano (también conocido como mureína) Por el contrario, la capa de
péptidoglucano de las Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una
segunda membrana plasmática exterior (de composición distinta a la interna) por
medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de péptidoglucano unida a una
membrana exterior por lipoproteínas. La membrana exterior está hecha de
proteína, fosfolípido y lipopolisacárido. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se
tiñen diferencialmente debido a estas diferencias constitutivas de su pared. La
clave es el péptidoglucano, ya que es el material que confiere su rigidez a la pared
celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha mayor proporción que
las Gram negativas.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloración, se debe a que la


membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgánicos, como
por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de péptidoglucano que posee es
demasiado delgada como para poder retener el complejo de cristal violeta/yodo
que se formó previamente, y por lo tanto este complejo se escapa, perdiéndose la
coloración azul-violácea. Pero por el contrario, las Gram positivas, al poseer una
pared celular más resistente y con mayor proporción de péptidoglucanos, no son
susceptibles a la acción del solvente orgánico, sino que este actúa deshidratando
los poros cerrándolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo cristal
violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-violácea.

BACTERIAS ACIDO ALCOHOL RESISTENTES (MICOBACTERIAS)


- No tienen membrana externa.
- Forman polisacáridos unidos por péptidoglucanos igual que las Gram positivas,
se diferencian porque pueden presentar una variedad de compuestos lipídicos
llamados ácidos micólicos.
- Se tiñen por el método Ziehl Neelsen, con carbolfucsina y resiste a la
decoloración con alcohol-ácido.
Ejemplo: Géneros Mycobacterium, Nocardia y Corynebacterium.

FUNDAMENTO DE ZIEHL NEELSEN


Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos
micólicos) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la
propiedad de resistir la decoloracíón con alcohol-ácido, después de la tinción con
colorantes básicos. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento
para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al
suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de
lo ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias. Por
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

otro lado, el calentamiento aumenta la energía cinética de las moléculas del


colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que
resisten la decoloración son de color rojo y las que no, se ven de color azul ya que
se utiliza azul de metileno como tinción de contraste.

Funciones de la Pared Celular:


- Confiere forma y rigidez a la célula.
- Relacionada con la susceptibilidad a antibióticos.
- Proporciona toxicidad al hospedador.
- Capacidad antigénica: ácidos teicóicos y el antígeno somático.
- Involucrada en la digestión enzimática.
- Permite diferenciar grupos celulares.
- Bacterias que carecen de pared celular: Mycoplasma y formas bacterianas L.

Funciones de la Membrana Citoplasmática:


- Respiración celular y fosforilación oxidativa.
- Síntesis y excreción: precursores péptidoglucano.
- Enzimas y moléculas: replicación ADN.
- Síntesis y secreción: enzimas y toxinas.
- Permeabilidad selectiva: barrera osmótica.
- Transporta metabolitos.

Mesosomas: Repliegues o invaginaciones forman saco de membrana


citoplasmática.
- Mesosomas septales: participan en los procesos de fisión binaria.
- Mesosomas laterales: función excretora, síntesis de hormonas.

Citoplasma: Sistema coloidal formado por 85% agua y 15 % minerales y enzimas.


Área citoplasmática. Área nuclear o cromatina. Porción líquida o fluida.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Ribosomas: Gránulos 18 a 20 nm diámetro, formados por proteínas y ARN.

Nucleóides: Cromosomas circular, material extracromosómico, doble hebra de


ADN, ARN, sin membrana nuclear ni cuerpo mitótico.

ELEMENTOS FACULTATIVOS

CÁPSULAS:
Tiene importancia con respecto a la virulencia, los que tienen cápsula no son tan
fácilmente fagocitados. Permite la clasificación morfológica. Para colorearlas hay
que utilizar coloración negativa.
- Material viscoso externo a la pared celular.
- Rígidos e integrales
- Constitución: polisacáridos extracelulares tipo dextran, levan, dextrin y celulosa.
Ejemplo: Klebsiella pneumoniae y Streptococcus pneumoniae

GLICOCALIX:
Capas externas forman marañas de fibrillas, polisacáridos con glicoproteínas,
polialcoholes y aminoazucares.
Ejemplo: Streptococcus mutans y gonococos.

FLAGELO:
Apéndices filamentosos extracelulares, helicoidales, formados por flagelina,
motilidad celular y capacidad antigénica.

Estructura del Flagelo:

 Gancho:
- Refuerzo proteico
- Porción de proteínas sin flagelina.
- Unión del filamento a la parte motora del flagelo.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

 Filamento:
- Le da movilidad.
- Tiene capacidad antigénica.
- Formado por flagelina.

 Cuerpo basal:
- Anillo L Membrana externa.
- Anillo P péptidoglucano.
- Bastón.
- Anillo S Membrana interna.
- Anillo M Membrana interna.
DISPOSICIÓN DE FLAGELOS

Flagelos Polares Flagelos Perítricos

Monótricos Lofótricos Anfítricos

Ej: Vibrio cholerae Ej: Pseudomonas Ej: Spirillum Ej: Escherichia coli

Fimbrias o pilis: Filamentos cortos, compuestos de pilina.


- Pilis comunes o adhesivos (unión de células)
- Pilis sexuales (transmisión del material genético)
Ejemplo: Salmonella typhi.

Inclusiones citoplasmáticas: Reserva de nutrientes, mecanismo regulación o


almacenaje celular. Fase reposo o envejecimiento bacteriano.

- Vacuolas: De aire o de líquidos.


- Granulaciones: Reserva de energía. Ejemplo: ácido betahidroxibutílico.

ESPORAS BACTERIANAS:
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Estructuras de resistencias no de producción, tiene un nucleóide de ADN


enrolladas, citoplasma, membrana citoplasmática, resistente a la temperatura, es
una célula de latencia, son eliminadas en autoclave.

Ejemplo: Bacillus genero, Clostridia (Bacillus Gram positivas anaerobios) Ejemplos


de esporas bacterianas: Bacillus anthracis, Clostridium tetará y Clostridium
botulinum.

ESPORULACIÓN
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Durante este proceso la célula vegetativa se convierte en una estructura inerte y


termoresistente. Disminuye el contenido de agua del sistema coloidal del
citoplasma. La esporulación bacteriana no se produce durante el crecimiento
exponencial, sino únicamente al cesar el crecimiento como consecuencia de la
limitación de un nutriente esencial (fuente de carbono o nitrógeno). El proceso
completo dura 8 horas. Formación de complejos de dipicolinato de calcio y
presencia de genes específicos.

- Fase 0 Forma vegetativa: Condensación del ADN


- Fase I Material nuclear dispuesto en filamentos.
- Fase II Formación del tabique; separación de cromatina nuclear.
- Fase III formación de la preespora: Crecimiento del tabique de la espora
(invaginación)
- Fase IV Inicio de la formación de la corteza: Aparición del exosporio
- Fase V Formación de cubiertas: Incorporación de Ca2+; deshidratación adicional;
producción de SASPS y ácido dipicolínico; formación de la capa cuticular.
- Fase VI Maduración: Resistencia al calor y agentes químicos.
- Fase VII Espora madura: Lisis de la célula y liberación de la espora.

ESPORULACIÓN
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

GERMINACIÓN
La espora es capaz de permanecer en periodo de latencia durante muchos años.
Puede dar lugar a una célula vegetativa relativamente rápido. Este proceso se
realiza en tres pasos:

- Activación:
Se realiza fácilmente por el calentamiento de las endosporas recién formada,
durante varios minutos a una temperatura subletal pero elevada. Las endosporas
activadas quedan así condicionadas a germinar cuando se colocan en presencia de
los nutrientes adecuados.

- Germinación:
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Es normalmente un proceso rápido que ocurre en cuestión de minutos y supone la


pérdida de refringencia de la espora, un aumento en la capacidad de tinción por
colorantes, y la pérdida de la resistencia al calor y a sustancias químicas. En esta
fase se produce la desaparición del dipicolinato cálcico y de los componentes del
córtex, y se degradan las SASPS.

- Crecimiento:
Se caracteriza por un hinchamiento visible de la célula debido a una acumulación
de agua y por síntesis de novo de ARN, proteínas y ADN. Finalmente la célula
emerge una vez rota la cubierta de la endospora y se divide.

REACCIONES TINTORIALES
- Aumentar el contraste de las células con el medio que las rodea.
- Diferenciar grupos bacterianos.
- Presencia de estructuras internas.
- Tinción de Ziehl Neelsen: (4 tipos de colorantes)
- Tinción de Gram (Gram positiva: morado. Gram negativa: Rosado, Rojo fucsia)

TEMA V FISIOLOGÍA BACTERIANA.


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Composición química bacteriana

- Ácidos nucléicos 10 y 30 %
- Sustancias inorgánicas 2 y 14 % (materia seca celular)
- Agua 75 a 85 %
- Proteínas 50 a 80 % (materia seca celular)
- Carbohidratos 12 % (materia seca celular)
- Lípidos 10 a 15 %

La composición puede variar de una bacteria o otra pero su semejanza es la


composición de agua siempre es abundante.

Requerimientos para que las bacterias cumplan su metabolismo y se desarrollen:

FÍSICOS:
▪ Temperatura.
▪ Oxígeno.
▪ Iones de hidrógeno.
▪ Presión osmótica.
▪ Humedad.

QUÍMICOS:
▪ Agua.
▪ Fuente de energía.
▪ Fuente de carbono.
▪ Proteínas, lípidos.
▪ Factores de crecimiento.
▪ Iones inorgánicos.
▪ Fuentes de nitrógeno.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

REQUERIMIENTOS FÍSICOS:

 Temperatura
- Psicrófilos: Temperatura óptima 15 a 20°C, Rango -10 a 20°C.
Ejemplo: Bacillus psichrophilus

- Psicrótrofos: Temperatura óptima 20 a 30°C, Rango 0 a 30°C.


Ejemplo: Pseudomonas fluorescens, Descomponen los alimentos refrigerados.

- Mesófilos: Temperatura óptima 25 a 37°C, Rango -10 a 20°C.


Ejemplo: Bacterias patógenas, Flora normal del cuerpo.

- Termófilos: Temperatura óptima 50 a 55°C, Rango 25 a 90°C.


Ejemplo: Bacillus stearothermophilus.

 Condiciones de oxígeno
- Aerobias obligadas:
Ejemplo: Neisseria, Pseudomonas.

- Anaerobias obligadas o estrictas:


Ejemplo: Clostridium, Arqueobacterias metanogénicas.

- Anaerobias aerotolerantes: Bacterias del ácido toleran ciertas condiciones.


Ejemplo: (leuconostoc, Lactobacillus).

- Anaerobias facultativas: Viven en presencia y ausencia de oxígeno.


Ejemplo: Enterobacterias.

- Microaerofílica: Crecen a bajas concentraciones de oxígeno.


Ejemplo: Campylobacter.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

 Concentración de iones de hidrógeno (pH)


Acidófilas: pH < 6
Neutrófilas: pH 6 a 8
Alcalófilas: pH> 8

 Presión Osmótica: Presión que ejercen los solutos sobre las membranas
citoplasmáticas.
- Osmófilas: Resisten altas presiones
- Halófilas: Resisten altas concentraciones de sal. Ejemplo: Staphilococcus
(osmotolerantes) halobacterium.
- Sucrófilas: Resisten altas concentraciones de azúcar (sacarosa) Ejemplo:
Saccharomyce rouxii, Pseudomonas.

 Presencia de dióxido de carbono: Lo obtienen de la atmosfera. Capnófilas:


crecen mejor en altas concentraciones de CO2

 Humedad: Su peso seco es en agua y la mayoría requiere humedad porque el


75-85% de las bacterias es pura H2O.

REQUERIMIENTOS QUÍMICOS:
 Agua: Mayor composición para su crecimiento. Para mantener el medio
interno.

 Fuente de energía
- Luz solar: Fotosintéticas o fotótrofas.
- Compuestos químicos orgánicos e inorgánicos: Quimiosintéticos o quimiótrofos.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

 Fuente de carbono: Necesitan carbono para su metabolismo.


- Autótrofos o litótrofos: Sintetizan pero necesitan de material inorgánico.
- Heterótrofos u organótrofos: No sintetizan por lo que necesitan que le
suministren compuestos orgánicos.

 Requerimientos de carbono y energía


- Autótrofas fotótrofas: Cuando el radical dado de electrones es un compuesto
inorgánico, la energía proviene de la luz (fotótrofas) y el carbono del dióxido de
carbono.
- Autótrofas quimiótrofas: Toman la energía de reacciones de óxido - reducción y
el carbono del dióxido de carbono.
- Heterótrofas fotoheterótrofas: Su requerimiento nutricional está formado por
compuestos orgánicos y la fuente de energía de la luz (fotoheterótrofos).
- Heterótrofas quimioheterótrofas: la fuente de carbono son compuestos
orgánicos y la energía proviene de procesos de óxido – reducción.

 Proteínas: Las bacterias necesitan proteínas, aminoácidos, lipoproteínas,


proteínas de membrana y lípidos de membrana citoplasmática.

 Factores de crecimiento: Auxótrofas que necesita que se le adicione un factor


adicional para que pueda crecer. Ejemplo: ahumófilos, amina y factor 5 para
crecer.

