UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NUEVO LEÓN

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

LICENCIADO EN QUÍMICA INDUSTRIAL

EVIDENCIA 2.2
PREPARACION DE MEDIOS, ESTERILIZACIÓN Y
AISLAMIENTO MICROBIANO

Semestre: 7
Unidad de aprendizaje: Bioquímica Microbiana
Equipo: 10

Estudiantes Matricula 23, 25 y 30 de 2 y 9 de % Participación

septiembre del octubre del
2019 2019
Brayan Alfredo Gaheta González 1683063 √ √ 33.3
Valeria Itzel García Salcido 1676221 √ √ 33.3
Luis Antonio Lozano Presa 1840250 √ √ 33.3

Profesores:
Dra. María Teresa Garza
Dr. Martín Rosas Castor

San Nicolás de los Garza, Nuevo León. A 16 de octubre de 2019

RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Preparación de medios de cultivo
Cálculos para la preparación de 190 mL de medio
de cultivo (Patata Dextrosa).
Basándonos en el frasco de PDA proporcionado
por la auxiliaría se realizaron los siguientes
cálculos:
39𝑔 → 1000𝑚𝐿
7.41𝑔 → 190𝑚𝐿

Se pesaron 7.41g de PDA para la preparación de

190 mL de Agar Patata Dextrosa.
Estos fueron utilizados por dos equipos.

El color que se obtuvo de la preparación es

ámbar claro, con una consistencia poco
viscosa y un aspecto ligeramente turbio u
opalescente.
El agar papa dextrosa es un medio de cultivo
que aporta los elementos nutricionales
necesarios para el desarrollo de hongos
filamentosos y levaduras.
Estos resultados se pueden observar en la
figura 1.

Figura 1. Medio de cultivo preparado de Agar

Patata Dextrosa (PDA)
Cálculos para la preparación de 80 ml de medio de cultivo (Agar Nutritivo).
31 g ----- 1000 ml
2.79 g ----- 90 ml
Se pesaron 2.79g de AN para la preparación de 90 mL de Agar Nutritivo.
Estos fueron utilizados por dos equipos.
El color obtenido de la preparación es
beige claro, es un color bastante
parecido al de PDA solo que este es
un color más intenso, con una
viscosidad relativamente moderada y
un aspecto ligeramente turbio.
El agar nutritivo es un medio de
cultivo sólido no selectivo y no
diferencial. En este medio crecen todo
tipo de bacterias no exigentes desde
el punto de vista nutricional.
Estos resultados pueden observarse
en la Figura 2.
Figura 2. Medio de cultivo preparado de Agar
Nutritivo (AN).

Inoculación y transferencia

Dilución 1:
Se adhirió una asada de la levadura Penicillum
al medio de cultivo en este caso PDA.
Se pueden observar pequeños círculos turbios
agrupados en el medio de cultivo esto indica
que se presentan algunas trazas de este
hongo y que hubo un crecimiento moderado
de este al alimentarse del medio de cultivo.
 Dilución 2:
Se tomo de la dilución 1 dos asadas y se
agregaron al medio de cultivo.
En esta dilución de la levadura Penicillum se
observan círculos turbios mas pequeños que
en la dilución 1, esto es debido a como se
menciono anteriormente el hongo fue diluido,
a pesar de su dilución este logro crecer en el
medio de cultivo.

Dilución 3:
Se tomo de la dilución 2 tres asadas y se
agregaron al medio de cultivo.
No se observo la presencia del hongo o podría
ser que sí, pero no se puede observar a simple
vista esto se debe a que esta dilución fue mas
grande, talvez al transcurso de más días podría
haber mas crecimiento y así ser observable al
ojo humano.
Estría en tres campos

3 En el campo 1 se puede observar un

crecimiento continuo del microorganismo,
2 mientras que en el campo 2 se fue diluyendo
debido a que se arrastró solo una parte del
campo 1 hacia el campo 2, en el campo 3 no
se logra apreciar a simple vista el crecimiento
del microorganismo, lo que esto es bueno ya
1 que el objetivo de la sección posterior es aislar
completamente el microorganismo de Basillus
Subtilis en forma pura.
Esto se puede observar en la figura 3.
Figura 3. Fotografía capturada el miércoles 2
de octubre del 2019, estría en tres campos
de Basillus Subtilis en AN.

