Manual de Harinas de Trigo

METRO MANUAL PARA
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UNA NALYTICAL METRO ÉTODOS PARA METRO ONITOREO
W CALOR F PONERSE CEÑUDO F ORTIFICATION CON yo RON
El Programa de Micronutrientes de la USAID parte 3

MMMANUAL
MANUAL PARA
PARA
WW CALOR
CALOR LOURF FORTIFICATION
F FLOUR ORTIFICATIONyo
CON CON yo
RONRON
parte 3
Métodos analíticos para la harina de trigo monitoreo
fortificación con hierro
Compilado por Ritu Nalubola

y Penélope Nestel
Esta publicación ha sido posible gracias al apoyo proporcionado por el Centro de Población, Salud y Nutrición de la Oficina de Programas Globales,
Apoyo de Campo e Investigación de la Agencia de Estados Unidos para el Desarrollo Internacional (USAID).
MOST es administrado por el Instituto Internacional de Ciencia y Tecnología, Inc. (ISTI) bajo los términos del Acuerdo de Cooperación No.
HRN-A-00-98-0047-00. Los socios son la Academia para el Desarrollo Educativo (AED), Helen Keller International (HKI), el Instituto Internacional de
Investigación sobre Políticas Alimentarias (IFPRI), y la Universidad Johns Hopkins (JHU). instituciones de recursos son la atención, el Cuerpo
Internacional Executive Service (CIES), Population Services International (PSI), Programa para una Tecnología Apropiada en Salud (PATH), y Save
the Children.
Las opiniones expresadas en este documento son las del autor (s) y no reflejan necesariamente los puntos de vista de la Agencia de Estados Unidos para el
Desarrollo Internacional.
de octubre de el año 2000
El proyecto más
1820 N. Fort Myer Drive, Suite 600 Arlington,
VA 22209 EE.UU.
Teléfono: (703) 807-0236 Fax: (703) 807-0278 Sitio Web:
http://www.mostproject.org E-mail: most@istiinc.com
Tabla de Contenidos
Expresiones de gratitud................................................. .................................................. ............................. v Prólogo ...................

.................................................. .................................................. ..................... vii abreviaciones ...........................
.................................................. .................................................. ....... ix Glosario .........................................
.................................................. .................................................. .xi
I. Introducción ............................................... .................................................. ................................... 1
II. Método cualitativo ................................................ .................................................. ....................... 3

A. Punto método de prueba ............................................. .................................................. ........................ 3
III. Métodos Semi-cuantitativos .............................................. .................................................. ........... 5

A. Punto método de prueba ............................................. .................................................. ........................ 5
método B. colorimétrico .............................................. .................................................. ................ 5
IV. Métodos cuantitativos................................................ .................................................. .................. 7

método A. espectrofotométrica .............................................. .................................................. 7 .....
espectrofotométrica de absorción B. Atómica (AAS) ......................................... método .................. 7
Apéndice 3.1: Costo de instrumentos analíticos seleccionados / equipos de diferentes proveedores ............... 9
Apéndice 3.2: Lista de proveedores de vidrio de laboratorio, equipos y productos químicos ...................... 11
Apéndice 3.3: método cualitativo Hierro ............................................ .................................................. 13
Apéndice 3.4: prueba de la mancha semi-cuantitativo para el hierro, el método INCAP IV .................................... ........15
Apéndice 3.5: semi-cuantitativa determinación colorimétrica de hierro en la harina,
método INCAP V ............................................... .................................................. .......................... 17
Apéndice 3.6: Método espectrofotométrico de Hierro, el método AACC 40-41B ...................................... ... 21
Apéndice 3.7: El análisis espectrofotométrico para la determinación cuantitativa del hierro en los alimentos,
método INCAP VI ............................................... .................................................. ........................ 25
Apéndice 3.8: Elementos por espectrofotometría de absorción atómica,
método AACC 40-70 ............................................. .................................................. ...................... 29
Apéndice 3.9: método oficial de la AOAC 975.03, metales en plantas y alimentos para mascotas, método espectrofotométrico de absorción
atómica ............................... .................................................. 33
Apéndice 3,10: digestión húmedo utilizando ácidos sulfúrico y nítrico ........................................ ................... 37
Anexo 3.11: Seguridad en el laboratorio ............................................. .................................................. ...... 39
iii
Agradecimientos
Este manual de tres partes es el producto de las conversaciones con la Iniciativa de Micronutrientes que identificaron la necesidad de poner a
disposición de los administradores de programas en los países en desarrollo la información matic y técnica programa- integral relacionada con
la fortificación con hierro de la harina de trigo. Los autores aknowl- afilan las contribuciones de Jack Bagriansky y Venkatesh Mannar al primer
borrador de la Parte 1, y de Pedro Ranum y Quentin Johnson al primer borrador de la Parte 2.
Omar Dary examinó un primer borrador del informe; Richard Hurrell, José Mora, y George Purvis revisaron un borrador posterior.
Todos ellos aportaron comentarios y sugerencias muy útiles.
La Asociación Americana de Químicos de Cereales (AACC), la Asociación de Químicos Analíticos Oficiales (AOAC), y el
Instituto de Nutrición de Centroamérica y Panamá (INCAP) permitió generosamente para citar e imprimir sus métodos analíticos
para la determinación de hierro en la harina.
Agradecemos enormemente el apoyo y el aliento de Frances Davidson en la Agencia de Estados Unidos para el Desarrollo
Internacional (USAID) en Washington, DC, y Roy Miller, del proyecto MOST. Agradecemos también a Betsy Reddaway y Marianne
Lown por su ayuda en la corrección de estilo y la finalización de este documento.
Los fondos para la preparación de este manual se proporciona a través de proyectos de USAID: OMNI Investigación y la mayoría
(contrato Nº HRN-A-00-98-00047-00.) (Contrato no HRN-5122-A-00-3046-00.).
v
Prólogo
La anemia es la deficiencia de micronutrientes más extendida en el mundo; que afecta a todos los grupos de edad en ambos países desarrollados y
en desarrollo. Los niveles más bajos de la anemia que se encuentran en los países desarrollados se atribuyen a los niveles más altos de consumo de
hemo-hierro y la fortificación de los granos básicos y otros alimentos tales como cereales para el desayuno. En los países en desarrollo, el consumo
regular de comidas ricas en fitato precipita la anemia debido a la mayor parte del hierro ingerido no está disponible para la absorción. Otras
deficiencias de micronutrientes, tales como la ingesta inadecuada de ácido fólico y la vitamina A, y parásitos también causan anemia. Gran parte de
la anemia que se encuentra en los países en desarrollo no se debe únicamente a la deficiencia de hierro; por lo tanto, se necesitan varias
intervenciones.
La anemia ferropénica se puede controlar a través de la suplementación con hierro y la fortificación de alimentos. Los alimentos a base de trigo
se consumen en muchos países, y su consumo va en aumento. La fortificación de la harina de trigo con hierro (y otros micronutrientes) es una
intervención práctica debido a las poblaciones objetivo no necesitan cambiar sus hábitos alimenticios y los programadores no tienen que
adaptar una nueva o costoso sistema de distribución; fortificación de trigo sólo requiere la existencia de un sistema de molienda y
comercialización bien establecido que permite la adición uniforme del hierro y el control del contenido de hierro en la harina. La fortificación de
la harina de trigo con hierro es seguro y puede ser utilizado para prevenir, pero no cura, anemia por deficiencia de hierro.
En este manual de tres partes, directrices técnicas se presentan a sistematizar y facilitar el establecimiento y la ejecución de un programa de
fortificación con hierro de la harina de trigo. Parte 1 describe por qué es importante para prevenir y reducir tanto la deficiencia de hierro y anemia
por deficiencia de hierro y cómo hacer para establecer un programa de este tipo. las estrategias existentes y se discuten los elementos básicos a
tener en cuenta en el establecimiento de un programa apropiado para la fortificación con hierro de la harina de trigo se describe en detalle.
Además, parte 1 ofrece una visión general de todo el programa para que los funcionarios del sector público y privado que gestionan y coordinan
las actividades de molienda de harina tienen información sobre los componentes esenciales para garantizar un funcionamiento adecuado. Las
áreas técnicas descritas en este documento también será útil para los especialistas para componentes específicos del proceso de fortificación.
Estos incluyen las operaciones implicadas en la fortificación de la harina de trigo, los factores determinantes de la eficiencia y la eficacia de la
intervención, y las directrices para la determinación de los costos del programa.
Parte 2, Técnico y directrices operativas, está escrito específicamente para personal técnico responsable de la implementación de la harina de
trigo fortificación con hierro. Abarca las diferentes formas de los compuestos de hierro, la composición y preparación de premezclas, los
procedimientos para la adición de hierro a la harina de trigo, y una descripción de los procedimientos de control de calidad.
Parte 3, Métodos de análisis para el control Harina de Trigo La fortificación con hierro, presenta métodos de laboratorio para determinar el
contenido de hierro en la mezcla previa y en la harina de trigo fortificada. Parte 3 está escrito principalmente para el personal de laboratorio que
serán responsables de los análisis de laboratorio.
Cada parte del manual es relativamente autosuficientes en las áreas esenciales de diseño y ejecución de los programas. Lo ideal sería que,
sin embargo, se recomienda tomar en consideración las tres partes como unidades teóricas y prácticas para ser utilizados juntos.
vii
Un programa sostenible para la fortificación con hierro de la harina de trigo refleja los esfuerzos de colaboración de los molineros, productores, el
sector público, los investigadores y los donantes. El propósito de este documento es compartir las experiencias de los involucrados en el trigo
enriquecimiento de la harina para que otros países puedan planificar y plemento im- esta importante intervención para eliminar y prevenir la
deficiencia de hierro y anemia por deficiencia de hierro.
Frances Davidson Roy Miller