 Iones inorgánicos: Fosforo (ácidos nucleicos), magnesio (cofactor en ciertas


enzimas), potasio, hierro, sodio, manganeso, zinc, cobre y cobalto.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

 Fuentes de nitrógeno: Existen tres procesos de fijación

- Reducción de asimiladora de nitratos: Bacterias aerobias.

Nitrato → Nitrito → Oxido de nitrógeno → Hidroxilamina → Amoniaco


NO3 NO2 NO NH2O2 NH3
NITRATO REDUCTASA NITRATO REDUCTASA

- Reducción desasimiladora de nitratos: Bacterias anaerobias y anaerobias facultativas.

Nitrato→ Nitrito→ Oxido de nitrógeno → Nitrógeno + Óxido Nitroso + Amoniaco


NO3 NO2 NO N2 NH3
NITRATO REDUCTASA NITRATO REDUCTASA Aceptor de electrones

- Fijación del nitrógeno: (klebsiella)

- Asimilación del amoniaco: Amoniaco producto inicial de todos los procesos.

- Formación de ácido glutámico vía glutamato deshidrogenasa (Cuando la


concentración de amoniaco es alta)
NH3 + α-cetoglutarato + NDPH + H
↕ Glutamato deshidrogenasa
Glutamato + NADPH +H2O
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

- Formación de ácido glutámico a partir de la vía glutamina sintetasa y glutamato


sintetasa.

MEDIO DE CULTIVO
Sustancias naturales o artificiales, en los cuales los microorganismos encuentran los
requerimientos necesarios para desarrollarse y cumplir sus actividades
metabólicas.

 Origen:
- Vivos: Ej. Huevo embrionario.
- Naturales: Ej. Leche, sangre, papa.
- Artificiales: Ej. Agar o caldo nutriente.

 Estado físico:
- Líquidos: Caldo
- Sólidos: Agar
- Semisólidos: Concentraciones de agar, gelatina

 Composición química:
- Complejos: Son aquellos medios de cultivo en los cuales se desconoce su
composición.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

- Químicamente conocidos: Son aquellos medios de cultivos en los cuales se


conoce su composición, son conocidos, están estandarizados.

 Utilidad:
- Básicos o comunes: Permite el crecimiento de todo tipo de microorganismos,
excepto los que necesitan condiciones especiales. Ej. Agar o caldo tripcasa de
Soya.
- Enriquecidos: Permite el crecimiento de microorganismos porque tiene añadido
factores de crecimiento. Ej. Agar sangre, agar chocolate.
- Selectivos diferenciales: Permite el crecimiento de microorganismos retrasando
el crecimiento de otros, debido a que tiene un componente añadido. Ej. Agar
manitol salado, agar MacConkey.
- Diferenciales: Permite la diferenciación de microorganismos basados en su
apariencia. Ej. Agar kligler, triple azucar hierro
- Medios de enriquecimiento: Medios selectivos e incubaciones adecuadas para
aislar microorganismos de muestras naturales. Ej. Caldo tetrationato, caldo
selenito.
- Medios de transporte: Preparado para servir como almacenamiento temporal a
especímenes transportados o en transferencia; manteniendo su viabilidad y
concentración. Ej. Medio stwart, Cary Blair.
- Medios para ensayo: Ej. Especiales para vitaminas y antibióticos.
- Medios de recuento:

Colonias: Masas visibles de células que se forman por la división de una o varias
células, el tamaño, textura, forma y color es propio de cada organismo.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA VI METABOLISMO BACTERIANO.

METABOLISMO:
Reacciones químicas que ocurren dentro de la célula, producen o utilizan energía
para actividades celulares. Se pueden obtener productos.

Reacciones Catabólicas (Energéticas): Descomposición de sustratos en sustancias


sencillas, con liberación de energía de degradación, las células obtienen energía.

Reacciones anabólicas (Biosíntesis): Utilizan sustancias sencillas y energía


proveniente del metabolismo catabólico para síntesis componentes celulares.

Metabolismo intermediario: Todo lo que ocurre en los productos intermedios.

ENZIMAS:
Moléculas muy grandes de elevado peso molecular, son catalizadores biológicos de
naturaleza proteica.

Propiedades físico-químicas de las enzimas:


- Proteína de elevado peso molecular.
- Termolábiles.
- Precipitan con etanol o elevadas concentraciones de sales inorgánicas.
- No difunden a través de membranas semipermeables.
- Pueden ser apoenzimas.

Condiciones que afectan la acción enzimática:


- Concentración de la enzima.
- Concentración del sustrato.
- Temperatura.
- Inhibidores.
- pH.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Funciones de las principales clases de enzimas:


- Oxidoreductasas: Regulan los procesos de oxido-reducción., transferencias de
electrones, átomos de hidrógeno.
- Transferasas: Se encargan de transferir de una sustancia a otra. Grupos
funcionales, fosfatos, metilos.
- Hidrolasas: liberan moléculas de agua. Reacciones de hidrólisis.
- Liasas: Forman o rompen dobles enlaces.
- Isomerasas: Permiten los cambios y transforman en isómeros.
- Ligasas: Formación de enlaces con hidrólisis de ATP.

Reacciones oxido-reducción: Utilizan energía contenida en los nutrientes.


- Oxidación: Pérdida de electrones.
- Reducción: Ganancia de electrones.
En bacterias los sistemas de oxido-reducción incluyen respiración y fermentación.

Respiración: Reacciones de liberación de energía (oxidaciones) que ocurren en la


célula, el sustrato es oxidado completamente a CO2 y H2O.
- Respiración aeróbica: utiliza oxígeno molecular como aceptor final de
electrones.
- Respiración anaeróbica: utiliza compuesto inorgánico diferente al oxígeno como
aceptor final de electrones.

Fermentación: Eventos donde las bacterias anaerobias facultativas u obligadas


utilizan un compuesto orgánico como dador y aceptor final de electrones.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

REACCIONES CATABÓLICAS. (Degradación de sustrato):

1.- METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS

a.- Glucólisis o ruta metabólica de Embden-Meyerhof-Parnas: Ruta bioquímica


mediante la cual se fermenta la glucosa para producir energía (ATP) y varios
productos resultantes de la fermentación.

Fase I Reacciones preparatorias:


- No se tienen reacciones redox.
- No hay liberación de energía.
- Hay consumo de energía por parte de la glucosa.
- Se obtiene gliceraldehido 3 – fosfato.
- Degradación de Carbohidratos.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Fase II Oxidación:
- Se genera energía.
- Se genera dos moléculas de ATP.
- El gliceraldehido 3-fosfato se oxida hasta piruvato.
- Se producen dos moléculas de piruvato.

Fase III Formación Productos de Fermentación:


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Por cada molécula de glucosa metabolizada se producen:


- Dos moléculas de piruvato.
- Cuatro moléculas de ATP.
- Se consumen dos moléculas de ATP por lo que la ganancia neta está
representada por dos moléculas de ATP.
- El NADH originado a partir de reacción de 3 – fosfo – glicerato fosfato
representa la segunda forma de energía obtenida, que puede ser convertida
después en ATP en presencia de oxígeno.

b.- Vía de las pentosas fosfatos: Se da de manera simultánea con la glucolisis, tiene
una diferencia con la glucólisis que el producto final no es energía, da como
resultado ribosa – 5 – fosfato, produce ARN y ribosa que se convierte en
desoxirribosa y da origen al ADN, es decir ayuda a construir moléculas de ARN y
ADN. Ruta multifuncional: Puede ser utilizada para degradación de hexosas,
pentosas y otros carbohidratos. Funciona en condiciones aerobias y anaerobias. No
producen energía. Aportan precursores biosintéticos que se emplean para la
síntesis de nucleótidos ADN y ARN.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

c.- Ruta de Entner Doudoroff: Ruta donde hay incorporación de glucosa, se da en


un grupo selecto bacteriano, forma piruvato y gliceraldehido – 3 – fosfato para
incorporarlo, para obtener más energía la cual producen piruvato.

Ruta usada por un número limitado de microorganismos, aerobios y anaerobios.


Bacterias Gram negativas: Pseudomonas, Rhizobium, Xhantomonas, Azobacter y
Zymomonas.

La producción de energía es de dos moléculas de ATP por lo que la ganancia neta es


de una molécula de ATP por cada molécula de glucosa, no se gana NADH.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

VÍAS DE DEGRADACIÓN DEL PIRUVATO:

a.- Procesos fermentativos: Bacterias heterofermentativas y homofermentativas.

FERMENTACIÓN PRODUCTOS MICROORGANISMO

Homoláctica Ácido láctico Streptococcus


Pediococcus
Lactobacillus (algunos)
Hetero Clásica Ácido láctico (mitad de la Leuconostoc
glucosa) Lactobacillus
CO2
Ácido fórmico
Ácido acético
Ácido Mixta Ácido láctico Bacteria entéricas:
Ácido acético Escherichia
Ácido succínico Enterobacter
Ácido fórmico
Etanol
Butanodiótica 2,3-Butanodiol Bacteria entéricas:
Etanol Klebsiella
Ácido láctico Enterobacter
Alcohólica Etanol Levaduras
CO2
Butírica Ácido butírico Anaerobias esporulados:
Ácido acético Clostridrium butyricium
CO2
Propiónica Ácido propiónico Propionibacterium
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

b.- Procesos respiratorios: Ciclo del ácido cítrico, del ácido tricarboxílico o de
Krebs.
- Propulsores biosintéticos.
- Produce energía: (NADP, GTP, NADH)
- Usado por la respiración.
Ruta metabólica presente en los organismos aerobios, facilita el consumo de
oxígeno y suministra intermediarios para biosíntesis de aminoácidos, ácidos grasos
y bases nitrogenadas.

Ganancia neta de ATP durante el ciclo de Krebs:


15 moléculas de ATP por 2 piruvatos:
30 moléculas
4 NADH: 3 ATP / NADH: 12 ATP
1 FADH: 2ATP / NADH: 2 ATP 15 Moléculas de ATP en el ciclo de Krebs
1 GTP: 1 ATP / GTP: 1 ATP

Más 6 ATP (Reoxidación NADH) Glucólisis


Más 2 ATP (Glucólisis)

TOTAL: 38 moléculas de ATP → Procariotas


30-32 moléculas de ATP → Eucariotas

Propulsores para la síntesis de aminoácidos en la vía biosintética.


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

CICLO DE KREBS

c.- Ciclo del glicoxilato: NH3


- Se da alternativo al ciclo de Krebs, se da cuando se trunca algún paso del ciclo
de Krebs.
- Dirigida a la utilización de ácidos de dos o tres átomos como fuente de carbono.
- Compuesto de la mayoría de las reacciones del ciclo de Krebs, además de dos
enzimas adicionales.

Isocitrato liasa: Isocitrato → Succinato y glicoxilato


Malato sintetasa: Glicoxilato y acetil CoA → Malato
Malato → Oxalacetato
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

d.- Cadena transportadora de electrones, sistema de citocromos o cadena


respiratoria:
- Constituye una serie de reacciones de óxido – reducción, es decir, secuencia de
reacciones óxido – reducción para la generación de ATP.
- Capta electrones a partir de compuestos reducidos y transfiere al oxígeno con
formación de H2O.
- Durante el proceso se libera energía para sintetizar ATP a partir de ADP y
fósforo inorgánico mediante un proceso llamado fosforilación oxidativa.

Citocromo: son hemoproteínas que contienen hierro y actúan como último eslabon
de la cadena de respiración aerobia, transfiriendo electrones (H +) al oxígeno con la
formación de agua. (Se encuentra en microorganismos aerobios y anaerobios
facultativos)

e.- Ciclo de Kalvin:


Bacterias autótrofas para fijación de CO2 e incorporarlo como material celular,
requiere NADPH y ATP. Requiere dos enzimas claves: ribulosa bifosfato carboxilasa
y fosforibulokinasa. En este proceso se produce fructosa – 6 – fosfato que puede
entrar al ciclo de la glucólisis o a otra ruta biosintética donde pueda ser degradada.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

CICLO DE KALVIN

2.- METABOLISMO DE PROTEÍNAS Y AMINOÁCIDOS.


- Proteasa: corta los enlaces peptídicos para formar péptidos.
- Peptidosa: corta los péptidos en aminoácidos.

a.- Transaminación: Se forma un aminoácido nuevo, que se forma del grupo amino
del aminoácido y el grupo cetónico de otro. Intercambio de un grupo amino de un
aminoácido por un grupo ceto de un cetoácido para formar un aminoácido
diferente.

b.- Desaminación: Corta el grupo amino de un aminoácido, el grupo amino cambia


por un ceto.

c.- Descarboxilación: Llevar un grupo que constituye el aminoácido para formar


aminos reactivos. Pierde el grupo COO- para formar una amina.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

3.- METABOLISMO DE LÍPIDOS:

Eventos de preparación previa para que las bacterias puedan degradarla porque
son moléculas muy grandes, este evento lo hace la lipasa, convierte los lípidos en
glicerol y ácidos grasos. 6 CO2
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

INTEGRACIÓN METABÓLICA:

REACCIONES ANABÓLICAS:
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Productos resultantes de loa procesos anabólicos:


 Sustancias solubles específicas: Polisacáridos
 Toxinas:
- Endotoxinas: Ejemplo. Lípido A del fosfolípido de las paredes celulares Gram
negativas.
- Exotoxinas: Ejemplo. β-Lactamasas, Hemolisinas
 Antimicrobianos:
 Vitaminas:
- Vitamina K (ayudante de la coagulación).
- Vitamina B.
 Pigmentos: Autocianinos, quinonas, carotenoides, pirroles.
 Bacteriocinos: Ayudar a los procesos de colonización.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA VII REPRODUCCIÓN BACTERIANA. .