En el campo 1 se puede observar un

crecimiento continuo del microorganismo,
3 mientras que en el campo 2 se fue diluyendo
2 debido a que se arrastró solo una parte del
campo 1 hacia el campo 2, en el campo 3 se
logra apreciar a simple vista alguno puntos
pequeños, esto es lo que se esperaba y así
poder aislar posteriormente el hongo de
1 Saccharomyces cerevisiae en forma pura.
Esto se puede observar en la Figura 4.

Figura 4. Fotografía capturada el miércoles 2

de octubre del 2019, estría en tres campos
de Saccharomyces cerevisiae en PDA
Aislamiento de colonias y agar inclinado
Se puede observar en las figuras 5 y 6 que tanto como el Basillus Subtilis y el
Saccharomyces cerevisiae presentaron un crecimiento en los medios de cultivo
correspondientes.
Se observa en el Basillus Subtilis como se aprecia en la figura 5 un aspecto blanquecino
expandido en casi todo el agar inclinado con las estrías un poco marcadas, comparado
con el que muestra la literatura[1][2] se puede apreciar que son muy similares, aunque
las estrías se noten mas marcadas en el de literatura, pero el crecimiento alrededor de
las estrías es el mismo.
En el tubo que se sembró Saccharomyces
cerevisiae se dice que una célula madre da lugar
a la formación de yemas en diferentes puntos de
la superficie produciendo en cada uno sólo una
célula hija (blastoconidio o blastospora) [3] ,
como se aprecia en la figura 6 se observo un
crecimiento en forma de pequeños puntos
introducidos en la estría, comparado con el que se encontró en la bibliografía se puede
observar el mismo aspecto blanquecino y un crecimiento en forma de círculos pequeños
[4].
Dados estos resultados se puede decir que el etiquetado de las muestras proporcionadas
corresponde a las características morfológicas de los microorganismos, para corroborar
esto con mas detalle se podrian hacer pruebas bioquímicas posteriores.

Figura 5. Fotografía capturada el Figura 6. Fotografía capturada el miércoles 9 de

miércoles 9 de octubre del 2019, agar octubre del 2019, agar inclinado de
inclinado de Basillus Subtilis en AN. Saccharomyces cerevisiae en PDA
ANEXOS (FOTOGRAFÍAS DE BIBLIOGRAFÍA)

TABLA 1. Fotografías encontradas en la literatura de los microorganismos estudiados en este trabajo.

TIPO DE MUESTRA BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA

B.Subtilis

[1][2]

Saccharomyces cerevisiae

[4]

CONCLUSIONES:
Para las diluciones en inoculación y transferencia se pudo observar que el
microorganismo fue decreciendo en concentración ya que no se observaban colonias a
simple vista esto puede decir que el aislamiento del microorganismo Penicillum se llevó
acabo satisfactoriamente.
Para el aislamiento por estría cruzada se pudo observar que en el campo 3 para cada
uno de los cultivos que se usaron para el aislamiento de los microorganismos Basillus
Subtilis y Saccharomyces cerevisiae se fue diluyendo el microorganismo inoculado y así
se obtuvo una colonia pura, esto se corroboro inoculando por medio de agar en tubo
inclinado donde se observó el crecimiento del microrganismo puro.
Comparando en base a lo encontrado en bibliografía se puede decir que el aislamiento
de los tres microorganismos si se logró.

REFERENCIAS
[1].ARUNA K. (2017). Purification and characterization of cholesterol oxidase from
novel native isolate bacillus subtilis YS01 isolated from meat sample. International
Journal of Biology, Pharmacy and allied science, 6 (8), 1578-1588.

[2].A nice Bacillus subtilis on a TSA slant. (2019). Retrieved 12 October 2019, from
https://www.reddit.com/r/microbiology/comments/b8w96l/a_nice_bacillus_subtilis
_on_a_tsa_slant/

[3].(2019). Retrieved 12 October 2019, from

http://www.unsa.edu.ar/biblio/repositorio/malim2007/4%20levaduras.pdf

[4].March 2013 – Eureka Brewing. (2019). Retrieved 12 October 2019, from

https://eurekabrewing.wordpress.com/2013/03/

́
[5].Brock, T., Madigan, M., Guerrero, R., Chica, C., & Barrachina, C. Brock Biologia
de los microorganismos.