Oficina de Salud y Nutrición, USAID MOST, el Programa de USAID de micronutrientes
Washington DC Washington DC
viii
Abreviaturas
AACC Asociación Americana de Químicos de Cereales
AAS espectrofotómetro de absorción atómica
AOAC Asociación de Químicos Analíticos Oficiales
INCAP Instituto de Nutrición de Centroamérica y Panamá
NIST Instituto Nacional de Estándares y Tecnología
ppm partes por millón; una unidad de medida; es equivalente a microgramos por gramo o miligramos por
kilogramo.
ppb partes por mil millones; una unidad de medida; es equivalente a 10- 3 microgramos por gramo.
ix
Glosario
incineración: el proceso de desintegración constituyentes orgánicos de alimentos para producir óxidos de elementos inorgánicos (minerales).
incineración en seco a altas temperaturas en un horno de mufla o cenizas húmedas con ácidos centrated con- y agentes oxidantes se utilizan
comúnmente en los análisis de mineral.
reactivo cromogénico: un reactivo que reacciona específicamente con el compuesto de interés y produce un color. Por
ejemplo, batofenantrolina (para el hierro ferroso).
Método cualitativo: proporciona información sobre la presencia o ausencia de un compuesto determinado sin referencia a la cantidad del
compuesto en los alimentos. Por ejemplo, la prueba de la mancha cualitativa de hierro en la harina.
Método cuantitativo: determina la cantidad exacta de un compuesto particular en los alimentos. Por ejemplo, el método
espectrofotométrico para el hierro en la harina.
método semi-cuantitativa: proporciona una estimación aproximada dentro de un rango predefinido (por hierro, de 10 a 20 mg / g) de la cantidad de
un determinado compuesto en los alimentos. Por ejemplo, la prueba de la mancha semi-cuantitativa de hierro en la harina.
xi
I. Introducción
Analizando el contenido de hierro de la harina determina si el nivel requerido de hierro está presente en la harina fortificada, que es fundamental
para el éxito de un programa de enriquecimiento de la harina. Varios ods met analíticos están disponibles para determinar el nivel de hierro en la
harina que van desde simples pruebas rápidas a los que requieren instrumentos sofisticados. Los métodos oficiales de análisis aprobados por
las asociaciones de renombre, tales como la Asociación de Químicos Analíticos Oficiales (AOAC) y la Asociación Americana de Químicos de
Cereales (AACC), generalmente son seguidas por la industria de la harina en los países desarrollados, y en un número cada vez mayor de los
países en desarrollo, con el fin de satisfacer las normas reglamentarias y de calidad PUR persecución.
Esta parte del manual proporciona una colección completa de las técnicas analíticas disponibles para la determinación de hierro en productos de
harina, incluyendo los métodos oficiales aprobados por la AOAC 1 y AACC 2 y ensayos simples desarrollados por instituciones de investigación
establecidas como INCAP 3. Los métodos son aplicables a todos los fortificantes de hierro y pueden ser utilizados por los molinos de harina, las
agencias reguladoras gubernamentales, proveedores de premezclas, u otros laboratorios que participan en el análisis del hierro de los alimentos.
En las secciones siguientes, se discuten brevemente los principales, ventajas y limitaciones de los métodos cualitativos, semi-cuantitativos y
cuantitativos. Esta información puede ayudar a identificar y seleccionar el método de ensayo más adecuado para los recursos disponibles. Esta
porción siguiente es seguido por varios apéndices, que incluyen una lista que resume los principales instrumentos analíticos y equipos, sus costos,
y materiales de construcción (Apéndice 3.1) y una lista de los principales proveedores comerciales para equipo de laboratorio y químicos
(Apéndice 3.2). Apéndices 3.3 a 3.10 contienen los diferentes procedimientos de ensayo de hierro, que se enumeran a continuación junto con sus
aplicaciones:
• Cualitativo:
método de punto de prueba (AACC 40-40, Apéndice 3.3) - harinas enriquecidas
• Semi-cuantitativa:
método de ensayo Spot (INCAP método IV, Apéndice 3.4) - Flour y premezclas Método colorimétrico (INCAP
método V, Apéndice 3.5) - Harina, premezclas, y otros productos
• Cuantitativo:
método espectrofotométrico (AACC 40-41B, Apéndice 3.6; método INCAP VI, Apéndice
3.7) - cereales, productos de cereales, premezclas, varios otros productos alimenticios e ingredientes método de absorción
atómica (AACC 40-70, Apéndice 3.8; AOAC 975.03, Apéndice 3.9; cenizas húmedas, Apéndice 3,10) - cereales, productos de
cereales, premezclas, y otra alimentos vegetales
Todos los métodos se han citado e impreso con el permiso de las organizaciones respectivas.
Una preocupación importante cuando se realizan ensayos de hierro en un laboratorio es la contaminación del hierro no fortificante de los accesorios
oxidadas de metal, equipos y muebles. Todos los análisis deben, por lo tanto, se llevaron a cabo con el máximo cuidado para evitar la
contaminación. Esto significa que toda la cristalería debe ser empapado en nítrico diluido o ácido clorhídrico, a fondo aclaró con agua destilada
desionizada, y se secó en un horno. Por otra parte, todos los reactivos deben ser de grado analítico adecuado para análisis minerales.
1 AOAC Official Methods of Analysis (2000). 17 º edición. Asociación de Químicos Analíticos Oficiales Internacional, Arlington,
Virginia, EE.UU..
2 Los métodos aprobados de la Asociación Americana de Químicos de Cereales (2000). 10 º edición. Asociación Americana de Químicos de
Cereales, Inc., Minnesota, EE.UU..

3 Los métodos para la determinación de hierro se obtuvieron a través de la comunicación personal con el Dr. Omar Dary en el Instituto de Nutrición de
Centroamérica y Panamá, Ciudad de Guatemala, Guatemala.
1
Los métodos de análisis para la fortificación de harina de trigo con hierro monitoreo
Siempre se debe tener cuidado al manipular los ácidos, ya que son corrosivos y causar quemaduras. Los técnicos deben llevar ropa
protectora, incluyendo guantes, y trabajar bajo una campana al manipular ácidos concentrados y otros agentes corrosivos. (Véase el
Apéndice 3.11 de seguridad en el laboratorio.)
2
II. Método cualitativo
A. método de ensayo de la mancha
Este método, aprobado por la AACC, es aplicable para determinaciones cualitativas de hierro en la harina riched es-. (Véase el
Apéndice 3.3.)
Principio
El hierro férrico añadido a la harina reacciona con un reactivo de tiocianato (KSCN) para formar un complejo de color rojo. Un mayor número de
manchas rojas y un color rojo más profundo aparecen con harina enriquecida y fortificada compara- ción con harina no tratada.
ventajas
1. Es una técnica simple, rápido y fácil que no requiere tratamiento previo de la muestra.
2. Es de bajo costo; sólo dos reactivos, KSCN y HCl, se necesitan.
3. El personal con un mínimo de entrenamiento pueden llevar a cabo este ensayo.
4. Que no requiere un laboratorio; puede llevarse a cabo en la fábrica de harina.
limitaciones
1. No es cuantitativa, es decir, no determina la cantidad de hierro presente en la muestra.
notas
1. Este método muestra sólo el hierro férrico. Si se añade hierro en forma ferrosa, la muestra necesita ser oxidado con peróxido
de hidrógeno para convertir el ferroso a hierro férrico antes del análisis.
3
III. Semi-cuantitativos
Métodos Semi-cuantitativos Métodos
A. método de ensayo de la mancha
Este método es una adaptación del método de ensayo de la mancha cualitativa de la AACC. Fue desarrollado y se usa rutinariamente en el INCAP
para determinaciones semi-cuantitativas de hierro de la harina. (Véase el Apéndice 3.4.)
Principio
Férrico o hierro ferroso añadido a la harina reacciona con un reactivo de tiocianato (KSCN), en presencia de peróxido de hidrógeno, para
formar un complejo de color rojo. El número de puntos refleja aproximadamente la cantidad y la homogeneidad del hierro en la muestra.
ventajas
1. Es una técnica simple, rápido y fácil que no requiere tratamiento previo de la muestra.
2. Es barato.
3. El personal con un mínimo de entrenamiento pueden llevar a cabo este ensayo.
limitaciones
1. Es semi-cuantitativa y sólo proporciona una estimación aproximada de la cantidad de hierro en la muestra.
notas
1. Hierro añadido a la harina en hierro ferroso o férrico o bien pueden ser detectados.
2. muestras de harina con concentraciones conocidas de hierro pueden ser probadas y los resultados pueden ser utilizados como una
referencia para las estimaciones más precisas.
SI. método colorimétrico
Este método fue desarrollado por el INCAP y se usa rutinariamente en su laboratorio para la determinación tiva semi-cuantitativa de hierro en
la harina. (Véase el Apéndice 3.5.)
Principio
Después de la combustión total del material orgánico, por calcinación de la muestra, el hierro se disuelve en una solución ligeramente
ácida y reduce a través de la adición de hidrocloruro de hidroxilamina. Ferrosos re hierro actúa con el cromógeno, batofenantrolina, para
formar un complejo de color rosa. La intensidad del color proporciona una estimación aproximada de la cantidad de hierro en la muestra.
ventajas
1. Es aplicable a diversos tipos de productos alimenticios e ingredientes.
2. Es relativamente barato.
3. El personal con una formación mínima pueden realizar los análisis.
limitaciones
1. Es semi-cuantitativa, pero proporciona una estimación más precisa que la prueba de la mancha semi-cuantitativa.
2. Es un procedimiento que consume tiempo que implica la incineración secar durante la noche. Las muestras con un alto contenido
de proteína pueden tomar más tiempo para ser incinerados.
3. Se implica el manejo de las soluciones de ácido calientes; por lo tanto, se deben tomar las precauciones de seguridad apropiadas.
notas
1. La prueba se basa en la diferenciación visual o categorización y no requiere de un espectrofotómetro.
5
2. reactivo de hidrocloruro de hidroxilamina se debe almacenar en el refrigerador.

3. Es posible reemplazar el reactivo con el batofenantrolina α, α- cromógeno dipiridilo. Sin embargo, ligeras
diferencias de color se vuelven más difíciles de distinguir con el reactivo dipiridilo.
6
IV. Métodos cuantitativos
A. método espectrofotométrico
Este método está aprobado por la AACC para determinaciones cuantitativas de hierro en los cereales y productos a base de cereales
alimenticios. (Véase el Apéndice 3.6.)
Principio
constituyentes orgánicos en una muestra de alimento se descomponen por incineración en seco o húmedo a una temperatura elevada y los
componentes inorgánicos se disuelven en una solución ligeramente ácida. hierro ferroso solubilizado se hace reaccionar a continuación con un
reactivo cromogénico, ortofenantrolina, en presencia de un agente reductor (tal como hidrocloruro de hidroxilamina), resultando en un complejo
de color rosa. La concentración de hierro se determina por su absorbancia espectrofotométrica a 510 nm.
ventajas
2. Es una técnica sensible con un límite de detección de menos de 1 ppm (1 μ g / g o 1 mg / Kg) de hierro en la muestra.
3. Es relativamente barato en comparación con espectroscopia de absorción atómica (AAS) o métodos de espectroscopia
de emisión.
4. La solución se incinera puede ser utilizado para la determinación de otros elementos inorgánicos.
limitaciones
1. Se requiere de personal capacitado para manejar los productos químicos corrosivos y para operar el espectrofotómetro o
colorímetro.
2. Es un procedimiento que consume tiempo que implica la incineración secar durante la noche. Las muestras con alto contenido de proteína
pueden tomar más tiempo para ser incinerados.
3. Es relativamente caro que implica costos de reactivos, horno de mufla (aproximadamente US $ 1.500), y el espectrofotómetro
(entre US $ 8.500 y 12.000; Apéndice 3.1). Se necesita una campana de humos (entre US $ 3.500 y 13.000) de incineración
en húmedo de muestras.
notas
1. Se requiere la preparación de una curva estándar de hierro.
2. Los reactivos deben ser almacenados en el refrigerador.
3. Los cromógenos distintos de orto-fenantrolina, tales como α, α- dipiridilo, batofenantrolina, y ferrozina, también reaccionan con el
hierro ferroso y son ampliamente utilizados para las determinaciones de hierro en varios laboratorios de alimentos. (Ver método
INCAP VI, Apéndice 3.7.)
4. Aunque se recomienda incineración en seco, cenizas húmedas también se puede usar para la determinación de hierro
espectrofotométrico. procedimientos cenizas húmedas se describen en los Apéndices 3.9 (preparación de la muestra) y 3,10.
SI. espectrofotométrico de absorción atómica método (AAS)
Este método está aprobado por la AACC y la AOAC para la determinación de hierro en diversos productos, INCLUYENDO cereales ING, productos
de cereales, la leche y los productos lácteos. (Ver Apéndices 3.8 y 3.9).
Principio
elementos inorgánicos, incluyendo el hierro, se solubilizan después de incineración en seco o en húmedo la muestra de alimento. La solución que
contiene hierro se atomiza entonces en una llama de aire-acetileno, y la absorción se midió a una longitud de onda específica (248 nm) para
determinar la concentración de hierro.
ventajas
7
2. Es una técnica sensible con un límite de detección de 10 a 20 ppb y un rango lineal entre 1 y 20 ppm de hierro.
3. Es altamente fiable, exacta y precisa.