Crecimiento bacteriano: Incremento ordenado de componentes de un sistema


biológico en organismos unicelulares referido a aumento de la población. Aumento
del número de células.

Características:
- Depende de: la especie bacteriana, edad (joven de 24 a 72 horas), cultivo y de
condiciones ambientales (pH, composición del medio, temperatura, factores
inhibidores)
- Formación de estructuras celulares: componentes de la pared celular,
membrana citoplasmática, flagelos, ribosomas, cuerpos inclusión, complejo
enzimático.
- Se puede estudiar a nivel individual (ciclos biológicos) y poblacional (sistemas
biológicos).
Crecimiento Exponencial: El número de células se multiplican en un período
determinado de tiempo. Desarrollo progresivo 41=4 ; 42=8 ; 43=16……… el
crecimiento logarítmico alcanza un máximo y el tiempo de generación se acorta.

Tiempo de generación: Tiempo de duplicación, tiempo requerido para que una


población microbiana duplique su número.

Sistema de cultivo cerrado: Cultivo que se forma en condiciones iniciales, a medida


que pasa el tiempo se terminan los nutrientes y el cultivo puede caer.
- Se da en un recipiente los cuales pueden ser líquidos o sólidos.
- No existe aporte continuo de nutrientes, ni drenajes de células o de sustancias
de desechos.
- Sistema inusualmente empleado al laboratorio de microbiología.
- Se producen metabolismos tóxicos.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Sistema de cultivo diánxico: Cultivo en medio líquido que provee a la población


bacteriana dos fuentes de carbono de las cuales una es usada preferencialmente
por la bacteria.

Ejemplo: Glucosa / Lactosa; la bacteria va a degradar un carbohidrato donde sea


más fácil, donde consuma energía. Luego viene una etapa donde se degrada el
segundo sustrato ya que es la más difícil para la bacteria.

Sistema de cultivo Balanceado: Se mantienen constantes todos sus parámetros


nutricionales y ambientales, al agregársele un inóculo bacteriano, la población de
bacterias crece de forma constante.

Sistema de cultivo balanceado constante: Cultivo balanceado mantenido por


tiempo indefinido.

TIPOS DE SISTEMAS DE CULTIVOS BALANCEADOS CONSTANTE

Cultivo de control interno o turbidostato: Ajuste de densidad celular ningún factor


nutricional es limitante. Concentración bacterias regula el flujo de entrada y salida.

Cultivo de control externo o quimiostático: Permite añadir en forma continua


medio nuevo a un cultivo continúo, a una velocidad determinada, permite
controlar la densidad y la tasa de crecimiento. Hay crecimiento exponencial.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

FASES DE CRECIMIENTO BACTERIANO:


- Diseñada para un solo individuo bajo un sistema de cultivo cerrado.
- Se evalúan las cuatro fases del crecimiento bacteriano: Latencia, exponencial,
estacionaria y de declinación o muerte.
- Se aplica a poblaciones celulares y no a células individuales.
- Curva de crecimiento bacteriano se obtiene en un cultivo de bacterias o en un
sistema cerrado.

 Fase de latencia:
- Fase de adaptación al medio.
- No ocurre bioquímica.
- No ADN.
- La bacteria se prepara para degradar.
- Aumento componentes macromoleculares.
- Aumento de actividad metabólica.
- Aumento a la susceptibilidad a agentes químicos y físicos.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

- Condicionadas por: inóculo, células dañadas, transferencias de medio rico a


pobre.

 Fase exponencial:
- Células dividen activamente a velocidad constante.
- Replicación del ADN.
- Masa bacteriana aumenta exponencialmente.
- Condicionada por factores inherentes a la bacteria y ambientales.

 Fase estacionaria:
- Los nutrientes empiezan a escasear.
- Disminución del desarrollo
- Nº de nuevos microorganismos producidos es igual al número de células que
mueren.
- Condicionadas por disminución de nutrientes, producción de sustancias tóxicas.

 Fase de declinación o muerte


- Bacterias se reproducen más lentamente y predominan las células muertas.
- Condicionada por agotamiento de nutrientes y acumulación de productos
inhibitorios.

MÉTODOS PARA DETERMINAR EL CRECIMIENTO BACTERIANO:

Mediciones del número de células

1.- Conteo total de células


a. Conteo directo: Limitaciones: no diferencia células muertas de las vivas, células
pequeñas difíciles de observar, requiere tiempo y habilidad, requiere
suspensión celular densa. Se realiza con la cámara de Neubauer.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

b. Contadores electrónicos de partículas (tipo Coulter).

2.- Conteo de bacterias viables: Se refiere a la célula que se quiere cultivar.


a. Método de siembra en la superficie del agar
b. Método de vertido.

3.- Determinación de unidades formadoras de colonias


a. Método de diluciones seriadas: Tantas unidades de colonias por mililitros de
solución.
b. Método de asa calibrada.

4.- Determinación de la masa celular


a. Determinación del peso húmedo.
b. Determinación del peso seco (10 – 20 % del peso húmedo del sistema).
c. Determinación de densidad celular (se utiliza el espectrofotómetro).

5.- Recuento indirecto del número celular: Medida de consumo de nutrientes o de


la producción de algún metabolito por unidad de tiempo.

a. Determinación del nitrógeno total.


b. Medida de consumo de oxígeno y consumo carbónico.
c. Determinación de compuestos estructurales.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA VIII CLASIFICACIÓN DE LAS BACTERIAS.

DIVERSIDAD DE ORGANISMOS VIVOS

Los tres dominios de la vida:


▪ Eucariota.
▪ Eubacterias.
▪ Archaea.
- Nomenclatura binaria por Linneo: Sistema natural 1758.
- Primer sistema de clasificación bacteriana: Muller (1786), reino animal.
- Clasificación bacteriana actual: características fenotípicas, fisiológicas y
genotípicas.

SISTEMÁTICA: Ciencia general para todos los organismos, organiza, estudia:


diversidad, similitud, interrelaciones en organismos y cuyas características son:
- Morfología.
- Fisiología.
- Bioquímica.
- Ecología.
- Epidemiología.
- Biología molecular.

RAMAS DE LA SISTÉMICA

Taxonomía: Ciencia que se encarga de clasificar en base a su agrupación sistémica


de organismos. Sus herramientas claves son:

- Clasificación: ordenamiento de organismos de un sistema; los organismos en


grupos similares llamado taxo.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

- Nomenclatura: Asignar un nombre científico a los organismos que se organizan


en la clasificación, correcto y admitido, internacionalmente a organismos:
Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus.
- Identificación: Ubicación de microorganismo en un grupo taxonómico.
Filogenia: Es otro sistema de clasificación el cual estudia líneas de descendencia
evolutiva de organismos y se basa en micromoléculas: estudios de ADN, ARN
ribosomal, proteínas y macromoléculas celulares.
Rangos taxonómicos: Niveles de grupos de organismos dentro de una
organización.
Categoría taxonómica: Agrupación ordenada de microorganismos en taxones.
Taxón: grupos de organismos ubicados en cualquier nivel taxonómico.
Ejemplo: Neisseria meningiditis
Dominio Eubacteria
Reino Monera
Phylum Proteobacteria
Clase β-proteobacteria
Orden neisseriales
Familia neisseriaceae
Género Neisseria
Especie Neisseria meningiditis
Especie: (nivel más bajo) grupo de individuos genética y fenotípicamente similares.

VARIACIONES TAXONÓMICAS:
- Biotipo.
- Serotipo → serovariedad.
- Fagotipo.
- Clon.
- Cepa.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

REGLAS DE NOMENCLATURA:

1. Existe un solo nombre correcto para un microorganismo.


2. Los nombres que causen error o confusión deben ser rechazados.
3. Nombre científico se establece según la nomenclatura binomial Linneo 1753.
4. Binomio formado por género y especie. Aceptación universal.
5. Vocablos latinizados; subrayados (escrito a mano) o escrito en letras cursivas.
6. Género: letra inicial en mayúscula, singular, puede abreviarse terminaciones en
“us”, “um” “a” Ejemplo: Bacillus → Bacilo.
7. Especie en minúscula no se abrevia. Ejemplo: S. epidermidis.
8. Niveles taxonómicos escritos con grupos característicos.
- Tribu “eae” (no corresponde rango taxonómico)
- Familia “aceae” Ejemplo: Enterobacteriaceae
- Orden “les”
- División “es” Ejemplo: Gammaproteobacteriales
9. La especie adquiere validez una vez publicada en revista reconocida
internacionalmente.

CRITERIOS PARA ESTABLECER CLASIFICACIÓN BACTERIANO

- Rasgos estructurales (Forma, Tamaño, movimiento, estadio en reposo,


reacciones tintoriales).
- Bioquímicas y nutricionales (comportamiento a diferentes sustratos).
- Formación de esporas.
- Características fisiológicas (oxígeno, temperatura, pH, respuesta
antimicrobiana).
- Características serológicas (rango que tienen los microorganismos).
- Rasgos ecológicos (agua, suelos, cuerpo, piel, nasal).
- Rasgos genéticos (composición de ADN, homología entre organismos).
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

PASOS PARA LA IDENTIFICACIÓN BACTERIANA EN EL LABORATORIO CLÍNICO

1. Aislamiento y obtención de cultivo puros en medios sólidos con agar.


▪ Separar poblaciones bacterianas en células individualmente: colonias aisladas.
▪ Consideran propiedades bacterianas: proporcionales condiciones optimas de
desarrollo.
2. Morfología de las colonias. Pueden variar en:
▪ Tamaño.
▪ Forma.
▪ Color.
▪ Olor.
▪ Textura.
▪ Grado de adherencia.
3. Morfología macroscópica y reacciones tintoriales:
▪ Forma.
▪ Tipo de agrupación.
▪ Estructuras bacterianas.
▪ Reacción frente a determinada coloración.
4. Características bioquímicas.
▪ Determinar la actividad de una vía metabólica, a partir de un sustrato que se
incorpora a un medio de cultivo.
5. Susceptibilidad a los microbianos.
6. Epidemiología:
▪ Permite conocer la distribución y diseminación de un microorganismo patógeno
en una comunidad.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TIPOS DE CLASIFICACIÓN

1. Clasificación taxonomía numérica o taxonométrica: Grado de similitud


existente entre dos microorganismos, utiliza un amplio número de cepas y
relaciona las propiedades fenotípicas.

a.- Coeficiente de similitud de Jaccord

b.- Coeficiente de similitud simple

a: número de características presentes en ambas cepas.


b: características presentes solo en la primera cepa.
c: número de características presentes en la segunda cepa.
d: número de características repetidas en ambas cepas.

2. Clasificación genética: Variaciones del genoma en tamaño, composición y


secuencia de bases de nucleótidos.
a. Tamaño del genoma.
b. Porcentaje guanina citosina (G – C).

c. Secuencia de bases de nucleótidos


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

PRINCIPALES CLASIFICACIONES TAXONÓMICAS

▪ Zoph.
▪ Lehmann y Neumann.
▪ Winslow.
▪ Flugge.
▪ Orla – Jensen.
▪ Castellani y Chalemrs.
▪ Bergey.
▪ Mizula.
▪ Buchanan.
▪ Weese y Olsen.

MANUAL DE SISTEMÁTICA BACTERIANA DE BERGEY


Compendio de información estándar y molecular de todas las especies procariotas
reconocidas, contiene claves dicotómicas e información sistemática útiles para
propósito de identificación.

Ubicación de los microorganismos según 2da edición: 2001 – 2011

Volumen I (2001) Arquea, cianobacterias y géneros fotótrofos y géneros


profundamente bifincados.

Volumen II (2005) Proteobacteria

Volumen III (2009) Firmicutes: Bacterias Gram positivas

Volumen IV (2010) Bacteroidetes, Spirochaetes, Tenericutes (Mollicutes),


Ácidobacteria, Fibrobacteria, Fusobacteria, Dictyoglomi, Gemmatimonadeles,
Zentisphaerae, Verrucomicrobia, Chlamydiae y Planctomucetes.

Volumen V (2011) Actinobacterias.


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA IX GENETICA BACTERIANA.

GENOMA DE LAS PROCARIOTAS

Genética: Estudia variabilidad y herencia de las características de un organismo.


Principal herramienta para entender los microorganismos moleculares por las
cuales la célula funciona.

Genoma: Genes y secuencias de ADN, elementos genéticos obligatorios y


dispensables.

Cromosoma: Elemento obligatorio del genoma constituido por ADN.

Gen: Segmento de ADN unidad funcional, información genética.

ADN: Sustancia química responsable de la transmisión hederitaria.

ARN: transmisión, información codificada en ADN para síntesis de proteína


mediada por la transcripción y traducción genética.

