FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

DEPARTAMENTO ACADEMICO DE CIENCIAS

BÁSICAS

Informe de química

Espectrofotometría

2019–II

Integrantes: - Alcántara Shyomara

- Alejos Samikay
- Carpio Grecia
- Huaringa Juan Carlos
- Rivera Diana
- Rosales Juliette
- Sevallos Jeanpol
Introducción:
La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la
concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben
las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende
de forma lineal de la concentración. Para hacer este tipo de medidas se emplea un
espectrofotómetro, en el que se pude seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa
por una solución y medir la cantidad de luz absorbida por la misma.
El fundamento de la espectrofotometría se debe a la capacidad de las moléculas para
absorber radiaciones, entre ellas las radiaciones dentro del espectro UV-visible. Las
longitudes de onda de las radiaciones que en una molécula puede absorber y la
eficiencia con la que se absorben depende de la estructura atómica y de las condiciones
del medio (Ph, temperatura, fuerza iónica, etc.), por lo que dicha técnica constituye un
valioso instrumento para la determinación y caracterización de biomoléculas.

Transmitancia:
La transmitancia se define como la cantidad de energía que atraviesa un cuerpo en
determinada cantidad de tiempo.
Existen varios tipos de transmitancia, dependiendo de qué tipo de energía
consideremos.
La transmitancia óptica se refiere a la cantidad de luz que atraviesa un cuerpo, en una
determinada longitud de onda. Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslúcido,
una parte de esa luz es absorbida por el mismo, y otra fracción de ese haz de luz
atravesará el cuerpo, según su transmitancia.

Absorbancia:
Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslúcido, una parte de esta luz es
absorbida por el cuerpo, y el haz de luz restante atraviesa dicho cuerpo. A mayor
cantidad de luz absorbida, mayor será la absorbancia del cuerpo, y menor cantidad de
luz será transmitida por dicho cuerpo. Como se ve, la absorbancia y la transmitancia
son dos aspectos del mismo fenómeno.
Demostración práctica
 MATERIALES:

❖ Espectrofotómetro
❖ Gradillas
❖ 8 Tubos de ensayo
❖ 48 Pipetas de 10 ml
❖ Piceta con agua destilada
❖ NaOH 0.01M
❖ NaOH 0.02M
❖ Ácido muriático 0.01 M
❖ CH3COOH 0.01M
❖ KOH 0.01 M
❖ Fenolftaleína

 Procedimiento:
1. Primero probamos el espectrofotómetro solo con agua destilada la cual ponemos
en un tubo de ensayo. Asegúrese de cerrar la tapa del compartimiento de
muestras antes de hacer las anotaciones de lecturas de absorbancia ya que
puede haber interferencias que alteran los resultados.
2. Después ajustamos la longitud de onda para encontrar el espectro de absorción.
3. Ajustar la absorbancia en cero siempre que probemos con otra sustancia.
4. Determinar la absorbancia del tubo.
5. Procedemos a hacer lo mismo con las otras sustancias (Ácido muriático,
CH3COOH, KOH) los cuales se le debe agregar agua destilada.
Resultados
Reactivo 1 2 3 4 5 6
Na(OH) 10 ml
0.01M
HCL 0.01 M 10 ml
CH3COOH 10 ml
0,01 M
Na(OH) 0.02 10 ml
M
K(OH) 0.01 M 10 ml
Agua 10 ml
destilada
Fenolftaleína 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas
Transmitancia
Absorbancia 0.708 0.530 0.528 0.528 0.50032
Longitud de
onda 520 nm

Reactivo 1 2 3 4 5 6
Na(OH) 10 ml 10 ml
0.01M
HCL 0.01 M 10 ml 10 ml 10 ml
CH3COOH 10 ml 10 ml
0,01 M
Na(OH) 0.02 10 ml
M
K(OH) 0.01 M 10 ml 10 ml 10 ml
Agua
destilada
Fenolftaleína 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas
Transmitancia
Absorbancia 0.178 0.180 0.020 0.02968 0.02968
Longitud de
ona 520 nm
Conclusiones y discusiones
El conocer el adecuado uso del espectrofotómetro permitió obtener en el laboratorio
resultaos con alta calidad analítica en las mediciones que son emitidas por este.
Se determinó la absorbancia de las sustancias como Na(OH), HCl, agua destilada entre otros
mediante la longitud de onda que estas sustancias liberaban en presencia del
espectrofotómetro de manera exacta con el apoyo de la computadora, el cual nos permitía
crear las gráficas de esta reacción.
El espectrómetro trabajaba a base de las sustancias que se deseaba analizar su composición
mediante el vertimiento de estas en unos contenedores pequeños hechos de cuarzo ya que
el vidrio no era muy útil en este caso.
La práctica con el espectrómetro por otro lado nos permitió comprender cuando importante
es este procedimiento puesto que nos permitió saber el contenido de cierta sustancia en un
compuesto lleno de otros tipos de componentes, como por ejemplo en un extracto de
guayaba podemos usar la cantidad exacta de flavonoides en ella; sin embargo, esta no es el
único que compone el extracto, por lo que de igual manera podemos analizar la cantidad de
azucares y otros. Y para ello se tiene que calibrar el espectrómetro ajustando el rango de
longitud de onda perteneciente a la sustancia que deseemos analizar, sin olvidarnos de zerar
el dispositivo para que cubetas de muestras no afecten el análisis.