4. Una vez que la muestra se incinera, la solución se puede utilizar para la determinación de otros elementos.
5. Aunque el instrumento AAS es caro, tiene una ventaja única, es decir, la capacidad para determinaciones
simultáneas de calcio, hierro, cobre, magnesio, zinc, y manganeso.
6. Es ideal para el análisis de un gran número de muestras.
limitaciones
1. Se requiere personal cualificado que están capacitados para manejar los productos químicos corrosivos. Además, el personal debe estar
bien entrenados en el uso del instrumento de AAS para optimizar los ajustes del instrumento y los parámetros de flujo de aire-acetileno.
2. El método AAS es un procedimiento que consume tiempo que implica la incineración secar durante la noche. Las muestras con alto
contenido de proteína pueden tomar más tiempo para ser incinerados.
3. El instrumento de AAS tiene altos costos de capital y de mantenimiento. (Véase el Apéndice 3.1.)
notas
1. cuidadosa calibración del instrumento AAS con una solución patrón de hierro es necesario. Un estándar interno también puede
ser necesaria para minimizar la interferencia de la matriz.
2. Tanto los procedimientos de incineración en seco y en húmedo son aprobados por AOAC para la preparación de muestras de
alimentos basados planta- para la determinación de hierro por AAS (AOAC 975.03, Apéndice 3.9).
3. cenizas húmedas también se puede realizar usando ácidos sulfúrico y nítrico. (Véase la Universidad de Chile método, Apéndice
3.10).
8
Apéndice 3.1
los
El costo
instrumentos
de los instrumentos
analíticos seleccionados
de análisis seleccionados
/ / costo de
diferentes
equipos deproveedores
diferentes proveedores de equipo de
________________________________________________________________________________
Equipo Nombre del producto Costo (US $) Proveedor
________________________________________________________________________________
AAS AAS-Analyst 100 16.500 - 20.000 Perkin-Elmer

AAS de llama 17000 Thermo Jarrell-Ash
Incineración / campana extractora de gases SafeAire • Básico 3400 - 7600 Fisher Scientific
Labconco • digestión ácida 13.120 Fisher Scientific
Labconco • digestión ácida 12.495 - 16.625 VWR
Horno de mufla Isotemp • Básico 1600 - 2230 Fisher Scientific

Thermolyne de sobremesa 1150 - 3200 Fisher Scientific
Thermolyne de servicio pesado 1670 - 3170 VWR
Espectrofotómetro Lambda UV / Vis Serie 8.510 - 15.750 Perkin-Elmer

Serie DU600 10,100 - 11,700 Beckman Instruments
________________________________________________________________________________
Nota: El equipo puede estar disponible en los proveedores locales a un costo menor. Se aconseja a los lectores a explorar tales posibilidades.
9
Apéndice 3.2
proveedores
Lista de proveedores
de vidriode
devidrio
laboratorio,
de laboratorio, lista de
productos
equipos, y químicos
equipos químicos, y
________________________________________________________________________________
Aldrich Tel: (414) 273 3852 productos químicos,
PO Box 355 Fax: (414) 273 4979 cristalería,
Milwaukee, WI 53201-9358 equipo de laboratorio
Baxter Diagnostics Inc. Tel: (847) 229 0180 Cristalería,

División de Productos científica Tel: (800) 873 8971 equipo de laboratorio, &
1430 Waukegan carretera Fax: (847) 229 0668 suministros
McGaw Park, IL 60085
Beckman Instruments, Inc. Tel: (714) 871 4848 espectrofotómetro

2500 Harbor Blvd. Tel: (800) 854 8067
Fullerton, CA 92634 Fax: (714) 521 3700
Fisher Scientific Tel: (412) 490 8300 Cristalería,

711 Forbes Ave. Fax: (800) 926 1166 equipo de laboratorio, &
Pittsburgh, PA 15219-4785 Fax: (201) 379 7638 suministros
NIST una Tel: (301) 975 6776 normas,

Bldg. 202, 204 habitaciones Fax: (301) 948 3730 Materiales de referencia
Gaithersburg, MD 20899
Perkin Elmer Tel: (203) 762 1000 instrumento de AAS,

761 Main Ave. Fax: (203) 762 6000 espectrofotómetro
Norwalk, CT 06859-0012
Sigma Chemical Co Tel: (314) 771 5750 productos químicos,

PO Box 14508 Fax: (314) 771 5757 kits de prueba
St. Louis, MO 63178-9916
Thermo Jarrell Ash-Co Tel: (508) 520 1880 instrumento de AAS

27 Forge Parkway
Franklin, MA 02038
VARIAN Tel: (408) 734 5370 espectrofotómetro

220 Humboldt Corte Fax: (408) 744 0261
Sunnyvale, CA 94089
VWR International Tel: (908) 757 4045 Cristalería,

PO Box 1002 Fax: (908) 757 0313 equipo de laboratorio, &
S. Plainfield, NJ 07080 suministros
________________________________________________________________________________
una Instituto Nacional de Estándares y Tecnología
Revisión de la tabla original por Dary, O., G. Arroyave, H. Flores, FACS Campos, MHCB Lins. 1996. fortificación de azúcar con vitamina
A. Parte 3. Los métodos analíticos para el control y evaluación de la fortificación del azúcar con vitamina A. USAID / INCAP.
Nota: La tabla anterior sólo las listas de proveedores con base en los Estados Unidos. Sin embargo, el equipo y los materiales pueden obtenerse a través de proveedores
locales en la mayoría de países.
11
método cualitativo Hierro
3.3 Apéndice método cualitativo
3.3 Apéndice Hierro
Método AACC 40-40

La primera aprobación 5 de mayo de, 1960; reaprobación 03 de noviembre 1999 Este
método determina cualitativamente hierro añadido a la harina.
I. Materiales
rectangular de vidrio o una placa de hierro galvanizado rígido, alrededor de 12 x 8 cm Trier Flour
II. Equipo
Ninguna
III. Reactivo
reactivo tiocianato - Disolver 10 g de KSCN en 100 ml de agua. Mezclar con el mismo volumen de HCl 2N justo antes del uso
El peróxido de hidrógeno, 3%
IV. Procedimiento
Determinación de hierro férrico
1. Slick lado harina no tratada y enriquecida por lado de la forma habitual (Véase método 14-10 a continuación).
2. Caída de aproximadamente 1 ml de reactivo de tiocianato en la unión de las dos harinas, en cantidad suficiente para zona húmeda de
aproximadamente 1 pulgada de diámetro.
3. Dejar reposar al menos 10 minutos. Si los compuestos férricos agregados están presentes, color rojo profundo se formará que en harina no tratada.
áreas locales pequeñas de rojo intenso aparece después de 20 min, lo que indica la ubicación de las partículas de compuesto de hierro. (Esto
proporciona alguna estimación de la uniformidad de la mezcla.)
Determinación de hierro ferroso

1.Siga los pasos 1 y 2 anteriores.
2.Drop aproximadamente 1 ml de peróxido de hidrógeno al 3% sobre el mismo área mojada por el reactivo tiocianato.
paso 3.Repita 3 anterior. El hierro ferroso se habrá oxidado al estado férrico por el peróxido de hidrógeno.
V. Referencia
Schlesinger, HI, y Van Valkenburgh, HB 1931. La estructura de tiocianato férrico y la prueba de tiocianato de hierro.
Mermelada. Chem. Soc. 53: 1212.
Prueba de colores MÉTODO 14-10-Pekar (Prueba de pulido)

aprobación últimos 13 de abril de, 1961; reaprobación 03 de noviembre 1999
Objetivo
el color de la harina, como contenido de cenizas, es una indicación de la eficiencia de molienda. Este método es una prueba cualitativa para el color
de la harina. El color de la harina se compara visualmente a la de una harina estándar.
Aparato
1. rectangular de vidrio o una placa de hierro galvanizado rígida, a unos 12 cm de largo y 8 cm de ancho.
2. mancha de harina
13
Procedimiento
1. Coloque aproximadamente 10-15 g de harina de vidrio o placa de hierro. Empacar un lado en línea recta a través de mancha de harina. Tratar
misma cantidad de harina estándar utilizado por la comparación de la misma manera, de modo que los bordes rectos de dos harinas son
adyacentes.
2. Cuidadosamente mueva una de las porciones de modo que estará en contacto con el otro y “mancha”, tanto con un solo golpe de la mancha de
harina de tal manera que el espesor de la capa disminuye de aproximadamente 0,5 cm en el centro de la placa de capa fina a borde. Línea de
demarcación entre las dos harinas deben ser distintos. Tenga en cuenta la diferencia de color.
3. Para enfatizar las diferencias en color, cortado bordes de capa con mancha de harina para formar rectángulo y cuidadosamente sumergir la
placa con la harina en agua fría durante 1 minuto.
4. Se seca a 100 ° y tenga en cuenta la diferencia de color cuando todavía húmedo y cuando está completamente seca.
Nota
Dado que el contenido de humedad original de la harina tiene una influencia marcada en los resultados de la prueba de Pekar, harina estándar
y harina probado deben ser de aproximadamente el mismo contenido de humedad.
Referencia
Alcock, AW, y Ediger, NJ 1929. influencia de la humedad harina en la prueba de Pekar. Cereal Chem. 6: 410.
14
Apéndice 3.4
la
prueba
mancha
de la
semi-cuantitativa
mancha semi-cuantitativa
de hierro de hierro prueba de
método IV
INCAP IV INCAP
Adaptación del método cualitativo AACC 40-40 para el hierro
I. Materiales
Ver los
cuentagotas de cristal
II. Equipo
Ninguna
III. Reactivos y Soluciones

El ácido clorhídrico, HCl, 37% Merck 317 El peróxido de hidrógeno, H 2 O 2, 30%, Merck 7209 (es posible reemplazar este
reactivo con agua oxigenada comercial)
El tiocianato de potasio, KSCN, Merck 5124 o 5125 KSCN - 10%: Disolver 10 g de