Catacterísticas del genoma bacteriano:


- Nucleóides: 60% ADN ; 30% ARN ; 10% proteínas.
- Cromosoma circular gigante de ADN, doble hélice, modelo clásico de Watson y
Crick.

Estructura del ADN:


- Nucleótidos: Unidad estructural básica ADN.
- Base nitrogenada.
- Azucar (Desoxirribosa) y fosfato.

Filamentos de polinucleótidos: Unión nucleótidos individuales por puentes


fosfodiéster entre azucares de nucleótidos adyacentes.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Doble hélice de ADN: Conformados por dos filamentos polinucleótidos unidos por
puente de hidógeno entre las bases nitrogenadas complementerias.

Estructura del ARN: Costituido por un filamento de una sola cadena sin formar
doble hélice, el azúcar es una ribosa. El ARN puede expresarse de las siguientes
maneras: ARNM; ARNT; y ARNR.

Comparación entre ADN y ARN:

ADN: - Doble hélice. - Desoxírribosa. - C, G, A, T. - Dos cadenas.


ARN: - Una hélice. - Ribosa. - C, G, A, U. - Una cadena.

Tamaño del cromosoma bacteriano:


- Expresado en función peso molecular, unidades Dalton.
- Sistema de miles de pares de nucleótidos 1 Kilo de bases (KB)= 1000 bases.
- Rango entre 70 KB (Mycoplasma genitalium) y más de 1200 KB (Cianobacterias,
Actinomycetos).
- Bacterias típicas (Escherichia coli) cromosoma de 4700 pares de kilobases (KB).

Organización del cromosóma bacteriano:

- Doble hélice ADN está superenrrollada sobre sí misma como una banda elástica
entrecruzada.
- Superenrrollamiento: Equilibrio entre ADN girasa (Topoisomerasa II) que
favorece la superhelicidad negativa (trabaja en sentido inverso que tiene
naturalmente el ADN) y ADN topoisomerasa I que relaja la superhelicidad
negativa.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

El ADN puede estar enrrollado en dirección negativa o positiva.

- Superenrrollamiento negativo: ADN dobla sobre sus ejes. Dirección opuesta


enrrollamiento hacia la derecha de la hebra de ADN para formar la doble hélice.
Predominante en la naturaleza.
- Superenrrollamiento positivo: Mediado por enzima girasa reversa.
Frecuentemente organismos extremófilos. Importante protección del ADN
contra elementos desnaturalizantes.

Material genético presenta interacciones con proteínas estructurales (HLP,


proteínas similares a vitaminas, histonas) ayudan a mantener la estabilidad de la
forma superenrrollada.

ELEMENTOS GENÉTICOS NO CROMOSÓMICOS:

Plásmidos: Elementos genéticos extracromosómico con capacidad de replicación


autónoma que no es necesario para el crecimiento.
▪ Moléculas circulares ADN bacteriano.
▪ Replicación autónoma.
▪ Poseen origen replicación y proteínas reguladoras.
- Tamaño entre 1 y 1000 KB.
- Transportan % a 100 genes.
- Número de copias celulares depende de la relación entre replicación
cromosómica y del plásmido.
- Plasmidos grandes: 1 a 2 copias celulares.
- Plásmidos pequeños: 50 a 100 copias celulares.
- No codifican funciones esenciales bacterianas.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Tipos de plásmidos:

▪ Plásmidos conjugativos o autotransmisibles: Se transmiten entre cepas de


conjugación.
▪ Plásmidos no conjugativos: Carente de la propiedad de conjugación.
▪ Episomas: Se integran al cromosoma bacteriano.
▪ Plásmidos crípticos.
▪ Plásmidos de resistencia (R): Resistencia a antibióticos.
▪ Plásmidos sexuales: Codifica el pili sexual.
▪ Plásmidos de virulencia: Transportan genes patógenos.
▪ Plásmidos de Col: Producen y codifican algunas proteínas que atacan algunas
bacterias.
▪ Plásmidos degradantes: Degradan sustancias como metales, tolueno, alcanfor.
▪ Plásmidos estafilococos: Transportan genes de resistencia para diferencias
antimcrobianas.

Elementos genéticos transponibles:

- Piezas de ADN en movimiento al azar de un sitio a otro del cromosoma a un


plásmido o viceversa.
- Incapacidad de autoreplicación.
- Transposición mediada por recombinación sitio específico.
- Transposición acompañada por duplicación queda una copia en sitio origina y
aparece una copia en nueva localización.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Tipos de elementos genéticos transponibles:


a. Secuensia de inserción (IS):
- Miden de 700 KB a unos pocos KB.
- Extremos inversamente repetidas, reconocidas por enzima transporasa.
- No confieren características fenotípicas a las bacterias.
- Se transponen con baja frecuencia en genoma.

b. Transposones (TN):
- Tamaño varia de 2 a 50 KB.
- Terminales inversamente repetidos.
- Tiene al menos dos genes: Codifican transporasa y propiedad no relacionada
con transcripción.
- Rango no genotípico no detectable.

c. Transposones conjugativos.
- Promueven diseminación de una bacteria a otra por conjugación.

Replicación del ADN:

- Duplicación de la molécula de ADN que permite obtener dos hebras hijas a


partir de una molécula madre.
- Secuencia de cadenas polinucleótidos se duplican exactamente.
- Forma una copia de cada molécula original.
- Apareamiento de bases complementarias.
- Adenina aparea específicamente con timina y guanina con citocina.
- Reproducción semiconservativa y bidireccional.
- Proceso replicativo se divide en iniciación, elongación y terminación.
- Resultado final: dos dobles hélices híbridas.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

1. Iniciación:
- Enzima helicasa: desenrrollamiento de doble hélice en origen de la replicación
(ORIC).
- En un solo cromosoma varios origenes de replicación.
- A cada hebra se unen las proteínas de unión ADN (SSBP).
- Origen replicación reconocido por las proteínas de iniciación: cebadores para la
polimerización de nuevos nucleótidos.

2. Elongación:
- Forman horquilla de replicación que origina dos hebras: cadena líder y cadena
rezagada.
- Actúan ADN polimerasa: forma bidireccional.
- Complejo multienzimático actúan incorporando nucleótidos a nuevas cadenas,
utiliza molde una hebra de cadena antigua.
- Cadena líder: sintesis de polinucleótidos por acción de ADN polimerasa III.
- Cadena rezagada: forma discontínua.
- ADN polimerasa oposición movimiento de horquilla de replicación.
- Primasa media acción de cebadores, síntesis fragmentos de cortes
polinucleótidos: (1000 bases) y fragmentos de Okazaki.
- Fragmentos de Okazaki unidos por ADN ligasa formación de hebras hijas
simultaneamente en cadena líder y rezagada.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

3. Terminación:
- Sitio de terminación: Las dos moléculas hijas se separan, ocurren los procesos:
corrección ADN. Superenrrollamiento.

Modelo de replicación del ADN bacteriano:

- Modelo theta θ - Modelo sigma σ o círculo


rodante.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA X TIPO DE VARIACIONES.

Genotipo: Referido a la constitución precisa de los genes de un organismo.

Fenotipo: Propiedades observables del organismo y es producto de la expresión del


genotipo.

Variaciones genotípicas o Mutaciones: cambios no heredados en secuencia del


ácido nucléico que conforma el genoma de un organismo.

TIPOS DE MUTACIONES:

 Mutaciones espontáneas: Acontecimientos producidos al azar surgen


espontáneamente.

a. Mutaciones puntuales:
- Microinserciones: Mutación por inserción (agregan un par de bases
nitrogenadas)
- Microdetecciones: Produce un par de bases nitrogenadas.

b. Mutacion por sustitución de pares de bases:


- Sustitución por transición: se cambia una base púrica por otra.
- Sustitución por transversión: se cambia una base púrica por una pirimídica.

c. Mutaciones silentes: Variaciones que no conducen a cambios en la proteína


decodificada.
d. Mutaciones en sentido erroneo: Inserción de un aminoácido didtintos en las
proteínas.
e. Mutaciones sin sentido: Cambia el cordón que codifica por un aminoácido por
cordón pasado.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

 Mutaciones Inducidas: Acontecimientos producidas por acción de agentes


físicos y químicos.

a. Inducida por agentes físicos:


- Calor: Desaminación de nucleótidos.
- Luz ultravioleta: Forman dimeros pirimidina.
- Radiaciones ionizantes: Rupturas estructurales en la cadena de ADN.

b. Inducidas por agentes químicos:


- Análogas de las bases de los nucleótidos: desestabilización y
desemparejamiento y errores durante la replicación.
- Mutaciones con cambios de entramado: adición o detección de una sola base.
- Sustancias químicas ADN reactivo: actúan directamente sobre el ADN conducen
a modificaciones de bases normales.

Tipos de mutaciones bacterianas:

- Tolerancia aumentada a agentes inhibitorios.


- Capacidad de fermentación alterada.
- Deficiencias nutricionales.
- Cambios en la morfología de cadenas.
- Producción de pigmentos.
- Cambios en la estructura química celular.
- Resistente a la acción de bacteriófagos.
- Cambios morfológicos (esporas, cápsulas y flagelos).
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

MECANISMO DE TRANSFERENCIA DE GENES:

a. Transformación: Incorporación del ADN libre proveniente del medio que rodea
al microrganismo.
- Realizado por células competentes.
- Competencia: estado transitorio, sucede al final de la fase exponencial de
crecimiento y capacita la célula para interacciones con ADN exogeno y captarlo.

b. Transducción: Intercambio de información genética por bacteriófagos.


- Transducción generalizada: Se refiere al empaquetamiento accidental o
aleatorio de ADN de la célula huésped en la cápside de la partícula de fago.
- Transducción especializada: es el empaquetamientode genes específicos de la
celula huésped en el profago transductor.

c. Conjugación: Intercambio de genotipo que requiere contacto célula – célula.


- Se establece el contacto extracelular.
- Replicación plásmido F.
- Una cadena simple de plásmido F para a través del tubo sexual a la célula
receptora: anillo de ADN bicatenario.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

VARIACIONES FENOTÍPICAS:
- Morfológicas: Bacilos cortos y móviles se convierten en bacilos largos e
inmóviles debido al agotamiento de nutrientes.
- Cromógenas: Algunas especies de bacterias producen coloraciones.
- Enzimáticas: Algunas bacterias producen enzimas en presencia de
determinados sustratos, por ejemplo, penicinilasa en presencia de penicilina.
- De tinción:
- Patógenas: Bacterias que producen toxinas según el ambiente en el que crecen.
Así Corynebacterium sólo lo hace si dispone de hierro en el medio.
- Sensibilidad a antibióticos: Hay bacterias que son sensibles en determinadas
condiciones pero no lo serán en otras.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA XI ACCIÓN DE LOS AGENTES FÍSICOS, QUÍMICOS Y ANTIMICROBIANOS.

Desinfección: Destrucción de microorganismos patógenos en su forma vegetativa,


aplicando agentes físicos o químicos sobre superficies inanimadas.

Esterilización: Método de control de crecimiento microbiano que elimina todos los


microorganismos viables presentes en un determinado material.

Condiciones para la selección de un ambiente antimicrobiano:


- Tipo o clase de microorganismo.
- Naturaleza del medio.
- Tiempo de exposición del agente.
- Numero de microorganismos.
- Intensidad y naturaleza del agente químico a utilizar.
- Temperatura aplicada a un agente químico.

AGENTES FÍSICOS, TIPOS Y MODO DE ACCIÓN:

1. TEMPERATURA:

a. Calor seco: Mecanismo de acción: Produce desnaturalización de proteínas y


aumento de electrolitos.
▪ Esterilización con aire caliente (Estufa): cristalería, objetos durante 1:30 a 60 –
180°C. Actúa sobre el citoplasma.

▪ Desecación: Se somete a calentamiento el microorganismo.

▪ Incineración (mechero): Para esterilizar asas y agujas de inoculación.


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

b. Calor húmedo: Mecanismo de acción: Desnaturalización y coagulación de


proteínas, causan la muerte celular. Actúa sobre membrana celular.

▪ Vapor a presión (Autoclave): 121°C a 15 libras de presión durante 15 mi., lo que


permitirá que todo estará esterilizado, medios de cultivo, telas, objetos de
caucho, es más rápido que la estufa.

▪ Tindalización: Calentar a 100°C por 30 min., incubar por 24 h repetir el


calentamiento e incubación (repetir 3 veces).

▪ Ebullición: prender y cuando rompa el hervor, se deja hirviendo de 10 a 15 min.

▪ Pasteurización:
- Lenta: 62,5°C por 30 min. seguida de enfriamientos rápidos (Lácteos).
- Rápida: 72,5°C por 16 seg. seguida de enfriamiento rápido (Cerveza).
- Ultrarápida: 85°C por 2 a 6 seg. seguido de enfriamiento rápido (lácteos y
cerveza).

c. Acción de temperaturas bajas:

▪ Temperatura de refrigeración: 4 y 7°C.

▪ Temperatura de congelación: Bajo 0°C (mantiene las bacterias con una larga
vida).

▪ Liofilización: Desecación con temperaturas bajas.