KSCN en 100 ml de agua destilada.
HCl - 2M: Para un vaso de precipitados de 500 ml se añaden 100 ml de agua destilada, luego 17 ml de HCl concentrado, y finalmente 83 ml de agua
destilada. H 2 O 2 - 3%: Añadir 9 ml concentró H 2 O 2 ( 30%) a 81 ml de agua destilada.
reactivo 1
Inmediatamente antes de usar, mezclar cantidades iguales de 10% KSCN y HCl 2M. Marque los niveles de 20 y 40 ml en un matraz con una
pipeta. Añadir HCl 2 M hasta la primera marca y, a continuación añadir 10% de KSCN hasta la segunda marca. Este es el reactivo 1. Uso
plazo de 1 día. Eliminar los residuos.
El reactivo 2
3% de H 2 O 2. Desechar la solución restante al final del día.
IV. Procedimiento
1. Tomar una muestra de 100 g de harina y colocarla en el vidrio de reloj. Con la parte inferior de otro vidrio de reloj, pulse sobre la muestra de
harina de manera que forme una superficie plana.
2. Añadir 5 gotas de reactivo 1 con el gotero de modo que cubra un área de 4x4 cm (1.5x1.5 pulgadas). Dejar reposar de 15 a 30
segundos.
3. Añadir 5 gotas del reactivo 2 en la superficie cubierta por el reactivo 1. Dejar reposar 1 a 2 minutos.
V. Interpretación
La aparición de manchas de color rojo indica la presencia de hierro. El número de manchas es una estimación aproximada de la cantidad y
la homogeneidad de hierro en la muestra. Si se requiere una estimación más precisa, prueba con concentraciones conocidas de hierro (30,
60, y 90 ppm) y comparar los resultados con los de las muestras de ensayo.
VI. notas
Ninguna
15
Apéndice 3.5
Semi-cuantitativa
determinación colorimétrica
de hierro de
Semi-cuantitativa
hierro de determinación colorimétrica
en harina en
método de harina
INCAP V INCAP
método V
INCAP, Química y Laboratorio de Bioquímica

Revisión No. 2; De abril de 1997
Este método implica la combustión total del material orgánico por calcinación de la muestra. A continuación, la ceniza se disuelve en
ácido y el hierro presente se reduce a través de la adición de reactivo de clorhidrato de hidroxilamina. El hierro ferroso se determina
mediante la formación de un color rosa en presencia de la batofenantrolina cromógeno (ácido 4,7-difenil-1,10-fenantrolina-disulfónico).
I. Materiales
Matraces aforados - 25, 100 y 1000 Beakers ml -
500 ml Bureta - 25 ml crisoles de porcelana tubos
graduados
Pipetas serológicas - 5 y 10 ml pipetas

volumétricas - 1, 2, y 5 ml de tubos de ensayo -
10 ml
II. Equipo
Balanza analítica (1 mg) horno de
mufla placa caliente
III. reactivos
acetato de sodio (CH 3 COONa.3H 2 O), 99%, Fe <200 mg / kg, PM 136,08, Merck Art. 6267 ácido clorhídrico (HCl), el
37%, 1,19 g / ml, Fe <28 mg / ml, PM 36,46, Merck Art. 317 batofenantrolina, 4,7-difenil-1,10-fenantrolina-disulfónico
(C 24 H dieciséis norte 2 O 6 S 2), PM (ácido libre, anhidrato) 492,5, Sigma B-1375 de hidroxilamina hidrocloruro (NH 2 OH.HCl), PM
69,49, Baker 2196
Hierro estándar 1 g, Baker DILUT-IT 4777, o cualquier otro estándar de hierro, incluyendo sulfato de amonio ferroso.
Agua desionizada, Fe <1 mg / dl
A. Preparación de soluciones
El ácido clorhídrico (HCl), 6M: Añadir 200 ml de agua desionizada a un vaso de precipitados de 500 ml. Añadir lentamente 250 ml de HCl
concentrado. Dejar enfriar y transferir a un matraz aforado de 500 ml y hacer el volumen con agua desionizada. Transferir a un matraz de vidrio y se
cierran con un tapón de vidrio. Esta solución es estable indefinidamente.
HCl, 0.96M: Añadir 168 ml de agua desionizada a un vaso de precipitados de 500 ml. Añadir lentamente 32 ml de HCl 6M. Transferir a un matraz de
vidrio y se cierran con un tapón de vidrio. Esta solución es estable indefinidamente.
hidrocloruro de hidroxilamina, 10%: Para un vaso de precipitados de 500 ml se añaden 50 g de hidrocloruro de hidroxilamina y luego 400 ml de
agua desionizada. Agitar con una varilla de vidrio. Después de que se disuelve completamente, la transferencia a una
17
500 ml matraz aforado y hacer el volumen con agua desionizada. Transferir a un matraz de vidrio y se cierran con un tapón de vidrio.
Esta solución es estable indefinidamente.
Batofenantrolina, 0,025% en acetato de sodio, 2 M (Bathophenanthroline-

0,025% / CH 3 COONa-2M): Para un vaso de precipitados 500 ml añadir 108,8 g de trihidrato de acetato de sodio y 0,10 g batofenantrolina. Añadir
400 ml de agua desionizada. Disolver completamente con una varilla de vidrio utilizando calor suave si es necesario. Asegúrese de que
batofenantrolina se haya disuelto completamente, ya que es poco soluble a temperatura ambiente. Almacenar en un frasco de vidrio o plástico.
Desechar la solución si se desarrolla el color rosa, ya que esto indica contaminación con hierro. La solución es estable durante 3 a 4 meses.
B. Preparación de los estándares de hierro
Estándar, 1.000 ppm: Diluir DILUT-IT reactivo, de acuerdo con las instrucciones del fabricante, en un matraz de 1 L con agua desionizada.
Alternativamente, se disuelven 3,512 g de Fe (NH 4) 2 ( ENTONCES 4) 2. 6H 2 O en agua destilada, añadir 2 gotas de HCl concentrado y se diluye hasta
500 ml.
Estándar, 10 ppm: A un matraz aforado de 100 ml, añadir 1,0 ml (medidos con una pipeta volumétrica) de 1000 estándar ppm de hierro. A
continuación, añadir 16 ml de HCl 6 M y ajustar el volumen con agua desionizada.
Los estándares para la comparación visual: Utilice 25 matraces aforados ml. Para hacer que las concentraciones de 0,0, 0,8,
1,6, 2,4, y 3,2 ppm, que son equivalentes a 0, 20, 40, 60, y 80 ppm (mg / kg) de hierro en la harina, añadir 2 ml HCl 6 M a cada matraz, a
continuación, agregar una solución de hidroxilamina 2,5 ml 10% y una cantidad correspondiente de la norma de hierro 10 ppm (ver tabla
siguiente). Ajustar el volumen con agua desionizada. Cubrir con tapones de vidrio. Estas normas son estables durante 2 a 4 semanas.
_____________________________________________________________________________ concentración equivalente

la concentración real Volumen de 10 ppm de hierro
en mg de hierro / kg de harina estándar a añadir (ml)
en hierro mg / L (ppm)
_____________________________________________________________________________
0 0.0 0.0
20 0.8 2.0
40 1.6 4.0
60 2.4 6.0
80 3.2 8.0
_____________________________________________________________________________
IV. Procedimiento
A. Incineración la muestra
1. Se pesan exactamente 2 g de muestra previamente homogeneizada. Pesar muestras en duplicados. Transferir la muestra a un crisol de
porcelana.
2. muestra de ceniza en un horno de mufla a 500 o C durante 4 horas. La muestra se incinera adecuadamente cuando se obtiene una ceniza blanca
o gris. Enfriar a temperatura ambiente.
B. solubilizar la ceniza
1. Añadir 5 ml de HCl 6 M a la crisol de porcelana permitiendo que el ácido para lavar las paredes del crisol y se evapora hasta que se seca
en la placa caliente, teniendo cuidado de que la muestra no salpica fuera del crisol en cualquier momento.
2. Disolver el residuo en exactamente 5 ml de HCl 6M y se deja durante 5 minutos en la placa caliente.

3. filtro en un matraz de 50 ml usando una pipeta Pasteur. Lavar el crisol usando varias porciones de agua destilada y
transferir cuantitativamente el contenido del crisol.
4. Añadir 5 ml de solución de hidroxilamina al 10% al matraz y mezclar haciendo girar suavemente el matraz. Ajustar el volumen con
agua desionizada.
18
determinación C. Hierro
1. Etiqueta de cinco tubos de 10 ml de prueba para 0, 20, 40, 60, y 80 ppm de normas de hierro y dos tubos de ensayo para muestras de harina
incinera.
2. Añadir 2 ml de cada uno de las soluciones patrón de hierro y soluciones de muestra harina incinera utilizando una pipeta volumétrica.
3. Añadir 6 ml de solución de acetato-2M batofenantrolina-0,025% / sodio usando una bureta. Dejar durante 20 minutos.
4. Compare el color de la muestra a la de las normas.
V. Interpretación
Reportar los resultados en intervalos de 0 a 20, 20 a 40, 40 a 60, o de 60 a 80 ppm. Si la intensidad del color superior a la de la
norma 80 ppm, diluir 5 ml de la solución de muestra con 5 ml de 0.96M HCl y mezclar. Repita el análisis con la muestra diluida.
Si el color de la muestra diluida cae en el intervalo de 20 a 40 ppm, la concentración real es de 40 a 60 ppm de hierro.
VI. notas
El reactivo batofenantrolina se puede reemplazar con α, α- dipiridilo (2,2'-bipiridina) [C10H8N2, PM 156,19, Fisher D-95] de
reactivo. En este caso, añadir 4 ml de la solución de cromógeno en lugar de 6 ml. La desventaja de usar el reactivo de dipiridilo
es que pequeñas diferencias en el color son más difíciles de distinguir.
VII. referencias
AOAC Official Methods of Analysis (1984), No. 14.011. JAOAC 27: 86, 396, 1944; 28: 77, 1945.
19
Apéndice método
espectrofotométrico Hierro 3.6 Apéndice
3.6 Método espectrofotométrico Hierro
40-41B
método AACC 40 AACC método
- 41B
la aprobación final 5 de mayo de, 1960; reaprobación 03 de noviembre 1999
Este método determina el contenido de hierro por reacción con ortofenantrolina y medición espectrofotométrica. Es aplicable a
los cereales y productos a base de cereales.
I. Materiales
matraz aforado, matraces de 1 L
volumétrico, matraces de 250 ml
volumétrico, 100 matraces ml
volumétrico, 25 ml Vasos de
precipitados, de 250 ml
pipetas volumétricas manuales, 1000 ml reloj consejos
vasos pipeta graduada tubos Consejos para tubos de
ensayo 'azules' pipetas, 10 mL
II. Equipo
Horno de mufla capaz de maintaing 550 °
Platinum, sílice, o crisol de porcelana, de aproximadamente 60 mm de diámetro, 35 ml de capacidad. Porcelana evaporación platos
de alrededor de 25 ml de capacidad son satisfactorios. No utilice platos de fondo plano de mayor diámetro de 60 mm.
Espectrofotómetro o colorímetro Eppendorf pipetas, 100 ml y 500 ml Balanza analítica Vortex mezclador de placa caliente
III. reactivos
1. Solución de ortofenantrolina. Disolver 0. lg o- fenantrolina en aproximadamente 80 ml de agua a 80 °, fresco, y diluir a 100 ml. Conservar en
frasco de color ámbar en el refrigerador. (Estable durante varias semanas.)
2. Solución patrón de hierro, 10 mg de Fe / ml. a) Disolver alambre Fe grado analítico 0,1 g en 20 ml de HCl y 50 ml de agua, y se
diluye hasta 1 litro. Diluir 100 ml de esta solución a 1 litro; o b) disolver 3,512 g de Fe (NH 4) 2 ( ENTONCES 4) 2. 6H 2 O en agua, añadir 2
gotas de HCl, y diluir a 500 ml. Diluir 10 ml de esta solución a 1 litro.
3. solución de clorhidrato de hidroxilamina. Disolver 10 g NH 2 OH.HCl en agua y diluir a 100 ml. Conservar en frasco de color ámbar en el
refrigerador. (Esta solución es estable durante varias semanas.)
4. solución de tampón acetato. Disolver 8,3 g de acetato de sodio anhidro (secado previamente a 100 °) en agua, añadir 12 ml de ácido
acético, y se diluye hasta 100 ml. (Puede ser necesario destilar el ácido acético y acetato de sodio purificar por recristalización a partir
de agua, dependiendo de la cantidad de Fe presente.)
5. Preparar los patrones de trabajo como sigue: Colocar alícuotas de la solución patrón de 10 mg / ml de acuerdo con la tabla a continuación en
100 ml de matraces aforados, añadir 2 ml de HCl concentrado a cada uno, y diluir a volumen.
21
__________________________________________________
Alícuota de 10? G / ml La concentración final Fe
solución tomada (ml) (Ppm)
__________________________________________________
0 0
2 0.2
5 0.5
10 1.0
15 1.5
20 2.0
25 2.5
30 3.0
35 3.5
40 4.0
45 4.5
__________________________________________________
Mezclar bien por inversión matraz de 10-20 veces. El uso de 10 ml de cada una de estas soluciones estándar, continuar bajo procedimiento
que empieza con el paso 8.
6. La ayuda Incineración
a. solución de nitrato de magnesio. Disolver 50 g de Mg (NO 3) 2. 6H 2 O en agua y diluir a 100 ml
o
si. redestilado HNO 3
IV. Procedimiento
1. Pesar con precisión 2-10 g de muestra (dependiendo de la concentración de hierro esperado) en crisol limpio. (Comienza a preparar la
solución en blanco en este punto de la misma manera como muestra.)
2. Char en la placa caliente o bajo lámpara infrarroja (opcional).
3. ceniza durante la noche en horno de mufla a < 550 °. Ver notas.
4. Retire el crisol del horno y enfriar a temperatura ambiente.
5. añaden cuidadosamente 5 ml de HCl concentrado, dejando que la porción superior de enjuague de ácido de crisol; evaporar a sequedad en
baño de vapor.
6. Disolver residuo mediante la adición de 2 ml de HCl concentrado, medido con precisión; cubrir con vidrio de reloj y de calor 5 min en baño de
vapor.
vidrio de reloj 7. Enjuague con agua, filtrar cuantitativamente en un matraz volumétrico ml L00, diluir a volumen y mezclar a fondo.
8. Pipetear alícuota de 10 ml en 25 ml matraz volumétrico, y añadir una solución de HCl 1 ml de hidroxilamina. Mezclar bien.
9. Después de 5 min, añadir 5 ml de solución tampón y 1 ml o- fenantrolina; diluir a volumen. Mezclar bien.
10. Dejar reposar 30 min, luego medir la absorbancia de las muestras, estándares y soluciones en blanco en espectrofotómetro a
510 nm. Nota:
a. Si la intensidad del color es demasiado grande, hacer dilución apropiada de solución de cenizas y continuar comenzando en el
paso 8.
si. Color producido es permanente durante varias horas. Mantener fuera de la luz solar directa.
22
V. Interpretación / Cálculos
1. Parcela absorbancia frente a la concentración (en ppm) para las soluciones estándar.
2. Obtener concentración de las soluciones de muestra de curva estándar, restando valor en blanco de cada uno.
3. Contenido de hierro (mg / 100 g) = (C x DF x 10) ÷ W
donde C = concentración de la solución de muestra (en ppm), DF = factor de dilución (si lo hay) de la etapa 10, tenga en cuenta una, W = peso
de la muestra en gramos.
VI. notas
Para disminuir el tiempo de incineración o para las muestras que no se queman prácticamente libre de carbono-, utiliza uno de los siguientes
coadyuvantes de la calcinación: Humedecer las cenizas con una solución de nitrato de 0,5-1,0 ml de magnesio) o b) redestilado HNO 3. contenido seco
y se encienden con cuidado en mufla para evitar salpicaduras. (A ceniza blanca sin resultados de carbono en la mayoría de los casos.) No añadir
estas ayudas de incineración a la harina (productos que contienen NaCl) leudante en cápsula de platino, a causa de una acción vigorosa en el plato.
VII. referencias
1. Andrews, JS y fieltro, C. El contenido de hierro de cereales. Cereal Chem 18: 8 l9.
2. AOAC Internacional. 1998. Métodos Oficiales de Análisis de la AOAC International, 16 º ed., 4 º rev, Método 944.02. La
Asociación, Gaithersburg, MD.
3. Howe, M. 1944. Informe de los 1943-44 métodos de subcomité análisis en la determinación de hierro en productos de
cereales. Cereal Chem. 21: 412.
23
Apéndice 3.7
espectrofotométrico
El análisis espectrofotométrico
cuantitativopara
paraelcuantitativa
análisis
determinación del
de hierro
hierro en
en los
los alimentos
alimentos
método VI
INCAP VI INCAP
INCAP, Química y Laboratorio de Bioquímica

Revisión No. 3; De abril de 1997
Para analizar hierro inorgánico en los alimentos, el material orgánico se quema en primer lugar por calcinación. La ceniza resultante
se solubiliza y el hierro reducido a la forma ferrosa mediante la adición de hidroxilamina. El hierro ferroso se determina
espectrofotométricamente después de formar un complejo coloreado con cualquiera de los siguientes cromógenos: α, α- dipiridilo
(2,2'-bipiridina), batofenantrolina (4,7-difenil-1,10phenanthroline-disulfónico), o ferrozina (3- (2-piridil) -5,6-bis (ácido 4-fenilsulfónico)
-1 , 2,4- triazina. los máximos de absorción de la solución coloreada es 521 nm para dipiridilo, 535 nm para batofenantrolina, y 562
nm para ferrozina. la reacción conduce a la formación del color es sensible al pH, por lo que el pH de la solución se mantiene a
través de la adición de tampón de acetato de sodio 2M.
I. Materiales
Manual de pipetas volumétricas (200-1000 mL) crisoles de
porcelana Vidrios de reloj puntas de las pipetas graduadas tubos
Consejos para tubos de ensayo 'azules' pipetas, 10 mL
II. Equipo
mezclador Vortex Balanza
analítica
Espectrofotómetro (521, 535, o 562 nm) placa caliente
horno de mufla
Eppendorf pipeta (100 y 500 ml)
III. reactivos
acetato de sodio (CH 3 COONa.3H 2 O), 99%, Fe <200 mg / kg, PM 136,08, Merck Art. 6267 ácido clorhídrico
(HCl), el 37%, 1,19 g / ml, Fe <28 mg / ml, PM 36,46, Merck Art. 317
α , α - dipiridilo (2,2' bipiridina) (C 10 H 8 norte 2), PM 156,19 Fisher D-95
o
Batofenantrolina, 4,7-difenil-1,10-fenantrolina-disulfónico (C 24 H dieciséis norte 2 O 6 S 2), PM (ácido libre, anhidrato) 492,5, Sigma
B-1375 de hidroxilamina hidrocloruro (NH 2 OH.HCl), PM 69,49, Baker 2196 estándares de hierro, elija entre los
siguientes:
25
- hierro electrolítico, Merck 3810 o de Baker 2234
- sulfato de amonio ferroso, (NH 4) 2 Fe (SO 4) 2. 6H 2 O Merck 3792
- Hierro estándar, Merck 19781
IV. Procedimiento
A. Preparación de soluciones
El ácido clorhídrico (HCl), 6M: Añadir 200 ml de agua desionizada a un vaso de precipitados de 500 ml. Añadir lentamente 250 ml de HCl
concentrado. Dejar cocer y transferir a un matraz aforado de 500 ml y crea el volumen con agua desionizada. Transferir a un matraz de vidrio y el
sello. Esta solución es estable indefinidamente.
HCl, 0.96M: Añadir 168 ml de agua desionizada a un vaso de precipitados de 500 ml. A continuación, añadir lentamente 32 ml de HCl 6M.
Transferir a un matraz de vidrio y el sello. Esta solución es estable indefinidamente.
hidrocloruro de hidroxilamina, 10%: Para un vaso de precipitados de 500 ml se añaden 50 g de hidrocloruro de hidroxilamina, a continuación, añadir
400 ml de agua desionizada. Agitar con una varilla de vidrio. Después de que se disuelve completamente, transferir a un matraz aforado de 500 ml y
hacer el volumen con agua desionizada. Transferir a un matraz de vidrio y el sello. Esta solución es estable indefinidamente.
Dipiridilo, 0,025% en acetato de sodio, 2 M: Para un vaso de precipitados 500 ml añadir 108,8 g de trihidrato de acetato de sodio y 0,10 g dipiridilo.
Añadir 400 ml de agua desionizada. Disolver completamente con calor suave si es necesario. Asegúrese de que batofenantrolina se haya disuelto
completamente, ya que es poco soluble a temperatura ambiente. Almacenar en un vaso o recipiente de plástico transparente. Desechar la solución si
el color rosa se desarrolla ya que esto indica contaminación con hierro. La solución es estable durante 3 a 4 meses.
Batofenantrolina, 0,025% en acetato de sodio, 2 M (Bathophenanthroline-

0,025% / CH 3 COONa-2M): Para un vaso de precipitados 500 ml añadir 108,8 g de acetato de sodio, trihidrato, y 0,10 g batofenantrolina.
Añadir 400 ml de agua desionizada. Disolver completamente con calor suave si es necesario. Asegúrese de que batofenantrolina se haya
disuelto completamente, ya que es poco soluble a temperatura ambiente. Guárdelo en un frasco de vidrio o plástico. Desechar la solución si
el color rosa desarrolla (indica contaminación con hierro). La solución es estable durante 3 a 4 meses.
B. Preparación de los estándares de hierro

Estándar, 1.000 ppm: Diluir DILUT-IT reactivo, de acuerdo con las instrucciones del fabricante, en un matraz de 1 L, utilizando agua desionizada.
Alternativamente, se disuelven 3,512 g de Fe (NH 4) 2 ( ENTONCES 4) 2. 6H 2 O en agua destilada, añadir 2 gotas de HCl concentrado y se diluye hasta 500
ml.
Estándar, 10 ppm: A un matraz aforado de 100 ml, añadir 1,0 ml (medidos con una pipeta volumétrica) de 1000 estándar ppm de hierro.
A continuación, añadir 16 ml de HCl 6M y hacer el volumen con agua desionizada.
Preparación de las normas: Preparar estándares en 100 matraces aforados mL. Para hacer que las concentraciones de 0,0, 0,3, 0,6, 1,2,
2,4, y 4,0 ppm, que son equivalentes a 0, 7,5, 15, 30, 60, y 100 ppm (mg / kg) de hierro en la harina, añadir 8 ml de HCl 6M a cada matraz, a
continuación, añadir una cantidad correspondiente de patrón de hierro 10 ppm (véase la tabla siguiente). Ajustar el volumen con agua
desionizada. Almacenar en frascos de vidrio oscuro y cubrir con tapones de vidrio. Estas normas son estables durante 2 a 4 semanas.
________________________________________________ concentración real
Volumen de 10 ppm de hierro

en hierro mg / L (ppm) estándar a añadir (ml)
________________________________________________
0.0 0
0.3 3
0.6 6
1.2 12
2.4 24
4.0 40
________________________________________________
26
C. Incineración la muestra
1. Se pesan exactamente a cabo sobre 2 g previamente homogeneizada muestra. Pesar muestras en duplicados. Transferir la muestra a un
crisol de porcelana.
2. muestra de ceniza en un horno de mufla a 500 o C durante 4 horas. La muestra se incinera adecuadamente cuando una
se obtiene ceniza blanca o gris. Enfriar a temperatura ambiente.
D. solubilizar la ceniza
1. Añadir 5 ml de HCl 6 M a la crisol de porcelana permitiendo que el ácido para lavar las paredes del crisol y se evapora hasta que se seca
en la placa caliente, teniendo cuidado de que la muestra no salpica fuera del crisol en cualquier momento.
2. Disolver el residuo en exactamente 5 ml de HCl 6M y se deja durante 5 minutos en la placa caliente.