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

2. PRESIÓN OSMÓTICA:

a. Ambiente isotónico: Hay equilibrio en las sustancias.

b. Ambiente hipotónico (Plasmóptisis): el contenido de soluto es mayor en el


interior de la célula, la célula bacteriana responde tratando de mantener la
concentración equilibrada, entra agua y luego estalla.

c. Ambiente hipertónico (Plasmólisis): Mayor contenido de soluto está en el


medio, entonces la célula tratará de sacar líquido desde su interior, perdiendo
líquido y se arruga.

3. RADIACIONES:

a. Radiaciones ionizantes: Tienen efectos letales y son mutagénicos produce


efecto sobre el ADN (ruptura o mutaciones).

▪ Fuente:
- Rayos catódicos 0,001 nm.
- Rayos γ 0,001 – 0,14 nm.
- Rayos χ 0,14 – 15nm.
- Isótopos radioactivos.

▪ Aplicaciones: Esterilización de material médico, farmacéutico, quirúrgico,


alimentos envasados.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

b. Radiaciones no ionizantes:

- Luz ultravioleta: Produce cambios en las moléculas que la absorben (proteínas,


ARN, ADN). Acción: Absorción de luz ultravioleta por ADN producen dímeros de
piridimina (tinina) altera la replicación y transcripción de ADN.

- Luz visible: Moléculas (riboflavinas, citocromos) absorben produciendo


fotoxidaciones en proteínas y ácidos nucleicos.

4. ACCIÓN MECÁNICA:

a. Filtración:
- Filtros de profundidad: Hoja fibrosa de papel, asbesto o fibra de vidrio.

- Membranas filtrantes: Es una estructura continúa y la filtración se produce por


efectos electrostáticos.
▪ Cámara de Chamberland – Pasteur.
▪ Cámara de berkefeld
▪ Cámara de vidrio poroso.
▪ Cámara de éter – celulosa.

- Filtro núcleo – pore: Partículas de policarbonatos perforados por radiación y


sustancias químicas.

b. Vibraciones sónicas y ultrasónicas:


- Desnaturalización de proteínas.
- Cavitación celular.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA XII AGENTES QUÍMICOS ORGÁNICOS E INORGÁNICOS.

Agente bactericida: Cualquier agente que produce la muerte bacteriana.


Agente bacteriostático: Inhibe el proceso de multiplicación de las bacterias sin
llegar a destruirlas.
Agente antimicrobiano: Sustancia que mata o inhibe el crecimiento de microbios.

AGENTES QUÍMICOS, TIPOS Y MODO DE ACCIÓN:

1. AGENTES QUÍMICOS INORGÁNICOS:


a. Ácidos y alcalis: Mecanismo de acción: Elevado poder bactericida actuando
sobre la membrana y pared celular.
Ejemplo: Ácido clorhídrico y ácido sulfhídrico.

b. Sales minerales: Mecanismo de acción: Bacteriostáticos, reacción reversible


con sulfihídridos de proteínas celulares. Bactericidas, desnaturalización
irreversible de proteínas.
Ejemplo: Nitrato de plata y sales de mercurio.

c. Halógenos u oxidantes: Mecanismo de acción: Bactericidas, inactivación de


proteínas enzimáticas, conversión de radicales –SH en disulfuros –S-S, atacan
radicales amino, grupo indol y tirosina.
- Yodo: Tintura de yodo.
- Cloro: Cloro gaseoso, hipoclorito y cloraminas.
- Agua oxigenada.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

2. AGENTES QUÍMICOS ORGÁNICOS:


a. Alcoholes: Mecanismo de acción: Bactericida, no esterilizante, actuan en las
membranas celulares y desnaturaliza las proteínas.
Ejemplo: Etanol, Isopropanol.

b. Fenoles: Mecanismo de acción: Bactericida, actúan en las membranas celulares,


inactivación irreversible de oxidasas y deshidrogenasas, provocan
desnaturalización protéica.
Ejemplo: Fenol y derivados fenólicos (Cresoles, hexaclorofenol, hexilresolcrinol)

c. Aldehidos: Mecanismo de acción: Agentes esterilizantes, actúan en proteínas y


ácidos nucléicos, activos en presencia de materia orgánica y de acción rápida.

- Formaldehido o aldehido fórmico: Usado para esterilizar en frio, áreas cerradas


por ser nocivo e irritante de la piel.
- Glutaraldehido: Menos tóxico, no cancerígeno, más efectivos (8 veces más que
la formalina) amplio espectro actividad antimicrobiana a pH alcalino.
- Formol: Gas soluble, al 40 % formalina, activo contra esporas, bacterias y virus.
La inhalación de sus vapores afectan el tracto respiratorio, ojos y la piel. Es
cancerígeno.
- Oxido de etileno: esterilizante gaseoso, acción lent, costoso y toxico para el
hombre.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

d. Colorantes: Mecanismo de acción: Bacteriostáticos o bactericidas según su


concentración, tienen acción antimicrobiana selectivas contra Gram positivas,
se une a grupos fosfatos de las nucleoproteínas , interfieren en biosíntesis de
ácidos y pared celular.
Ejemplos:
- Trifenilmetano o derivados anilina: Verde brillante, verde malaquita, violeta de
genciana, cristal violeta, fucsina básica.
- Derivados de la acridina o flavinas: Acriflavina, proflavina, tripoflavina. Usadas
en asepsias de heridas.

e. Detergentes: Mecanismo de acción: Bactericidas tensiactivos, actúan en la


membrana celular, porción hidrofóbica y una hidrofílica forman micelas.

- Detergentes catiónicos: Contra bacterias Gram positivas y Gram negativas.


Distorsión de la membrana celular, desnaturalización de proteínas, su actividad
es mejor a pH alcalino. Ejemplo: Sales de amonio cuaternario.

- Detergentea aniónicos: Actúan en la membrana celular con efecto de lisis, más


efectivos contra bacterias Gram positivas, su actividad es mejor en pH ácido.
Ejemplo: Jabones, saponinas, sales biliares, dodecil sulfato de sodio (SDS),
lamilsulfato sódico.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

f. Antisépticos y desinfectantes:

- Antisépticos: Sustancia química antimicrobiana que se aplican sobre tejidos


vivos o la piel e impiden su infección, sepsis o putrefacción. Son de baja
actividad tóxica.

- Desinfectantes: Agentes químicos que destruyen formas vegetativas pero no


esporas, son toxicas en tejidos vivos, se aplican en materiales inertes.

Características de un buen desinfectante:

▪ No volatil.
▪ Alta actividad bactericida.
▪ Costo moderado.
▪ Amplio espectro de acción.
▪ Más bactericida que bacteriostático.
▪ Estable en almacenamiento.
▪ Homogeniza uniformemente con diluente.
▪ Fácil penetración.
▪ Compatible con otras sustancias.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Valoración de desinfectante
▪ Determinación de coheficiente fenólico.
▪ Cepas: Salmonella typhi, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus.
▪ Hacer diluciones del fenol y el desinfectante problema.
▪ Sembrar las diluciones con la cepa, poner en contacto a 5, 10 y 15 minutos,
transferir a las placas o tubos con medio de cultivo estéril e incubarlo.
▪ Cálculo del coeficiente fenólico (CF): dilución desinfectante y fenol mata
microorganismos en 10 minutos pero no en 5 minutos.
▪ Coeficiente fenólico: inverso dilución infectante problema /inverso de la
dilución de fenol.
▪ Aplicable desinfectantes químicamente similares al fenol.
▪ Prueba de la concentración equivalentes: consiste en determinar la
concentracióndel desinfectante a ensayar que ejerce el mismo efecto sobre la
bacteria de referencia que otra concentración de un desinfectante tipo.
▪ Determinación de la toxicidad del desinfectante: Evaluar el potencial tóxico
mediante el llamado índice de toxicidad que es el cociente entre el poder
desinfectante y el poder tóxico.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA XIII ANTIBIÓTICOS Y AGENTES QUIMIOTERÁPICOS.

HISTORIA:
- Paracelso: Alquimista y médico suizo, empleó azufre, plomo y mercurio.
- Paul Ehrlich: compuesto 606, posteriormente salvarsan, quimioterapia 1 er
(Sífilis).
- Domagk: Rojo de prontosilsulfamidas.
- Alexander flemining 1929: Penicillium notatum.
- Chain y Florey 1940: Penicilina. P.Chrysogenum.
- Rene Dabos: Bacillus brevis. Tirotreicina y derivados gramicidina y tirocidina.
- Walsman: Streptomices grisens. Estreptomicina.
- Era antibiótica: A partir de 1945 se conocen más de 5000 antibióticos y más de
7000 derivados semisintéticos, solo 150 de usos clínicos.

Antibióticos: Sustancias químicas de bajo peso molecular producida por un ser vivo
o derivado sintético de ella que destruye o inhibe a microorganismos.

Quimioterápicos: Sustancias obtenidas por síntesis químicas capaces de inhibir o


destruir microorganismos de toxicidad suficientemente bajo para ser administrado
a un organismo para alcanzar o mantener concentraciones eficaces en los tejidos.

Antimicrobiano: Sustancia producida por un microorganismo o sustancia con


carácteres similares a un antibiótico elaborado de forma parcial o total por síntesis
química la cual a bajas concentraciones inhiben o destruyen microorganismos.

Espectro antimicrobiano: Rango de actividad de una sustancia contra un


microorganismo.

Sinergismo antibiótico: Combinación de dos antibióticos que tienen mayor


actividad bactericida juntos que por separados.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Antibiótico de amplio espectro: Antibiótico que actua sobre microorganismos


Gram positivos como Gram negativos del dominio bacteria.

PROPIEDADES DE UN BUENANTIBIÓTICO O BUEN ANTIMICROBIANO:


- Amplio espectro de acción.
- No tóxico al hospedero.
- No alergénico al paciente ni causar efectos colaterales.
- No elimina la flora bacteriana normal.
- No genera resistencia antimicrobiana.
- Activo en presencia de plasma, líquidos corporales, exudados.
- Hidrosolubles y liposolubes.
- Elevada potencia biológica.

CLASIFICACIÓN DE LOS ANTIMICROBIANOS:

a) Según su origen:
- Biológicos: Bacterias típicas: Polimixina → Bacillus polimixina.
Antimicrobiano: Cloranfenicol → Streptomyces venezuelae.
Hongos: Penicilina → Penicillium notatum.
- Sintéticos: Nitrofuranos y sulfamidas.
- Semisintéticos: Cefalosporinas de 2da, 3era y 4ta generación.
b) Según su espectro de acción:
- Amplio espectro: Cloranfenicol y tetraciclinas.
- Espectro medio: Penicilina G.
- Espectro corto: Polimixinas.

c) Según su forma de activación:


- Agentes bactericidas: β-Lactámicos.
- Agentes bacteriostáticos: Cloranfenicol.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

d) Según su estructura química:

1. β-LACTÁMICOS: Bactericida lento de amplio espectro que inhiben la ultima


etapa de la síntesis de la pared celular. Contienen un anillo betalactámico de
cuatro átomos heterocíclicos.

a. Penicilinas: (Ácido 6 – aminopenicilónico):

a.1. Penicilinas naturales (Penicilina G, V)


- Penicilina G o bencilpenicilina: Espectro de acción: Cocos, bacilos Gram
positivos y bacterias anaeróbias.
- Penicilina V o benzatina: Espectro de acción: Gram positivos (Streptococcus
pyogenes). Ejemplos: Fenoxietilpenicilina, fenoxifenilpenicilina.

a.2. Penicilinas resistentes a penicilinasas o penicilina M: Semisintéticos, cepas


resistentes a penicilina. Espectro de acción: Bacterias Gram positivas y Gram
negativas. Ejemplos: Meticilina y Oxacilina.

a.3. Aminopenicilinas: Espectro de acción: Cocos , bacilos Gram negativos y


bacterias anaeróbias. Ejemplos: Ampicilina, Amoxicilina.

a.4. Antipseudomónicas: Amplio espectro: Bacterias Gram positivas, Gram


negativas y anaeróbios. Ejemplos: Carboxipenicilina (Carbenicilina, Ticarcilina),
Ureidopenicilina (azlocilina, piperacilina).
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

b. Cefalosporinas (Ácido 7 – aminocefalosporánico):

b.1. Cefalosporina de primera generación: Espectro de acción: Cocos Gram


positivos, bacilos Gram negativos. Ejemplos: Cefalotina, Cefazolina, Cefalexina,
Cefradina, Cefadroxilo.

b.2. Cefalosporina de segunda generación: Espectro de acción: Anaeróbios,


Cocos Gram positivos mayor actividad frente a bacterias Gram negativas.
Ejemplos: Cefaclor, Cefamandol, Cefuroxima.

b.3. Cefalosporina de tercera generación: Espectro de acción: Cocos Gram


positivos y anaeróbios, mayor actividad frente a bacterias Gram positivas
intrahospitalarias. Ejemplos: Cefixima, Ceftibuteno, Ciftriaxoma, Ceftazidima.

b.4. Cefalosporina de cuarta generación: Espectro de acción: Bacterias


multiresistentes hospitalarias (Gram positivas y Gram negativas) Ejemplos:
Cefepima, Cefpiroma.

b.5. Cefalosporina de 5ta Generación: Espectro de acción: Staphylococcus


aureus, Streptococcus pneumonia, Pseudomona aeruginosa, Enterococcus.
Ejemplos: Ceftobiprol, Ceftarolina.

c. Carbapenem: Espectro de acción: Gram positivos y Gram negativos. Ejemplos:


Imipenem, Meropenem.

d. Monobactámicos: Resistentes a las betalactamasas. Espectro de acción: Gram


negativos, aeróbios. Ejemplos: Aztreonan, Camuronan.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

- Inhibidores de los betalactámicos: Ácido cavulámico, Tazobactam y Sulbactam.