3. filtro en un matraz de 50 ml. Lavar el crisol con varias porciones de agua destilada, y transferir
cuantitativamente el contenido del crisol.
Determinación E. Hierro
1. Etiqueta, por duplicado, 10 tubos de ensayo mL para los estándares de (0,0, 0,3, 0,6, 1,2, 2.4, 4.0, y hasta 10 ppm), control, y
muestras.
2. A cada tubo correspondiente, añadir 5 ml de estándar, control, o muestra.
3. Añadir 0,5 ml de solución de hidroxilamina al 10%. Vórtice.
4. Añadir 4 ml de dipiridilo-0,025% / acetato de sodio-2M o solución / acetato de sodio-2M batofenantrolina-0,025%. Vortex
y se deja durante 20 minutos.
5. Leer la absorbancia de la solución en cada tubo en un espectrofotómetro a 521 nm para dipiridilo o 535 nm para
batofenantrolina. Ajuste a cero usando agua destilada.
1. concentración Parcela de hierro en ppm (y) frente a la absorbancia (x).
2. La concentración de hierro se puede calcular directamente mediante una ecuación de regresión. Para informar de la concentración de hierro en
mg de hierro por kg de alimento, multiplicar los resultados obtenidos en ppm (mg / L) como:
Hierro (mg / kg) = conc. de hierro (mg / L) x [(50 x 10- 3 L) / (muestra en kg)]
Hierro (mg / kg) = conc. (Ppm) / peso (g) x 50
VI. notas
1. Asegúrese de que todos los artículos de vidrio son adecuados para el análisis mineral. Los reactivos deben ser de grado analítico con un precio tan
bajo concentración de hierro como sea posible.
2. Use sólo agua destilada y desionizada con una conductividad de menos de 2 mSi / cm o 10- 6 ( ohm.cm) - 1.
3. Cuando se utiliza el cromógeno dipiridilo, es fundamental para mantener el pH de la solución entre 5 y 6. Si es necesario, añadir
solución de tampón de acetato de sodio.
micro ensayo: Si pipetas manuales y Eppendorf están disponibles, así como un espectrofotómetro capaz de leer células pequeñas, este
método puede llevarse a cabo en la versión “micro”. Los cálculos son similares al método de “macro”.
1. Identificar, por duplicado, 10 tubos mL para los estándares de (0,0, 0,3, 0,6, 1,2, 2,4, 4,0, y hasta 10 ppm), control, y muestras.
2. A cada tubo correspondiente, añadir 1 ml de estándar, control o muestra.

3. Añadir 0,1 ml 10% de solución de hidroxilamina y vórtice.
4. Añadir 0,75 ml de dipiridilo-0,025% / acetato de sodio-2M o solución / acetato de sodio-2M batofenantrolina-0,025%. Vortex
y se deja durante 20 minutos.
5. Leer la absorbancia de la solución en cada tubo en un espectrofotómetro a 521 nm para dipiridilo o 535 nm para
batofenantrolina. Ajuste a cero usando agua destilada.
27
VII. referencias
AOAC Official Methods of Analysis (1984), No. 14.011. JAOAC 27: 86, 396, 1944; 28: 77, 1945. La medición de los niveles de
hierro. 1985. Informe de la Anemia Nutricional Grupo Consultivo Internacional (INACG).
28
Apéndice 3.8
espectrofotometría
Elementos por elementos
de absorción
espectrofotometría
atómica de absorción atómica por
AACC
método40-70
AACC 40 método- 70
la aprobación final de 16 de octubre de, 1991; Reaprobación 03 de noviembre 1999
Este método determina calcio, cobre, hierro, magnesio, manganeso y zinc en granos y productos de cereales.
I. Materiales
II. Equipo
Atómica absorción productos de cereales espectrofotómetro. Varios modelos comerciales están disponibles. Debido a que cada diseño es
algo diferente, con diferentes requisitos de la fuente de luz, velocidad de flujo del quemador, y la sensibilidad del detector, sólo el contorno
general de los parámetros de funcionamiento se da en Tabla I
(abajo). El operador debe familiarizarse con los ajustes y procedimientos adaptados a propio aparato y el uso de mesa sólo como guía para
intervalos de concentración y las condiciones de la llama. quemador de una ranura puede requerir que añadir que lantano a las soluciones
estándar y de muestra para todos los elementos. Incineración vasos, 150 ml vaso de precipitados (Pyrex o Vycor) o 30 ml Vycor crisol. Horno de
mufla capaz de operar a temperaturas de hasta 525 °. mezclador Vortex Balanza analítica placa caliente
Eppendorf pipeta (100 y 500 ml)
Tabla I. Parámetros de funcionamiento

______________________________________________________________________________ Elemento Longitud de onda ( UNA)
Llama una Rango (g / ml) observaciones
______________________________________________________________________________ Ca
4227 Rica de aire-C H 2-20 2 21% La, 1% de HCl
4227 Rich N 2 jefe 2 H 2 2-20 Requiere quemador especial
Cu 3427 Aire-C 2 H 2 2-20
Fe 2483 Rica de aire-C 2 H 2 2-20
mg 2852 Rica de aire-C 2 H 2 0,2-2 La pueden necesitar
Minnesota 2795 Aire-C 2 H 2 2-20
Zn 2138 Aire-C 2 H 2 0,5-5
______________________________________________________________________________
una C 2 H 2 = acetileno
29
III. reactivos
1. Agua, destilada-desionizada (resistencia mayor de 10 megaohmios). Utilice durante todo el procedimiento en toda la preparación y la dilución de
las soluciones.
2. Las soluciones de reserva. Ver Nota 1.
a. El calcio, 25 mg de Ca / ml. Disolver 1,249 g CaCO 3 en una cantidad mínima 3N HCl. Diluir hasta 1 litro. Diluir 50 ml a 1
litro.
si. El cobre, 1,000 g de Cu / ml. Disolver 1,000 g de metal puro Cu en una cantidad mínima HNO 3 y añadir 5 ml de HCl. Se
evapora casi hasta sequedad y se diluye hasta 1 litro con HCl 0,1N.
C. Hierro, 1,000 g de Fe / ml. Disolver alambre de Fe puro 1,000 g en aproximadamente 30 ml de HCl 6N con hirviendo. Diluir hasta 1
litro.
re. Magnesio, l000 mg Mg / ml. Coloque 1,000 g de metal puro Mg en 50 ml de agua y se añade lentamente 10 ml de HCl
concentrado. Diluir hasta 1 litro.
mi. El manganeso, 1,000 g Mn / ml. Disolver 1,582 g de MnO 2 en unos 30 ml de HCl 6N. Hervir para eliminar Cl y se diluye
hasta 1 litro.
F. Zinc, 1,000 g de Zn / ml. Disolver 1,000 g de metal Zn puro en aproximadamente 10 ml de HCl 6N. Diluir hasta 1 litro.
3. lantano solución madre, 50 g La / litro ~ 5% de HCl. Disolver 58,65 g de La 2 O 3 ( 99,99%, bajo contenido de calcio) en 250 ml de HCl
concentrado, la adición de ácido lentamente. Diluir a l litro.
4. Trabajar soluciones estándar.

a. El calcio, 0, 5, 10, 15, y 20 g de Ca / ml que contienen 1% La y 1% de HCl ~. A 25 ml matraces aforados, añadir
0, 5, 10, 15, y 20 ml Ca solución madre (reactivo 2a). Añadir 5 ml La solución y diluir a volumen.
si. Otras soluciones estándar. Diluir alícuotas de soluciones 2b, 2c, 2d, 2e, 2f y con HCl 0,5 N para hacer al menos cuatro
soluciones estándar de cada elemento dentro del alcance de determinación.
IV. Procedimiento
A. Preparación de la muestra
1. Se pesan exactamente 1-10 g de muestra de tierra (dependiendo de la concentración esperada de elemento) en incineración recipiente. Ver nota 2.
comenzar la preparación del blanco de reactivo en este punto.
2. Char en la placa caliente o en mufla, a continuación, ASH en 500 ° durante la noche. Si no está completamente incinera, muestra fresco y
húmedo con unas pocas gotas de HCl concentrado o HNO 3, seco a fuego lento, y re-ash. Ver Nota 3.
3. Romper torta con varilla de agitación y disolver en 10 ml de HCl concentrado. Hervir y se evapora la solución casi hasta sequedad
en la placa caliente. No hornear residuos.
4. residuo Redisolver en 20 ml de HCl 2 N, hirviendo suavemente si es necesario.
5. Filtrar a través de papel rápido en 100 ml del matraz volumétrico, de papel de lavado y el residuo con agua. Diluir hasta 100 ml y
mezclar.
6. absorción Medida de la solución directamente, o se diluye con HCl 0,5 N para obtener soluciones dentro de los rangos de instrumento. Si
Ca se va a determinar, añadir suficiente solución madre La hacer dilución final 1% La (es decir, 5 ml La solución a matraz de 25 ml, 20 ml a
100 ml matraz, etc.). Véase Nota 4.
30
B. Método
1. Situar el instrumento como en la Tabla I o por ajustes óptimos previamente establecidos para los aparatos a utilizar. líneas secundarias o
menos sensibles se pueden utilizar para reducir la dilución necesaria si se desea. Ver Ref.
2.
2. Leer al menos 4 soluciones estándar dentro de rango analítico antes y después de cada grupo de 6 a 12 muestras. quemador Enjuague
con agua entre las muestras, y restablecer el punto cero de absorción cada vez.
3. Preparar curva de calibración a partir de la media de cada estándar antes y después de grupo de muestra. Ver nota
5.
4. concentración Lee de las muestras de trama de absorción contra g / ml.
Elemento (ppm) = (/ ml x 100 g) peso de la muestra ÷ (g)
Si se diluye original de 100 ml de volumen, tener esto en cuenta en el cálculo final.
VI. notas
1. No utilice <2 pipetas ml o <matraces volumétricos de 25 ml en la fabricación de los estándares. Preparar soluciones de trabajo en 0-20 mg / ml
rango diario fresco. aparato de dilución automática puede ser utilizado. Por otra parte, las normas adquiridos pueden ser sustituidas por soluciones
madre.
2. Algunos granos y productos no fortificados pueden requerir calcinación una muestra más grande para aumentar la concentración de
elementos a intervalos detectables. Ver Ref. 3.
3. La contaminación por material de laboratorio y reactivos puede contribuir cantidades significativas de error analítico. Los espacios en blanco se
deben ejecutar para supervisar la contaminación. Limpieza de protocolos, incluyendo enjuagues en ácidos minerales (por ejemplo, ácidos nítrico y
clorhídrico) y múltiples enjuagues en agua destilada / desionizada han demostrado ser eficaces en la reducción de la contaminación por metales en
el material de laboratorio. Si re-incineración es necesario, preparar una re-ceniza en blanco, usando la misma cantidad de HCl de concentración o
HNO 3 como para las muestras.
4. El fósforo interfiere en calcio y puede interferir en la determinación de magnesio con aire-C 2 H 2