2. GLICOPÉPTIDOS: Bactericidas de alto peso molecular, actúan en fase activa,


inhiben la pared celular en la fase exponencial. Espectro de acción: Gram
positivas. Ejemplos: Teicoplanina, Vancomicina.

3. POLIPÉPTIDOS: Espectro de acción: Variable, efectivas sobre Gram negativas,


inhiben la síntesis protéica. Ejemplos: Polimixinas B (Colistina), Bacitracina.

4. AMINOGLUCÓSIDOS: Contienen aminoazucares unidos por uniones glicosídicas.


Inhiben la síntesis de proteína actuando a nivel de ribosoma. Espectro de
acción: Enterobacterias y estafilococos. Ejemplos: Amikacina, Estreptomicina,
Gentamicina, Tobramicina.

5. MACRÓLIDOS: Espectro de acción: Actividad bacteriostática, actividad


antibacteriana completa. Ejemplos: Eritromicina (Se aplica a pacientes alérgicos
a la penicilina), Oleandomicina, Azitromicina.

6. ANFENICOLES: Bacteriostáticos y antimicrobianos de bajo peso molecular,


interfiere en la sítesis protéica. Espectro de acción: antibióticos de amplio
espectro, espiroquetas, rickettsias, clamidias, salmonelas y micoplasmas.
Ejemplos: Cloranfenicol, Tianfenicol.

7. LINCOSAMIDAS: Inhiben la síntesis protéica. Espectro de acción: Cocos Gram


positivos y anaerobios. Ejemplos: Clindamicina, Lincosamina.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

8. QUINOLONAS: Compuesto antibacteriano sintéticos que interaccionan con el


ADN girasa e impiden el superenrrollamiento del ADN bacteriano. Origen
químico y sintéticas, inhiben la replicación de ADN de las bacterias.

a. Quinolonas de primera generación: No fluoradas en el centro activo. Espectro


corto: Enterobacterias, Neisseria y Haemophilus. Ejemplos: Ácidos nalidíxico y
oxolínico.

b. Quinolonas de segunda generación: Fluoradas. Espectro amplio: bacterias Gram


negativas. Ejemplos: Norfloxacina, Ciprofloxacina

c. Quinolonas de tercera generación: Fluoradas. Espectro extendido, inhibe la


enzima ADN girasa. Ejemplos: lomefloxacina, Levofloxacina.

d. Quinolonas de cuarta generación: Fluoradas. Espectro de acción: Gram


positivas, Gran negativas y Pseudomonas aeruginosa. Ejemplos: Gatifloxacina,
Moxifloxacina.

9. RIFAMICINAS: Inhiben la síntesis protéica. Espectro de acción: Actividad


bactericida de amplio espectro. Ejemplos: Rifamicinas, Rifampicinas.

10. TETRACICLINAS: Inhiben la sistesis protéica a nivel de ribosoma y descoplan la


fosforilación oxidativa, alteran la membrana citoplasmática. Caracterizados por
un anillo de naftaceno de cuatro átomos. Ejemplos:
- Vida media corta: Tetraciclina, Oxitetraciclina.
- Vida media intermedia: Demeclociclina:
- Vida media larga: Doxiciclina, Minociclina.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

11. ANTIMETABOLITOS: Inhiben la formación de ácido fólico, tienen actividad


bacteriostáticas por separado y actividad bactericida unidas.

a. Sulfamidas: Espectro de acción: Bacterióstáticos de amplio espectro y


protozoarios. Ejemplos: Sulfinozaxol, Sulfametoxazol.

b. Trimetoprim: Espectro de acción: Amplio espectro. Ejemplos: Trimetoprim.

MECANISMO DE ACCION DE LOS ANTIBIÓTICOS:

1. Inhibicion de la pared celular:

a. Cocos Gram positivos:


- Tienen una capa de péptidoglucano.
- Hace una envoltura celular muy fuerte.
- Tiene una presión interna muy fuerta por la capa de péptidoglucano.

b. Bacilos Gram positivos:


- Tienen una capa de lipoproteínas.

c. Antibióticos que actuan sobre la pared celular:


- Penicilina: Inhiben el proceso del ácido – N – acetilmuránico.
- Cefalosporina: Unión de la lisina con glisina.
- Vancomisina, Bacitracina: Ácido – N – acetilmuránico.
- Ciclocerina D – alanina.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

d. Efectos de los antibióticos sobre la síntesis de la pared celular

2. Efecto sobre la membrana citoplasmática:


- Acción de la polimixina B

3. Inhibición de síntesis protéica: Formación de proteínas innecesarias en cantidad


que originan la muerte celular.

4. Inhibición de síntesis de ácidos nucléicos:


Fabricación de ácido fólico para sintetizar los precursores del ácido nucléico.

GENÉTICA DE LA RESISTENCIA BACTERIANA FRENTE A ANTIBIÓTICOS:


- Mutaciones cromosómicas.
- Mutación por plásmido R de resistencia.

MECANISMOS DE RESISTENCIA BACTERIANA FRENTE A LOS ANTIBIÓTICOS:

1. Modificación enzimática: Destruyen el principio activo de los antibiótocos.


a. Enzimas destructoras de antibióticos: β-Lactamasa.
b. Enzimas modificadoras de antibióticos: Cloranfenicolacetiltransferasa.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

2. Modificación sitio receptor antibiótico: Cuando el antibiótico es administrado;


éste se ancla a la célula por medio de proteínas que están en la membrana, si
hay mutación el antibiótico no logra anclarse y no puede ejercer su mecanismo
de acción.

a. Alteraciones en la proteína diana: Proteínas de unión a penicilina alteradas de


las bacterias.

b. Alteración de sitios de ataque ribosoma: No actua debido a que no encuentra el


receptor que debe estar en el ribosoma. Tetraciclina, Eritromicina,
aminoglucósidos.

3. Modificación de permeabilidad celular: Acción de las porinas permite la


permeabilidad de la membrana, impidieno que el antibiótico pueda ingresar a la
célula.

4. Promoción del eflujo o expulsión de antibióticos: Bomba de glucomode de


expulsión activa.

5. Desarrollo de una vía metabólica alterada que funciona como vía alternativa.

6. Desarrollo de una enzima alterada: No es la misma enzima ya que está alterada


y no es reconocida por el antibiótico
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

MÉTODOS DE LABORATORIO PARA DETERMINAR LA SUSCEPTIBILIDAD


ANTIMICROBIANA

Métodos de difusión en agar


- Muestra.
- Identificación bacteriana (cultivo joven 18-24 horas)
- Patrón de Mac Farland.
- Discos de antibióticos.
- Medio de cultivo (Agar Müeller Hinton): En la preparación de este medio es
fundamental que las concentraciones de timina, timidina y ácido 4-
aminobenzoico, sean lo suficiente bajas para no inhibir la actividad
antibacteriana de antibióticos y sulfamidas. Las dos primeras inhiben los
antibióticos y el último las sulfamidas. El ensayo de sensibilidad de un
microorganismo frente a un antibiótico se puede realizar sobre placas de agar
Mueller-Hinton por procedimientos de difusión, por diluciones seriadas o por
técnicas turbidimétricas en el Caldo Mueller-Hinton. En las técnicas de difusión
se mide el halo de inhibición del crecimiento confluente alrededor del depósito
de antibiótico (discos, torrecillas, etc.). El diámetro del círculo de inhibición es
inversamente proporcional a la concentración mínima inhibitoria (CMI) del
agente antibacteriano.
- Siembra – inoculación hisopos estériles.
- Colocación de discos.
- Incubación.
- Lectura e interpretación.
- Reporte de resultado (Sencible. Intermedio, resistente)
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Metodos de dilución
- Diluciones antimicrobiano.
- Inóculo cepa pura
- Reporte:
▪ Concentración mínima inhibitoria CMI: Concentración mínima de una
sustancia para impedir el crecimiento microbiano.
▪ Concentración mínima bactericida CMB.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA XIV ECOLOGÍA MICROBIANA.

INTERRELACIONES ENTRE ORGANISMOS SUPERIORES E INFERIORES.

Ecología: Ciencia encargada de estudiar organismos vivosen su medioambiente. En


el cual circula de forma permanente la energia conformando los denominados
ecosistemas.

Ecosistema: Conjunto de organismos vivos y su medio ambiente que representa la


unidad básica de la ecología. Se compone de factores abióticos y bióticos
(autóctonos y alóctonos)

- Autóctonos: Se desarrollan en un determinado ambiente.

- Alóctono: cuando existe un incremento de un nutriente produzca su desarrollo.

Medio ambiente: Rodea a un organismo vivo, se refiere a factores físicos, químicos


y biológicos, así como las fuerza que actuan sibre ser vivo.

Saprófitos: bacterias libres en la naturaleza se alimentan de materia orgánica e


inorgánica, constituyen la mayor parte del mundo microbiano, transforman la
materia orgánica en mineraly son responsables de los ciclos del carbono, nitrógeno,
etc.

Hábitat natural de los micoorganismos:

1. Suelo:
▪ Microorganismos nativos: Bacterias autótrofas, quimiorganotróficas, especies
de Bacillus, hongos entre otros.
▪ Especies patógenas aisladas en el suelo:
- Bacterias: Clostridium perfringes, Clostridium tetani, Clostridium botulinum.
- Hongos patógenos: Criptococcus capsulatum y Criptococcus neuformans
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

- Actinomyces.

2. Aire:
▪ Ambientes externos poco contaminados por desecación, ozono, radiaciones.
▪ Ambientes cerrados: virus, hongos, bacterias, parásitos.

3. Agua:
▪ Medio ambiente marino: Altas concentraciones de sal (halófilas).
▪ Lagos y rios: Parasitos , hongos, bacterias (Vibrios, cólera, aeromonas).
▪ Agua de consumo humano: (aguas servidas) fango activado, metabolizan los
microorganismos innecesarios, más decantación, más filtros, más
potabilización.
▪ Especies patógenas: Microorganismos patógenos: Escherichia coli, Salmonella,
Shigella, Vibrio, Enterococcus, Virus de la Hepatitis A, enterovirus, entre otros.

4. Alimentos
▪ Efectos perjudiciales de microorganismos en alimentos:
- Alteración de los alimentos.
- Enfermedades microbianas: Salmonella, Campylobacter, Clostridium perfringes,
Listeria, Escherichia coli.

▪ Efectos beneficiosos de microorganismos en alimentos:


- Fermentación de alimentos.
- Producción de alimentos.
- Indicadores de contaminación fecal en alimentos.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA XV FLORA HABITUAL DEL CUERPO HUMANO.

Colonización: Multiplicación de un organismo despues de su adherencia a los


tejidos de un organismo hospedador. El proceso comprende: fijación,
multiplicación y leberación.

Hospedero: Organismo que alberga a otro organismo, sustentando su crecimiento


o desarrollo.

Infección: Invación del organismo por microorganismos patógenos que se


reproducen y multiplican causando un estado enfermizo por lesión celular local,
secreción de una toxina o el provocar una reacción antigeno – anticuerpo (Ag – Ac).

Flora normal: Conjunto de microorganismos que se encuentran habitualmente en


el individuo sano normal y coexisten en forma bastante pacífica en una relación
equilibrada con su hospedero.

CADENA EPIDEMILÓGICA DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS:

Flora basal o residente: Ejemplos: Staphylococcus epidermidis en piel, Escherichia


coli en el intestino.

Flora transitoria: Llega temporalmente a una zona determinada, está representada


por bacterias patógenas.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Condiciones que favorecen la loacalización de la flora en un sitio anatómico:

1. Tropismo por tejidos particulares: Tiene afinidad por tejidos en particular.


2. Presencia de elementos de fijación en la pared celular bacteriana: Cápsulas y
fimbrias.
3. Formación de biopelículas.

Flora normal del hombre:


- Mucosas.
- Piel.
- Tracto urogenital.
- Tracto respiratorio.

1. Flora normal de la piel


▪ Factores relacionados con su naturaleza y extención:
- Aumento de temperatura y humedad.
- Efecto de la edad de la piel.
- Higiene personal
▪ Flora residente: bacterias Gram positivas como Staphylococcus, Micrococcus,
Propionibacterium, acnes y corynebacterium.
▪ Flora transitoria: Staphylococcus aureus y bacilos Gram negativos.

2. Flora normal de la conjuntiva:


▪ Flora residente: Staphylococcus epidermidis, Streptococcus Sp., algunos
difteroides aerobios y anaerobios.

3. Flora normal del aparato respiratorio:


▪ Nariz y nasofaringe:
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Flora residente: Staphylococcus epidermidis, Streptococcus α y no hemolíticos,


bacilos difteroides, Neisseria y especies de Corynebacterium.

▪ Tracto respiratorio bajo (Traquea, bronquios y tejido pulmonar):


- Flora transitoria:
- Patógenos: Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Neisseria
meningiditis.
- Oportunistas: Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Pseudomonas.

4. Flora normal de la cavidad oral y orofaringe:


▪ Flora residente: Staphylococcus, Lactobacillus, corynebacterias anaerobios
(bacteroides), Streptococcus grupo viridans (Streptococcus sangui y
Streptococcus mutans (dientes), Streptococcus mitis (mucosa oral),
Streptococcus Salivarius (lengua).

5. Flora normal del tracto gastrointestinal:


▪ Estomago y porción superior del intestino delgado:
- En ayuno son estériles o contienen menos de 103 microorganismos / mL.
- Flora residente: Streptococcus α hemolíticos, lactobacillus y cocos anaerobios.

▪ Porcion inferior del intestino delgado:


- Flora residente: anaerobios, lactobacilos, estreptococos, enterococos,
coliformes, actinomicetos y bacteroides.

▪ Intestino grueso:
- Flora residente: anaerobios, coliformes, enterobacterias, Enterococcus,
Streptococcus y Staphylococcus.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

▪ Importancia de la flora normal digestivo:

- Determina un correcto desarrollo de mucosa intestinal, intervienen en el


metabolismo de ácido fólico, biotina, vitamina B12, K y E.
- Favorece la producción de IgA, contribuye a inmunototerancia.
- Intervienen el el ciclo enterohepático de drogas como clorafenicol.
- Efecto barrera mediante interferencia bacteriana.
- Segrega bacteriocinas ( sustancias que inhiben el crecimiento bacteriano).

6. Flora normal del tracto urogenital


▪ Uretra anterior:
- Flora residente: Lactobacillus, corinebacterium y estafilococos coagulasa
negativa.

▪ Vagina:
- Flora residente: Lactobacillus, Enterococcus, Corinebacterium y Candida
albicans.

▪ Importancia de la flora normal de la vagina:


- Proteger de infección vaginal, en embarazo.
- Suministrar la flora al recien nacido.
- Disminuir el riesgo de madre y del recien nacido en la fase bacteriémica del
parto.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

FACTORES QUE ACFECTAN LA FLORA NORMAL:


- Dieta.
- Temperatura.
- Humedad.
- Enfermedades debilitantes.
- Tratamiento con antibióticos.
- Presencia de sustancias inhibitorias.
- Embarazo.

IMPORTANCIA DE LA FLORA NORMAL BACTERIANA:


- Antagonista frente a patógenos.
- Previene la colonización de patógenos.
- Fuente de vitamina K, E y complejo B.
- Estimula el desarrollo de ciertos tejidos.
- Contribuye al desarrollo del sitema inmune.
- Nos protege contra hongos patógenos.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

TEMA XVI RELACIÓN HOSPEDERO – PARASITO.

MODELOS DE RELACIÓN MICROORGANISMO – HOSPEDERO

Simbiosis: Comunidad o asociación de dos organismos distintos. Existen dos grados


de simbiosis de acuerdo a la proximidad del organismo: ectosimbiosis y
endosimbiosis.

- Ectosimbiosis: Cuando un organismo se desarrolla fuera de la célula de o del


hospedero.
- Endosimbiosis: Cuando un organismo se desarrolla dentro de la célula o tejido
del hospedador.

Mutualismo: Asociación benefisiosa para el hospedero y el microorganismo.

Comensalismo: asociación neutra e indiferente para el hospedero, es decir, es una


asociación que no reporta daño, ni beneficios para el hospedero. Ejemplo: Flora
normal.

Parasitismo: Es una asociación perjudicial para el hospedero se producen


alteraciones que causan daño al hospedador y beneficios al microorganismo.
Ejemplo: Bacterias patógenas.

ACCIÓN PATÓGENAS DE LAS BACTERIAS

Patógeno: Microorganismo que puede causar daño al hospedador.

Oportunista: Microorganismo que se aprovecha del desequilibrio orgánico en el


hospedador

Patogenicidad: Capacidad que tiene un microorganismo de causar daño.

Virulencia: Mecanismo que utiliza el microorganismo para causar dañon


Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

FACTORES DETERMINANTES DE LA ACCIÓN PATÓGENA:

1. Entrada al hospedero:
- Piel.
- Mucosas.
- Cavidad oral.
- Tracto respiratorio.
- Tracto genitourinario.

2. Tamaño del inóculo:


Dosis infecciosa (ID)

3. Mecanismo de invasión y establecimiento del patógeno:


▪ Mecanismo de adherencia:
- Fimbria o pilis.
- Flagelos.
- Cápsulas.
- Glicocáliz.

▪ Factores de virulencia: (penetración o invasión)


- Exoenzimas.
- Toxinas.
- Factores antifagocíticos.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

ENZIMAS EXTRACELULARES O EXOTÓXINAS:


- Naturaleza protéica.
- Termolábiles.
- Sencibles a ácidos y enzimas proteolíticas.
- Elevada actividad biológica.
- Acción específica.
- Difundibles extracelularmente.
- Carácter antigénico.
- Forman toxoides.
- Ocasionalmente pirógenas.
Ejemplos:
▪ Toxinas citoliticas: α toxina Staphylococcus aureus, pneumolisina Streptococcus
pneumoniae.
▪ Toxinas A – B: Toxinas Shiga y similares Shiga S. dysenterias y Escherichia coli.
Toxina colérica de Vibrio cholerae.
▪ Toxinas superantígenos: Toxinas Streptococcus grupo A, toxinas Staphylococcus
Shock toxico TSST – 1.

ENZIMAS INTRACELULARES O ENDOTOXINAS:


- Naturalesa polisacarida.
- Termoestables.
- Unidas membrana externa pared celular
- Antigénica.
- No forman toxoides.
- Potencia relativamente baja.
- Baja especifidad.
- Pirogénicas
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

Ejemplos: Endotoxinas presentes en Escherichia coli, Salmonella Spp., Shigella Spp.,


Pseudomonas, Neisseria, entre otros.

FACTORES ANTIFAGOCÍTICOS
- Producción de leucocidinas.
Ejemplo: Especies de Streptococcus y Staphylococcus.

- Producción de cápsula.
Ejemplo: Streptococcus pneumoniae, Shigella typhi, Yersenia pestis, Neisseria
meningiditis.

- Supervivencia dentro fagocito después de ingestión.


Ejemplo: Legionella, Listeria, Mycobacterium.

MECANISMO DE DEFENSA DEL HOSPEDERO

1. Defensas constitutivas

a. Barreras anatomicas: Piel y membranas mucosas.


- Piel: Ácidos grasos libres, ácido láctico, bajo pH, ambiente seco.
- Membranas mucosas: lisosimas y lactoferrina.
- Aparato respiratorio: Pelos nasales, moco, epitelio ciliado.
- Aparato digestivo: Moco, pH ácido, movimientos peristálticos, vellosidades
intestinales, secresiones biliares.
- Tracto urinario: micción frecuente y descamasiones constantes
- Conjuntiva: parpadeo y secresiones.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

b. Inflamación: Respuesta celular que se opone al ingreso de patógenos.


- Mediadores inflamatorios: IL 1, IL 3, TNF.
- Liberación de citoquinas
- Liberación de proteínas y fluidos.
- Células inmunes convergen en el sitio de herida.
- Produce dolor y formación de pus.

c. Fagocitosis: Ingestión de partículas por fagocitosis, las células fagocitarias son


polimorfonucleares, monocitos y macrófagos.
- Activación: Monocitos y leucocitos polimorfonucleares.
- Adherencia: Microorganismos a fagocitos.
- Internalización: Englobamiento, vacuolas fagocíticas.
- Digestión: Vacuola fagocítica, lisosomas primarios, fagolisosomas.

d. Fiebre: Elevación de la temperatura corporal por endotoxinas o como respuesta


inmune.

2. Defensas inducibles (Respuesta inmunitaria frente a patógenos)

a. Respuesta inmune natural inespecífica:


- Innato.
- Congenito.
- Defiende de cualquier patógeno.
- Esta representada por la fagositosis.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

b. Respuesta inmunitaria específica:


- Adquirida.
- Actúa contra patógenos específicos.
- Se produce por vacunaciones e infecciones.
- Es llevada a cabo por linfocitos y se clasifica en: Inmunidad humoral
(anticuerpos) e inmunidad celular (linfocitos T y B).

INMUNIDAD HUMORAL:

- IgM: Fija complemento, causa lisis celular, inmunoglobulina en fase aguda.


- IgG: Neutraliza toxinas y virus. Fija complemento. Cuatro subclases: IgG1, IgG2,
IgG3 e IgG4. Es la de la memoria.
- IgA: Secreciones mucosas, lágrimas, fluido nasal, saliva, moco intestinal, leche
materna y fluido seminal, neutralización de toxinas, alergeno, bacterias y virus.
- IgD: Función inmunorregulatoria de supresión o activación linfocitos B.
- IgE: Responsable de hipersensibilidad a antígenos, función respuesta segura
frente a parásitos.

FUNCIONES DE LAS INMUNOGLOBULINAS:

- Forman parte del complejo membrana de Cell B.


- Moléculas circulantes o secretadas.
- Efectores sistema inmune específico humoral.
- Opsonización (marcaje del antígeno).
- Neutralización de toxinas.
- Aglutinación y precipitación.
- Activación del complemento.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

INMUNIDAD CELULAR:

a. Linfocitos T
- Principal productor de citotoxinas.
- Receptor de membrana TCR.
- Linfocitos TCR2 CD4+: Células cooperadoras.
- Linfocitos TCR2 CD8+: Células citotóxicas.

b. Linfocitos B
- Reconoce al antígeno en forma soluble.
- Inmunoglobulinas de membranas.
- Células plasmáticas.
- Linfocitos B cebados de memoria.

HOSPEDERO COMPROMETIDO

Hospedadores en los que funcionan mal uno o más mecanismos de resistencia y en


los que, por tanto existe mayor probabilidad de infección.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

I PARCIAL DE MICROBIOLOGIA SEMESTRE II 2013

PARTE I COMPLETACIÓN:

1.- Pasteur introdujo los términos: Aeróbios y anaeróbios.

2.- En la historia microbiológica los investigadores más destacados fueron: Louis pasteur, Robert
koch

3.- Con que finalidad fueron introducidos los postulados de Robert Koch: Aislamiento y obtención
de cultivo puros

4.- La nomenclatura es una rama de: La taxonomía

5.- Son rasgos estructurales utilizados para establecer una clasificación bacteriana: Elementos
obligados y elementos facultativos.

6.- Un género representativo de bacterias en forma cocoide que se agrupan en racimos es:
Staphylococcus

7.- El lipopolisacárido se encuentra ubicado en: Membrana externa de las bacterias: Gram
negativas

8.- Las estructuras bacterianas que intervienen en el proceso de replicación celular son: Enzimas y
Moléculas

9.- En la célula bacteriana el ADN puede ser de tipo: Nucleóide

10.- La cápsula es un elemento facultativo de la célula bacteriana que le confiere: Rigidez e


integralidad, virulencia, clasificación morfológica y difícil fagocitarlas.

11.- Bacillus y Clostridium son bacilos: Gram Positivos formadores de: Esporas

12.- son estructuras bacterianas que intervienen en la síntesis de proteínas: ARN

13.- Categoría más básica de la clasificación taxonómica, formada por un grupo de individuos
genética y fenotípicamente similares: Especies
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

14.- La taxonomía numérica evalúa el grado: de similitud existente entre dos microorganismos,
utiliza un amplio número de cepas y relaciona las propiedades fenotípicas.

15.- Los científicos responsables de inventar las primeras lentes para observar bacterias fueron:
Antonio Van Leeuwenhoek

16.- Las vías de degradación de los aminoácidos son: Transaminación, desaminación y


descarboxilación

17.- La pared celular de las bacterias realizan funciones de: Confiere forma y rigidez a la célula;
Relacionada con la susceptibilidad a antibióticos; Proporciona toxicidad al hospedador;
Capacidad antigénica; Involucrada en la digestión enzimática y Permite diferenciar grupos
celulares.

18.- Las formas de obtención de energía por las bacterias son: Metabolismo de los carbohidratos;
Metabolismo de proteínas y aminoácidos y Metabolismo de lípidos

19.- La fermentación de define como: Eventos donde las bacterias anaerobias facultativas u
obligadas utilizan un compuesto orgánico como dador y aceptor final de electrones y la
oxidación: perdidas de electrones.