quemadores. Eliminar las interferencias mediante la adición de La solución madre a soluciones estándar y de la muestra de modo que las diluciones
finales contienen 1% La. El fósforo no interfiere con la determinación de calcio cuando un N 2 0-C 2 H 2 Se utiliza quemador.
5. Se recomienda que un material de referencia estándar (tales como los disponibles en el Instituto Nacional de Normas y
Tecnología) ser analizada con frecuencia para asegurar la exactitud de la determinación. Elija material de referencia que
coincide lo más cerca posible de la matriz de la muestra que se analiza.
VII. referencias
1. AOAC Internacional. 1995. Métodos Oficiales de Análisis de la AOAC Internacional. dieciséis º ed. Método
965.09. La Asociación, Arlington, VA.
2. Gatehouse, BM, y Willis, JB 1961. Performance de una simple espectrofotómetro de absorción atómica.
Spectrochim. Acta 17: 710.
3. Zook, EG, Greene, FE, y Morris, ER 1970. composición de nutrientes de trigos seleccionados y productos de trigo. VI.
Distribución de manganeso, cobre, níquel, zinc, magnesio, plomo, estaño, cadmio, cromo y selenio tal como se determina
por espectroscopia de absorción atómica y Chem colorimetría Cereal. 47: 720.
31
Apéndice 3.9 Apéndice 3.9 método oficial de
la AOAC 975.03 método oficial de la AOAC 975.03 metales
en plantas y alimentos para mascotas metales en plantas y
alimentos para mascotas de absorción atómica método
espectrofotométrico de absorción atómica método
espectrofotométrico
Primera Acción 1975; Acción Final 1988

(Aplicable a calcio, cobre, hierro, magnesio, manganeso, potasio y zinc)
I. Materiales
II. Maquinaria / Aparatos

mezclador Vortex Balanza
analítica placa caliente
Horno de mufla con pirómetro y capaz de operar hasta 525 ° C o una Wet incineración campana de humos Eppendorf pipeta
(100 y 500 ml)
espectrofotómetro de absorción atómica - Varios modelos comerciales están disponibles. Debido a que cada diseño es algo diferente, con
diferentes requisitos de la fuente de luz, velocidad de flujo del quemador, y la sensibilidad del detector, esquema único general de parámetros de
funcionamiento se da en la Tabla 965.09 (abajo). Los operadores deben familiarizarse con los ajustes y procedimientos adaptados a su propia
mesa aparato y el uso sólo como guía para intervalos de concentración y las condiciones de la llama. (Precaución: Ver Apéndice 3.11
para las notas de seguridad en espectrofotómetro de absorción atómica)
Tabla 965.09 Los parámetros de funcionamiento

______________________________________________________________________________ Elemento
Longitud de onda ( UNA) Llama Rango (g / ml) observaciones
______________________________________________________________________________ Ca
4227 Rica de aire-C H 2-20 2 1% La, 1% de HCl
2
4227 Rich N 2 jefe 2 H 2 2-20 Requiere quemador especial

Cu 3427 Aire-C 2 H 2 2-20
Fe 2483 Rica de aire-C 2 H 2 2-20
mg 2852 Rica de aire-C 2 H 2 0,2-2 La pueden necesitar
Minnesota 2795 Aire-C 2 H 2 2-20
Zn 2138 Aire-C 2 H 2 0,5-5
______________________________________________________________________________
33
III. reactivos
desionizada H 2 O puede ser utilizado. (una) solución de potasio de valores. - 1,000 g K / mL. Disolver 1,9068 g secaron (2 h a 105 ° C)
de KCl en H 2 O y diluir a 1 L. Uso siguientes parámetros para la Tabla 965.09: 7665 UNA ( 766.5nm), aire-C 2 H 2 llama, y 0,04 a 2 g gama
/ mL. (si) Stock de calcio solutions.- Preparar Ca solución madre y las normas de trabajo como en 965.09B (abajo).
(C) Cu, Fe, Mg, Mn y Zn Stock solutions.- Preparar como en 965.09B (b), (c), y (e) - (g) (a continuación).
(D) Trabajar solutions.- estándar Diluir alícuotas de soluciones de (c) con HCl al 10% para hacer > 4 soluciones estándar de cada
elemento dentro del alcance de determinación.
965.09 soluciones estándar B.

(No utilice <2 pipetas ml o <25 matraces aforados mL. Aparato de dilución automática puede ser utilizado. Preparar soluciones estándar
en el rango de 0-20 mg diariamente fresca).
a. soluciones de calcio - 1) de la solución - 25 g de Ca / ml. Disolver 1,249 g CaCO 3 en una cantidad mínima 3N HCl.
Diluir a 1 L. Diluir 50 ml a 1 L. 2) Trabajar soluciones estándar - 0, 5, 10,
15, y 20 g de Ca / ml que contenía 1% La. A 25 ml matraces aforados añadir 0, 5, 10, 15, y 20 ml Ca solución madre.
Añadir 5 ml La solución madre y se diluye hasta 25 ml.
si. Cobre Stock solución - 1.000 g de Cu / ml. Disolver 1,000 g de metal puro Cu en una cantidad mínima HNO 3 y añadir 5 ml de
HCl. Se evapora casi hasta sequedad y se diluye hasta 1 L con HCl 0,1N.
C. Hierro solución stock - 1000 mg Fe / ml. Disolver alambre de Fe puro 1,000 g en ca 30 ml de HCl 6N con ebullición. Diluir a
1 L.
re. Lantano solución de reserva - 50 g La / L. Disolver 58,65 g de La 2 O 3 en 250 ml de HCl, ácido añadiendo lentamente. Diluir a 1 L.
mi. El magnesio de la solución - 1000 mg mg / ml. Coloque 1,000 g de metal puro Mg en 50 ml de H _ 2 0 y se añade lentamente 10 ml de
HCl. Diluir a 1 L.
F. Manganeso solución stock - 1,000 g Mn / mL. Disolver 1,582 g de MnO 2 en ca 30 ml de HCl 6N. Hervir para eliminar Cl
y diluir a 1 L.
sol. Zinc de la solución - 1000 mg de Zn / ml. Disolver 1,000 metal de Zn puro en ca 10 ml de HCl 6N. Diluir a 1 L.
h. Otras soluciones estándar - Diluir alícuotas de soluciones de b, c, e, f, g y con 0,5 N HCl para hacer
> 4 soluciones estándar de cada elemento dentro del alcance de determinación.
IV. Procedimiento
A. Preparación de la muestra
1. incineración en seco. Pesar con precisión porción 1 g de prueba, secada y molida como en 922.02 (a) (a continuación), en esmaltado, de
alta forma crisol de porcelana. Ash 2 h a 500 ° C, y dejar enfriar. La ceniza húmeda con 10 gotas de H 2 O, y añadir cuidadosamente 34 ml HNO 3
( 1 + 1). Se evapora el exceso de HNO 3 en la placa caliente a 100-120 ° C. Volver crisol de horno y cenizas 1 h adicional a 500 ° C. crisol frío,
disolver ceniza en 10 ml de HCl (1 + 1), y transferir cuantitativamente a un matraz de 50 ml volumétrica.
922.02 (a) Preparación de la muestra (a) Para los componentes minerales. eliminar completamente toda la materia extraña a partir de
material, especialmente la tierra adherida o arena, pero para evitar la lixiviación, evitar el exceso de lavado. Aire o secada al horno lo más
rápidamente posible para evitar la descomposición o pérdida de peso por la respiración, moler y almacenar en frascos tapados
herméticamente. Si los resultados se expresarán en base a peso fresco, peso de las muestras registro antes y después del secado. Cuando
Cu, Mn, Zn, Fe, Al, etc. deben ser determinados, evitar la contaminación de la muestra por el polvo durante el secado y de molienda y
tamizado de la maquinaria.
2. cenizas húmedas. Pesar con precisión porción de ensayo 1 g, secado y molido como en 922.02 (a), en 150 ml Pyrex vaso de precipitados. Añadir
10 ml de HNO 3 y dejar en remojo a fondo. Añadir 3 ml 60% HClO 4 y el calor en la placa caliente, lentamente al principio, hasta la formación de espuma
cesa. Calentar hasta que HNO 3 es casi evaporado. Si se produce carbonización, fresco, agregar 10 ml de HNO 3, y continuar el calentamiento. Calentar a
humos blancos de HClO 4. Enfriar, añadir 10 ml de HCl
34
(1 + 1), y la transferencia cuantitativamente a 50 matraz volumétrico mL. (Precaución: Ver Apéndice 3.11 para las notas de seguridad en las
cenizas húmedas.)
B. Determinación
A una solución en 50 matraz volumétrico ml, añadir 10 ml La solución al 5%, y diluir a volumen. Dejar reposar sílice, sobrenadante de
decantación, y proceder como en 965.09D (abajo).
Hacer diluciones necesarias con HCl 10% para obtener soluciones dentro del alcance del instrumento.
Determinación 965.09D
(P interfiere en Ca y puede interferir en la determinación de Mg con aire-C 2 H 2 quemadores. Eliminar la interferencia mediante la adición
de La solución madre a soluciones estándar y de la muestra de modo que las diluciones finales contienen 1% La. P no interfiere con la
determinación de Ca con N 2 jefe 2 H 2 se utiliza la llama.) Configurar instrumento como en la Tabla 965.09, o previamente establecido
ajustes óptimos para aparato a utilizar. líneas secundarias menos sensibles (Gatehouse y Willis, Spectrochim Acta. 17: 710,
1961) puede usarse para reducir la dilución necesario, si se desea. Leer > 4 soluciones estándar dentro del rango de análisis antes y
después de cada grupo de 6-12 muestras. quemador Enjuague con H 2 O entre las muestras, y re-establecer 0 punto absorción cada
vez. Preparar curva de calibración a partir de la media de cada estándar antes y después de grupo de muestra. Leer concentración
de las muestras de trama de absorción contra g / ml.
Element, ppm (g / g) = (g / ml) x F/ g de muestra
Element,% = ppm (mg / g) x 10- 4
dónde F = ( ml de dilución original de x ml de dilución final) / mL alícuota si se diluye original de 50 ml.
VI. notas
Ninguna
VII. Referencia
JAOAC 58: 436 (1975).
Revisado: March de 1996
35
3.10
Apéndice
3.10 Apéndice
húmeda
digestiónusando
húmedoácidos
utilizando
sulfúrico
ácidos
y nítrico
sulfúrico y nítrico digestión
Utilizado por el Instituto de Nutrición y Tecnología de los Alimentos, Universidad de Chile
I. Materiales
pipetas volumétricas, 100 ml, 500 ml, 200-1000 ml Graduado tubos de
tubos de ensayo, 10 mL
II. Equipo
Balanza analítica unidad de digestión
Hot-bloque de cenizas húmedas
campana extractora de gases
matraces Kjeldahl
III. reactivos
Soluciones A. Hierro Estándar
1. Solución madre estándar. Fe 1.000 mg / L. Disolver 1,0 g de alambre de metal Fe en 10 ml (65%) ultrapura HNO3. Diluir a
1000 ml con agua deonized.
2. Solución patrón intermedia. Fe 10 mg / L. Diluir 10 ml de la solución estándar a 1000 ml con agua deonized.
3. Solución estándar de trabajo. Fe 1 μ g / mL. Diluir 10 ml solución patrón intermedia a 100 ml con agua deonized.
IV. Procedimiento
Enjuague toda la cristalería con HCl concentrado diluido 1: 1 con agua deonized.
1. Pesar 1 g de muestra homogeneizada (peso seco) en un matraz de 100 ml Kjeldahl.
2. Añadir 6 ml de concentrado (97%) ultrapura H2SO4 y luego 4 ml de (65%) HNO3 ultrapura a la muestra, y predigest a
temperatura ambiente durante 12 horas.
3. Colocar los frascos en un aparato de digestión-bloque caliente y se calienta a 150 ° C durante 4 horas.
4. Retirar el matraz del hot-bloque, y dejar enfriar a temperatura ambiente.
5. Después de un enfriamiento adecuado añadir 10 ml de HCl 1 N ultrapura, devolver los matraces a una rejilla digestión y se calienta a 90 ° C
hasta que las muestras son claras.
6. Posteriormente, eliminar los matraces Kjeldahl y transferir la muestra a digerir a 50 matraz volumétrico ml (enjuagar el matraz de
Kjeldahl cinco veces con 5 ml de agua deonized), y completar hasta el volumen con agua deonized.
V. Interpretación
El hierro se midió por el método espectrofotométrico de absorción atómica usando las siguientes condiciones: longitud de onda 248 nm,
raja 0,2 nm, y la llama de aire-C 2 H 2 ( lean-azul).
VI. notas
Ninguna
VII. Referencia
Manuel Olivares, MD, Fernando Pizarro MT, MT Angélica Letelier, Eva Hertrampf, MD, y Tomas Walter, MD.
Instituto de Nutrición y Tecnología de los Alimentos, Universidad de Chile.
37
Apéndice 3.11 Apéndice
3,11 laboratorio de
seguridad de laboratorio de
seguridad
Las notas seleccionadas tomadas de: Cole, CE. Seguridad en el laboratorio. En: Métodos de análisis para la Nutrición
Etiquetado, DM Sullivan y DE Carpenter (Eds.), AOAC International, 1993
Estas notas precautorias y técnicas de manejo seguro sólo sirven como un recordatorio de posibles peligros que entraña
el uso de operaciones o sustancias particulares. Los lectores deben seguir los requisitos de seguridad de su
organización y estatal, provincial o federal.
Cristalería
Disponer de astillado o material de vidrio roto en contenedores especiales; chips de menor importancia pueden ser retenido y manufacturas de vidrio
pulido al fuego. Si la cristalería se va a reparar, marque claramente área defectuosa y almacenar en un lugar especial hasta que se completen las
reparaciones. El uso de vidrio resistente al calor para la preparación de soluciones que generan calor (por ejemplo, no botellas o frascos graduados).
Espectrofotómetro de absorción atómica