20.- bacterias patógenas al hombre de acuerdo con los requerimientos de carbono y temperatura
se clasifican en: heterótrofas y Mesófilas

PARTE II SELECCIÓN

1.- El conocimiento de los antimicrobianos se debió a las investigaciones realizadas por:


a) Fleming b) Domangk c) Gallo d) Jenner

2.- Son especies bacterianas caracterizadas por presentar cápsula en su estructura:


a) Proteus vulgaris b) Streptococcus pneumoniae c) Klebsiella Pneumoniae d) Serratia
marcescens

3.- Los flagelos están presentes en:


a) P. fluorescens b) Proteus mirabillis c) E. coli d) K. neumoniae
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

4.- El crecimiento bacteriano se mide en términos de:


a) Tamaño b) Número de células c) Crecimiento Exponencial d) Ninguna de las
anteriores

5.- Está formado por el género y la especie, conformando la nomoespecie, binomio o binomio
de Linneo:
a) Nivel taxonómico b) Clon c) Nombre científico d) Cepa

6.- Las bacterias capaces de desarrollarse en bajas presiones de oxígeno son:


a) Anaerobias facultativas b) Microaerófilas c) Aerotolerantes d) Anaeróbias

7.- De acuerdo con los efectos de la presión osmótica (7,5% NaCl) y los requerimientos de
agua disponibles (aw), S. aureus es considerada una bacteria:
a) Acidófila b) Mesófila c) Psicrófila d) Halófila

8.- Es conocido como la posición jerárquica relativa dentro de la clasificación taxonómica:


a) Taxón b) Filogenia c) Rango taxonómico d) Ninguna de las anteriores

9.- El ensamblaje de un flagelo en las bacterias Gram negativas, presentaría un cuerpo basal
compuesto por:
a) Juegos de anillos MSLP b) 2 juegos de anillos c) Juegos de anillos MP d) Ninguna de las
anteriores

10.- Los métodos directos para medir crecimiento bacteriano son:


a) Contaje en cámara b) Contaje de UFC/ml c) Asa calibrada d) Diluciones seriadas

11.- Los flagelos que pueden encontrarse en los polos de las células y se denominan:
a) Lofótrico b) Perítrico c) Anfítrico d) Átrico

12.- La energía a partir de carbohidratos, en bacterias heterótrofas se puede obtener de un


carbohidrato vía:
a) Glucolítica b) De la luz solar c) Fotosíntesis d) Ninguna de las anteriores

13.- Son productos de la fermentación del piruvato:


a) Metanol b) Ácido láctico c) Ácido butírico d) Etanol
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

14.- Los pilis les confieren a las bacterias, las funciones de:
a) Resistencia b) Conjugación c) Intercambio genético d) Movilidad

15.- Elemento de la célula bacteriana caracterizada por servir como barrera osmótica:
a) Membrana citoplasmática b) Citoplasma c) Vacuolas citoplasmáticas d) Inclusiones
citoplasmáticas

PARTE III DESARROLLO


1.- Explique el fundamento de la tinción de Gram en términos de diferencias de estructuras
y propiedades químicas entre las paredes de las bacterias Gram Positivas y Gram negativas.

La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de péptidoglucano,
además de dos clases de ácidos teicóicos: Anclado en la cara interna de la pared celular y
unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido lipoteicóico, y más en la superficie,
el ácido teicóico que está anclado solamente en el péptidoglucano (también conocido
como mureína) Por el contrario, la capa de péptidoglucano de las Gram negativas es
delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (de
composición distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de
péptidoglucano unida a una membrana exterior por lipoproteínas. La membrana exterior
está hecha de proteína, fosfolípido y lipopolisacárido.

Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen diferencialmente debido a estas diferencias
constitutivas de su pared. La clave es el péptidoglucano, ya que es el material que confiere
su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha mayor
proporción que las Gram negativas.

La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloración, se debe a que la


membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgánicos, como por
ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de péptidoglucano que posee es
demasiado delgada como para poder retener el complejo de cristal violeta/yodo que se
formó previamente, y por lo tanto este complejo se escapa, perdiéndose la coloración
azul-violácea. Pero por el contrario, las Gram positivas, al poseer una pared celular más
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

resistente y con mayor proporción de péptidoglucanos, no son susceptibles a la acción del


solvente orgánico, sino que este actúa deshidratando los poros cerrándolos, lo que impide
que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-
violácea.

2.- Nombre correctamente las reglas de nomenclatura.

▪ Existe un solo nombre correcto para un microorganismo.


▪ Los nombres que causen error o confusión deben ser rechazados.
▪ Nombre científico se establece según la nomenclatura binomial Linneo 1753.
▪ Binomio formado por género y especie. Aceptación universal.
▪ Vocablos latinizados; subrayados (escrito a mano) o escrito en letras cursivas.
▪ Género: letra inicial en mayúscula, singular, puede abreviarse terminaciones en “us”,
“um” “a” Ejemplo: Bacillus → Bacilo.
▪ Especie en minúscula no se abrevia. Ejemplo: S. epidermidis.
▪ Niveles taxonómicos escritos con grupos característicos.
▪ Tribu “eae” (no corresponde rango taxonómico)
▪ Familia “aceae” Ejemplo: Enterobacteriaceae
▪ Orden “aceae” Ejemplo: Zymobacteriaceae
▪ División “es” Ejemplo: Gammaproteobacteriales
▪ La especie adquiere validez una vez publicada en revista reconocida
internacionalmente.

3.- Grafique y explique la curva de crecimiento bacteriano, en cultivo cerrado en presencia


de lactosa (carbohidrato)
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

II PARCIAL DE MICROBIOLOGIA SEMESTRE I 2013

PARTE I COMPLETACIÓN:

1.- Las radiaciones ultravioletas ejercen su acción bactericida actuando sobre el: ADN Bacteriano

2.- Las bacterias cuando se encuentran en un medio hipotónico desarrollan el fenómeno de:
Plasmóptisis

3.- Son antibióticos que actúan inhibiendo la síntesis de proteínas: Aminoglucósidos, Anfenicoles,
Lincosamidas, Rifamicinas y Tetraciclinas

4.- El compuesto de referencia para medir la acción de los desinfectantes es: Fenol y se realiza
mediante el cálculo de coeficiente fenólico

5.- Los antibióticos betalactámicos actúan durante: la última etapa de la síntesis de la pared
celular y la estructura bacteriana que afectan es: la pared celular

6.- Un nucleótido está constituido por: Base nitrogenada, azúcar (desoxirribosa) y fosfato

7.- El mecanismo de calor húmedo se debe a: Desnaturalización y coagulación de proteínas,


causan la muerte celular y son ejemplos de estos: Vapor a presión, Tindalización, ebullición y
pasteurización

8.- Los siguientes antimicrobianos pertenecen al grupo de los betalactámicos: Penicilinas,


Cefalosporinas, Carbapenen y monobactámicos.

9.- De acuerdo al espectro de acción los antimicrobianos se clasifican en: Amplio espectro,
espectro medio y espectro corto y como ejemplo de ellos podemos citar, respectivamente, a:
Cloranfenicol, Penicilina G, polimixinas

10.- Los plásmidos son: Moléculas circulares de ADN bacteriano, de replicación autónoma y
poseen origen replicación y proteínas reguladoras

11.- El método más utilizado para medir la acción de los antimicrobianos en el laboratorio es: El
estudio de la sensibilidad de las bacterias y la selección de los mismos se realiza en base a:
Enfrentamiento in vitro de la bacteria con distintas concentraciones del agente antimicrobiano.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

12.- Son considerados aldehídos los siguientes compuestos: Formaldehido, Glutaraldehido,


Formol y su mecanismo de acción es: Agente esterilizante, actúan en proteínas y ácidos
nucléicos, activos en presencia de materia orgánica y de acción rápida.

13.- La esterilización se refiere a: la inactivación total de todas las formas de vida microbianas y la
desinfección a: agentes químicos que destruyen formas vegetativas pero no esporas, son tóxicos
en tejido vivos se aplican en materiales inertes.

14.- Los halógenos pertenecen al grupo de: Agentes químicos inorgánicos y su mecanismo de
acción es: Bactericida, inactivación de proteínas enzimáticas, conversión de radicales –SH en
disulfuros –S-S, atacan radicales aminos, grupo indol y tirosina.

15.- El transporte de genes bacterianos de una célula a otra a través de un fago se denomina:
Transducción

16.- Los agentes bactericidas se diferencian de los bacteriostáticos por: que destruyen a las
bacterias mientras los bacteriostáticos inhiben su crecimiento sin destruirlas.

17.- Los siguientes aspectos caracterizan a un buen desinfectante: No volátil, alta actividad
bactericida, costo moderado, amplio espectro de acción, más bactericida que bacteriostático,
estable en almacenamiento, homogeniza uniformemente con diluente, fácil penetración y
compatible con otras sustancias.

18.- Las variaciones genotípicas son definidas como: Cambios no heredados en secuencia del
ácido nucleico que conforma el genoma de un organismo y se clasifican en: Mutaciones
espontaneas y Mutaciones inducidas

19.- El efecto que tiene la temperatura baja sobre el crecimiento bacteriano: Inhibición del
crecimiento bacteriano y se puede realizar mediante: Refrigeración 4-7ºC, Congelación < 0ºC y
Liofilización.

20.- La forma más común de aplicar calor húmedo en el laboratorio de microbiología es a través
de: Autoclave y los mecanismos de acción son: Esterilizar medios de cultivos, telas, objetos de
caucho mediante 121ºC a 15 libras de presión a 15 minutos.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

PARTE II SELECCIÓN

1.- El intercambio de material genético entre las células bacterianas se puede formar por:
a) Delección b) Transcripción c) Transformación d) Mutación

2.- Son considerados agentes bacteriostáticos:


a) Cloro b) Incineración c) Alcohol Absoluto d) Ninguna de las anteriores

3.- Se consideran antimicrobianos del grupo de las quinolonas:


a) Ácido nalidixico b) Norfloxacina c) Bacitracina d)Vancomicina

4.- Dentro de los antibióticos que tienen acción sobre la membrana citoplasmática están:
a) Polimixina b) Eritromicina c) Vancomicina d) Doxiciclina

5.- Son agentes que actúan sobre el ADN:


a) Radiaciones b) Fenoles c) Calor d) Ninguna de las anteriores

6.- Las mutaciones por transversión se producen por el cambio de una base:
a) Purina por pirimidina b)Pirimidina por otra pirimidina
c) Purina por otra purina d) Ninguna de las anteriores

7.- Estructura bacteriana sobre la cual ejercen acción los detergentes catiónicos:
a) Ribosomas b) Membrana externa c) Pared celular d) Membrana citoplasmática

8.- Son compuestos químicos orgánicos:


a) Nitrato de plata b) Tintura de yodo c) Isopropanol d) Cloraminas

9.- Representa un antimicrobiano del grupo de los macrólidos:


a) Vancomicina b) Eritromicina c) Bacitracina d) Bencilpenicilina

10.- La resistencia bacteriana frente a los antimicrobianos se produce debido a:


a) Mutaciones cromosómicas b) Producción de enzimas
c) Plásmidos de resistencia d) Todas las anteriores
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

PARTE III DESARROLLO


1.- Nombre cada uno de los mecanismos de resistencia que desarrolla la bacteria frente a los
antibióticos y explique dos de ellos

- Modificación enzimática: Las bacterias producen enzimas destructoras de antibióticos


(betalactamasa) y enzimas modificadoras de antibióticos (cloranfenicol acetiltransferasa)

- Modificación sitio receptor antibiótico: Alteracionnes en la proteínas diana (proteínas de


unión a la penicilina alteradas de las bacterias) y alteración de sitios de ataque del ribosoma
(tetraciclina, eritomicina, aminoglucosidos)

- Modificación de la permeabilidad celular:

- Promoción del eflujo o expulsión de antibióticos:

- Desarrollo de una vía metabólica alterada que funciona como vía alternativa

- Desarrollo de una enzima alterada.

2.- Describa brevemente las etapas de replicación de ADN bacteriano

Iniciación: se desenrolla la doble hélice mediante la enzima helicasa, ocurriendo en un solo


cromosoma varios orígenes de replicación, a cada hebra se unen las proteínas unión ADN
(SSBP), impidiendo que ésta se una consigo misma, el origen de la replicación es reconocido
por las proteínas de iniciación (cebadores para la polimerización de nuevos nucleótidos)

Elongación: Forman la horquilla de replicación que origina dos hebras (cadena líder: síntesis
de polinucleótidos por acción de ADN polimerasa III y rezagada: forma discontinua) el
complejo enzimático actúan incorporando nucleótidos a nuevas cadenas utiliza molde una
hebra de cadena antigua, el ADN polimerasa en movimiento opuesto a la horquilla, la primasa
media la acción de cebadores para la síntesis de fragmentos de cortes polinucleótidos
(fragmentos de okazaki) que serán unidos por el ADN ligasa formando dos hebras hijas
simultáneamente en la cadena líder y la cadena rezagada.

Terminación: las dos moléculas hijas se separan, ocurren los procesos de corrección de ADN y
el superenrrollamiento
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

3.- Explique cómo se determina en el laboratorio la susceptibilidad antimicrobiana y en que


se fundamenta cada uno de los métodos.

Difusión (antibiograma): consiste en depositar en la superficie de agar de una placa de Petri


previamente inoculada con el microorganismo, discos de papel de filtro impregnados con
diferentes antibióticos, cuando estos se ponen en contacto con la superficie húmeda de agar,
absorben agua y el antibiótico difunde en forma radial a través del espesor del agar,
produciendo un gradiente de concentración.

Dilución: consiste en la determinación del crecimiento del microorganismo en presencia de


concentraciones crecientes del antimicrobiano, que se encuentra diluido en el medio de
cultivo, determinando la concentración mínima inhibitoria y la concentración mínima
bactericida.
Microbiología 200-3455 Licenciatura en Bioanálisis

S-ar putea să vă placă și