Siga todas las instrucciones del fabricante para la instalación, operación, seguridad y mantenimiento. Use solamente la manguera / tubo para conducir
los gases aprobados por el fabricante y el proveedor. Utilice dispositivo de eliminación de humos eficaz para eliminar los efluentes gaseosos de
quemador. Use solamente C 2 H 2 que se disuelve en disolvente recomendado por el fabricante. Open C 2 H 2 vástago de la válvula del tanque solamente un
cuarto de vuelta. Cambio de tanque cuando C 2 H 2 presión muestra 75-100 lb. Si instrumento tiene un sifón de drenaje, asegúrese de que está lleno de
H 2 O antes de encender el quemador. Después de la reparación a C 2 H 2 línea de suministro, la verificación de hermeticidad al gas en todas las
conexiones con solución de jabón o combustible sistema de detección de gas. Siempre que se aspiran las soluciones que contienen altas
concentraciones de Cu, Ag o Hg, cámara pulverización debe ser enjuagado con 50-100 ml de H _ 2 O antes de apagar para limpiar estos metales de la
cámara. Ver notas de seguridad en los cilindros de gas comprimido.
cilindros de gas comprimido

Identificar por nombre (s) del (ES) el contenido de gas de cilindros de gas comprimido en la calcomanía pegada, plantilla, o etiqueta, en lugar de por
códigos de color. cilindros mover (con tapa de protección) en posición vertical asegurados a la compra. Asegure los cilindros en posición vertical por
medio de la correa, cadena, o la base no es la punta. Dejar que el contenido de C 2 H 2

cilindros se asientan y dejar que todos los cilindros llegan a temperatura ambiente antes de la apertura. Utilice sólo medidores de presión correctos,
regulador de presión, el regulador de flujo, y de la manguera / tubería para cada tamaño de cilindro de gas y el tipo de gas tal como se especifica
por el proveedor. Use una solución de jabón o combustible sistema de detección de gas para comprobar todas las conexiones, sobre todo la que el
sistema está presurizado y el gas no fluye, para comprobar si hay fuga lenta. Utilice calentador especial en N 2 O línea de gas. Cerrar la válvula del
tanque de gas y el diafragma en el regulador (gire en sentido antihorario) cuando el gas no está en uso. regulador de servicio por lo menos
anualmente. Usar gases tóxicos sólo en dispositivo de eliminación de humos eficaz. Cuando se quema gas, utilizar dispositivo de prevención de
retroceso en la línea de gas en el lado de salida del regulador para evitar que la llama que es aspirado en el cilindro.
radiaciones peligrosas
La radiación UV se encuentra en espectrofotometría AA, fluorometría, espectrofotometría UV y las lámparas UV tanto a largo como onda corta.
Nunca exponga los ojos sin protección a los rayos UV de cualquier fuente, ya sea directa o reflejada (por ejemplo, llamas en fotómetro de
llama, lámparas, arcos eléctricos, etc.). Siempre use protección adecuada para los ojos tales como gafas con cristales de óxido de uranio,
gafas de soldador, etc., cuando tales radiaciones están presentes y no blindado. Mantener la exposición de la piel a la radiación UV al mínimo.
pipetas
No pipetear líquidos peligrosos por medio de la aspiración boca para llenar la pipeta. Utilice rellenos pipeta o tubo de goma conectados a través
de la trampa a la línea de vacío para este propósito.
39
cenizas húmedas
Esta técnica es uno de los usos más peligrosos de los ácidos, pero puede realizarse con seguridad. Observar las indicaciones para los ácidos
particulares utilizados y rigurosamente seguir las instrucciones dadas en el método específico que se utiliza.
ácidos
Utilice dispositivo de eliminación de humos resistente a los ácidos eficaz siempre que el calentamiento de los ácidos o la realización de reacciones
que liberan vapores ácidos. En dilución, siempre añadir el ácido al agua a menos que se indique lo contrario en el método. Mantener los ácidos de
la piel y proteger los ojos de salpicaduras. Si los ácidos se derrama sobre la piel, lavar inmediatamente con grandes cantidades de agua.
humos copiosas se desprenden cuando ácido nítrico concentrado y ácido clorhídrico concentrado se mezclan. Evitar la mezcla previa.
Utilice dispositivo eficaz de eliminación de humos cuando se generan humos. Mango con cloruro desechable de polivinilo, no de goma,
guantes.
Peróxido de hidrógeno
El peróxido de hidrógeno de la fuerza 30% es peligroso y puede causar quemaduras graves. secado H 2 O 2 en material orgánico tal como papel o tela
pueden conducir a la combustión espontánea. Cobre, hierro, cromo, otros metales, y sus sales provocan la rápida descomposición catalítica de H 2 O 2.
Hazardous con líquidos inflamables, anilina y nitrobenceno. Puesto que se descompone lentamente con desprendimiento de O, proporcionan
almacenado H 2 O 2 con tapas de ventilación. Use guantes y gafas protectoras durante su manipulación.
40

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Expresiones de gratitud................................................. .................................................. ............................. v Prólogo ...................

I. Introducción ............................................... .................................................. ................................... 1

II. Método cualitativo ................................................ .................................................. ....................... 3

III. Métodos Semi-cuantitativos .............................................. .................................................. ........... 5

IV. Métodos cuantitativos................................................ .................................................. .................. 7

Frances Davidson Roy Miller

AACC Asociación Americana de Químicos de Cereales

AAS espectrofotómetro de absorción atómica

AOAC Asociación de Químicos Analíticos Oficiales

INCAP Instituto de Nutrición de Centroamérica y Panamá

NIST Instituto Nacional de Estándares y Tecnología

Cereales, Inc., Minnesota, EE.UU..

Centroamérica y Panamá, Ciudad de Guatemala, Guatemala.

A. método de ensayo de la mancha

A. método de ensayo de la mancha

SI. método colorimétrico

2. reactivo de hidrocloruro de hidroxilamina se debe almacenar en el refrigerador.

SI. espectrofotométrico de absorción atómica método (AAS)

3. Es altamente fiable, exacta y precisa.

AAS AAS-Analyst 100 16.500 - 20.000 Perkin-Elmer

Horno de mufla Isotemp • Básico 1600 - 2230 Fisher Scientific

Espectrofotómetro Lambda UV / Vis Serie 8.510 - 15.750 Perkin-Elmer

Baxter Diagnostics Inc. Tel: (847) 229 0180 Cristalería,

Beckman Instruments, Inc. Tel: (714) 871 4848 espectrofotómetro

Fisher Scientific Tel: (412) 490 8300 Cristalería,

NIST una Tel: (301) 975 6776 normas,

Perkin Elmer Tel: (203) 762 1000 instrumento de AAS,

Sigma Chemical Co Tel: (314) 771 5750 productos químicos,

Thermo Jarrell Ash-Co Tel: (508) 520 1880 instrumento de AAS

VARIAN Tel: (408) 734 5370 espectrofotómetro

VWR International Tel: (908) 757 4045 Cristalería,

Método AACC 40-40

Determinación de hierro ferroso

Prueba de colores MÉTODO 14-10-Pekar (Prueba de pulido)

Adaptación del método cualitativo AACC 40-40 para el hierro

III. Reactivos y Soluciones

El tiocianato de potasio, KSCN, Merck 5124 o 5125 KSCN - 10%: Disolver 10 g de

INCAP, Química y Laboratorio de Bioquímica

Pipetas serológicas - 5 y 10 ml pipetas

Agua desionizada, Fe <1 mg / dl

Batofenantrolina, 0,025% en acetato de sodio, 2 M (Bathophenanthroline-

B. Preparación de los estándares de hierro

_____________________________________________________________________________ concentración equivalente

2. Disolver el residuo en exactamente 5 ml de HCl 6M y se deja durante 5 minutos en la placa caliente.

4. Compare el color de la muestra a la de las normas.

la aprobación final 5 de mayo de, 1960; reaprobación 03 de noviembre 1999

2. Char en la placa caliente o bajo lámpara infrarroja (opcional).

3. ceniza durante la noche en horno de mufla a < 550 °. Ver notas.

4. Retire el crisol del horno y enfriar a temperatura ambiente.

3. Contenido de hierro (mg / 100 g) = (C x DF x 10) ÷ W

INCAP, Química y Laboratorio de Bioquímica

Eppendorf pipeta (100 y 500 ml)

Batofenantrolina, 0,025% en acetato de sodio, 2 M (Bathophenanthroline-

B. Preparación de los estándares de hierro

Volumen de 10 ppm de hierro